JP6471145B2 - 鎮静用の自律神経調整剤及び日周リズム改善剤 - Google Patents
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Description
[1] 乳を乳酸菌及び酵母によって発酵して得られる発酵乳由来成分を有効成分とし、当該有効成分を嗅覚に作用させることを特徴とする、鎮静用の自律神経調整剤;
[2] 乳酸菌がラクトバチルス属の微生物であることを特徴とする、[1]に記載の鎮静用の自律神経調整剤;
[3] 乳酸菌がラクトバチルス・ヘルベティカス(L. helveticus)であることを特徴とする、[2]に記載の鎮静用の自律神経調整剤;
[4] 酵母がサッカロマイセス属の微生物であることを特徴とする、[1]〜[3]のいずれか1項に記載の鎮静用の自律神経調整剤;
[5] 酵母がサッカロマイセス・セレビシエ(S. cerevisiae)であることを特徴とする、[1]〜[4]のいずれか1項に記載の鎮静用の自律神経調整剤;
[6] 乳が脱脂乳であることを特徴とする、[1]〜[5]のいずれか1項に記載の鎮静用の自律神経調整剤;
[7] 乳を乳酸菌及び酵母によって発酵して得られる発酵乳由来成分を有効成分とし、当該有効成分を嗅覚に作用させることを特徴とする、日周リズム改善剤;
[8] 乳酸菌がラクトバチルス属の微生物であることを特徴とする、[7]に記載の日周リズム改善剤;
[9] 乳酸菌がラクトバチルス・ヘルベティカス(L. helveticus)であることを特徴とする、[8]に記載の日周リズム改善剤;
[10] 酵母がサッカロマイセス属の微生物であることを特徴とする、[7]〜[9]のいずれか1項に記載の日周リズム改善剤;
[11] 酵母がサッカロマイセス・セレビシエ(S. cerevisiae)であることを特徴とする、[7]〜[10]に記載の日周リズム改善剤;
[12] 乳が脱脂乳であることを特徴とする、[7]〜[11]のいずれか1項に記載の日周リズム改善剤;
[13] 嗅覚に作用させる、鎮静用の自律神経調整剤の製造方法であって、乳を乳酸菌によって発酵した後に、酵母によって発酵することを特徴とする、自律神経調整剤の製造方法;
[14] 嗅覚に作用させる、日周リズム改善剤の製造方法であって、乳を乳酸菌によって発酵した後に、酵母によって発酵することを特徴とする、日周リズム改善剤の製造方法;[15] 乳を乳酸菌及び酵母によって発酵して得られる発酵乳由来成分を含有する付香組成物。
自律神経は、交感神経と副交感神経の2つの神経系からなる。交感神経活動の亢進時や副交感神経活動の抑制時には、ストレス状態(興奮)であることが一般的に知られている。また、交感神経活動の抑制時や副交感神経活動の亢進時には、リラックス状態(鎮静)であることが一般的に知られている。
「日周リズム」とは、一昼夜を周期として表れる生活リズムで、日内リズムとも称される。ヒトでは明るい期間(明期)が活動期間であり、暗い期間(暗期)が休眠期間である(ラットでは明期が休眠期、暗期が活動期であり、ヒトと逆である)。自律神経の乱れ等に起因するストレス状態では、日周リズムに乱れが生じる。
本発明の自律神経調整剤及び日周リズム改善剤の「有効成分」である「発酵乳由来成分」は、上記発酵乳の匂い成分、すなわち、常温付近又はそれ以上の通常使用される温度で揮発性の成分である。
発酵乳由来成分は「嗅覚に作用」することで自律神経調整剤及び日周リズム改善剤としての効果(機能)を発揮する。すなわち、「嗅覚に作用」とは、有効成分である発酵乳の匂い成分が揮発し、嗅覚を刺激することを意味する。こうして、発酵乳由来の匂いが嗅覚を刺激し、信号となって脳に伝わることで、自律神経の乱れや日周リズムの乱れが調整される。なお、嗅覚への作用は、鼻先から匂いが吸い込まれるオルソネーザル経路であっても、口腔内に含んだ匂いが鼻腔内に入り込むレトロネーザル経路であっても本発明の範囲に含まれる。
本発明で用いられる「発酵乳」は、乳を乳酸菌と酵母を用いて発酵して液状または糊状にした酸性の乳であり、乳等省令で定める発酵乳や乳酸菌飲料等を含む。
本発明は、上記した嗅覚に作用させる、鎮静用の自律神経調整剤あるいは日周リズム改善剤の製造方法であって、乳を乳酸菌によって発酵した後に、酵母によって発酵することを特徴とする、自律神経調整剤あるいは日周リズム改善剤の製造方法も提供する。
本発明の自律神経調整剤及び日周リズム改善剤は、上記発酵後に得られる発酵乳をそのまま懸濁液の形態で用いてもよいし、本発明の目的を損なわない範囲で、滅菌等の処理を施してもよい。剤形としては、液剤のほか、用時溶解あるいは添加して使用されるカプセル剤、顆粒剤、散剤、粉剤、ドライシロップ剤などの形態であってもよい。
本発明は、乳を乳酸菌及び酵母によって発酵して得られる発酵乳由来成分を含有する「付香組成物」も提供する。本発明の付香組成物は、発酵乳から常温付近又はそれ以上の温度で揮発性の匂い成分を水蒸気蒸留法や減圧蒸留法、溶剤抽出法等を用いて抽出した抽出物、発酵乳や抽出物を蒸発法や膜濃縮法等を用いて濃縮した濃縮物、及び、それらの抽出物や濃縮物を製剤化した香料等の形態で、芳香剤、香粧品、医薬品、食品、飼料添加物、繊維製品用洗剤、繊維製品等に添加して使用される。
1.材料・方法
1.1 発酵乳A (乳酸菌+酵母) の調製
殺菌脱脂乳100質量%に、乳酸菌(L. helveticus)と酵母(S. cerevisiae)を含む混合スターター3質量%を接種して、37℃、24時間発酵を行った。その後、ショ糖を添加し、25℃、24時間発酵を行った後、加熱殺菌処理を行い、発酵乳Aを調製した。
(1)供試試料:発酵乳A、水(コントロール)
(2)試験動物:Wistar系ラット(n=3)を12時間毎の明暗周期下(8時より12時間点灯)、24℃の恒温条件の下、餌及び水を自由摂取させ一週間以上予備飼育し、体重約300gの個体を試験に供した。
(3)試験方法:
試験当日は3時間絶食させた後、ラットをウレタン麻酔下(1g / kgのウレタン水溶液を腹腔内投与)で開腹した後、各自律神経の遠心枝について電気活動の変化を測定した。具体的には開腹したラットの各自律神経の遠心枝を、実体顕微鏡下で銀製記録電極で釣り上げて行った。乾燥を防ぐ為に電極は予め液体パラフィンとペトロレウムゼリーの混合物に十分浸しておいた。得られた神経の電気活動はコンデンサー式差動増幅器にて増幅し、オッシロスコープにてモニターし、磁気テープに記録した。全ての神経活動は、その生データをバックグランド・ノイズと分離するためにスライサーとウィンドウ・ディスクリミネーターを用いて標準パルスに変換した後に解析した。放電頻度はレイトメーターにより5秒間のリセットタイムにてペンレコーダー上に表示した。なお、手術開始から実験終了までチューブを気管に挿入して気道を確保し、保温装置にて体温(ラットの直腸温)を35℃±0.5℃に保つようにした。匂い刺激は、プラスチック容器(直径4.5cm、高さ5cm)の底に入れた医薬用カット綿(4cm×4cm×0.5cm)に発酵乳Aの100倍水希釈液もしくは水を4mL注入してカット綿に浸し、その容器の口をラットの鼻孔に10分間あてて実施した。データは5分間毎の5秒あたりの発火頻度(pulse / 5s)の平均値にて解析し、匂い刺激直前(0分値)を100%と百分率で示した。有意差に関する統計学的検定はanalysis of variance (ANOVA) with repeated measuresにより行った。
発酵乳Aの匂い刺激はコントロールと比較して副腎交感神経活動を低下させ(図1)、胃副交感神経活動を上昇させた(図2)。このことから発酵乳Aの嗅覚を介した匂い刺激は鎮静様の自律神経調整作用を有することが明らかとなった。
1.材料・方法
1.1 発酵乳A(乳酸菌+酵母)の調製
実施例1に記載した方法で発酵乳Aを調製した。
(1)供試試料:発酵乳A、水(コントロール)
(2)試験動物:7週齢(♂)のWistar系ラット(n=6)を一週間予備飼育後、更に一週間試験環境で馴致した後、9週齢で試験に供した。
(3)試験方法:
12時間毎の明暗周期下(8時より12時間点灯)に24℃の恒温条件にて飼育し、餌及び水は自由摂取とした。最初の一週間はコントロールである水の匂い刺激期間とし、次の一週間は発酵乳Aの匂い刺激期間とした。毎日14時より30分間匂い刺激を行い、動物が赤外線を横切る回数の測定による自発活動量測定を行った。自発活動量は経時的に測定し、一日活動量、明期(昼間)活動量、暗期活動量などを算出した。また、それらの値から明期活動率[明期活動量×100 / 一日活動量]及び暗期活動率[暗期活動量×100 / 一日活動量]を計算した。なお、匂い刺激はポンプを用いて水又は発酵乳Aの1000倍希釈液50mLをバブリングして液の匂いを含む風を各動物飼育ケージに送風した。有意差に関する統計学的検定はWilcoxon signed-rank testにより行った。なお、ヒトでは明るい期間(明期)が活動期間であり、暗い期間(暗期)が休眠期間であるが、ラットでは明期が休眠期、暗期が活動期であり、ヒトと逆である。
発酵乳Aの匂い刺激はコントロールと比較して総活動量に影響を及ぼさなかったが(図3)、明期活動率を低下させた(図4)。このことから発酵乳Aの嗅覚を介した匂い刺激により日周リズムを改善させる作用があることが明らかとなった。
1.材料・方法
1.1 発酵乳B(乳酸菌)、発酵乳C(酵母)、脱脂乳の調製
殺菌脱脂乳100質量%に、乳酸菌(L. helveticus)スターター3質量%を接種して、37℃、24時間発酵を行った後、加熱殺菌処理を行い、発酵乳Bを調製した。
殺菌脱脂乳100質量%に、酵母(S. cerevisiae)スターター3質量%を接種して、ショ糖を添加し、25℃、24時間発酵を行った。その後、加熱殺菌処理を行い、発酵乳Cを調製した。
市販の脱脂粉乳を9%(w/w)に溶解した後、加熱殺菌処理を行い、脱脂乳を調製した。
(1)供試試料:発酵乳B、発酵乳C、脱脂乳、水(コントロール)
(2)試験動物:7週齢(♂)のWistar系ラット(n=6)を一週間予備飼育後、更に一週間試験環境で馴致した後、9週齢で試験に供した。
(3)試験方法:
実施例2にしたがい、ラットへの匂い刺激による日周リズム改善作用を評価した。
発酵乳B、発酵乳C、及び脱脂乳の匂い刺激はコントロールと比較して総活動量(図5、図6、図7)、明期活動率に影響を及ぼさなかった(図8、図9、図10)。このことから発酵乳B、発酵乳C、及び脱脂乳の嗅覚を介した匂い刺激は日周リズムを改善させる作用はないことが明らかとなった。よって、日周リズム改善作用は発酵乳Aに特徴的な効果と考えられた(図11)。
1.材料・方法
1.1 発酵乳A(乳酸菌+酵母)、発酵乳B(乳酸菌)、脱脂乳の調製
発酵乳A、発酵乳B、脱脂乳は、上記実施例及び比較例に従って調製した。
殺菌脱脂乳100質量%に、乳酸菌(L. helveticus CM4株 受託番号:FERM BP-6060)スターターを3質量%接種して、37℃、24時間乳酸発酵を行い、乳酸菌発酵乳を調製した。次いで得られた乳酸菌発酵乳に酵母(S. cerevisiae JCM7255株)スターターを3質量%接種した後、ショ糖を添加し、25℃、24時間発酵を行った後、加熱殺菌処理を行い、発酵乳A'を調製した。
(1)試験試料:発酵乳A、発酵乳A'、発酵乳B、脱脂乳
(2)被験者:訓練された分析型パネラー10名
(3)試験方法:
50mLプラスチックカップに各試験試料をそれぞれ30mL入れ被験者に提示し、自然曝露した匂いに関して官能評価を実施した。匂いの評価にはVisual Analogue Scale(VAS)法を用いた。
発酵乳A及び発酵乳A'の匂いは発酵乳Bや脱脂乳の匂いと比較して快であり、リラックス(鎮静)効果を有することが示された(表1)。
本発明の自律神経調整剤及び日周リズム改善剤は、体内に摂取(投与)することを必要とせず、嗅覚に作用することで効果を奏するため、安全性が高く、芳香剤、香粧品、食品、医薬品、飼料添加物、繊維製品用洗剤、繊維製品等、様々な製品に付香組成物として添加して使用することができる。
Claims (8)
- 乳、乳酸菌及び酵母を原料とする発酵乳由来成分を有効成分とし、当該有効成分を嗅覚に作用させることを特徴とする、鎮静用の自律神経調整剤であって、
乳酸菌がラクトバチルス・ヘルベティカス(L. helveticus)であり、酵母がサッカロマイセス・セレビシエ(S. cerevisiae)であることを特徴とする自律神経調整剤。 - 乳が脱脂乳であることを特徴とする、請求項1に記載の鎮静用の自律神経調整剤。
- 乳、乳酸菌及び酵母を原料とする発酵乳由来成分を有効成分とし、当該有効成分を嗅覚に作用させることを特徴とする、日周リズム改善剤であって、
乳酸菌がラクトバチルス・ヘルベティカス(L. helveticus)であり、酵母がサッカロマイセス・セレビシエ(S. cerevisiae)であることを特徴とする日周リズム改善剤。 - 乳が脱脂乳であることを特徴とする、請求項3に記載の日周リズム改善剤。
- 嗅覚に作用させる、鎮静用の自律神経調整剤の製造方法であって、乳を乳酸菌によって発酵した後に、酵母によって発酵することを特徴とする、自律神経調整剤の製造方法であって、
乳酸菌がラクトバチルス・ヘルベティカス(L. helveticus)であり、酵母がサッカロマイセス・セレビシエ(S. cerevisiae)であることを特徴とする製造方法。 - 嗅覚に作用させる、日周リズム改善剤の製造方法であって、乳を乳酸菌によって発酵した後に、酵母によって発酵することを特徴とする、日周リズム改善剤の製造方法であって、
乳酸菌がラクトバチルス・ヘルベティカス(L. helveticus)であり、酵母がサッカロマイセス・セレビシエ(S. cerevisiae)であることを特徴とする製造方法。 - 乳、乳酸菌及び酵母を原料とする発酵乳由来成分を含有する付香組成物であって、
乳酸菌がラクトバチルス・ヘルベティカス(L. helveticus)であり、酵母がサッカロマイセス・セレビシエ(S. cerevisiae)であることを特徴とする付香組成物。 - 乳が脱脂乳であることを特徴とする、請求項7に記載の鎮静用の付香組成物。
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