JPS6289692A - アズキサポニン類、その単離法と用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明はアズキの種子より単離されたサポニン類、そ
の単離法と用途に関する。

（以下余白、次頁に続く。） アズキは日本の各地をはじめ、中国、朝鮮半島で広く栽
培さね１、その種子ｆｔ製あん用、煮マメ、甘納豆など
の食品用に用いられ親しまれている。

種子の形は普通楕円体であるが、長楕円又は円筒状のも
のがあり、その色はえんじ色、黄白色、緑色又は斑色の
もあり、各種のアズキがある。日本で栽培が奨励されて
いる品種は、光小豆、暁犬納言、栄小豆と称されるもの
である。ことに通常大納言アズキと呼ばれ学名Ｖｉｇｎ
ａ　ａｎｇｕｌａｒｉｓ（ｗｉｌｌｄ、）　Ｏｈｗｉ　
　ｅｔ　０ｈａｓｈｉ　ノ７ズキ又は赤アズキと呼ば力
、学名Ｐｈａｓｅｏ工ｕｓａｎｇｕ−１ａｒｉｓ　　Ｗ
ｉｇｈｔ、をぶ料として用いるのが好ましい。この外、
アズキの同属植物としてはミャプツルアズキ［Ｖｉｇｎ
ａ　　ａｎｇｕｌａｒｉｓ　ＶａｒＮｉｐｐｏｎｅｎｓ
ｉｓ　（○ｈｗａ　）］、ツルアズキ［Ａｚｕｋ　　ａ
　　ｕｍｂｅｌｌｅｔａ（Ｔｈｕｎｂ、）Ｏｈｗｉ］、
オオヤプツ／ｌ／　７ズキ［Ａｚｕｋｉａ　　ｒｅｆｌ
ｅｘｏ−ｐｉｌｏｓａ　（Ｈａｙａｔａ）Ｏｈｗｉ　］
、］ヒメフル７ズーＩＦ−［Ａｚｕｋｉａ　　ｎａｋａ
ｓｈｉｍａ　（Ｏｈｗｉ　）○ｈｗｉ］、ブンドク［Ａ
ｚｕｋｉａ　　ｒａｄｉａｔａ（Ｌｉｎｎ、）○ｈｗｉ
］などが挙げられる。

この発明の発明者らは、植物中のサポニン成分の追究を
行っている中で、アズキの種子から実質的にサポニン類
のみからなる物質を単離し、さらにこの中に少なくとも
６種類の文献未知のサポニンが含まれていることを見出
した。

かくして、この発明は、実質的に純粋なアズキプボニン
類ならびに式０）で示される６種のサポニンと、それら
の単離法が提供される。

すなわちこの発明による新規な６種のサポニンＣ式中Ｒ
’　ｆａｒβ−Ｄ−グルコピラノシル（１−２）−β−
Ｄグルクロノピラノシル基であるときは、Ｒ２、Ｒ３、
Ｒ４とＲ６がメチル基、Ｒ６が水酸基、Ｒ２、Ｒ４トＲ
６がメチル基、Ｒａがオキシメチル基、Ｒ’カ水酸基、
　Ｒ２とＲ４がメチル基、Ｒ３がオキシメチル基、Ｒｓ
が水素原子　Ｒ６がカルボキシル基：又はＲ２とＲ−が
メチル基　Ｒ１がメチルオキシ基　Ｒ５が水素原子、Ｒ
６がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１−６９−β−Ｄ−グ
ルコピラノシルーオキシカルボニル基、 Ｒ１がβ−Ｄ−グルコピラノシル基であるときは、Ｒ２
とＲ６がメチル基　Ｒ８がカルボキシル基、Ｒ６が水素
原子、Ｒ４がβ−Ｄ−グルコピラノシル（１−Ｌ６）−
β−Ｄ−グルコピラノシルーオキシカルボニル基、 Ｒ１がα−Ｌ−ラムノピラノシル（１−２）−β−Ｄ−
グルフピラノシル（１−２）−β−Ｄ−グルクロノピラ
ノシル基であるときは、Ｒ２、Ｒ４とＲ６がメチル基、
Ｒ１がオキシメチル基、Ｒ６が水酸基〕で示される。こ
れらのサポニン類の具体名’ｔ　列挙すると次のとおり
である。

すなわち、３−０−［β−Ｄ−グルコピラノシル（１−
２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル］−ソホラジオー
ル：（アズキプボニンＩ）、３−０−〔β−Ｄ−グルコ
ピラノシル（１−２）−３−Ｄ−クルクロノピラノシル
クーソーヤサポゲノールＢ：（アズキプボニン■）、３
−０−［β−Ｄ−グルフピラノシル（１−２）−β−Ｄ
−グルクロノピラノシル］−アズキサボゲノール：（ア
ス゛キプボニン■）、３−０−［β−Ｄ−グルコピラノ
シル］−２８−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（１−
６）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−ジブソゲ°ンｅ：
（アズキサポニンｆｆ）、３−０−〔α−Ｌ−ラムノピ
ラノシル（ｌ→２）−β−り一グルコピラノシル（１−
２）−β−Ｄ−、Ｆ”ルクロノビラノシル］−ンーヤサ
ボゲノールＢ：（アス゛キフホニンＶ）及び３−０−［
β−Ｄ−グルコピラノシル（１−２）−β−Ｄ−グルク
ロノピラノシル）−２９−０−［β−Ｄ−グルコピラノ
シル（＋−６）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−アス゛
キサボゲノール＝（アス゛キプボニン■）である。

この発明のアズキプボニン類は実質的に純粋であり、こ
の“実質的に純粋“とは、サポニン類のみを少なくとも
９０％以上好ましく１−ｔ９８％以上含むことを意味す
る。

この発明によれば、アズキの種子を脱脂処理し、次いで
低級脂肪族アルコール又はその含水物で抽出し、抽出液
を濃縮し、濃縮エキスを水とｎ−ブタノールで分配処理
し、ブタノール層を濃縮し、得られる粗サポニン類を精
製処理してアズキサゲニン類を単離する方法が提供され
る。以下具体的に説明する。

厚料となるアズキの種子はなるべく種皮を除き粉砕する
。この粉砕物を脱脂処理する。その際、通常の脂溶性有
機溶媒、例えばエーテル、ヘキプン、ベンゼン、石油エ
ーテル、リグロイン、酢酸エチルなどが用いられるが、
好ましくは酢酸エチルである。

この脱脂物を低級脂肪族アルコール又はその含水物で抽
出処理する。この抽出は使用する溶媒が煮沸する程度に
加熱して行わｎる。低級脂肪族アルコールトシてはメタ
ノール、エタノール、フロパノール、ブタノール等が挙
げられるが、メタノールが最も好ましく次いで０〜６０
％メタノール含有水が好ましい。この抽出処理は数回繰
り返すのが好ましく、−回の溶媒の使用量は上記脱脂物
に対し２〜４倍（重量／重量）程度が好ましい。

次いでこの抽出液をなるべく低温低圧で濃縮する。ある
程度濃縮が行なわれると褐色の沈澱物を生ずるので、こ
れを戸別するのが望ましい。そのＰ液をさらに濃縮して
エキスとする。

この濃縮物（エキス状）を水とｎ−ブタノールで分配処
理する。この分配処理は　ｉ）濃縮物を水とｎ−ブタノ
ールの混液の約２＝１〜約１＝２の重量比率のもの、好
ましくは約ｌ：ｌの重量比率のものと振盪するかｉｉ）
濃縮物を水に懸濁し、ｎ−ブタノールと共に振盪するか
、　１ｌｌ）濃縮物を水飽和ｎ−ブタン−ルに溶解後、
水を添加して振盪するかの何れの方法によってもよい。

目的とするサポニン成分は、ｎ−ブタノール層に移行さ
れる。

上記ｎ）の場合をさらに説明すれば、濃縮物をはｙ同型
量の水に懸濁し、これに約１．０〜２．０倍量（重量）
のｎ−ブタノールを加えて振盪し、この処理を２〜３回
繰り返すことにより、目的とするアズキプボニン類をｎ
−ブタノール層に移行させる。この際の温度は常温で行
われる。

かくして得られるｎ−ブタノール層をなるべく低温低圧
で濃縮する。この濃縮は乾固するまで行うのが好ましい
。この濃縮物は粗サポニン類からなるが、さらにこれは
精製処理に付される。

この精製処理の第一の方法は、サポニン類に対し溶解性
の有機溶媒と非溶解性の有機溶媒とを組合わせて行われ
る。この発明のサポニン類は水、メタノール、ジメチル
スルホキシド、ピリジン等に易溶性で、エーテル類、ヘ
キサン、クロロホルム、アセトン、酢酸エチル等に不溶
であり、これらを組合わすことができるが、好ましい組
合わせはメタノールとエチルエーテルである。すなわち
、粗サポニン類を溶解性有機溶媒に溶解し、これを不溶
解性溶媒中に加えるか又はこれに不溶解性溶媒を加える
かして行えばサポニン類が精製されて析出する。この際
、活性炭処理すればより効果的である。

また第二の精１！法として、上記粗サポニン類を吸着性
樹脂と接触させて吸着させ、次いで溶離させてもよい。

吸着性樹脂としては、巨大網状構造で多孔性の架橋され
たポリスチレン系樹脂が好ましい。その具体例としては
セルバクロムＸＡＤタイプ−２（１００〜２００μ、セ
ルバクロム社製）、アン）＜　−ライトＸＡＤ−２（ロ
ームアンドハース社製）等が挙げられる。こ＼で使用す
る溶媒系としては、まず粗プボニンを溶解するのに水又
は３０％以下の低級脂肪族アルコール含有の水（好まし
くｌ”ｔｌ　０％メタノール含有水）を使用し、次に低
級脂肪族アルコール又は約３０％以上の低級脂肪族アル
コール含有の水（好ましくは３５〜９９％メタノール）
ｔ−用いて溶離させればよい。

また第三の精製法として、上記粗サポニン類を遠心液体
クロマトグラフィ（例えば担体：ＫＴゲル、富士ゲル販
売株式会社製；溶出溶媒：クロロホルム／メタノール／
水＝１０／３／１の下層；回転数：　３００ＲＰＭ）に
付して精製してもよい。

さらに第−又は第二の精製法の手段に続いて第三の精製
法の手段を用いて精製してもよい。

このようにして得られたアズキプボニン類は、大質的に
サポニン成分のみを含むものであって、そのま＼この発
明の有効＃を分として使用できる。

またこのアズキプボニン類は、アズキの種類によって構
成される成分の種類、量に若干の差があるであろう。

また式ＣＩ）の各々の成分を単離するには、前記第−又
は第二の精製法の手段に続いて第三の精製法の手段を用
いるのが好ましい。

アズキプボニン類は、天然には塩として存在していると
考えられるが、単離は酸の形で行い、所望により塩に変
換してもよい。塩としては、アルカリ金属塩又はアルカ
リ土類金属塩遺体的にはナトリクム塩、カリクム塩、カ
ルシクム塩、マグネシクム塩などが挙げられる。またこ
れらの塩は常法によって作られるがト例えば含水エタノ
ールに溶解し、弱アルカリ性になるまで飽和水酸化力ル
シクム水溶液を加え、減圧下アルコールｔ−蒸発させ、
次いで水を加えて沈澱を集め含水エタノールで再結晶さ
せてカルシクム塩が得うれる。

この発明のサポニン類は、例えば医薬として有用である
。ことに脂質代謝促進作用を有し、肥満の防止、高脂血
庁の予防と治療に有効であると考えられる。さらに過酸
化脂質生成の抑制作用に基づき動脈硬化症、心筋症、脳
溢血、脳血栓症の予防と治療及び老化防止に用いたり、
尿酸代謝促進作用に基づく痛風の予防と治療に有効と信
じられる。

従ってこの発明はアズキから単離されたアズキプボニン
類もしくは式（ｒ）の各々のサポニン又はその医薬的に
受容な塩と医薬的に受容な賦形剤易からなる代謝用薬剤
組成物を提供するものである。

この組成物は、経口用又は非経口用のいずれであっても
よい。経口用剤形としては通常散剤、錠剤、ＦＬ剤、カ
プセル剤、薬剤、顆粒剤、液剤（チンキ剤、流エキス剤
、慰精剤、懸濁剤、リモナーデ剤、シロップ剤などを含
む）などが挙げられる。

また非経口剤形としては、注射剤、点滴剤、軟膏、硬膏
剤、液剤（酒精剤、チンキ剤、ローション剤等を含む〕
、湿布剤（パップ剤、パスタ−剤）塗布剤、噴霧剤、散
布剤、リニメント剤（塗擦剤）、クリーム剤、乳剤、浴
剤などが挙げられる。

投与量は病状ンζ応じて異なるが、経口用の製剤、注射
剤、点滴剤の場合、サポニン成分として成人１日当り２
０〜１０１００Ｏ，好ましくは３０−３００−１を２〜
３回に分けて投与することはよって効力を発揮すること
が出来る。又、非経口用の゛外用の場合、サポニン成分
として０．０１〜５％濃度の配合でよく、好ましくは０
．１−１％の製剤として使用するのがよい。

ここに使用される固体または液体の賦形剤としては、当
該分野で公知のものが使用される。ただ後述のような１
回の投与量に必要なこの発明の化合物を含むように製剤
化するのが望ましい。

いくつかの例を挙げると教則、その他の内服用粉末剤に
おける賦形剤としては、乳糖、澱粉、デキストリン、リ
ン酸力ルシクム、炭酸力ルシウム、合成および天然ケイ
酸アルミニクム、酸化マグネシウム、乾燥水酸化アルミ
ニクム、ステアリン酸マグネシクム、重炭酸ナトリクム
、乾燥酵母などが挙げられる。

外用散剤の場合は酸化亜鉛、タルク、澱粉、カオリン、
ホク酸末、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸マグネシク
ム、炭酸マグネシウム、沈降炭酸力ルシウム、次没食子
酸ビスマス、硫酸アルミニウムカリクム末などが挙げら
れる。液剤における賦形剤としては水、グリセリン、プ
ロピレングリフール、単シロップ、エタノール、脂肪油
、エチレングリコール、ポリエチレンクリコール、ソル
ビトールなどが挙げられる。さらに軟膏剤の場合には脂
肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、グリセリン、ミンロ
ク、モクロク、パラフィン、流動パラフィン、樹脂、高
級アルフール、プラスチックス、グリコール類、水界面
活性剤などを組み合わせて作ったｉ性基剤あるいは親水
性基剤（乳剤性基剤、水溶性基剤および懸濁剤性基剤を
含む）が賦形剤として使用される。

浴剤とするには、本発明のサポニン類にボク硝や硫酸カ
リクム等の希釈剤を加えて製剤化するのが好ましい。

次にこの発明のアズキサポニンの製造例を示す。

実施例１．（アズキサゲニン類の製造）小豆（Ｖｉｇｎ
ａ　　ａｎｇｕｌａｒｉｓ　（Ｗｉｌｌｄ、）Ｑｈｗｉ
ｅｔ　　０ｈａｓｈｉ、北海道産犬納言、５ｇ）を粉末
とし、ヘキサジ１５ｅで１時間加熱抽出し脱脂を行いそ
の残留物についてメタノール（１５ｅ）で加熱抽出する
。５時間還流した後濾過してメタノール抽出液を得、残
渣は新たにメタノール（１５ｅ）を加え加熱抽出する。

同様の操作を計５回行い、得られたメタノール抽出液を
合し、減圧濃縮する。メタノール抽出液の濃縮過程にお
いてかっ色沈殿が生じるので、これを戸別し沈殿ＣＢ４
９　）を得る。涙液は減圧下溶媒留去しメタノールエキ
ス（９６Ｆ）を得る。このメタノールエキス（９６Ｎ）
を水（１００ｍ／）に懸濁させ、ｎ−ブタノール（＋５
０．、ｅＸ３）抽出する。ｎ−ブタノール移行部は減圧
下溶媒留去し、ｎ−ブタノールエキス（３８ｆ）を得、
また水移行部から同様にして水工キス（４６Ｆ）を得る
。ｎ−ブタノールエキス（３８９）ヲ少量のメタノール
に溶解し、多量のエチルエーテル中に撹拌しながら滴下
する。生じる沈ｗｋ（＋４ｆ）を戸数した後活性炭（特
製白鷺、武田薬品工業株式会社製）−セライ）５３５（
和光純薬工業株式会社製）カラムで脱色精製して白色粉
末としてアズキサボーン類（ＩＯｙ）を得る。このアズ
キプボニン類は以下の性質を有する。

ａ、　　［ａ＋］”＋１１．１°　（Ｃ＝　１．０．メ
タノール）の旋光度を有する。

ｂ、赤外線吸収スペクトル（ＫＢｆ、　ａｎ−’　）は
３４７５　（ブロード、強）、２９３０　（強〕２３Ｄ
＋６０９（ブロード、強）、１１００（ブロード、強）
に特有の吸収極大を有す。

Ｃ６白色粉末である。

ｄ、溶解性はジメチルスルホキシド、ピリジンに易溶、
メタノール、水に可溶、アセトン、クロロホルム、エー
テル、ヘキサジに不溶で６る。

ｅ、薄層クロ寸トゲラフイー（担体：プレコートノシリ
カゲル６０Ｆ　　２５４．０．２５．、、　　メルク社
製；展開溶媒：クロロホルム：メタノール：水＝６：４
：Ｉ）に付した場合６つのＲｆ値を示す。

薄層クロマトグラム上１％硫酸第２セリクムと１０％硫
酸の混合液を噴霧し、加熱すると赤紫色を呈す。

実施例２．　アズキプボニン類からアズキプポニン■の
単離 実施例１の方法で得られたアズキサポニン（５ｆ）を遠
心クロマトクリフィー（装置：日立遠心クロマトグラフ
、ＣＬＣ−５；担体：ＫＴゲルフ冨士ゲル販売株式会社
製、１００ｆ；溶出溶媒：クロロホルム：メタノール：
水＝１０：３：ｌ（下層）；回転数：　３Ｘ１００Ｒ，
Ｐ、Ｍ、）　　で分離し、アズキサポニン■カルボキシ
レート型（０，９６ｇ）を得る。

アズキプポニン■（カルボキシレート型）は以下の性質
を示す。

ａ、　　［Ｑｌ　］”＋１４．０°（Ｃ＝１．１．　メ
タ／　　／ｌ／）の旋光度を有する。

ｂ、赤外線吸収スペクト７１／　（ＫＢｒ　、　（ｍ−
’　）は８４００　（ブロード、強）、２９３０　（強
）　、＋６１０（ブロード、強〕、＋０４０　（ブロー
ド、強）に特有の吸収極大を有す。

Ｃ，２１０ｎｍより長波長には紫外線吸収を示さない。

ｄ、白色粉末である。

ｅ、　Ｇ解性１−１ジメチルスルホキシド、ピリジンに
易溶、水、メタノール、エタノールに可溶、アセトン、
クロロホルム、エチルエーテル、へキサンシこ不溶であ
る。

ｆ、薄層クロマトグラフィー（担体：プレコートのシリ
カゲル６０Ｆ−２５４，０，２５餌、　メルク社；展開
溶媒：クロロホルム：メタノール：水＝６：４：１）に
付した場合Ｒｆ値０．４９を示す。

薄層クロマトグラム上１％の硫酸第２セリクムと１０％
の硫酸の混合液を噴霧し、加熱すると赤紫色を呈す。

上記の方法で得たアズキサポニン■カルボキシレート型
（１ｆ）をメタノール＋ｏｏｍｅに溶解し、グク＝ツク
ス５０Ｗ×８（Ｈ”ｑ　　）５ｍｌｌｔ加ｊ−５加温−
５室温ｃりで１時間撹拌する。樹脂を戸別し、ｐ液を減
圧下溶媒留去してアズキサポニンｎ（０，９ｆ）を得た
。

実施例３．（アズキプボニン類からアズキサポニンＩ、
　Ｉｔ、■、■、Ｙ及び■の単離）実施例１の方法で得
たアズキプボニン１（２５ｆ）１に６０％メタ／−ル水
に溶解し、シリカゲル（ａｏｌ、７０〜２３０メツシユ
、メルク社、以下省略）にまぶした後赤外線ランプを照
射して乾燥する。

これをシリカゲル（１，５Ｋｌｔ−充填したカラムンζ
層積する。そしてクロロホルム：メタノール：水（６５
：３５：１０、下層）を溶出溶媒としてクロマトグラフ
ィー全行いアズキプボニンＩ　、ＩＩ　混合物ＣＢ、５
ｆ）、アズキプボニン■及び■の混合物（４，２１、ア
ズキサポニン■及びＶの混合物（２，２ダ）、およびア
ズキプボニン■含有分画（１，６９）に分離する。

この様にして得られた分画について更に次の様に分離操
作を行った。

アズキサポニンエ及びｎの混合物（８，５１！Ｉ′ｉメ
タノールに溶解し、ジアゾメタン−エーテル溶液を加え
メチルエステルＣＢ、Ｔｆ）とする。

ついでアス°キサボニン■及び■のメチルエステル混合
物を上記と同様にカラムクロマトグラフィー（担体：シ
リカグノペ　］　ｘｐ　；溶出溶媒：クロロホルム：メ
タノール：水＝１０：３：１．下Ｎ）で分離してアズキ
サポニンエメチルエステル（１，１２ｙ）およびアズキ
サポニン■メテルエヌテ／ｌ／（４，ｏ２ｙ）ｔ４る。

アズキサポニンＩメチルエステル（Ａ、ｌ２ｆ）ｆ：エ
タノール（１００ｍ（Ｊに溶解し、５％炭酸カリクム水
溶＃（＋５−ｇ）を加え３時間加熱還流する。

１０％硫酸水溶液で中和後、エタノールを減圧下留去し
、冷水を加え生じる沈殿をｔｐ取する。沈殿をメタノー
ルに溶解し、タフエックス５０Ｗ　Ｘ　８（Ｈ＋＋２０
〜５０メツシュ、室町化学工業製）でカルボキシル基金
遊離とした後、結晶化してアズキプボニンＩ（無色微細
結晶、ｏ、５３Ｆ）を得る。

アズキプポニン■メチルエステルＣ４，０２ｆ）も同様
にアルカリ加水分解、樹脂処理してカルボキシル基遊離
とした後メタノールから結晶化してアズキプボニン■（
無色針状晶、３．４ｙ）を得る。

アズキプボニン■及び■の混合物Ｃ４，２ｆ）は遠心ク
ロマトグラフィー（日立遠心クロマトグラフＣＬＣ−５
、ＫＴゲル、富士ゲル販売社製、１００ｆ１クロロホル
ム二メタ／−／Ｌ／：水＝ＩＯ：３：１の下層、回転数
３ｘｌＯＯＲ，ＰｏＭ、）で分離後樹脂（タフエックス
５０ＷＸ８、Ｈ＋型）処理してアズキプボニン１１（１
，２ダ）、アズキプボニンＩＩＩ（１，５ｆンを得る。

アスキテボニン■及びＶの混合物Ｃ２，２ｆ）ｎカラム
クロマトグラフィー（担体：シリヵゲノペ１２０ｆ　ｉ
溶出溶媒：ｎ−ゲタノール：酢酸エチルエステル：水＝
５：１：４、上層）で分離後、樹脂（タフエックス５０
ＷＸ８、Ｈ＋型）処理してアズキサポニンｆｆ（０，４
５５Ｍおよびアス゛キプボニンＶ（０，６９）を得る。

アスキサボニン■含有分画（１，６Ｆ）は樹脂（タフエ
ックス５０ＷＸ８、Ｈ＋型）処理した後、ｎ−ブタノー
ル−水で分配する。ｎ−ブタノール移行部を減圧濃縮後
、カラムクロマトグラフィー（担体ニジリカゲル、５ｏ
ｆ；溶出溶媒：クロロホルム：メタノール二本＝６５：
３５：１０．下層）テ分離後、樹脂（タフエックス５０
ＷＸ８、Ｈ＋型型処処理てアス°キサボニン■ｏ、ｓｙ
ｔ’Ｎる。

上記実施例２．３で得られた各アズキプボニンの化学構
造式及び物性は次のとおりであった。

（１）アス°キプボニンＩ　（Ｃ４２Ｈｓｓ　Ｏ＋ｘ　
）ａ、構造式 ％式％ ２１５〜２１７℃（メタノールで再結晶、無色微細結晶
） ｄ、赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ　） ３４００．２９４０，１７２０．＋６２５、＋０７５及
び１０４０備−１ ｆ２１　７　ス”　＊　’ｌ’　ホニンＩｆ　（Ｃ４２
Ｈｓｌｓ○１４２Ｈ２ｏ）ａ、構造式 ％式％ ｄ、赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ） ３４００（ブロード、強）、２９３０Ｃ強入１６１０　
（ブロード、強）及び２０４０（ブロード、強）備−１ ｅ、”ｃ−核磁気共鳴スベクトル（ｄ、−ピリジン、δ
Ｃ） １　７　１．９　　（Ｃｏｏ）（）、　１４４．８（Ｃ
，３ン、　　Ｉ２２．５（Ｃ，□４〕、１０５、１及び
１０４．７（いずれもア／メリンク炭素）並びに９１．
１（Ｃ，） ｆ、溶解性 ジメチルスルホキシド、メタノール、ピリジンに易溶、
水、エタノールに可溶、クロロホルム、アセトン、酢酸
エチ／Ｌ／、エチルエーテルに不溶である。

ｇ、奥はなく、水溶液は弱酸性を呈す（水２Ｊにアズキ
サポニン■（カルボキシル型）’１．ｎｆを溶解させた
溶液はｐ）（６を示す）。

ｈ、無色の針状結晶（メタ／−ルから結晶化）である。

ｉ、シリカゲルを用いた薄層クロマトクリフィー（プレ
コートのシリカゲル６０Ｆ−２５４，０，２５餌、メル
ク社製）で、展開溶媒（クロロホルム：メタノール：水
＝６：４：１）に付した場合Ｒｆ（ｉｉｏ、４９を示し
、展開溶媒［ｎ−ブタノール：酢酸エチルエステル：水
＝４：１：５（上層）］に付した場合Ｒｆ値０．２０を
示す。

ｊ、薄層クロマトグラム上１％硫酸第２セリクムと１０
％硫酸の混合液を噴霧し、加熱すると赤紫色を呈す。

ｋ、メタツリシス（９％塩化水素−ＫＮメタノール中加
熱還流する）するとメチルグルコシドおよびメチルグル
クロニド各々１モルが得られる。

箱守法（沃化メチル、ジメチルスルホキシド、水素化ナ
トリクム）によってメチル化すると完全メチル化体〔白
色粉末、［Ｑ！］ぜ＋１３．２゜（Ｃ＝１．２、クロロ
ホルム）、Ｃ６Ｃ６１Ｈ１１＋４、赤外線吸収スペクト
ル（四塩化炭素、ｅｓ−１）は１７６０（強）、１０９
５　（ブロード、強）〕が得られる。

完全メチル化体を水素化アルミニウムリチクムで還元後
、メタツリシスするとメチル化すポゲノールとして２１
．２４−ジーＯ−メチルソーヤサポゲノールＢおよびメ
チル化糖としてメチル２．３．４．６−テトラ−０−〆
チルグルフピラノシド、メチル３．４−ジー０−メチル
グルフピラノシドがそれぞれ１モル得られる。

（３）　　アズキサポニンＩ［［（Ｃ，□Ｈｇｇ　０１
！　）ａ、構造式 ％式％ ２１８〜２２１°Ｃ（水性メタノールで再結晶化、無色
微細結晶 ｄ、赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ） ３４００．２９４０．１７０５．１６３５．１０６５及
び１０４１０４Ｏ’ ｅ、溶解性はアズキサポニン■と同様であった。

（４）　　アス°キサボニンＰＩ　（ＣＱ　Ｈ％　Ｏコ
）ａ、構造式 ％式％ ２３５〜２３７℃（メタノールから再結晶）ｄ、赤外吸
収スペクトル（ＫＢｒ　） ３４００．１７２０．１６５０及び１０１０７Ｏ’ｔ５
１　７ＸキｖホニンＶ　（Ｃ４，Ｈ，８０，、）ａ、構
造式 ％式％ ２２８〜２２９℃（水性メタノールから再結晶）無色微
細結晶 ｄ、赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ） ３３８０．２９３Ｌ　１７２６．１６３６、＋０７２及
び１０２６閑−１ （６）アス゛キサボニンＶＩ　（Ｃ％Ｈ％　Ｏｉｒ　）
ａ、構造式 ％式％ ｃ、赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ） ３４００．２９２０．１７２５．１６３３．１０５５及
び１０３２ｍ−’ 次に、このようにして製造したアズキプボニンの薬理試
験結果を示す。

過酸化脂質生成抑制薬理試験 坑腫瘍薬、アドリアマイシンはＤＮＡと結合して核酸合
成を抑制すると共に心臓での脂質代謝を阻害して過酸化
脂質を蓄積させ心筋障害を副作用として引起す事が広く
知られている。

この発明の発明者らはこれを利用して、過酸化脂質生成
抑制作用について、アズキサポニン１１■、■、■、ｖ
及び■並び旧総アズキプボ″：し類の過酸化脂質抑制剤
としての効力検定を行い、いずれも強い過酸化脂質抑制
作用のあることを見出した。

以下、具体的に試験結果を説明する。

［実験方法］ １）ＣＯＦ系雄性マウス（５週齢２０〜２５ｆ）５匹ず
つで構成された群を用い、各マクスにアドリアマイシン
（協和醗酵工業製）を１５．、ｆ＾の用量で腹腔内投与
（薬液量：体重ＩＯＮ当１１１０．１５Ｊ）した。

下記第１表ンζは被検サポニンとして実施例１．２゜３
、のいずれかで得たアズキサゲニン類並びにアズキプボ
ニンエ、■、■、Ｖｌ、Ｖ及び■を用いた場合の結果を
示した。各被検薬は、アドリアマイシン投与１日前より
体重１０ｇ当！＋０．１０．．６割合で腹腔内投与を開
始し、５日間連続投与を行なった。なお、被検薬はいず
れも使用直前に、０．９％生理食塩水もしくは１％ツイ
ーン８０　（ＴｗｅｅｎｇＱ）含有０．９％生理食塩液
に懸濁　　　　　　　゛　−ダ丑士ｉ日させて用いた。

また各被検薬は毎日正午に投与し、アドリアマイシンの
みは被検薬投与３時間後に投与した。各被検薬投与量は
、各アズキサポニンについて２００イ／Ｋｆ、１００４
／Ｗ、５０．４７Ｋｌ、２５．ｄ’／Ｋｆ、及び！２．
５．ｄ’／Ｋｉｔ’であり、また対照群のマウスには０
，９％生理食塩水を投与した。

２）過酸化脂質の測定は、各動物を６８目に頚椎脱臼に
て層殺し、速やかに心臓及び肝臓を摘出し、湿重量を測
定した後、水冷下ボッタボ型テフロンホモジナイデーで
０．９％生理食塩水を用いて２％ホモジネート液を調製
した。これを検液として次の八木改良法を用いて過酸化
脂質ｔを測定し、心臓、肝臓中の過酸化脂質を定量し対
照群と比較した。

上記２％ホモジネート液０．２４に３％ラクリル硫酸ナ
トリクム水溶液０．５−ｇを加え、３０秒振盪混和せし
め、これに酢酸緩衝液（ＰＨ３，６）　１．５４及び０
．８％チオパルピックル酸溶液！、５ｆｎｅを加え、蒸
留水をもって全容４．０．１４１？とじた後、３０秒間
よく振盪し、油浴中で６０分間９５℃で加熱後、５分間
流水にて冷却する。次に０．２規定塩酸１．０−１ｎ−
ブタノール／ピリジン（１５：　Ｉ　）溶液５．０−ｇ
を加え、激しくふりまぜた後、１５分間遠心分離（３０
００ｒｐｍ　）に付し、上層のｎ−ブタノール層を分取
し、蛍光分光光度計（Ｅｘ５１５ｎｍ、　ｌ：ｍ５５３
　ｎｍ）τ蛍光度を測定する。別にマロンアルデヒド標
準液を用いて本操作と同一の試験を行った蛍光度と過酸
化脂質量との関係を示す検量線を作成しておき、測定値
をこれにあてはめ含有量を求めた。

〔実験結果〕

各被検薬、各投与量の作用を比較するため次式によって
過酸化脂質生成抑制率を求め、その結果を第１表に示す
。

Ａニアドリアマイシンを投与しない群の過酸化脂質濃度 Ｃニアドリアマイシンを投与した対照群の過酸化脂質濃
度 Ｄ＝ニアドリアマイシンび被検薬を投与した群の過酸化
脂質濃度 〔以下余白、次頁に続く。〕 急性毒性試験 一週間予備飼育し、健康で発育の順調な体重１９０〜２
３０ｇのヴイスタ系うット４０匹および１８ｇ〜２１（
７体重のＤＤＹ系マウマウス４０匹い前記アズキサポニ
ン類の１回経口投与による急性毒性試験を実施した。上
記ラットとマウスについて、それぞれ１０匹づつの４グ
ループに分は無投与群、０．８ｇ／ｋ（］体重投与群、
１．８（１／ｋ（Ｉｔ体重投与群、および最大投与可能
量の３．２（］　／ｋｇ投与の群について観察したがい
ずれも死亡例が認められなかった。

（以下余白、次頁に続く。）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、アズキに含有され、次の性質： ａ、〔α〕＾２＾３＿Ｄ＋１１．１°（Ｃ＝１．０、メ
   タノール）の旋光度を有する、 ｂ、赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ、ｃｍ＾−＾１）は
   ３４７５（ブロード、強）、２９３０（強）、１６０９
   （ブロード、強）、１１００（ブロード、強）に特有の
   吸収極大を有する、 ｃ、白色粉末である、 ｄ、溶解性はジロチルスルホキシド、ピリジンに易溶、
   メタノール、水に可溶、アセトン、クロロホルム、エー
   テル、ヘキサンに不溶である、ｅ、薄層クロマトグラフ
   ィー（担体：プレコートのシリカゲル６０Ｆ−２５４、
   ０．２５ｍｍ、メルク社製；展開溶媒：クロロホルム；
   メタノール：水＝６：４：１）に付した場合６つのＲｆ
   値を示す、ｆ、薄層クロマトグラム上１％硫酸第２セリ
   ウムと１０％硫酸の混合液を噴霧し、加熱すると赤紫色
   を呈す、 ｇ、過酸化脂質生成抑制作用を有する、 によって特徴づけられる実質的に純粋なアズキサポニン
   類又はその医薬的に受容な塩。 ２、アズキの種子を脱脂処理し、次いで低級脂肪族アル
   コール又はその含水物で抽出し、抽出液を濃縮し、濃縮
   エキスを水とｎ−ブタノールで分配処理し、ブタノール
   層を濃縮し、得られる粗サポニン類を、精製処理に付し
   て、次の性質：ａ、〔α〕＾２＾３＿Ｄ＋１１．１°（
   Ｃ＝１．０、メタノール）の旋光度を有する、 ｂ、赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ、ｃｍ＾−＾１）は
   ３４７５（ブロード、強）、２９３０（強）、１６０９
   （ブロード、強）、１１００（ブロード、強）に特有の
   吸収極大を有する、 ｃ、白色粉末である、 ｄ、溶解性はジロチルスルホキシド、ピリジンに易溶、
   メタノール、水に可溶、アセトン、クロロホルム、エー
   テル、ヘキサンに不溶である、ｅ、薄層クロマトグラフ
   ィー（担体：プレコートのシリカゲル６０Ｆ−２５４、
   ０．２５ｍｍ、メルク社製；展開溶媒：クロロホルム；
   メタノール：水＝６：４：１）に付した場合６つのＲｆ
   値を示す、ｆ、薄層クロマトグラム上１％硫酸第２セリ
   ウムと１０％硫酸の混合液を噴霧し、加熱すると赤紫色
   を呈す、 ｇ、過酸化脂質生成抑制作用を有する、 によって特徴付けられる実質的に純粋なアズキサポニン
   類を単離することを特徴とするアズキサポニン類の製造
   法。 ３、精製処理が、粗サポニン類を低級脂肪族アルコール
   に溶解後、その溶液をアズキサポニン類に対し非溶解性
   の有機溶媒で処理し、アズキサポニン類を単離すること
   からなる特許請求の範囲第２項記載の方法。 ４、精製処理が粗サポニン類を水又は約３０％以下の低
   級脂肪族アルコール含有水に溶解し、この溶液を吸着性
   樹脂に接触させて吸着させた後、低級脂肪族アルコール
   含有水で溶離してアズキサポニン類を単離することから
   なる特許請求の範囲第２項記載の方法。 ５、次の性質： ａ、〔α〕＾２＾３＿Ｄ＋１１．１°（Ｃ＝１．０、メ
   タノール）の旋光度を有する、 ｂ、赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ、ｃｍ＾−＾１）は
   ３４７５（ブロード、強）、２９３０（強）、１６０９
   （ブロード、強）、１１００（ブロード、強）に特有の
   吸収極大を有する、 ｃ、白色粉末である、 ｄ、溶解性はジメチルスルホキシド、ピリジンに易溶、
   メタノール、水に可溶、アセトン、クロロホルム、エー
   テル、ヘキサンに不溶である、ｅ、薄層クロマトグラフ
   ィー（担体：プレコートのシリカゲル６０Ｆ−２５４、
   ０．２５ｍｍ、メルク社製；展開溶媒：クロロホルム；
   メタノール：水＝６：４：１）に付した場合６つのＲｆ
   値を示す、ｆ、薄層クロマトグラム上１％硫酸第２セリ
   ウムと１０％硫酸の混合液を噴霧し、加熱すると赤紫色
   を呈す、 ｇ、過酸化脂質生成抑制作用を有する、 によつて特徴付けられる実質的に純粋なアズキサポニン
   類又はその医薬的に受容な塩と医薬的に受容な賦形剤と
   からなる過酸化脂質生成抑制剤。