JPS6327434A - ガングリオシドを含有する医薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 本発明は、抗腫瘍剤によって引き起こされる神経毒作用
に対して保護作用を有することが証明された、ガングリ
オシド類の混合物、並びにその単一のフラクション（分
画）を含有する特定の組成物に関するものである。

ガングリシドは複雑な糖脂質分子の一族（ファミリー）
であって、細胞膜、特に神経細胞の細胞膜を構成する天
然の膜成分であり、神経細胞の発達、分化および再生の
過程に関与しでいる。

外因性のガングリオシドは、安定に、神経細胞の細胞膜
に導入される〔トファノら（Ｔｏｆｆａｎｏ。

Ｇ、）（１９８０）：ジャーナル・オブ・ニューロケミ
ストリイ（Ｊ、　Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、　）　　３５　
（４１８５１〜８６６：アポルテイら（Ａｐｏｒｔｉ　
Ｆ、　）（１９８１）アクタ　オトーラリンゴロジカ（
Ａｃｔａ　Ｏｔｏ−Ｌａｒｙｉｎｇｏｌｏｇｉｃａ　）
　９２　４３３−４３７３゜この導入に伴なって、酵素
的な細胞膜系（Ｎａ＋、Ｋ＋）　ＡＴＰａｓｅ　　（そ
の活性は、神経のインパルス（活動電位）の伝達Ｅこ必
須である〕が賦活化される。

酵素的な導入と賦活化は、インビトロ〔レオンら（Ｌｅ
ｏｎ　Ａ、　）　（１９８１）ジャーナル・オブ・二二
一口ケミストリイ（Ｊ、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、　）　３
７　（２１３５０〜３５７〕およびインビボ〔アポルテ
イら、（１９８１））の両者で証明された。

ガングリオシドは、糖スフィンゴ脂質として知られでい
る生物学的な化合物の仲間に属する酸糖脂質である。こ
れらは、４つの基本的な構造単位から成っている。即ち
、それは１個の長いアミノアルコール鎖、１個の脂肪酸
、１つのオリゴ糖分画、詔よび１またはそれ以上のシア
ル酸残基から成っている。

脳内のガングリオシド中に存在する長いアミノアルコー
ル鎖は、４−スフィンゴシン類、マたその最長鎖同族体
は、４−エイコサスフィンゲニンと同定することができ
る。これらの化合物は、−般にスフィンゴシン類としで
知られている。

Ｃ ｌ （ＣＨ２）ｎ−ＣＨ５ ｎ＝１２　：　４−スフィンゲニン ｎ＝１４　：　４−エイコサスフィンゲニンガングリオ
シド類には、対応する飽和化合物（スフィンゲニン類）
も、少量存在している。

１つの脂肪酸が、フ゛スフィンゴシン塩基とアミド結合
によって結合する。脳内ガングリオシドの場合、この脂
肪酸の９５％がステアリン酸（１８：０）である。その
他の脂肪酸はもつど低い割合で存在しでおり、それらｌ
どは、例えば、アラキドン酸（２０：Ｏ）、パルミチン
酸（１６：０）またはパルミトレイン酸（１６：１９）
が含まれる。

アミノアルコールと脂肪酸とが結合することにより、ガ
ングリオシド分子の疎水性部分である、セラミドと称さ
れる１つの単位が形成される。

このセラミドに結合したオリゴ糖鎖が、ガングリオシド
をも含む、糖スフーインゴ脂質の、膨大ζ数の族を特徴
付ける。スフィンゴ脂質は、セラミドに最初に結合した
炭水化物の種類ノに基づいて２つのサブグループに分類
される。第１の、そして小さいサブグループは、ガラク
トシルセラミドから導かれる。大多数の糖スフィンゴ脂
質、従って、事実止金てのガングリオシドはグリコジル
セラミドから導かれるサブグループに属する。

脳ガングリオシドに含まれでいるシアル酸は主としでＮ
−アセチル型をとっているが、いくつかのガングリオシ
ド種では、Ｎ−グリコリル型のものも認められている。

この残基は、通常、ノイラミン酸（ＮＡＮＡまたはＮＧ
ＮＡ）として知られでいる。

ＯＯＨ ガングリオシドの親水性はオリゴ糖鎖、並びにこの鎖と
結合しているシアル残基の数に基づいて０する。

ガングリオシドの分布： ガングリオシドは、脳天白質中に最も高濃度で見い出さ
れでおり、灰白質の湿重量（ｇ）あたり、約２．５μｍ
ｏｌのＮＡＮＡ（乾燥重量の約０．４％、総脂質の０．
６％）が含有されている〔レデーン（Ｌｅｄｅｅ’ｎ、
Ｒ，）、サルスフ　　（Ｓａｌｓｍａｒ、に、　）、カ
ブレラ（Ｃａｂｒｅｒａ　、　Ｍ、　）　　ジャーナル
・オブ・リピッド・リサーチ（Ｊ、　Ｌｉｐｉｄ　Ｒｅ
ｓ、）　９１２９　（１９６８））。哺乳類の脳から得
た全ガングリオシドの内、約９０％は、同一のオリゴ糖
配列を有する４種類のガングリオシドで構成されている
。

Ｇａ１（β１−”３）ＧａｌＮＡｃ（β１→４）Ｇａｌ
（β１→４）Ｇｌｃ（β１−＋１）Ｃｅｒ 哺乳類の脳内ガングリオシドの残る１０％には、末端の
ガラクトースを欠失した、あるいは、ガラクトシル−Ｎ
−アセチルガラクトサミン単位を失なったガラクトシド
が含まれる〔スベネローム（ＳｖｅｎｎｅｒｈｏＪｍ　
Ｌ、　）　％　７ンソン（Ｍａｎｓｓｏｎ　　Ｓ−）、
す（ＬｉＹ、）ジャーナル・オブ・ザ・バイオロジカル
・ケミストリイ（Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、）２４
８　７４０（１９７３））。

ガングリオシド類の構造と命名： 脳内ガングリオシドを、クロマトグラフィー法によっで
単離精製した。最初に、ＧＭｌ　　ガングリオシドの構
造を決定した。ＧＭｌ　ガングリオシドの構造は、哺乳
類の脳内に存在しでいる４種類の主要なガングリオシド
に共通していることが分った。以下に示す構造はＧＭｌ
の構造であり、１つの例として示したものである。表１
に、４種類の主要な、哺乳類の脳内ガングリオシドを示
す。

表　１４種類の主要な、哺乳類の脳ガングリオシドの構
造 米　スベネローム（Ｓｖｅｎｎｅｒｈｏｌｍ　Ｌ、　）
、（１９６３）：ジャーナル・オブ・二二一ロケミスト
リイ（Ｊ、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、　）　１０　６１３本
発明は、抗腫瘍製剤、特にビンカアルカロイド類による
神経毒作用を処置および治療する方法であって、次の割
合： ＧＭｌ　：　　２１％ ＧＤ１ａ：４０％ ＧＤ１ｂ：　１６％ ＧＴ１ｂ＝　１９に で、ＧＭ　　、　ＣＤ　　１ａ、ＧＤ　　およびＧＴ１
ｂを含有１　　　　　　ｔａ　　　　　　 １ｂするガングリオシド混合物である組成物を生産し、
上記の処置および治療を行う方法を提供することを目的
とするものである。

また本発明は、抗腫瘍剤、特に、ビンカ系の抗腫瘍剤ア
ルカロイドの細胞毒作用に対して防御作用を有するガン
グリオシド混合物または、その単一の分画を含有する医
薬組成物を提供することを目的とするものである。より
詳しくは、この組成物とは、上記の組成比率（％）でガ
ングリオシドＧＭ　１ＧＤ１ａ１ａ、ＧＤ１５およびＧ
Ｔ１５　を含有しでいる混合物を意味する。該組成物は
抗腫瘍剤による細胞毒性に対する保護作用を有しでおり
、化学物質による抗腫瘍治療における毒性副作用を治療
し、解消するのに有用である。

また本発明は、抗新生物（抗腫瘍）剤の投与に起因する
全身的な毒作用または慢性的な神経毒作用の予防に役立
つ医薬を提供することを目的とするものである。

また本発明は、抗腫瘍剤の連続投与によって起きる全身
的な毒作用または慢性的な神経毒作用の防止または予防
を目的とする医薬の製造に、ガングリオシド混合物、特
に、ＧＭ　　ＧＤ　１ＧＤ１ｂ１％　　　　Ｉａ およびＧ１□ｂの混合物を用いる方法を提供することを
目的とするものである。

既述の如く、ガングリオシドは、細胞膜の天然の成分で
ある、複雑な糖脂質分子の１族である。

ガングリオシド類が、主に神経細胞の細胞膜に伴なって
存在しているならば、ガングリオシドは、これらの膜を
通しての情報の伝達に一役を担っている可能性がある、
との示唆がなされた〔フィッシュマン（Ｆｉｓｈｍａｎ
　）とその共同研究者、（１９７６）サイエンス（５ｃ
ｉｅｎｃｅ　）　１９４　９０６−９１５Ｊ。

この仮説に対する支持は、これらの分子を含有している
細胞膜によって媒介される事象Ｉこ関する一連の観察に
より得られた。その様な観察には、神経細胞の発達〔デ
ィンフェル（Ｄｉｍｐｆｅｌ　Ｗ・）とその共同研究者
：［神経学的並びに神経筋の機能、発達および修復にお
けるガングリオシド（Ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ　ｉｎ
　Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ　　ａｎｄＮｅｕｒｏｍｕ
ｓｃｕ１ａｒ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ％Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅ
ｎｔ　ａｎｄＲｅｐａｉｒ）　Ｊラポート（Ｒａｐｐｏ
ｒｔ　）　　およびゴリオ（Ｇｏｒｉｏ　）、ラベン（
Ｒａｖｅｎ　）プレス１１９−１３４．１９８１　）、
神経細胞の分化〔レオン（Ｌｅｏｎ　Ａ、　）　　とそ
の共同研究者：「増殖と発達にあける膜（Ｍｅｍｂｒａ
ｎｅｓ　ｉｎ　Ｇｒｏｗｔｈ　＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎ
ｔ　）ホフマン（Ｈｏｆｆｍａｎ）　　とその共同研究
者、３１１〜３２０．１９８１３、および神経細胞の再
生〔ゴリオ（Ｇｏｒｉｏ　Ａ、　）とその共同研究者（
１９８１ａ）：　　ｒ神経学的および神経筋の機能、発
達および修復におけるガングリオシド（Ｇａｎｇｌｉｏ
ｓｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ
Ｎｕｒｏｍｕｓｃｕ１ａｒ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ、Ｄｅｖ
ｅｌｏｐｍｅｎｃ　ａｎｄＲｅｐａｉｒ　）　、ラポー
トおよびゴリオ、ラベン出版、１７７〜１９５〕が含ま
れる。

非経口的に用いるために精製されたガングリオシドＧＭ
　１ＧＤ　　ＳＧＤ　およびＧＴ１ｂの混合１　　　　
　１３　　　　１ｂ 物は、神経細胞の増殖を増強することにより、神経再支
配を刺激する作用を有することが分った〔ゴリオら（Ｇ
ｏｒｉｏ　Ａ、　）　（１９８０）　ニブレイン・リサ
ーチ（ＢｒａｉｎＲｅｓ、）　１９７　２３６〜２４１
〕。神経の神経細胞増殖促進作用は、インビトロでの神
経細胞組織モデル〔ロイセンら（ＲｏｉｓｅｎＦ−Ｊ、
）（１９８１）：サイエンスυ１５７７〜５７８；ハウ
ら（Ｈａｕｗ　Ｊ−Ｊ−）（１９８１）　：’ニューロ
フイジオーロジエ（Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏ−１ｏｇｉ
ｅ、）Ｃ，Ｒ，Ａｃａｄ、Ｓｃ、　　パリ、　２９２　
　（８）５６９〜５７１〕　並びにインビボでの神経除
去動物モデル〔ゴリオら、「プレイン・リサーチＪ　１
９７２３６〜２４１　；ゴリオら（Ｇｏｒｉｏ　Ａ、　
）　（１９８１）　ｒ神経系の再生（Ｎｅｒｖｏｕｓ　
ｓｙｓｔｅｍ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）先天性欠損
（Ｂｉｒｔｈ　Ｄｅｆｅｃｔｓ）　　：オリジナル記事
シリーズ（ｏｒｉｇｉｎａｌ　ａｒｔｉｃｌｅ　５ｅｒ
ｉｅｓ　）　Ｊ肥（４）１５７〜１７４　（１９８３）
ハバーら（Ｈａｂｅｒ　Ｂ、　）　］の両モデルにおい
で確認された。

インビボ実験の動物モデル（坐骨神経の破壊によりラッ
トの堅牢ｒｌ　（ｆａｓｔ　）筋肉を脱神経し、神経板
Ｌ５の切除または転位（脱臼）によりラットの堅牢な足
底筋肉を部分的に脱神経して得た）に、外因性のガング
リオシドを投与（５〜５０■／に９／日の静注）すると
、処置後、副軸索神経の増殖が増大し、機能の回復が迅
速化されることが証明された。

ガングリオシドを用いた治療により、損傷された神経の
回復が迅速化されるという、機能的、かエクスペリエン
ティア（Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ　）　３７３０１〜３
０２）；騒音処理後の鍋中管機能の低下〔アポルテイら
（Ａｐｏｒｔｉ　Ｆ、　）（１９７７）ヌーボ・アーク
・オトル・リノル・ラリンゴル（Ｎｕｏｖｏ　Ａｒｃｈ
、　０ｔｏ１．　Ｒｉｎｏｌ、　Ｌａｒｉｎｇｏｌ、　
）５（１）２５〜３２〕　；遺伝的な糖尿病マウスにお
ける糖尿病性神経障害ｆノルデイオら（Ｎｏｒｉ・ｄ。

Ｆ、）？ッスル・アンド・ナーブ（Ｍａｓｃｌｅ　ａｎ
ｄＮｅｒｖｅ　）　５　１０７〜１１０　（１９８２）
　］　：神経毒の毒性作用〔アポルテイら（１９８１）
　　アクタ・オトラリンゴロギヵ（Ａｃｔａ　Ｏｔｏ１
ａｒｙｎｇｏｌｏｇｉｃａ）９２　４３３〜４３７　（
１９８１）：　　マロニら（Ｍａｒｏｎｉ　Ｍ−）臨床
毒物学（Ｃ１Ｃ１１ｎｉｃａｌＴｏｘｉｃｏｌｏ　）　
１８　（１２）　１４７５〜１４８４　（１９８１））
等の様々な動物モデルにおいて実証された。これらの実
験データーに基づき、ガングリオシドＧＭ　　、ＧＤ１
ａ、ＧＤ１ｂおよびＧＴ１５の混合物は、広範囲に及ぶ
末梢神経系に影響する副作用を治療する上で有用であり
、その様な部位の神経の再支配を刺激し、迅速化するこ
とができると考えられる。

さらに、このガングリオシド混合物は、抗腫瘍剤一般、
とりわけ、ビンカ類から得られたアルカロイド類による
神経毒作用に対する保護作用において有用であることが
分った。この結果は、本発明の目的に適うものである。

誘導 上記の如く、ガングリオシドは広在性の膜成分であって
、その大部分は、原形質膜の脂質層の葉−状部外方に存
在している〔レデーン（Ｌｅｄｅｅｎ　Ｒ。

）（１９８４）：チンス（ＴＩＮＳ）８　１６９〜１７
４〕。

ガングリオシドが制御事象と、細胞認識に関与している
ことは文献からよく知られでおり、このことは、それら
が、細胞の発達と分化に関与していることを実証しでい
る。また、腫瘍形成に際しでは、細胞表面の糖スフィン
ゴ脂質（従って、ガングリオシド）に重大な変化が起き
ることが分っている。これらの結果に基づいて、ガング
リオシドは、増殖の制御、分化および細胞間の相互作用
〔ハコモリ（Ｈａｋｏｍｏｒｉ　Ｓ、）　（１９８１）
　：アン・レブ・バイオケム（Ａｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ、　）　５０７３３〜７６４〕　に何らか
の役割を果しでいることが予測される（まだ充分に明ら
かにされていない）。

実際、胚性の、および組織の発達と分化の際；こは、遺
伝的なプログラムによってコードされてぃる細胞表面の
分子の連続的な変化により、細胞間相互作用は媒介され
ている。この過程の間に、細胞表面のガングリオシド含
有量と複雑さに相依存性の著し０）変化が起きる。

その様な状況ｔこついての幾つかの例を以下に示す。

ａ）ＣＮＳ（中枢神経系）１こおける破傷風毒素の結合
部位の発現〔コウラコツフら（Ｋｏｕ１ａｋｏｆｆＡ、
）（１９８３）：デベロツプ・バイオ口（Ｄｅｖｅ！ｏ
ｐ、　Ｂｉｏｌ、）　１００　３５０〜３５７３および
コレラトキシンの結合部位の発現〔ライリンガ−（Ｗｉ
　ｌＩＩｎｇｅｒ　Ｍ、　）　　およびシャツヒナ−（
Ｓｃｈａｃｈｎｅｒ　Ｍ、　）　（１９８０）　：デベ
ロツプ・ノ＜イオ０７４１０１〜１１７〕　は、分裂終
了後の神経細胞においでのみ起きる。

ｂ）腸上皮細胞（こおいで、未分化細胞にはＬａｃ−Ｇ
ｅｒとＧｌｕ−Ｇｅｒとが存在し、６Ｍ３が存在してい
ないという特徴があり、分化した細胞には高濃度の６Ｍ
３　が存在しでいるという特徴がある〔レデーンＲ，（
１９８４）　　チンス８１６９〜１７４Ｊ。

Ｃ）マクロファージ内でアミロイド細胞の分化を誘導す
るとＧ　Ｍ　１　ｂの顕著ζ増加が認められる。

これらの例、並びに、細胞と細胞との接触時におけるガ
ングリオシドの修飾の如く、本明細書に記載されでいな
い他の例は、細胞表面における特定のガングリオシドの
発現が、増殖段階から非増殖段階への細胞プログラムの
切り換えと関連していることを示唆しでＯ）る〔コウラ
コツフら（Ｋｏｕ１ａｋｏｆｆ　Ａ、　）　（１９８３
）　：　　デベＣ１ツブ・バイオ口１００　３５０〜３
５７〕。　ざらに、それらの発現が、細胞−細胞相互作
用、細胞の移動および細胞の分化を規定しでいる可能性
もある。

後者は、増殖性の細胞〔例、３Ｔ３細胞、神経芽細胞腫
、芽細胞腫等〕または非増殖性細胞（例、−次神経細胞
）の培養物に外因性のガングリオシドを加えることから
なるインビトロ実験によって支持された。あらゆる場合
において、外部から加えられたガングリオシドは、細胞
の分化を促進した。増殖性細胞の場合Ｅこは、この効果
は、増殖の減少を伴なった（下記参照〕〔ハバー（Ｈａ
ｂｅｒＢ、　）およびゴリオ（Ｇｏｒｉｏ　Ａ、）編（
１９８４）ニジエイ・ニューロサイ・レス（Ｊ、Ｎｅｕ
ｒｏｓｃｉ。

Ｒｅｓ、　）　） ガングリオシドが細胞増殖制御に一役を担っている可能
性は、以下のことから、示唆されている。

ａ）特定のガングリオシドの合成は、細胞増殖の「接触
阻害」に関連して大０１に促進される〔レデーン（Ｌｅ
ｄｅｅｎ　Ｒ，）　（１９８４、ＴｌＮ５８１６９〜１
７４　））。

ｂ）ガングリオシドの合成は、分化性試薬によって細胞
分裂を停止されたり、形質転換した細胞に導かれた場合
には増大する〔レデーン（１９８４ＴＩＮＳ　　８　１
６９〜１７４〕。

ｃ）ＧＭ１　等のガングリオシドを外部から加え、それ
が原形質膜に取り込まれると、細胞増殖が阻害され、接
触阻止が誘導される。この作用は多くのセルラインにお
いて観察されでいる（即ち、３Ｔ３、神経芽細胞腫、芽
細胞腫）〔ハバーＢ、およびゴリオＡ１編（１９８４）
ジエイ・ニューロサイ・レス；レデーンＲ９らｍ（１９
８４）：　　アドバ・エクスペリ・メト・アンド・バイ
オ口（Ａｄｖ・Ｅｘｐｅｒ、　　Ｍｅｄ、　　ａｎｄ　
　Ｂｉｏｌ、　）　１７４　　）。

この様に、ガングリオシドの合成は増殖の停止時］こ増
大する。その上、外部からガングリオシドを補給するこ
とによって細胞増殖を停止または遅延させることができ
る。この後者の効果が、細胞毒性となんら関連していな
いと０）うことは注目に値する。

細胞表面におけるガングリオシドのパターンの変化は、
種々のタイプの腫瘍細胞Ｅこおいて、また、様々な悪性
形質転換物質に対する特異的応答として認められており
、従って、形質転換に常に付随して起こる一般的な状況
であると考えられる〔）・コモリ（Ｈａｋｏｍｏｒｉ　
Ｓ、　（１９７５）　　：バイオチム・パイオフィス・
アクタ（Ｂｉｏｃｈｉｍ、　Ｂｉｏｐｈｙｓ。

Ａｃｔａ　）　４１７　５５−８９　Ｊ。

腫瘍形成性の形質転換の間に、ガングリオシドをも含め
て、細胞表面の糖脂質には、基本的（こ３つのカテゴリ
ーに入る変化が生じる。即ち、糖脂質分子の不完全な合
成、新規合成（ｎｅｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）並びに組織
的な膜転位が起きる〔ハコモリ（Ｈａｋｏｍｏｒｉ　Ｓ
、）　（１９８４）　：　ＴｒＢＳ　　１０４５３〜４
５８〕。不完全な合成によって蓄積される前駆体、およ
び新規合成によって形成されるネオ糖脂質（通常、重要
でない糖脂質またはガングリオシド）の両者は、それが
前駆細胞の細胞表面メこ検出されない場合には「腫瘍に
関連したＪ抗原性の発現であると考えられる。しかも、
これらの腫瘍関連性の抗原は、時折、特徴的に通常と異
るセラミド組成を有しでいる。

報 ビンクリスチンは広範囲に用いられている抗腫瘍剤であ
り、白血病、リパ腫および一般の、進行したがんの治療
に用いて奏効している〔ホランドら（Ｈｏｌ１ａｎｄ　
Ｊ、　Ｆ、）　（１９８３）　：キャンサー・リサーチ
（Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　）　３３　１２５８〜１２
６４）。様々な腫瘍性病理学においてビンクリスチンを
広範囲に用いる場合の主たる欠点は、その毒性が高いこ
とにある。なかでも、重要な副作用の１つは、末梢神経
毒性および自律神経毒性症状によって始まる。

ニューロバシイは、通常、肺反射の喪失、知覚障害、筋
肉痛および筋肉衰弱叡便泌および腹痛として現れる。こ
の神経毒性により、腫瘍病理学的症状の治療に必要な用
量、並びに投与が制限され、しばしば、薬物投与の停止
を招く〔アーノルドら（Ａｒｎｏｌｄ　Ａ、　Ｍ、）（
１９８５）　：ランセット（Ｔｈｅ　Ｌａｎｃｅｔ　）
　Ｆｅｂ、　９　ｔｈ　）。

ビンカアルカロイドの抗有糸分裂作用の機序は、微小管
が集合して紡錐系を形成することを妨害することにある
。この微小管崩壊作用は実験動物においてみられる軸索
と神経細胞の形態学的な変化（それは、軸索の焦点的な
膨潤、ニューロフィラメントの無秩序な蓄積で表わされ
る）チョウら（Ｃｈｏ　Ｅ、Ｓ、　）　（アーク・トキ
シコル（ＡｒｃｈＴｏｘｉｃｏｌ、）　５２　８３〜９
０）、並びにニューロン内の微小管クリスタロイド封入
体の存在〔サトウ（５ａｔｏ　Ｍ、　）　　ミヨシ（Ｍ
ｉｙｏｓｈｉ　Ｋ、　）　　（１９８４）：アクタ・ニ
ューロパシー（ＡｃｔａＮｅｕｒｏｐａ　ｔｈｏ　Ｉ。

６３　１５０〜１５９　）によって示される。電気生理
学的観点からみると、マツフレオド（ＭｃＬｅｏｄ　）
およびベニ−（Ｐｅｎｎｙ　）　（ジエイ・ニューロル
・ニューロサーブ・サイキアト（Ｊ、　Ｎｅｕｒｏｌ、
　Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ、　Ｐｓｙｃｈｉａｔ、　）　３
２２９７〜３０４．１９６９）、並びにギヘニュークら
（Ｇｕｉｈｅｎｅｕｃ　）　　（ジエイ・ニューロル・
サイ（Ｊ、Ｎｅｕｒｏｌ、　Ｓｃｉ、　４５　３５５〜
３６６　（１９８０）］は、ヒトを対象とする研究にお
いて、ＶＣＲで誘導したニューロパシーはグイイングバ
ック（ｄｙｉｎｇ　−ｂａｃｋ　）型であり、遠位の、
老化した軸索の退化に関連していることを示した。これ
らの遠位軸索の退化の過程で、標的筋肉の部分的脱神経
が起きる。この様ζ状況の下、生命力のある軸索によっ
て副軸索の萌芽現象の形で修復性の配列が現われ、萎縮
しでしまった軸索が放棄した標的を、再び神経で支配し
ようとする生物の作用がみられる〔ブラウンら（Ｂｒｏ
ｗｎ　Ｍ、　Ｃ，）　　（１９８１）：アン・レブ・ニ
ューロサイ（Ａｎｎ。

Ｒｅｖ、　　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、　４　１７〜４２　３
゜マツフレオドとベニ−（１９６９）は、ＶＣＲ治療の
中断後に、これらの生理学的な修復過程の効力が回復し
、神経線維が迅速に再生されることを見い出した。他方
、実験動物に対するガングリオシド混合物（登録商標ク
ロナツシャル、ＣＲＯＮＡＳＳＩＡＬ　）を非経口投与
すると、神経の発芽を容易ならしめるという作用機序を
介しで、末梢神経の修復工程が刺激されることもよ（知
られている〔ゴリオら、（１９８０）：ブレインリサシ
ャル２製剤は、様々な末梢神経の異常の治療に推せんし
得るものであって、その臨床上の利点は、神経支配の修
復を刺激し得ることにあることが分った。その様な末梢
のニューロパシーには、腫瘍形成の治療に用いられたビ
ンカアルカロイドによる医原性ニューロパシー等の毒作
用型の症例が含まれる。

ビンクリスチン誘導ニューロパシーに関する特定の分野
において、ダントナら（Ｄａｎｔｏｎａ　）　　（１９
７８）Ｃリビスタ・サイエンテイフイ力・工・エデュカ
ジオン・パルマネンテ（ＲｉｖｉｓｔａＳｃｉｅｎｔｉ
ｆｉｃａｅｄ、　Ｅｄｕｃａｚｉｏｎｅ　Ｐｅｒｍａｎ
ｅｎｔｅ　）（５ｕｐｐ１．９　）　　１５５〜１５８
　）は、ビンクリスチンによって誘発された４０名の一
連の急性神経毒症候群患者に関しで記載しでいる。これ
らの患者はクロナツシャルＲを２０ｍ９／日の用量で２
０日間投与された後、１０’Ｗ／日の用量でさらに１０
日間投与された。特に患者の症状について注意を払って
規則的に患者と面会した結果、患者の５７゜５％が主観
的に、有意な程度の改善があったことを報告した。特に
、感覚異常症状は治療開始後４日目という早さで治まっ
ていることが分った。この非対照調査研究に引き続き、
少数の患者における対照試験が行われた。

アに（Ａｚｚｏｎｉ　）は、７名のクロナツシャルＲ治
療ｆこ係る患者を、７名の非治療比較患者と並行させで
研究した［１１ポリクリニコ、セズ・メゾイカ（１１Ｐ
ｏ１ｉｃｌｉｎｉｃｏ、　Ｓｅｚ、　Ｍｅｄｉｃａ　）
　８５（４１２５５〜２６２（１９７８））。治療群の
患者には、腫瘍形成異常を強調するためにビンクリスチ
ンの同時投与を行Ｑ）ζから、クロナツシャルＲを２０
ｍ９／日で、４〜６週間筋ａ　（ｉ　、ｍ、　）投与し
た。

治療効果を、４種類の主要な神経学的な変化に関する兆
候を採点することにより、監視した。それらは、感覚異
常、アキレス腓反射の消失、足の背屈力、並びに腸機能
の異常である。治療川明を終了した後、点数の低い患者
を考慮して兆候スコアーをアルミターシュ（Ａｒｍ１　
ｔａｇｅ　）の連続分析法により、解析した。この解析
の結果、クロナツシャルＲ治療は、用いた用量レベルに
おいで、中程度の神経毒症状（感覚異常およびアキレス
所反射の消失）の発現を防止する効果のあることが分っ
た。

本発明の実験的な研究 クロナッシャルＲ１こ含有されでいるガングリオシドと
ビンクリスチンとの、物理−化学的、または生物学的相
互作用を排除すると共に、ビンクリスチンの抗腫瘍活性
がクロナツシャルＲの同時投与によって損なわれる可能
性を調べるために、ビンクリスチンとガングリオシドの
同時投与に係る動物を用いて様々な実験を行った。特に
、１、急性および慢性毒性、 ２、抗腫瘍効果 について調べた。

１　ビンクリスチンの急性毒性に対するガングリオシド
の効果 動物：標準的な飼育用の艦内に、８匹を越えなり）マウ
スを１群として割当でた。食物と水は随意に与えた。動
物の飼育は、条件を厳格にコントロールした室内で行っ
た。

薬物：ビンクリスチン１〜を希釈し、０．１ｍＱ／菌蒸
留水を加えで調製した。この用量を、体重約２０ｇのマ
ウスに投与した。

結果 結果を表２に示す。この表から、ガングリオシド混合物
は、ビンクリスチンの１回静注投与による急性毒性の防
止作用を示さないことが分る。

表２　マウスにおける、ビンクリスチン、並ひにビンク
リスチン＋ガングリオシド投与による急性の死亡 目的：抗腫瘍製剤の毒性軽減作用 投与量　投与経路　３００日目　３００日目〜／ＫＳ１
　　時間　死亡例　死亡率（％）ビンクリスチン　　３
．Ｏｅ、ｖ、　　　　　　２／８　　　２５ビンクリス
チン　　３．Ｏｅ、ｖ。

十 ｉｐ投与 ２、　ビンクリスチンの慢性毒性に対するガングリオシ
ドの効果 ３０ｇの雄性ＣＤ−１（ＩＣＲ）ＢＲマウス（チャール
ス・リバー、イタリア）を用いた。マウスは１０匹を１
群として檻に入れ、これを、標準的な実験用の配合飼料
と水道水を随意、摂取させて飼育した。恒温（２１°±
１℃）で相対湿度６０％の室内で、明／暗サイクルをコ
ントロールしながら（明：午前８時〜午後８：００）動
物を飼育した。

ビンクリスチン硫酸塩（リリイ、Ｌｉ１ｌｙ）を生理食
塩水に溶かして１０　ｍｌ　／　”９の投与量で静注（
ｉ、ｖ、）Ｌ、他方、ガングリオシドを０．８ＸＮａＣ
／含有りん酸バッファー（０，０１Ｍ、　ｐＨ７，５）
に溶かし、ｓｍＱ／Ｋｆの投与量で筋注（ｉ、ｍ、）投
与した。

ガングリオシド混合物（またはビヒクル）を、連続５日
間、種々の投与量（５０，１ｏＯおよび２００Ｉｎ９／
Ｉ’ｆ）で毎日筋注投与し、このガングリオシド（また
はビヒクル）による最後の処置から５時間後に、ビンク
リスチンを、投与量２，４η／即および２．６η／〜で
静注投与した。

ガングリオシドｌζよる後処置 ビンクリスチンによる連続５日間の静注処置の５時間前
Ｅこ、ガングリオシド混合物（またはビヒクル）を、用
量２００η／即で筋注投与した。

ビンクリスチンの投与量は２．２．２．４および２゜６
η／　Ｋｇであった。

死亡率は、ビンクリスチン処置の、最初の１４日以内に
死亡した動物の数で評価した。

死亡率の統計上の有意性は、フィッシャーの厳格な確率
試験（Ｆｉｓｈｅｒ’ｓ　ｅｘａｃｔ　ｐｒｏｐａｂｉ
ｌｉｔｙｔｅｓｔ　）に基づいて評価された。

結果 試験結果を第３表と第４表に挙げ、更に第１図に於いて
グラフで表わす。ビンクリスチン投与後の死亡率曲線に
基づいて、投与量２〜３〜／Ｋｔｉを選別し、ガングリ
オシドの調査を行った。最初の実験では、ビンクリスチ
ン注射前と注射後に於けるガングリオシド処置の効果を
比較した。

後処理の場合、ガングリオシドの前処理によるビンクリ
スチン毒性を低下させる効能が最後のガングリオシド注
射によってのみ増大しかねない可能性を排除するために
、ガングリオシドの投与は単回投与で行なった。

第１図に示されているように、ビンクリスチン毒性の低
下は、ガングリオシド混合物をビンクリスチン注射の後
ではなく、注射前に、半持続的（亜慢性的、５ｕｂｃｈ
ｒｏｎｉｃａｌｌｙ　）に投与した場合に認められた。

この効果は、ガングリオシドを最大用量（２００η／即
）で使用して得られた。ガングリオシド混合物をこれよ
りも低い用量で投与した場合にも、第３表に於けるガン
グリオシド１００〜／９とビンクリスチン２．６■／へ
との処置群での異常な死亡率を除き、ガングリオシドの
防御作用の用量依存性を認めることができた（第３表）
。

更に、ガングリオシド２００　ｑ／Ｋｐ用量を用いて各
種の実験を行なった。これに関連するデータは第４表に
示す。

第３表 ビンクリスチン（ＶＣＲ）の急性致死毒性に対する、各
種投与量のガングリオシドによる半持続的前処理の効果 ＊：筋注、＊＊：静注 第４表 ビンクリスチン（ＶＣＲ）の急性致死毒性に対する、ガ
ングリオシドｆこよる半持続的前処理（２００η／　Ｋ
ｇ、筋注）の効果 の抗腫瘍活性 原材料および方法 種々の腫瘍としで、以下の系統を実用した：・肉腫５１
８０に関する実験では、スイス・シュネイダ−（Ｓｗｉ
ｓｓ　５ｃｈｎｅｉｄｅｒ　）雄マウス（体重２７ｇ）
を使用した。

・黒色腫Ｂ１６に関する実験では、０５□Ｂ１雌マウス
（体重２０ｇ）を実用した。

・白血病Ｌ１２１０　　に関する実験では、ＢＤＦ□雄
マウス（体重３０ｇ）を実用した。

・ルイス肺に関する実験では、０５７Ｂ１マウス（体重
２０ｇ）を実用した。

腫瘍： 肉腫５１８０；この腫瘍は、本研究所に於いて、１０年
間にわたり、同系のマウスに移植されで来た。この移植
は、２６ゲージ針に繰返し通して無菌のペトリ血に流入
させた生存能力のある腫瘍組織を、細かく粉砕して作成
した腫瘍ホモジネート０、１　ｍＱを皮下に接種するこ
とにより行なった。この溶液には、ペニシリン（２０，
０００ｕ／ｒｎＱ　）とストレプトマイシン（２０，０
００ｕ／ｍＲ）とを０．１　ｄ加え、更にネオマイシン
５〜も加えた。

黒色腫８１６；この腫瘍は、肉腫５１８０の場合と同じ
接種法によって調製した。

Ｌ１２１０　；　　動物にＬ１２１０　細胞を接種して
７日後に該動物から肺臓を取り出し、次いてこれを等張
性食塩水と共に粉砕した（１：１００）。次に、この肺
臓と白血病細胞Ｌ１２１０　　との懸濁液を、ＢＤＦエ
マウスの各々の脇腹ｆこ皮下注射した。

の場合と同じ接種法によって調製した。

薬剤： る標準的バイアルを使用した。これを適量の希釈溶液を
用いて調製し、０．１　ｍＱ／体重Ｌｏｇで注射するの
に必要な最終濃度にした。

グリオシトの混合体であるこの物質の溶液を、用量０．
２−中に２ｏｏｒｒｙｉ／に９の濃度を得るのに十分な
量の滅菌蒸留水を加えることで調製した。この用量で、
体重約２０ｇのマウスｆこ投与する。

結果 これらの試験結果を第５表に示す。

腫瘍５１８０、Ｂ１６およびＬ１２１０で試験した、ク
ロナツシャル投与および非投与のビンクリスチンの作用
成積により、クロナツシャルはビンクリスチンが当然有
している抗腫瘍活性を妨害しないことが判明した。この
ことは腫瘍の平均重量、平均生存期間の点でその増殖が
阻害されでいることから明らかである。

これに対し、白血病Ｌ１２１０　で得られた成積は、平
均生存期間がビンクリスチン単独の７．８日と比較しで
、クロナツシャル併用では１０．３日になっていること
から、ビンクリスチンのみの毒性により誘起される死亡
率が、クロナ・ンシャルを投与した場合に低下しでいる
可能性があり、Ｌ１２１０に対するビンクリスチンの効
果が増強されて０することを示しでいる。上記７．８日
と１０．３日の差は、統計的に有意なものである。

医薬組成物 本発明に係る新規な治療適用法に於けるガングリオシド
製剤は、以下の比率で個々のガングリオシドを含有する
ものである： 個々のガングリオシド　　　　　　　重量百分率−ＧＭ
１　　　　　　　　　１９〜２３−ＧＤ１ａ　　　　　
　　　　　３６〜４４−ＧＤ１ｂ　　　　　　　　　１
４〜１８−ＧＴ１ｂ　　　　　　　　　　１７〜２１ひ
とつの優先的な製剤の具体例は、以下の°重量比のガン
グリオシドが各々−諸になって配合されているものであ
る： ＧＭ１−　２１％ ＧＤ１ａ−４０％ ＧＤ１ｂ−１６％ Ｇｖ１ｂ−１９％ 本発明に係る医薬組成物を製造するには、製剤に、全ガ
ングリオシド（ＧＭＩ＋ｃＤ１ａ＋ＧＤ１ｂ＋ＧＴ□５
）を９５％（乾燥重量で計算）の力価用量で含有させる
ことが好ましい。製造物は、至適ｐＨのリン酸媒質およ
び生理的体液と等張性の媒質を含有する、ひとつまたは
それ以上の薬学的）こ許容できる賦形剤または希釈剤と
一諸のガングリオシド化合物の溶液、あるいは該化合物
の凍結乾燥粉末とすることができる。各組成物の用量は
、ガングリオシド混合物１０〜１００■とすべきである
。

各々の投与量は、所望の効果および投与経路によって左
右される。例えば、標準的投与量１０〜１００ｍ９では
、１日当り、体重ＩＫｇに付き活性化合物０．１４３〜
１．４３ｍ９を投与するとよい。考えられる医薬組成物
をいくつか以下【こ示す：製造例１ 各々、ガングリオシド混合物を、 ＧＭ１　　　２１％ ＧＤ１ａ　　　４０に ＧＤ１ｂ　　　１６％ ＧＴ１ｂ　　　１９％ の割合で：１００Ｉｎ９含有させ、発熱性物質不含の滅
菌蒸留水のリン酸緩衝液（１）Ｈ７，６Ｍ／１００）を
十分加えて全量を：２ｍｌとした２ｍ２ノ＜イアル。

製剤例２ 各々、ガングリオシド混合物を、 ＧＭ１　　　２１％ ＧＤ１ａ　　　４０％ ＧＤ１ｂ　　　１６％ ＧＴ１ｂ　　　１９％ の割合で：１０ｍｇ含有させ、発熱性物質不含の滅菌蒸
留水のリン酸緩衝液（ｐＨ７，６Ｍ／１００　）を十分
加えて全量を：２証とした２ｍＱバイアル。

製剤例３ 各々、ガングリオシド混合物を、 ＧＭｏ　　　　２１％ ＧＤ１ａ　　　４０％ ＧＤ１ｂ　　　１６Ｎ Ｇ１１ｂ　　　１９Ｘ の割合で：２５■含有させ、発熱性物質不含の滅菌蒸留
水のリン酸緩衝液（ｐＨ７，６Ｍ／１００）を十分加え
て全量を：２ｍＱとした２ｍＱバイアル。

製剤例４ 各々、ガングリオシド混合物を、 ＧＭｌ　　　　２１％ ＧＤ１ａ　　　４０Ｘ ＧＤ１ｂ　　　１６％ ＧＴ１ｂ　　　１９％ の割合でニア５ｍｇ含有させた凍結乾燥バイアル、並ヒ
に、マンニトール７２５ｍ９を含有させ、発熱性物質不
含の滅菌蒸留水のリン酸緩衝液（ｐＨ７，６Ｍ／Ｚｏｏ
）を十分加えて全量を：２ｒｎＱとした溶媒用２ｒｎＱ
バイアル。

総括的結論と治療への使用 前記の試験から観察されたこの全身的な予防作用を、先
の研究で観察されたガングリオシド単独の神経ニューロ
ン修復効果と関連付けることはできないことから、ガン
グリオシド混合物を併用することによるビンクリスチン
の慢性毒性の予防作用を示した本試験機種は驚ろくへき
ものであった。

むしろ、従来のガングリオシドに関する知見に基づけば
、ガングリオシドはビンクリスチンの神、怪障害を予防
するが、もつと全身性の慢性毒性に起因する神経障害は
予防できないのではｆ、ｆＱ）かと考えられでいた。

ビンクリスチンの影響を最も強く受ける領域は、血液系
、胃腸系および神経系の３つの領域である。

他方、中枢または自律神経系を考えた場合、動物；こ於
けるビンクリスチンにより確定された死亡が、末梢また
は自律神経系に対する効果のみｆこその原因があると結
論付けることはできないことから、ガングリオシドの予
防作用を論するのは困難である。従って、このことは、
ガングリオシドがより全身的な作用機序によって機能し
でおり、従来の研究から予測されでｏまたものとは異な
るものであることを意味しτＧ）る。

更に、この作用は、他の抗腫瘍薬剤、例えばミトザント
ロン（ｍ１ｔｏｚａｎｔｒｏｎｅ　　）、　シスプラチ
ウム、メトトレキサート、アドリアマイシン、ダウノマ
イシンおよびシクロホスファミドなどの全身および神経
ニューロンに高度な毒性を示すもの；こ対しでも確認す
ることができた。注意しなければζらｆ１９）のは、ガ
ングリオシドがビンクリスチンの抗腫瘍活性をネガティ
ブに妨害せず、白血病実験の場合（こほこの薬剤に対し
ポジティブな活性を示してＧ）ることである。これらを
治療１こ適用する場合、以下の点に留意する必要がある
：（１）形質転換中の細胞系にガングリオシドを外部か
ら添加すると、細胞増殖が減少または減速し、細胞分化
が促進される。

（２）ガングリオシドの効果は細胞毒性的でなく、可逆
的である。

（３）ガングリオシドの抗増殖効果が、細胞の型（こ依
存し、増殖のための生長因子に対する相当する細胞の依
存性に左右されることもある。

他方、ビンクリスチンは、細胞の型および相当する生長
因子とは関係なく細胞増殖を阻害する。

しかし、その効果は、腫瘍化した、および腫瘍化してい
なＯ）両増殖性細胞（こ対する細胞毒性（こ基づくもの
である。従って、腫瘍性疾患にガングリオシド−ＶＣＲ
を併用するこさは、妥当ζことと考えられる。ガングリ
オシドにより、抗腫瘍薬剤としてのＶＣＨの投与量を少
なくすることができ、結果さしで正常細胞へのＶＣＲの
細胞毒性作用を減することができる。一方、Ｖ　ＣＲｆ
、ｌどの抗腫瘍薬剤を、腫瘍に冒されでいる患者（こ投
与すれば、重篤な副作用が出ることは周知のことである
。従つて、このような副作用（薬剤のより全身的な毒性
に基づく副作用）を減少させることが非常に属望されで
いる。

要約すれば、得られたデータは神経系に帰属されないこ
とから、予想とは異なっていることが証明され、むしろ
、これらは、ビンカ系列の細胞発育抑制剤の投与によっ
て誘起される全身的毒性の副作用に対する保護または予
防効果を確実に示唆している。このような作用により、
腫瘍増殖速度を低下させるのｌζ十分な高用量のビンク
リスチンでの治療の期間を延長させることができ、同時
に上記の副作用の出現を遅延させることができる。

ガングリオシド混合物、具体的にはクロナツシャル■混
合物を投与することにより、抗腫瘍剤の投与によって誘
起される全身的毒性作用および慢性神経毒作用を予防す
ることができる。

本明細書で説明しできたように、本発明は、上記の混合
物のいくつかの変形物を提供できることは明らかである
。これらの変形物を、本発明の必須の目的に包含される
ものではないと考えてはならず、これらの変形型は全て
、当業者Ｅことつては自明のものであり、当然に本発明
の・特許請求の範囲に包含されるものである。

【図面の簡単な説明】

第１図は、ビンクリスチンによる毒性に対するガングリ
オシド処理の結果を示すグラフである。 特許出願人　フイディーア・ンシエタ・ベル・アチオニ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、抗腫瘍薬剤の投与に起因する全身的毒性作用または
   慢性的神経毒作用の予防薬であつて、活性成分としてガ
   ングリオシドＧＭ＿１、ＧＤ＿１＿ａ、ＧＤ＿１＿ｂお
   よびＧＴ＿１＿ｂの混合物を含有し、該抗腫瘍薬剤を投
   与する前に患者に投与される予防薬。 ２、ガングリオシド混合物が重量比でＧＭ＿１を約１９
   〜２３％、ＧＤ＿１＿ａを約３６〜４４％、ＧＤ＿１＿
   ｂを約１４〜１８％、ＧＴ＿１＿ｂを約１７〜２１％含
   有する第１項に記載の予防薬。 ３、ガングリオシド混合物が重量比でＧＭ＿１を約２１
   ％、ＧＤ＿１＿ａを約４０％、ＧＤ＿１＿ｂを約１６％
   、ＧＴ＿１＿ｂを約１９％含有する第２項に記載の予防
   薬。 ４、ガングリオシド混合物が重量比でＧＭ＿１を約２３
   ％、ＧＤ＿１＿ａを約４０％、ＧＤ＿１＿ｂを約１６％
   、ＧＴ＿１＿ｂを約１９％含有する第２項に記載の予防
   薬。 ５、ガングリオシド混合物を１０〜１００ｍｇの標準的
   用量で投与する第１項から第４項のいずれかに記載の予
   防薬。 ６、該抗腫瘍薬剤がビンカ系アルカロイドである第１項
   から第５項のいずれかに記載の予防薬。 ７、該抗腫瘍薬剤が、ビンクリスチン、ミトザントロン
   、シスプラチウム、メトトレキサート、アドリアマイシ
   ン、ダウノマイシンおよびシクロホスファミドからなる
   群から選ばれる第１項から第６項のいずれかに記載の予
   防薬。 ８、該抗腫瘍薬剤がビンクリスチンである第１項から第
   ６項までのいずれかに記載の予防薬。 ９、該神経毒作用が、腱反射の喪失、知覚異常、筋肉痛
   、筋肉衰弱、便秘または腹痛などである第１項から第８
   項のいずれかに記載の予防薬。 １０、抗腫瘍薬剤による処置を行なう前に、該ガングリ
   オシド混合物を半持続的に投与する第１項から第７項の
   いずれかに記載の予防薬。 １１、抗腫瘍薬剤による処置を行なう前に、該ガングリ
   オシド混合物を連続して５日間毎日投与すべき第１項か
   ら第１０項のいずれかに記載の予防薬。 １２、抗腫瘍薬剤の投与に起因する全身的毒性作用また
   は慢性的神経毒作用を予防するためのガングリオシドＧ
   Ｄ＿１＿ａ、ＧＤ＿１＿ｂおよびＧＴ＿１＿ｂと共に投
   与するべき医療用活性成分であるガングリオシドＧＭ＿
   １であつて、該抗腫瘍薬剤を投与する前に患者に投与さ
   れる該ガングリオシドＧＭ＿１。 １３、抗腫瘍薬剤の投与に起因する全身的毒性作用また
   は慢性的神経毒作用を予防するためのガングリオシドＧ
   Ｍ＿１、ＧＤ＿１＿ｂおよびＧＴ＿１＿ｂと共に投与す
   るべき医療用活性成分であるガングリオシドＧＤ＿１＿
   ａであつて、該抗腫瘍薬剤を投与する前に患者に投与さ
   れる該ガングリオシドＧＤ＿１＿ａ。 １４、抗腫瘍薬剤の投与に起因する全身的毒性作用また
   は慢性的神経毒作用を予防するためのガングリオシドＧ
   Ｍ＿１、ＧＤ＿１＿ａおよびＧＴ＿１＿ｂと共に投与す
   るべき医療用活性成分であるガングリオシドＧＤ＿１＿
   ｂであつて、該抗腫瘍薬剤を投与する前に患者に投与さ
   れる該ガングリオシドＧＤ＿１＿ｂ。 １５、抗腫瘍薬剤の投与に起因する全身的毒性作用また
   は慢性的神経毒作用を予防するためのガングリオシドＧ
   Ｍ＿１、ＧＤ＿１＿ａおよびＧＤ＿１＿ｂと共に投与す
   るべき医療用活性成分であるガングリオシドＧＴ＿１＿
   ｂであつて、該抗腫瘍薬剤を投与する前に患者に投与さ
   れる該ガングリオシドＧＴ＿１＿ｂ。 １６、ＧＭ＿１を約１９〜２３％、ＧＤ＿１＿ａを約３
   ６〜４４％、ＧＤ＿１＿ｂを約１４〜１８％、ＧＴ＿１
   ＿ｂを約１７〜２１％の重量比用量で投与する第１２項
   から第１５項のいずれかに記載の医療用活性成分。 １７、ＧＭ＿１を約２１％、ＧＤ＿１＿ａを約４０％、
   ＧＤ＿１＿ｂを約１６％、ＧＴ＿１＿ｂを約１９％の重
   量比用量で投与する第１２項から第１５項のいずれかに
   記載の医療用活性成分。 １８、ＧＭ＿１を約２３％、ＧＤ＿１＿ａを約４０％、
   ＧＤ＿１＿ｂを約１６％、ＧＴ＿１＿ｂを約１９％の重
   量比用量で投与する第１２項から第１５項のいずれかに
   記載の医療用活性成分。