JPS63218685A - 抗生物質ムレイドマイシンｂおよびｄ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新抗生物質ムレイドマイシン （Ｍｕｒｅｌｏｍｙａｉｎ　）　ＢおよびＤｌその製造
法およびそれを有効成分とする抗菌剤に関するものであ
る。本発明者らは、土壌から分離したストレプトミセス
属に属する５ＡＮＫ６Ｇ４８８株が、主としてダラム陰
性細菌特にシュウトモナス　スペシーズ（ｐａｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ　ｓｐ、　　）に対して有効な新抗生物質ム
レイドマイシンＢｇよびＤを生産することを見出した。

本発明の抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤはその諸
性状より新規抗生物質と同定された。

抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤはグラム陰性細菌
、特にシュウトモナス　スペシーズに対して強い抗菌力
を示すことから、ヒトおよび動物のこれらの細菌に起因
する疾病の予防および治療に用いられる。

抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤを生産する８ＡＮ
Ｋ８０４８８株の菌学的性状は次の通りである。

ｔ　形態学的特徴 一般的に基生菌糸は寒天培地上で分岐してよく伸長し気
菌糸は単純分岐である。胞子鎖の形態は多くのものは直
〜曲線状を示す。１胞子鎖上に形成される胞子数は多く
の場合。

約１０〜５０個またはそｎ以上が観察される。

胞子の形は楕円状であり、その大きさは（ＬＩＳ〜ｌ　
８　μｍ　Ｘ　ｌ　７〜Ｌ　１　ｐｍであり、その我面
は平滑状を示す。また気菌糸の車軸分岐、菌核、胞子の
うなどの特殊器官は観察されなかった。

２　各種培養基上の諸性質 各種培養基上で２８℃、１４日間培養後の性状は第１表
に示す通りである。色調の表示は日本色彩研究新版“標
準色票゛のカラーチ第　　１　　表 Ｇ　余り良くない、平坦、ｉＲ味灰（１−９−１０ンシ
ユクロース・ＡＭ　　良好に形成、粉状、黄味灰（１−
９−１０）硝酸塩寒天　Ｒ薄黄味橙（２−９−９）ＳＰ
　　産生せず グリセリン・　Ｇ　良好、隆起状、薄黄味＠　（２−７
−ＩＩ　）アスパラギン　ＡＭ　　豊富に形成、粉状、
薄黄味橙（２−９−１１）寒天　　　　Ｒ黄味茶（４−
７−９） （Ｉ８Ｐ５，３　　　ＳＰ　　産生せず培地の種類項目
　　　８ＡＮ１１０４８１１株の性状Ｇ　非常に良好、
平坦、明るい茶味灰（２−８−８）チロシン寒天ＡＭ　
　豊富に形成、粉状、茶味白（１−８−６）（よりＰＩ
）　　　Ｒ黄味茶（４−７−１１）ｓｐ　　産生ぜず ペプトン・イ　Ｇ　非常に良好、しわ状、薄黄味茶（４
−８−９）−ストエキス　ＡＭ　　４かに形成、白拳鉄
寒天　　　Ｒ薄黄味茶（６−７−９）（Ｉｓｐｓ）　　
　ｓｐ　　産生せず Ｇ　非常に良好、平坦、薄黄味橙（２−ｇ−１栄養寒天
　　ＡＭ　　良好に形成、粉状、白（Ｄｉｒｃｏ）　　
　Ｒ薄黄味橙（ト→−９）ｓｐ　　産生せず 培地の種類項目　　　　Ｓ　ＡＮＫ６　Ｇ　４８８株の
性状Ｇ　余り良くない、平坦、黄味灰（１−９−１０）
ｓｐ　　産生せず Ｇ：生育、ＡＭ：気菌糸、Ｒ：１に面、ｓｐ：町Ｓａ色
累１　生理学的性質 ５ＡＮＫ６Ｇ４８１１株の生理学的性質は第２表に示す
通りである。

第　　２　　表 澱粉の氷解　　　　　　　　　　　陽性ゼラチンの液化
　　　　　　　　　＃！Ｉ注硝酸塩の還元　　　　　　
　　　　陽性ミルクの凝固　　　　　　　　　　１ｌｉ
Ｉ性ミルクのペプトン化　　　　　　　陽性生育温度範
囲（培地１）４　６〜３４℃食塩耐性（培地１　）＊　
　１チで生育、１０％では生育せずカゼインの分解　　
　　　　　　　陽性チロシン　〃　　　　　　　　　　
　陽性キサンチン〃　　　　　　　　　　陰性メラニン
様色素生産性（培地２戸　　　陰性＃　　　　　（〃　
３戸　　　陰性 ＃　　　　　　（ｅｔ４）木　　　陰性＊培地１；イー
スト・麦芽寒天（ＩＳＦ２　）２ニドリプトン・イース
トエキス・グ ロス（ＩＳＰＩ） ３；ペプトン・イーストエキス・鉄寒 天（工ｓｐｓ　） ４；チロシン寒天（よりＰ７） また、プリドハム・ゴトリーブ寒天培地（工５ｐ９）を
使用して、２８℃、１４日間培養後に観察した５ＡＩＪ
Ｋ６０４８１１株の炭素源の資化性は第３表に示す通り
である。

第　　３　　餞 ＋：利用する。−：利用しない ４、菌体成分について Ｓ　ＡＮＫ６０４８６株の細胞壁はと一〇ベツカーらの
方法（Ｂ、Ｂｅｃｋｅｒ　ｅｔ　ａｌ　、アプライドマ
イクロバイオロジー（ＡｐｐｌｔｅｄＭｉＣｒｏｂｉＯ
−１ｏｇｙ）、　　１２巻、４２１〜４２３頁、１９６
４年〕に従い検討した結果、　Ｌ、　　Ｉ、−ジアミノ
ピメリン酸およびグリシンが検出されたこと、から、ス
トレプトマイセスｅ７ラビドピレンスＳ　ＡＮＫ　６０
４８６　（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｆｌａｖｉｄｏ
−ｖｉｒｅｎｓ　Ｓ　ＡＮＫ６０４８　Ｂ　）　（、微
工研菌寄第８６３６号〕と同定された。

なお、５ＡＮＫ６０４８６株の同定は、■ＳＰ〔ジ・イ
ンターナショナル・ストレプトミセス・プロジェクト（
’１”ｈａ工ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａ１８ｔｒｅｐｔＯ
ｍｙｃｅｓ　ｐｒｏｊｅｃｔ）　）基準、バージニーズ
＊　−ｙ　二ｗア／ｌ／　（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎ
ｕａｌ　ｏｆＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅ
ｒｉｏｌｏｇｙ）第８版、ニス−エイ−ワックスマン（
８＊　Ａ　、　Ｗａｋ８ｍａｎ　）著〔ジ−７クテノミ
セテス（Ｔｈｅ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃ−ｅｔｅａ）　）
および放線菌に関する最近の文献によって行った。

以上、抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤの生産菌に
ついて説明したが、放線菌の諸性質は一定したものでな
く、自然的１人工的に容易に変化することは周知のとお
りであり１本発明で使用しつる菌株はストレプトミセス
属に属する。抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤ％生
産するすべての菌株を包含するものである。

本発明における培養は一般放線菌における培養方法に準
じて行われ、液体培地中での振盪培養あるいは通気攪拌
培養によるのが好ましい。

培地成分としては、たとえば炭素源としてブドウ糖、マ
ルトース、シュクロース、マンニット。

稠密、グリセリン、デキストリン、澱粉、大豆油、綿実
油などが、窒素源として大豆粉、落花生粉、綿実粉、フ
ァーマミン、魚粉、コーン・スチープ・リカー、ペプト
ン、肉エキス、イースト、イーストエキス、硝酸ソーダ
、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウムなどが、また、
無機塩として食塩、燐酸塩、炭酸カルシウム、微量金属
塩などが必要に応じて適宜添加される。

液体培養に際してはシリコン油、植物油、界面活性剤等
が消泡剤として適宜使用される。

培地のｐＨは中性付近、培養温度は２０℃から３７℃、
特に２２℃前後が好ましい。

培養の経過Ｉζ伴って生産される抗生物質ムレイドマイ
シンＢおよびＤの力価の経時変化は。

シュウトモナスΦエルギノ−ｔ　　８ＡＮＫ７０５７９
を被検菌としたペーパーディスク（東洋科学産業（株ン
製、直径８　ｔｍ　、　ｔｈｌｏｋ　）検定法により測
定される。通常７２〜９６時間の培養で抗生物質ムレイ
ドマイシンＢおよびＤの生産量は最高値に達する。

主として培養液中の液体部分に存在する抗生物質ムレイ
ドマイシンＢおよびＤは、培養終了ｖｋ、ｉｇ体その他
の固形部分をけいそう上等ヲｒ過助剤とする濾過操作、
あるいは遠心分離によって除去し、そのｒ液または上清
中から抽出。

精製することによって得られる。

抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤはその物理化学的
性状を利用することによって１分離。

採取、　ｙｉ＋ｔｉさｎる。すなわち、浴媒抽出法；イ
オン交換法２例えばダウエックス５ＢＲ−Ｐ（ダウケミ
カル社ＩＡ）などの陰イオン交換樹脂、ダウエックス５
０Ｗ（ダウケ）カル社製）、工ＲＯ−５０，ＣＧ−５０
などの陽イオン交換樹脂；吸着法１例えば吸着剤さして
活性炭、アンバーｙ　ＨＰＩ　Ｏ、ＨＰ２Ｑ　、ＣＨＰ
２０Ｐ、Ｉｌ［Ｐ２Ｏ（三菱化成工業（株）製ン等によ
る非イオン性吸着樹脂等の樹脂、シリカゲル、アルミナ
等；による方法も適宜使用される。またアビセル（旭化
成工業（株）展）などのセルロース、セファデックスＬ
Ｉ’ｌ−２０（７アルマシ７社製）などを用いた分配カ
ラムクロマトグラフィー法；セファデックスＧ−１０、
Ｇ−２５、Ｇ−５０、Ｇ−１００（ファルマシア社裂］
やトヨパール（生化学工業社製）などを用いたゲルＰ：
ＪＩ４法；また結晶化法；再結晶法等の手段も有効であ
りこれらの手段を単独または任意の順序で組み合わせ、
また反復して用いて分離、採取、精製を行う。

抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤはまた培養条件に
よっては培養液中の菌体部分に存在する。この場合は、
アルコール類、アセトン等の親水性有機啓媒によって抽
出し、抽出液より溶媒を除去し１次いで水溶液としたの
ち、培養ｒ液からと同様の方法で抽出精製することがで
きる。

このようにして得らｎた抗生物質ムレイドマイシンＢお
よびＤは下記のような理化学的および生物学的性状を有
する。

ｔ　抗生物質ムレイドマイシンＢ０ １）物質の性状二両性水Ｉ！ｌ！注、白色粉末。

２）　　Ｊｆ［光Ｗｔ　：　Ｃａｂ、　＝−ｙ’（ｃｏ
、ａ　、５ｏ％　　メタノール） ３）元素分析値（＠：ｃ、ｓα６７；Ｈ，６，３６；Ｎ
。

１２．６２；Ｓ、３．１３　（水和物として〕４）分子
量：＆４２（高分解能質量分析ＦＡＢ−ＭＡＳＳ：８４
３．３３２８９（ＱＭ＋））５）分子式：　Ｃ４８Ｈ５
ＯＮ８０１２８１８）酸加水分解ニ ジヒドロウラシル、ｍ−チロシン、２−アミノ−３−Ｎ
−メチルアミノ酪酸 １％ ７）紫外線吸収スペクトル：λ融ｘｎｍ（Ｔ！、１．ｎ
〕中性、　２５５ｎｍ（１９４）；０．ＩＮＨＯｌ、２
５５ｎｍ（１８６ン；０．ｌＮＮａＯＨ，２４５ｎｍ（
３２５）および２９５ｎｍ（８５ｓｈ） 第１図に示す通りである。

、ＫＢｒ−１ ８）赤外線吸収スペクトル、シエエ偲 ＫＢｒディスクで測定した赤外線吸収スペクトルは第２
図に示す通りである。

ｇ）核磁気共鳴スペクトル（δニー］ 重水中、外部基準にＴＭＳ（テトラメチルシラン）を使
用して測定した該磁気共鳴スペクトル（２１０ＭＨｆＭ
）は第３図に示す通りである（配座異性体を含む）。

１Ｇ、）溶解性： 水、メタノールに可＃、アセトンに４１１８゜酢酸エチ
ル、クロロホルム、ベンゼン憂ζ不俗。

１１）呈色反応： ニンヒドリン、硫酸、ヨード、塩化第二鉄、バイエル反
応に陽性。

１２）薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値；０．３４ 吸着剤；シリカゲルプレート（メルク社製Ｋｉｅａｅ１
ｇｅ１６０　Ｆ’２５４）ｉｇ浴媒；ｎ−ブタノール：
ｎ−グロパノール：水（４：２：１） １３）高速液体クロマトグラフィー： カラム；アクアシル８８３７２−Ｎ（センシュウ科学社
製］ 展開溶媒；クロロホルム：１−グロバノール：メタノー
ル：水（２００：１００：１ＧＧ＝４０） 保持時間；３．９４分 １リ　抗菌カニ 一般グラム陽ａｈグラム陰注細菌に対する抗生物質ムレ
イドマイシンＢの最小阻止濃度（Ｍ工Ｃ）はミューラー
ヒントン寒天培地（ＤｉｆｃＯ社製）を用いた寒天培地
希釈法によって測定した。その結果は第４表に示すとお
りである。

１５）毒性 マウスに４００■／に９を静脈内投与したが１！＃注は
認められなかった。

２　抗生物質ムレイドマイシンＤ 貝物質の性状二両性水引り白色粉末。

２）比旋光度：〔α）、＝−３ｏ’（ｃｏ、ｓｚ　、５
０チメタノール水ン ３）元素分析値（％）　：　ｃ：４１７９　、Ｈ：１ｌ
Ｉ６　、Ｎ：１２．４２，８：１２６　（水和物として
］リ　分子量：　５ＳＳ（高分解能質量分析ＦＡＢ−Ｍ
Ａｓｓ：５ｏ（Ｌａ！１ａｔｙ（ｃｔ、Ｍ＋））５ン　
分子式：　０４０Ｈ５！１Ｎ９０１５ｓ１６）酸加水分
解ニ ジヒドロウラシル、グリシン、ｍ−チロシン、２−アミ
ノ−３−Ｎ−メチルアミノ酪酸 ７）紫外線吸収スペクトル：λｍａｘ”＜、兄′１：ｎ
ノ中注　、２５５ｎｍ（１９１ン；０．ＩＮＨＯｌ、２
５５ｎｍ（１８４）；０．ｌＮＮａＯＨ，２４５ｎｍ（
３４６ン　および２９５ｎｍ（９０ｓｈ） 第４図に示す通りである。

８〕　赤外線吸収スペクトル：シ工、ＸｃｒｎＫＢｒデ
ィスクで測定した赤外線吸収スペクトルは第５図に示す
通りである。

９）核磁気共鳴スペクトル（δ：ｐ） 重水中、外部基準にＴＭＳ　（テトラメチルシランンを
使用して測定した核磁気共鳴スペクトル（２７０ＭＨｚ
）は第６図に示す通りである（配座異性体を含む）。

１０）溶解性： 水、メタノールに可溶、アセトンに難溶。

酢酸エチル、クロロホルム、ベンゼンに千尋０ １り呈色反応： ニンヒドリン、硫酸、ヨード、塩化第二鉄、バイエル反
応に陽性。

１２）　Ｒ層りロマトグラフィー二 Ｒｆ＠；０．２Ｂ 吸着剤；シリカゲルプレート（メルク゛４製ｘｉｅｓｅ
１ｇｃｓ１６０　Ｆ２５４）展開溶ｌ　；　ｎ−ブタノ
ール：ｎ−プロ・ノール：水（４：２：１） １３ノ　高速液体クロマトグラフィー：カラム；アクア
シル５１８３７２−Ｎ　（セニシュウ科学社製〕 ｉ開ｇ媒；クロロホルム：１−プロパツール：メタノー
ル：水（２００：１Ｇ０：１０：４０） 保持時間；７．２４分 １４）抗菌カニ 一般グラム陽ａ、グラム陰注細菌に対する抗生物質ムレ
イドマイシンＤの最小阻止濃度（Ｍｘｌ、）はミューラ
ーヒントン寒天墳地（Ｃ）ｉｆｃｏ社製フ蛋用いた寒天
培地希釈法によって測定した。その結果は第４表に示す
とおりである。

１５）毒性： マクスＣζ４００　岬／　ｋｇ　４靜脈内投与した１　
　　が毒性は認められなかった。

第　４　表 ・く スメフイロコッヵス・アウレウス ＦＤＡ　２Ｄ９Ｐ　、７０−１　　　　　）２０Ｇ　　
　）２０Ｇエツ７エリヒア・コリ　Ｎ工ＨＪ　　：ｒｏ
　−ｚ　　　　　＞２（１０＞２００プｏ７つｘ＊ミラ
ビｌＪｘ　　８ＡＮＫ７０４６１　　　　）２０Ｇ　　
　）２００フ クレブシェラ−ニューモニエ　ｐｃ工　８０２　　　　
２５　　、　２５シユウトモナス・アシトポランス８Ａ
ＮＫ７２７８２　　２００　　　１００シユクドモナス
ーエルギノーサ　５ＡＮＫ７１８７３　　　２５　　　
　　６．２５シユウトモナス・エンレギノーサ５ＡＮＫ
７５７７５　　２００　　　　　８．２５シーＬ））”
−１−？−スー！ル＝Ｎ／−１７３ＡＮＫ７Ｂ１７５　
　　５０　　　　１２．５シー１）’−！−ナスーーＺ
ルー？’／−？ＢＡＮＫ７０＃７Ｇ　　　　２５　　　
　　３．１３シユクドモナス・エルギノーサ日ＡＮＫ７
３２７９　　　２５　　　　　６．２５シユクドモナス
・エルギノーザ８ＡＮＩｍ７３３７９　　２００　　　
　５０シ３−’）ｋ”％ｆスーエｈｄｆ）−１ＭＪＲＲ
ＬＢＩＧＯ０５０［２５ＭｘＯ（μｍ／−） 被検菌 ムレイト険イｍムｔ−イトζｔイー／／Ｄシュクドモナ
ス・エルギノーザＡＴｃｃＬ３３０ａ　　　５０　　　
　　１２器Ｖ　ユ’：！　ドーｅｆス拳ｘルギ／　−ｔ
　　８ＡＮＫ７０４７９　　１２Ｊ　　　　　Ｌ２１ｉ
シュウトモナス・エルギノーザ　８ＡＨＫ１０５１９　
　　Ｇ、２　　　　０．２シユクドモナス・エルギノー
ザ８ＡＮＫＴ３３７５　　２５　　　　　１２１１シユ
ウトモナス龜エルギノーサＮ０ＴＯ１０４１１０Ｇ、８
　　　　１．５６セラチア・マルセツセンス　５ＡＮＫ
７３０１１０　　）２００　　　　）２０Ｇ以上から、
抗生物質ムレイドマイシνＢおよびＤはグラム陰性細菌
、特にシュウトモナス属細菌に有効である。

以上から、抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤは各種
ＭＪＪ菌感染疾患を対照とする抗菌剤として使用さｎる
。その投与形態としては、皮下注射、静脈内注射、筋肉
注射、層剤などによる非経口投与法あるいは錠剤、カプ
セル剤、散剤。

顆粒剤などによる経口投与法力１あげられる。投与飯は
対象疾患、投与経路および投与回数などによって異なる
が２例えば成人ｌζ対して通當は１日（ＬＩｆ〜１０１
を１回または数回に分けて投与するのが好ましい。

次に実施例、＃！剤例をあげて本発明蛋具体的に説明す
る。

実施例ｔ ストレプトミセスΦフラビドビレンス５ＡＮＫ８Ｇ４８
８株をＡ培地（グルコース、３チ；化イースト、１％；
大豆粉、３月０ａ００５　、　（１４％。

Ｍｇ８０４・７　Ｈ２Ｏｔ　ａ、２　’／ｈ　；　ニア
サン・ディｘ７オーＡ　０Ｂ−４４２，０，０１％５滅
菌ｎｐＨ７，２）８０ｇｊをｔｔＪ’５００ｇｇ容三角
フラスコに一白金耳接種し、　２２０　ｒｐｍの回転振
盪培養機により２２℃で８４時間培養した。この培養液
２５ｄをＡ培地５００ｍ１を含む２ノ容三角フラスコ４
本に接種して２２　Ｏｒｐｍの回転振盪培養機により２
２℃、２４時間培養した。この培養液７５０ｄをＡ培地
１５１を含む３０１１容ジヤークアーメンメー２基に接
種し、２２℃２回転数；１５゜ｒｐｍ　、通気ｉ；ｔｓ
ｌｌ／分で９６時間通気攪拌培養した。この＃Ｉ養液３
０７にＦＩ通助剤としてセライト５４５を加えてＰｍす
ると、Ｆ液３０ノが得らｎた。このｒ液を３１のアンバ
ーライトＸＡＤ−２カラムに吸着させ、１５１の精製水
および１２１の１５％メタノール水で順次洗浄した稜ｈ
１５１の４０％メタノール水にて溶出した。得られた活
性画分を減圧下でメタノールを留去波、凍結乾燥すると
粗粉末１７．４　Ｆが傅らｎた。得られた粗粉末１７ｆ
を３１の精製水に溶解しアンバーライト０Ｇ−５０（Ｈ
＋）。

８００ｄのカラムを通過させ有効物質を吸着させた。こ
のカラムから有効物質ｉ　０．５　Ｍのアンモニア水で
溶出した。活性画分３．５ノを集め。

減圧下１．０１に濃縮した。濃縮液１０２をＱ、１Ｍの
炭酸水素アンモニウムで平衡化した４００ｄのＤＥ−５
２（ワットマン社製）に通過吸着させ、０．２Ｍの炭酸
水素アンモニウムで溶出した。活性画分１１Ｇ（ｌｊＩ
ｌｊｆ集め、ダイヤイオンＨＰ２０（三菱化成工業（株
米製）２００ｄに臥着後、５０％アセトン５００ｍ１で
有効物質を溶出した。活性画分を鍼細し凍結乾燥するこ
とにより抗生物質ムレイドマイシンＢおよびＤ％含む粗
粉末１．６Ｆを得た。この粗粉末１．５２を２００ｄの
ｙｒｆ！製氷に溶解し、０．０５Ｍの炭酸水素アンモニ
ウムで平衡化した５００ａ／のＤＩ−５２に吸着させ、
０．０５Ｍの同緩衝液で洗浄後、０．１Ｍの同緩衝液で
洛出し、２Ｇ−ごとに分画した。

活性画分として、フラクション２５からＢＯを集め、Ｈ
Ｐ２０カラムにて吸着、脱塩することにより脱塩し、減
圧濃縮、凍結乾燥し、抗生物質ムレイドマイシンＢおよ
びＤを含む部分精製粉末５１（１９を得た。部分精製粉
末５ｏｏｌＮｉを１０Ｏｆのシリカゲルカラムにかけ＆
ｎ−ブタノール：ｎ−グロパノール：水（８：４：１ン
より成る混合部課で展開し、２０ｄごとに分画した。活
性は２つのピークとして現われた。フラクション３７か
ら５５を集め水を加えて濃縮後、凍結乾燥することによ
り、抗生物質ムレイドマイシンＢを含む粗粉末７４／１
９ｉ得た。また　゛同様にしてフラクション７Ｂから１
１０より抗生物質ムレイドマイシンＤｉ含む粗粉末６７
．５ｍｇを得たつ 実施例２ 実施例１で得た抗生物質ムレイドマイシンＢを含む粗粉
末のうち７０５９％３０％メタノールで作製した１００
０ａｌのトヨバールカラムに吸着させ同容媒で展開し、
１０ｍ１ずつに分画した。

活性両分としてフラクション５５から７５を集め、１０
ｇ／のＣＧ−５０（ＩＩｉ＋型〕に吸着後。

０．５Ｍのアンモニア水にて溶出した。活性画分を集め
濃縮後、凍結乾燥することにより抗生物質ムレイドマイ
シンＢ４５１９％得た。

実施例３゜ 実施例１で得た抗生物質ムレイドマイシンＤを含む粗粉
末のうちａｓＪｖ４ｓｏ％メタノールで作製したｔｏｏ
ｏｙのトヨパールカラムに吸着させ同塔媒で展−開し、
１０ａｌずつに分画した。

活性画分としてクラクション６５から８５を集め、１０
ｄのＣＧ−５０（Ｈ＋温ンに吸着後。

０．５Ｍのアンモニア水にて溶出した。活性画分を集め
濃縮後、凍結乾燥することにより抗生物質ムレイドマイ
シンＤ４０１１１ｇを得た。

次に製剤例について述べる。

製剤例１．　経口用カプセル剤 ムレイドマイシンＢ　　　　　　　１００η乳糖　　　
　　　　　　　　　１０Ｇ トウモロコシ澱粉　　　　　　　　１４＆５５ＧＩＩ９ 上記処方の粉末を混合し、３０メツシユのふるいを通し
た後、この粉末３５０■を２号ゼラチンカプセルに入れ
、カプセル剤とした。

製剤例２　経口用カプセル剤 ムレイドマイシンＤ　　　　　　　　Ｉ００〜乳楯　　
　　　　　　　　　　１ＧＧ トウモロコシ澱粉　　　　　　　　１４＆５３５０〜 上記処方の粉末を混会し、３０メツシユのふるいを通し
た後、この粉末３５０■を２号ゼラチンカプセルに入れ
、カプセル剤きした。

製剤例３．注射剤 ムレイドマイシンＢ　１．　Ｏｆを１７１５Ｍ燐酸緩衝
液（ｐＨ８，９）ｌｅａ／に加えて溶解し２次いで５ｄ
アンプルに封入し、常法に従って滅菌し注射剤とした。

製剤例４．注射剤 ムレイドマイシンＤ１．Ｏｆｆ１７１５Ｍ燐酸緩衝液（
１）Ｈｅ、　９　）　５．０ｔｊに加えて溶解し２次い
で５Ｉ１１１アンプルに封入し、常法に従って滅菌し注
射剤とした。

【図面の簡単な説明】

第１図は抗生物質ムレイドマイシンＢの紫外線吸収スペ
クトルを示し、第２図は同物質の赤外線吸収スペクトル
を示し、第３図は同物質の核磁気共鳴吸収スペクトルを
示す。篤４図は抗生物質ムレイドマイシンＤの紫外線吸
収スペクトルを示し、第５図は同物質の赤外線吸収スペ
クトルを示し、第６図は同物質の核磁気共Ｓ吸収スペク
トルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記の理化学的性状を有する抗生物質ムレイドマイ
   シンＢ。 １）物質の性状：両性水溶性、白色粉末。 ２）比旋光度：〔α〕＾２＾３＿Ｄ＝−７℃（ｃ０．３
   ，５０％メタノール水） ３）元素分析値（％）：Ｃ，５０．６７；Ｈ，６．３６
   ；Ｎ，１２．６２；Ｓ，３．１３（水和物として）４）
   分子量：８４２（高分解能質量分析ＦＡＢ−ＭＡＳＳ：
   ８４３．３３１８９（ＱＭ＋））５）分子式：Ｃ＿３＿
   ８Ｈ＿５＿０Ｎ＿８Ｏ＿１＿２Ｓ＿１６）酸加水分解： ジヒドロウラシル、ｍ−チロシン、２− アミノ−３−Ｎ−メチルアミノ酪酸 ７）紫外線吸収スペクトル：λ＿ｍ＿ａ＿ｘｎｍ（Ｅ＾
   １＾％＿１＿ｃ＿ｍ）中性、２５５ｎｍ（１９４）；０
   ．１ＮＨＣ１，２５５ｎｍ（１８６）；０．１ＮＮａＯ
   Ｈ、２４５ｎｍ（３２５）および２９５ｎｍ（８５ｓｈ
   ） 第１図に示す通りである。 ８）赤外線吸収スペクトル：ν＾Ｋ＾Ｂ＾ｒ＿ｍ＿ａ＿
   ｘｃｍ＾−＾１ＫＢｒディスクで測定した赤外線吸収ス
   ペ クトルは第２図に示す通りである。 ９）核磁気共鳴スペクトル（δ：ｐｐｍ） 重水中、外部基準にＴＭＳ（テトラメチ ルシラン）を使用して測定した核磁気共鳴 スペクトル（２７０ＭＨｚ）は第３図に示す通りである
   。 １０）溶解性： 水、メタノールに可溶、アセトンに難溶、 酢酸エチル、クロロホルム、ベンゼンに不 溶。 １１）呈色反応： ニンヒドリン、硫酸、ヨード、塩化第二 鉄、バイエル反応に陽性。 １２）薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値；０．３４ 吸着剤；シリカゲルプレート（メルク社 製Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　６０Ｆ＿２＿５＿４）展開溶媒
   ；ｎ−ブタノール：ｎ−プロパ ノール：水（４：２：１） １３）高速液体クロマトグラフィー： カラム；アクアシルＳＳ３７２−Ｎ（センシユウ科学社
   製） 展開溶媒；クロロホルム：１−プロパノ ール：メタノール：水（２００：１００：１００：４０
   ） 保持時間；３．８４分 ２、下記の理化学的性状を有する抗生物質ムレイドマイ
   シンＤ。 １）物質の性状：両性水溶性、白色粉末。 ２）比旋光度：〔α〕＾２＾３＿Ｄ＝−３０°（ｃ０．
   ５２、５０％メタノール水） ３）元素分析値（％）：Ｃ、４８．７９、；Ｈ、５．８
   ６；Ｎ、１２４２；Ｓ、３．２６（水和物として） ４）分子量：８９９（高分解組質量分析ＦＡＢ−ＭＡＳ
   Ｓ：９００．３５６１７（ＱＭ＋））５）分子式：Ｃ＿
   ４＿０Ｈ＿５＿３Ｎ＿９Ｏ＿１＿３Ｓ＿１６）酸加水分
   解： ジヒドロウラシル、グリシン、ｍ−チロ シン、２−アミノ−３−Ｎ−メチルアミノ 酪酸 ７）紫外線吸収スペクトル：λ＿ｍ＿ａ＿ｘｎｍ（Ｅ＾
   １＾％＿１＿ｃ＿ｍ）中性、２５５ｎｍ（１９１）；０
   ．１ＮＨＣｌ、２５５ｎｍ（１８４）；０．１ＮＮａＯ
   Ｈ、２４５ｍ（３４６）および２９５ｎｍ（９０ｓｈ） 第４図に示す通りである。 ８）赤外線吸収スペクトル：ν＾Ｋ＾Ｂ＾ｒ＿ｍ＿ａ＿
   ｘｃｍ＾−＾１ＫＢｒディスクで測定した赤外線吸収ス
   ペ クトルは第５図に示す通りである。 ９）核磁気共鳴スペクトル（δ：ｐｐｍ） 重水中、外部基準にＴＭＳ（テトラメチ ルシラン）を使用して測定した核磁気共鳴 スペクトル（２７０ＭＨｚ）は第６図に示す通りである
   。 １０）溶解性： 水、メタノールに可溶、アセトンに難溶、 酢酸エチル、クロロホルム、ベンゼンに不 溶。 １１）呈色反応： ニンヒドリン、硫酸、ヨード、塩化第二 鉄、バイエル反応に陽性。 １２）薄層クロマトグラフィー： Ｒｆ値；０．２６ 吸着剤；シリカゲルプレート（メルク社 製Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　６０Ｆ＿２＿５＿４）展開溶媒
   ；ｎ−ブタノール：ｎ−プロパ ノール：水（４：２：１） １３）高速液体クロマトグラフィー： カラム；アクアシルＳＳ３７２−Ｎ（センシユウ科学社
   製） 展開溶媒；クロロホルム：ｉ−プロパノ ール：メタノール：水（２００：１００：１００：４０
   ） 保持時間：７．２４分 ３、ストレプトミセス属に属する抗生物質ムレイドマイ
   シンＢおよびＤ生産菌を培養し、その培養液より抗生物
   質ムレイドマイシンＢおよび抗生物質ムレイドマイシン
   Ｄを採取することを特徴とする抗生物質ムレイドマイシ
   ンＢおよびＤの製造法。 ４、ストレプトミセス属に属する抗生物質ムレイドマイ
   シンＢおよびＤ生産菌がストレプトミセス・フラビドビ
   レンス　ＳＡＮＫ６０４８６株（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
   ｅｓ　ｆｌａｖｉｄｏｖｉｒｅｎｓ　ＳＡＮＫ６０４８
   ６）（微工研菌寄第８６３６号）である特許請求の範囲
   第３項記載の製造法。 ５、抗生物質ムレイドマイシンＢおよび／または抗生物
   質ムレイドマイシンＤを有効成分とする抗菌剤。