KR100450021B1

KR100450021B1 - 4'-0-메틸피리독신 및 바이오플라본 함량을 감소시킨 징코 빌로바 잎 추출물 및 제조 방법

Info

Publication number: KR100450021B1
Application number: KR10-2000-0032649A
Authority: KR
Inventors: 슈와베 클라우스-피터
Original assignee: 닥터 빌마르 쉬바베 게엠베하 운트 코
Priority date: 1997-12-19
Filing date: 2000-06-14
Publication date: 2004-09-24
Also published as: EP1037646A1; JP2001526235A; CN1282252A; WO1999032129A1; KR20000063097A; CN1177596C; DE19756848A1; US6328999B1; DE19756848C2; DE59805452D1; JP4530533B2; EP1037646B1

Abstract

본 발명은 4'-0-메틸피리독신 및 비플라본 함량을 감소시킨 징코 빌로바 잎 추출물과 그 제조 방법 및 상기 추출물을 함유하는 의약물에 관한 것이다.

Description

4'-0-메틸피리독신 및 바이오플라본 함량을 감소시킨 징코 빌로바 잎 추출물 및 제조 방법{EXTRACTS OF GINKGO BILOBA LEAVES WITH REDUCED 4′OMETHYLPYRIDOXINE AND BIOFLAVONES CONTENT}

본 발명은 적은 함량의 4'-0-메틸피리독신 및 바이오플라본을 가진 징코 빌로바(Ginkgo biloba) 잎 추출물, 그 제조 방법 및 높은 (고) 투여량에서도 4'-0-메틸피리독신 및 바이오플라본에 의해 작용되는 바람직하지 않은 부작용이 발생되지 않는, 상기 추출물로 이루어진 의약물에 관한 것이다.

징코 빌로바 잎 추출물은 지난 30년간 치료에 사용되어 왔으며, 베를린에 있는 연방보건소(Bundesgesundheitsamt)의 위원회 E에서는 상기 추출물로 이루어진 의약품이 대뇌 기능부전, 말초 폐색증, 현기증 및 이명증에 의해 유발된 기능장애의 증후를 보이는 치료에 효과적이라는 것을 인정하였다(BAnz No. 133, July 19, 1994).또한, 상기 추출물로 이루어진 의약품이 대뇌 기능부전, 말초 폐색증, 현기증 및 이명증에 의해 유발된 기능장애에 대해서 여러 가지 임상실험을 통해 치료효과가 있다고 입증되었음이 세계보건기구(WHO)의 은행잎에 대한 학술연구 전공 논문을 통해 다음과 같이 공지되어 있다(Folium Ginkgo, WHO monographs on selected medicinal plants, page 161 ∼162).상기 세계보건기구(WHO)의 학술연구 전공논문에 의하여 공지된 바에 의하면, 집중력과 기억의 곤란, 주의력 부족, 혼란, 에너지 결핍, 피로, 체력감소, 우울증, 불안, 현기증, 이명증, 그리고 두통을 포함하는 대뇌 기능부전의 증후군을 임상실험 연구에서 징코 빌로바가 효과적으로 처리하였다. 동맥, 모세관, 정맥의 혈관조절활동과 같은 혈액순환에 대한 효과(혈액순환 증진); 유동학적 효과(점성 감소, PAF-수용체 길항작용); 무산소증에 대한 인내력의 증가와 같은 신진대사 변화; 신경자극 전달부에 대한 유익한 영향; 그리고 자유 기(基)에 의해 멤브레인 손상의 방지. 징코 빌로바 추출물을 이용한 인간의 치료는 전체적 및 국부적 뇌 혈액순환과 미소 순환의 증진을 보여주고 있으며, 산소결핍증으로부터 보호, 혈소판 집합체의 억제를 포함하여 혈액유동의 증진, 세포 조직의 신진대사 증진, 그리고 모세관 투과성 감소의 효과를 보여주고 있다. 대뇌 기능부전을 위해 징코 빌로바 추출물을 (하루에 150mg 경구투입하여) 투입한 성인환자들에 있어서 위약으로 통제되고 무작위 표본으로 실시한 11개의 이중맹검법(二重盲檢法)에 의한 연구(double-blind study)의 차이분석에 의하면 8개의 연구가 성공적으로 수행되었다는 결론을 내리고 있다. 모든 분석된 단일 증후군들에 대해 중요한 차이들이 발견되었고 위약과 비교하여 약품의 우월성을 나타냈다. 임상실험 증후군들의 전체 성적을 분석한 것을 보면 1개의 연구는 결론이 나지 않았지만 7개의 연구에서는 징코 빌로바 추출물이 효과가 있었음을 보여주었다.말초폐색증의 치료효과에 대한 임상실험을 보면, 간헐적인 절름발이(말초폐색증 폰테인 단계 Ⅱ)를 치료함에 있어서 위약으로 통제되고 이중맹검법에 의해 실시된 임상실험에서 통계적으로 보행거리의 상당한 증가를 보여줌으로써 위약과 비교하여 징코 빌로바 추출물의 효용성이 증명되었다. 약품(24주 동안 120-160mg)으로 치료를 받고 물리적인 훈련도 받은 폰테인 단계 Ⅱb에 있는 말초폐색증 환자 60명은 뚜렷하게 보행거리가 증가하였다. 말초폐색증 환자들에 있어서 위약으로 통제된 징코 빌로바 추출물을 이용한 5개의 임상실험(1991년 말까지)의 차이분석을 행한 후에, 조사자들이 내린 결론에 의하면 추출물이 상당히 중요한 치료효과를 행사했다는 것이다.현기증 및 이명증의 치료효과에 대한 임상실험을 보면, 난청, 현기증 및 이명증과 같은 귀의 내부 질환을 치료하는데 있어서 징코 빌로바 추출물이 임상적으로 사용되었다. 최근에 시작된 현기증 증후군을 가진 68명의 환자를 대상으로 위약으로 통제된 이중맹검법(二重盲檢法)에 의한 연구결과, 징코 빌로바 추출물을 이용한 치료(4-12주 동안 하루에 120-160mg)는 위약을 사용한 집단과 비교하여 통계적으로 중요한 개선이 있었음을 보여주었다. 이명증의 치료에 관한 임상실험 연구결과는 모순되는 것이었다. 최소한 6개의 임상실험 연구는 이명증 치료에 징코 빌로바 추출물이 효과가 있었음을 평가했다. 세 개의 연구는 긍정적인 결과를 보고했다. 103명의 이명증 환자들을 대상으로 다중심, 무작위 표본, 이중맹검법으로 13개월 동안 연구한 바에 의하면, 징코 빌로바 추출물로 치료받았을 때(3개월 동안 하루에 160mg) 예후의 요인에 관계없이 모든 환자들이 개선되었음을 보여주었다.이들 징코 빌로바 잎 추출물은 22 %내지 27%의 플라본 글리코시드, 5% 내지 7%의 터펜 락톤, 2.8 %내지 3,4%의 징콜리드 A,B와 C 및 2.6% 내지 3.2%의 바이로발리드 함량과, 최대 5ppm의 징콜산(알킬페놀 화합물) 함량을 특징으로 한다.이러한 징코 빌로바 잎 추출물 및 그 제조방법은 DE 39 40 091(EP-B-0 431 535) 및 DE 39 40 092(EP-B-0 431 536)에 공지되어 있다.

징코 빌로바 씨에서 4'-메톡시피리독신(4'-O-메틸피리독신)의 발생은 와다 등(Wada et al., Chem.Pharm.Bull.33(1985), 3555-3557)에 의해 기술되어 공지되었다. 이 화합물은 다량의 은행 씨를 섭취한 후에 발생할 수 있는 경련 및 무의식과 같은 중독증상("Gin-nan food poisoning" 및 "Gin-nan sitotoxism")을 유발시킨다. 따라서, 이 화합물의 발견자는 이 화합물을 "징코톡신"이라고 명명하였다. 나중에 같은 연구진이 4'-O-메틸피리독신이 은행잎에는 없다는 것을 발견하였다.(Wada et al., Biol.Pharm.Bull.16(1993), 210-212). 그렇지만, 이 발견과는 다르게 최근에는 징코 빌로바 잎에서의 4'-O-메틸피리독신의 분리 및 동정에 관한 발행물이 출판되었다(Arenz et al., Planta Medica 62 (1996), 548-551). 이 연구에서, 징코 빌로바 잎 추출물을 함유한 시판용 제제를 그 항(anti)-비타민 B6(4'-O-메틸피리독신) 함량에 대해 분석하여 액체 상태의 약제로 약 4 내지 10㎍/㎖ 농도의 독성이 있다는 것을 발견하였다. 이 제제로 가공되는 건조 추출물은 약 100ppm 내지 250ppm의 농도에 해당한다. 이와 같이 독성이 함유되어 있음은 임상실험을 통해 확인되었음이 세계보건기구(WHO)의 연구논문을 통해서도 공지되어 있다(Folium Ginkgo, WHO monographs on selected medicinal plants).

본 발명의 기술적 문제는, 4'-O-메틸피리독신 및 알킬페놀 화합물(징콜산, 징콜)을 거의 함유하지 않으며, 기술적으로 가능한 한도내에서 바이오플라본 함량이 최소이며, 인정된 활성결정 성분인 플라본 글리코시드 및 터펜 락톤을 위원회 E(BAnz No.133, July 19, 1994)가 요구하는 농도로 함유하는 징코 빌로바 잎 추출물을 제공하는 것이다.

본 발명에 따른 추출물은

- 20 내지 30중량%의 플라본 글리코시드

- 총 2.5 내지 4.5중량%의 징콜리드 A, B, C 및 J

- 2.0 내지 4.0 중량%의 바이로발리드

- 10ppm 미만, 바람직하게는 1ppm 미만의 알킬페놀 화합물(징콜산, 징콜)

- 10중량% 미만의 프로안토시아니딘

- 50ppm 미만의 4'-O-메틸피리독신

- 100ppm 미만의 바이오플라본

을 함유한다.

또한, 본 발명은 그러한 징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법에 관한 것이다.

이러한 기술적 문제는 공지된 징코 추출물의 제조방법에 다음의 두 단계를 더 추가함으로써 해결된다:

1. 양이온 교환체로 처리하여 4'-O-메틸피리독신을 제거하는 단계

2. 바이오플라본을 활성탄에 흡착시키는 단계

본 발명에 따른 추출물은,

- 20 내지 30중량%의 플라본 글리코시드

- 총 2.5 내지 4.5중량%의 징콜리드 A, B, C 및 J

- 2.0 내지 4.0중량%의 바이로발리드

- 10중량% 미만의 프로안토시아니딘

- 50ppm 미만의 4'-O-메틸피리독신

- 100ppm 미만의 바이오플라본

을 함유한다.

2. 바이오플라본을 활성탄에 흡착시키는 단계

이들 방법은 DE 39 40 091의 청구항 3에 따른 방법으로, 바람직하게는 단계 g 전후로 시행한다. 따라서 단계 f에서 얻은 용액을 여과한 후에 상기 용액을 양이온 교환컬럼에 통과시키고 컬럼을 수성 에탄올 또는 수성 메탄올로 용리한다. 얻어진 용리액을 활성탄으로 처리한다. 양이온 교환체의 용리를 위해, 20 내지 80중량%, 바람직하게는 50중량%의 에탄올 또는 메탄올을 함유하는 수용액을 사용할 수 있다. 본 발명에 따른 두 단계의 순서는 결과에 영향을 미치지 않는다면 바꿀 수 있다. 다음에 하기의 실시예 3에 따라 실험을 계속하고 용액을 지방족 또는 고리지방족 용매로 추출하여 알킬페놀 화합물을 제거한다.

본 방법중 단계 c는 다량의 바이오플라본을 포함하는, 난수용성 지방친화성 성분을 제거하는데 사용된다.

본 발명의 청구항 1에 따른 추출물의 바람직한 제조방법은,

a) 징코 빌로바 잎을 수성 아세톤, 탄소원자수 1 내지 3의 수성 알칸올 또는 무수 메탄올로 추출하는 단계,

b) 유기용매를 10중량% 이하의 함량으로까지 농축함으로써(물은 최종 증류단계에서 첨가할 수 있다) 이 용매를 분리하는 단계,

c) 잔류 수용액을 5 내지 25 중량%의 고형물 함량이 되도록 물로 희석하고, 25℃ 미만의 온도로 냉각시켜 침전이 형성될 때까지 방치하는 단계,

d) 잔류 수용액을 황산암모늄으로 처리한 다음에 메틸에틸케톤 또는 메틸에틸케톤과 아세톤의 혼합물로 적어도 1회 추출하는 단계,

e) 얻은 추출물을 농축하고 각각 50중량%의 물과 에탄올 및 10 중량%의 고형물을 함유하는 용액이 되도록 에탄올-물 혼합물로 희석하는 단계,

f) 용액을 납화합물 또는 불용성 폴리아미드로 처리하는 단계,

g) 용액을 여과하고 강산성 양이온 교환체를 통과시키고 양이온 교환체를 수성 에탄올 또는 수성 메탄올로 용리하는 단계,

h) 용리액을 활성탄으로 처리하는 단계,

i) 여과용액을 비점이 60 내지 100℃인 지방족 또는 고리지방족 용매로 추출하는 단계,

j) 잔류 수성 알코올계 용액을 농축하고 나서 황산암모늄으로 처리하고 메틸에틸케톤 및 에탄올로 추출하는 단계,

k) 얻은 유기상을 50 내지 70 중량%의 고형물 함량으로 농축하는 단계 및

l) 진공하에서 물함량이 5%미만인 건조 추출물이 되도록 농축물을 건조하는단계들과 그 순서를 특징으로 한다.

본 발명의 다른 구체예에서 단계 g 및 h는 서로 바꿀 수 있다.

본 발명의 다른 구체예에서 본 방법중 단계 g 및 h는 단계 i 후에만 시행한다.

흡착수지에 의한 플라본 글리코시드 및 터펜 락톤의 첨가물에 대해 공지된 방법에 있어서(EP-B-0 360 556, JP-A-04182434) 본 발명에 따른 두 단계는 탈착단계에서 얻은 추출물의 메탄올계 수용액(EP-B-0 360 556, 실시예 III, 청구항 12 참고) 및 JP-A-04182434에 따른 에탄올계 수용액으로 각각 시행한다. 유용한 양이온 교환체의 예로는 산성 양이온 교환체가 있다. 가장 바람직한 양이온 교환체는 Merck I와 같은 강산성 양이온 교환체이다.

[실시예 1]

오금 림프결절 시험: 18 내지 24g의 수컷 C57BL/6 마우스를 사용하였다(Charles River, Sulzfeld). 동물들을 음식과 물을 자유롭게 먹을 수 있는, 표준화된 환경 조건하에 두었다. 오금 림프결절반응(PLR)을 유발시키기 위해 시험물질을 포함하는 DMSO 10㎕을 왼쪽 뒷발에 피하주사하였다. 대조군의 동물에는 DMSO 10㎕를 1회 주사하였다. 단일 추출물을 각각 2㎎씩 투여하였다. 상이한 부추출물은 출발 추출물중의 그 각각의 비율에 대응하여 투여하였다. 7일이 지난 후에 시험동물을 에테르 마취 하에서 경부 탈구시켜 치사시켰다. 접착되어 있는 조직을 제거 후에, 양 오금 림프결절을 떼어내고 페트리접시안의 물기를 머금은 필터상에서 수집하였다. 림프결절의 중량을 감도가 0.1㎎인 전자저울에서 바로 측정하였다. PLR 강도는 동측 및 대측성 오금 림프결절의 중량차로 나타낸다.

[실시예 2]

활성탄 2.5g을, 50중량%의 에탄올 용액중의 10% 중량의 건조 잔류물을 함유하는, DE 39 40 091(col. 4, l. 67)의 실시예 1에 따른 납-타닌산 침전의 상청액 250㎖에 가한다. 이 혼합물을 30분간 실온에서 교반한다. 활성탄을 여과제거하고 여액을 강산성 양이온 교환체(Merck I) 20㎖가 적재된 컬럼을 통과시킨다. 용리한 용액을 DE 39 40 091의 실시예 1에 기재된 방법에 따라 더 처리한다. 메틸에틸케톤/에탄올중의 최종 생성물 용액을 건조한 후에 23.9%의 징코 플라본 글리코시드, 3.3%의 징콜리드, 2.9%의 바이로발리드, 7.1%의 프로안토시아니딘, 1ppm 미만의 알킬페놀 화합물, 50ppm 미만의 4'-O-메틸피리독신(Arenz et al., Planta Medica, Vol. 62 (1996), 548-551에 따른 분석방법) 및 60ppm의 바이오플라본(Gobbata et al., Fitoterapia, Vol. 67 (1996), 152-158에 따른 분석방법) 함량의 건조 추출물 22.25g을 얻는다.

[실시예 3]

90중량%의 메탄올중의 10중량%의 건조 잔류물을 함유하는, EP-B-0 360 556의 5페이지 41째줄에 있는 실시예 III에 따른 흡착제 수지 Duolite S-761로부터의 터펜 락톤 및 플라본의 탈착으로 얻은 90% 메탄올계 수용액 250㎖를 강산성 양이온 교환체 15㎖가 적재된 컬럼을 통해 여과한다. 활성탄 3.75g을 가하여 메탄올 일부를 진공하에서 용액으로부터 제거하고, 물을 가하여 용액을 50중량%의 메탄올 농도로 조정하고 실온에서 30분간 교반한다. 활성탄을 필터베드를 통한 흡입으로 여과제거하고 50% 메탄올 20㎖로 세정한다. 용액을 진공하에서 농축건조한 다음에 22.8%의 징코 플라본 글리코시드, 3.1%의 징콜리드, 2.8%의 바이로발리드, 9.6%의 프로안토시아니딘, 1ppm 미만의 알킬페놀 화합물, 50ppm 미만의 4'-O-메틸피리독신 및 28ppm의 바이오플라본 함량의 징코 추출물 23.2g을 얻는다.

[실시예 4]

징코 추출물 정제(알약)용 조성:

성분들을 혼합하여 혼합기 또는 와동 분무장치에서 통상의 방법에 따라 물로 입상화한 다음에 회전 펠릿화 프레스에서 정제화한다.

치료에 사용되는 은행 추출물은 최대 1000ppm의 바이오플라본을 더 포함한다. 본 발명자들의 연구 결과 놀랍게도 이들 화합물이 문헌에 공지되어 있는 생물학적 활성외에 면역독성 효과를 나타낸다는 것을 밝혀냈다. 마우스의 오금 림프결절 분석에서, 본 발명자는 은행잎을 에탄올-물로 추출한 총 추출물중 아세트산에틸 가용성 분획물이 림프결절 반응을 유발시킨다는 것을 알아내었다(실시예 1 참조). 크로마토그래피 분리로 얻은 부분획물을 시험하여 면역독성 효과는 70%가 넘는 바이오플라본을 함유하는 부분획물을 사용한 후에만 발생한다는 것을 밝혔다. 은행에서 발견된 바이오플라본은 다음 화합물, 즉 시아도피티신, 징케틴, 이소징케틴, 세쿠오이아플라본 및 빌로베틴이다.

본 발명에 따라 제조한 추출물은 약물학적 시험모델에서 순환촉진성, 허혈 손상 예방성, 라디칼 스캐빈져성 및 혈소판의 응집 억제성을 나타내며, 여기서, 지금까지 공지된 은행 추출물과는 달리, 높은(고) 투여량에서 4'-O-메틸피리독신 및 바이오플라본에 의해 유발될 수 있는, 바람직하지 않은 효과를 발생하지 않을 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명에 따른 징코 빌로바 추출물을 가지는 것을 특징으로 하는 의약물에 관한 것이다.

의약물 제조를 위해 본 발명에 따른 추출물은 예를 들면 용액, 코팅된 정제, 주사용 정제나 제제로 통상적으로 가공될 수 있다. 의약은 말초 및 대뇌 동맥 순환장애 치료에 사용될 수 있다.

Claims

- 20 내지 30중량%의 플라본 글리코시드

- 총 2.5 내지 4.5중량%의 징콜리드 A, B, C 및 J

- 2.0 내지 4.0중량%의 바이로발리드

- 1 ppm 미만의 징콜산 및 징콜

- 10중량% 미만의 프로안토시아니딘

- 50 ppm 미만의 4'-O-메틸피리독신

- 100 ppm 미만의 바이오플라본

을 함유하는 징코 빌로바 잎 추출물.
징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법에 있어서,

a) 수성 아세톤, 탄소원자수 1 내지 3의 수성 알칸올 또는 무수 메탄올로 구성되어 있는 기에서 정선한 유기용매로 징코 빌로바 잎을 추출하는 단계,

b) 유기용매를 10중량% 이하의 함량으로 농축함으로써(물은 최종 증류단계에서 첨가할 수 있다) 이 용매를 분리하는 단계,

c) 잔류 수용액을 5 내지 25중량%의 고형물 함량이 되도록 물로 희석하고, 25℃ 미만의 온도로 냉각시켜 침전이 형성될 때까지 방치하는 단계,

d) 잔류 수용액을 황산암모늄으로 처리한 다음에 메틸에틸케톤 또는 메틸에틸케톤과 아세톤의 혼합물로 적어도 1회 추출하는 단계,

e) 얻은 추출물을 농축하고 각각 50중량%의 물과 에탄올 및 10중량%의 고형물을 함유하는 용액이 되도록 에탄올-물 혼합물로 희석하는 단계,

f) 용액을 납화합물 또는 불용성 폴리아미드로 처리하는 단계,

g) 용액을 여과하고 강산성 양이온 교환체를 통과시키고 양이온 교환체를 수성 에탄올 또는 수성 메탄올로 용리하는 단계,

h) 용리액을 활성탄으로 처리하는 단계,

i) 여과용액을 비점이 60 내지 100℃인 지방족 화합물 용매 또는 고리지방 족 화합물 용매로 추출하는 단계,

j) 잔류 수성 알코올계 용액을 농축하고 나서 황산암모늄으로 처리하고 메틸에틸케톤 및 에탄올로 추출하는 단계,

k) 얻은 유기상을 50 내지 70중량%의 고형물 함량으로 농축하는 단계 및

l) 진공하에서 물함량이 5%미만인 건조 추출물이 되도록 농축물을 건조하는 단계

의 단계들과 그 순서를 특징으로 하는 징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법.
징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법에 있어서,

a) 수성 아세톤, 탄소원자수 1 내지 3의 수성 알칸올 또는 무수 메탄올로 구성되어 있는 기에서 정선한 유기용매로 징코 빌로바 잎을 추출하는 단계,

b) 유기용매를 10중량% 이하의 함량으로 농축함으로써(물은 최종 증류단계에서 첨가할 수 있다) 이 용매를 분리하는 단계,

c) 잔류 수용액을 5 내지 25중량%의 고형물 함량이 되도록 물로 희석하고, 25℃ 미만의 온도로 냉각시켜 침전이 형성될 때까지 방치하는 단계,

d) 잔류 수용액을 황산암모늄으로 처리한 다음에 메틸에틸케톤 또는 메틸에틸케톤과 아세톤의 혼합물로 적어도 1회 추출하는 단계,

e) 얻은 추출물을 농축하고 각각 50중량%의 물과 에탄올 및 10중량%의 고형물을 함유하는 용액이 되도록 에탄올-물 혼합물로 희석하는 단계,

f) 용액을 납화합물 또는 불용성 폴리아미드로 처리하는 단계,

h) 용리액을 활성탄으로 처리하는 단계,

g) 용액을 여과하고 강산성 양이온 교환체를 통과시키고 양이온 교환체를 수성 에탄올 또는 수성 메탄올로 용리하는 단계,

i) 여과용액을 비점이 60 내지 100℃인 지방족 화합물 용매 또는 고리지방족 화합물 용매로 추출하는 단계,

j) 잔류 수성 알코올계 용액을 농축하고 나서 황산암모늄으로 처리하고 메틸에틸케톤 및 에탄올로 추출하는 단계,

k) 얻은 유기상을 50 내지 70중량%의 고형물 함량으로 농축하는 단계 및

l) 진공하에서 물함량이 5%미만인 건조 추출물이 되도록 농축물을 건조하는 단계

의 단계들과 그 순서를 특징으로 하는 징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법.
징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법에 있어서,

a) 수성 아세톤, 탄소원자수 1 내지 3의 수성 알칸올 또는 무수 메탄올로 구성되어 있는 기에서 정선한 유기용매로 징코 빌로바 잎을 추출하는 단계,

b) 유기용매를 10중량% 이하의 함량으로 농축함으로써(물은 최종 증류단계에서 첨가할 수 있다) 이 용매를 분리하는 단계,

c) 잔류 수용액을 5 내지 25중량%의 고형물 함량이 되도록 물로 희석하고, 25℃ 미만의 온도로 냉각시켜 침전이 형성될 때까지 방치하는 단계,

d) 잔류 수용액을 황산암모늄으로 처리한 다음에 메틸에틸케톤 또는 메틸에틸케톤과 아세톤의 혼합물로 적어도 1회 추출하는 단계,

e) 얻은 추출물을 농축하고 각각 50중량%의 물과 에탄올 및 10중량%의 고형물을 함유하는 용액이 되도록 에탄올-물 혼합물로 희석하는 단계,

f) 용액을 납화합물 또는 불용성 폴리아미드로 처리하는 단계,

i) 여과용액을 비점이 60 내지 100℃인 지방족 화합물 용매 또는 고리지방족 화합물 용매로 추출하는 단계,

g) 용액을 여과하고 강산성 양이온 교환체를 통과시키고 양이온 교환체를 수성 에탄올 또는 수성 메탄올로 용리하는 단계,

h) 용리액을 활성탄으로 처리하는 단계,

j) 잔류 수성 알코올계 용액을 농축하고 나서 황산암모늄으로 처리하고 메틸에틸케톤 및 에탄올로 추출하는 단계,

k)얻은 유기상을 50 내지 70중량%의 고형물 함량으로 농축하는 단계 및

l) 진공하에서 물함량이 5%미만인 건조 추출물이 되도록 농축물을 건조하는 단계

의 단계들과 그 순서를 특징으로 하는 징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법.
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제1항에 있어서, 징코 빌로바 잎 추출물을 공지의 약물학 첨가제들과 혼합하여 제조되는 것을 특징으로 하는, 대뇌 기능부전, 말초 폐색증, 현기증 및 이명증에 의해 유발되는 기능장애의 치료용 의약품.
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- 20 내지 30중량%의 플라본 글리코시드

- 총 2.5 내지 4.5중량%의 징콜리드 A, B, C 및 J

- 2.0 내지 4.0중량%의 바이로발리드

- 10 ppm 미만의 징콜산 및 징콜

- 10중량% 미만의 프로안토시아니딘

- 50 ppm 미만의 4'-O-메틸피리독신

- 100 ppm 미만의 바이오플라본

을 함유하는 징코 빌로바 잎 추출물.
징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법에 있어서,

a) 수성 아세톤, 탄소원자수 1 내지 3의 수성 알칸올 또는 무수 메탄올로 구성되어 있는 기에서 정선한 유기용매로 징코 빌로바 잎을 추출하는 단계,

b) 유기용매를 10중량% 이하의 함량으로 농축함으로써(물은 최종 증류단계에서 첨가할 수 있다) 이 용매를 분리하는 단계,

c) 잔류 수용액을 5 내지 25중량%의 고형물 함량이 되도록 물로 희석하고, 25℃ 미만의 온도로 냉각시켜 침전이 형성될 때까지 방치하는 단계,

d) 잔류 수용액을 황산암모늄으로 처리한 다음에 메틸에틸케톤 또는 메틸에틸케톤과 아세톤의 혼합물로 적어도 1회 추출하는 단계,

e) 얻은 추출물을 농축하고 각각 50중량%의 물과 에탄올 및 10중량%의 고형물을 함유하는 용액이 되도록 에탄올-물 혼합물로 희석하는 단계,

f) 용액을 납화합물 또는 불용성 폴리아미드로 처리하는 단계,

i) 여과용액을 비점이 60 내지 100℃인 지방족 화합물 용매 또는 고리지방족 화합물 용매로 추출하는 단계,

h) 용리액을 활성탄으로 처리하는 단계,

g) 용액을 여과하고 강산성 양이온 교환체를 통과시키고 양이온 교환체를 수성 에탄올 또는 수성 메탄올로 용리하는 단계,

j) 잔류 수성 알코올계 용액을 농축하고 나서 황산암모늄으로 처리하고 메틸에틸케톤 및 에탄올로 추출하는 단계,

k) 얻은 유기상을 50 내지 70중량%의 고형물 함량으로 농축하는 단계 및

l) 진공하에서 물함량이 5%미만인 건조 추출물이 되도록 농축물을 건조하는 단계

의 단계들과 그 순서를 특징으로 하는 징코 빌로바 잎 추출물의 제조방법.
제8항에 있어서, 징코 빌로바 잎 추출물을 공지의 약물학 첨가제들과 혼합하여 제조되는 것을 특징으로 하는, 대뇌 기능부전, 말초 폐색증, 현기증 및 이명증에 의해 유발되는 기능장애의 치료용 의약품.