JPWO2017104729A1 - 発酵乳製品及びその製造方法 - Google Patents
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Abstract
Description
特許文献2には、トランスグルタミナーゼを添加して発酵乳を製造すると、トランスグルタミナーゼの酵素作用により乳タンパク質間及び乳タンパク質内(分子間及び分子内)のネットワークが形成(ゲル化)されることが記載されている。特許文献2には、得られた発酵乳の硬度について記載はないが、上記のトランスグルタミナーゼの作用機序からすると、発酵乳の硬度が増大することが推測される。
〔1〕 原料乳と、乳酸菌と、を混合し、混合液を得る第1工程と、
前記混合液を発酵させる第2工程と、
を順次行う発酵乳製品の製造方法であって、
上記第2工程が終了する前に、前記原料乳及び/又は前記混合液にペニバチルス属由来のプロテアーゼを添加する工程(プロテアーゼ添加工程)を行うことを特徴とする発酵乳製品の製造方法;
〔2〕 前記原料乳に含まれる乳脂肪分(質量%)と、前記プロテアーゼの添加量(PU/g)との比(前記乳脂肪分:前記プロテアーゼの添加量)が、50:1〜1:10である、前記[1]記載の発酵乳製品の製造方法;
[3] 前記プロテアーゼの添加量が、前記原料乳の全質量を基準として0.05〜10.0PU/gである、前記[1]又は[2]記載の発酵乳製品の製造方法;
[4] 前記原料乳に含まれる乳脂肪分が0〜10質量%である、前記[1]記載の発酵乳製品の製造方法;
[5] 前記原料乳に含まれる無脂乳固形分が3.0〜20質量%である、前記[1]〜[4]記載の発酵乳製品の製造方法;
[6] 前記プロテアーゼが、下記の(1)〜(5)の性質を有することを特徴とする[1]〜[5]のいずれか記載の発酵乳製品の製造方法。
(1)ペニバチルス属に属する細菌により産生され、
(2)中性範囲でκ−カゼイン及びヘモグロビンを分解し、
(3)pH5.5〜9.0で安定であり、至適pHが7.0〜8.0であり、
(4)20〜75℃で作用し、至適温度が50〜60℃であり、
(5)SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分子量が32,000〜34,000Daと推定されるプロテアーゼ;
[7] 更にラクターゼ、グルコースイソメラーゼ、グルコースオキシダーゼ、トランスグルタミナーゼ、リパーゼ、セルラーゼ、アミラーゼ、イヌリナーゼ、ラッカーゼ、パーオキシダーゼ、及び、前記プロテアーゼ以外のプロテアーゼから選択される1種又は複数種を上記原料乳及び/又は上記混合液に添加する工程を含む、前記[1]〜[6]のいずれか記載の発酵乳製品の製造方法;
[8] ペニバチルス属由来のプロテアーゼを含有する発酵乳製品であって、
クリープメータを用いて測定した場合のカードの破断点が、0.002〜1.0Nであることを特徴とする発酵乳製品;
[9] 発酵乳製品の製造方法であって、
原料乳と、乳酸菌と、を混合し、混合液を得る第1工程と、
上記混合液を発酵させる第2工程と、
上記第2工程が終了する前に、上記原料乳及び/又は上記混合液にペニバチルス属由来のプロテアーゼを添加する工程(プロテアーゼ添加工程)と
を含み、
所望の前記発酵乳製品のカード硬さと、原料乳に含まれる乳脂肪分と、ペニバチルス属由来プロテーゼの添加量と、を指標として、当該乳脂肪分と当該プロテアーゼの添加量を決定し、発酵工程を行うことを特徴とする発酵乳製品の製造方法
が提供される。
<中性プロテアーゼ>
本発明において好適に使用することができるプロテアーゼは、以下の性質を有する。
(1)ペニバチルス属に属する細菌により産生され、
(2)中性範囲でκ−カゼイン、ヘモグロビンを分解し、
(3)至適pHは7.0〜8.0であり、
(4)pH5.5〜9.0で安定である中性プロテアーゼであり、
(5)20〜75℃で作用し、至適温度が55℃であり、
(6)電気泳動法による分子量が32,000〜34,000Daと推定される。
ペニバチルス属は旧来バチルス属に分類されていたが、近年再分類され、新たな属として提案された。上記の性質を有するプロテアーゼは、バチルス・ポリミキサから再同定されたペニバチルス・ポリミキサ或いはペニバチルス・エスピーを含む別の種から得ることができる。文献等によっては、バチルス・ポリミキサと表示されている場合があるが、同義である。
(a)作用
中性プロテアーゼとしての一般的性質を示し、pHの中性範囲でカゼイン、ヘモグロビンなどの蛋白質を分解してペプチド乃至遊離のアミノ酸を生成する。
酸化インシュリンのB鎖に対してはPha(1)−Val(2)、His(5)−Leu(6)、His(10)−Leu(11)、Glu(13)−Ala(14)、Ala(14)−Ler(15)、Ler(15)−Tyr(16)、Tyr(16)−Leu(17)、Leu(17)−Val(18)、Gly(23)−Phe(24)、Phe(24)−Phe(25)、Phe(25)−Tyr(26)及びLys(29)−Ala(30)の12ヶ所のペプチド結合を切断することが確認されている。
(b)基質特異性
κ−カゼインに対し、pHの中性範囲において温和な蛋白分解作用を示す。α−カゼイン及びβ−カゼインに対しては、pHの中性範囲においても蛋白分解作用をほとんど示さない。
(c)至適pH及び安定pH範囲
イ 至適pH:κ−カゼインに対する蛋白分解作用の至適pHは、7.0〜8.0である。
ロ 安定のpH範囲:5.5〜9.0の範囲で極めて安定である。
(d)作用適温の範囲
20℃〜75℃の範囲で作用し、至適温度は50〜60℃である。最適温度は55℃である。
(e)pH、温度などによる失活の条件
pH3.0以下及びpH10.0以上では、活性は完全になくなる。また、65℃、10分間の加熱処理により、完全に失活する。
(f)阻害、活性化及び安定化
エチレンジアミンテトラアセテート(EDTA)、クエン酸、0−フェナンスロリン、2,2−ジピリジル、フッ化ソーダのごとき、金属キレート剤、及びN−ブロモサクシニイミド(NBS)、沃素のごとき酸化剤によって阻害される。
カルシウムイオンにより安定化され、活性には亜鉛イオンが必要である。
(g)分子量
電気泳動法による分子量は、32,000〜34,000Daと推定される。
プロテアーゼは、微生物を含む、非常に広範囲の生物から単離されている。好ましいプロテアーゼは、価格や反応性の面から微生物由来プロテアーゼである。例えば、このようなプロテアーゼとしては、バチルス(Bacillus)属又はペニバチルス属(paenibacillus)、ジオバチルス属(Geobacillus)、アスペルギルス(Aspergillus)属、リゾプス属(Rhizopus)、リゾムコール属(Rhizomucor)ストレプトマイセス属(Streptomyces)に属する微生物由来のプロテアーゼ、乳酸菌由来のプロテアーゼなどが挙げられる。本発明の酵素として使用できるプロテアーゼは、ペニバチルス属(paenibacillus)由来のプロテアーゼであり、具体的には、好ましいプロテアーゼは、Paenibacillus polymyxa、Paenibacillus macerans、Paenibacillus pabuli、Paenibacillus peoriae、Paenibacillus thiaminolyticus、Paenibacillus validus、Paenibacillus glucanolyticus、Paenibacillus kobensis、Paenibacillus lautus、Paenibacillus alginolyticus、Paenibacillus alvei、Paenibacillus amylolyticus、Paenibacillus chitinolyticus、Paenibacillus chondroitinus、Paenibacillus curdlanolyticus、Paenibacillus durus、Paenibacillus ehimensis、Paenibacillus sp.からなる群から選択される微生物(細菌)に由来するプロテアーゼである。
本発明に使用される金属プロテアーゼは、従来の一般的な方法で微生物から回収され、精製されたものであることができる。従って、当該プロテアーゼの生産は、遺伝子組換え又は非遺伝子組換えによって実施することができる。例えばPaenibacillus polymyxa NBRC 15309株をDifco社製ニュートリエント培地等で培養し、培養物からろ過又は遠心した培養上清として得ることができる。また、得られた培養上清液をカラムクロマトグラフィーや硫安分画などによって適宜精製して用いることもできる。得られた酵素液の形状は液状の他、スプレードライや凍結乾燥により粉末状にしても良い。その際には日常的に用いられる安定剤や賦形剤を添加しても良い。
金属プロテアーゼは、原料乳の全質量を基準として、0.05〜10.0PU/gの範囲で添加することが好適である。より好適には0.25〜5.0PU/gの範囲で添加することができる。本範囲内であれば、発酵乳製品のカード内部の硬さのムラが減少し、食感がなめらかになるからである。また、その添加量を変化させることにより、カード内部の硬さを変化させ、調節することが可能となる。例えば、比較的乳脂肪分の高い原料乳(例えば、1.5%超5.0%以下)に対し、4.0PU/gのプロテアーゼを添加しても、カードの形状を保つことができるため、後発酵タイプの発酵乳製品に好適に使用でき、更に、0.25PU/g以上添加することにより、カードにより十分な柔らかさを付与できる。他方、低脂肪乳や無脂肪乳(例えば、1.5%以下)に対しては、本発明のプロテアーゼを添加することで、カードの適度な硬さを付与することが可能となる。即ち、所望のカード硬さの発酵乳製品を得るためには、原料乳に含まれる乳脂肪分と、ペニバチルス属由来プロテーゼの添加量と、を指標として、当該乳脂肪分と当該プロテアーゼの添加量を決定し{例えば、ある乳脂肪分の原料乳に対し、事前にプロテアーゼの添加量を振って検討し、当該添加量を決定する(検量線等を作成して決定する)}等として、発酵工程を行えばよい。
本発明の乳製品は、その製造方法において乳酸菌スターターを用いる。本発明において、使用する乳酸菌としては、特に限定はされないが、例えば、Lactobacillus.delbrueckii subsp. bulgaricus, Streptococcus thermophilus,Lactobacillus casei,Lactobacillus paracaseiなど従来使用されている乳酸菌が使用できる。これら乳酸菌スターターの入手方法としては、一般に流通している市販品を購入することができるし、独自に分離した菌株を使用することもできる。尚、同一種の乳酸菌を複数組み合わせて使用しても、或いは、異なる種の乳酸菌を複数組み合わせて使用してもよい。また、スターターと同時にビフィズス菌などのプロバイオティクス菌を同時に添加して使用してもよい。
乳酸菌スターターの添加量としては、特に限定はされない。一般的な量を添加することができる。例えば、クリスチャン・ハンセン社凍結乾燥スターターを使用する場合、原料乳を基準として、0.1〜0.5mg/gであるが、乳酸菌の生育が可能な添加量であれば、添加量は特に限定されない。
原料乳としては、特に限定されないが、生乳、原乳、全脂乳、脱脂乳、ホエイ、バターなどの乳成分を含む液体及び粉末の溶解液であり、これらを組み合わせて使用することができる。
下限値未満でも上限値超でも、発酵乳製品の滑らかさが不足するおそれがある。下限値未満では発酵乳製品が固まり難く、上限値超では発酵乳製品が固まりすぎてしまう可能性がある。また、本発明の乳製品は、固形物(例えば、チーズ)及びゲル状の物(例えば、ヨーグルト)に限定されず、液体状及びゾル状の物(例えば、ドリンクタイプのヨーグルト)も含まれるが、その場合、上記無脂乳固形分は、下限値(3.0%)未満であってもよい。無脂乳固形分には、カゼインを主成分とするタンパク質、乳糖を主成分とする糖、各種無機塩を主成分とする塩類等が含まれる。
本発明の乳製品の製造方法には、必要に応じ、各種成分を添加することができる。具体例としては、乳製品の安定化に寄与する金属塩類、各種糖類、アスコルビン酸、グリセリン等、使い勝手をよくするための賦形剤である澱粉、デキストリン、緩衝作用を有する無機塩類、乳由来成分である乳糖、乳清、乳タンパク類、ゲル化剤である寒天、ゼラチン、ペクチン等を挙げることができる。
本発明の乳製品の製造方法においては、ラクターゼ溶液等のラクターゼ製品を添加することもできる。このラクターゼ溶液等は、特に限定されず、市販の製品を用いることができる。
本発明の乳製品の製造方法においては、液状、粉末状等の各種酵素製品を添加することもできる。この酵素製品は特に限定されないが、例えば、グルコースイソメラーゼ、グルコースオキシダーゼ、トランスグルタミナーゼ、リパーゼ、セルラーゼ、アミラーゼ、イヌリナーゼ、第2のプロテアーゼから選択される1種又は複数種であり、市販の製品を用いることができる。
<食感の評価>
本発明の発酵乳製品の有する食感(なめらかさ、粘性)、硬度の評価(破断強度解析)については、株式会社山電社製、クリープメータ(RE2−33005C)を使用した物性値に基づいて行うことができる。
食感における「なめらかさ」については、クリープメータによる波形の直線性に基づき、評価をすることができる。より波形に乱れがない(直線に近い)ことにより、食感として、よりなめらかであるといえる。
粘性(糸引き性:テクスチャ解析)については目視及び後述するプランジャー上昇時の接線の傾きで評価できる。接線の傾きがより小さくなれば、発酵乳製品がより粘性を有し、より濃厚感を有し、発酵乳製品に口中でよりまとまる感覚を付与できると考えられる。
本発明の発酵乳製品のカードの硬度としては、後述する破断強度解析により、評価することができる。具体的な物性値として、カードをくずさずクリープメータによりプランジャーを押し下げた場合に、カードが崩れる時点の荷重(N)を「破断点」(クリープメータにより自動計算される値)として、その硬度を評価することが可能である。本発明の発酵乳製品の硬度としては、所望の硬さに調節可能であり、特に限定されないが、例えば、好ましい硬度(破断点)として、0.002〜1.0Nであり、より好ましくは、0.005〜0.5Nである。
本発明の金属プロテアーゼを含む原料乳を発酵させた場合に、その前後においてκ−カゼイン以外の乳タンパクの変化が最小限であることが好適である。味や風味等を変化させることなく食感を改善させることが可能となるからである。このことは、発酵前後の発酵物をSDS−PAGEに供し、その表れる各バンドの変化によって確認できる。
本発明の乳製品の製造方法は、原料乳と、乳酸菌と、を混合し、混合液を得る第1工程と、混合液を発酵させる第2工程と、を順次行い、第2工程が終了する前に、前記原料乳及び/又は前記混合液にペニバチルス属由来のプロテアーゼを添加する工程(プロテアーゼ添加工程)を含むものであればよく、具体的な製造方法は特に限定されない。例えば、乳製品が発酵乳である場合には、その製造方法は(1)牛乳に乳酸菌スターターと金属プロテアーゼを所定の濃度で同時に添加する、(2)43℃で10〜15分間程度撹拌する、(3)得られた混合液をガラス容器に分注し、43℃で5時間発酵させる、(4)得られた発酵調整物は1日以上4〜5℃で冷蔵保存する、等の工程を含むものである。
前発酵タイプはドリンクタイプやフルーツヨーグルト等に用いることができる。後発酵タイプはプレーンヨーグルト等に用いることができる。また、ラクターゼの活性に影響を与えないため、ラクターゼを添加した乳製品とすることも可能である。
<製造例1>
(材料)
牛乳:明治おいしい牛乳(乳脂肪分3.8±0.3質量%、無脂乳固形分8.6±0.3質量%)
中性プロテアーゼ:Paenibacillus polymyxa NBRC 15309株をDifco社製ニュートリエント液体培地に植菌し、30℃で2日間培養した培養液を10000gで10分間遠心した上清を透析によって脱塩して用いた。尚、当該プロテアーゼは、前述の(a)〜(g)の性質を有するものであった。
乳酸菌スターター:乳酸菌粉末FD−DVS YF−L812 Yo−Flex(クリスチャン・ハンセン社製:Lactobacillus.delbrueckii subsp.及びStreptococcus.thermophilusの混合である)。
(製造方法)
牛乳450gを滅菌済みガラス容器に入れ、乳酸菌スターターYF−L812と中性プロテアーゼを同時に添加した。スターター添加濃度は原料乳を基準として0.1mg/g、中性プロテアーゼ添加濃度は1.0(PU/g)とした。スターター、中性プロテアーゼを添加した牛乳は、恒温水槽中において43℃で10〜15分程度撹拌した。続いて、ガラス容器(ダイソー社製、220ml)に分注し、43℃で5時間醗酵した。醗酵調製物は1日以上冷蔵保存(4〜5℃)し、製造例1のヨーグルトを得た。
乳酸菌スターターをFD−DVS YC−380 Yo−Flex(クリスチャン・ハンセン社製:Lactobacillus.delbrueckii subsp.及びStreptococcus.thermophilusの混合である。)とした以外は、製造例1と同様にして、製造例2のヨーグルトを得た。
牛乳を低脂肪牛乳(UHT殺菌牛乳:明治おいしい低脂肪乳 乳脂肪分1.2質量%、乳固形分11±1.0質量%)とした以外は、製造例1と同様にして、製造例3のヨーグルトを得た。
牛乳を無脂肪乳(UHT殺菌牛乳:小岩井無脂肪牛乳 乳脂肪分0.1質量%、乳固形分8.8±0.2質量%)とした以外は、製造例1と同様にして、製造例4のヨーグルトを得た。
中性プロテアーゼを添加しなかった以外は、製造例1と同様にして、製造例5のヨーグルトを得た。
中性プロテアーゼを添加しなかった以外は、製造例2と同様にして、製造例6のヨーグルトを得た。
中性プロテアーゼを添加しなかった以外は、製造例3と同様にして、製造例7のヨーグルトを得た。
中性プロテアーゼを添加しなかった以外は、製造例4と同様にして、製造例8のヨーグルトを得た。
<試験例1(食感についての物性評価)>
(破断強度解析)
製造例1(実施例)及び製造例2(実施例)のヨーグルト並びに製造例5(比較例)及び製造例6(比較例)のヨーグルトについて、物性の測定を行った。物性の測定は、山電社製のクリープメータ(RE2−33005C)を使用して行った。破断強度解析は、カードを崩さずに行った。結果を図1に示す。破断強度解析においては、プランジャーの圧入速度を1mm/s、サンプル厚さを47mm、プランジャ形状を径16mmの丸型、測定歪率を40%、ロードセルの規格を2Nに設定した。
テクスチャ解析は、スプーンで十分に撹拌してカードを崩し、専用カップに入れて測定した。テクスチャー解析においては、プランジャーの圧入速度を5mm/s、サンプル厚さを15mm、プランジャ形状を径16mmの丸型、測定歪率を66.66%、ロードセルの規格を2Nに設定した。この設定により、テクスチャー解析では、プランジャーをカード内に10mm挿入し、続いてプランジャーを上昇させ、プランジャーへの荷重変化が測定された。結果を図2に示す。プランジャーの挿入により増加した荷重は、プランジャーの上昇に伴いマイナス値を示し、プランジャーがカードの界面から離れると、糸引き様となった。中性プロテアーゼを添加した場合、酵素無添加と比較して付着性(荷重ゼロ以下の面積)が減少しているが、糸引き様の粘性が増加した。糸引き様の粘性は、プランジャーが上昇する際に逆に引っ張られるために荷重の上昇がなだらかになり、波形に接線を引いた場合、酵素無添加の接線(接線1及び接線3、実線)と比較して中性プロテアーゼ添加の接線(接線2及び接線4、破線)の傾きが小さくなる。接線の傾きは、エクセル(登録商標)を使用して以下のように求めた。波形の荷重が最少となった点より歪率14%の範囲で近似直線を引き、得られた近似直線より接線の傾きを求めた。詳細を表1に示す。この粘性のため食感は口中でまとまる感覚があり、濃厚かつなめらかになった。
(破断強度解析)
製造例3(実施例)、及び製造例7(比較例)のヨーグルトについて、試験例1と同様にして、破断強度解析を行った。結果を図3に示す。
テクスチャ解析を試験例1と同様に行った。結果を図4に示す。中性プロテアーゼを添加した場合、酵素無添加と比較して付着性(荷重ゼロ以下の面積)は増加し、表にはしていないが、接線の傾きは減少し、糸引き様の粘性が増加した。この粘性のため食感は口中でまとまる感覚があり、濃厚かつなめらかになった。
(破断強度解析)
製造例4(実施例)及び製造例8(比較例)のヨーグルトについて、試験例1と同様にして、破断強度解析を行った。結果を図5に示す。
テクスチャ解析を試験例1と同様に行った。結果を図6に示す。中性プロテアーゼを添加した場合、酵素無添加(製造例8)と比較して付着性(荷重ゼロ以下の面積)が増加した。表にはしていないが、接線の傾きは殆ど変化がなかったが、硬さと付着性の増加により、官能評価の結果、食感は口中でまとまる感覚があり、濃厚かつなめらかになった。
テクスチャ改変効果が見られる本発明の中性金属プロテアーゼの添加濃度を製造例1の発酵乳について添加濃度を変えて(0.05、0.10、0.25、1.0、2.0及び4.0PU/g)検討した。破断強度解析は、カードを崩さずに行った。結果を図7に示す。0.25PU/g以上の中性プロテアーゼを添加するとカードの硬さが減少する。4.0PU/gの中性プロテアーゼを添加してもカードの形状を保っており、後醗酵タイプの醗酵乳に使用可能であると考えられた。酵素無添加の場合、カード内部の硬さにムラがある(太実線の凸凹波形)が、0.05PU/g以上の中性プロテアーゼを添加するとカード内部の硬さのムラが減少し、食感がなめらかになると解される。
被験者10人について、中性プロテアーゼを添加したヨーグルト(製造例1)と無添加のヨーグルト(製造例5)について、以下の評価基準に基づいて、次の4つの基準において官能試験を行った。その結果を表2に示す。
評価基準としては、ヨーグルトの食感を、なめらかさ、口当たり、風味、濃厚感の4つの評価項目に分け、4段階の評価(とても良い=3点、良い=2点、普通=1点、悪い=0点)とし、平均点(○=2〜3点、△=1〜2点、×=0〜1点)を算出した。
(発酵方法)
製造例1と同様に中性プロテアーゼの添加濃度を1.0PU/gとして43℃で10〜15分程度撹拌した後に、15mL容遠沈管に分注し、43℃で5時間発酵した。発酵前、発酵1、2、3、4及び5時間後の発酵液について、発酵過程のタンパク質変化を下記の方法に従い、SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動により解析した。
上記得られた発酵溶液を超純水で20倍に希釈し、SDS−PAGE用Sample Buffer(0.125M Tris-HCl pH6.8、0.0125% ブロモチモールブルー、20% グリセリン、2.5% SDS、2.5% 2-メルカプトエタノール)と1:1に混合し、95℃、5分間の加熱処理により泳動用サンプルを調製した。12.5%アクリルアミドゲル(4%スタッキングゲル、ゲル厚1mm、泳動距離50mm)に分子量スタンダード及び泳動用サンプルを供し、マリソル産業泳動漕にて、スタッキング10mA定電流、セパレーティング20mAにて泳動前線がゲル下端付近に達するまで泳動した。分子量スタンダード(レーンM)にはBIO−RAD#161−0313(プレステインド)を使用した。泳動後のゲルは、CBB染色液(APRO SP−4010)によるタンパク染色を1時間行った。泳動結果を図8に示す。また、ImageJによるバンドの解析結果を表3に示す。
中性プロテアーゼのpH安定性試験を行った。中性プロテアーゼを50mM MES、1mM 酢酸Ca含有(pH6.5)で約1,000 PU/mLに希釈し、希釈後に1N塩酸でpH調製を行い、43℃、1時間加温した。プロテアーゼを測定し、pH未調整未加熱のサンプルを100%とした時の残存活性を求めた。プロテアーゼ活性は以下のように測定した。50mM MES、1mM 酢酸Ca含有(pH6.5)にAzocasein(SIGMA A2765)を5%に溶解し、基質とした。100 μLの5% Azocaseinに300 μLの50mM MES、1mM 酢酸Ca含有(pH6.5)及び100 μLの希釈酵素液を添加し、43℃、30分反応した後に、500 μLの10% トリクロロ酢酸により反応を停止した。遠心上清に等量の1N NaOHを添加して混合し、OD428nmの吸光度を測定した。結果を図9に示した。発酵乳の一般的な醗酵温度である43℃において、中性プロテアーゼはpH4.5、1時間で失活した。従って、醗酵調製物に中性プロテアーゼ活性が残存せず、保存時に、中性プロテアーゼが醗酵調製物に悪影響を与えないことが予想される。
中性プロテアーゼとラクターゼ溶液との併用について、食感の変化、及び、ラクターゼによる乳糖分解率への影響について検討した。製造例1と同様に、スターター添加濃度は0.1mg/g、中性プロテアーゼ添加濃度は1PU/gとし、ヨーグルトを製造した。上述した破断強度解析と同様に柔らかさ及びカード内部のムラ(なめらかさ)について検討した。結果を図10のパネルAに示す。尚、スターター、中性プロテアーゼを添加した牛乳は、43℃で10〜15分程度撹拌した後にガラス容器に分注し、43℃で5時間醗酵した。醗酵調製物は1日以上冷蔵保存し、物性測定を行った。破断強度解析は、カードを崩さずに行った。結果を図10のパネルBに示す。
Claims (9)
- 原料乳と、乳酸菌と、を混合し、混合液を得る第1工程と、
前記混合液を発酵させる第2工程と、
を順次行う発酵乳製品の製造方法であって、
上記第2工程が終了する前に、前記原料乳及び/又は前記混合液にペニバチルス属由来のプロテアーゼを添加する工程(プロテアーゼ添加工程)を行うことを特徴とする発酵乳製品の製造方法。 - 前記原料乳に含まれる乳脂肪分(質量%)と前記プロテアーゼの添加量(PU/g)との比(前記乳脂肪分:前記プロテアーゼの添加量)が、50:1〜1:10である、請求項1記載の発酵乳製品の製造方法。
- 前記プロテアーゼの添加量が、前記原料乳の全質量を基準として0.05〜10.0PU/gである、請求項1又は2記載の発酵乳製品の製造方法。
- 前記原料乳に含まれる乳脂肪分が0〜10質量%である、請求項1記載の発酵乳製品の製造方法。
- 前記原料乳に含まれる無脂乳固形分が3.0〜20質量%である、請求項1〜4のいずれか一項記載の発酵乳製品の製造方法。
- 前記プロテアーゼが、下記の(1)〜(5)の性質を有することを特徴とする請求項1〜5のいずれか一項記載の発酵乳製品の製造方法。
(1)ペニバチルス属に属する細菌により産生され、
(2)中性範囲でκ−カゼイン及びヘモグロビンを分解し、
(3)pH5.5〜9.0で安定であり、至適pHが7.0〜8.0であり、
(4)20〜75℃で作用し、至適温度が50〜60℃であり、
(5)SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分子量が32,000〜34,000Daと推定されるプロテアーゼ。 - 更にラクターゼ、グルコースイソメラーゼ、グルコースオキシダーゼ、トランスグルタミナーゼ、リパーゼ、セルラーゼ、アミラーゼ、イヌリナーゼ、ラッカーゼ、パーオキシダーゼ、及び、前記プロテアーゼ以外のプロテアーゼから選択される1種又は複数種を上記原料乳及び/又は上記混合液に添加する工程を含む、請求項1〜6のいずれか一項記載の発酵乳製品の製造方法。
- ペニバチルス属由来のプロテアーゼを含有する発酵乳製品であって、
クリープメータを用いて測定した場合のカードの破断点が、0.002〜1.0Nであることを特徴とする発酵乳製品。 - 発酵乳製品の製造方法であって、
原料乳と、乳酸菌と、を混合し、混合液を得る第1工程と、
上記混合液を発酵させる第2工程と、
上記第2工程が終了する前に、上記原料乳及び/又は上記混合液にペニバチルス属由来のプロテアーゼを添加する工程(プロテアーゼ添加工程)と
を含み、
所望の前記発酵乳製品のカード硬さと、原料乳に含まれる乳脂肪分と、ペニバチルス属由来プロテーゼの添加量と、を指標として、当該乳脂肪分と当該プロテアーゼの添加量を決定し、発酵工程を行うことを特徴とする発酵乳製品の製造方法。
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WO2023008491A1 (ja) * | 2021-07-27 | 2023-02-02 | 合同酒精株式会社 | 酵素含有組成物、乳の製造方法及び発酵乳の製造方法 |
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Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS4427714B1 (ja) * | 1966-02-26 | 1969-11-17 | ||
JP3145829B2 (ja) * | 1993-03-26 | 2001-03-12 | 雪印乳業株式会社 | 発酵乳及びその製造方法 |
JP3182954B2 (ja) * | 1993-01-08 | 2001-07-03 | 味の素株式会社 | ヨーグルト類の製造法 |
JP2002306063A (ja) * | 2001-04-10 | 2002-10-22 | Mahoroba:Kk | チーズの製造方法 |
JP2004033093A (ja) * | 2002-07-02 | 2004-02-05 | Daisuke Yasogawa | 細菌由来凝乳酵素及び当該酵素を用いたチーズの製造 |
JP2005521391A (ja) * | 2002-02-15 | 2005-07-21 | カンパニー・ジェルベ・ダノン | 細菌起源の酵素による発酵乳製品の新規生産方法 |
JP2010512798A (ja) * | 2006-12-18 | 2010-04-30 | セレクト ミルク プロデューサーズ, インク. | 酪農調合物及びその製法 |
WO2013039188A1 (ja) * | 2011-09-15 | 2013-03-21 | 株式会社明治 | 低カロリーの発酵乳およびその製造方法 |
CN104673773A (zh) * | 2015-03-30 | 2015-06-03 | 光明乳业股份有限公司 | 一种直投式凝乳酶制剂的制备方法及其产物和应用 |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR1569837A (ja) * | 1968-04-12 | 1969-06-06 | ||
SU471380A1 (ru) * | 1973-09-07 | 1975-05-25 | Московский ордена Трудового Красного Знамени технологический институт пищевой промышленности | Способ получени ферментного препарата дл свертывани молока |
JPH07147898A (ja) | 1990-12-20 | 1995-06-13 | Ogawa Koryo Kk | 発酵豆乳調製物 |
EP0896509B1 (en) | 1996-04-15 | 2007-06-27 | Friesland Brands B.V. | Methods for producing dairy products, in particular cheese using lactic acid bacteria provided with additional neutral protease activity |
FR2836015B1 (fr) * | 2002-02-15 | 2004-10-01 | Gervais Danone Sa | Nouveau procede de fabrication de produits laitiers fermente |
JP2004180553A (ja) * | 2002-12-02 | 2004-07-02 | Ajinomoto Co Inc | ドリンクタイプヨーグルトの製造法 |
CN1887098B (zh) * | 2005-06-27 | 2010-12-15 | 天津科技大学 | 具有酪蛋白磷酸肽和抗血管紧张素转化酶肽的成熟干酪及其制备方法 |
CN1903049A (zh) * | 2005-07-26 | 2007-01-31 | 天津科技大学 | 具有酪蛋白磷酸肽和血管紧张素转化酶抑制肽的乳清饮料及其制备方法 |
JP5119404B2 (ja) * | 2007-05-15 | 2013-01-16 | ビーエイチエヌ株式会社 | 乳発酵物の製造方法 |
US20090297660A1 (en) * | 2008-06-02 | 2009-12-03 | Kraft Food Holdings, Inc. | Cheese Products Containing Galacto-Oligosaccharides And Having Reduced Lactose Levels |
US8951397B2 (en) * | 2009-11-18 | 2015-02-10 | Godo Shusei Co., Ltd. | Electrophoretic analysis method |
BR112013015376A2 (pt) * | 2010-12-20 | 2016-09-20 | Nestec Sa | modulação de sabor por bioprocessamento usando cepas bacterianas formadoras de sabor |
CN104115941B (zh) * | 2013-04-24 | 2016-07-20 | 任发政 | 一种低脂干酪的制备方法以及一种低脂干酪 |
CN103865842B (zh) * | 2014-01-27 | 2015-10-28 | 光明乳业股份有限公司 | 一种具有凝乳酶活性的发酵液提取物的制备方法及其产物 |
GB201501565D0 (en) * | 2015-01-30 | 2015-03-18 | Dupont Nutrition Biosci Aps | Method |
US11291214B2 (en) | 2015-04-06 | 2022-04-05 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Proteases for high protein fermented milk products |
-
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Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS4427714B1 (ja) * | 1966-02-26 | 1969-11-17 | ||
JP3182954B2 (ja) * | 1993-01-08 | 2001-07-03 | 味の素株式会社 | ヨーグルト類の製造法 |
JP3145829B2 (ja) * | 1993-03-26 | 2001-03-12 | 雪印乳業株式会社 | 発酵乳及びその製造方法 |
JP2002306063A (ja) * | 2001-04-10 | 2002-10-22 | Mahoroba:Kk | チーズの製造方法 |
JP2005521391A (ja) * | 2002-02-15 | 2005-07-21 | カンパニー・ジェルベ・ダノン | 細菌起源の酵素による発酵乳製品の新規生産方法 |
JP2004033093A (ja) * | 2002-07-02 | 2004-02-05 | Daisuke Yasogawa | 細菌由来凝乳酵素及び当該酵素を用いたチーズの製造 |
JP2010512798A (ja) * | 2006-12-18 | 2010-04-30 | セレクト ミルク プロデューサーズ, インク. | 酪農調合物及びその製法 |
WO2013039188A1 (ja) * | 2011-09-15 | 2013-03-21 | 株式会社明治 | 低カロリーの発酵乳およびその製造方法 |
CN104673773A (zh) * | 2015-03-30 | 2015-06-03 | 光明乳业股份有限公司 | 一种直投式凝乳酶制剂的制备方法及其产物和应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
上野川修一編, 乳の科学, vol. 第3刷, JPN6017006954, 25 March 1998 (1998-03-25), pages 19, ISSN: 0004025881 * |
香川芳子監修, 食品成分表2014, vol. 初版第1刷, JPN6017006955, 10 February 2014 (2014-02-10), pages 200 - 201, ISSN: 0004025882 * |
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