JPWO2019017148A1 - グルコース測定方法およびグルコースセンサ - Google Patents
グルコース測定方法およびグルコースセンサ Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2019017148A1 JPWO2019017148A1 JP2018533949A JP2018533949A JPWO2019017148A1 JP WO2019017148 A1 JPWO2019017148 A1 JP WO2019017148A1 JP 2018533949 A JP2018533949 A JP 2018533949A JP 2018533949 A JP2018533949 A JP 2018533949A JP WO2019017148 A1 JPWO2019017148 A1 JP WO2019017148A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glucose
- xylose
- gdh
- activity
- less
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/001—Enzyme electrodes
- C12Q1/005—Enzyme electrodes involving specific analytes or enzymes
- C12Q1/006—Enzyme electrodes involving specific analytes or enzymes for glucose
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/66—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood sugars, e.g. galactose
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
- C12Y101/99—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with other acceptors (1.1.99)
- C12Y101/9901—Glucose dehydrogenase (acceptor) (1.1.99.10)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E60/00—Enabling technologies; Technologies with a potential or indirect contribution to GHG emissions mitigation
- Y02E60/30—Hydrogen technology
- Y02E60/50—Fuel cells
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
そのため、SMBGセンサ上でのD−キシロース作用性に関する評価は、スパイク試験を用いて行われることが多い。また、D−キシロースの影響がないことを確実に担保するために、スパイク試験で採用するD−キシロース濃度は非特許文献1に記載の濃度よりも高く設定し性能評価を行う場合がある。
項1.下記の特性(1)及び(2)を備えるグルコース脱水素酵素を用いるグルコース測定方法。
(1)D−グルコースに対するKmが0.1mM以上、100mM以下
(2)D−キシロースに対するKmが600mM以上、3000mM以下
項2.グルコース脱水素酵素のD−キシロースに対するKmが619mM以上、3000mM以下である項1に記載のグルコース測定方法。
項3.グルコース脱水素酵素のD−キシロースに対するKmが736mM以上、3000mM以下である項1に記載のグルコース測定方法。
項4.グルコース脱水素酵素を備えた酵素電極を用いる項1から3のいずれかに記載のグルコース測定方法。
項5.グルコース脱水素酵素が、さらに、酵素電極法でのD−キシロース作用性(10mMのグルコース溶液に対する応答値に対して、10mMのD−グルコース溶液に対し20mMのD−キシロースをスパイクした溶液に対する応答値の割合(%))が95%以上、105%以下である項1から4のいずれかに記載のD−グルコースを測定する方法。
項6.下記の特性(1)及び(2)を備えるグルコース脱水素酵素が、カーボン電極または金属電極上に備わるグルコースセンサ。
(1)D−グルコースに対するKmが0.1mM以上、100mM以下
(2)D−キシロースに対するKmが600mM以上、3000mM以下
項7.グルコース脱水素酵素が、さらに、酵素電極法でのD−キシロース作用性(10mMのグルコース溶液に対する応答値に対して、10mMのD−グルコース溶液に対し20mMのD−キシロースをスパイクした溶液に対する応答値の割合(%))が95%以上、105%以下である項6に記載のグルコースセンサ。
項8.カーボン電極または金属電極上に、さらに、メディエーターを備えた項6または7に記載のグルコースセンサ。
項9.グルコース脱水素酵素のキシロースに対するミカエリス定数(Km)を測定する工程を含むグルコースセンサの製造方法。
項10.グルコース脱水素酵素のキシロースに対するKmを測定し、かつ、Kmが600mM以上であるグルコース脱水素酵素を選択する工程を含む項9に記載のセンサの製造方法。
本発明のグルコース測定方法は、以下の反応を触媒するグルコース脱水素酵素を利用することを特徴とする。
D−グルコース + 電子受容体(酸化型) → D−グルコノ−δ−ラクトン + 電子受容体(還元型)
温度安定性は、50℃、15分処理後の残存活性が70%以上であることが好ましく、75%以上がより好ましく、80%以上がさらに好ましい。
至適pHは、5.0から8.5であることが好ましく、5.5から8.0がより好ましく、6.0から7.5がさらに好ましい。
pH安定性は、25℃、16時間処理条件下で、2.5から10.0であることが好ましく、3.5から9.0がより好ましく、4.5から8.0がさらに好ましい。
糖含有量は、5%から50%であることが好ましく、10%から40%がより好ましく、20%から30%がさらに好ましい。
至適温度 50〜55℃
温度安定性 50℃、15分処理後の残存活性が80%以上
至適pH 7.0付近
pH安定性 4.0〜8.0(25℃、16時間)
糖含有量 20〜50%
D−グルコースに対するKm 50〜70mM
至適温度 50〜70℃
温度安定性 50℃、15分処理後の残存活性が80%以上
至適pH 6.5〜7.5
pH安定性 2.5〜10.0(25℃、16時間)
糖含有量 10〜40%
D−グルコースに対するKm 10〜90mM
至適温度 45〜50℃
温度安定性 45℃、15分処理後の残存活性が80%以上
至適pH 6.0〜6.5
pH安定性 3.5〜6.5(25℃、16時間)
糖含有量 20〜50%
D−グルコースに対するKm 5〜20mM
(I)D−キシロースに対するミカエリス定数(Km)が619mM以上であるグルコース脱水素酵素を用いて、酵素電極法により、D−グルコースを測定する。
(II)酵素電極法でのD−キシロース作用性(10mMのD−グルコース溶液に対する応答値に対して、10mMのD−グルコース溶液に対し20mMのD−キシロースをスパイクした溶液に対する応答値の割合(%))が80%以上120%以下であり、好ましくは85%以上115%以下であり、さらに好ましくは90%以上110%以下であり、さらに好ましくは95%以上105%以下であり、さらに好ましくは97%以上103%以下である。
本発明において、グルコース脱水素酵素の活性は、以下の組成からなる試薬を用いた方法に従い、基質存在下で1分間に1マイクロモルのDCPIPを還元する酵素量を1単位(U)として定義する。
<試薬>
50mM PIPES緩衝液(pH6.5;0.1%TritonX−100を含む)
24mM PMS溶液
2mM 2,6−ジクロロフェノールインドフェノール(DCPIP)溶液
1M D−グルコース溶液
上記溶液を混合して200mM D‐グルコース、0.068mM DCPIP、1.63mM PMS、0.1% TritonX‐100、35mM PIPES緩衝液(pH6.5)となるように反応試薬を調製する。
まず、反応試薬3mlを37℃で5分間予備加温する。これにGDH溶液0.1mlを添加し、ゆるやかに混和後、水を対照に37℃に制御された分光光度計で、600nmの吸光度変化を5分記録し、直線部分から1分間あたりの吸光度変化(ΔODTEST)を測定する。盲検はGDH溶液の代わりにGDHを溶解する溶媒を試薬混液に加えて、同様に1分間あたりの吸光度変化(ΔODBLANK)を測定する。これらの値から、次の式に従ってGDH活性を求める。GDH活性における1単位(U)とは、濃度200mMのD−グルコース存在下で1分間に1マイクロモルのDCPIPを還元する酵素量として定義する。
グルコース脱水素酵素のD−グルコースに対するミカエリス定数(Km)は、本発明においてはラインウィーバー・バークプロットから算出する。具体的には、上記1記載のD−グルコース脱水素酵素活性測定法において30mM、50mM、100mMおよび200mMの4点のD−グルコース濃度における反応速度を測定することで算出できる。
グルコース脱水素酵素の水系でのD−キシロース作用性は、上記1に記載のグルコース脱水素酵素活性測定法において、基質濃度を50mM及び200mMの2水準に設定した2種類の方法で、それぞれグルコース及びD−キシロースに対する反応性を取得し、グルコースへの反応性に対するキシロースへの反応性の割合を算出することで評価する。キシロースに対する反応性は、以下の測定条件で取得する
50mM PIPES緩衝液(pH6.5;0.1%TritonX−100を含む)
24mM PMS溶液
2mM 2,6−ジクロロフェノールインドフェノール(DCPIP)溶液
1M D−キシロース溶液
上記溶液を混合して50mMまたは200mM D‐キシロース、0.068mM DCPIP、1.63mM PMS、0.1% TritonX‐100、35mM PIPES緩衝液(pH6.5)となるように反応試薬を調製する。
まず、反応試薬3mlを37℃で5分間予備加温する。これにGDH溶液0.1mlを添加し、ゆるやかに混和後、水を対照に37℃に制御された分光光度計で、600nmの吸光度変化を5分記録し、直線部分から1分間あたりの吸光度変化(ΔODTEST)を測定する。盲検はGDH溶液の代わりにGDHを溶解する溶媒を試薬混液に加えて、同様に1分間あたりの吸光度変化(ΔODBLANK)を測定する。これらの値から、上記1に記載の方法によりキシロースに対する反応性を求める。
グルコース脱水素酵素のD−キシロースに対するミカエリス定数(Km)は、本発明においてはラインウィーバー・バークプロットから算出する。具体的には、上記1記載のグルコース脱水素酵素活性測定法において基質をD−グルコースからD−キシロースに変更し、各種D−キシロース濃度における反応速度を測定することで算出できる。算出のために用いるD−キシロース濃度は、その酵素のミカエリス定数に応じて適切な濃度を設定できるが、本発明では、Kmが0mM〜100mMの間であれば、30mM、50mM、100mM及び200mMの4点、Kmが100mM〜500mMの間であれば、50mM、200mM、600mMおよび1000mMの4点、Kmが500mM〜1500mMの間であれば、50mM、200mM、600mMおよび1400mMの4点をプロットするものとする。
本発明に用いる酵素電極法は特に限定されない。図5に酵素電極を用いてD−グルコースを測定する方法の原理の一例を示す。グルコース脱水素酵素は、メディエーター(電子受容体)の存在下で、グルコースの水酸基を酸化してグルコノ−δ−ラクトンを生成する反応を触媒する。FADGDHがD−グルコースに作用する際に、補酵素FADはFADH2(還元型)となるが、メディエーターとしてフェリシアン化物(例えば「Fe(CN)6」3−)を存在させると、FADH2(還元型)はこれをフェロシアン化物(この場合「Fe(CN)6」4−)へと変換し、自らはFAD(酸化型)へと戻る。フェロシアン化物は電位を与えると、電子を電極に渡してフェリシアン化物へと戻るので、こうした電子伝達物質をメディエーターとすることにより、電気化学的なシグナル検出が可能になる。
酵素電極法におけるキシロースに対する反応性は、下記の方法で作製したセンサチップを用い、10mMのグルコース溶液に対し、20mM(300mg/dLに相当)のD−キシロースをスパイクした溶液で評価する。なお、この条件は、非特許文献1に記載の条件を参考に、非特許文献1の推奨条件より厳しく設定したものである。
絶縁性基板に作用電極、対向電極および参照電極を配した電極センサを、有限会社バイオデバイステクノロジー(石川県能美市)より、委託製造により入手した。本電極センサは、4.0mm×17mmの基板上に電極が印刷されている。このセンサの作用電極(面積約1.3mm2)上に試薬層となる水溶液を3μLマウントした。試薬層となる水溶液には、下記の組成からなる。
1000U/ml FAD−GDH
200mM フェリシアン化カリウム
50mM リン酸カリウムバッファー (pH7.0)
これを50℃で10分加温することにより乾燥させ、FADGDHが1枚当たり3U固定化されたグルコースセンサチップを得る。
10mMのグルコース溶液及び10mMのグルコース溶液に対し、20mMのD−キシロースをスパイクした溶液を調製する。ポテンショスタットに接続した上記チップに、これら試料溶液5μLをマイクロピペットで滴下し、滴下から5秒後に+300mVの電圧を印加、電流値を測定する。10mMのグルコース溶液に対する応答値に対して、10mMのグルコース溶液に対し、20mMのD−キシロースをスパイクした溶液に対する応答値の割合(%)を酵素電極法におけるキシロースに対する作用性と定義する。この値が100%であれば、D−キシロースからの影響を全く受けないことを示す。この値が100%から離れるほど、D−キシロースから正または負の影響を受けていることになる。
4種類のFADGDH(後述のGDH1〜4)についてその特性を比較した。比較した項目および各項目の測定方法は、次の通りである。
(a)基質濃度50mMでの水系でのD−キシロース作用性
測定法:「3.グルコース脱水素酵素の水系でのD−キシロース作用性の評価方法」に記載の方法
(b)水系でのD−キシロースに対するミカエリス定数(Km)
測定法:「4.グルコース脱水素酵素のD−キシロースに対するミカエリス定数」に記載の方法
(c)水系でのD−グルコースに対するミカエリス定数(Km)
測定法:「2.グルコース脱水素酵素のD−グルコースに対するミカエリス定数」に記載の方法
(d)酵素電極法でのD−キシロース作用性
測定法:「6.酵素電極法におけるD−キシロース作用性の評価方法」に記載の方法
GDH1〜4における各種酵素特性を比較した結果を表1に示す。
実施例1の結果から導かれた前記の仮説を検証するために、D−キシロースに対するKm(b)が619mM以上となるGDHを探索した。特開2015−84676の実施例1には、サッカロマイセス属酵母を宿主とした、FADGDHランダム変異ライブラリーの構築について記載がある。配列番号5のアミノ酸配列記載のGDHをコードするDNAから、特開2015−84676の実施例1記載の方法に基づく方法で、1000株からなるサッカロミセス属酵母を宿主とした、FADGDHランダム変異ライブラリーを構築した。
溶液中での酵素の反応速度が分単位の観察によって計算されるのに対し、酵素電極法に代表されるセンサ系では、秒単位あるいはミリ秒単位の変化を電流応答値として観察している。実施例1の結果より、D−キシロースに対する親和性が低い、すなわちKmが十分に大きい酵素を使用した酵素電極法においては、瞬間的に測り込まれるD−キシロース分解に由来の電流応答値が少なく抑えられるため、D−キシローススパイク条件下での電流応答値の変動が小さくなるであろうと推測された。
Claims (10)
- 下記の特性(1)及び(2)を備えるグルコース脱水素酵素を用いるグルコース測定方法。
(1)D−グルコースに対するKmが0.1mM以上、100mM以下
(2)D−キシロースに対するKmが600mM以上、3000mM以下 - グルコース脱水素酵素のD−キシロースに対するKmが619mM以上、3000mM以下である請求項1に記載のグルコース測定方法。
- グルコース脱水素酵素のD−キシロースに対するKmが736mM以上、3000mM以下である請求項1に記載のグルコース測定方法。
- グルコース脱水素酵素を備えた酵素電極を用いる請求項1から3のいずれかに記載のグルコース測定方法。
- グルコース脱水素酵素が、さらに、酵素電極法でのD−キシロース作用性(10mMのグルコース溶液に対する応答値に対して、10mMのD−グルコース溶液に対し20mMのD−キシロースをスパイクした溶液に対する応答値の割合(%))が95%以上、105%以下である請求項1から4のいずれかに記載のD−グルコースを測定する方法。
- 下記の特性(1)及び(2)を備えるグルコース脱水素酵素が、カーボン電極または金属電極上に備わるグルコースセンサ。
(1)D−グルコースに対するKmが0.1mM以上、100mM以下
(2)D−キシロースに対するKmが600mM以上、3000mM以下 - グルコース脱水素酵素が、さらに、酵素電極法でのD−キシロース作用性(10mMのグルコース溶液に対する応答値に対して、10mMのD−グルコース溶液に対し20mMのD−キシロースをスパイクした溶液に対する応答値の割合(%))が95%以上、105%以下である請求項6に記載のグルコースセンサ。
- カーボン電極または金属電極上に、さらに、メディエーターを備えた請求項6または7に記載のグルコースセンサ。
- グルコース脱水素酵素のキシロースに対するミカエリス定数(Km)を測定する工程を含むグルコースセンサの製造方法。
- グルコース脱水素酵素のキシロースに対するKmを測定し、かつ、Kmが600mM以上であるグルコース脱水素酵素を選択する工程を含む請求項9に記載のセンサの製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022188451A JP2023015399A (ja) | 2017-07-19 | 2022-11-25 | グルコース測定方法およびグルコースセンサ |
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2017140041 | 2017-07-19 | ||
JP2017140041 | 2017-07-19 | ||
JP2017151687 | 2017-08-04 | ||
JP2017151687 | 2017-08-04 | ||
JP2018017142 | 2018-02-02 | ||
JP2018017142 | 2018-02-02 | ||
PCT/JP2018/023776 WO2019017148A1 (ja) | 2017-07-19 | 2018-06-22 | グルコース測定方法およびグルコースセンサ |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022188451A Division JP2023015399A (ja) | 2017-07-19 | 2022-11-25 | グルコース測定方法およびグルコースセンサ |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2019017148A1 true JPWO2019017148A1 (ja) | 2020-05-28 |
JP7196607B2 JP7196607B2 (ja) | 2022-12-27 |
Family
ID=65016652
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018533949A Active JP7196607B2 (ja) | 2017-07-19 | 2018-06-22 | グルコース測定方法およびグルコースセンサ |
JP2022188451A Pending JP2023015399A (ja) | 2017-07-19 | 2022-11-25 | グルコース測定方法およびグルコースセンサ |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022188451A Pending JP2023015399A (ja) | 2017-07-19 | 2022-11-25 | グルコース測定方法およびグルコースセンサ |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11591631B2 (ja) |
EP (1) | EP3656868B1 (ja) |
JP (2) | JP7196607B2 (ja) |
WO (1) | WO2019017148A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102247002B1 (ko) | 2019-10-15 | 2021-04-29 | 동우 화인켐 주식회사 | 바이오 센서 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013065770A1 (ja) * | 2011-11-02 | 2013-05-10 | キッコーマン株式会社 | 基質特異性が向上したフラビン結合型グルコースデヒドロゲナーゼ |
JP2013116102A (ja) * | 2011-10-31 | 2013-06-13 | Toyobo Co Ltd | 新規なグルコース脱水素酵素 |
JP2015084676A (ja) * | 2013-10-29 | 2015-05-07 | 東洋紡株式会社 | 耐熱性に優れたフラビンアデニンジヌクレオチド依存性グルコースデヒドロゲナーゼ |
JP2017000137A (ja) * | 2015-06-04 | 2017-01-05 | キッコーマン株式会社 | フラビン結合型グルコースデヒドロゲナーゼを用いたグルコースの測定方法 |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS527482B2 (ja) | 1972-05-08 | 1977-03-02 | ||
JP4649993B2 (ja) | 2005-01-12 | 2011-03-16 | パナソニック株式会社 | リチウム二次電池およびその製造方法 |
WO2010140431A1 (ja) | 2009-06-04 | 2010-12-09 | キッコーマン株式会社 | フラビン結合型グルコースデヒドロゲナーゼ |
EP2719761B1 (en) | 2011-06-07 | 2018-01-24 | Kikkoman Corporation | Flavin-binding glucose dehydrogenase, method for manufacturing flavin-binding glucose dehydrogenase, and glucose measurement method using same |
WO2013022074A1 (ja) * | 2011-08-11 | 2013-02-14 | 東洋紡株式会社 | 新規なグルコース脱水素酵素 |
JP5588578B2 (ja) | 2012-05-17 | 2014-09-10 | 東洋紡株式会社 | 担子菌酵母変異体 |
JP6526572B2 (ja) | 2013-12-27 | 2019-06-05 | キッコーマン株式会社 | 熱安定性が向上したフラビン結合型グルコースデヒドロゲナーゼ |
JP6342174B2 (ja) | 2014-02-06 | 2018-06-13 | 東洋紡株式会社 | 新規なグルコースデヒドロゲナーゼ |
JP6856344B2 (ja) | 2015-10-29 | 2021-04-07 | アークレイ株式会社 | 変異グルコース脱水素酵素およびその利用 |
EP3456823A4 (en) | 2016-05-09 | 2019-11-13 | Kikkoman Corporation | FLAVIN BINDING GLUCOSE DEHYDROGENASE VARIANT |
-
2018
- 2018-06-22 WO PCT/JP2018/023776 patent/WO2019017148A1/ja unknown
- 2018-06-22 US US16/629,559 patent/US11591631B2/en active Active
- 2018-06-22 EP EP18834325.5A patent/EP3656868B1/en active Active
- 2018-06-22 JP JP2018533949A patent/JP7196607B2/ja active Active
-
2022
- 2022-11-25 JP JP2022188451A patent/JP2023015399A/ja active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2013116102A (ja) * | 2011-10-31 | 2013-06-13 | Toyobo Co Ltd | 新規なグルコース脱水素酵素 |
WO2013065770A1 (ja) * | 2011-11-02 | 2013-05-10 | キッコーマン株式会社 | 基質特異性が向上したフラビン結合型グルコースデヒドロゲナーゼ |
JP2015084676A (ja) * | 2013-10-29 | 2015-05-07 | 東洋紡株式会社 | 耐熱性に優れたフラビンアデニンジヌクレオチド依存性グルコースデヒドロゲナーゼ |
JP2017000137A (ja) * | 2015-06-04 | 2017-01-05 | キッコーマン株式会社 | フラビン結合型グルコースデヒドロゲナーゼを用いたグルコースの測定方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3656868B1 (en) | 2023-05-17 |
EP3656868A1 (en) | 2020-05-27 |
EP3656868A4 (en) | 2021-04-07 |
JP2023015399A (ja) | 2023-01-31 |
WO2019017148A1 (ja) | 2019-01-24 |
US11591631B2 (en) | 2023-02-28 |
JP7196607B2 (ja) | 2022-12-27 |
US20200172950A1 (en) | 2020-06-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5947901B2 (ja) | 電気化学バイオセンサーのための酸化還元試薬組成物およびそれを含むバイオセンサー | |
Palmisano et al. | Electrosynthesized bilayer polymeric membrane for effective elimination of electroactive interferents in amperometric biosensors | |
Yamashita et al. | Direct electron transfer type disposable sensor strip for glucose sensing employing an engineered FAD glucose dehydrogenase | |
JP6312593B2 (ja) | グルコースオキシダーゼ | |
JP2010057427A (ja) | グルコース脱水素酵素およびグルコースの電気化学測定法 | |
Baş et al. | Amperometric biosensors based on deposition of gold and platinum nanoparticles on polyvinylferrocene modified electrode for xanthine detection | |
Kulys et al. | Glucose biosensor based on the incorporation of Meldola Blue | |
JP5001240B2 (ja) | バイオセンサ、その製造方法、その使用方法 | |
Li et al. | A new handheld biosensor for monitoring blood ketones | |
Yabuki et al. | Preparation of a microperoxidase and ferrocene-immobilized polyion complex membrane for the detection of hydrogen peroxide | |
JP2023015399A (ja) | グルコース測定方法およびグルコースセンサ | |
Feng et al. | A disposable cholesterol enzyme biosensor based on ferrocene-capped gold nanoparticle modified screen-printed carbon electrode | |
US20220057355A1 (en) | Crosslinker comprising genipin for use in preparation of sensing film or diffusion control film of electrochemical sensor | |
JP6635913B2 (ja) | 比活性が向上したフラビン結合型グルコースデヒドロゲナーゼ | |
JP2011120500A (ja) | 乳酸オキシダーゼ組成物 | |
JP5380888B2 (ja) | グルコースの定量方法ならびに定量組成物 | |
Arai et al. | Pyruvate sensor based on pyruvate oxidase immobilized in a poly (mercapto-p-benzoquinone) film | |
Castrovilli et al. | Improved reuse and storage performances at room temperature of a new environmentally friendly lactate oxidase biosensor prepared by ambient electrospray immobilization | |
JPWO2016076364A1 (ja) | 基質特異性が向上したフラビン結合型グルコースデヒドロゲナーゼ | |
Shkil et al. | Bioelectrochemical detection of L-lactate respiration using genetically modified Hansenula polymorpha yeast cells overexpressing flavocytochrome b2 | |
JP5419779B2 (ja) | バイオセンサ | |
Kafi et al. | DNA as a support for glucose oxidase immobilization at Prussian blue-modified glassy carbon electrode in biosensor preparation | |
Garjonyte et al. | Investigation of baker’s yeast Saccharomyces cerevisiae-and mediator-based carbon paste electrodes as amperometric biosensors for lactic acid | |
JP6402887B2 (ja) | グルコースデヒドロゲナーゼ組成物 | |
JP6702192B2 (ja) | グルコース脱水素酵素製剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210416 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220329 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220525 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220711 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20221115 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20221128 |
|
R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 7196607 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |