JPWO2004091663A1 - 神経再生薬 - Google Patents

神経再生薬 Download PDF

Info

Publication number
JPWO2004091663A1
JPWO2004091663A1 JP2005505483A JP2005505483A JPWO2004091663A1 JP WO2004091663 A1 JPWO2004091663 A1 JP WO2004091663A1 JP 2005505483 A JP2005505483 A JP 2005505483A JP 2005505483 A JP2005505483 A JP 2005505483A JP WO2004091663 A1 JPWO2004091663 A1 JP WO2004091663A1
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
dihydro
indolo
benzazepine
group
bromo
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Abandoned
Application number
JP2005505483A
Other languages
English (en)
Inventor
森下　剛
剛 森下
一洋 桜田
一洋 桜田
鈴木　恵子
恵子 鈴木
俊一 池田
俊一 池田
Original Assignee
協和醗酵工業株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 協和醗酵工業株式会社 filed Critical 協和醗酵工業株式会社
Publication of JPWO2004091663A1 publication Critical patent/JPWO2004091663A1/ja
Abandoned legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/4045—Indole-alkylamines; Amides thereof, e.g. serotonin, melatonin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本発明の課題は、神経再生薬、神経幹細胞のニューロン新生促進剤、該ニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養して得られるニューロンおよび該ニューロンの製造方法を提供することにある。該課題を解決するために、本発明は、グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３の活性を阻害する物質を有効成分として含有する神経再生薬、該物質を有効成分として含有する神経幹細胞のニューロン新生促進剤、該ニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養して得られるニューロンおよび該ニューロンの製造方法を提供する。本発明の医薬は、パーキンソン病、アルツハイマー病、ダウン症、脳血管障害、脳卒中、脊髄損傷、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん、不安障害、統合失調症、うつ病、躁鬱病などの神経疾患治療薬として有用である。

Description

本発明はグリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（以下、ＧＳＫ−３と略す）の活性を阻害する物質を有効成分として含有してなる神経再生薬、ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質を有効成分として含有してなるニューロン新生促進剤、該ニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養して得られるニューロン、および該ニューロンの製造方法に関する。
神経疾患とは、脳や末梢のニューロンが遺伝的要因、環境要因、加齢要因などにより傷害を受ける疾患である神経変性疾患と、神経の変性を伴わないうつ病および躁鬱病等とを総称する。神経変性疾患として、具体的には、パーキンソン病、アルツハイマー病、ポリグルタミン酸病、筋萎縮性側索硬化症、多発ニューロパチー、脊髄損傷、脳血管障害などがあげられる。これら神経変性疾患の一般的治療法は、ニューロンの傷害により失われた神経伝達物質を補充する療法であるが、該療法で症状が改善するのはパーキンソン病、アルツハイマー病などに限定される。また神経伝達物質補充療法では神経細胞死の進行を止めることはできない。
中枢神経系を再生する再生医療は、パーキンソン病で失われたドーパミン作動性ニューロンの機能を積極的に回復させる治療法として検討が進められてきたが、中絶胎児脳を用いる方法であることから様々な問題があり一般的な利用としては応用されていない。
また、胎児脳から取得した神経幹細胞やヒト受精卵から取得したＥＳ細胞を生体外で大量培養した後、目的のニューロンへ変換して移植に用いるという治療法も検討されているが、目的とするニューロンへ正確に分化させる技術は確立されておらず、また胎児由来の神経幹細胞やヒトＥＳ細胞を用いる方法であることに起因する問題もあり、臨床応用は進んでいない。
一方、成体脳から神経幹細胞が分離され、ヒト成体脳でも生涯にわたりニューロンの新生が起こることが報告されたことから、患者の脳内に内在する神経幹細胞を薬剤などで刺激して再生を誘導して神経変性疾患を治療する方法が検討されている。
インスリン様増殖因子−１［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２０，２８９６−２９０３（２０００）］、線維芽細胞増殖因子−２［Ｐｒｏ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９８，５８７４−５８７９（２００１）］、ステムセルファクター［Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１１０，３１１−３１９（２００２）］、エリスロポエチン［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２１，９７３３−９７４３（２００１）］、全脳虚血［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１８，７７６８−７７７８（１９９８）］、てんかん刺激［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２２，３１７４−３１８８（２００２）］などサイトカインの脳内投与や疾患モデルにより海馬や嗅球でのニューロン新生が促進されることが報告されている。また、腫瘍増殖因子−αの脳内投与により線条体でドーパミン作動性ニューロンが新生し、パーキンソン病の症状が改善することも報告されている［Ｐｒｏ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９７，１４６８６−１４６９１（２０００）］。さらに、海馬への虚血傷害により失われたＣＡ１錘体細胞が虚血後２日目から５日目にかけて脳内に線維芽細胞増殖因子−２と上皮細胞増殖因子を投与することにより、その４０％が完全に回復することも報告されている［Ｃｅｌｌ，１１０，４２９−４４１（２００２）］。
しかし、上記の方法は、いずれも蛋白性の因子を脳内に投与することが必要であり、一般的な医療へと応用することは困難である。
末梢投与可能な低分子化合物によりニューロン新生を惹起できるものとしては、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、セロトニン特異的なトランスポーター阻害剤、フォスフォジエステラーゼＩＶ阻害剤などの抗鬱薬が報告されている［Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２５，８３６−８４４（２００１）］。これらの薬剤が脳内で神経再生を誘導するメカニズムとしては、セロトニン作動性ニューロンのセロトニン受容体シグナルに直接的または間接的に作用して、神経栄養因子を生産し、セロトニン作動性ニューロン周囲のニューロン新生を促進していることが考えられている。したがって、これらの薬剤はセロトニン作動性ニューロンの変性とは関係しない大部分の神経疾患においては、神経再生薬として利用することはできないと考えられる。
また、気分安定化薬のリチウムが細胞死抑制遺伝子ｂｃｌ−２の発現を誘導することにより海馬で恒常的に新生している新生ニューロンをニューロン死から保護し、海馬でのニューロン新生を見かけ上増加させることが報告されてい［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７５，１７２９−１７３４（２０００）］。またリチウムは神経栄養因子ＢＤＮＦの発現を誘導することも報告されている［Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，４３，１１７３−１１７９（２００２）］。しかしながら、リチウムが直接、神経幹細胞に働きかけ、ニューロン分化を促進することによりニューロン新生を促進させることについては報告されておらず、またリチウムの海馬以外でのニューロン新生促進活性についても報告されていない。また、リチウムが何故、神経変性を伴わないうつ病および躁鬱病に対し治療効果があるのかについても知られていない。
アルツハイマー病では、グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（以下、ＧＳＫ−３と略す）が、微小管関連蛋白質であるタウ蛋白質を過剰にリン酸化することで神経原繊維変化を形成し、神経細胞死を誘導するという仮説が提唱されている［Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，８，１２６−１３２（２００２）］。またＧＳＫ−３の活性を阻害する物質は、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて成熟した神経細胞を保護する活性があると報告されている［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７７，９４−１０２（２００１）］。該報告に基づき、ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質は、アルツハイマー病をはじめ様々な神経変性疾患の治療薬として用いることができると考えられている（国際公開第００／３８６７５号パンフレット）が、成熟したニューロンを保護することで実際に神経変性疾患を治療することができるか否か、およびＧＳＫ−３の活性を阻害する物質にニューロン新生促進作用があることは知られていない。
本発明の目的は、ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質を有効成分として含有してなる神経再生薬、該物質を有効成分として含有してなる神経幹細胞のニューロン新生促進剤、該ニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養して得られるニューロンおよび該ニューロンの製造方法を提供することにある。
本発明は以下の（１）〜（４１）に関する。
（１） グリコーゲンシンターゼキナーゼー３（以下、ＧＳＫ−３と略す）の活性を阻害する物質を有効成分として含有してなる神経再生薬。
（２） 神経再生薬が、神経疾患の治療薬である上記（１）の医薬。
（３） 神経疾患が、パーキンソン病、アルツハイマー病、ダウン症、脳血管障害、脳卒中、脊髄損傷、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん、不安障害、統合失調症、うつ病および躁鬱病からなる群より選ばれる神経疾患である上記（２）の医薬。
（４） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、リチウムまたはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（５） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、ビスインドリルマレイミド誘導体、３−アリール−４−インドリルマレイミド誘導体、インドロカルバゾール誘導体、インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン誘導体もしくはインジルビン誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（６） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（Ｉ）
Figure 2004091663
［式中、ｎおよびｍは同一または異なって、１〜３の整数を表し、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、−ＣＯＲ６（式中、Ｒ６は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）、−ＣＯＯＲ７（式中、Ｒ７は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）または−ＯＲ８（式中、Ｒ８は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）を表し、Ｒ２およびＲ５は同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシカルボニル、置換もしくは非置換のアリール、カルボキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、アミノまたはモノもしくはジ低級アルキルアミノを表し、ｎおよびｍがそれぞれ２または３であるとき、それぞれのＲ２およびＲ５は同一でも異なっていてもよい］で表される化合物、式（ＩＩ）
Figure 2004091663
（式中、ｎａ、ｍａ、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３ＡおよびＲ５Ａは、それぞれ前記ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５と同義である）で表される化合物もしくは式（ＩＩＩ）
Figure 2004091663
［式中、ｎｂ、ｍｂ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２ＢおよびＲ５Ｂは、それぞれ前記ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５と同義であり、Ｒ３ＢおよびＲ４Ｂは同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、−ＣＯＲ６（式中、Ｒ６は前記と同義である）、−ＣＯＯＲ７（式中、Ｒ７は前記と同義である）または−ＯＲ８（式中、Ｒ８は前記と同義である）を表すか、またはＲ３ＢとＲ４Ｂが一緒になって、
Figure 2004091663
（式中、ｋは１または２を表し、ＸはＣＨ２、ＮＨ、酸素原子または硫黄原子を表し、Ｒ９はヒドロキシ、カルボキシ、カルバモイルまたは低級アルコキシカルボニルを表す）を形成する］で表される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（７） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（Ｉａ）
Figure 2004091663
（式中、Ｒ２ａは水素原子、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、アリールまたはニトロを表し、Ｒ３ａおよびＲ４ａは同一または異なって、置換もしくは非置換の低級アルキルを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（８） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（ＩＩａ）
Figure 2004091663
（式中、ｍａは前記と同義であり、Ｒ３Ａａは置換もしくは非置換の低級アルキルを表し、Ｒ５Ａａはハロゲンを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（９） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（ＩＩＩａ）
Figure 2004091663
（式中、Ｒ９は前記と同義である）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１０） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、３，４−ビス（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−（１−プロピルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−シアノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルボキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルバモイルプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−プロピルオキシインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−メトキシカルボニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−ニトロインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）−５−ニトロインドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２，４−ジクロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、４−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−３−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンおよび
Figure 2004091663
からなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１１） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、式（ＩＶ）
Figure 2004091663
［式中、Ａは単結合または二重結合によって右に結合されている酸素または硫黄であり、Ｒ１０は水素原子、アリール、低級脂肪族置換基、特にアルキルおよび低級アルキルエステルからなる群より選択され、Ｒ１１〜Ｒ１４はアルコキシ、アミノ、アシル、脂肪族置換基、特にアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、脂肪族ニトリル、特にアルキルニトリル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、ハロゲン、水素原子、ヒドロキシル、イミノならびにα、β不飽和ケトンからなる群より個別に選択され、Ｒ１５〜Ｒ１８は脂肪族置換基、特にアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基、特に低級脂肪族置換基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、アルコキシ、アシル、シアノ、ニトロ、エポキシ、ハロアルキル基、ハロゲン、水素原子ならびにヒドロキシルからなる群より個別に選択され、Ｒ１９は脂肪族の基、特に低級アルキル基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、カルボン酸、および水素からなる群より選択される］で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１２） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、９−ブロモ−５，１２−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７，１２−トリ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、５−ベンジル−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（メチルイミノアミン）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（カルボン酸）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１０−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１１−ヒドロキシメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）プロピオニトリル、２−ブロモ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリロニトリル、２−（３−ヒドロキシ−１−プロピニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−（３−オキソ−１−ブテニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、２−ヨード−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−ピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−［２−（１−ヒドロキシシクロヘキシル）エチニル］−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−メチル−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オンおよび３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリル酸メチルエステルからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１３） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンおよび７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１４） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オンおよび７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１５） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンまたはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１６） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、式（Ｖ）
Figure 2004091663
［式中、同じか異なってよいＲ２０およびＲ２５は水素原子；ハロゲン；ヒドロキシ基；メチレンヒドロキシ基；直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキルまたはアルコキシまたはメチレンアルコキシ基；必要に応じて１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個−炭素原子を有するシクロアルキル基；必要に応じて１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換のアリール、アラルキルまたはアリールオキシ基；それぞれ互いに独立に、直鎖または分枝鎖のアルキル基中に１から６個の炭素原子を有するモノ−、ジ−またはトリアルキルシリル基；それぞれ互いに独立に置換または非置換アリール基を有するモノ−、ジ−またはトリアリールシリル基；トリフルオロメチル基；−ＣＯＭ；−ＣＯＯＭ；あるいは−ＣＨ２ＣＯＯＭ基（ここでＭは水素原子、必要ならばヒドロキシおよび／またはアミノ基１個または複数で置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキル基、または必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有し、１個または複数のハロゲン、アルキル基またはアルコキシ基で置換されていてよいアリール基を表す）；−ＮＲ３０Ｒ３１基（ここで同じか異なってよいＲ３０およびＲ３１は水素原子、必要ならば付加的に１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ１８直鎖または分枝鎖アルキル基、置換または非置換で、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含むアリール基を表す）；アシル基；−ＣＨ２−ＮＲ３０Ｒ３１メチレンアミノ基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；ベンゼン環が必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有するベンジル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する、炭素原子３から７個を有するメチレンシクロアルキル基；アミドとしての、窒素原子に結合した生理的アミノ酸基；グリコシドが単糖または二糖から選択されるＯ−グリコシドまたはＮ−グリコシド；あるいはメチレンスルホネート基を表し；同じか異なってよいＲ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８およびＲ２９は水素原子；ハロゲン；ヒドロキシ基；ニトロソ基；ニトロ基；アルコキシ基；必要ならば１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されている直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８アルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換のアリール基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換アラルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換アリールオキシ基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換メチレンアリールオキシ基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個の炭素原子を有するシクロアルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個の炭素原子を有するメチレンシクロアルキル基；トリフルオロメチル基；−ＣＯＭ；−ＣＯＯＭ；またはＣＨ２ＣＯＯＭ基（ここでＭは水素原子、必要ならばヒドロキシおよび／またはアミノ基１個または複数で付加的に置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキル基、または必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有し、１個または複数のハロゲン原子、アルキル基またはアルコキシ基で置換されていてよいアリール基を表す）；−ＮＲ３０Ｒ３１基（ここで同じか異なってよいＲ３０およびＲ３１は水素原子、必要ならば付加的に１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１８アルキル基、置換または非置換で、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含むアリール基、アシル基を表すか、窒素原子が、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、炭素原子３から７個を有するシクロアルキルの一部を形成する）；−ＣＯＮＲ３０Ｒ３１基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；ヒドロキシルアミノ基；ホスフェート基；ホスホネート基；スルフェート基；スルホネート基；スルホンアミド基；−ＳＯ２ＮＲ３０Ｒ３１基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；−Ｎ＝Ｎ−Ｒ３２アゾ基（ここでＲ３２は必要ならば１個または複数のカルボキシル、ホスホリルまたはスルホネート基で置換された芳香族基あるいはグリコシドが単糖または二糖から選択されているＯ−グリコシドまたはＮ−グリコシド基を表す）を表すか；Ｒ２０およびＲ２４ならびにＲ２５およびＲ２９はそれぞれ一緒になって、互いに独立に必要ならば置換された１から４個のＣＨ２基を有する環を形成し；同じか異なってよいＹおよびＺは酸素；イオウ；セレン；テルルの原子；ＮＲ３３基（ここでＲ３３は水素原子、必要ならば１個または複数のカルボキシル、ホスホリルまたはスルホネート基で置換された直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１８アルキル基、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む置換または非置換のアリール基、アラルキル基またはスルホネート基を表す）；あるいは−ＮＯＲ３３（ここでＲ３３基は前記の意味を有する）を表す］で表される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１７） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン、５−ヨード−インジルビン、５−ブロモ−インジルビン、５−クロロ−インジルビン、５−フルオロ−インジルビン、５−メチル−インジルビン、５−ニトロ−インジルビン、５−ＳＯ３Ｈ−インジルビン、５’−ブロモ−インジルビン、５−５’−ジブロモ−インジルビンおよび５’−ブロモ−インジルビン５−スルホン酸からなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１８） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン−３’−モノオキシム、５−ヨード−インジルビン−３’−モノオキシムおよび５−ＳＯ３Ｎａ−インジルビン−３’−モノオキシムからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（１９） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン−３’−モノオキシムまたはその薬理学的に許容される塩である上記（１）〜（３）のいずれか１つの医薬。
（２０） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質を有効成分として含有してなる神経幹細胞のニューロン新生促進剤。
（２１） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、リチウムまたはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（２２） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、ビスインドリルマレイミド誘導体、３−アリール−４−インドリルマレイミド誘導体、インドロカルバゾール誘導体、インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン誘導体もしくはインジルビン誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（２３） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（Ｉ）
Figure 2004091663
［式中、ｎおよびｍは同一または異なって、１〜３の整数を表し、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、−ＣＯＲ６（式中、Ｒ６は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）、−ＣＯＯＲ７（式中、Ｒ７は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）または−ＯＲ８（式中、Ｒ８は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）を表し、Ｒ２およびＲ５は同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシカルボニル、置換もしくは非置換のアリール、カルボキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、アミノまたはモノもしくはジ低級アルキルアミノを表し、ｎおよびｍがそれぞれ２または３であるとき、それぞれのＲ２およびＲ５は同一でも異なっていてもよい］で表される化合物、式（ＩＩ）
Figure 2004091663
（式中、ｎａ、ｍａ、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３ＡおよびＲ５Ａは、それぞれ前記ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５と同義である）で表される化合物もしくは式（ＩＩＩ）
Figure 2004091663
［式中、ｎｂ、ｍｂ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２ＢおよびＲ５Ｂは、それぞれ前記ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５と同義であり、Ｒ３ＢおよびＲ４Ｂは同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、−ＣＯＲ６（式中、Ｒ６は前記と同義である）、−ＣＯＯＲ７（式中、Ｒ７は前記と同義である）または−ＯＲ８（式中、Ｒ８は前記と同義である）を表すか、またはＲ３ＢとＲ４Ｂが一緒になって、
Figure 2004091663
（式中、ｋは１または２を表し、ＸはＣＨ２、ＮＨ、酸素原子または硫黄原子を表し、Ｒ９はヒドロキシ、カルボキシ、カルバモイルまたは低級アルコキシカルボニルを表す）を形成する］で表される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（２４） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（Ｉａ）
Figure 2004091663
（式中、Ｒ２ａは水素原子、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、アリールまたはニトロを表し、Ｒ３ａおよびＲ４ａは同一または異なって、置換もしくは非置換の低級アルキルを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（２５） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（ＩＩａ）
Figure 2004091663
（式中、ｍａは前記と同義であり、Ｒ３Ａａは置換もしくは非置換の低級アルキルを表し、Ｒ５Ａａはハロゲンを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（２６） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（ＩＩＩａ）
Figure 2004091663
（式中、Ｒ９は前記と同義である）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（２７） ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、３，４−ビス（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−（１−プロピルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−シアノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルボキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルバモイルプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−プロピルオキシインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−メトキシカルボニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−ニトロインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）−５−ニトロインドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２，４−ジクロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、４−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−３−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンおよび
Figure 2004091663
からなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（２８） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、式（ＩＶ）
Figure 2004091663
［式中、Ａは単結合または二重結合によって右に結合されている酸素または硫黄であり、Ｒ１０は水素原子、アリール、低級脂肪族置換基、特にアルキルおよび低級アルキルエステルからなる群より選択され、Ｒ１１〜Ｒ１４はアルコキシ、アミノ、アシル、脂肪族置換基、特にアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、脂肪族ニトリル、特にアルキルニトリル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、ハロゲン、水素原子、ヒドロキシル、イミノならびにα、β不飽和ケトンからなる群より個別に選択され、Ｒ１５〜Ｒ１８は脂肪族置換基、特にアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基、特に低級脂肪族置換基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、アルコキシ、アシル、シアノ、ニトロ、エポキシ、ハロアルキル基、ハロゲン、水素原子ならびにヒドロキシルからなる群より個別に選択され、Ｒ１９は脂肪族の基、特に低級アルキル基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、カルボン酸、および水素からなる群より選択される］で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（２９） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、９−ブロモ−５，１２−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７，１２−トリ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、５−ベンジル−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（メチルイミノアミン）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（カルボン酸）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１０−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１１−ヒドロキシメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）プロピオニトリル、２−ブロモ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリロニトリル、２−（３−ヒドロキシ−１−プロピニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−（３−オキソ−１−ブテニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、２−ヨード−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−ピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−［２−（１−ヒドロキシシクロヘキシル）エチニル］−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−メチル−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オンおよび３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリル酸メチルエステルからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（３０） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンおよび７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（３１） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オンおよび７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（３２） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンまたはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（３３） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、式（Ｖ）
Figure 2004091663
［式中、同じか異なってよいＲ２０およびＲ２５は水素原子；ハロゲン；ヒドロキシ基；メチレンヒドロキシ基；直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキルまたはアルコキシまたはメチレンアルコキシ基；必要に応じて１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個−炭素原子を有するシクロアルキル基；必要に応じて１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換のアリール、アラルキルまたはアリールオキシ基；それぞれ互いに独立に、直鎖または分枝鎖のアルキル基中に１から６個の炭素原子を有するモノ−、ジ−またはトリアルキルシリル基；それぞれ互いに独立に置換または非置換アリール基を有するモノ−、ジ−またはトリアリールシリル基；トリフルオロメチル基；−ＣＯＭ；−ＣＯＯＭ；あるいは−ＣＨ２ＣＯＯＭ基（ここでＭは水素原子、必要ならばヒドロキシおよび／またはアミノ基１個または複数で置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキル基、または必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有し、１個または複数のハロゲン、アルキル基またはアルコキシ基で置換されていてよいアリール基を表す）；−ＮＲ３０Ｒ３１基（ここで同じか異なってよいＲ３０およびＲ３１は水素原子、必要ならば付加的に１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ１８直鎖または分枝鎖アルキル基、置換または非置換で、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含むアリール基を表す）；アシル基；−ＣＨ２−ＮＲ３０Ｒ３１メチレンアミノ基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；ベンゼン環が必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有するベンジル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する、炭素原子３から７個を有するメチレンシクロアルキル基；アミドとしての、窒素原子に結合した生理的アミノ酸基；グリコシドが単糖または二糖から選択されるＯ−グリコシドまたはＮ−グリコシド；あるいはメチレンスルホネート基を表し；同じか異なってよいＲ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８およびＲ２９は水素原子；ハロゲン；ヒドロキシ基；ニトロソ基；ニトロ基；アルコキシ基；必要ならば１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されている直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８アルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換のアリール基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換アラルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換アリールオキシ基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換メチレンアリールオキシ基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個の炭素原子を有するシクロアルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個の炭素原子を有するメチレンシクロアルキル基；トリフルオロメチル基；−ＣＯＭ；−ＣＯＯＭ；またはＣＨ２ＣＯＯＭ基（ここでＭは水素原子、必要ならばヒドロキシおよび／またはアミノ基１個または複数で付加的に置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキル基、または必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有し、１個または複数のハロゲン原子、アルキル基またはアルコキシ基で置換されていてよいアリール基を表す）；−ＮＲ３０Ｒ３１基（ここで同じか異なってよいＲ３０およびＲ３１は水素原子、必要ならば付加的に１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１８アルキル基、置換または非置換で、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含むアリール基、アシル基を表すか、窒素原子が、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、炭素原子３から７個を有するシクロアルキルの一部を形成する）；−ＣＯＮＲ３０Ｒ３１基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；ヒドロキシルアミノ基；ホスフェート基；ホスホネート基；スルフェート基；スルホネート基；スルホンアミド基；−ＳＯ２ＮＲ３０Ｒ３１基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；−Ｎ＝Ｎ−Ｒ３２アゾ基（ここでＲ３２は必要ならば１個または複数のカルボキシル、ホスホリルまたはスルホネート基で置換された芳香族基あるいはグリコシドが単糖または二糖から選択されているＯ−グリコシドまたはＮ−グリコシド基を表す）を表すか；Ｒ２０およびＲ２４ならびにＲ２５およびＲ２９はそれぞれ一緒になって、互いに独立に必要ならば置換された１から４個のＣＨ２基を有する環を形成し；同じか異なってよいＹおよびＺは酸素；イオウ；セレン；テルルの原子；ＮＲ３３基（ここでＲ３３は水素原子、必要ならば１個または複数のカルボキシル、ホスホリルまたはスルホネート基で置換された直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１８アルキル基、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む置換または非置換のアリール基、アラルキル基またはスルホネート基を表す）；あるいは−ＮＯＲ３３（ここでＲ３３基は前記の意味を有する）を表す］で表される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（３４） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン、５−ヨード−インジルビン、５−ブロモ−インジルビン、５−クロロ−インジルビン、５−フルオロ−インジルビン、５−メチル−インジルビン、５−ニトロ−インジルビン、５−ＳＯ３Ｈ−インジルビン、５’−ブロモ−インジルビン、５−５’−ジブロモ−インジルビンおよび５’−ブロモ−インジルビン５−スルホン酸からなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（３５） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン−３’−モノオキシム、５−ヨード−インジルビン−３’−モノオキシムおよび５−ＳＯ３Ｎａ−インジルビン−３’−モノオキシムからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（３６） ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン−３’−モノオキシムまたはその薬理学的に許容される塩である上記（２０）のニューロン新生促進剤。
（３７） 上記（２０）〜（３６）のいずれか１つのニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養して得られるニューロン。
（３８） 上記（２０）〜（３６）のいずれか１つのニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養してニューロンを新生させ、培養物中よりニューロンを採取することを特徴とするニューロンの製造方法。
（３９） ＧＳＫ−３を阻害する物質を投与することを特徴とする神経再生方法。
（４０） 神経再生薬の製造のためのＧＳＫ−３を阻害する物質の使用。
（４１） 神経幹細胞のニューロン新生促進剤の製造のためのＧＳＫ−３を阻害する物質の使用。
以下、本発明の詳細を説明する。
１．本発明の神経再生薬および神経幹細胞のニューロン新生促進剤に含有されるＧＳＫ−３の活性を阻害する物質
ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質としては、ＧＳＫ−３の活性を阻害する化合物であればいずれでもよいが、例えばリチウム、ビスインドリルマレイミド誘導体、３−アリール−４−インドリルマレイミド誘導体、インドロカルバゾール誘導体、インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン誘導体、インジルビン誘導体等があげられる。
ビスインドリルマレイミド誘導体、３−アリール−４−インドリルマレイミド誘導体、インドロカルバゾール誘導体としては、具体的には、例えば式（Ｉ）〜（ＩＩＩ）で表される化合物があげられる。中でも３，４−ビス（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−（１−プロピルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−シアノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルボキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルバモイルプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−プロピルオキシインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−メトキシカルボニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−ニトロインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）−５−ニトロインドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２，４−ジクロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンおよび
Figure 2004091663
等が好ましい。
インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン誘導体としては、具体的には、例えば式（ＩＶ）で表される化合物があげられる。中でも７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’２’：２，３アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、９−ブロモ−５，１２−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７，１２−トリ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、５−ベンジル−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（メチルイミノアミン）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（カルボン酸）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１０−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１１−ヒドロキシメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）プロピオニトリル、２−ブロモ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリロニトリル、２−（３−ヒドロキシ−１−プロピニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−（３−オキソ−１−ブテニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、２−ヨード−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−ピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−［２−（１−ヒドロキシシクロヘキシル）エチニル］−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−メチル−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オンおよび３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリル酸メチルエステル等が好ましい。
インジルビン誘導体としては、具体的には、例えば式（Ｖ）で表される化合物があげられる。中でもインジルビン、５−ヨード−インジルビン、５−ブロモ−インジルビン、５−クロロ−インジルビン、５−フルオロ−インジルビン、５−メチル−インジルビン、５−ニトロ−インジルビン、５−ＳＯ３Ｈ−インジルビン、５’−ブロモ−インジルビン、５−５’−ジブロモ−インジルビン、５’−ブロモ−インジルビン５−スルホン酸、インジルビン−３’−モノオキシム、５−ヨード−インジルビン−３’−モノオキシムおよび５−ＳＯ３Ｎａ−インジルビン−３’−モノオキシム等が好ましい。
以下、式（Ｉ）〜（Ｖ）で表される化合物をそれぞれ化合物（Ｉ）〜（Ｖ）という。他の式番号の化合物についても同様である。
化合物（Ｉ）〜（ＩＩＩ）および化合物（Ｉａ）〜（ＩＩＩａ）の各基の定義において、以下の例示があげられる。
（ｉ）低級アルキル、低級アルコキシおよび低級アルコキシカルボニルの低級アルキル部分としては、例えば直鎖または分岐状の炭素数１〜１０のアルキルがあげられ、具体的にはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、６−メチルヘプチル、イソオクチル、ノニル、デシル等があげられる。
（ｉｉ）シクロアルキルしては、例えば炭素数３〜８のシクロアルキルがあげられ、具体的にはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等があげられる。
（ｉｉｉ）低級アルケニルとしては、例えば直鎖、分岐または環状の炭素数２〜８のアルケニルがあげられ、具体的にはビニル、アリル、１−プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、シクロヘキセニル、２，６−オクタジエニル等があげられる。
（ｉｖ）モノもしくはジ低級アルキルアミノの低級アルキル部分は、前記低級アルキルと同義であり、ジ低級アルキルアミノの２つの低級アルキル部分は、同一でも異なっていてもよい。
（ｖ）ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素の各原子を表す。
（ｖｉ）アリールとしては、例えば炭素数６〜１４の単環式、二環式または三環式のアリールがあげられ、具体的にはフェニル、ナフチル、インデニル、アントラニル等があげられる。
（ｖｉｉ）置換低級アルキル、置換低級アルケニル、置換低級アルコキシおよび置換低級アルコキシカルボニルにおける置換基としては、同一または異なって、例えば置換数１〜３の、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシ、カルバモイル、アミノ、モノまたはジ低級アルキルアミノ、シクロアルキル、低級アルカノイル、低級アルコキシ、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノイルオキシ等があげられる。
ここで示したハロゲン、モノもしくはジ低級アルキルアミノ、シクロアルキル、アリールおよびアリールオキシのアリール部分、ならびに低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノイルおよび低級アルカノイルオキシの低級アルキル部分は、それぞれ前記ハロゲン（ｖ）、モノまたはジ低級アルキルアミノ（ｉｖ）、シクロアルキル（ｉｉ）、アリール（ｖｉ）および低級アルキル（ｉ）と同義である。
また、ここで示した置換アリールおよび置換アリールオキシにおける置換基としては、同一または異なって、例えば置換数１〜３の、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ等があげられる。
ここで示したハロゲンならびに低級アルキル、低級アルコキシおよび低級アルコキシカルボニルの低級アルキル部分は、それぞれ前記ハロゲン（ｖ）および低級アルキル（ｉ）と同義である。
（ｖｉｉｉ）置換アリールおよび置換シクロアルキルにおける置換基としては、前記置換低級アルキルにおける置換基（ｖｉｉ）の定義であげた基に加え、例えば低級アルキル、置換低級アルキル等があげられる。
ここで示した置換低級アルキルにおける置換基としては、同一または異なって、例えば置換数１〜３の、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ等があげられる。
ここで示したハロゲンならびに低級アルコキシおよび低級アルコキシカルボニルの低級アルキル部分は、それぞれ前記ハロゲン（ｖ）および低級アルキル（ｉ）と同義である。
また、ここで示した低級アルキルは、前記低級アルキル（ｉ）と同義である。
ビスインドリルマレイミド誘導体、３−アリール−４−インドリルマレイミド誘導体、インドロカルバゾール誘導体、インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン誘導体、インジルビン誘導体、化合物（Ｉ）〜（Ｖ）および化合物（Ｉａ）〜（ＩＩＩａ）の薬理学的に許容される塩としては、毒性のない水溶性のものが好ましく、例えば塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩などの有機酸塩があげられ、薬理学的に許容される金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、亜鉛塩などがあげられ、薬理学的に許容されるアンモニウム塩としては、アンモニウム、テトラメチルアンモニウムなどの塩があげられ、薬理学的に許容される有機アミン付加塩としては、モルホリン、ピペリジンなどの付加塩等があげられる。
ビスインドリルマレイミド誘導体、３−アリール−４−インドリルマレイミド誘導体、インドロカルバゾール誘導体、インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン誘導体、インジルビン誘導体、化合物（Ｉ）〜（Ｖ）および化合物（Ｉａ）〜（ＩＩＩａ）は、ＥＰ４７０４９０、ＷＯ９３／１８７６６、ＷＯ９３／１８７６５、ＥＰ３９７０６０、ＷＯ９８／１１１０５、ＷＯ９８／１１１０３、ＷＯ９８／１１１０２、ＷＯ９８／０４５５２、ＷＯ９８／０４５５１、ＤＥ４２４３３２１、ＤＥ４００５９７０、ＤＥ４２１７９６４、ＤＥ４００５９７０、ＤＥ３９１４７６４、ＷＯ９６／０４９０６、ＷＯ９５／０７９１０、ＤＥ４２１７９４６４、ＵＳ５８５６５１７、ＵＳ５８９１９０１、ＷＯ９９／４２１００、ＥＰ３２８０２６、ＥＰ３８４３４９、ＥＰ５４０９５６、ＤＥ４００５９６９、ＥＰ５０８７９２、ＷＯ９９／６５９１０、ＷＯ０１／０３７８１９等に記載の方法またはそれらに準じた方法により製造することができる。
また、ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質として、ｓｈｏｒｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を使用することもできる。ＧＳＫ−３に対するｓｉＲＮＡは、そのＲＮＡｉ活性によりＧＳＫ−３の発現を抑制し、その結果、ＧＳＫ−３の活性を阻害することができる。ｓｉＲＮＡは、そのもの自身を細胞内に導入することによってＧＳＫ−３の活性を阻害することができるほか、ｓｉＲＮＡを発現するベクターを細胞内に導入することによっても可能である。
ヒトＧＳＫ−３に対する効果的なｓｉＲＮＡを作製するためには、効果の高いターゲット配列を選択することが重要である。その配列を決定するアルゴリズムは様々な方法が知られているが、例えば、ヒトＧＳＫ−３のメッセンジャーＲＮＡ配列中の任意の１９配列の中で、グアニンまたはシトシンの含量が３０〜５２％であること、３’末端の５塩基のうち３塩基以上がアデニンまたはウリジンであること、融解温度が２０℃未満であること、３番目の塩基がアデニンであること、１０番目の塩基がウリジンであること、１３番目の塩基がグリシン以外であること、１９番目の塩基がアデニンであること、１９番目の塩基がグリシン及びシトシンでないことの各条件をより多く満たす配列を選択することにより効果の高いターゲット配列を選択することができる。そのターゲット配列のオリゴＲＮＡの３’末端に２塩基のヌクレオチドを付加したセンス鎖オリゴＲＮＡおよびそのターゲット配列に相補的な配列のオリゴＲＮＡの３’末端に２塩基のヌクレオチドを付加したアンチセンス鎖オリゴＲＮＡの両者をハイブリダイズさせることにより、ヒトＧＳＫ−１３に対する効果的なｓｉＲＮＡを作製することができる。ｓｉＲＮＡの合成、精製、ハイブリダイズは様々な方法により可能であるが、例えば、Ｓｉｌｅｎｃｅｒ ｓｉＲＮＡ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ Ｋｉｔ（Ａｍｂｉｏｎ社製）を用い、添付のプロトコールに従うことにより実施することができる。またｓｉＲＮＡを発現するベクターは、各種プラスミドベクターやレトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクターなどの各種ウイルスベクターによって可能であるが、例えば、ｐｉＧＥＮＥ ｈＵ６ Ｖｅｃｔｏｒ（ｉＧＥＮＥ社製）に上記の方法により選択したターゲット配列のオリゴＤＮＡを添付プロトコールに従って組み込むことにより作製することができる。ｓｉＲＮＡやｓｉＲＮＡを発現するベクターの細胞内への導入は様々な方法により可能であるが、例えばＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ Ｄｅｖｉｃｅ（Ａｍａｘａ社製）を用い添付のプロトコールに従うことにより実施することができる。
２．ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質の探索法
ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質の探索法は、［ｉ］被験物質の存在下、ＧＳＫ−３、ＧＳＫ−３によりリン酸化されるペプチドおよびＡＴＰを共存させた場合と、［ｉｉ］被験物質の非存在下、上記［ｉ］のＧＳＫ−３、ＧＳＫ−３によりリン酸化されるペプチドおよびＡＴＰを共存させた場合での、［ｉｉｉ］リン酸化されているペプチドの量を測定、比較し、［ｉｖ］被験物質の非存在下に比べ、被験物質の存在下におけるリン酸化されているペプチドの量が少ない物質を選択する方法をあげることができる。
被験物質は、特に限定されないが、例えば、ペプチド、蛋白質、細胞抽出液や該抽出液由来の精製物、細胞培養上清や該上清由来の精製物、血清などの生体試料や該生体試料由来の精製物、微生物の菌体抽出液や該抽出液由来の精製物、微生物培養上清や該上清由来の精製物、化合物、コンビナトリアルケミストリーを用いて合成された化合物などをあげることができる。
ＧＳＫ−３としては、ＧＳＫ−３の活性を有するものであれば特に限定されないが、好ましくはほ乳類、より好ましくはラット、マウス、サルまたはヒト由来のＧＳＫ−３αまたはβをあげることができ、具体的には配列番号１で表されるアミノ酸配列を有する蛋白質をあげることができる。
ＧＳＫ−３は、ＧＳＫ−３をコードする遺伝子を有する発現ベクターを動物細胞に導入し、該動物細胞を培養する方法などにより取得することができる。ＧＳＫ−３をコードする遺伝子は、ＧＳＫ−３をコードする遺伝子であれば特に限定されないが、好ましくはほ乳類、より好ましくはラット、マウス、サルまたはヒト由来のＧＳＫ−３αまたはβをコードする遺伝子をあげることができ、具体的には配列番号２で表される塩基配列を有する遺伝子をあげることができる。
ＧＳＫ−３によりリン酸化されるペプチドとしては、グリコーゲン合成酵素をあげることができ、グリコーゲン合成酵素としては、例えば配列番号３で表されるアミノ酸配列を有するペプチドをあげることができる。
グリコーゲン合成酵素は、グリコーゲン合成酵素をコードする遺伝子を有する発現ベクターを動物細胞に導入し、該動物細胞を培養する方法などにより取得することができる。グリコーゲン合成酵素をコードする遺伝子は、グリコーゲン合成酵素をコードする遺伝子であれは特に限定されないが、好ましくはほ乳類、より好ましくはラット、マウス、サルまたはヒト由来のグリコーゲン合成酵素をコードする遺伝子をあげることができ、具体的には配列番号４で表される塩基配列を有する遺伝子をあげることができる。
また、蛋白質の翻訳に関与するｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ２Ｂ（ｅＩＦ２Ｂ）蛋白質のアミノ酸配列中で、ＧＳＫ−３によりリン酸化される部位を含むアミノ酸配列を有するペプチドもＧＳＫ−３によりリン酸化されるペプチドとして用いることができ、具体的には配列番号５で表されるアミノ酸配列を有するペプチドをあげることができる。
ＧＳＫ−３の活性を測定する方法としては、例えばリン酸の供与体であるＡＴＰとして［γ−３３Ｐ］ＡＴＰを用い、被験物質存在下、または被験物質非存在下において、ＧＳＫ−３によるグリコーゲン合成酵素または該酵素のリン酸化部位を含むペプチドのリン酸化反応を行い、該酵素またはペプチドに取り込まれた３３Ｐの量を液体シンチレーションカウンターなどを用いて測定する方法をあげることができる。
３．神経再生薬
神経再生薬とは、ヒトまたは動物の脳内の神経幹細胞に直接作用することでニューロン新生を促進し、脳内のニューロンを増加させる作用を有する薬剤をいう。
該神経再生薬は、神経の変性または損傷を伴う神経疾患の治療薬として用いることができる。
該神経疾患としては、パーキンソン病、アルツハイマー病、ダウン症、脳血管障害、脳卒中、脊髄損傷、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん、不安障害、統合失調症、うつ病および躁鬱病などをあげることができる。
ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質またはその薬理学的に許容される塩は、神経再生薬として、そのまま単独で投与することも可能であるが、通常各種の医薬製剤として提供するのが望ましい。また、それら医薬製剤は、動物および人に使用されるものである。
本発明の神経再生薬は、活性成分としてＧＳＫ−３の活性を阻害する物質またはその薬理学的に許容される塩を単独で、または任意の他の治療のための有効成分との混合物として含有することができる。また、それら医薬製剤は、活性成分を薬理学的に許容される一種またはそれ以上の担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造される。
投与経路は、治療に際し最も効果的なものを使用するのが望ましく、経口または、例えば静脈内などの非経口をあげることができる。
投与形態としては、錠剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤、注射剤などがある。
経口投与に適当な、例えばシロップ剤のような液体調製物は、水、蔗糖、ソルビット、果糖などの糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールなどのグリコール類、ごま油、オリーブ油、大豆油などの油類、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類などの防腐剤、ストロベリーフレーバー、ペパーミントなどのフレーバー類などを使用して製造できる。また、錠剤、散剤および顆粒剤などは、乳糖、ブドウ糖、蔗糖、マンニットなどの賦形剤、澱粉、アルギン酸ソーダなどの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどの滑沢剤、ポリビニールアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、ゼラチンなどの結合剤、脂肪酸エステルなどの界面活性剤、グリセリンなどの可塑剤などを用いて製造できる。
非経口投与に適当な製剤は、好ましくは受容者の血液と等張である活性化合物を含む滅菌水性剤からなる。例えば、注射剤の場合は、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩水とブドウ糖溶液の混合物からなる担体などを用いて注射用の溶液を調製する。
また、これら非経口剤においても、経口剤で例示した希釈剤、防腐剤、フレーバー類、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤などから選択される１種もしくはそれ以上の補助成分を添加することもできる。
ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質またはその薬理学的に許容される塩の投与量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質または重篤度により異なるが、通常経口の場合、成人一人当り０．０１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは０．０５〜５０ｍｇを一日一回ないし数回投与する。静脈内投与などの非経口投与の場合、成人一人当り０．００１〜１００ｍｇ、好ましくは０．０１〜１０ｍｇを一日一回ないし数回投与する。
４．神経幹細胞のニューロン新生促進剤
神経幹細胞のニューロン新生促進剤とは、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて、神経幹細胞と接触させたとき、該神経幹細胞のニューロン新生を促進する薬剤のことをいう。
神経幹細胞は、神経幹細胞であれば特に限定されないが、脳の成体神経幹細胞が好ましい。
脳は、いずれの動物の脳であってもよいが、好ましくは哺乳動物、より好ましくはラット、マウス、サル、ヒトなどの脳をあげることができる。
ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質またはその薬理学的に許容される塩は、神経幹細胞のニューロン新生促進剤として、そのまま単独で用いることも可能であるが、通常各種の医薬製剤として提供するのが望ましい。また、それら医薬製剤は、動物および人に使用されるものである。
本発明の神経幹細胞のニューロン新生促進剤は、活性成分としてＧＳＫ−３の活性を阻害する物質またはその薬理学的に許容される塩を単独で、または任意の他の治療のための有効成分との混合物として含有することができる。それら医薬製剤は、上記した神経再生薬の製剤と同様の方法により製造することができ、同様の投与方法により投与することができる。
本発明の神経幹細胞のニューロン新生促進剤は、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて、神経幹細胞と接触させ、該神経細胞を培養することにより、ニューロンを新生させ、培養物から該ニューロンを採取することを特徴とするニューロンの製造法に用いることができる。ｉｎ ｖｉｔｒｏで本発明の神経幹細胞のニューロン新生促進剤を用いる場合、ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質またはその薬理学的に許容される塩を、該物質または該塩を溶解することができる溶液に溶解して用いることが好ましい。該溶液としては、水、ＤＭＳＯなどをあげることができる。
５．本発明のニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養して得られるニューロン
本発明のニューロン新生促進剤の存在下、動物の神経幹細胞を培養することにより、該神経幹細胞のニューロン新生を積極的に促進させることができる。動物の神経幹細胞は、いずれの動物の神経幹細胞であってもよく、好ましくは哺乳動物、より好ましくはラット、マウス、サル、ヒト由来の神経幹細胞をあげることができ、神経幹細胞としては、脳由来の神経幹細胞をあげることができる。神経幹細胞は、いずれの週齢、または年齢の動物由来の細胞でもよいが、好ましくは成体神経幹細胞をあげることができる。
動物から成体神経幹細胞を取得する方法としては、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｎｅｃｅ，１９，８４８７（１９９９）およびＧｅｎｅｓ ＆ Ｄｅｖｅｌｏｐ．，１０，３１２９（１９９６）記載の方法に準じて、外科的手法によって成体動物から脳を摘出して、脳細胞粗抽出液を調製し、該粗抽出液から成体幹細胞を濃縮する方法をあげることができる。
また、ヒトから成体神経幹細胞を取得する方法としては、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２８９，３７８（２００３）記載の方法に準じて、バイオプシーによって神経疾患患者の側脳室壁から組織を採取して、脳細胞粗抽出液を調製し、該抽出液から成体幹細胞を濃縮する方法をあげることができる。
本発明のニューロン新生促進剤存在下、成体神経幹細胞を培養する場合、１．８×１０５個／ｃｍ２程度の成体神経幹細胞に対して、該ニューロン新生促進剤を１００ｎｍｏｌ／ｌ〜１００μｍｏｌ／ｌの濃度で作用させることが好ましい。ただし、リチウムまたはその薬理学的に許容される塩は１００μｍｏｌ／ｌ〜１０ｍｍｏｌ／ｌの濃度で作用させることが好ましい。成体神経幹細胞と本発明のニューロン新生促進剤を接触させ、３７℃で５％ＣＯ２雰囲気下、４〜１４日間、２日おきに全量または部分量培地交換しながら静置培養することでニューロン新生を促進させることができる。
成体神経幹細胞の培養に用いる培地は、ニューロン新生の促進を妨げない培地であればいずれの培地でもよいが、１％のＮ２ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）などを用いるのが好ましい。
上記の培養により取得されるニューロンは、培地から回収し、神経疾患患者の障害部位へ外科的手法で移植することにより該神経疾患の治療に用いることができる。該神経疾患としては、パーキンソン病、アルツハイマー病、ダウン症、脳血管障害、脳卒中、脊髄損傷、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん、不安障害、統合失調症、うつ病および躁鬱病などをあげることができる。
６．本発明の神経再生薬の評価法
本発明の神経再生薬が、ｉｎ ｖｉｖｏにおいてニューロンを再生させ、神経疾患を治療することができることは、以下の方法により確認することができる。
上記した本発明の神経再生薬を、ラットまたはサルなどの実験動物に投与する。実験動物は、傷害を有していない健康な動物であってもよいが、海馬虚血傷害を与えることによりニューロン新生を効果的に観察することができるので［Ｃｅｌｌ，１１０，４２９（２００２）］、虚血、６−ｈｙｄｒｏｘｙｄｏｐａｍｉｎｅ（６−ＯＨＤＡ）投与またはカイニン酸投与等の方法により、脳に傷害を与えた動物が好ましい。投与経路としては、経口、口腔内、皮下、筋肉内、静脈内または脳室内などへの投与をあげることができる。投与量、投与方法としては、例えば体重１ｋｇ当り１００μｇ〜１０ｍｇ、好ましくは５００μｇ〜５００ｎｇを一日一回ないし数回投与する。静脈内投与などの非経口投与の場合、体重１ｋｇ当り１０μｇ〜１ｍｇ、好ましくは１００μｇ〜１００ｎｇを一日一回ないし数回投与する。
新生したニューロンは以下の方法により検出することができる。
増殖細胞を標識することができるブロモデオキシウリジン（ＢｒｄＵ）、またはＧｒｅｅｎ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＧＦＰ）やベータガラクトシダーゼ等の細胞標識可能な遺伝子を発現できるレトロウイルスベクターを該物質の最初の投与と同時、投与前または投与後に該実験動物に投与した後、該物質を一日一回ないし数回投与して１０〜２０日間飼育する。その後、該実験動物の脳を摘出し、脳の凍結切片を調製して蛍光顕微鏡を用いて観察し、例えば増殖細胞を標識する薬剤としてＢｒｄＵを用いた場合は、単位面積当たりのＢｒｄＵ陽性細胞数およびＢｒｄＵ陽性細胞数に対するニューロンマーカーであるＴｕｊ１陽性細胞数の割合を、陰性コントロールと比較する。
以上の方法により、本発明の神経再生薬のニューロン新生促進作用および神経疾患治療効果を評価することができる。
７．本発明のニューロン新生促進剤の評価法
参考例２記載の方法で取得できるＡＮＳＣ−７細胞を、１ｍｌの１％のＮ２ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）と２０ｎｇ／ｍｌのＦＧＦ−２（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ社製）を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地が入ったポリオルニチンおよびラミニンでコートした１２穴培養ディッシュに１穴当たり１．８×１０５個まき、一晩インキュベートする。培養液を、ＦＧＦ２を含まず０．５％の胎仔牛血清及び１％のＮ２ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔを含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製。以下、分化誘導培地と称する）に全量交換して分化を誘導する。その際、ＰＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）またはＤＭＳＯで０．０１ｍｍｏｌ／ｌ〜５ｍｏｌ／ｌの範囲で段階的に希釈したＧＳＫ−３の活性を阻害する物質をそれぞれ１０００分の１容量添加する。陰性コントロールとして同容量のＰＢＳまたはＤＭＳＯを添加する。
培養液を、それぞれのＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が入った分化誘導培地で２日おきに交換し、計６日間分化誘導後、１５％中性緩衝ホルマリン液（和光純薬工業）に置換し２０分間固定する。その後、０．３％ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００（ナカライテスク社製）を含むＰＢＳを用いた５分間の洗浄を３回繰り返す。次に、ＰＢＳで希釈した１０％ヤギ胎児血清（ＤＡＫＯ社製）を用いて細胞を２時間ブロッキングした後、１次抗体としてＰＢＳで１０００倍希釈したマウス抗Ｔｕｊ１（βチューブリンイソタイプＩＩＩ）抗体（シグマ アルドリッチ社製）を４℃で１６時間反応させる。その後、０．３％ ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含むＰＢＳを用いた５分間の洗浄を３回繰り返す。
次に、２次抗体として１０００倍希釈したＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ４８８コンジュゲートヤギ抗マウスＩｇＧ抗体（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社製）を室温で２時間反応さる。同時にＢｉｓｂｅｎｚｉｍｉｄｅ Ｈ ３３３４２ Ｆｌｕｏｒｏｃｈｒｏｍｅ，Ｔｒｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ社製、以下Ｈ３３３４２と記す）を終濃度１μｇ／ｍｌになるように添加し、核を染色する。ＰＢＳに浸したのち倒立型蛍光顕微鏡（ニコン社製）により観察し、２．４４平方ミリメートルあたりのＴｕｊ１陽性ニューロン数をカウントする。
以下、本発明のニューロン新生促進剤のニューロン新生促進作用に関する実験例を示す。
実験例１：塩化リチウムによるニューロン新生促進（１）
上記７の方法により、ＡＮＳＣ−７細胞の分化誘導時にＰＢＳで０．０１，０．１，１，３ｍｏｌ／ｌになるように溶解した塩化リチウムまたは塩化ナトリウム（いずれもナカライテスク社製）を培養液の１０００分の１容量、ＡＮＳＣ−７細胞を含有する培地に添加し、分化誘導後６日目のニューロン数を解析した。その結果、Ｔｕｊ１陽性のニューロン数は終濃度０．０１，０．１，１，３ｍｍｏｌ／ｌの塩化リチウムでそれぞれ１．１，１．３，１．８，２．１倍となり（塩化リチウム１ｍｍｏｌ／ｌ以上で有意差あり）、塩化リチウム濃度に依存して増加した。また３ｍｍｏｌ／ｌの塩化リチウムによるＨ３３３４２陽性の総細胞数は塩化リチウムなしのコントロールと比較して１．１倍で有意差がなかった。以上のことから、塩化リチウムはＡＮＳＣ−７細胞のニューロン新生促進作用を有することが明らかとなった。また、ネガティブコントロールである塩化ナトリウムではＴｕｊ１陽性のニューロン数は終濃度０．０１，０．１，１，３ｍｍｏｌ／ｌでそれぞれ１．０，１．１，１．２，１．２倍で全て有意差は無く、ニューロン新生数の増加は塩濃度や塩化物イオンによる効果ではなくリチウムの効果であると考えられる。
実験例２：塩化リチウムによるニューロン新生促進（２）
ＡＮＳＣ−７細胞に対するニューロン新生促進作用がＢＤＮＦおよびＢｃｌ−２の発現誘導によるものであるかどうかを明らかにするため、リチウムによりＢＤＮＦおよびＢｃｌ−２の発現が促進されるか否かを半定量的ＲＴ−ＰＣＲにより解析した。
ＡＮＳＣ−７細胞を、２ｍｌの１％のＮ２ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔと２０ｎｇ／ｍｌのＦＧＦ−２を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地が入ったポリオルニチンとラミニンでコートした６穴培養ディッシュに、１穴あたり４．５×１０５個になるように計７穴まき、一晩インキュベートした。１穴の細胞からＲＮｅａｓｙ ｍｉｎｉ ｋｉｔ（キアゲン社製）を用いて添付プロトコールに従って全ＲＮＡを取得した。残り６穴の培地を分化誘導培地に全量交換して分化を誘導した。そのうち２穴には３ｍｏｌ／ｌの塩化リチウムを培地の１０００分の１容量、別の２穴には１ｍｏｌ／ｌの塩化リチウムを培地の１０００分の１容量添加した。残り２穴には同容量のＰＢＳを添加しコントロールとした。
分化誘導開始から２４時間後、各濃度の塩化リチウムを添加した１穴ずつから細胞を採取し、該細胞から上記と同様の方法により全ＲＮＡを取得し、残りの細胞からは分化誘導開始から６日後に全ＲＮＡを取得した。上記で取得した各５μｇの全ＲＮＡに、１０μｌの５×ＤＮａｓｅ ｂｕｆｆｅｒ、０．５μｌのＲＮａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（４０Ｕ／μｌ）、２．５μｌのＲＮａｓｅ−ｆｒｅｅ ＤＮａｓｅＩ（１Ｕ／μｌ）（以上プロメガ社製）をそれぞれ加え、滅菌水で総容量を５０μｌとした。３７℃で３０分間反応させた後、フェノール／クロロホルム処理したのちエタノール沈殿した。
ＤＮａｓｅ処理した各１μｇの全ＲＮＡに０．５μｇ／μｌオリゴ（ｄＴ）１２−１８プライマーを１μｌ加え、滅菌水で総容量を１２μｌとした。６５℃で１０分間加熱した後氷上で急冷し、４μｌの５×ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｂｕｆｆｅｒ（インビトロジェン社製）、１μｌの１０ｍｍｏｌ／ｌ ｄＮＴＰ ｍｉｘ、２μｌの０．１ｍｏｌ／ｌ ＤＴＴ、１μｌの２００Ｕ／μｌ ＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔＩＩ ＲＴ（インビトロジェン社製）を加え、４２℃で５０分間反応した。９０℃で５分間加熱した後氷上に１０分間置いた。
次にＲＮａｓｅＨ（２Ｕ／μｌ）（インビトロジェン社製）を１μｌ加え、３７℃で２０分間反応し、滅菌水を加えて総容量を２００μｌとすることによりｃＤＮＡを作製した。
同様に陽性コントロール用としてラット脳の全ＲＮＡからｃＤＮＡを作成した。１μｌの該ｃＤＮＡに、２μｌの１０μｍｏｌ／ｌプライマーセット、１μｌのＤＭＳＯ（ナカライテスク社製）、２μｌの１０×ＥｘＴａｑ ｂｕｆｆｅｒ、１．６μｌのｄＮＴＰｍｉｘ、０．１μｌのＥｘＴａｑ（以上、タカラバイオ社製）を加え、サーマルサイクラーを用いて９４℃で１分間処理後、９４℃で１分間、６０℃で１分間、７４℃で１分間のサイクルを、Ｂｃｌ−２増幅用ＰＣＲで２７サイクル、ＢＤＮＦ増幅用ＰＣＲで３５サイクル繰り返し、それぞれのｃＤＮＡ断片を増幅させた。Ｂｃｌ−２の増幅には配列番号６および７で表される塩基配列からなる合成ＤＮＡを、ＢＤＮＦの増幅には配列番号８および９で表される塩基配列からなる合成ＤＮＡをプライマーセットに用いた。
増幅ＤＮＡは、１．８％アガロース（ナカライテスク社製）ゲルで電気泳動し、エチジウムブロマイド（ナカライテスク社製）で染色後、トランスイルミネーター（東洋紡社製）で検出した。Ｂｃｌ−２のバンド強度は分化開始後２４時間目および６日目ともに塩化リチウムの濃度差により変化しなかった。ＢＤＮＦは塩化リチウムの濃度差に関わらず発現は認められなかった。
以上の結果から、塩化リチウムによるニューロン新生促進活性は、Ｂｃｌ−２およびＢＤＮＦを介した細胞死抑制の結果ではなく、塩化リチウムは積極的にニューロン新生を促進することが示唆された。
実験例３：塩化リチウムによるニューロン新生促進（３）
リチウムによるニューロン新生促進作用がアポトーシス抑制による新生細胞数の増加によるものであるのか、または積極的にニューロン分化を誘導していることによるものであるのかを明らかにするため、リチウムによるＡＮＳＣ−７細胞に対するアポトーシス抑制効果を解析した。
上記７の方法により、塩化リチウムを終濃度３ｍｍｏｌ／ｌになるようにＡＮＳＣ−７細胞を含有する培地に添加して６日間培養し、塩化リチウムを添加して培養したＡＮＳＣ−７細胞とコントロールとしてＰＢＳを添加して培養したＡＮＳＣ−７細胞とを、ｉｎ ｓｉｔｕ細胞死検出キット、フルオレセイン（ロシュ・ダイアグノスティックス社製）を用いて添付プロトコールどおり該細胞と反応させた。倒立型蛍光顕微鏡（ニコン社製）を用いて該細胞を観察し、２．４４平方ミリメートルあたりのアポトーシス細胞数をカウントした。
その結果、アポトーシス陽性細胞数は塩化リチウム添加により１．０倍となり変化せず、塩化リチウムはＡＮＳＣ−７細胞のアポトーシスを抑制しないことが明らかとなった。従って、リチウムによるニューロン新生促進作用は、積極的なニューロン新生の促進によるものであることが明らかとなった。
実験例４：インスリンおよびフォルスコリンとリチウムとのニューロン新生促進作用に関する拮抗作用
ニューロン新生促進作用が知られるインスリンおよびフォルスコリンとリチウムとのニューロン新生促進作用に関する拮抗作用を解析した。
上記７の方法により、ＡＮＳＣ−７細胞の分化誘導時に、培地中の濃度が５μｇ／ｍｌまたは２５μｇ／ｍｌになるようにインスリンを培地に添加するとともに、各濃度のインスリンを含む培地に、終濃度が０、１および３ｍｍｏｌ／ｌになるように塩化リチウムを添加し、６日間分化誘導を行った。
その結果、３ｍｍｏｌ／ｌの塩化リチウムによるニューロン増加率は、５μｇ／ｍｌのインスリン共存時に比べ、２５μｇ／ｍｌのインスリン共存時で０．７０倍となり有意に低下していた。よって、インスリンとリチウムの作用が拮抗することが明らかとなった。
また、上記と同様の方法にて、インスリンの代わりに終濃度が０、１および５μｍｏｌ／ｌになるようにフォルスコリンを培地に添加し、終濃度が０または３ｍｍｏｌ／ｌの塩化リチウム共存時におけるニューロン増加率を算出した。
その結果、塩化リチウムなしの条件ではフォルスコリンによるニューロン増加率が１，５μｍｏｌ／ｌのフォルスコリンでそれぞれ１．９，２．２倍であるのに対し、３ｍｍｏｌ／ｌの塩化リチウム共存時にはそれぞれ１．２，１．１倍と加算しなかった。従って、塩化リチウムとフォルスコリンは、ニューロン新生促進作用において拮抗することが明らかとなった。
リチウムの標的分子としては、ＧＳＫ−３やイノシトール−１−リン酸フォスファターゼやイノシトール−ポリフォスファターゼが知られており［Ｎａｔｕｒｅ，４１７，２９２−２９５（２００２）］、また、インスリンとフォルスコリンは間接的にＧＳＫ−３の活性を阻害することが知られている［Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１９，４９８９−５０００（１９９９）］。リチウム、インスリンおよびフォルスコリンのニューロン新生促進作用に関する標的分子は共通であると考えられることから、リチウムはＧＳＫ−３の活性を阻害することにより神経幹細胞のニューロン新生を促進していることが示された。
実験例５：ＧＳＫ−３の選択的阻害剤であるＳＢ−２１６７６３によるニューロン新生促進
参考例１記載の方法により合成したＧＳＫ−３の選択的阻害剤として知られるＳＢ−２１６７６３［Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，７，７９３−８０３（２０００）］を、０．１および０．３３ｍｍｏｌ／ｌになるようにＤＭＳＯに溶解し、上記７の方法により、その１０００分の３容量をＡＮＳＣ−７を含有する培地に、ＡＮＳＣ−７細胞分化誘導時に添加し、分化誘導後６日目のニューロン数を測定した。
その結果、Ｔｕｊ１陽性のニューロン数は終濃度０．３，１．０μｍｏｌ／ｌのＳＢ−２１６７６３によってそれぞれ１．２倍、１．８倍となり濃度依存的に有意に増加した。よって、ＧＳＫ−３を選択的に阻害する活性を持つ化合物によりニューロン新生を促進できることが明らかとなった。
以上より、ＧＳＫ−３を選択的に阻害する活性を持つ物質は、神経幹細胞のニューロン新生促進剤になるとともに、神経の再生治療薬になることが示された。
実験例６：ＧＳＫ−３の阻害剤である９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン（Ｋｅｎｐａｕｌｌｏｎｅ）によるニューロン新生促進
実験例１に示した方法と同様の方法により、ＧＳＫ−３およびサイクリン依存性キナーゼ（以下、ＣＤＫと称す）の阻害剤として知られるＫｅｎｐａｕｌｌｏｎｅ［Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，３７１，１９９−２０４（２００３）、ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ社製］を、０．５、２および５ｍｍｏｌ／ｌになるようにＤＭＳＯに溶解し、培養液の１０００分の１容量の該ＤＭＳＯ溶液を、ＡＮＳＣ−７細胞を含有する培地に添加し、分化誘導後６日目のＴｕｊ１陽性ニューロン数を解析した。陰性コントロールとして同容量のＤＭＳＯを添加した。また同様に、ＣＤＫ阻害剤として知られ、ＧＳＫ−３はほとんど阻害しないＲｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ［Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，３７１，１９９−２０４（２００３）、シグマアルドリッチ社製］を、２、５および１０ｍｍｏｌ／ｌになるようにＤＭＳＯに溶解し、培養液の１０００分の１容量の該ＤＭＳＯ溶液を、ＡＮＳＣ−７細胞を含有する培地に添加し、分化誘導後６日目のＴｕｊ１陽性ニューロン数を解析した。
その結果、Ｔｕｊ１陽性ニューロン数は終濃度０．５μｍｏｌ／ｌのＫｅｎｐａｕｌｌｏｎｅで陰性コントロールと比較して１．３倍、２μｍｏｌ／ｌで２．７倍、５μｍｏｌ／ｌで３．７倍となり、Ｋｅｎｐａｕｌｌｏｎｅの濃度依存的に有意に増加した。一方、終濃度２μｍｏｌ／ｌのＲｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅで陰性コントロールと比較して１．０倍、５μｍｏｌ／ｌで１．２倍、１０μｍｏｌ／ｌで１．１倍でありそれぞれ有意差は無く、ＲｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅによるＴｕｊ１ニューロン数の増加は認められなかった。従って、Ｋｅｎｐａｕｌｌｏｎｅはニューロン新生促進作用を持ち、その作用はＫｅｎｐａｕｌｌｏｎｅのＣＤＫ阻害活性ではなくＧＳＫ−３阻害活性によるものであることが明らかとなった。
以上より、リチウム、ＳＢ−２１６７６３に限らず、ＧＳＫ−３を阻害する活性を持つ化合物は、神経幹細胞のニューロン新生促進剤になるとともに、神経疾患の再生治療用医薬になることが示された。
実験例７：ＧＳＫ−３β遺伝子高発現によるニューロン新生の抑制
アルツハイマー病患者の脳内でＧＳＫ−３βの高発現が認められることから［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５６，７０−７８（１９９７）］、アルツハイマー病発症の原因とＧＳＫ−３βの関係を明らかにするため、成体神経幹細胞のニューロン分化に対するＧＳＫ−３β高発現の影響を、レトロウイルスベクターを用いて検討した。
まず、実験例２に記載したラット脳由来ｃＤＮＡを鋳型として、野生型ラットＧＳＫ−３β遺伝子をコードするｃＤＮＡを以下のように調製した。２．５μｌの鋳型ｃＤＮＡに、３μｌの配列番号１０および１１からなる１０μｍｏｌ／ｌのプライマーセット（プロリゴ社製）、５μｌの１０×ＰＣＲ ｂｕｆｆｅｒ ｆｏｒ ＫＯＤ−ｐｌｕｓ−、５μｌの２ｍｍｏｌ／ｌ ｄＮＴＰｓ、２μｌの２５ｍｍｏｌ／ｌ ＭｇＳＯ４、１μｌのＫＯＤ−ｐｌｕｓ−ＤＮＡ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（以上、東洋紡績社製）および３１．５μｌの滅菌水を加え、サーマルサイクラーを用いて９４℃で２分間保温後、９４℃で１５秒間、６０℃で３０秒間、６８℃で１分２０秒間のサイクルを２５サイクル繰り返し、ｃＤＮＡ断片を増幅させた。
一方、ＧＳＫ−３βのキナーゼ活性を失う変異である８５番目のリジン残基がアルギニン残基に変異した変異型ラットＧＳＫ−３β遺伝子［Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２，８４９８−８５０２（１９９５）］をコードするｃＤＮＡを同様に以下のように調製した。
２．５μｌの野生型ラットＧＳＫ−３β遺伝子をコードするｃＤＮＡを鋳型として、配列番号１０および１２からなるプライマーセットを用いて変異型ラットＧＳＫ−３βの５’末端側部分長ｃＤＮＡを増幅させ、配列番号１１および１３からなるプライマーセットを用いて変異型ラットＧＳＫ−３βの３’末端側部分長ｃＤＮＡを増幅させた。それぞれの部分長ｃＤＮＡの混合物を鋳型として、配列番号１０および１１からなるプライマーセットを用いて変異型ラットＧＳＫ３βの完全長ｃＤＮＡを増幅させた。
野生型および変異型それぞれの増幅反応液をフェノール／クロロホルム処理したのちエタノールを加えて沈殿させ、ＱＩＡｑｕｉｃｋ ＰＣＲ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｋｉｔ（キアゲン社製）で添付プロトコールに従って精製した。
続いて１０μｇのｐＣＬＮＣＸプラスミドベクター（ＩＭＧＥＮＥＸ社製）に１０μｌの１０×Ｍバッファー、５μｌのＨｉｎｄＩＩＩ（タカラバイオ社製）を加え、滅菌水を加えて１００μｌとし、３７℃で１２時間反応させた。反応液をフェノール／クロロホルム処理した後エタノールを加えてＤＮＡを沈殿させ、３２μｌの滅菌水に溶解した。該ＤＮＡ溶液に４μｌの１０×Ｂｌｕｎｔｉｎｇ ｂｕｆｆｅｒ、４μｌのＫＯＤ ＤＮＡ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅを加え、７２℃で２分間反応させ平滑末端化した。反応液をフェノール／クロロホルム処理した後エタノールを加えてＤＮＡを沈殿させ、４３μｌの滅菌水に溶解した後、５μｌの１０×Ａｌｋａｌｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｂｕｆｆｅｒおよび２μｌのＡｌｋａｌｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（以上、タカラバイオ社製）を加え６５℃で３０分間反応させた。反応液をフェノール／クロロホルム処理したのちエタノールを加えてＤＮＡを沈殿させ滅菌水に溶解した。
この切断したｐＣＬＮＣＸプラスミドベクター３μｇに上記で調製した３μｇの野生型または変異型のラットＧＳＫ−３β遺伝子をコードするｃＤＮＡを混合し滅菌水を加えて４μｌとし、４μｌのｌｉｇａｔｉｏｎ ｈｉｇｈ（東洋紡績社製）を加え１６℃で１２時間反応させた。これをＥ．ｃｏｌｉ ＤＨ５αコンピテントセル（タカラバイオ社製）にトランスフォーメーションした。定法によりアンピシリン耐性コロニーを液体ＬＢ培地で培養し、Ｅｎｄｏｆｒｅｅ Ｐｌａｓｍｉｄ Ｍａｘｉ Ｋｉｔ（キアゲン社製）を用いて添付プロトコールに従ってｐＣＬＮＣ−ＧＳＫ３βプラスミドＤＮＡおよびｐＣＬＮＣ−ＧＳＫ３β（Ｋ８５Ｒ）プラスミドＤＮＡを調製した。
次に、以下のとおりウイルスベクターを作製し、ＡＮＳＣ−７細胞のニューロン分化に関わる機能を解析した。まず、ｐＣＬＮＣ−ＧＳＫ３β、ｐＣＬＮＣ−ＧＳＫ３β（Ｋ８５Ｒ）、または陰性コントロールであるｐＣＬＮＣＸプラスミドベクターＤＮＡ１５μｇと、それぞれｐＭＤ．ＧプラスミドベクターＤＮＡ（米国ソーク研究所より分与）５μｇを２ｍｌのＤ−ＭＥＭ ｈｉｇｈ ｇｌｕｃｏｓｅ培地（インビトロジェン社製）に溶解し、Ｔｒａｎｓｆａｓｔ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｒｅａｇｅｎｔ（プロメガ社製）を用いて添付プロトコールに従って、前日に用意した２９３ｇｐ細胞（米国ソーク研究所より分与）にトランスフェクションを行った。
トランスフェクションの３日後に、培養上清を０．４５μｍのフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）でろ過し、ウイルスベクターを含む溶液を回収した。該ウイルスベクター溶液をポリアロマチューブ（日立工機製）に移し、超遠心機（日立工機製）を用いて５０，０００×ｇ、１８℃で９０分間遠心分離した。上清を除去し、沈殿しているウイルスを１％のＮ２ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔと２０ｎｇ／ｍｌのＦＧＦ−２と８μｇ／ｍｌの臭化ヘキサジメトリン（シグマアルドリッチ社製）を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地に懸濁した。実験例１に示した方法と同様の方法により、ポリオルニチンおよびラミニンでコートした１２穴培養ディッシュに１穴当たり１．８×１０５個まいて一晩静置したＡＮＳＣ−７細胞から培養上清を除いて該ウイルス懸濁液を添加し、３７℃、５％ＣＯ２濃度のインキュベーター中で２時間培養して感染させた。続いて培養液を分化誘導培地に全量交換して分化誘導を開始し、実験例１と同様に分化誘導６日後のＴｕｊ１陽性ニューロン数を解析した。
その結果、陰性コントロールであるｐＣＬＮＣＸより作製したレトロウイルスを感染させ分化させたＡＮＳＣ−７細胞と比べ、ｐＣＬＮＣ−ＧＳＫ３βより作製したレトロウイルスを感染させＧＳＫ−３βを高発現させ分化させた細胞では新生ニューロン数が３３％有意に減少した。一方、ｐＣＬＮＣ−ＧＳＫ３β（Ｋ８５Ｒ）より作製したレトロウイルスを感染させキナーゼ活性を持たないＧＳＫ−３β（Ｋ８５Ｒ）を高発現させ分化させた細胞では新生ニューロン数が野生型ＧＳＫ−３βを高発現させた細胞より有意に３４％多く、陰性コントロールであるｐＣＬＮＣＸより作製したレトロウイルスを感染させ分化させた場合と同程度であった。よってＧＳＫ−３βのキナーゼ活性によりニューロン新生が抑制されることが明らかとなった。
従って、アルツハイマー病は、ＧＳＫ−３βの高発現による標的分子のリン酸化の促進によってニューロン新生が抑制されることにより脳の自己再生能が抑制され、発症する可能性が示され、ＧＳＫ−３阻害剤が神経疾患、例えばアルツハイマー病の治療薬となり得ることが示された。
実験例８：会合型ベータアミロイドペプチドによるニューロン新生の抑制とＧＳＫ−３阻害剤による抑制の解除（１）
ベータアミロイドペプチド（以下、Ａβと称す）は老人斑の主要構成成分であり、アルツハイマー病の原因であると考えられている物質である［Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，９８，１１０３９−１１０４１（２００１）］。Ａβ［１−４０］（ＢＩＯＳＯＵＲＣＥ社製）を０．１％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸（ナカライテスク社製）で１０ｍｇ／ｍｌになるように溶解し、２５℃で１時間保温した後、ＰＢＳで０．５ｍｇ／ｍｌに希釈した。２５℃で２４時間保温して会合体を形成させ［Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７６，４２０２７−４２０３４（２００１）］、実験例１に示した方法と同様の方法によりＡＮＳＣ−７細胞の分化誘導時に終濃度０．１ｍｇ／ｍｌになるように培地に添加し、陰性コントロールには同容量のＰＢＳを添加した。分化誘導２日後、４日後にはそれぞれ分化誘導培地のみで全量培地交換し、分化誘導６日後のニューロン数を測定した。
その結果、Ｔｕｊ１陽性ニューロン数は会合型Ａβの添加により７８％有意に減少した。従って、神経疾患の１つであるアルツハイマー病は、会合型Ａβによりニューロン新生が抑制されることにより、脳の自己再生能が抑制され、発症する可能性が示された。
実験例９：会合型ベータアミロイドペプチドによるニューロン新生の抑制とＧＳＫ−３阻害剤による抑制の解除（２）
会合型Ａβによるニューロン新生の抑制がアポトーシス促進による新生細胞数の減少によるものであるのか、またはニューロン分化の抑制によるものであるのかを明らかにするため、会合型ＡβのＡＮＳＣ−７細胞に対するアポトーシス促進効果を解析した。
実験例８と同様の方法により、終濃度０．１ｍｇ／ｍｌの会合型Ａβを含有する分化誘導培地により６日間分化誘導したＡＮＳＣ−７細胞とコントロールとしてＰＢＳを含有する分化誘導培地により分化誘導したＡＮＳＣ−７細胞とを、ｉｎ ｓｉｔｕ細胞死検出キット、フルオレセイン（ロシュ・ダイアグノスティックス社製）を用いて添付プロトコールどおり該細胞と反応させた。倒立型蛍光顕微鏡（ニコン社製）を用いて該細胞を観察し、２．４４平方ミリメートルあたりのアポトーシス細胞数をカウントした。
その結果、アポトーシス陽性細胞数は会合型Ａβ添加により１４％増加したが有意差は無かったことから、会合型Ａβによる新生ニューロン数の減少は、アポトーシス促進よりもニューロン分化の抑制により主に引き起こされることが明らかとなった。
実験例１０：会合型ベータアミロイドペプチドによるニューロン新生の抑制とＧＳＫ−３阻害剤による抑制の解除（３）
実験例８と同様の方法により、終濃度０．１ｍｇ／ｍｌの会合型Ａβを含有する分化誘導培地でＡＮＳＣ−７細胞を分化誘導する際に、塩化リチウムを終濃度３ｍｍｏｌ／ｌ、またはＫｅｎｐａｕｌｌｏｎｅを終濃度２μｍｏｌ／ｌになるように加え、分化誘導６日後のＴｕｊ１陽性ニューロン数を解析した。
その結果、塩化リチウムまたはＫｅｎｐａｕｌｌｏｎｅを加えることにより、Ｔｕｊ１陽性ニューロン数が、会合型Ａβのみと比較してそれぞれ７３％、４００％有意に増加した。
従って、ＧＳＫ−３阻害剤は会合型Ａβによるニューロン新生の抑制を解除する作用を持つことが明らかとなった。
以上より、ＧＳＫ−３を選択的に阻害する活性を持つ化合物は、アルツハイマー病等の神経疾患の神経再生薬になること、および該化合物は神経幹細胞のニューロン新生促進剤になることが示された。
実験例１１：ＧＳＫ−３の阻害剤であるＩｎｄｉｒｕｂｉｎ−３’−ｍｏｎｏｘｉｍｅによるニューロン新生促進
実験例１に示した方法と同様の方法により、ＧＳＫ−３の阻害剤として報告されているＩｎｄｉｒｕｂｉｎ−３’−ｍｏｎｏｘｉｍｅ［Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７６，２５１−２６０（２００１）、シグマアルドリッチ社製］を、１ｍｍｏｌ／ｌになるようにＤＭＳＯに溶解し、培養液の１０００分の１容量の該ＤＭＳＯ溶液を、ＡＮＳＣ−７細胞を含有する培地に添加し、分化誘導後６日目のＴｕｊ１陽性ニューロン数を解析した。陰性コントロールとして同容量のＤＭＳＯを添加した。その結果、終濃度１μｍｏｌ／ｌのＩｎｄｉｒｕｂｉｎ−３’−ｍｏｎｏｘｉｍｅの添加条件において、Ｔｕｊ１陽性ニューロン数は陰性コントロールと比較して１．４倍に有意に増加した。従って、Ｉｎｄｉｒｕｂｉｎ−３’−ｍｏｎｏｘｉｍｅはニューロン新生促進作用を持つことが明らかとなった。
以上より、リチウム、ＳＢ−２１６７６３、Ｋｅｎｐａｕｌｌｏｎｅに限らず、ＧＳＫ−３を阻害する活性を持つ化合物は、神経幹細胞のニューロン新生促進剤になるとともに、神経疾患の再生治療用医薬になることが示された。
実験例１２：ＧＳＫ−３に対する特異的なｓｉＲＮＡによるニューロン新生促進
ｓｈｏｒｔ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）は遺伝子を特異的にノックダウンする［Ｎａｔｕｒｅ，４１１，４９４−４９８（２００１）］。成体神経幹細胞に発現するＧＳＫ−３を特異的に阻害することによりニューロン新生が促進できることをさらに明らかにするため、ＧＳＫ−３βに対する特異的な化学合成ｓｉＲＮＡをＡＮＳＣ−７細胞に導入し、ニューロン新生に対する効果を検討した。
まず、以下のとおりＧＳＫ−３βに対する２種の化学合成ｓｉＲＮＡのＡＮＳＣ−７細胞でのノックダウン効果を検討した。ＡＮＳＣ−７細胞に対するｓｉＲＮＡの導入はＲａｔ ＮＳＣ ＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒＴＭ Ｋｉｔ（Ａｍａｘａ社製）を用いて行なった。１×１０６個のＡＮＳＣ−７細胞に対して１５０ｐｍｏｌの配列番号１４および１５からなる２重鎖ｓｉＲＮＡ−Ｂ１または配列番号１６および１７からなる２重鎖ｓｉＲＮＡ−Ｂ２（Ｄｈａｒｍａｃｏｎ社製）を添付プロトコールに従って導入した。陰性コントロールとしてＮｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｄｕｐｌｅｘ ＩＸ（４７％ ＧＣ Ｃｏｎｔｅｎｔ）ｓｉＲＮＡ（Ｄｈａｒｍａｃｏｎ社製）を導入した。導入後直ちに５ｍｌの分化誘導培地に懸濁し、ポリオルニチンおよびラミニンでコートした６センチ培養ディッシュに播種した。播種４８時間後に細胞を１％のＮｏｎｉｄｅｔ Ｐ−４０、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、５０ｍＭのＮａＣｌ（以上、ナカライテスク社製）、１０ｍｌあたり一錠のＣｏｍｐｌｅｔｅｍｉｎｉ，ＥＤＴＡ ｆｒｅｅ（ロシュ・ダイアグノスティックス社製）を含む水溶液に溶解して回収し、定法によりＳＤＳ−ＰＡＧＥ法で分離したのちウエスタンブロッティング法でＧＳＫ−３β量を検出した。検出にはＧＳＫ−３αおよびβを認識する抗ＧＳＫ−３抗体（シグマ社製）を用いた。その結果、２種のＧＳＫ−３βに対するｓｉＲＮＡを導入した細胞は両者とも陰性コントロールと比較してＧＳＫ−３β量が９割以上減少し、ＧＳＫ−３α量は変化しなかったため、それぞれのｓｉＲＮＡはＧＳＫ−３β特異的にノックダウンできることが明らかになった。
続いてそれら２種のｓｉＲＮＡをＡＮＳＣ−７に導入後、直ちに１ｍｌの分化誘導培地が入ったポリオルニチンおよびラミニンでコートした１２穴培養ディッシュに１穴当たり１．８×１０５個まき、分化を誘導した。実験例１に示した方法と同様の方法により、分化誘導後６日目のＴｕｊ１陽性ニューロン数を解析した。その結果、Ｔｕｊ１陽性ニューロン数はｓｉＲＮＡ−Ｂ１を導入した細胞では陰性コントロールと比較して２．５倍に増加し、ｓｉＲＮＡ−Ｂ２を導入した細胞では１．９倍に増加した。従って、ＧＳＫ−３βに対するｓｉＲＮＡはニューロン新生促進作用を持つことが明らかとなった。
以上より、ＧＳＫ−３を阻害する活性を持つ化合物およびｓｉＲＮＡを含む核酸は、神経幹細胞のニューロン新生促進剤になるとともに、神経疾患の再生治療用医薬になることが示された。
参考例１：３−（２，４−ジクロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＳＢ−２１６７６３）の合成工程１：３−インドールグリオキシル酸メチルエステルの合成
市販の３−インドールグリオキシル酸（９．５５ｇ）を塩化メチレン（３００ｍＬ）に懸濁し、氷冷下、オキサリルクロリド（８．８ｍＬ）を加え、２０℃で２０時間攪拌した。反応液を氷冷し、メタノール（１９０ｍＬ）を加えた後、反応液を２５℃で１時間攪拌した。反応液に水および塩化メチレンを加え、析出した結晶を濾取し、結晶を塩化メチレンで洗浄した。結晶を減圧乾燥し、３−インドールグリオキシル酸メチルエステル（７．０７ｇ、６９％）を得た。
工程２：２−（１−メチルインドール−３−イル）−２−オキソ酢酸メチルエステルの合成
工程１で得られた３−インドールグリオキシル酸メチルエステル（５．８８ｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１８０ｍＬ）に溶解し、０℃で攪拌しながら、水素化ナトリウム（６０％オイル分散、１．４ｇ）を少量ずつ加えた。反応混合物を１時間攪拌した後、ヨウ化メチル（１．２ｍＬ）を加え、２０℃で２０時間攪拌した。氷冷水を反応液に添加した後、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸でｐＨ値を５に調整した。析出した結晶を濾取し、水で洗浄した。結晶を減圧乾燥し、２−（１−メチルインドール−３−イル）−２−オキソ酢酸メチルエステル（１．９６ｇ、３３％）を得た。
工程３：２，４−ジクロロフェニル酢酸アミド
市販の２，４−ジクロロフェニル酢酸（１２．４ｇ）を塩化メチレン（３５０ｍＬ）に溶解し、氷冷下、オキサリルクロリド（１０．６ｍＬ）を加え、２０℃で２０時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣を塩化メチレン（１００ｍＬ）に溶解した。この溶液を氷冷した２８％アンモニア水溶液（２５０ｍＬ）に滴下し、塩化メチレンを減圧留去した。析出した結晶を濾取し、水で洗浄した。結晶を減圧乾燥し、２，４−ジクロロフェニル酢酸アミド（１１．１４ｇ、９０％）を得た。
工程４：ＳＢ−２１６７６３の合成
ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム（０．５ｇ）をテトラヒドロフラン（３５ｍＬ）に溶解し、氷冷下、工程２で得られた２−（１−メチルインドール−３−イル）−２−オキソ酢酸メチルエステル（０．４ｇ）、次いで工程３で得られた２，４−ジクロロフェニル酢酸アミド（０．３ｇ）を加え、同温度で３時間攪拌した。水を反応液に添加した後、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、結晶をエタノールで洗浄した。結晶を減圧乾燥し、ＳＢ−２１６７６３（３９０ｍｇ、７０％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：３．８９（ｓ，３Ｈ），６．４１（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．８０（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），７．１５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３２−７．３８（ｍ，３Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｓ，１Ｈ），１０．９４（ｓ，１Ｈ）元素分析：理論値（Ｃ：６１．５、Ｈ：３．３、Ｎ：７．６）、測定値（Ｃ：６１．３、Ｈ：３．５、Ｎ：７．４）
参考例２：ラット脳からの成体神経幹細胞の単離と培養
７週齢のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ ｒａｔをエテール麻酔によって眠らせた後に断頭し、頭頂部より頭蓋骨を切開して脳を摘出した。摘出した脳から脳室周囲部位を含む組織を顕微鏡下で眼科用のはさみとピンセットを用いて分離した。脳室周囲部位を含む組織は眼科用はさみとメスを用いて１ｍｍ３程度の断片にした後、２．５Ｕ／ｍｌのパパイン、２５０Ｕ／ｍｌのＤＮａｓｅ（いずれもＷｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ，Ｆｒｅｅｈｏｌｄ，ＮＪ社製）、１ｕ／ｍｌの中性プロテアーゼ（Ｄｉｓｐａｓｅ：Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｈｅｉｍ社製）を含む５ｍｌのＨＢＳＳ緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）中で３７℃、３０分間消化反応を行なった。該反応により得られた細胞と組織の混合物を１０％の胎仔牛血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ社製）を含むＤＭＥＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）で３回洗浄後、１０％の胎仔牛血清を含むＤＭＥＭに溶解し、１０７μｍのナイロンメッシュを用いて未消化物を除去した。
得られた細胞粗抽出液を、１０ｃｍの培養皿上で１０％の胎仔牛血清を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を用いて３７℃のインキュベーター中で１晩培養した。翌日、培地を１％のＮ２ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）と２０ｎｇ／ｍｌのＦＧＦ−２（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ社製）を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２に置換して培養を開始した。３日に一度、培地の半分を新しい１％のＮ２ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔと２０ｎｇ／ｍｌのＦＧＦ−２を含むＤＭＥＭ／Ｆ１２に置換し、培養を継続した。小型細胞の小さなコロニーが形成されたら１％のトリプシンで３０秒から１分間程度処理し、剥がれた細胞を回収した。該細胞は、１０μｇ／ｍｌのポリオルニチン（シグマ社製）を用いて室温で一晩、および５μｇ／ｍｌのマウスＥＨＳ腫瘍由来ラミニン（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社製）を用いて３７℃で一晩コートしたマルチ・ウエルの培養皿（Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）上に撒き、培養を継続した。上記培養を続けることで、小型の突起を有し、厚みのある小型細胞が濃縮された。本細胞を成体神経幹細胞株ＡＮＳＣ−７として上記の実験に使用した。
実施例１：錠剤
常法により、次の組成からなる錠剤を調製する。
（１）処方 ＳＢ−２１６７６３ ５ｍｇ
乳糖 ６２ｍｇ
馬鈴薯デンプン ３０ｍｇ
ポリビニルアルコール ２ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム １ｍｇ
１００ｍｇ
（２） Ｋｅｎｐａｕｌｌｏｎｅ ５ｍｇ
乳糖 ６２ｍｇ
馬鈴薯デンプン ３０ｍｇ
ポリビニルアルコール ２ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム １ｍｇ
１００ｍｇ
（３） Ｉｎｄｉｒｕｂｉｎ−３’−ｍｏｎｏｘｉｍｅ ５ｍｇ
乳糖 ６２ｍｇ
馬鈴薯デンプン ３０ｍｇ
ポリビニルアルコール ２ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム １ｍｇ
１００ｍｇ
実施例２：神経幹細胞のニューロン新生促進剤（１）
常法により、塩化リチウムを３ｍｏｌ／ｌになるようにＰＢＳに溶解し、塩化リチウムを含む神経幹細胞のニューロン新生促進剤を調製した。
実施例３：神経幹細胞のニューロン新生促進剤（２）
常法により、ＳＢ−２１６７６３、ＫｅｎｐａｕｌｌｏｎｅまたはＩｎｄｉｒｕｂｉｎ−３’−ｍｏｎｏｘｉｍｅを０．１ｍｍｏｌ／ｌになるようにＤＭＳＯに溶解し、ＳＢ−２１６７６３、ＫｅｎｐａｕｌｌｏｎｅまたはＩｎｄｉｒｕｂｉｎ−３’−ｍｏｎｏｘｉｍｅを含む神経幹細胞のニューロン新生促進剤を調製した。
本発明によれば、グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３の活性を阻害する物質を有効成分として含有してなる神経再生薬、該物質を有効成分として含有してなる神経幹細胞のニューロン新生促進剤、該ニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養して得られるニューロンおよび該ニューロンの製造方法を提供することができる。
配列番号５−人工配列の説明：合成蛋白質
配列番号６−人工配列の説明：合成ＤＮＡ
配列番号７−人工配列の説明：合成ＤＮＡ
配列番号８−人工配列の説明：合成ＤＮＡ
配列番号９−人工配列の説明：合成ＤＮＡ
配列番号１０−人工配列の説明：合成ＤＮＡ
配列番号１１−人工配列の説明：合成ＤＮＡ
配列番号１２−人工配列の説明：合成ＤＮＡ
配列番号１３−人工配列の説明：合成ＤＮＡ
配列番号１４−人工配列の説明：合成ＲＮＡ
配列番号１５−人工配列の説明：合成ＲＮＡ
配列番号１６−人工配列の説明：合成ＲＮＡ
配列番号１７−人工配列の説明：合成ＲＮＡ
【配列表】
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663
Figure 2004091663

Claims (41)

  1. グリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（以下、ＧＳＫ−３と略す）の活性を阻害する物質を有効成分として含有してなる神経再生薬。
  2. 神経再生薬が、神経疾患の治療薬である請求項１記載の医薬。
  3. 神経疾患が、パーキンソン病、アルツハイマー病、ダウン症、脳血管障害、脳卒中、脊髄損傷、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、てんかん、不安障害、統合失調症、うつ病および躁鬱病からなる群より選ばれる神経疾患である請求項２記載の医薬。
  4. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、リチウムまたはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  5. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、ビスインドリルマレイミド誘導体、３−アリール−４−インドリルマレイミド誘導体、インドロカルバゾール誘導体、インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン誘導体もしくはインジルビン誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  6. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（Ｉ）
    Figure 2004091663
    ［式中、ｎおよびｍは同一または異なって、１〜３の整数を表し、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、−ＣＯＲ６（式中、Ｒ６は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）、−ＣＯＯＲ７（式中、Ｒ７は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）または−ＯＲ８（式中、Ｒ８は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）を表し、Ｒ２およびＲ５は同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシカルボニル、置換もしくは非置換のアリール、カルボキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、アミノまたはモノもしくはジ低級アルキルアミノを表し、ｎおよびｍがそれぞれ２または３であるとき、それぞれのＲ２およびＲ５は同一でも異なっていてもよい］で表される化合物、式（ＩＩ）
    Figure 2004091663
    （式中、ｎａ、ｍａ、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３ＡおよびＲ５Ａは、それぞれ前記ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５と同義である）で表される化合物もしくは式（ＩＩＩ）
    Figure 2004091663
    ［式中、ｎｂ、ｍｂ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２ＢおよびＲ５Ｂは、それぞれ前記ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５と同義であり、Ｒ３ＢおよびＲ４Ｂは同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、−ＣＯＲ６（式中、Ｒ６は前記と同義である）、−ＣＯＯＲ７（式中、Ｒ７は前記と同義である）または−ＯＲ８（式中、Ｒ８は前記と同義である）を表すか、またはＲ３ＢとＲ４Ｂが一緒になって、
    Figure 2004091663
    （式中、ｋは１または２を表し、ＸはＣＨ２、ＮＨ、酸素原子または硫黄原子を表し、Ｒ９はヒドロキシ、カルボキシ、カルバモイルまたは低級アルコキシカルボニルを表す）を形成する］で表される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  7. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（Ｉａ）
    Figure 2004091663
    （式中、Ｒ２ａは水素原子、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、アリールまたはニトロを表し、Ｒ３ａおよびＲ４ａは同一または異なって、置換もしくは非置換の低級アルキルを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  8. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（ＩＩａ）
    Figure 2004091663
    （式中、ｍａは前記と同義であり、Ｒ３Ａａは置換もしくは非置換の低級アルキルを表し、Ｒ５Ａａはハロゲンを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  9. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（ＩＩＩａ）
    Figure 2004091663
    （式中、Ｒ９は前記と同義である）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  10. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、３，４−ビス（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−（１−プロピルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−シアノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルボキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルバモイルプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−プロピルオキシインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−メトキシカルボニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−ニトロインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）−５−ニトロインドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２，４−ジクロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、４−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−３−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンおよび
    Figure 2004091663
    からなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  11. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、式（ＩＶ）
    Figure 2004091663
    ［式中、Ａは単結合または二重結合によって右に結合されている酸素または硫黄であり、Ｒ１０は水素原子、アリール、低級脂肪族置換基、特にアルキルおよび低級アルキルエステルからなる群より選択され、Ｒ１１〜Ｒ１４はアルコキシ、アミノ、アシル、脂肪族置換基、特にアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、脂肪族ニトリル、特にアルキルニトリル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、ハロゲン、水素原子、ヒドロキシル、イミノならびにα、β不飽和ケトンからなる群より個別に選択され、Ｒ１５〜Ｒ１８は脂肪族置換基、特にアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基、特に低級脂肪族置換基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、アルコキシ、アシル、シアノ、ニトロ、エポキシ、ハロアルキル基、ハロゲン、水素原子ならびにヒドロキシルからなる群より個別に選択され、Ｒ１９は脂肪族の基、特に低級アルキル基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、カルボン酸、および水素からなる群より選択される］で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  12. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、９−ブロモ−５，１２−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７，１２−トリ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、５−ベンジル−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（メチルイミノアミン）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（カルボン酸）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１０−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１１−ヒドロキシメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）プロピオニトリル、２−ブロモ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリロニトリル、２−（３−ヒドロキシ−１−プロピニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−（３−オキソ−１−ブテニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、２−ヨード−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−ピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−［２−（１−ヒドロキシシクロヘキシル）エチニル］−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−メチル−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オンおよび３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリル酸メチルエステルからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  13. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンおよび７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  14. ９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  15. ９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  16. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、式（Ｖ）
    Figure 2004091663
    ［式中、同じか異なってよいＲ２０およびＲ２５は水素原子；ハロゲン；ヒドロキシ基；メチレンヒドロキシ基；直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキルまたはアルコキシまたはメチレンアルコキシ基；必要に応じて１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個−炭素原子を有するシクロアルキル基；必要に応じて１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換のアリール、アラルキルまたはアリールオキシ基；それぞれ互いに独立に、直鎖または分枝鎖のアルキル基中に１から６個の炭素原子を有するモノ−、ジ−またはトリアルキルシリル基；それぞれ互いに独立に置換または非置換アリール基を有するモノ−、ジ−またはトリアリールシリル基；トリフルオロメチル基；−ＣＯＭ；−ＣＯＯＭ；あるいは−ＣＨ２ＣＯＯＭ基（ここでＭは水素原子、必要ならばヒドロキシおよび／またはアミノ基１個または複数で置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキル基、または必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有し、１個または複数のハロゲン、アルキル基またはアルコキシ基で置換されていてよいアリール基を表す）；−ＮＲ３０Ｒ３１基（ここで同じか異なってよいＲ３０およびＲ３１は水素原子、必要ならば付加的に１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ１８直鎖または分枝鎖アルキル基、置換または非置換で、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含むアリール基を表す）；アシル基；−ＣＨ２−ＮＲ３０Ｒ３１メチレンアミノ基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；ベンゼン環が必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有するベンジル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する、炭素原子３から７個を有するメチレンシクロアルキル基；アミドとしての、窒素原子に結合した生理的アミノ酸基；グリコシドが単糖または二糖から選択されるＯ−グリコシドまたはＮ−グリコシド；あるいはメチレンスルホネート基を表し；同じか異なってよいＲ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８およびＲ２９は水素原子；ハロゲン；ヒドロキシ基；ニトロソ基；ニトロ基；アルコキシ基；必要ならば１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されている直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８アルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換のアリール基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換アラルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換アリールオキシ基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換メチレンアリールオキシ基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個の炭素原子を有するシクロアルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個の炭素原子を有するメチレンシクロアルキル基；トリフルオロメチル基；−ＣＯＭ；−ＣＯＯＭ；またはＣＨ２ＣＯＯＭ基（ここでＭは水素原子、必要ならばヒドロキシおよび／またはアミノ基１個または複数で付加的に置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキル基、または必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有し、１個または複数のハロゲン原子、アルキル基またはアルコキシ基で置換されていてよいアリール基を表す）；−ＮＲ３０Ｒ３１基（ここで同じか異なってよいＲ３０およびＲ３１は水素原子、必要ならば付加的に１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１８アルキル基、置換または非置換で、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含むアリール基、アシル基を表すか、窒素原子が、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、炭素原子３から７個を有するシクロアルキルの一部を形成する）；−ＣＯＮＲ３０Ｒ３１基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；ヒドロキシルアミノ基；ホスフェート基；ホスホネート基；スルフェート基；スルホネート基；スルホンアミド基；−ＳＯ２ＮＲ３０Ｒ３１基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；−Ｎ＝Ｎ−Ｒ３２アゾ基（ここでＲ３２は必要ならば１個または複数のカルボキシル、ホスホリルまたはスルホネート基で置換された芳香族基あるいはグリコシドが単糖または二糖から選択されているＯ−グリコシドまたはＮ−グリコシド基を表す）を表すか；Ｒ２０およびＲ２４ならびにＲ２５およびＲ２９はそれぞれ一緒になって、互いに独立に必要ならば置換された１から４個のＣＨ２基を有する環を形成し；同じか異なってよいＹおよびＺは酸素；イオウ；セレン；テルルの原子；ＮＲ３３基（ここでＲ３３は水素原子、必要ならば１個または複数のカルボキシル、ホスホリルまたはスルホネート基で置換された直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１８アルキル基、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む置換または非置換のアリール基、アラルキル基またはスルホネート基を表す）；あるいは−ＮＯＲ３３（ここでＲ３３基は前記の意味を有する）を表す］で表される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  17. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン、５−ヨード−インジルビン、５−ブロモ−インジルビン、５−クロロ−インジルビン、５−フルオロ−インジルビン、５−メチル−インジルビン、５−ニトロ−インジルビン、５−ＳＯ３Ｈ−インジルビン、５’−ブロモ−インジルビン、５−５’−ジブロモ−インジルビンおよび５’−ブロモ−インジルビン５−スルホン酸からなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  18. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン−３’−モノオキシム、５−ヨード−インジルビン−３’−モノオキシムおよび５−ＳＯ３Ｎａ−インジルビン−３’−モノオキシムからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  19. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン−３’−モノオキシムまたはその薬理学的に許容される塩である請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。
  20. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質を有効成分として含有してなる神経幹細胞のニューロン新生促進剤。
  21. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、リチウムまたはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  22. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、ビスインドリルマレイミド誘導体、３−アリール−４−インドリルマレイミド誘導体、インドロカルバゾール誘導体もしくはインドロ［３，２ｄ−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン誘導体またはそれらの薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  23. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（Ｉ）
    Figure 2004091663
    ［式中、ｎおよびｍは同一または異なって、１〜３の整数を表し、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、−ＣＯＲ６（式中、Ｒ６は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）、−ＣＯＯＲ７（式中、Ｒ７は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）または−ＯＲ８（式中、Ｒ８は水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換のアリールまたは置換もしくは非置換のシクロアルキルを表す）を表し、Ｒ２およびＲ５は同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置換の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、置換もしくは非置換の低級アルコキシ、置換もしくは非置換の低級アルコキシカルボニル、置換もしくは非置換のアリール、カルボキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、アミノまたはモノもしくはジ低級アルキルアミノを表し、ｎおよびｍがそれぞれ２または３であるとき、それぞれのＲ２およびＲ５は同一でも異なっていてもよい］で表される化合物、式（ＩＩ）
    Figure 2004091663
    （式中、ｎａ、ｍａ、Ｒ１Ａ、Ｒ２Ａ、Ｒ３ＡおよびＲ５Ａは、それぞれ前記ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５と同義である）で表される化合物もしくは式（ＩＩＩ）
    Figure 2004091663
    ［式中、ｎｂ、ｍｂ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２ＢおよびＲ５Ｂは、それぞれ前記ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ５と同義であり、Ｒ３ＢおよびＲ４Ｂは同一または異なって、水素原子、置換もしくは非置極の低級アルキル、置換もしくは非置換の低級アルケニル、−ＣＯＲ６（式中、Ｒ６は前記と同義である）、−ＣＯＯＲ７（式中、Ｒ７は前記と同義である）または−ＯＲ８（式中、Ｒ８は前記と同義である）を表すか、またはＲ３ＢとＲ４Ｂが一緒になって、
    Figure 2004091663
    （式中、ｋは１または２を表し、ＸはＣＨ２、ＮＨ、酸素原子または硫黄原子を表し、Ｒ９はヒドロキシ、カルボキシ、カルバモイルまたは低級アルコキシカルボニルを表す）を形成する］で表される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  24. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（Ｉａ）
    Figure 2004091663
    （式中、Ｒ２ａは水素原子、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、アリールまたはニトロを表し、Ｒ３ａおよびＲ４ａは同一または異なって、置換もしくは非置換の低級アルキルを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  25. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（ＩＩａ）
    Figure 2004091663
    （式中、ｍａは前記と同義であり、Ｒ３Ａａは置換もしくは非置換の低級アルキルを表し、Ｒ５Ａａはハロゲンを表す）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  26. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、式（ＩＩＩａ）
    Figure 2004091663
    （式中、Ｒ９は前記と同義である）で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  27. ＧＳＫ−３の活性を阻害する物質が、３，４−ビス（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−（１−プロピルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−シアノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルボキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−カルバモイルプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−プロピルオキシインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−フェニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−メトキシカルボニルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−４−（１−メチル−５−ニトロインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（１−メチルインドール−３−イル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）−５−ニトロインドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２，４−ジクロロフェニル）−４−（１−メチルインドール−３−イル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、３−（２−クロロフェニル）−４−［１−（３−ヒドロキシプロピル）インドール−３−イル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン、４−［１−（３−アミノプロピル）インドール−３−イル］−３−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオンおよび
    Figure 2004091663
    からなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  28. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、式（ＩＶ）
    Figure 2004091663
    ［式中、Ａは単結合または二重結合によって右に結合されている酸素または硫黄であり、Ｒ１０は水素原子、アリール、低級脂肪族置換基、特にアルキルおよび低級アルキルエステルからなる群より選択され、Ｒ１１〜Ｒ１４はアルコキシ、アミノ、アシル、脂肪族置換基、特にアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、脂肪族ニトリル、特にアルキルニトリル、シアノ、ニトロ、カルボキシル、ハロゲン、水素原子、ヒドロキシル、イミノならびにα、β不飽和ケトンからなる群より個別に選択され、Ｒ１５〜Ｒ１８は脂肪族置換基、特にアルキル、アルケニルおよびアルキニル置換基、特に低級脂肪族置換基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、アルコキシ、アシル、シアノ、ニトロ、エポキシ、ハロアルキル基、ハロゲン、水素原子ならびにヒドロキシルからなる群より個別に選択され、Ｒ１９は脂肪族の基、特に低級アルキル基、脂肪族アルコール、特にアルキルアルコール、カルボン酸、および水素からなる群より選択される］で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  29. ７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、９−ブロモ−５，１２−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７−ビス−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−５，７，１２−トリ−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、５−ベンジル−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−１２−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−プロペニル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（メチルイミノアミン）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２−（カルボン酸）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１０−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１１−ヒドロキシメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，３−ジメトキシ−９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）プロピオニトリル、２−ブロモ−９−ニトロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリロニトリル、２−（３−ヒドロキシ−１−プロピニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−（３−オキソ−１−ブテニル）−９−トリフルオロメチル−７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−クロロ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、２−ヨード−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−ピリド［３’，２’：４，５］ピロロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−［２−（１−ヒドロキシシクロヘキシル）エチニル］−９−トリフルオロメチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ヨード−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−エチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−メチル−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オンおよび３−（６−オキソ−９−トリフルオロメチル−５，６，７，１２−テトラヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−２−イル）アクリル酸メチルエステルからなる群より選択される、請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  30. ９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１０−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、１１−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−フルオロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−メチル−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−チオン、８，１０−ジクロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−（２−ヒドロキシエチル）−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジヒドロキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−１２−メチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−５−メチルオキシカルボニルメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンおよび７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選択される、請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  31. ９−シアノ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−２，３−ジメトキシ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、２，９−ジブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−トリフルオロメチル−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、９−クロロ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オン、８−ブロモ−６，１１−ジヒドロ−チエノ［３’，２’：２，３］アゼピノ［４，５−ｂ］インドール−５（４Ｈ）−オン、７，１２−ジヒドロ−９−メトキシ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選択される、請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  32. ９−ブロモ−７，１２−ジヒドロ−インドロ［３，２−ｄ］［１］ベンズアゼピン−６（５Ｈ）−オンからなる群より選択される、請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  33. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、式（Ｖ）
    Figure 2004091663
    ［式中、同じか異なってよいＲ２０およびＲ２５は水素原子；ハロゲン；ヒドロキシ基；メチレンヒドロキシ基；直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキルまたはアルコキシまたはメチレンアルコキシ基；必要に応じて１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個−炭素原子を有するシクロアルキル基；必要に応じて１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換のアリール、アラルキルまたはアリールオキシ基；それぞれ互いに独立に、直鎖または分枝鎖のアルキル基中に１から６個の炭素原子を有するモノ−、ジ−またはトリアルキルシリル基；それぞれ互いに独立に置換または非置換アリール基を有するモノ−、ジ−またはトリアリールシリル基；トリフルオロメチル基；−ＣＯＭ；−ＣＯＯＭ；あるいは−ＣＨ２ＣＯＯＭ基（ここでＭは水素原子、必要ならばヒドロキシおよび／またはアミノ基１個または複数で置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキル基、または必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有し、１個または複数のハロゲン、アルキル基またはアルコキシ基で置換されていてよいアリール基を表す）；−ＮＲ３０Ｒ３１基（ここで同じか異なってよいＲ３０およびＲ３１は水素原子、必要ならば付加的に１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されているＣ１〜Ｃ１８直鎖または分枝鎖アルキル基、置換または非置換で、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含むアリール基を表す）；アシル基；−ＣＨ２−ＮＲ３０Ｒ３１メチレンアミノ基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；ベンゼン環が必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有するベンジル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する、炭素原子３から７個を有するメチレンシクロアルキル基；アミドとしての、窒素原子に結合した生理的アミノ酸基；グリコシドが単糖または二糖から選択されるＯ−グリコシドまたはＮ−グリコシド；あるいはメチレンスルホネート基を表し；同じか異なってよいＲ２１、Ｒ２２、Ｒ２３、Ｒ２４、Ｒ２６、Ｒ２７、Ｒ２８およびＲ２９は水素原子；ハロゲン；ヒドロキシ基；ニトロソ基；ニトロ基；アルコキシ基；必要ならば１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されている直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８アルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換のアリール基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換アラルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換アリールオキシ基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有する置換または非置換メチレンアリールオキシ基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個の炭素原子を有するシクロアルキル基；必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、３から７個の炭素原子を有するメチレンシクロアルキル基；トリフルオロメチル基；−ＣＯＭ；−ＣＯＯＭ；またはＣＨ２ＣＯＯＭ基（ここでＭは水素原子、必要ならばヒドロキシおよび／またはアミノ基１個または複数で付加的に置換された直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ１８−アルキル基、または必要ならば１個または複数のヘテロ原子を有し、１個または複数のハロゲン原子、アルキル基またはアルコキシ基で置換されていてよいアリール基を表す）；−ＮＲ３０Ｒ３１基（ここで同じか異なってよいＲ３０およびＲ３１は水素原子、必要ならば付加的に１個または複数のヒドロキシおよび／またはアミノ基で置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１８アルキル基、置換または非置換で、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含むアリール基、アシル基を表すか、窒素原子が、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む、炭素原子３から７個を有するシクロアルキルの一部を形成する）；−ＣＯＮＲ３０Ｒ３１基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；ヒドロキシルアミノ基；ホスフェート基；ホスホネート基；スルフェート基；スルホネート基；スルホンアミド基；−ＳＯ２ＮＲ３０Ｒ３１基（ここでＲ３０およびＲ３１は前記の意味を有する）；−Ｎ＝Ｎ−Ｒ３２アゾ基（ここでＲ３２は必要ならば１個または複数のカルボキシル、ホスホリルまたはスルホネート基で置換された芳香族基あるいはグリコシドが単糖または二糖から選択されているＯ−グリコシドまたはＮ−グリコシド基を表す）を表すか；Ｒ２０およびＲ２４ならびにＲ２５およびＲ２９はそれぞれ一緒になって、互いに独立に必要ならば置換された１から４個のＣＨ２基を有する環を形成し；同じか異なってよいＹおよびＺは酸素；イオウ；セレン；テルルの原子；ＮＲ３３基（ここでＲ３３は水素原子、必要ならば１個または複数のカルボキシル、ホスホリルまたはスルホネート基で置換された直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ１８アルキル基、必要ならば１個または複数のヘテロ原子を含む置換または非置換のアリール基、アラルキル基またはスルホネート基を表す）；あるいは−ＮＯＲ３３（ここでＲ３３基は前記の意味を有する）を表す］で表される化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  34. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン、５−ヨード−インジルビン、５−ブロモ−インジルビン、５−クロロ−インジルビン、５−フルオロ−インジルビン、５−メチル−インジルビン、５−ニトロ−インジルビン、５−ＳＯ３Ｈ−インジルビン、５’−ブロモ−インジルビン、５−５’−ジブロモ−インジルビンおよび５’−ブロモ−インジルビン５−スルホン酸からなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  35. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン−３’−モノオキシム、５−ヨード−インジルビン−３’−モノオキシムおよび５−ＳＯ３Ｎａ−インジルビン−３’−モノオキシムからなる群より選ばれる化合物またはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  36. ＧＳＫ−３を阻害する物質が、インジルビン−３’−モノオキシムまたはその薬理学的に許容される塩である請求項２０記載のニューロン新生促進剤。
  37. 請求項２０〜３６のいずれか１項に記載のニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養して得られるニューロン。
  38. 請求項２０〜３６のいずれか１項に記載のニューロン新生促進剤の存在下、神経幹細胞を培養してニューロンを新生させ、培養物中よりニューロンを採取することを特徴とするニューロンの製造方法。
  39. ＧＳＫ−３を阻害する物質を投与することを特徴とする神経再生方法。
  40. 神経再生薬の製造のためのＧＳＫ−３を阻害する物質の使用。
  41. 神経幹細胞のニューロン新生促進剤の製造のためのＧＳＫ−３を阻害する物質の使用。
JP2005505483A 2003-04-18 2004-04-16 神経再生薬 Abandoned JPWO2004091663A1 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2003114579 2003-04-18
JP2003114579 2003-04-18
PCT/JP2004/005503 WO2004091663A1 (ja) 2003-04-18 2004-04-16 神経再生薬

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPWO2004091663A1 true JPWO2004091663A1 (ja) 2006-07-06

Family

ID=33296154

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2005505483A Abandoned JPWO2004091663A1 (ja) 2003-04-18 2004-04-16 神経再生薬

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20060217368A1 (ja)
EP (1) EP1645286A1 (ja)
JP (1) JPWO2004091663A1 (ja)
CN (1) CN1774265A (ja)
CA (1) CA2522712A1 (ja)
WO (1) WO2004091663A1 (ja)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003048831A (ja) * 2001-08-02 2003-02-21 Suntory Ltd 脳機能の低下に起因する症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物
CN100418519C (zh) * 2002-09-24 2008-09-17 三得利株式会社 用于增强认知能力的含有花生四烯酸或其与二十二碳六烯酸的组合的组合物
TWI324604B (en) 2003-06-18 2010-05-11 Novartis Ag New use of staurosporine derivatives
JP4522075B2 (ja) * 2003-10-29 2010-08-11 サントリーホールディングス株式会社 血管の老化に起因する症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物
JP4993852B2 (ja) 2004-09-17 2012-08-08 サントリーホールディングス株式会社 ストレスに起因する行動異常を伴う症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物
JP2006083136A (ja) * 2004-09-17 2006-03-30 Suntory Ltd ストレスに起因する脳機能の低下およびそれに伴う症状あるいは疾患の予防又は改善作用を有する組成物
CA2595004A1 (en) * 2005-01-18 2006-07-27 Kyoto University Remedy for nerve cell regeneration
JP5697293B2 (ja) * 2005-06-30 2015-04-08 サントリーホールディングス株式会社 器質的脳障害に起因する高次脳機能の低下に対する改善作用を有する組成物
JP5967855B2 (ja) * 2005-06-30 2016-08-10 サントリーホールディングス株式会社 日中活動量の低下および／又はうつ症状の改善作用を有する組成物
EP1757607A1 (en) 2005-08-24 2007-02-28 Molisa GmbH N5-substituted benzo¬2,3|azepino¬4,5-b|indol-6-ones for treating tropical diseases
ES2446269T3 (es) * 2006-12-19 2014-03-06 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois 3-Benzofuranil-4-indolil-maleimidas como potentes inhibidores de GSK-3 para trastornos neurodegenerativos
KR101578498B1 (ko) 2006-12-28 2015-12-18 산토리 홀딩스 가부시키가이샤 신경 재생제
WO2008121346A1 (en) * 2007-03-30 2008-10-09 Massachusetts Institute Of Technology Methods for identifying compounds that modulate neurotrophic factor signaling
EP2147013A4 (en) * 2007-04-16 2012-03-07 Modgene Llc METHOD AND COMPOSITIONS FOR DIAGNOSIS AND TREATMENT OF DEPRESSION AND FEARING
EP2014281A1 (en) * 2007-06-19 2009-01-14 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Use of inhibitors of sirtuins and/or ampk for the preparation of a medicament for the treatment of polyalanine diseases.
WO2010096496A2 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Methods of neural conversion of human embryonic stem cells
CN101548987B (zh) * 2009-04-10 2012-08-22 清华大学 一种用于降解β淀粉样蛋白的细胞培养提取物及其制备方法和应用
EP2305274A1 (en) * 2009-09-21 2011-04-06 Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) Use of WNT stimulators for treating demyelinating diseases
RU2015108907A (ru) * 2009-09-22 2015-08-20 Ньюронасент, Инк. Способы и фармацевтические композиции для лечения синдрома дауна
HUE046227T2 (hu) * 2010-05-25 2020-02-28 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Eljárás humán embrionális õssejtek nociceptor-differenciációjára és alkalmazásai
GB201111427D0 (en) * 2011-07-05 2011-08-17 Amakem Nv Novel bisindolylmaleimides, pan-pkc inhibitors
CN110684733A (zh) 2011-11-04 2020-01-14 纪念斯隆-凯特琳癌症中心 用于植入的中脑多巴胺（da）神经元
WO2013142817A2 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Dennis Brown Compositions and methods to improve the therapeutic benefit of indirubin and analogs thereof, including meisoindigo
GB201217621D0 (en) * 2012-10-02 2012-11-14 Univ Leuven Kath Anticonvulsant activity of gsk-3b inhibitors
WO2014176606A1 (en) 2013-04-26 2014-10-30 Memorial Sloan-Kettering Center Center Cortical interneurons and other neuronal cells produced by the directed differentiation of pluripotent and multipotent cells
JP2017524739A (ja) * 2014-07-17 2017-08-31 アンセルムＩｎｓｅｒｍ 神経筋接合部関連疾患の処置方法
WO2016114322A1 (ja) * 2015-01-13 2016-07-21 国立大学法人京都大学 筋萎縮性側索硬化症の予防及び／又は治療剤
WO2018178194A1 (en) * 2017-03-28 2018-10-04 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Pharmaceutical compositions for use in the treatment of brain injuries or demyelinating disorders
CN107235966B (zh) * 2017-05-04 2019-12-03 浙江工业大学 一类3,4-双吲哚-1,2,4-三氮唑酮类化合物及其制备方法和应用
US20220378741A1 (en) * 2019-11-04 2022-12-01 Ck Regeon Inc. Compositions and methods for suppressing and/or treating neurodegenerative diseases and/or a clinical condition thereof
MX2024004264A (es) 2021-10-08 2024-07-10 Azora Therapeutics Inc Derivados de agonistas de los receptores de aril hidrocarburos.
CN114470164A (zh) * 2022-02-28 2022-05-13 浙江卫未生物医药科技有限公司 一种毛囊干细胞（orsc）制剂及其在神经损伤中的应用

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT93947B (pt) * 1989-05-05 1996-11-29 Goedecke Ag Processo para a preparacao de novos derivados de maleinimidas e de composicoes farmaceuticas que os contem
DE4217964A1 (de) * 1992-05-30 1993-12-02 Goedecke Ag Indolocarbazol-Imide und deren Verwendung
US5753506A (en) * 1996-05-23 1998-05-19 Cns Stem Cell Technology, Inc. Isolation propagation and directed differentiation of stem cells from embryonic and adult central nervous system of mammals
AU2548699A (en) * 1998-02-23 1999-09-06 Rei Asakai Cell death inhibitors
GB9828640D0 (en) * 1998-12-23 1999-02-17 Smithkline Beecham Plc Novel method and compounds
AU6593600A (en) * 1999-08-20 2001-03-19 Rei Asakai Drugs inhibiting cell death
FR2801216A1 (fr) * 1999-11-23 2001-05-25 Centre Nat Rech Scient Utilisation de derives d'indirubine pour la fabrication de medicaments
KR20030023878A (ko) * 2000-06-26 2003-03-20 몬산토 테크놀로지 엘엘씨 소마토트로핀의 지속적인 방출을 위한 계면활성제 함유비수성 제제들
GB0103031D0 (en) * 2001-02-07 2001-03-21 Smithkline Beecham Plc Novel treatment
EP1411052B1 (en) * 2001-07-05 2011-10-05 Takeda Pharmaceutical Company Limited Benzo-fused 5-membered hetrocycle compounds,process for preparation of the same, and use thereof
US20040247525A1 (en) * 2003-01-23 2004-12-09 Rene Hen Brain progenitor cell-based assay, and related methods and compositions

Also Published As

Publication number Publication date
CA2522712A1 (en) 2004-10-28
CN1774265A (zh) 2006-05-17
EP1645286A1 (en) 2006-04-12
US20060217368A1 (en) 2006-09-28
WO2004091663A1 (ja) 2004-10-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPWO2004091663A1 (ja) 神経再生薬
US7232814B2 (en) Use of paullone derivatives for making medicines
JP7109446B2 (ja) 幹細胞／前駆支持細胞の自己複製を誘導するための１ｈ－ピロール－２，５－ジオン化合物およびその使用方法
US20160082015A1 (en) Methods, compositions and kits for promoting motor neuron survival and treating and diagnosing neurodegenerative disorders
US7968535B2 (en) Use of azapaullones for preventing and treating pancreatic autoimmune disorders
KR20100024951A (ko) 세포를 자극하기 위한 방법 및 조성물
KR20090035596A (ko) 골수증식 장애의 치료를 위한 ｊａｋ 억제제
CN116640143A (zh) 用于治疗认知损害的苯并二氮杂环庚三烯衍生物，组合物和方法
US20200123127A1 (en) Removal of senescence-associated macrophages
JP2013536256A (ja) ＤＮＡ−ＰＫ阻害剤としてのイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン
JP2009517390A (ja) ストレス活性化プロテインキナーゼ系を調節する方法
JP6893917B2 (ja) 神経変性疾患の処置
JP2015502926A (ja) 癌治療における使用のためのモルホリニルベンゾトリアジン
JP2021509395A (ja) がんの治療に使用するためのミルシクリブの製剤及びその治療的組み合わせ
US9028810B2 (en) Composition for inducing migration of neural stem cells containing periostin as effective ingredient
WO2014145625A1 (en) Compositions and methods for promoting the generation of endocrine cells
WO2019133992A1 (en) Compositions for cryopreservation and methods of use thereof
JP6669774B2 (ja) 筋萎縮の治療に有用な誘導体
KR20180101228A (ko) 신경세포 분화용 배지 조성물 및 상기 배지 조성물을 이용한 체세포로부터 신경세포로의 분화 방법
CN1882687B (zh) 心肌细胞的增殖方法
Ichikawa et al. Inhibition of phosphodiesterase type 3 dilates the rat ductus arteriosus without inducing intimal thickening
CN101006055B (zh) 作为酪蛋白激酶Iε抑制剂的3-取代的-5-和6-氨基烷基吲哚-2-羧酸酰胺以及相关类似物
US20230364153A1 (en) Method for direct reprogramming from somatic cells into pancreatic beta cells by using microrna, and differentiation composition
TW202320817A (zh) 用於治療癌症的方法和組成物
KR102466691B1 (ko) Tsg6 억제제를 포함하는 전이성 고형암 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20070323

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20070323

A762 Written abandonment of application

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A762

Effective date: 20071120