JPWO2012029367A1 - 腸管免疫調整剤 - Google Patents
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Abstract
Description
ラクトバチルス・パラカゼイK71をMRS培地に接種し、37℃で20時間培養した。遠心分離により乳酸菌体を回収し、蒸留水で2回洗浄後に乾燥菌体重量と等量のデキストリンを添加して80℃で30分間加熱殺菌を行った。これを凍結乾燥することによりラクトバチルス・パラカゼイK71の死菌体粉末(以下、「K71粉末」と略す)を得た。
実施例1と同様に、BALB/c雌マウス(各群6匹)にK71粉末を1mg/マウス/日となるように反復経口投与し、毎週1回糞中のSIgA量を測定した。その結果、図2に示されるように、試験期間全体を通じてK71投与群のSIgAが対照群に比べ高い値を示し、その差は2、4、及び6週目には有意(P<0.05)であった。
実施例1と同様に、BALB/c雌マウス(各群6匹)にK71粉末又は滅菌水を毎日投与した。5週間の飼育終了後に脾細胞を採取した。脾細胞(1.25×106cells/ml)とYAC−1細胞(1×105cells/ml)とを12.5:1(脾細胞:YAC−1細胞)の比率で混合し、1%ウシ胎児血清を含むRPMI−1640培地(96wellプレート)、37℃、5%CO2条件下で4時間インキュベートした。YAC−1細胞の破壊に伴い放出された乳酸脱水素酵素(LDH)の活性を調べることにより、採取した脾細胞が有する細胞傷害活性を求めた。具体的には脾細胞とYAC−1細胞の共培養液上清50μLを新しい96wellプレートに移し、Roche社製Cytotoxicity Detection Kit(LDH)を使用してLDH酵素活性を測定した。
6週齢のSD雄ラットを日本SRLより購入し、SPF環境下、固形飼料(フナバシファームFR−2)及び上水道水の自由摂取により、1週間予備飼育した。動物を各群3匹となるように2群に分け、対照群にはFR−2飼料を、K71投与群にはK71粉末を5%混餌したFR−2飼料を自由に摂取させ、22℃のSPF環境下で8日間飼育した。飼育の前後における動物の体重を測定するとともに、飼育開始直前(予備飼育終了前日夜〜終了日朝)及び飼育終了直前(飼育7日目夜〜8日目朝)の糞便を回収した。
ヘルシンキ宣言および疫学研究に関する倫理指針に則りヒト試験を実施した。30歳〜57歳の健康な成人男女24名について、摂取前検査として唾液SIgA分泌速度を定法に従い測定した。SIgA分泌速度は47.87±20.07μg/minであった。24名中で比較的SIgA分泌速度が低い11名(男性5名、女性6名)を被験者として選択した。被験者に対して試験食品(1包にK71粉末200mgを含む粉末食品)を配布し、1日に1包を水またはぬるま湯などに混ぜて摂取させた。4週間毎の来院時に問診と唾液SIgAの分泌速度測定を行った。試験途中で2名の中止脱落(男女各1名)があったため、9名を対象として解析を行った。その結果、図5に示す通り、摂取開始後4週目、8週目、12週目のSIgA分泌速度は、摂取前の値と比較して有意に増加していた。摂取期間を通じ、試験食の摂取に起因する有害事象は認められなかった。
技術分野
[0001]
本発明は、腸管免疫調整剤に関し、より詳細には特定の乳酸菌の菌体又は菌体成分を有効成分として含有する腸管免疫調整剤に関する。
背景技術
[0002]
分泌型免疫グロブリンA(SIgA)は、口腔、鼻孔、呼吸器官、消化管等の粘膜に存在し、粘膜免疫の中核をなす免疫物質である。粘膜は常に外気や食物を通じて病原菌やアレルギー物質等に暴露されているが、SIgAは、これらから粘膜を防御するために重要な役割を果たしている。すなわち、SIgAは、細菌やウイルスに結合してこれらを凝集させるとともに、毒素や細菌由来の酵素などに結合してこれらを無毒化することで、粘膜を保護している。SIgAの分泌量は、脳、内分泌系や自律神経系による制御を受けているが、若年層や高齢者では成人と比べて低い。
[0003]
一方、ナチュラルキラー(NK)細胞は、癌細胞やウイルス感染細胞等の非自己と認識される細胞を発見してこれを殺傷するリンパ球の一種である。NK細胞の数も若年時や高齢者で少なく、そのことが小児や高齢者において感染症を発症する原因の一つと考えられている。
[0004]
近年、SIgA分泌量又はNK細胞活性を高める食品や食品成分の開発が試みられており、乳酸菌やビフィズス菌の特定の菌株がかような機能を有することが報告されている(特許文献1〜8参照)。
先行技術文献
特許文献
[0005]
特許文献1:特開2005−194259号公報
特許文献2:特開2007−308419号公報
特許文献3:特開2008−179630号公報
特許文献4:特開2008−201708号公報
成分を水洗除去した後、炊飯その他の加熱、加圧等を施して製造されてよい。
[0025]
菌体は、生菌体及び/又は死菌体であってよく、所望程度の上記作用を確実に得る点では死菌体が好ましい。ただし、乳酸菌の増殖又は代謝による利点や腸管免疫調整剤の製造コスト削減の観点からは、生菌体も好ましい。なお、生菌体とは、生きたままの菌体を指し、死菌体とは、加熱、加圧、薬物処理等で殺菌処理された菌体を指す。また、菌体成分は、酵素処理、ホモジナイズ、超音波処理等で細胞を破壊した破砕物、又は細胞壁画分を分取したものを指す。
[0026]
本発明の感染症予防剤は、特定されている優れた作用の観点から、分泌型免疫グロブリンAの産生亢進(例えば、粘膜上皮細胞への病原体の感染予防)及び/又はナチュラルキラー細胞の活性化(例えば、ウイルスの感染領域が粘膜上皮細胞から周囲へと拡大することを抑制する)を実現することができる。
[0027]
本発明の腸管免疫調整剤は、従来飲食されてきた乳酸菌を有効成分とするため、経口投与に最適であり、種々の剤型(溶液、錠剤、顆粒等)で投与されてよい。ただし、腸内へと注射等で直接導入することも除外されない。
[0028]
このような本発明の腸管免疫調整剤は、優れた腸管免疫調整能力及び安全性を有するため、医薬品の成分として有用である。従って、本発明は、上記腸管免疫調整剤と同様の成分を含有し、感染症(例えば、いわゆる風邪)の予防に用いられる医薬品を包含する。本発明に係る医薬品は、分泌型免疫グロブリンAの産生亢進作用とNK細胞活性化作用とを併せて有するため、優れた感染症予防効果を奏する。
実施例
[0029]
<実施例1>
Claims (7)
- 受託番号FERM BP−11098として国際寄託されたラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)K71株の菌体又は菌体成分を有効成分として含有する腸管免疫調整剤。
- 前記菌体は、死菌体である請求項1記載の腸管免疫調整剤。
- 分泌型免疫グロブリンAの産生亢進に用いられる請求項1又は2記載の腸管免疫調整剤。
- ナチュラルキラー細胞の活性化に用いられる請求項1から3いずれか記載の腸管免疫調整剤。
- 経口投与されるものである請求項1から4いずれか記載の腸管免疫調整剤。
- 前記K71株の菌体を用いて発酵させた米か、該米の粉砕物か、前記米または米の粉砕物を炊飯調理して得られる飯かを含む請求項1から5いずれか記載の腸管免疫調整剤。
- 請求項1から6いずれか記載の腸管免疫調整剤を含有し、感染症の予防に用いられる医薬品。
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