CN116515586A - 具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒及其制备方法 - Google Patents
具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒及其制备方法，属于白酒生产技术领域。苦荞养生酒的制备方法包括如下步骤：以苦荞籽粒为原料，将苦荞籽粒清洗、浸泡、沥干后粉碎，利用渗漉提取法对苦荞籽粒进行一次提取，得到苦荞提取液和原料渣；利用扩繁驯化后的金银花菌菌丝对原料渣进行二次发酵和二次渗漉提取，三次提取液分别经过浓缩、真空冷冻干燥后混合即得苦荞干物质。其次以高粱和玉米为原料，加入酒曲进行糖化发酵，得到基酒。最后将苦荞混合干物质与基酒复配，即得具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒。本发明得到的苦荞酒具有抗炎、抗氧化能力，兼具金银花菌的营养成分和苦荞的特有风味，口感俱佳。
Description
技术领域
本发明属于白酒生产技术领域，具体涉及一种具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒及其制备方法。
背景技术
在几千年的传承中，白酒不仅是一种必不可少的商品，更是代表了中国的文化象征。在社交、酒席等重要的活动中，成为必要的特殊饮品。并且传统医学和现代医学认为白酒味甘、辛、性热，具有畅通血脉、去除风寒、健脾胃的功效，适当饮酒可以加快新陈代谢、增强抵抗力，降血压、防止动脉硬化等功效。中国白酒种类繁多，原料中的淀粉、蛋白质、脂肪、单宁与白酒酿造性能和白酒风味息息相关。苦荞中含有丰富的蛋白质、淀粉以及对人体有益的活性成分，可作为一种较理想的酿酒原料。大部分的苦荞酒，利用苦荞直接发酵、蒸酿，苦荞白酒的生产仍然处于初级阶段，主要体现在：①苦荞在加工过程中活性成分易流失，利用率较低，造成苦荞原料的浪费；②苦荞中营养成分和活性成分保存方法研究不足；③酒中功效成分单一，活性成分含量较少，口感不佳，苦荞酒知名度和人均消费量不足等问题。
苦荞是一种兼具营养成分和活性成分的伪谷物类作物，具有古老的栽培历史，被鉴定具有药食同源特性，是理想的保健品原料和食品原料。通过实验鉴定其富含蛋白质、淀粉、膳食纤维及微量元素等营养物质，并具有其他禾谷类粮食所缺乏的生物活性物质，比如黄酮类化合物(其中芦丁和槲皮素被研究的最多，芦丁含量约为0.8-3.0％)、酚酸类、生物糖醇等。实验研究发现苦荞黄酮具有多方面的药理活性和生理功能，例如降血糖血脂，增强机体免疫力，抗炎，抗氧化，抗衰老、抗肿瘤等作用，通过相应的细胞实验、小鼠实验、体外转化实验得到验证。
茶藨子叶状层菌Phylloporia ribis(Lonicerajaponica Thunb.)(又名金银花菌)，为锈革孔菌科叶状层菌属药食两用真菌，该菌常寄生于生长年限较长的忍冬藤植株上。经检测发现该菌含有优质的菌丝蛋白，氨基酸含量丰富。经鉴定活性成分有甾醇类、萜类、有机酸、多糖等。有关实验研究发现该菌具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤、免疫调节等功效。在民间药用历史悠久，常用于治疗咽炎、喉炎、扁桃体等，效果显著。此外，卫生部发布公告批准茶藨子叶状层菌发酵菌丝体为新资源食品，因此该菌具有较大的发展潜力。目前对该菌的成分研究及其他应用研究鲜有报道。
发明内容
本发明针对上述问题，提供一种具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒及其制备方法，通过利用扩繁后的金银花菌发酵苦荞籽粒，经过三次提取，两次发酵，充分将苦荞中的活性成分提取出来，制备出一款具有金银花菌和苦荞特有风味，且具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，包括如下步骤：
A、以苦荞籽粒为原料，经清洗、浸泡、沥干后粉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液1和原料渣1；
B、将步骤A得到的原料渣1经烘干、浸泡、灭菌处理后，加入扩繁培养后的金银花菌进行一次发酵处理，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液2和原料渣2；
C、将步骤B得到的原料渣2经烘干、浸泡、灭菌处理后，加入扩繁培养后的金银花菌进行二次发酵处理，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液3；
D、将步骤A得到的苦荞提取液1、步骤B得到的苦荞提取液2和步骤C得到的苦荞提取液3分别进行过滤、浓缩和真空冷冻干燥，分别得到苦荞干物质1、2、3；
E、将步骤D得到的苦荞干物质1、2、3混合均匀后和基酒复配，按0.5-1g苦荞干物质混合物/1000mL基酒的比例混合，得到具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤E中，所述基酒由以下方法制备得到：
a1、以高粱和玉米为原料，经除杂、清洗、粉碎后，混合均匀后进行蒸熟熟化，得到熟料；
a2、将熟料摊开冷却后，加入特制酒曲，与熟料充分搅拌均匀，然后入罐发酵；
a3、发酵结束后放干黄水，得到酒料，对酒料进行蒸馏，蒸馏完成后进行澄清、储存、勾调，得到基酒。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，制备基酒时，步骤a2中，所述特制酒曲由以下方法制备得到：
b1、以大麦和大米作为原料，经浸泡、烘干和粉碎，得到原料粉；
b2、将2/3-4/5质量的原料粉用作培，剩余的原料粉用作裹粉，加入泸州老窖酿酒大曲(参见：李大和,李国红.泸州老窖大曲酒传统操作法——祝贺“泸州老窖大曲酒”荣获巴拿马赛会国际金奖90周年[J].酿酒,2005,(03):107-114.)、水和分离出来的霉菌，混匀；
b3、将混匀配料先于温度28-35℃，培养2-3d，之后于温度35-40℃，继续培养4-5d，曲子成熟，将成熟后的曲子烘干或晒干，得到特制酒曲。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，制备基酒时，步骤a1中，所述高粱和玉米的质量比为700-1200:200-300。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，制备基酒时，步骤a2中，所述蒸熟后高粱、玉米和特制酒曲质量比为700-1200:200-300:100-200。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，制备基酒时，步骤a2中，所述发酵的温度为25-28℃，发酵的时间为45-60d。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，制备基酒时，步骤a3中，所述的基酒的酒精度为55-67°。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，制备特制酒曲时，步骤b1中，所述大麦和大米的质量比为5-10:3-10，浸泡的时间为4-8h，所得原料粉的粒度为过100-150目筛。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，制备特制酒曲时，步骤b2中，所述泸州老窖酿酒大曲的加入量为培质量的8-15％，水的加入量为培质量的50-70％；霉菌(其由本领域常规市售酒曲分离出来的霉菌)的加入量为培质量的5-10％；所述霉菌的浓度为107CFU/mL。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤A中，所述选取黄酮成分含量较高的苦荞籽粒为原料，其黄酮成分含量为2-4％。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤A中，所述浸泡时间为9-11h，粉碎目数为25-50目。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤A中，所述渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10-20倍质量的乙醇水溶液(一般采用55-65％乙醇水溶液)混合，于室温下浸泡10-15h后，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液1。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤B、步骤C中，所述烘干后的原料渣1、原料渣2利用纯水润湿浸泡1h后分装到发酵瓶中，利用高压蒸汽灭菌锅灭菌，灭菌条件为：100℃，15min。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤B、步骤C中，所述扩繁驯化后的金银花菌丝由以下方法制备得到：将带金银花菌的培养基于玉米基质(挑选大小均一的玉米粒，浸泡清洗后，经高温高压灭菌，封装在发酵瓶里)中进行扩繁培养，培养温度为24-26℃，培养时间为25-30d，使玉米基质上长满金银花菌，即得扩繁驯化后的驯化后的金银花菌菌丝。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤B、步骤C中，所述扩繁驯化后的金银花菌菌丝的加入量与步骤A、步骤B所得原料渣1、2的比例为20-25颗玉米粒∶300-500g原料渣。
本发明中，由于杏鲍菇菌丝生长在玉米基质(即玉米粒)上，因此本发明是直接加入长满菌丝的玉米粒。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤B、步骤C中，所述一次发酵、二次发酵处理的温度为24-26℃，发酵的时间为15-25d。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤B、步骤C中，所述所述渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10-30倍质量的乙醇水溶液(采用60-65％乙醇水溶液)混合，于室温下浸泡15-20h后，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液2、提取液3。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤D中，所述过滤条件为：采用0.22μm滤膜进行真空抽滤；浓缩条件为：于温度45-50℃，转速90-100r/min，进行真空旋转蒸发(目的是除去大部分的乙醇和水，一般使最终剩余的体积与原有体积之比为1∶10-15)。
其中，上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，步骤D中，所述真空冷冻干燥为：于-77～-80℃真空冷冻干燥48-60h。
一种具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒，由上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法制备得到。
本发明的有益效果：本发明提供的苦荞养生酒，通过选取富含营养成分和有效成分的苦荞籽粒作为原料，并且有效的融入金银花菌的健康成分，提升抗炎、抗氧化能力，得到的苦荞酒兼具金银花菌的营养成分和苦荞的特有风味，口感俱佳。
本发明采用渗漉提取方法提取苦荞中的活性成分，与其他提取方式相比，该方法具有操作简单、提取率高、保护活性成分等特点，经过三次提取得到提取液1、2、3，再将其混合，可以将苦荞中的有效成份充分提取，提高苦荞原料的利用率，通过金银花菌发酵增加可以使苦荞中与其他营养成分结合，将多酚、黄酮等部分提取的成分释放出来，实现苦荞活性成分的进一步转化和增值。其次，本发明通过使用金银花菌对一次提取后的苦荞粉(原料渣1)进行二次发酵，在发酵过程中，不仅实现了苦荞籽粒成分的转化和增加，还可以融入更多的金银花菌中的活性成分和风味成分，充分发挥金银花菌的固态发酵优势，提升最终得到的养生酒的保健价值，从而拓展金银花菌、菌发酵技术、苦荞的下一步应用途径。
本发明采用基酒复配的方法制备苦荞养生酒，得到的苦荞养生酒富含多种有益健康的元素，能够为人体吸收，具有抗炎、抗氧化的现实效果。本发明通过多次发酵，提升苦荞籽粒的利用率，大大提高了苦荞养生酒的产量，降低了生产成本，为工业化生产提供了生产空间和利润空间；并且有效的融入金银花菌的健康成分，提升抗炎、抗氧化能力，成为产品方面都不同于传统苦荞酒，跨界融合更健康的新型养生酒产品，为苦荞养生酒的开发提供了独特的思路。
附图说明
图1为本发明实施例中总黄酮(以芦丁计)的标准曲线；
图2为本发明实施例中多酚(以没食子酸计)的标准曲线；
图3为本发明实施例中芦丁标准曲线；
图4为本发明实施例中三萜标准曲线；
图5为本发明实施例中VC-ABTS标准工作曲线；
图6为本发明实施例中VC-DPPH标准工作曲线。
具体实施方式
本发明的技术方案，具体可以按照以下方式实施。
具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，包括如下步骤：
A、以苦荞籽粒为原料，经清洗、浸泡后粉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液1和原料渣1；
B、将步骤A得到的原料渣1经烘干、浸泡、灭菌处理后，加入扩繁培养后的金银花菌进行一次混合发酵处理。发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液2和原料渣2；
C、将步骤B得到的原料渣2经烘干、浸泡、灭菌处理后，加入扩繁培养后的金银花菌进行二次混合发酵处理，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液3；
D、将步骤A得到的苦荞提取液1、步骤B得到的苦荞提取液2和步骤C得到的苦荞提取液3分别进行过滤、浓缩和真空冷冻干燥，分别得到苦荞干物质1、2、3；
E、将步骤D得到的苦荞干物质1、2、3混合均匀好和基酒复配，按0.5g～1g苦荞干物质混合物/1000mL基酒的比例混合，得到具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒；
本发明步骤E中，所述基酒由以下方法制备得到：
a1、以高粱和玉米为原料，经除杂、清洗、粉碎后，混合均匀后进行蒸熟熟化，得到熟料；
a2、将熟料摊开冷却后，加入特制酒曲，与熟料充分搅拌均匀，然后入罐发酵；
a3、发酵结束后放干黄水，得到酒料，对酒料进行蒸馏，蒸馏完成后进行澄清、储存、勾调，得到基酒。
其中，基酒制备方法所述特制酒曲由以下方法制备得到：
b1、以大麦和大米作为原料，经浸泡、烘干和粉碎，得到原料粉；
b2、将2/3～4/5质量的原料粉用作培，剩余的原料粉用作裹粉，加入泸州老窖酿酒大曲(参见：李大和,李国红.泸州老窖大曲酒传统操作法——祝贺“泸州老窖大曲酒”荣获巴拿马赛会国际金奖90周年[J].酿酒,2005,(03):107-114.)、水和分离出来的霉菌，混匀；
b3、将混匀配料先于温度28～35℃，培养2～3d，之后于温度35～40℃，继续培养4～5d，曲子成熟，将成熟后的曲子烘干或晒干，得到特制酒曲。
本发明制备基酒时，步骤a1，所述高粱和玉米的质量比为700～1200:200～300；步骤a2，所述蒸熟后高粱、玉米和特制酒曲质量比为700～1200:200～300:100～200，发酵的温度为25～28℃，发酵的时间为45～60d；步骤a3中，所述的基酒的酒精度为55～67°。
本发明制备特制酒曲时，步骤b1中，所述大麦和大米的质量比为5～10:3～10，浸泡的时间为4～8h，所得原料粉的粒度为过100～150目筛；步骤b2中，所述泸州老窖酿酒大曲的加入量为培质量的8～15％，水的加入量为培质量的50～70％；霉菌(其由本领域常规市售酒曲分离出来的霉菌)的加入量为培质量的5～10％；所述霉菌的浓度为107CFU/mL。
本发明步骤A中，所述选取黄酮成分含量较高的苦荞籽粒为原料，其黄酮成分含量为2％～4％。
本发明利用渗漉提取方法，能够将苦荞中的提取得较为完全，该方法简单、设备易于操作、成本较低。
本发明步骤A中，所述浸泡时间为9～11h，粉碎目数为25～50目；所述渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10～20倍质量的乙醇水溶液(一般采用55～65％乙醇水溶液)混合，于室温下浸泡10～15h后，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液1。
本发明中，所用菌种通过在玉米基质中进行扩繁驯化，使该菌适应杂粮基质，提高了该菌的生长发酵速度及水解酶产生速度。通过利用扩繁驯化后的金银花菌对一次提取后的苦荞籽粒进行发酵，利用发酵过程中产生水解酶，分解植物材料中大分子物质释放与大分子物质结合存在的活性物质，从而使混合发酵物中富含苦荞活性成分(例如苦荞籽粒中的酚酸、黄酮……)，同时能够加入该菌中的活性成分(多糖、甾醇类化合物、有机酸、三萜类化合物……)。
本发明步骤B、步骤C中，所述烘干后的原料渣1、原料渣2利用纯水润湿浸泡1h后分装到发酵瓶中，利用高压蒸汽灭菌锅灭菌，灭菌条件为：100℃，15min。
本发明步骤B、步骤C中，所述扩繁驯化后的金银花菌丝由以下方法制备得到：将带金银花菌的培养基于玉米基质(挑选大小均一的玉米粒，浸泡清洗后，经高温高压灭菌，封装在发酵瓶里)中进行扩繁培养，培养温度为24～26℃，培养时间为25～30d，使玉米基质上长满金银花菌，即得扩繁驯化后的驯化后的金银花菌菌丝。
本发明步骤B、步骤C中，所述扩繁驯化后的金银花菌菌丝的加入量与步骤A、步骤B所得原料渣1、2的比例为20～25颗玉米粒：300～500g原料渣。
本发明中，由于杏鲍菇菌丝生长在玉米基质(即玉米粒)上，因此本发明是直接加入长满菌丝的玉米粒。
本发明步骤B、步骤C中，所述一次发酵、二次发酵处理的温度为24～26℃，发酵的时间为15～25d。
本发明步骤B、步骤C中，所述所述渗漉提取方法的操作为：将烘干粉碎后的混合发酵物与10～30倍质量的乙醇水溶液(采用60～65％乙醇水溶液)混合，于室温下浸泡15～20h后，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，即得提取液2、提取液3。
步骤D中，所述过滤条件为：采用0.22μm滤膜进行真空抽滤；浓缩条件为：于温度45～50℃，转速90～100r/min，进行真空旋转蒸发(目的是除去大部分的乙醇和水，一般使最终剩余的体积与原有体积之比为1：10～15)；所述真空冷冻干燥为：于-77～-80℃真空冷冻干燥48～60h。
一种具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒，由上述具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法制备得到。
下面通过实际的例子对本发明的技术方案和效果做进一步详细说明，但并不因此将本发明保护范围限制在所述的实施例范围之中。
扩繁培养后的金银花菌的制备：
将带金银花菌的培养基于玉米基质(挑选大小均一的玉米粒，浸泡清洗后，经高温高压灭菌，封装在发酵瓶里)中进行扩繁培养，培养温度为24～26℃，培养时间为25～30d，使玉米基质上长满金银花菌，即得扩繁驯化后的驯化后的金银花菌菌丝。
特制酒曲由以下方法制备得到：
①浸米：选择大麦和大米(质量比为5:3)作为原料，浸泡8h，浸泡后的原料烘干后粉碎，利用150目的筛子过筛得到原料粉；②配料接种：将原料3/4的原料粉用作培，剩余的用作裹粉，加入培质量15％的泸州老窖酿酒大曲、60％的水以及8％的由市售酒曲分离出来的霉菌，搅拌混匀；③制坯和培曲：将混匀配料制成圆形曲坯，将曲坯置于培养室中，温度35℃，培养3d，之后设置温度40℃，继续培养5d，曲子成熟，将成熟后的曲子取出置于45℃烘干，储存备用。
实施例1
具有抗炎、抗氧化功效的苦荞养生酒的制备，按重量份数计，包括以下原料：高粱1000份，玉米200份，苦荞籽粒500份，特制酒曲100份，长满金银花菌的玉米基质。
该养生酒的制备方法包括以下步骤：
1、选择黄酮成分含量较高的苦荞籽粒，清洗干净，去除杂质，用干净的水浸泡10h，去掉多余的水分，粉碎，粉碎后的苦荞粉使用1.5倍体积的65％的乙醇水溶液于室温下浸泡20h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，利用20倍体积的65％乙醇溶液提取，提取得到苦荞提取液1和原料渣1；
2、将原料渣1烘干去除多余的乙醇和水，利用纯水浸泡后沥干，进行灭菌处理，然后加入扩繁驯化后的金银花菌菌丝(即长满金银花菌菌丝的玉米基质)进行一次固态发酵处理(接种量为20(颗)玉米/300(g)原料渣1，于26℃发酵25d)，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，将粉碎后的混合发酵物使用1.5倍体积的65％的乙醇水溶液于室温下浸泡20h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，利用20倍体积的65％乙醇溶液提取，提取得到苦荞提取液2和原料渣2；
3、将原料渣2烘干去除多余的乙醇和水，利用纯水浸泡后沥干，进行灭菌处理，然后加入扩繁驯化后的金银花菌(即长满金银花菌菌丝菌丝的玉米基质)进行二次固态发酵处理(接种量为20(颗)玉米/300(g)原料渣2，于26℃发酵25d)，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，将粉碎后的混合发酵物使用1.5倍体积的65％的乙醇水溶液于室温下浸泡20h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，利用20倍体积的65％乙醇溶液提取，得到提取液3和原料渣3；
4、将提取三次得到的苦荞提取液1、苦荞提取液2和苦荞提取液3分别利用具有0.22μm滤膜的真空抽滤装置对混合溶液进行过滤除杂，然后利用真空旋转蒸发装置(条件：温度45℃，转速为100r/min)除去大部分的乙醇和水，使最终剩余的体积与原有体积之比为1∶10，将得到的浓缩溶液置于-80℃冷冻冰箱中进行速冻，再利用真空冷冻干燥工艺(条件：温度为-77～-80℃，时间为60h)对浓缩液进行冷冻干燥，得到苦荞干物质1、2、3；
5、基酒制备方法步骤如下：
①称取高粱和玉米，经除杂、清洗、粉碎后，混合均匀后进行蒸熟熟化，得到熟料；
②将熟料摊开冷却后，加入特制酒曲(高粱、玉米和特制酒曲的质量比为700:200:20)，与熟料充分搅拌均匀，然后入罐发酵(发酵温度28℃，发酵时间60d)；
③发酵结束后放干黄水，得到酒料，对酒料进行蒸馏，，掐头去尾，酒尾复蒸，蒸馏完成后进行澄清、储存、勾调，得到基酒；
6、将苦荞干物质1、2、3混合均匀和基酒复配，按1g苦荞干物质混合物/1000mL基酒的比例混合，得到具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒。
实施例2
具有抗炎、抗氧化功效的苦荞养生酒的制备，按重量份数计，包括以下原料：高粱1200g，玉米300g，苦荞籽粒600g，特制酒曲200g，长满金银花菌的玉米基质。
该养生酒的制备方法包括以下步骤：
1、选择黄酮成分含量较高的苦荞籽粒，清洗干净，去除杂质，用干净的水浸泡15h，去掉多余的水分，粉碎，粉碎后的苦荞粉利用1.5倍体积的65％的乙醇水溶液于室温下浸泡20h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，利用20倍体积的55％乙醇溶液提取，提取得到苦荞提取液1和原料渣1；
2、将原料渣1烘干去除多余的乙醇和水，利用纯水浸泡后沥干，进行灭菌处理，然后加入扩繁驯化后的金银花菌菌丝(即长满金银花菌菌丝的玉米基质)进行一次固态发酵处理(接种量为25(颗)玉米/300(g)原料渣1，于26℃发酵25d)，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，将粉碎后的混合发酵物使用1.5倍体积的65％的乙醇水溶液于室温下浸泡20h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，利用30倍体积的65％乙醇溶液提取，提取得到苦荞提取液2和原料渣2；
3、将原料渣2烘干去除多余的乙醇和水，利用纯水浸泡后沥干，进行灭菌处理，然后加入扩繁驯化后的金银花菌(即长满金银花菌菌丝菌丝的玉米基质)进行二次固态发酵处理(接种量为20(颗)玉米/300(g)原料渣2，于26℃发酵25d)，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，将粉碎后的混合发酵物使用1.5倍体积的65％的乙醇水溶液于室温下浸泡20h，然后将整个体系置于渗漉装置中进行渗漉提取，利用1g/20倍体积的65％乙醇溶液提取，得到提取液3和原料渣3；
4、将提取三次得到的苦荞提取液1、苦荞提取液2和苦荞提取液3分别利用具有0.22μm滤膜的真空抽滤装置对混合溶液进行过滤除杂，然后利用真空旋转蒸发装置(条件：温度45℃，转速为100r/min)除去大部分的乙醇和水，使最终剩余的体积与原有体积之比为1∶10，将得到的浓缩溶液置于-80℃冷冻冰箱中进行速冻，再利用真空冷冻干燥工艺(条件：温度为-77～-80℃，时间为60h)对浓缩液进行冷冻干燥，得到苦荞干物质1、2、3；
5、基酒制备方法步骤如下：
①称取高粱和玉米，经除杂、清洗、粉碎后，混合均匀后进行蒸熟熟化，得到熟料；
②将熟料摊开冷却后，加入特制酒曲(高粱、玉米和特制酒曲的质量比为1200:300:200)，与熟料充分搅拌均匀，然后入罐发酵(发酵温度28℃，发酵时间60d)；
③发酵结束后放干黄水，得到酒料，对酒料进行蒸馏，，掐头去尾，酒尾复蒸，蒸馏完成后进行澄清、储存、勾调，得到基酒；
6、将苦荞干物质1、2、3混合均匀后和基酒复配，按0.5g苦荞干物质混合物/1000mL基酒的比例混合，得到具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒。
成分及抗氧化活性检测
一、有效成分测定
对实施例1、2中的成品酒进行成分测定，通过化学方法、高效液相色谱法进行检测。保证其他条件不变，通过建立芦丁标准曲线，没食子酸标准曲线，齐墩果酸标准曲线分别测定浸泡提取的高粱酒和原基酒的黄酮成分、芦丁、总酚、三萜等活性成分，得到表1的实验数据；
1、测定方法
(1)总黄酮测定
采用三氯化铝比色法测定苦荞发酵物中总黄酮含量(参见：李欣.苦荞麦中黄酮类化合物分析方法的建立[D]；中国农业科学院，2010.)。
以芦丁为标准品，制定标准曲线。取0.2mg/mL的芦丁标准溶液(mL)按梯度分别吸取0、0.25、0.5、1、2、3、4(mL)置于10mL的比色管中，先加入2mL三氯化铝溶液，再加入3mL乙酸钾溶液，然后用70％的甲醇溶液定容至5mL，室温下放置反应30min，在420nm出测OD值并记录，同时做空白对照，以净OD值(即工作溶液吸光度与空白试验吸光度相减)为横坐标，芦丁标准液浓度为纵坐标，绘制标准工作曲线，如图1所示。该标准曲线回归方程为Y＝0.0559X-0.0025，线性系数R2＝0.9999，且线性关系在0.0056-0.0896mg/mL范围内良好。
样品测定中按照上述操作步骤，若超过线性范围则需要适当稀释。取1mL样品于10mL比色管中，先加入2mL三氯化铝溶液，再加入3mL乙酸钾溶液，然后用70％的甲醇溶液定容至5mL，室温下放置反应30min，以0号管做空白对照，在420nm出测OD值并记录，同时做空白对照。根据标准曲线和总黄酮得率计算公式计算苦荞提取液中的总黄酮含量。
(2)总酚测定
采用福林酚比色法测定苦荞中的总多酚。(参见：郭乾城.荞麦茎中总酚和总黄酮的提取工艺研究[J].中国农业文摘-农业工程，2020，作出部分修改)
称取0.500g没食子酸，用水溶解并定容至100mL，以此母液配制质量浓度为0、4、8、12、20、30mg/L的系列标准溶液，分别吸取系列标准溶液1mL于10mL离心管中，加入10％Folin-Ciocalteu显色剂2.5mL混匀3-8min内各加入15％碳酸钠溶液2.5mL，混匀，40℃水浴1小时，冷却20分钟后，在760nm处测吸光度用紫外-可见分光光度计测定在765nm下的吸光值(A)，平行测定3次，绘制标准曲线，如图2所示。
(3)芦丁含量测定：
色谱条件为：色谱柱：Damonsil C18色谱柱，流动相：甲醇-0.5％磷酸水溶液(40：60)；柱温40℃；流速1.0mL/min；检测波长390nm；进样量10μL，检测时间为5min。绘制标准曲线，如图3所示。
如图3所示，芦丁标准曲线回归方程为Y＝6.3517X-27.702，线性系数R2＝0.9994，且线性关系在0.0392～0.558mg/mL范围内良好；
(4)三萜含量检测
色谱条件为：色谱柱：C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇：纯水＝91：9(磷酸调pH为3.0)，流速0.6mL/min，柱温为室温，检测波长为210nm，进样量20μL，检测时间25min。
分别精密称取三萜标准品(齐墩果酸)标准溶液0.2mL、0.5mL、1mL、2mL、5mL，用甲醇定容至10mL，得到浓度分别为2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的系列标准工作液，过0.22μm膜后于4℃避光保存备用。测定得到标准品色谱图和样品色谱图，绘制标准曲线，如图4所示。三萜标准曲线回归方程为Y＝23.730X+13.236，线性系数R2＝0.9998，且线性关系在2～50μg/mL(r＝0.9998)范围内良好。
2、分别测定实例1、实例2得到的成品酒中的活性成分含量，如下表所示：
表1实施例1、2中主要成分检测结果
| 测定项目 | 总黄酮mg/L | 总酚mg/L | 芦丁mg/L | 三萜mg/L |
| 实施例1 | 138.8±2.02 | 112±0.51 | 112.8±1.15 | 105.5±1.10 |
| 实施例2 | 85.6±0.12 | 69±2.16 | 76.4±0.85 | 72.1±0.22 |
二、对实施例1、2中的抗氧化活性进行检测，检测方法：以VC当量，ABTS和DPPH作为抗氧化能力测定指标，检测结果如表2所示。
1、ABTS自由基清除活性测定
(1)Vc标准曲线的制定
Vc稀释液：分别吸取0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8mLVc标准液于10mL棕色容量瓶中，用70％的甲醇定容，配制成浓度为4、6、8、10、12、14μg/mL的Vc稀释液，于4℃避光冷藏。
分别吸取1mLVc稀释液(如清除率过高可稀释)，加入4mLABTS，摇匀，于避光处静置10min，在734nm波长处测定OD值为A1；分别另取1mLVc稀释液，加入4mL 70％甲醇溶液，摇匀，于避光处静置30min，在734nm波长处测定OD值为A2；同时作空白试验，1mL 70％甲醇溶液，加入4mLABTS，摇匀，于避光处静置30min，在734nm波长处测定OD值为A0。
ABTS清除率([A0-(A1-A2)])/A0：以Vc浓度(μg/mL)为横坐标，ABTS自由基清除率为纵坐标，绘制标准工作曲线，标准工作曲线为见图5，回归方程为Y＝3.23X+8.0333，线性系数R2＝0.9996，线性关系良好。
(2)样品的测定
分别吸取1mL样品液(如清除率过高可稀释)，按照上述标准品添加操作，同时作空白试验，1mL 70％甲醇溶液，加入4mLABTS，摇匀，于避光处静置30min，在734nm波长处测定OD值为A0，按公式计算样品中ABTS清除率，代入标曲中，以Vc/g DW(ABTS)表示样品中抗氧化活性。
2、DPPH自由基清除活性测定
(1)Vc标准曲线的绘制
分别吸取2mLVc稀释液，加入2mL 0.1mg/mL DPPH，摇匀，于避光处静置30min，在517nm波长处测定OD值为A1；分别另取2mLVc稀释液，加入2mL 70％甲醇溶液，摇匀，于避光处静置30min，在517nm波长处测定OD值为A2；同时作空白试验，2mL 70％甲醇溶液，加入2mL0.1mg/mLDPPH，摇匀，于避光处静置30min，在517nm波长处测定OD值为A0。
DPPH自由基清除率＝([A0-(A1-A2)])/A0：按以上公式计算各VC稀释液的DPPH自由基清除率，以VC浓度(μg/mL)为横坐标，DPPH自由基清除率为纵坐标，绘制标准工作曲线，标准工作曲线如图6所示，回归方程为Y＝3.4956X+6.6006，线性系数R2＝0.9992，线性关系良好。
(2)样品的测定
分别吸取2mL样品液(如清除率过高可稀释)，按上述标准品操作步骤，同时作空白试验，按公式计算样品中DPPH清除率，代入标曲中，以VC/g DW(DPPH)表示样品中抗氧化活性。
3、测定结果，如表2所示。
表2实施例1、2中成品酒抗氧化活性测定结果
| 测定项目 | ABTS(mg/L)/VCEAC | DPPH(mg/L)/VCEAC |
| 实施例1 | 337±5.09 | 80.9±6.15 |
| 实施例2 | 384±3.12 | 108±5.85 |
由表2可知，本发明制备的成品酒富含多种活性成分，抗氧化活性测定结果显示该酒展现了较强的抗氧化活性，因此对人体健康具有一定调节功效。
三、将实施例1、2得到的养生酒选取20人进行感官分析，得到本发明养生酒的感官评价，如表3所示：
表3实施例1、2中成品酒感官分析结果
| 项目 | 实施例1 | 实施例2 |
| 色泽 | 颜色呈黄色、澄清透明 | 颜色呈淡黄色、澄清透明 |
| 香气 | 浓郁、和谐的酒香 | 同左 |
| 滋味 | 口感醇和，入口微苦，绵甜爽净，余味悠长 | 同左 |
| 风格 | 具有本品独特风格 | 同左 |
| 组织状态 | 澄清透明，无沉淀、杂质及悬浮物 | 同左 |
Claims (9)
1.具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
A.以苦荞籽粒为原料，经清洗、浸泡、沥干后粉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液1和原料渣1；
B.将步骤A得到的原料渣1经烘干、浸泡、灭菌处理后，加入扩繁培养后的金银花菌进行一次发酵处理，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液2和原料渣2；
C.将步骤B得到的原料渣2经烘干、浸泡、灭菌处理后，加入扩繁培养后的金银花菌进行二次发酵处理，发酵完成后，将混合发酵物烘干、揉碎，利用渗漉提取法提取得到苦荞提取液3；
D.将步骤A得到的苦荞提取液1、步骤B得到的苦荞提取液2和步骤C得到的苦荞提取液3分别进行过滤、浓缩和真空冷冻干燥，分别得到苦荞干物质1、2、3；
E.将步骤D得到的苦荞干物质1、2、3混合均匀后和基酒复配，按0.5-1g苦荞干物质混合物/1000mL基酒的比例混合，得到具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒。
2.根据权利要求1所述的具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：步骤E中，所述基酒的制备方法包括如下步骤：
a1.以高粱和玉米为原料，经除杂、清洗、粉碎后，混合均匀后进行蒸熟熟化，得到熟料；
a2.将熟料摊开冷却后，加入特制酒曲，与熟料充分搅拌均匀，然后入罐发酵；
a3.发酵结束后放干黄水，得到酒料，对酒料进行蒸馏，蒸馏完成后进行澄清、储存、勾调，得到基酒。
3.根据权利要求2所述的具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：步骤a2中，所述特制酒曲的制备方法包括如下步骤：
b1.以大麦和大米作为原料，经浸泡、烘干和粉碎，得到原料粉；
b2.将2/3～4/5质量的原料粉用作培，剩余的原料粉用作裹粉，加入泸州老窖酿酒大曲、水和分离出来的霉菌，混匀；
b3.将混匀配料先于温度28～35℃，培养2～3d，之后于温度35～40℃，继续培养4～5d，曲子成熟，将成熟后的曲子烘干或晒干，得到特制酒曲。
4.根据权利要求2所述的具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：至少满足下列的一项：
步骤A中，选取黄酮成分含量较高的苦荞籽粒为原料，其黄酮成分含量为2％～4％；
步骤A中，所述浸泡时间为9～11h，粉碎目数为25～50目；
步骤A中，渗漉提取法的条件为：浸泡时间10～15h，乙醇水溶液浓度55～65％，乙醇水溶液用量为苦荞籽粒质量的10～30倍。
5.根据权利要求1所述的具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：至少满足下列的一项：
步骤B、步骤C中，烘干后的原料渣1、原料渣2利用纯水润湿浸泡1h后分装到发酵瓶中，利用高压蒸汽灭菌锅灭菌，灭菌条件为：100℃，15min；
步骤B、步骤C中，所述扩繁驯化后的金银花菌丝由以下方法制备得到：将带金银花菌的培养基于玉米基质中进行扩繁培养，培养温度为24～26℃，培养时间为25～30d，使玉米基质上长满金银花菌，即得扩繁后的驯化后的金银花菌菌丝；所述扩繁培养后的金银花菌的加入量与步骤A、步骤B所得原料渣1、2的比例为20～25颗玉米粒：300～500g原料渣；
步骤B、步骤C中，所述一次发酵、二次发酵处理的温度为24～26℃，发酵的时间为15～25d；
步骤B、步骤C中，所述渗漉提取法的条件为：浸泡时间15～20h，乙醇水溶液浓度55～65％，乙醇水溶液用量为苦荞籽粒质量的10～30倍。
6.根据权利要求1所述的具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：至少满足下列的一项：
步骤D中，所述过滤条件为：采用0.22μm滤膜进行真空抽滤；
步骤D中，所述浓缩条件为：于温度45～50℃，转速90～100r/min，进行真空旋转蒸发，提取液与蒸发后剩余溶液体积比为10～15:1～3；
步骤D中，所述真空冷冻干燥条件为：于-77～-80℃真空冷冻干燥48～60h。
7.根据权利要求2所述的具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：制备基酒时，至少满足下列的一项：
步骤a1，所述高粱和玉米的质量比为700～1200:200～300；
步骤a2，所述蒸熟后高粱、玉米和特制酒曲质量比为700～1200:200～300:100～200；
步骤a2中，所述发酵的温度为25～28℃，发酵的时间为45～60d；
步骤a3中，所述的基酒的酒精度为55～67°。
8.根据权利要求3所述的具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法，其特征在于：制备特制酒曲时，至少满足下列的一项：
步骤b1中，所述大麦和大米的质量比为5～10:3～8；
步骤b1中，所述浸泡的时间为4～8h；
步骤b1中，所得原料粉的粒度为过100～150目筛；
步骤b2中，所述泸州老窖酿酒大曲的加入量为培质量的8～15％；
步骤b2中，所述水的加入量为培质量的50～70％；
步骤b2中，所述霉菌的加入量为培质量的5～10％；所述霉菌的浓度为107CFU/mL。
9.一种具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒，由权利要求1～8所述的具有抗炎、抗氧化特性的苦荞养生酒的制备方法制备得到。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116463183B (zh) * | 2023-05-19 | 2024-05-03 | 泸州老窖股份有限公司 | 融入杏鲍菇的苦荞养生酒及其制备方法 |
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- 2023-06-13 CN CN202310696097.3A patent/CN116515586A/zh active Pending
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