JPS62500027A

JPS62500027A - エプスタイン、バールウィルス核抗原と免疫反応する抗体を産生する化学的に合成されたポリペプチド

Info

Publication number: JPS62500027A
Application number: JP60503593A
Authority: JP
Inventors: ヴオーン　ジヨン　エイチ; カーソン　デニス　エイ; ローデス　ゲアリー; ホーテン　リチヤード
Original assignee: スクリツプス　クリニツク　アンド　リサ−チ　フアウンデ−シヨン
Priority date: 1984-08-08
Filing date: 1985-08-02
Publication date: 1987-01-08
Anticipated expiration: 2009-10-05
Also published as: IL76037A; US4654419A; USRE33897E; ATE114671T1; ES545971A0; IE851954L; DK172035B1; WO1986001210A1; AU4721085A; ZA855971B; ES8700442A1; DE3587949T2; DK156786D0; EP0191813B1; EP0191813A1; DK156786A; CA1292839C; EP0191813A4; NZ213035A; AU585529B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

合成ポリペプチドとエプスタイン・バールウィルス核抗原に関する抗体本発明は免疫原、抗１つ、接種材料、抗体、エプスタイン・バールウィルスによる病気の治療２診断に有効な方法及びシステム、そのウィルスの核抗原に関するものである。幻シ憚臘エプスタイン・バール・つイルス（ＥＢＶ）はヘルペスウィルス科の一種で人間の感染性単核の病室体である。又、ＥＢＶはバーキットリンパ腫、上咽頭がん及び免疫抑制患者に生ずるＢ−リンパ球腫瘍の病因に関係している。さらに、リューマチ性関節炎やシエーグレン症１侯群のような人間の自己免疫疾患におけるこのウィルスの役割の可能性を示す状況鉦拠がある。ＩＥ　ＢＶは世界中の成人の８０〜１００％が感染している極めて一般的環境因子である。初期もしくは一次感染は急性か又は潜伏性である。ＥＢＶ移染が循環血液、リンパ節及び肺臓中に存在するＢ−リンパ細胞中で潜伏している期間の長い間追跡した。潜伏とはつ・イルスが発現しないか又は部分的に発現した状態で細胞内に存在する過程である。この潜伏は再び活性化することができる。生体内で潜伏を制御する宿主因子はあまり知られていないが、１つまたはそれ以」二の免疫メカニズムの欠１員が重要因子となることを示すいくつかの証（処がある。ｌ？：Ｂｖへの免疫応答の細胞毒性で抑圧性のＴ細胞要素は免疫ダログリンＭにおけるＥ　Ｂ　Ｖによる急性感染を抑圧するのに非常に重要であることが報告されている。また、それらはＥＢＶで潜伏的に感染させた＋３１Ｊンパ球の無料ｆｌｊな増殖を妨書するに重要である。Ｔ細胞サプレッサーメカニズムの欠損は、アフリカのバーキットリンパ腫、上咽頭がん、器官移植の拒絶反応をおさえるのに用いられる免疫抑制療法の結果性ずるＢ　ＩＪンバ球ＩＩｔｇＡ、及び種々の自己免疫の無秩序さの処理の間に生ずるリンパ球腫瘍の発生させるのに１Ｒ要であると考えられている。エプスタイン（Ｅｐ９ｔｅｉｎ　）とアコング（Ａｃｈｏｎｇ）　１１７４“エプスタイン・バール・ウィルス”；スプリング−バーレグ（Ｓｐｒｉｎｇ−νｅｒｌｅｇ）版、ベルリン、ハイデルベルグ（１９７０年）及び、クロウフォード（Ｃｒａｗｆｏｒｄ）等、ランセ・ノド（ＬａｎｃｅＬ３　。１３５５頁、（１９８０年）。加えて、それらのＴ細胞メカニズムやＥＢＶが感染したリンパ球のひきつづき起こる増殖の欠損がリューマチ性関節炎において重要な役割を果していると考えられている。スローター（Ｓｌａｎｇｈｔｅｒ　）等、実験医学雑Ｌｆ、　（Ｊ、　Ｅｘｐ、Ｍｅｄ）　、　＋　４８巻、　１４２９頁（１９７８年）、デッパー（口ｅｐｐｅｒ）等、免疫学雑誌（Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　）　１２７巻、１１（９９頁（１９８１年）、トサト（Ｔｏｓａｔｏ）等、英国医学雑ｖＪ（Ｎ　、Ｅｎｇｌ　、　Ｊ　、Ｍｅｄ、　）　３０５巻。１２３８頁（１９Ｂ］年）。ＥＢＶによる一次感染にひきつづく血ｌｎ学的及び細胞媒介した免疫応答はよ（記述されているし、感染をｉ頂して発現されるウィルス抗原に対する宿主の応答を反映している。組織におけるこの抗原の検出と同様にこれらの応答の側面がＥＢＶに関連した疾患の診断に役立つようになってきている。感染後検出される最も早いＥＢＶ関連の抗原はＥＢＶ銹導の核抗原（ＥＢＮＡ）である。ＥＢＮＡは潜伏的に感染している増殖する形質転換したＢリンパ細胞の中に検出される。またＥＢＮＡはアフリカのバーキット腫瘍リンパ芽球や悪性の上咽頭がん細胞の核中に検出される。ＥＢＶに感染したＢリンパ細胞の細胞核中のＥＢＮＡの濃度は細胞再生サイクルの種々の相で変化する。この様に、ＥＢＮＡは周期的に合成されたり、分解されたりしている。そのような分解の結果として、ＥＢＮＡのタンパク質断片（ポリペプチド）は細胞質を通過し、り（膜」−に存在するか、そこで発現すると１８ＩＬられている。しかし、特異的なｒＥ　Ｂ　Ｎ　Ａの分解ポリペブチＩ・は今日まで同定されていない。細胞の外股中又はその」−に存在するＥＢＮ八分へポリベプ・Ｉ−ドは宿−（Ｔリンパ細胞に対してｉｎ大なφり激を構成し、抗ＥＢＮＡの抗体を生産をうながす免疫応答を開始すると信１〜られている。また、細胞表面上にＥ　１３　Ｎ　Ａ分解ポリペブチ１′を発現する、Ｂ細胞に対する特異的なＴ細胞応答は、ＥＢＮＡＭ有（ＩＥＢＶの感染した）Ｂリンパ細胞の増殖を制限するのに重要な細胞毒性及び抑圧的ＴＩ（Ｉｆ抱の発生をうながす。このように、ＥＢＮＡ及び抗ＩＦ、　Ｉ３　Ｎ　Ａ抗体の双方の存在に対する検定はいくつかの一般的な臨床的見地からして重要である。さらに、Ｅ　［３Ｖが感染したＢリンパ細胞に対する牛痘庶もまた臨床的に重要であろう。抗Ｅ　Ｉ３　Ｎへ抗体は典型的には退屈な抗補体性免疫螢光法（ＡＣＩＦ）を使、って検定する。リードマン（Ｒｅｅｄ＋ｗａｎ　）等、国際がん雑誌１１巻、４９９−５２０夏（１９７３年）。この検定法は顕微鏡のスライドガラスにＥ　１３　Ｖを形質転換した人のＢ細胞を固定することを含んでいる。患Ｈの血清をいろいろに希釈したものを固定した細胞に加える。抗補体性の血清がその補体と混合されると（２段階操作）偽貨反応もしくはプロシンを生ずるために試験細胞のかたまりに、血清、補体、及びその抗補体性螢光結合物（３段階操作）を連続的に添加することが重要である。この検定法にはいくつかの問題点がある。それらにはこの検定は相対的に感度が悪く、そして補体を１ｌｌｌＬで媒介される増巾を必要と−４−るという事実が含まれている。加えて、この検定法は全く特異的ということではないし、その血清がホ乳動物の細胞核に対する抗体を含む思考については判断することができない、またさらに、抗補体免疫螢光検定法をつかって得られる定量的結果は再現性がない。これらやその他の理由で抗ＥＢＮＡ抗体に対する検定法は一般的に非常に僅かで専門化した研究室に躍られている。抗ＥＢＮＡ抗体を検定する上記の困難さは相対的に純粋なＦｉＢＮＡが無いこと根ざしている。ホ乳動物組織細胞培養から得られるＥＲ局のＭｉ製は抗原の低濃廣と多重形態のために複雑である。現行の方法のようにＥＢＮＡを発現する全細胞を使用するのがより簡単で安価であるけれども、特異性や再現性の問題は直接全細胞の使用の結集体ずるものである。遺伝工学と合成ポリペプチドの技術は最近大量のタンパク質やポリペプチド′抗原を製造するＩｊＪ題に解答を与えた。しかし、いずれの技術も生のタンパク質のアミノ酸配列が既知のときにのみ有効なものとなる。天然のタンパク質のアミノ酸残基の配列はタンパク質それ自身から決定することができるが、これはしばしば困難を伴う。このタンパク質をコードＬ２でいる遺伝子のヌクレオチド配列もまたクンバク質のアミノ酸残基配列を明らかにすることができる。しかし、全てのＤＮＡ配列は三種の可能な読み取り枠をもち、その各々が全く異なるタンパク質を生ずる。それ故、その遺伝子から正しいタンパク質のアミノ酸残基配列を引き出すには、正しい読み取り枠を知らなくてはならない。タンパク質をコードするＤＮＡ配列の正しい読み取り枠、つまり正しいアミノ酸残基の配列は抗体の使用によって決定することができる。この戦略は、三つの可能な遺伝子産物から得られる配列に対応するアミノ酸残基配列のタンパク質断片もしくはポリペプチドを作ることを含んでいる。その遺伝子の天然のタンパク質産物と免疫反応する抗体を誘導するタンパク質断片もしくはポリペプチドは、遺伝子の正しい読み取り枠と一致している。逆に、もし、天然のタンパク質に対する抗体が作ったタンパク質断片もしくはポリペプチドを認識するのならば、遺伝子とタンパク質の関係も確立しているといえる。・＼ラー（ｌｌｅｌｌｅｒ）　等は、つ・イルス学雑ａＥ　（Ｊ　、Ｖｉｒｏ！、’）の１９８２年ａｉ巻、３＋＋〜３２０頁で、−、キサヌクレオ千ドのグイレフトリビーＩ・と２つのヌクレオチド９９体を含む、ｌＲ３と命名したインターナルリーン４１ンを含むことが分ったＥ　Ｂ　Ｖ　１青仏子の一部のＤＮ八へ列を報告ｔ７た。彼等はｌＲ３の周囲及びそれを含む配列はＢＢＮＡをコードするｉｌ伝子を含むごとを示す＾ＩＦ拠について述べている。しかし、丁で）の可能なり　Ｎ　Ａ配列読み取り枠のものを翻ＪＲシたものが知られていなかったので、ヘラ−（１ｌｅｌ　Ｉｅｒ）等は可能なＥＢＮＡタンパク質に対するアミノ酸配列を確定的に誘導できなかった。１９８３年９月、へネジ−（ｌ１ｅｎｎｅｓｓｙ）とキエフ（Ｋｉｅｆｆ　）は米国Ｈ学アカデミ−の１１を歩（Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ　、Ａｃａｄ　、Ｓｃｉ、　）の８０巻。５６６５〜５６６９夏（１９８３年）の中で、以前、ヘラ−（Ｈｅ目ｅｒ）等によ−）で報告されたＥ１３ＶＤＮＡ配列の天然の読み取り枠を確定したと＋長音した。基本的に、ｉ座らはＩ　Ｒ３ＤＮＡを単離し、小さなランダムな断片に分解し、大腸菌（Ｅ　、ｃｏｌｉ　）の発現ベクターのｌａｃ　Ｚ遺伝子［１尻こその小片を挿入し、その結果、全ての三つのＥＢＮＡｉｌ伝子読み取り枠が各々別々のクローンとして発現させた。　ＩａｃＺ　遺伝子はバクテリアの酵素であるヘーターガラクトシダーゼをコードしている。Ｉ　Ｒ３−１ａｃＺ遺伝子融合産物はβ−ガラクトシダーゼタンパク質分子の第７と第９のアミノＮｌ（第８番は構築の過程で欠失している）の間に挿入した［Ｒ３タンパク質をもった１つの融合クンバク質とｊ７て大腸菌中で発現される。へ不ン−（１ｌｅｎｎｃｓｓｙｌ　とキエフ（Ｋｉｅｆｆ　）は抗ＥＢＮＡ陽性人間血清によ−）て確認される融合タンパクＶをスクリーニングすることによって天然の読み取り枠のＩ　Ｒ３ＤＮＡを発現する［　Ｒ３−１ａｃＺ遺伝子融合体を同定した。そのよ・）に同定したプラスミドをｐｉｌ１１８２−４４と命名した。ｐＫｌ１１８２−４４により−Ｑ現されるタンパク質がＥＢＮΔ特Ｗ的抗原性決定因子を含んでいることを確認するために、前にヘネシー（Ｈｅｎｎ−ｅｓｓｙ）とキエフ（Ｋｉｅｆｆ　）は臭化シアン分解（ＣＮＩｌｒ）　シたｌＲ３−ガラクトシダーゼ融合タンパク質に対する抗血清をウサギで生じさせた。免疫原として使ったＣＮＢｒ断片はＥＢＮＡと相同的な５３アミノ酸とベーク−ガラクトシダーゼと相同的な８９アミノ酸を含んでいる。これらの抗血清は間接免疫螢光法を使ってＥＢＶ感染細胞中の天然のＢＢＮＡを確認した。ヘネシー（Ｈｅｎｎｅｓｓｙ）とキエフ（に１ｅｆｆ　）の結果はＥ１３ＮΔＩＲ３＠域の反復的性質に依存しているようだ、　ｐＫＨ１８２−４４により生成する融合タンパク質はｌＲ３領域（５３アミノ酸）と相同的な比較的長いセグメントを含んでいる。それ故、融合タンパク質およびそのＣＮＢｒ断片が抗原性の決定因子を含んでいることは驚くに値しない。さらにヘネシー（Ｈｅｎｎｅｓｓｙ）とキエフ（Ｋｉｅｆｆ　）は抗原性決定因子として働いているその断片中の反復配列を同定しなかった。ヘネシー（Ｈｅｎｎｅｓｓｙ）とキエフ（Ｋｉｅｆｆ　）は、人の血清中の抗ＥＢＮＡ抗体によって認識される物質を作ることができなかったが、そのデザインのために臨床環境の中で使用するのは炉ねしいことである。ＥＢＮＡに相同的なその融合タンパク質の５３アミノ酸残基のセグメントは生理学的にも化学的にもベータ・ガラクトシダーゼの一部である。それ故、その免疫学的性質はそこから分離することのできないベータ・ガラクトシダーゼ分子の一部によってＩｆをうける。事実、彼らの研究で使用される人血清の全てがベータ・ガラクトシダーゼと反応し、ベータ・ガラクトシダーゼと吸着させ、遺伝学的に製造したタンパク質に対する特異性をテストする前にこの反応性を除くような処理が必要となる。遺伝子の正しい読み取り枠を決定し、臨床学的及び妙所」−の目的のために病原に関係する抗原（免疫原）を大量に作る上での相互に関連した問題へのもう１つの方法は、合成ポリペプチドの化学の使用である。抗原（免疫原）を作るこの方法は一部に述べた遺伝子工学的方法よりも利点がある。合成ポリペプチド抗原は天然のタンパク質の副産物やそのフラグメントは合まない。そしてそれらの使用は望ましくない相互反応の可能性やへネジ−（Ｈｅｎｎｅｓｓｙ）とキエフ（Ｋｉｅ４ｆ　）の研究におけるのと同様ｎｌ１ｌ／Ｉｖ試料の前処理の必要性を除く。合成抗原（免疫原）の開架や既知の特異性をもつ抗体を導入する為のそれらの使用の一般的概念が１本られている一方、断定を許さないこの技術分野の広い領域が残っている。これには少なくとも２つの理由がある。第１に、合成抗原（免疫原）は必ずしも、その自然の環境下でその本来のクンバク質と免疫反応する抗体を誘導しない。第２に、ウィルスタンパク質のよ・うな天然に生ずる免疫原に対する宿主の天然の抗体は、その免疫原のアミノ酸残基配列に対応するポリペプチドとほとんど免疫反応を起こさない。この後者の現象は必須の２次、３次構造を欠いている短かい線状ポリペプチドの結果であると信しられている。タンパク質に作られるべく抗体によるペプチドの結合に関する研究の多くは、ベンジャミニ（Ｂｅｎｊａｎｉ旧、Ｅ）等による″微生物学や免疫学における現在の１−ピックス”の５８巻、８５〜１３４夏（１９７２年）のレヴユー・にまとめである。抗体結合におけるペプチド構造の役割はグツドマン（Ｇｏｏｄｍａｎ、　Ｊ、Ｗ、）によって“免疫化学”６巻、１３９−１４９頁（１９６９年）に強調されている。抗体結合にペプチドの配列のどのような変化が影響するかに関する研究の多くは抗体結合部位の構造が重要な役割を果たすことを示すことにより説明している。それらの研究におりる配列や構造の変化の影響は相互に混合し分離するのが難しい、それらの研究のいくつかは、その結合に影響する抗原における構造上の変化により、等しく良く説明されている。分子レベルでの抗体応答は限られた配列（−次構造）の、限られた横費（２次、３次構造）での抗原の結合を意味している。タンパク質抗原に対する免疫応答は伝統的にクンバク質の一次、二次もしくは三次構造に対して起こるものとして説明されてさている。この古典的図式は、生理学的温廟及び溶液における全横１告がよく分っているものに対してはいくらかの正統性をもつかもしれない。しかし、その正統性はより動的な構凸をもつペプチド抗原に対しては疑がわしい。いくつかのグループが絹のフィブロイン（アンダーマン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）等分子生物学雑ｕ６７巻、　４５９〜４６８　Ｎ　（１９７２年））とコラーゲン（アンダーマン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）等Ｂ、Ｂ、Ｒ，Ｃ，３９巻　８０２−８０８頁（１９７０年）、ドイル（Ｄｏｙｌｅ）等分子生物学雑誌５１ｔ５４７〜５９１（１９７０年））のモデルとして合成したグリシンとアラニンもしくはグリシンとセリンの反復配列のポリマーの構造的研究を報告し７た。最も系統的研究は、公式（＾Ｉａｘ−Ｇｌｙｙ）においてｘ−１，ｙ＝１．２そして３．またｘ＝２．ｙ＝１．２そして３及びｘ−３，ｙ−３であるようなホモポリマー的ブロック反復ユニッ１−をもつ一連のブロックホモポリマー的ポリペプチドの合成を報告しているブラック（Ｂｒａｃｋ　）等の“生体高分子１１巻５６３〜５８６ｉ（１９７２年）の研究がある。この後者の研究から報告された結果は、固体状態ではほとんどアラニンからなるホモポリマーは、α−ヘリックスであるが、はとんどグリシンからなるホモポリマーは無秩序であることをや）】告している。／８液中では、ポリアラニンはα −ヘリックスであるが、ポリ−（Ａｌａ　２−　Ｇｌｙ　２　）はベータ反平行型であると報じているやよりグリシンに冨むポリマーはα−ヘリックスでもβ− ｆｊｌ造でもない他の固定した構造をもつと言われている。ブラック（Ｂｒａｃｋ　）等によって報告されたグリシンとアラニンのホモポリマーブロックは活性なエステル型のカルボキシル基を末端にもつグリシン残基を有する２から６個のペプチドの反復ユニットの縮合重合により調すされた。２から６８までの重合度がポリ（Ａｌａ　−Ｇｌｙ　２　）に対して報告された。ぞれらの研究に用いられた溶媒が例えば、水やリン酸禮術食塩水のよ・うな生理学的に許容できるものではなかったとしても結果は次の二点を説明している。（１）構造の変化はポリペプチドの配列の変化とともに起っている。（２）また構造の変化は溶液から固体状態への変化の間に起っている。電型−９７−製廟本発明はエプスタイン・バールウィルス核抗原（ＥＢＮＡ）と免疫反応を起こす抗体の仕産を誘導する能力のある合成ランダム共重合ポリペプチドを企図したものである。ランダム共重合ポリペプチドは約６から約４０の、また好ましくは約１５から約２０のアミノ酸残基を含んでおり、左から右に署かれた配列はアミノ末端からカルボキシル末端の方向であり、公式−ｃｒｙ−Ｒ’　−Ｇｌｙ−Ｒ２ −Ｇｌｙ−−で現されるアミノ酸残基を含んでいる。そこでの個々に取り上げられているＲ１とＲ２に割り当てられたアミノ酸残基は同じであっても異なっていてもよい、そして、Ｒ１とＲ２が両方ともグリシンでなければ、アラニン、アスパラギン、アルギニン、グリシン、ロイシン、プロリン、セリン及びスレオニンからなるグループから選らばれる。ポリペプチドは少なくともモル分率２５のグリシンを含んでいて、キャリヤーに結合され、ホ乳動物宿主の中に有効ｇ導入されるとＥＢＮＡと免疫反応し抗体の生産を誘導することができる。本発明の好ましいポリペプチドは次のものからなるグループから選択されるアミノ酸残基を含んでいる。１ｉ１　−　Ｇｌｙ　−八ｒｇ　−Ｇｌｙ　−＾ｒｔ’、−ＧＩＶ　１１ｉｉ１　−　Ｇｌｙ　−Ａｓｎ　−Ｇａｙ　−Ｌｅｕ　−Ｇｌｙ　；１ｉｉｉ１　−　Ｇｌｙ　−Ｓｅｒ　−Ｇｌｙ　−Ｓｅｒ　−Ｇａｙ　。ひとつのより好ましい具体例はＲ１がアラニンでＲ２も■Ｉアラニンであり結果としてポリペプチドば−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−の配列をもつ。もう一つの好ましい具体例はＲ１はアラニンでＲ２はグリシンの場合で、結果としてポリペプチドは−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ−の配列をもつ。またもう一つのより好ましい具体例はＲ１がグリシンでＲ２がアラニンの場合で、結果としてポリペプチドは−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙの配列をもつ。好ましいアミノ酸残基の配列は左から右にアミノ末端からカルボキシル末端へという方向で表わされる次にあげるもの、及び薬学的に許容されるその塩及び抗原的に関連するその変化物からなるグループから選ばれる配列をもつ。 −Ａｒｇ　−Ａｌａ　−Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−八ｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ　− Ｇｌｙ　−Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｕ　−Ｌｙｓ　−Ａｒｇ　−Ｐｒｏ　−Ｎｅｔ　−；−ｌｉｅ　−Ｍｅｔ　−Ｓｅｒ　−Ａｓｐ　−Ｇｌｕ　−Ｇｌｙ　− Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ｔｂｒ　−Ｇａｙ−Ａｓｎ　−Ｇｌｙ　−Ｌｅｕ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｕ　−；−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｓｅｒ　−Ｇｌｙ　−Ｓｅｒ　−Ｇｌｙ　−Ｐｒｏ　−；また、それに対応するポリペプチド自体好まれるものは、すなわち、Ｈ−Ａｒｇ　−Ａｌａ　−Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−八ｒｇ　−Ｇｌｙ　 −Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｕ　−Ｌｙｓ　−Ａｒｇ　−Ｐｒｏ　−Ｍｅｔ　− ＯＨ；Ｈ−１１ｅ　−Ｍｅｔ　−３ｅｒ　−Ａｓｐ　−Ｇｌｕ　−Ｇｌｙ　−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ｔｈｒ　−Ｇｌｙ　−Ａｓｎ　−Ｇｌｙ　−Ｌｅｕ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｕ　−ＯＨ；Ｈ−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−５ｅｔ　−Ｇａｙ　−３ｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｐｒｏ　−ＯＨ；及びその薬学的に許容できる塩及びその抗原的に関連する変化物である。特に好ましい具体化物では、合成ランダム共重合ポリペプチドは約８から約４０の、また特に好ましくは約１５から約２０のアミノ酸残基をもち、以前に定義したｃｒｙ−Ｒ３−ｃｒｙ　−Ｒ’−ｃｒｙのアミノ酸残基配列をもっている。またこのポリペプチドは、（８）　少なくともモル分率５０％以上のグリシン残基を含んでおり、ｔｂ＋　キャリヤーと結合し、ホ乳動物の宿主中に幼果的な９が導入されるとＬ’、　Ｄ　Ｎ　Ａと免疫反応を起こす抗体の生産を誘導する能力があり、ｔＣ１大然のＥ　Ｂ　Ｎ　Ａにより導入された人の抗体と免疫反応することができ、そして＋ｄ＋　さらに左から右に７ミノ末端からカルボキシル末端への方向で書かれた次に示す式で表わされるオーバーラツプする６ケのアミノ酸残基配列をもつ。 −Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−特に好ましいアミノ酸残基配列は、左から右にアミノ末端からカルボキシル末端という方向で書かれ、次にあげる式で表わされる配列及びその薬学的に許容できる塩さらにその抗原的に関連する変化物からなるグループから選択される配列をもっている。（ｉ）　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇａｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ　−；（ｉｉ）−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−１目５−ＧｌｙＧｌｙ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ａｌａ　Ｇｌｙ　−１（ｉｉｉ　）　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　 −Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　Ａｌａ　Ｇｌｙ；（ｉｖ）　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　 −Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−；（ｖ）　−Ｇｌｙ−一部ｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　 −Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　− Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｉｙ　−；（ｖｉ）　−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　 −Ａｌａ−Ｇａｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−ＧＬｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−；（ｖｉ）　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｉｙ　− Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ　−；（ｖｉｉｉ）　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　 −Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　− Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−；また、さらに好ましいそれに対応するポリペプチドは、すなわち（ｉ）　Ｉ（−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ−Ｏｆ（；（ｉｉ）　Ｈ−Ｌｙｓ　−Ｇｌｙ　−丁ｈｒ　−１１ｉｓ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｔｈｒ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−ＯＨ；（ｉｉｉ　）　Ｈ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−０■（：（ｉｖ）　Ｈ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−０！（；（Ｖ）　Ｈ−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　 −Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−ＯＨ；（ｖＤ　Ｈ−Ｇｌｙ　 −Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−＾１８−ｃｒｙ −＾１ａ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−ＯＨ；（ｖｉｉ　）　Ｈ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇａｙ−Ｇｌｙ−＾１ａ−Ｇｌｙ　− Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−ＯＨ；（ｖｉｉｉ）　Ｈ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　７Ｇ１ｙ　−ＯＨ；及びその薬学的に許容できる塩及びその抗原的に関連する変化物である。また本発明は、その反復ユニットの少なくとも１つが上に述べたポリペプチドであるような多数の結合した合成ポリペプチド反復ユニットをもつ合成多重合体をも企図している。そのポリペプチド反（夏ユニットはアミド結合によりヘッド・トウー・テイルを速成で結合していることも考えられる。他方、その合成ポリペプチドモノマーが、分子内、ポリペプチド間のシスティンのジスルフィド結合のようなアミド結合以外結合によって重合性多重合体を形成するような結合をすることもできる。もう１つの具体例では、本発明のポリペプチドの有効量がＥＩ３ＮＡと免疫反応を起こ１抗体をｊ誘導する能力のある接種物を形成するのに生理学的にかなった希釈剤中で使用されている。抗体の産生に対して使用されるのに加えて、この発明の接種物は細胞表面Ｊ１でＦｉｌｌＮＡもし、くはその断片を発現するリンパ細胞に対する活性のある免疫性を導入する手段として人のワクチンとして１重用することができる。１１：たもう１つ別な具体例としては、受容分子はＥＢＮＡと免疫反応Ａ゛ることかできる抗体結合部位をもつように企図されている。その受容体は上記の合成ポリペプチドそれ自身か結合体としてそれを含む合成免疫原に対して生している。ｒＥたＥＩ３ＮＡの存在を検定する診療システムについても考えられている。、 −のシステムは上述の受容分子とＥＢＮＡと結合部位との免疫反応の信憂を指示する手段と苓含んでいる。さらに体内成分中でのＥＢＮＡに対する抗体分子の存在を検定する診療し・ステムも考えられている。そのようなシステムは上述の特に好ましい：ｔンダム共重合合成ポリペプチドとＥＢＮＡに対する抗体分子とポリペブチ１′との免疫反応を信号化する指示方法とから成る３、さらに好ましい具体例では　このシステムはまた、特に好ましいポリペプチドを固定しまた固体７トリノクスを含む固体支持体も含んでいる。免疫反応を起こした抗体分子のイソタイプを同定する手１立もｔたそのシステムに含まれている。さらに、その細目包表面でＥ、　Ｂ　Ｎ　Ａを発現するＢ−リンパ細胞に対する受動的免疫に関する調製物も考えられている。その調製物は生理学的ム゛二かなった希釈剤中、上述の受容分子の有効量を含んでいる。ホ乳動物宿主に導入されると、その調製物は細胞表面でＥＩ３ＮＡを発現するＢリンパ細胞の宿主に対する影響を少なくする能力がある。図の簡単な鋭吸図の中では本発明の公開の一部を形成している。図１はポリペプチド（Ｆ）、（Ｂ）及び（Ｅ）の円二色性スペクトルをプロットしたものである。これらのポリペプチドはまたここでは各々Ｆ１３．Ｆ６２及びＦ］２と呼ばれている。各々のスペクトルは１ミリリットル当り１ミリグラム（ａｒ／ｍｌ）の？Ｊｌりの生理学的溶液（リン酸緩衝食塩水）中のポリペプチドの１０回連続測定したものの平均したものである。旋光性はミリラジアンで表現され、ナノメートル（ｎ　ｍ　）で表わされた偏光の波長に対してプロットしである。ポリペプチドＦ（Ｒ１３）の比較的特徴のないプロットはこのサイズのペプチドで通常得られるランダムな構造を示している。ポリペプチドＢ（Ｒ６２）でみられる谷とピークのスペクトルは比較的に安定な２次構造、たぶんβ−シートに特徴的なものである。データは示されていないが、ポリペプチドＰ２Ｆ、Ｐ６０．Ｆ１４及びＲ１５は本発明のより好ましいポリペプチドが生理学的溶液中で同様な安定した構造で存在していることを示すたいへん類偵したスペクトルをもっている。ポリペプチドＥ（Ｆ］２＞のスペクトルは、そのような構造に部分的に負っていることを示している。図２は、合成ポリペプチドＣ（Ｔ’６０）と１３（Ｒ６２）に対するウサギの抗ペプチド抗血清を使用したＥＢＶ−形質転換Ｗ　Ｉ　−Ｌ、　２細胞の全細胞抽出物のニトロセルロース免疫プロットの写真である。以前に抗ＥＢＮＡ陽性、つまり抗ＥＢＮＡ抗体をもつと決定された人の血清（患者Ｔ、Ｉから）を、１：２０の希釈でレーンＡに陽性コントロールとして使用した。カサギの抗Ｐ−６０（Ｃ）血ｌｎは１；５０の希釈で（レーンＢ）、ウサギの抗−Ｒ６２（Ｂ）血清はｌ：１０の希釈で（レーンＤ）で、天然のＥＢＮＡをそれらが認識することを示す陽性コントロールとして同様のバンドと免疫反応させた。レーンＡ−Ｇは図の下に示しである。抗−Ｒ６０血清によるｒＥ　ＢＮＡの認識は、免疫プロッティングの１時間前にグリシン］・ル当り４０マイクログラムのポリペプチドＰ６０と共に５０分の１に希釈した抗Ｐ６０血清をインキュベートすることにより妨害される。（レーン３）６同様に、抗Ｐに２血清によるＥＢＮへの認識は免疫ブｒ１７テイングの１時間前に４０μｇ／ｍｌのポリペプチドＰ６２とともに１０分の１に希釈した抗Ｐ６２血清をインキュベートすることにより阻害された。Ｒ６０とＲ６２の抗原的関係はレーン６と７に示されている。レーン６はＥＩ３ＮＡバンドと免疫反応を起こした１０分の１希釈の抗Ｐ６２血清を示している。レーン７では、ＥＢＮＡバンドと抗Ｐ６２血ＩＩｖとの免疫反応性が免疫プロッティング１時間前に４０μｇ／ｍＩのポリペプチドＰ６０とインキュページ噌ンすることにより阻害されている。図３は溶液中での競合するポリペプチドによる患′Ｍ１０１＋のＥＢＮＡ陽件の血？ｎ中の抗Ｇ２血ｌＲの活性の阻害を説明したグラフである。固相標的としてポリペプチドＰ６２を使うイライラ法は、イライラ法で使用する前にポリペプチドＰ２７．Ｐ６２．Ｐ６０．Ｒ８９乃びＦｌ（ｉの各々と１時間前処理をした患者１０１１の血清を使、って行なわれた。またポリペプチドＰ２７．Ｐ６２．Ｐ６０．Ｒ８９，ＰＩＧはここではそれぞれＡ、［３，Ｃ，Ｄ及びＧと呼んでいる。抗ポリベブ千１′活性率がミリリットル当りマイクロダラム表示での競合するポリペプチド濃度に対する縦座標としてプロットしである。図４は実証された伝染性単核症の場合におけるＥＢＮＡ　（点線。Ｏ）とポリペプチドＰ６２　（実線、・）に対する抗体出現の平行した時間経過を示すグラフである。連続的血清を臨床着手後に採集し、右側縦座標にカタラ／　（Ｃａｔａｌａｎｏ）等が臨床研究雑誌（Ｊ、　Ｃ１ｊｎ。Ｉｎｖｅｓｔ）の６５巻１２３Ｂ　−１２４２頁に報告した手順に従つた抗ＥＢＮＡ活性の測定の目盛がうっである。又血清試料は本発明のイライラ法の中で、左縦座標に示されているよ・うに固相標的としてポリペプチドＰ６２を使って検定した。そこでは４０５ナノメーターでの吸光度がプロットしである。図５は、ヘンル（Ｈｅｎｌｅ　＋　Ｇ　）等により、感染病唯ｕ　（Ｊ、　Ｉｎｆｅｃｔ。Ｄｉｓ　）の１３ｏＳ、２３】頁（１９７４年）に述べている古典的へＣＩＦ法による検出を使って、抗ＥＢＮＡ　（点線、０）と比較したポリペプチドＰ６２（実線、・）に対する抗体の初期検出を説明する２つのグラフからなっている。連続的血清は臨床的に実証された伝染性単核症をもった２人の患者（＃１４、上のパネル、＃２、下のパネル）から採集した。血清は上述のカタラノ　（Ｃａ　ｔａ　Ｉａｎｏ）等で報告しである方法で抗Ｅ　Ｂ　Ｎ　Ａ　／ｒｌｉ性を滴定した。抗ポリペプチド活性は、図４で報告しである活性をもつ、固相標的としてのポリペプチドＰ６２を使い、本発明のイライラ法を用いて測定した。エプスタイン・バールウィルス（ＥＢＶ）が感染した人間はつ・イルスにより形質転換したＢリンパ細胞中に存在するウィルス骨核抗原（ＥＢＮＡ）に対する抗体を産生ずる。人中のＥＢＮＡ及び抗ＥＢＮＡ抗体を検定するのに用いられてきた従来の臨床的手法は面倒臭いものである。さらに、細胞培養からのＥＢＮＡの精製に対する現行の操作は大量生産に簡単に通用できるものではない。本発明は現行の方法論のいくつかの問題点を解消する合成ポリペプチド技術の利用を考えた。短かい合成ポリペプチドは免疫学的に天然のクンバク質に関する模擬の抗原決定素となりうるし、その為天然のタンパク質を認識する予め分った特異性をもつ抗体を産生するのに用いることができる。 “免疫学的模Ｉ９法”という言葉は、ここでは、本発明の免疫原性ポリペプチドはその誘導ポリペプチド及び本来のタンパク質の同じ配列部位に結合する抗体の産生を誘導するということを意味して使われでいろ。この現象は実験的にも臨床的にも利用することができる。 ′ｒ験的に、合成ポリペプチドに対する抗体はＤＮＡの読み取り枠を決定し、さらにＩＥ　ｉ（Ｎ　Ａのような臨床学的に￥Ａ要なタンパク質のアミノ酸残基配列を確定するのに使うことかできる。臨床学的には、合成ポリペプチドに現わされた予め分っている特異性をもつ抗体はａｔ＋折りの、あるいは、γ６療上の「１的で使用することができる。以前にヘラ−（Ｉ（ｅｌｌｅｒ）等はＥＢ　Ｎ　Ａをコードする遺伝子を含むＤＮＡヌクレオチド配列を報告した。ｉ皮等は、もしこのＤＮＡがタンパク質に翻訳されたら、その三種の可能な読み取り枠は、それに応して、１１１　セリン、アルギニン、グリシン、　１ｉｉｌ　グリシンとアラニン、及び１ｉｉｉｌ　グルタミン、グルタミン酸塩及びグリシンの三種のみからなる２００以」二のアミノ酸残基からなる［Ｒ３タンパク質領域をコードしているだろうと予想している。Ｅｒ３ＮＡ遺伝子中の可能な終止コドンの分布を考え合せると、ＩＥ　１３　Ｎ　Ａ分子の報告されている化学的性質は、ｌＲ３は最初にグリシンとアラニン残基を含んでいることを示している。この示差を検定するために、グリシンとアラニンのランダム共重合体であるｌＲ３をもつＣｒ５ＮＡタンパク質に基本的に対応しているアミノ酸残基をもつ短かいポリペプチドを合成した。本研究で用いた一連の小合成ポリペプチド（長さ５〜２１アミノ酸残基）は、メリフィールＦ　（Ｍｅｒｒｉｆ　１ｅｌｄ）とメリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）等により、米国化学会ｉｓ　（Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、）の８５巻２１４９〜２】５４頁（１９６３年）に報告された固相法を用いて合成した。その配列は、［ＥＢＮＡの提唱されたｌＲ３領域の中がその丁度外側からの色々な領域を示すように選ばれた。ここで７Ｉう“合成”というＨ葉は、そのポリペプチド分子もしくはポリペプチド反１ν単位は化学的￥段、つまり遺伝子Ｔ学的技術によるような、生物学的に作られるというよりもむしろ化学的な合成によって組み立゛ζられるということを意味している。このように、本発明を具体的なものとする合成ポリペプチドに天然に存在するタンパク質やその断片は含まれていない。又、化学的に合成したポリペプチドはタンパク質の臭化シアンの作用により作られるような天然に存在するタンパク質の分解産物とも違う。望ましいポリペプチドを得る為に連続的にアミノ酸ブロックを付加してい（、よく知られている同相化学合成法は、有利な合成法で、以下により詳しく議論されている。ここで示される全てのアミノ酸は天然のもの、もしくはＬ体である。標準的なポリペプチド命名法に従って、アミノ酸の略号は以下のようにする。記　命−アコ−仁醜Ｆ　Ｐｈｅ　Ｌ−フェニルアラニンＭ　Ｍｅｔ　Ｌ−メチオニンＰ　・　Ｐｒｏ　Ｌ−プロリンＫ　Ｌｙｓ　Ｌ−リジンＨＨｉｓ　Ｌ−ヒスチジンＱ　Ｇｌｎ　Ｌ−グルタミンＥ　Ｇｌｕ　Ｌ−グルタミン酸Ｚ　Ｇｌに　Ｌ−グルタミン酸又はＬ−グルタミンＷ　Ｔｒｐ　Ｌ　ｈリブ１−ファンＲＡｒｇ　Ｌ−アルギニンＩ）　Ａｓｐ　Ｌ−アスパラギン酸Ｎ　Ａｓｎ　Ｌ−アスパラギンＢ　Ａｓｘ　Ｌ−アスパラギン酸又はＬ−アスパラギンＣＣｙｓ　、　Ｌ−システィン本発明は約６〜約４０の、より好ましくは約１５から約２０のアミノ酸残基を含み、左から右へ、アミノ末端からカルボキシル末端の方向に−Ｇｌｙ　−Ｒ’　 −Ｇｌｙ−Ｒ２−Ｇｌｙ−の配列を含む合成ランダム共重合ポリペプチドを考えたものである。ここでＲ１及びＲ２はいずれもｃｒｙの場合を除いて、各々重複も含めて、Ａｌａ　、　Ａｓｎ　。＾ｒｇ、ＧＩｙ、しｅｕ　、Ｐｒｏ　、Ｓｅｔ　、　Ｔｈｒから選ばれたアミノ酸残基である。また、このポリペプチドは少なくとも２５％モル分離のグリシン残基を含み、キャリヤーと結合したとき又はホ乳動物宿主中にその有効量が導入されたとき、ＥＩ３ＮＡと免疫反応を起こす抗体の産生をうながす。ひとつの好ましい具体例では、Ｒ１とＲ２が双方ともアルギニンであり、その結果、そのポリペプチドは−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ−ｃｒｙ−のアミノ酸配列をもっている。又、もう一つの好ましい具体例は、Ｒ１はＡｓｎでＲ２はＬｅｕでその結果、そのポリペプチドは、−Ｇｌｙ　−Ａｓｎ　−Ｇｌｙ　−Ｌｅｕ　−Ｇｌｙ−のアミノ酸配列をもっている。又、さらにもう一つの好ましい具体例はＲＩ、Ｒ２共にＳｅｔで、その結果、そのポリペプチドは、−Ｇｌｙ　−Ｓｅｔ　−Ｇｌｙ　−Ｓｅｒ　−Ｇｌｙ　−のアミノ酸残基配列をもっている。好ましいアミノ酸残基配列は左から右に、アミノ末端からカルボキシル末端の方向で次の表示で示される配列、−＾ｒｇ　−Ａｌａ　−Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ　−Ｇｌｙ　−八ｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｕ　Ｌｙｇ　−、Ａｒｇ　−Ｐｒｏ　−Ｎｅｔ　−ｉ−ｌｉｅ　−Ｍｅｔ　−３ｅｒ　−Ａｓｐ　−Ｇｌｕ　−Ｇｌｙ　−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ｔｈｒ　−−Ｐｒｏ　−Ｇｌ　−Ａｌａ　−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−５ｅｒ　−Ｇｌｙ　−３ｅｒ　−Ｇｌｙ　−Ｐｒｏ　−；又は、その薬学的に許容できる塩、もしくは、抗原的に関連したその変化物を含んでいる。さらに好ましい具体例は、Ｒ１及びＲ２がＡｌａもしくはｃｒｙである。例えば、Ｒ１はＡｌａでＲ２もＡｌａ、Ｒ’はＡｌａでＲ２がｃｒｙ　。そしてＲ１がＧｔｙでＲ２がＡｌａであるやさらに好ましい具体例は、次のものからなるグループから選ばれた式により現わされる５つのアミノ酸残基配列を含んでいる。ｆｉｌ　ｃｒｙ　−−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−ＧＩｙ　；１：ｌ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　１１ｉｉｉｌ　−Ｇｌｙ　− Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−。 “ランダム共重合体”という−８葉は通常使われている意味で使われている。このように、そのポリペプチドは、異なるアミノ酸残基の１．＜ｉｌＪユニ、１・を多く含んでいるという意味で共重合体である。その共重合体はそのポリペプチドの個々のアミノ酸残基が、アンダーソン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）等、ドイル（Ｉｌｏｙｌｅ　）等、又はブラック（Ｂｒａｃｋ　）等が以前に調整した交互共重合体やブロック共重合体の反復配列にみられるような特殊な反復配列として存在しないという理由で交互もしくはブ１コック共重合体に比べて、ランダムである。このように、そのポリペプチドが連続する反復配列−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−八ｌａ　−Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　＝Ａｌａ　Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−をもつときそれをＲ６２（表２）と呼ぶとしても、そのポリペプチドのカルボキシル基末端は一Δ １ａ−Ｇ１．ｙ−ペプチドを含んでいる。結果として、ポリペプチドを通して反ｉ３ｉするアミノ酸残基配列はなく、ポリペプチドＰＧ２はランダムコポリマーで、ブランク（Ｂｌａｃｋ　）等により調製されたポリ　（Ａｌａ　Ｘ　Ｇｌｙ　Ｘ　）や、アンダーソン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）等によりｊｌＨＪされたポリ　（Ｓｅｔ　−Ｇｌｙ　）のような、そのポリマー全体に渡って特殊なアミノ酸残基配列の同じブロックの反復をもつようなブロック、１いｈ合体でもない。本発明の合成ランダム共重合ポリペプチドは、しばしば単に“ポリペプチド”とか“合成ポリペプチド”というように使われる。この使用は簡潔さの為である。ここで使われている“抗原的に関連した変化物”とは少なくとも抗原決定因子の一部をもち、それ赦免疫学的反応性を有する、全体としてみたら種ケのアミノ酸残基配列をもつポリペプチドを示している。ここで使われている“抗原決定因子”とは同じ又は関連した抗原もしくは免疫原により誘導される各々の抗体（免疫グロブリン）分子と特異的に相互作用を起こすのに役立っている分子の構造的要素を示している。ここで用いられる“免疫原的決定因子”とは、抗原として用いられたとき免疫原と結合する抗体結合部位イディオタイプを含む抗体の宿主中での誘導に役立っている分子の構造的要素を示している。ここで用いられている“抗原”とは抗体により結合される実体を意味する。ここで用いられている“免疫原”とは、宿主動物中で抗体の産生を誘導する実体を述べている。いくつかの例においては、抗原と免疫原は同一物であるが、一方、別な例ではその二つは異なっている。例えば、以下に述べるように、ポリペプチドＰ６２は、ウサギの体内での抗体の産生を誘導するのに使われるのでひとつの免疫原として使われている。抗原として使われるときは、そのようにして誘導された抗体がポリペプチドＰ６２と結合する。つまり、ポリペプチドＰ６２は免疫原でもあり抗原でもある。抗ＥＢＮＡ抗体は、抗原としてのポリペプチドＰ６２に対してと同様に免疫原でもあり抗原でもあるＥＢＮＡと結合する。本発明の好ましい具体例は、表１に示されている合成ランタン・共重合ポリペプチドＰ８９．Ｆ］２．Ｒ１３と、その薬学的に許容できる塩及びその抗原的に関連した変化物である。それらのポリペプチドは各々、Ｒ１とＲ２が以下のように定義される一Ｇｌｙ−Ｒ’−ｃ＋ｙ−Ｒ’−ｃｒｙ−のアミノ酸残基配列をもつ。つまり、各ポリペプチドは少なくともモル分率２５％以上のＧｌｙを含む、そして各々が前に述べたようなＥ　１３　Ｎ　Ａに結合する抗体を誘導する能力を有する。表　１合成ポリペプチドの配列Ｇｒｙ　−八１ａ−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ＾ｒｇ−０１１Ｒ８９（Ｄ）　［（−Ａｒｇ−Ａｌａ−＾ｒｇ−Ｇｌｙ−＾ｒｇ　−Ｇｌｙ　− Ａｒｇ。Ｇｌｙ　−八ｒｇ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｕ　−Ｌｙｓ　−Ａｒｇ　−Ｐｒｏ　−Ｍｅｔ−ＯＨ；Ｒ１２（Ｅ）　Ｈ−１１ｅ−Ｍｅｔ−３ｅｒ−＾ｓｐ　−Ｇｌｕ　−Ｇｌｙ　Ｐｒｏ−Ｇｌｙ　−Ｔｈｒ　−Ｇｌｙ　−Ａｓｎ　−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ　−Ｇｌｙ　 −Ｇｌｕ−０１１；ＦＩ３　（Ｆ）　Ｈ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｓｅｒ　−Ｇｌｙ　−５ｅｒ　−Ｇｌｙ　−Ｐｒｏ　−ＯＨ；Ｒ２７（Ａ）　Ｈ−Ｌｙｓ　−Ｇｌｙ　−Ｔｈｒ　−１１ｉｓ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｔｈｒ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　〜＾ｌａ　−Ｇｌｙ　−ＯＨ；Ｐｆ３２　（Ｂ）　Ｈ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−ＧＩｙ−ｃｔｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　− Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−０１１；ＦＩ４　Ｈ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　〜Ｇｌｙ　−［；１ｙ−Ａｌａ　Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ−０１１；Ｆ　１５　ｔｌ−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ− Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−ｃｒｙ−ｏＨ；Ｒ１６（Ｇ）　Ｈ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　 −Ｇｌｙ　−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　− ＯＨ；＊　カッコ付の大文字はここでいくつかの図や表に出てくる対１芯するポリペプチドを示すのに使われている。ポリペプチド／抗ボリベブチドリセプター結合や結合阻害の研究結果は、以下のセクション１Ｄで議論している。これらの結果はそのポリペプチドの間での配列相同性の割合と関連する相互反応性や、相互阻害効果を説明している。例えば、ポリペプチドＰ６０は、Ｒ６２と相同的な１０ケのアミノ酸セグメントを含んでいる。ポリペプチドＤ２（表２）はポリペプチドＰ２７．Ｐ６０．Ｐ６２．ＤＩのセグメントと相同的な７ケのアミノ酸残基セグメントをもっている。この研究で顕著な相互反応を示さなかったポリペプチドＰ８９は、ポリペプチドＰ２７．Ｐ６２．６０と相同的な配列をもっていない。ざらに重要なことには、ポリペプチドＰ２７．Ｐ６２．Ｐ６０゜Ｄｌが共有する８ケのアミノ酸残基配列は、少なくとも、すべての三つのランダム共重合ポリペプチドに共通な１ケの抗原決定要素を含んでいる。それ故それらの三つのポリペプチドは抗原的に関連する変化物となっている。さらに、その共有セグメントは６ケのアミノ酸残基配列−ｃｒｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−を含み、−ＧＩｙ　−Ｒ’　−ｃｒｙ−Ｒ２−ｃｒｙ−の式でＲ’及びＲ２がＡｌａである一Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ−Ｇｌｙ−によって表わされる重複配列をもっている。゛重複”によって、第２命名配列は第１命名配列の一部を含んでいることを意味している。アミノ酸残基のこの重複は、１文字アミノ酸残基コードを使って、下に示しである重複する“枠で囲んだ”、配列領域により、ポリペプチドＰ６２で説明しであるや共存する６ケのアミノ酸残基を含む配列及び重複する５ケのアミノ酸残基を含む合成ランダム共重合ポリペプチドは、本発明の特に好ましい具体例を設定する。そのような特に好ましい具体例のうち、本発明の合成共重合ポリペブチ１′はやく８から約４０の、好ましくは約１５から約２０のアミノ酸残基を含んでおり、前に定義したアミノ酸配列−ｃｒｙ　−Ｒ’　−Ｇｌｙ−Ｒ２− ｃｒｙ−に加えて、少なくともモル分率５０％のＧ１ｙ残基を含み、ｉａ＋キャリヤーと結合してホ乳ＩＪＩ物宿主内に有効量導入されると、ＥＢＮＡと免疫反応を起こす抗体の産生をうながし、［ｂｌそして、天然のＥＢＮＡにより導入される人の抗体と免疫反応する能力のある、左から右ヘアミノ末端からカルボキシル末端へ、Ｇｌｙ　−Ａｈａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−の式で表わされる配列を含む。特に好ましいアミノ酸配列は、左から右へ、アミノ末端からカルボキシル末端の方向へ次の式で示される配列、（ｉ　）　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　 −Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　− Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｒｇ　−１（ｉｉ）　−Ｌｙｓ　 −Ｇｌｙ　−Ｔｈｒ　−１１ｉｓ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ、−Ｔｈｒ　−Ｇｌｙ　 −Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−ＧＩｙ　−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−；（ｉｉｉ）　−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−八Ｉａ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　− Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−ＧＩｙ−ｃｒｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−；（ｉｖ）　 −Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　＝Ｇ１．ｙ　−Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−；（Ｖ）　−Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ、−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−；（ｖｉ）　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　− Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−；（ν目）　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ −Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　Ａｌａ　−Ｇｌｙ　；（ｖｉｉｉ）　−Ａｌａ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙ　；及びその薬学的に許容できる塩、又その抗原的に関連する変化物を含んでいる。アミノ酸残基配列の最初又は最後のダラシ１は、アミノもしくはカルボキシル末端各々についてＨもしくはＯＨのようなラジカルへの結合、もしくはポリペプチド鎖中に１ケ以上で総数４０アミノ酸残基までの、さらなる配列を含んでいる。また、その対応するポリペプチド自身が特に好ましい、すなわち、表１のポリペプチドＰ６０．Ｐ２７．Ｐ６２．Ｒ１４，Ｒ１５゜Ｒ１６と表２中のＤＩとＤ２及びそれらに対応する薬学的に許容できる塩とそれらの抗原的に関連のある変化物である。ここでいう“薬学的に許容できる塩゛とは、技術上よく知られている方法で調製されるす１−リウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウムやその＋１似物を含む薬学的産業で用いられている非毒性のアルカリ金属、アルカリ土類金属及びアンモニア塩のことである。またその言葉は、通用できる有機又は無機酸と本発明の化合物を反応させることにより一般的に調製できる非毒性酸付加塩をも含む。代表的塩には塩酸塩、臭素酸塩２硫酸塩、！１１！硫酸塩、酢酸塩、オキザール酸塩、バリレート、オリニー１−、ヴオレート、ベンゾニー（・、酪酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩。フマル酸塩、コハク酸塩、タートレート２、サイズ抗ＥＢＮＡ抗体が結合する能力に関する合成ポリペプチドの大きさのＦ５）２が研究された。一般的にはポリペブチ１゛の大きさが減少するにつれ、抗体の結合能も減少することが分っている。アミノ末端から最初の９ケのアミノ酸残基が直接反復している２０ケのアミノ酸残基からなり、アミノ酸基基金−文字コードで表２に示しである配列をポリペプチドＰ６２は含んでいる。以下の表２に示しであるよらに先行するアミノ末端ペプチドからアミノ酸残基３ケが欠けてポリペプチドＤ１．Ｉ）２．Ｄ３を与えるようにＰＯ２に相同的な一連のポリペプチドを合成した。それゆえ、ＰＯ２の配列対称性が多い領域はＤｌ、Ｉ）２．Ｄ３のポリペプチドには欠けている。表　２ポリペプチド命名記号　ア　ミ　ノ　酸　配　列ＤＩ　：　ＧＧＧＡＧＧＡＧＡＧＧＣ；ＡＧＧＡＧＤ２　Ｆ　ＡＧＧＡＧＡＧＧＧＡＧＧＡＧＤ３　ｊ　ＡＧＡＧＧＧＡＧＧＡＧＡ８　ｊ　ＡＧＡＧＧＧＡＧＡ９　：　ＧＡＧＡＧＧＧＡＧ＃　１文字コードをつかったポリペプチド配列は左から右ヘアミノ末端からカルボキシル末端の方向で示されている。＊　ポリペプチドＰ６２中の入量体の直接反復の結合個所。Ｄシリーズのポリペプチドの３種のヒトの抗ＥＢＮＡ血ｌｉＩ及びウサギの抗Ｐ６２血清との免疫反応を以下に述べられているイライザ法の固相中でのポリペプチドを使って研究した。Ｄｌに結合する抗体は、全ての試験された血清に対する元のポリペプチドＰ６２に結合する４）のとほぼ同じであった。それに対して、ウサギの抗Ｐ６２以外、いかなる血ｌｎに対しても固相Ｄ３は結合しなかった。Ｄ２に対する結果は中間的なもので、試験した血清に依存していた。このように、このシリーズのポリペプチドの抗体認識は、ポリペプチドの起さが２０から１１アミノ酸残基に短かくなるにつれ、減少していった。抗体結合が全ての血清に対して減しているという事実は、そのポリペプチドが２ケの抗原決定因子を含み、そのうちの１つが配列の欠ｔ１１による影響をつけているために、特異的抗原決定因子が連続的アミノ酸残基の除外により欠ｔｒｉ　している可能性を示している。また、ＰＯ２の配列対称性は、反復の結合部分は除いて、ＰＯ２中に存在する４から８アミノ酸残基のすべての配列がＤ３中にも存在することを保証している。イライザ法中の固相に結合しているポリペプチドの構造変化は抗体の認識の（ｍ制に寄りしているかもしれない。この可能性は溶液中での競合するポリペプチドのｆ′Ｉ！度変化全変化って、固相に結合したＰＯ２へのいくつかの血清の結合（免疫反応）を阻害することで研究した。抗血清は、ＰＯ２でコーティングしたマイクロタイター板に加える前に、免疫反応（結合）を起こすのに十分な予め決められた時間ポリペプチドＰ６２．Ｄ１．Ｄ２及びＤ３の溶液と混ぜ合せ、反応（インキュベート）させた。５人の患者からの血清を使ったこの研究結果は下の表３にまとめである。表　３ペプチドＰ６２＊への抗体の結合を５０％阻害する競合ポリペプチド濃度　− 競合ペプチド（マイクログラム／ミリリットル）血清　ＰＯ２ＤＩ　Ｄ２　Ｄ３ＴＪ　Ｏ，０５０，０５０，１２００ＶＭ　Ｏ，３０，３０，４３ＣＶ　Ｏ，１０，１０，１１ＯＮ６　０．６　０゜６　０．６　３ＪＣ１１１５００＊これらの測定に使われたイライザ法の操作はセクションＩＥｆ２１とＩＩＤに述べである。Ｒ６２への抗体の結合に関するポリペプチドＤ１の阻害的作用は、Ｒ６２自体の阻害効果と区別できないと考えられている。これは試験したすべての血清に対して正しい。ざらに興味深いことに、ポリペプチドＤ３は、より長いポリペブチ１．とほぼ同様にいくつかの血清ＶＭ及びＮ６を阻害した。この強い阻害効果は、これらの血清のどれもがイライザ法中の同相に結合したＤ　３への結合を示さなかった事実にもかかわらず起った。これらのデータは、そのポリペプチドはマイクロタイクー板のプラスチックの表面に結合するとき、必要とする二次構造を維持するのに必要な少なくと６１５アミノ酸残基以上の長さのものでなければならないことを示すと信じられている。認識に必要な最小の抗原サイズは、ポリペプチドＡ５．Ａ６゜Ａ７．Ａ８．Ａ９についても研究した。表２に示したとおり、ポリペプチド八５は５ケのアミノ酸残基をもち、一連の八６から八９の各メンバーは、Ａ９の９残基にいたるまで先のポリペプチドに１アミノ酸残基ずつ長さを増している。試験した抗面清ば、以下に述べるイライザ法中のマイクロタイター板に結合しているときのこれらのポリペプチドとは免疫反応を起こさなかった。固相ＰＧ２へのヒ１−の抗ＩＦ、　Ｂ　Ｎ　Ａ抗体の結合を阻害するＡシリーズのポリペプチドの能力に関するデータは以下の表４に示しである。表　４１ミリリットル当り１００マイクログラムの１度でおこるペプチドＰ６２への抗体結合ｌＩ？Ｉ害率活性阻害率（％）血清　Ａ５　Ａ６　Ａ？　Ａ８　Ａ９ＴＪ　９６　８０　９１　７４　３］ＶＭ　９３　８１　５１　＋７　９ＣＶ　９２　９３　９３　７２　２０ＪＣ９４９２６０ＢＢ　７４Ｓ６２　８６　９６　８９　９５　７８Ｓ６０１０６１０９　９３　８４　５３車　これらの研究は表３に述べられているのと同様に行なわれた。試験したほとんど全ての血清は、非常に高濃度必要だったけれど（Ｒ６２又はＤｌと等価な阻害を生じるのにその１００倍以上の濃度）、八９により阻害された。ざらに、３つの血清がＡ８と免疫反応全起こし、阻害され、Ａ７により阻害されたのは１つであった。より短かいポリペブチ１′ΔＧ及び八５により阻害されたものはなかった。このように、ポリペプチドサイズの減少と平行する免疫反応性の減少は２つの効果によるものと思われる。ｆｌｌＡｌｌ−ズのポリペプチドに示されるように、抗体の結合する抗原上の結合部位の欠損の効果、と、＋２１　Ｄシリーズのポリペプチドにより示されるように、そのサイズの減少によるポリペプチドの構造上の変化、である。３構　造本発明における合成ポリペプチドの構造上の特性は、円二色スペクトロスコピー（ＣＤ）により研究した。ポリペプチドＰ２７゜Ｒ６０，Ｒ６２，Ｒ１３，Ｒ１５，ＦＩ６のＣＤスペクトルを測定した。図１に部分的に示したデータは、好ましいアミノ酸残基配列、でＲ１及びＲ２は以前に述べたようなもの、や−ｃｒｙ　−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−八ｌａ　−Ｇｌｙ　−を含む本発明のポリペブチ１′は、２０℃で生理学的ｆａ？＆の中では比較的安定な二次構造をとることを示している。これらのポリペプチドのｉＲｊ！ｌ：な構造は比較的安定なので、ヒトの抗ＥＢＮへ抗体活性はこの特別な構ｊ♂に応答して起こると信じられている。 ■３．４叫資本本発明は、また、複数の結合した合成、ランダム共重合ポリペプチド反ｉｙ１ニットを含み、少なくともその１つがここで述べられているポリペプチドであるよ・うな合成各市合体を考慮している。単独もしくはキャリヤーと結合した本発明の多重合体は、ポ乳動物宿主中にその有効量が導入したとぎに、Ｅ　ＢＮ八に結合する抗体の産生を誘導することができる。アミノ酸残基配列がＲ１，Ｒ２が以前に定義されたものであるような５残基−ｃｒｙ　−Ｒ’　−Ｇｒｙ　−Ｒ２−Ｇｌｙ−の配列と６残基−ＧＩｙ−八Ｉａ　−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ａｌａ　−Ｇｌｙの配列を含み、また少なくとも　５０％のモル分；ドのグリシンを含む、本発明の侍に好ましい合成ランダム共重合ポリペプチドを含むこれらの多重合体はＥＢＮＡにより誘導されたヒトの抗体にも結合することができる。このように、それらの構成ポリペプチドと同様に、本発明の多重合体は免疫原性で、ヒ１−の抗ＥＢＮＡ抗体に対し抗原性である。それゆえ、これらの多重合体は、以下に述べる診療上の方法やシステムに有効な抗ＥＢＮＡ抗体の産生をうながすのに利用でき、又、迩切な診療上の方法やシステムの中で抗原として利用することもできる。全多重合体のうちに、約３５以下のアミノ酸残基しか含まない多重合体は典型的には免疫原として使用するのにギヤリヤーに結合する。総数約３５以上のアミノ酸残基をもつこれらの多ｆ「合体は典型的にはキャリヤーなしでも免疫原として十分に使用することができポリペプチド多重合体は以前に述べた固相法をつかって、ヘット−トウーテイル方式で合成ポリペプチドモノマーを結合していくことにより合成することができる。例えば、１つの完全なポリペプチド配列がレジン上に合成することができ、つづいて１つ以上の同しか又は異なるポリペプチド配列を合成することにより、後にレジンから切り離され、ここで述べたように使用する全多重合ユニット配列をもつものがつくられる。このようなヘット−トウーテイルポリベブヂド各重合体は約２から４のポリペプチド反１シュニットを含むのが好ましい。共重合ポリペプチドのポリマーとして合成することができる。ここで用いられているように、色々な文法−Ｆの形の“ポリマー”という言葉はポリペプチド結合により結合している複数の合成ランタン・共Ｆ立合ポリペプチド反復ユニットを含むある型の多重合体として定義される。本発明の典型的ポリマーはアミノ及びカルボキシル末端の両方に付加したシスティン残基を含む（ｄｉＣｙｓポリペプチド）、本発明のポリペプチドモノマーをつかって合成することができる。ｄｉＣｙｓポリペプチドモノマーは、酸化ｔＱ作をつかって分子内、ポリペプチド間にシスティンのジスルフィド結合を形成することができ、免疫原性、抗原性のポリマーを形成する。そのようにして作られたポリマーは反復ユニットとして本発明の複数の合成ランダム共重合ポリペプチドを含んでいる。これらの反復ユニットは上記の酸化したシスティン（シスチン）残基によって結合する。キャリヤーに対するポリペプチドの結合の目的のためや、ポリマーの合成のために本発明のポリペプチド中に１もしくは２ケのシスティン残基が存在することは、本発明のポリペプチド反復ユニットのアミノ酸配列を修正することとしては解釈されない。Ｃ２接種物もう一つの具体例には、本発明のポリペプチドは、効果的な量が投与されたときＥＢＮＡと免疫反応する抗体を誘導することができる接種物ヌばワクチンを作るために薬学的に許容できる希釈剤でうすめられる。？ｆ々の文法」二の型での言葉′接種物”は、ここでは、ＥＢＮＡに対する抗体を作るのに用いられる活性成分としての本発明のポリペプチドを含む混合物をいうのに用いられている。ポリペプチドが抗体を作るのに用いられるとき、そのポリペプチドは単独の場合もあるし、キャリヤーに結合した形もしくは多重合体として使われることが理解されようが表現の簡略化の為に、これらの選択を、以後常に表現するとは限らない。約３５残基以下のアミノ酸残基を含むポリペプチドに対しては、抗体の産生をうながすのにはキャリヤーを使った方が好ましい。キャリヤーに結合したポリペプチドは、抗体を作るところで、実際に使われよう。その接種物はＥＢＮＡを発現する細胞を検出する診療」−の検定に使用する為に抗体を産生ずるのに使うことができる。その接種物により産生じた抗体は、その細胞表面上でＥＢＮＡを発現するＢリンパ細胞に対する受け身免疫を誘導するための準備に用いることができる。ｆε々の文法型での言葉“ワクチン５は、ここでは、宿主動物の能動免疫を誘導するのに使われる活性成分として本発明のポリペプチドを含むある種の接種物をいうのに用いられる。能動免疫は抗体の産生を含むので、ワクチンもしくは接種物は同一の成分を含むことがあるかもしれないが、その使用法は異っている。はとんどの場合、ワクチン及び接種物の成分は、多くの動物で有用な補薬が人間では用いられないことから異なったものとなる。本接種物又はワクチンは、酸化したポリペプチド末端のシスティン残基を通して互いに結合した個々のポリペプチドの重合体のような多重合体、又はキャリヤーに結合した結合体として本発明のポリペプチドを有効量含んでいる。しかし、表現の簡略化の為に、本発明のポリペプチドの種々の具体化物はまとめて“ポリペプチド”という言葉とその種々の文法型のものによって表わされいる。投与当りの有効なポリペプチド量は、他にも考えられる中で、その技術分野ではよく知られているとおり、接種される動物種、その動物の体重及び選択された接種法に依存している。接種物及びワクチンは典型的には接種（投与）当り約１０マイクログラムから約５００ミリグラムのポリペプチド濃度を含んでいる。キャリヤーが用いられているときのポリペプチド量は、キャリヤーの重さを除いたポリペプチドの市さを表わしている。特別の実例接種物は以後与えられたキャリヤーとポリペプチドを加えた市さく結合物の）で述べられている。 “投与当り”という言葉は、動物に対する１回の投与として適する物質的に分離した単位を表わしており、その各々の単位は、必要な希釈剤、例えばキャリヤー又は賦形剤と合せて望ましい治療上の効果を上げるのに必要と計算された予め決められた量の活性物質を含んでいる。本発明の新たな投与に対する特許説明書は、＋ａ＋　その活性物質の独創的特性と達成される特別な治療上の効果、とｆｂｌ　動物中で治療の為に使われるそのような活性物質を混合する技術に基づく制限、を述べているものであって、それらは明細署に詳細に公開されて、おり本発明の特徴をなすものである。接種物は、典型的には乾燥した固体のポリペプチド結合物やポリペプチドポリマーを水や、食塩水、リン酸緩衝食塩水に懸濁することにより調製する。又接種物は補薬も含むことがある。完全フレンド（Ｆｒｅｕｎｄ）補薬、不完全フレンド（Ｆｒｃｕｎｄ）補薬、みょうばんのような補薬はその技術分野ではよく知られた物質であり、いくつかの業をから市販され本発明ポリペプチドにより生ずる抗体及び誘導されるすべての抗体は、そのような抗体から作られる抗体結合部位同様もう一つの本発明の具体化物を構成している。これらの分子はまとめて受容体と呼ぶ。受容体は先に述べた接種物を使う免疫により、ネズミ、ウサギ、ウマその他のホ乳動物中に生ずる。適当なモノクローナル受容体、典型的には抗体そのものは、参考文献にその陳述が組み込まれているところのナイマン（Ｎｉｍａｎ　）等らによって“米国科学の進歩”　（Ｐｒｏ、Ｎａｔｌ、　Ｓｃｉ、、　Ｕ、　Ｓ、　Ａ、　）　。８０巻、　４９４９〜４９５３頁（１，９８３年）に述べられているハイブリドーマ法をつかって調製した。簡単に、モノクローナル受容体を作るハイブリドーマを作るために、骨髄細胞又は他の自己増殖細胞系を本発明のポリペプチドで異常免疫化されたホ乳動物の肺臓がら得られるリンパ細胞と融合した。骨髄細胞系はリンパ細胞と同じ種由来であることが望ましい。典型的には、１２９　ＧＩＸ“株のマウスは望ましいホ乳動物である。本発明で用いられるのに適当なマウス骨髄細胞は、ヒポキサンチン−アミノプテリン−チミジン感受性（ＨＡ　Ｔ　）の細胞系列Ｐ３Ｘ６３−Ａｇ８．６５３　（ＡＴＣＣＣＲＬ　１５８０）　、及びＳｐ２　／　Ｏ−Ａｇｌ　４（ＡＴＣＣＣＲＬ　１５８１）を含んでいる。＃臓細胞は典型的にポリエチレングリコール（Ｐ　Ｅ　Ｇ）　１５００ヲ用いて骨髄細胞と融合させる。融合ハイプツトはＨＡ　Ｔに対する感受性で選択することができる。本発明の受容体分子を産生ずるハイブリドーマは、以下に述べる原料と方法のセクションＩＴＤに示す酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬ［ＳＡ）をつかって同定した。モノクローナル受容体はハイブリドーマの上清から必ずしも取る必要はなく、望ましいハイブリドーマを導入するホ乳動物の腹水から、一般的にはより高濃度で得ることができる。腹水をつかったモノクローナル抗体の産生はよく知られていることであり、ここではこれ以上取り扱わない。本発明の受容体はそれを生じさせたポリペプチドにも、また本発明のポリペプチドの免疫学的まれをする、対応するＥＢＮＡ抗堂性決定部位にも結合する。このように、本発明のポリペプチドは免疫原でもあり、抗原でもある。本発明の受容体は、本来のＥＢｈＪ八分子八王子トープと比較して仕較的少ないエピトープしか、それらがもたない免疫原により生ずるという理由で、天然のポリクローナル抗体と比べてオリゴクローナルと呼ぶことができよう、結果的に、本発明の受容体はポリペプチドのエピトープと結合する一方、ＥＢＮＡにより生じた天然の抗体はＩＥ　Ｂ　Ｎ　Ａ分子をとおしてエピトープと結合する。表１で示したポリペプチドに対してウサギ中で生した本発明の抗体結合部位を含む典型的な受容体分子はトービン（Ｔｏｗｂｉｎ）等の一米国科学学会の進歩” 　（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｅａｄ、　Ｓｃｉ、、　Ｕ、　Ｓ、　Ａ）の７　ｆｉ巻４３５０〜４３５４　（１９７９年）の発表と、ビリンゲス（Ｂｉｌｌｉｎｇｓ）等の“米国科学学会の進歩”　（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ。Ｓｃｉ、＋　ｕ、ｓ、　Ａ）の８０巻７１０４〜・７１０８頁（１９８３年）の発表の免疫ブｒ１ノティング操作法を用いて研究した。さらに詳しいことは涼１と方法のセクション（Ｉ＋）に述べられている。本発明の全てのポリペプチドは結合物としてタンパク質キャリヤーに結合し、以後に述べるように接種物中にウサギへの有効量を導入することにより、ウサギの抗ポリペプチド抗体を誘導することが分った。これらの受容体分子は、ＥＢＶで形質転換したヒトのＢリンパ体細胞系列Ｗ　Ｉ　−Ｌ　２、ラジ（Ｒａｊ　ｉ）及びダウン（Ｄａｕｄｉ　）からｆｌｉＪｆｆされる本来のＥＢＮＡタンパク質を認識する。これらの研究のデータを一部図２に示す。コントロール実験として、ＩＥ　ｒ３　Ｖ感染に陰性なりリンパ細飽のタンパク抽出物（Ｉ３ＪＡＢ細胞；スクリップス（Ｓｃｒｉｐｐｓ　＞　Ｄｍ床及び基礎研究所から入手可、う・ジョラ（Ｌａ　Ｊｏｌｌａ　）カルホルニア（ＣＡ））は抗ポリペプチド抗血清と反応するバンドは生じなかった。これらのデータは本発明の典型的な受容体分子はＥＢＶ感染に特東的なタンパク質と免疫反応をおこすことを示している。加えて、本来のＥＢＮＡタンパク質に対するウサギの抗ポリペプチド抗体の免疫反応性は、図２でも示されているように一つの抗原として使われる誘導性免疫原ポリペプチドにより阻害されよう。これらの結果は、特殊型の抗ポリペプチド抗血清はＥＢＮＡ抗λ性決定因子に特異的であることを示している。ポリペプチドＰ６２に対するウサギの抗ポリペプチド抗体はポリペブチＦＰ２７．Ｐ６２．Ｐ６０及びＰ８９の抗原性の比較を検討するために競争実験で使われた。この抗体は以後に１玉べるイうイザ法中の結合型及び非結合型のポリペプチドと非常によく相互反応を起こした。固相のポリペプチドＰ６２に対する抗ポリペプチド　Ｐ６２の結合は、その抗体を予めポリペプチドＰ６２とインキュベ− １・することにより９８％阻害された。同様に、ポリペブチＦ　Ｐ　（ｉ２に対する抗ポリペプチドＰ　６２の結合は、ポリペプチド■）６０により８１％、ポリペプチドＰ２７により３６％の阻害をうけた。ポリペプチドＰ８９は抗ポリペプチドＰ６２活性を全く阻害しなかった。ヒトのＥＢＶ免疫血清もこの抗原決定因子を認識するかどうかを決めるために、ＥＢＶ−免疫したりニーマチ関節炎患者の血清（血清１０１１）をつかった競争実験を行った。図３に示しであるその結果は、抗ポリペプチドＰ６２をつかったときのものと同様であった。これは、ポリペプチドＰ２７．Ｐ６２．Ｐ６０が共有している抗原決定因子はＥＢＮＡの天然の免疫原決定因子に類催していることを示しポリペプチドと前に述べたポリペプチドにより生ずる抗体及び抗体結合部位（受容体）；及び本発明の方法は免疫検定法のような給断上のテストにも用いることができる。例えば、そのような診断上の技術には、酵素免疫検定法、酵素増ｒｆＪ免疫検定技術、（Ｅ旧Ｔ）、酵素結合免疫吸着検定法（イライザ法）、放射性免疫検定法（ＲＩＡＬ、螢光免疫検定法、単−又は二重抗体技術及びその受容体もしくは抗原が何かの検出可能な目印又は検出手段でラベルしであるというその他の技術がある。一般的なものでは、マジオ（Ｍａｇｇｉｏ）の“酵素免疫検定法”　（Ｅｎｚｙｍｅ　Ｌｗｍｕｎｏａｓｓａｙ　）　＋ＣＲＣ版、オハイオ州クリーブランド（１９８１年）か、ゴールドマン（Ｇｏｌｄ＊ａｎ　Ｍ、　）の５螢光抗体法”　（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ＡｎｔｉｂｏｄｙＭｅｔｈｏｄｓ　）アカデミツクブレス版、ニューヨーク州、ニューシーク（１９８０年）を見よ。それらの方法を行なう際に有用なそれらの検定法及びシステムの特別な例が以下に議論しである。１、Ｅ［３ＮＡの検定身体試料中のＥＢＮＡの存在を検定する方法もここで考慮されている。一般的方法では、検定される検体試料が準備され、本発明の合成ランダム共重合ポリペプチドにより生ずる抗体結合部位を含む受容体分子と混ぜる。その混合物は検体試料中に存在するＥＢＮＡと受容体分子が免疫反応するのに十分な予め決めた時間維持する。それからＥ！３ＮＡ分子が検定した検体試料中に存在するか否かを決める為に免疫反応量を測定する。本発明の１つの具体化したものとしてキットとなっている実例で示される診断システムは１パツケージ中の本発明のポリペプチドにより生ずる抗体、潜在的全ての抗体及びＦａｂやＦ（ａｂ）’ｚ抗体領域のような抗体結合部位のような本発明の受容体分子を含む検体試料中のＥＢＮＡを検出するのに有効である。又、このシステムは受容体とその抗原との間の免疫反応の存在を信号化するための指示方法をも含んでいる。典型的指示法は１２５■と１３１　（のような放射性同位元素、アルカリホスファターゼ、西洋わさびパーオキシダーゼ、ベーターＤ−ガラクトシダーゼ及びグルコースオキシダーゼのような酵素、そしてフルオレセインやローダミンのような螢光色素を含んでいる。その隋示物質は本発明の受容体と直接結合させることができるし、又、本発明の受容体に反応（結合）する二次抗体、抗体結合部位又はスタフィロコッカス費アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）（Ｓ、アラレラム（ａｕｒｅｕｓ）　）タンパクへのような分離した分子にも結合することもある。そのような分離した分子指示方法の特別な例としては１２５■ラベルのＳ・アウレウス（ａｕｒｅｕｓ）タンパク質入がある。その指示方法は検出するべき免疫反応生成物を妨害せず、本発明の受容体に直接結合させない場合には、その受容体から分離して包装する。アセトンで固定した末梢血液リンパ細胞（ＰＢＬ）スミアのような検体と混合するとき、その受容体分子はＥＢＮＡと免疫反応して免疫反応物を生じ、その指示方法は、免疫反応生産物の形成を知らせる。ＥＢＮＡの診断法の１具体例には増巾剤を含む免疫螢光体がある。そのような検定において、ＰＢＬスミアは平坦な顕ｍ鏡スライドにアセトンで固定する０本発明に従って生じた抗体試料、例えばウサギ中で生じたものを一般的には約ｌθマイクログラムから約５００マイクログラム、よく知られた技法によりスライドに接触させる。本発明の未免疫反応抗体を洗い流したあと、もし必要ならスライド上のすべての非特異的結合部位を典型的には子ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）のようなタンパク質でブロックする。補体又は抗・免疫グロブリン抗体のような第２の試薬（項中試薬）、例えばモルモット補体、をテストスライド上でインキユベートすることができる。この第二のインキュベーシッンの後に、検定スライド上の抗体に結合しているものはそのままにして、未反応の項中試薬は洗い流す。ｗ４３の試薬（指示法）、例えばヤギの抗モルモット補体、をそのテストスライド上でインキユベートする。その第３の試薬はフルオレセインイソチオシアネー）　（Ｆ　ＥＴＣ）、ローダミンＢイソチオシアネート（ＲＩＴＣ）、テトラメチルローダミンイソチオシアネ−１−（ＴＲ［ＴＣ）　、　４．４　’−ジイソチオシアノスヂルベンー２．２′−ジスルホン＃１（、ＤＩＤＳ）及びその他この技術分野でよく知られているような螢光色素に結合させることによってラベルしである。この第３のインキエベーシッン後、未反応の第３の試薬は洗い流され、そのテストスライド上の補体に結合したＦｒＴＣでラベルしたヒツジ−抗モルモット補体抗体が残る。ＦＩＴＣでラベルした第３試薬の存在は螢光顕微鏡をつかって検出でき、ＥＢＶ感染の存在の信号となる。Ｅ　Ｂ　Ｖで感染していると分っているＢリンパ細胞について、上に述べより詳細には原料と方法セクションに述べられている免疫螢光検定法をつかってＥＢＮＡの存在をテストンた。表１で示されている各ポリペプチドで生したウサギの抗体はＥＢＶＩ−３染細胞系列Ｗ１−

【、２中のＥＢＮＡｆｃ検出することができる。」−記検定法を遂行するのに有用な望ましい診断システム、で好ましくはキノ！ −になったものは、各パッケージ中にｔａｌ　Ｅ　ＲＮ　Ａと免疫反応する本発明の受容体（抗体）　、（ｂｌ　その受容体と反応するモルモフト・の補体、抗免疫グロブリン抗体又はＳ、アウレウス（Ａｕｒｅｕｓ）タンパク質へのような補体（ｐの第２の増巾試薬、Ｔｅｌ　その増巾試薬と反応する抗体又は抗イ本Ｄ〜部分のような分別した分子の一部となるか、直接その増ｉ＋試薬に結合する（斤示拭薬、を含んでいる。その指示法は間接的にその増巾試薬の媒介をとおして、受容体分子とＥＢＮＡとの免疫反応のＣ８号を示す。上記の増巾試薬と同様、ここに述べられている受容体分子と診断システムの各（ｈ示拭薬は溶液、液体分散物又は凍結乾燥したもののような基本的に乾燥粉末として与えられる。その指示試薬がその増巾試薬と異なる分子であるときは、そのｔ斤示試薬は別々に包装される。その指示拭よが酵素であるときは、その酵素基質はそのシステムの別々に包装した形で与えられる。以前に述べた顕微鏡スライＩ′のような固体支持体、目ゼ以トの緩衝液及びアセトンもこの炒断検定システム・中で各々別々の包装置１１位で与えられる。診断システムに関してここで議論した包装は診断システムで慣習的に使われるものである。そのような包装はガラス及びプラスチック（例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン及びポリカーボネ−１・）のビン、バイアル、プラスチックやプラスチックホイルの薄い外装その他のものを含んでいる。本来の生物学的に活性な全抗体は上に述べられている免疫螢光検定法のような多くの診断システムには必要ではない、むしろ免疫学的に活性で、特異的型を含む抗体分子の抗体結合部位のような抗原結合及び認識受容体部位が用いられる。そのような抗体結合部位の例は、その技術分野でよく知られているように各々パパイン及びペプシンを使ってタンパク質分解によりつくられるＦａｂ及びＦ（ａｂ ’）２のようなその分野でよく知られているものである。２、抗Ｅ　Ｉ３　Ｎへ抗体の検定本発明のもう１つの診断法は検体中の抗ＥＢＮＡ抗体を検出するイライザ法である。ここではポリペプチドＰ６２のような本発明の特に望ましいポリペプチドは抗原として使われ、そして好ましくはファルマシア・ファイン・ケミカル（Ｐｈａｒ＋１Ｉａｃｉａ　Ｆｉｎｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）社にュージャージー州（Ｎｅｗ　Ｊｅｒｓｅｙ）　＋　ビス力タウェイ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ）　）からセファデックスとして市販されている網状デキストラン、アガロース、　ＩＩ！１ＩＴクリルアミド、ニトロセルロース又はマイクロタイター板のウェルのような固体マトリックスに結合（吸着）させ固体サポートを作る。特に望ましいポリペプチドを検定すべき神体と混ぜる。その混合物を、検体中に存在する抗ＥＢＮＡ抗体がそのポリペプチドと免疫反応するに十分な決った時間維持する。その免疫反応の存在は検体中の抗ＥＢＮＡ抗体の存在を知らせる指示手段で検出した。上記の方法で用いられる典型的イライザ法は、ポリスチレン又はポリビニルクロライド製の１２もしくは９６ケのウェルをもつマイクロタイター板からなる固体マトリックス上に吸着した、特に望ましいポリペプチドを含む固体サポートを使用する。マイクロタイター板のウェルの壁土の非特異的結合部位は典型的には子ウシ血清アルブミン（［３ＳＡ）のようなタンパク質でブロックした。洗浄により未結合のポリペプチド及びＢＳＡをマイクロタイターウェルから取り除いた。人の血清、血液又は血漿のような挟体試料を上記のポリペプチドが結合した固体サポートと混合し、固体と液体の二相からなる混合物をつ（る。その固液用混合物を、検体中の抗Ｅ１３Ｎ八抗体がポリペブチ１１元厚と免１へ反応するのに十分な時間維持した。それからその固液用は一般的に分局１する。第２のらヘル化したｔｂ示手段を含む抗体、抗体結合１（イ≦位ヌはぞの抗体き反応するＳ、アウレウス（橿＋ｒｅｕｓ）タンパク質、への溶液を固体用と混合してもう−っの固液摺？ｒ１合物を作る６１′ｌＩ！型的な第２の抗体はフプースＩ−不一ムの抗体がヒ１検出から由来−４−るところのパーオキシダーゼでラベルしたヤギの抗ヒトＩｇ抗体である。さらなるイ１用な酵素ラベルはアルカリホスファターゼ、ヘーターＤ−ガラクトンダーゼ及びグルコースオギシダーゼである。固相と第２のラベル化抗体からなる混合物をファースＩ・不−人の抗体と二つの抗体間の免疫反応のような指示手段の間の反応物を作るのに十分な予め決められた時間（３０分間）維持する。それから固相及び液相を分離する。１記の第２の抗体も免疫グロブリンの一種のみに特異的で、それと免疫反応する（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＤ）。そのような抗体は以下表６に示されるように、検体中に存在する抗ＩＪＮΔ抗体の免疫グ１：ｊプリンのクラスを同定する能力を与える。さらに第２の抗体又は抗体結合部位は２つのタイプの免疫グロブリンの軽鎖（例えば、カンバスはラムダ）の１つに特異的で、それと免疫反応する。これらの抗体は検体中に存在する免疫グロブリン分子の同−型を同定する能力を与える。さらにバーオギンダ〜ゼに対する過酸化水素のような酵素ラベルに対するも（質、アルカリホスファターゼに対するｐ−ニトロフェニルリン酸、又は○−）二二レンジアミンのような色形成色素前駆体を含む溶液を面相と混合する。それから予め選１ツ（シた波長（例えば、各々４９０又は４０５ナノメーター）での光学濃度を一定時間経過後に測定しく例えば６０分後）、検体中に抗ＥＢＮ△抗体が存在するかどうかを決める為に：２ントロールの光学１度とｊＪ、較する。本発明のもう１つの具体例はポリスチレン要の】２ウェルマイクロターイタ−ストリップのような固体マトリックスとそのマ（・リノクスに吸ｆ固定した本発明のポリペプチドからなる固体サポートを合乙゛キットになった診１析システムを含んでいる。またこのシステムは好ましくは、パーオキシダーゼラベルのヤギの抗ヒトＩｇ抗体のような結合した指示手段をもつ別々に包装した抗ヒトＩｇ抗体を含み、またさらに別に包装した０−フェニレンジアミンのような色形成色素前駆体と過酸化水素のような結合した指示手段に対する基質も含まれている。過酸化水素は通常比較的に不安定なためにキット中には含まれず、普）ｍは使用者により補なわれる。このシステムを使用する検定に便利な緩衝塩も乾燥物や液体の形で１ヶ以上の分離した包装で含んでいる。ヒトの抗ＥＢＮＡ抗体や抗Ｆ、　Ｂ　Ｎ　Ａ抗体を含まないヒ１−抗体く正常なヒト抗体）を合む個々の包装も陽性及び陰性のコントロールとして各々含んでいる。血清のような神体中の抗ヒトＩｇ抗体の存在に対する検定は上記の方法を使ったこの診断システムをつかって行なわれる。以前に述べまた後に原料と方法セフシラン（ＩＴ）で詳しく述べるのと同様に典型的なイライザ法は、先に述べた抗補体免疫螢光（ＡＣＩＦ）を用いて確定した抗ＥＢＮＡ陽性の血清型の９１人の血清中に、抗ポリペプチド免疫グロブリンの存在をスクリーニングするのに用いられていた。その血清を２０分の１の希釈で検定したとき、全ての９Ｎ＊体は、ポリペプチドＰ２７．Ｐ６２．Ｐ６０及びＦ１６．Ｆ１４．Ｆ１５に対して陽性であった。３２０分の１のより高い希釈率でさえ、９１のＩＥ　Ｂ　ＮΔ陽性血清中８３ケがイライヂ法中でポリペプチドＰ６２と免疫反応を起こした。このように、ＡＣＩＦにより確定した抗ＢＢＮへ抗体測定値と各血清の抗ペプチド活性には優れた相関があるように思われる。加えて、その結果は、ＡＣＩＦとより単純で容易な本イライザ技法の間の優れた相関を示している。さらに、その結果は抗Ｅ１３　Ｎ△抗体に対する診断検定に対する本発明のポリペプチドの有用性も示している。Ｆの表５にＥＢＶで誘導した伝染性単核症の収縮前後の２つの検体から得られた血清の反応性を示している。双方の場合におい°ζ、ボリベプヂＦＰ２７’、Ｉ）［ｌｉ２．　ＩＩ；０と結合した抗体は感染前にはなく、後で現れてきた。それとは反対に、ポリペプチドＰ８９に結合する抗体は産生されなかった。さらに研究を進めると、２７ケの非免疫供与体の以前に報告した登録簿〔カタラノ　（Ｃａｔａｌａｎｏ）等、臨床研究Ｌｔ　（Ｊ、ＣＩ　ｉｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ）６５巻、１２３８〜１２４５頁（１９８０年）〕からの貯蔵血清を前に述べたイライザ法におけるポリペプチドＰ６２とＰ２Ｏに対する結合でスクリーニングした。用いられた血清のＥＢＶ免疫資格はエプスタイン・バール・ウィルス外皮抗原（ＶＣＡ）の存否で定義した。ＶＣＡに対する血ｌ＃抗体をもたない（ＶＣＡ−）ものはＥＢＶ感染性で、典型的に抗ＥＢＮＡ抗体は低濃度しかもっていない。各ポリペプチドに対する有急な反応性を示す血ｌＲは、表５でわかるように、なかった。表　５ヒト血清ｉ中のＥＢＮＡペプチドに対する抗体【−一遭　忠旬嚇そ匈ソＸ塵−菫 ≠η二見吐馴とＰ２７　ＰＯ２Ｐ２ＯＰＲ９ＶＣＡ十正常　１３　１５５　９５８　１５４　２３ＶＣＡ＋正常　２３　５１６　８１９　１４５　１６Ｓトプレモノヌクレオシス　ＩＩ　１３　５１　ＱＳＢ−ポストモノヌクレオシス　３３　５１４　１１５　２３Ｍｔｌ−プレモノヌクレオシス　＋５　７７　７２　２！’ＩＭＶ−−ボストモノヌクレオシス　ＩＯ２６３１１６２２５ＶＣＡ−正常（ｎ＝２７）’　６７±２３５　ＮＤ’　４５±＋８　ＮＤｌ、全ての血清は２０分の１の希釈でテストンた。２、光学濃度は、３０分の基質インキュベーシッン後、４０５ナノメートルＶＣＡ”血清。４、過去も現在もＶＣＡに対する抗体の欠除によって示されるようなＥＢＶ関連の病気の臨床的２（ｉを示さない２７人からの血清。５、平均光学濃変上標準偏差。６、行なわなかった。感染の進行に伴うイライザ法と、Ａｃ＋Ｆ吟所法との関連を試験する為に、８人のカレッジ年令の学生の貯蔵血清で伝染性単核症の到来後連続的に採増したものをポリペプチドＰ６２を用いた前述のイうゴザ法で試験した。全ての学生は従来の方法１例えばＡＣ［Ｆによりへ１１定されたように、感染後１０月から１年にかけて抗ＥＩＩＳＡ測定値ハ増加り、た。へ７／ｌ／　（ｌｌｅｎｌｅ　）等は “伝染病ＰｌＩＤ　”　（Ｊ、　Ｉｎｆｅｃｔ。Ｄｉｓ　）の１３０巻２３１〜２３９頁（１９７４年）に報告している。検体の半分では、抗Ｐ６２抗体は、図４中の患者１５に対して示されているとおり、対応する抗ＥＢＮＡ測定値と平行している。他の半分は、ポリペプチドＰ６２に対する抗体はその徴候の到来後最初の１力月で投出される一方、それらの抗体はＡＣＩＦ法をつかって最近検出された。これらの結果は図５中の患ｆｔ＋４と２に対して示されている。それ故、抗Ｐ６２抗体は抗ＥＢＮＡ抗体が標準的抗 −補体免疫螢光法によって検出される以前に本発明のイライザ法をつかって検出することができる。ム、・ト染性単核症の経過に沿って、ある時間に個体の免疫応答に主に寄与する免疫グロブリンの分類をするのに、ヒトのＩｇＧ又はＩＢＭに特異的な２次（１！を示）抗体を原料と方法セクション（ＩＩ）で述べられているように・Ｃライザ法の中で使う。下の表６はイライザ法中でポリペプチドに対して測定したＥＢＶ感染中の異なる時間からの２個体の血清をつかった研究の結果である。表　６単核症感染後の抗ペプチド活性のポリペプチドＰ６２結合イライザ検出法による出現感染後の　患者　ＭＶ　患者　１５時間　１ｇ　Ｍ’　ＩｇＧ’　ＩｇＭ’　ＩｇＧ’感染前　１０３’　７４　ＮＤ’　ＮＤ１週間　２４５　８０　１５２　１１３１力月　８７　３７　２２５　１１８３力月　１３６　６０　２０８　１１８１２力月　ＮＤ　ＮＤ　２４９　３７５２１力月　１４５　６００　１８５　９９４１、　ヒトＩｇＭｖｆ異的二次抗体を使って検出した患者の１ｇＭレベル。２、　ヒ［ｇＧｌＩ異的二次抗体を使って検出した患者のＩｇＧレベル。３．４０５ナノメーターの６！ｉ長で測定した光学濃度。４、行なわれなかったもの。このイライラ法をつかって、小さいけれどＩｇＭ抗体値が上昇したということはテストした全ての一連の而〆ｎにおいて再現よく観察できる。イライラ法により測定した免疫応答はＥＢＶ感染中１ｇＭが典型的に１ｇＧの前に現れることで正常である。ＩｇＣ抗体の前にＩｇＭ抗体が出現することは表６中、患者１５に対して特によく示されている。、再び上の結果はＥｒ３Ｖの感染は少なくとも本発明のポリペプチドの１つと反応する抗体の産生の原因となっている。より大きな抗ポリペプチドのイライザ法研究において、先に述べた１９のＶＣＡ −血清の登録簿をポリペプチドＰ２７．Ｐ６２゜Ｐ２Ｏ，Ｆ１２．Ｆ１３．Ｆ１４．Ｆ１５．ＦＩ６に対してスクリーニングした。ＶＣＡ〜血清のどれもが陽性反応を起こさなかった。典型的データは後の表７に示した。下の表７中に示した典型的結果はＶＣＡ＋のＩＷ体の全てが各ポリペプチドに対し陽性、つまり結合すべき抗体をもっていることを示している。いくつかのリューマチ関節症の生者の血清６イライザ法でスクリーニングした。これらの結果も表７にまとめである。表　７ヒト１ｆＩＩ清中のイうゴザ法でべ１１定した平均抗ベブ千ドレヘルポリペプチドに対する平均抗体活性１患者グループ　血清数Ｐ２７　ＰＯ２Ｐ２ＯＦ］２　Ｆ１ａ　Ｆ１６８ｏｒ−’　！／２０”　１９　２２　１７　７７　３４　４１　４７８ｏｒｍ’　Ｉ／２０　２６　５２１　８５４　３９４　１２８　７０　７３３Ｎｏｒ＋　１／３２０　４８９０　２２３　７０　３７　３７　１１ｉ６ＲＡ＋５　＋／２０　２８　５９７　９９９　５６４　１１８　１１３　８４３ＲＡ＋　１／３２０　４８　１２Ｇ　３４８　１２２　５０　５０　２：Ｈｌ、血清インキエベーシクン後３０分に４０５ナノメーターの波長でＨｌ淀した活性。２、ＶＣＡ町貧生１冴陣。３、血清をテストンたときの希釈率。４、　ＶＣＡｌｑｋ生（固０− ５、リューマチ関節炎をもつと診断された（門木。正常、ＶＣΔ陽性（コントロール）及びＲＡ患者間の差は血清を３２０分の１に希釈したときに最もよくみることができる。ＲＡ患Ｈの抗体レヘルは、ウィル：フーノクス・ランク・サン法（ＷｉｌｃｏにＲａｎｋ　Ｓｕｍ　Ｍｅｔｈｏｄ）全つかって分析したとき、この希釈率のときにデス１したすべてのポリペプチドに対し有意に高い値であった（有意性９９％以上）。ソーグレン症、全身性エリ１−７１・−デス、（ＳＬＹ）及び強皮症（Ｐ　Ｓ　Ｓ）をもつ患者も高低両血清希釈率についてスクリーニングした。これらの患者グループと正常な人との間でみられる差異は、ポリペプチドＰ２７．　Ｐｆｉ２．Ｐ２Ｏ，Ｆ］６．ＦＩ４．Ｆｉ５に対するＰＳＳ患者の測定値が比較的高い値であったということだけであった。これらの結果は、がなり、以前のＥＢＶに関係する感染もしくはそれらの自己免疫病にＥＢＶを含んでいたことに寄因すると考えられている。これらのデータは診断法としてのイライラ法の有効性を城しるものではない。３、　ｆｉｌ　ｆｆ１Ｊ＋免疫のためのｒ％備細胞表面にＥＢＮΔを発現する潜伏性Ｂリンパ細胞をもつ患者を、Ｅ　Ｂ　Ｎ八と免疫反応をおこす本発明の合成ポリペプチドにより生ずる本発明の受容体、望ましくは全抗体で処理することができる。その受８体は蘂学的に許容できる希釈剤中に分散させた有効量の受容体を含む単位服用９の形で与えられるつそのような抗体の６効９とはその抗体の反応性や種ｔ、ｎによって界なる。一般的には、小者の体正午ログラム当り、約０．５ミリグラムから約２５．０　＝、リグラムがｆｆ妨と考えられている。その抗体は、３から２０口間隔で砂回、静脈内、筋肉内、又は腹股内に投与さガ、る。またその抗体は外科的もしくは科学的処理と、馬に与えることもある。その抗体は、前述の接種物をつかった、本発明のポリベブヂドムこ、とり抗体をイｔしさせる処理を番、１どこしノこ４ｔ４　ｆｔと冑なる動物種の血〆ｎや血漿から得ることができる。また、その抗体は、その分野ではよく知られている技術をつかってハイプリドーマ細胞を調製することにより、腹水溶液のようなモノクローナルなものから１７ることもできる。免疫複合体が住じたときに補体を活性化する能力があるという理由で、抗体そのものが結合部位として望ましい。 ■、方法と原料Ａ、ポリペプチドの合成本発明のポリペプチドは、メリフィールＦ　（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）等の米国化学会Ｌｔ　（Ｊ、　静、Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、）　８５巻、　２＋、４９〜２＋５４頁（１９６３年）とホーテン（Ｉｌｏｕｇｈ　ｔｅｎ）等の国際ペプチド及びタンパク質研究誌（Ｉｎｔ、　Ｊ、　Ｐｅｐｔ、　Ｐｒｏｔ、　Ｒｅｓ、）　１６巻、３］１〜３２０　Ｔｒ、（１９８０年）に述べられている固相法により化学合成した。ペプチド合成の面相法は、米国、カルフォルニア州ベーカリ− のベフタマンインスッルノン１−社（Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　Ｃｏ、　）から市販されているベックマンモデル９９０Ｂ＋ｆリベブチド合成機をつかって行なった。接種物中で用いられた３５残基以下のポリペプチドに対しては、システィン残基をアミノ末端もしくは、カルボキシル末端に付は加えて以下に述べるタンパク質キャリヤーへの結合を助けた。全てのポリペプチドの組成はアミノ酸分析により確かめた。上記固相法による本発明の合成ポリペプチドを作るに当り、アミノ酸残基をカルボキシル末端残基からエステル結合をとおして樹脂（固相）に結合した。ポリペプチドがシスティン残基を経由してキャリヤーに結合されるか、もしくは末端のシスティン残基を経由して重合されるときには、樹脂にエステル結合するカルボキシル末端残基としてシスティン残基を用いるのが便利である。各々付は加誠るアミノ酸のアルファアミノ基は、そのアミノ酸が成長するポリペプチドに加えられる前にタージャリーブ１−キシカル２江ニル（ｔ−ＢｏＣ）基で保護する。そのｔ　−ＢｏＣ基は成長するボリベブヂ１′随に次のアミノＩＩＩｔを結合さ一仕る前に除かれる。また、反応性アミノ酸側鎖もポリベブ千ド合成の間保護しておく。通常ｆｕｌｌ鎖保護基には次のようなものが使われる。チロシンに対しては０− 　（ｐ−ブロモヘンシロキシカルボニル）、スレオニン、セリン、アスパラギン酸、グルタミン酸には０−ヘンシル、システィン乙こはＳ−メトキシヘンシル、ヒスチジンにはジニトロフェニル、リジンには２−クロロヘンジキシ力ルボニル、アルギニンにはトシルの各基である。保護したアミノ酸は薄層クロマトグラフィーでまゝ−スポットを与えるよう適当な溶媒で再結晶する。結合反応は、最９］のＮ末端アミノ酸のミリ当量数当り１０倍モル過剰の保護アミノ酸とジシクロへキシルカルボジイミドを加えて行なうのが典型的である。また両試桑を２倍モル量使・うこともある、アスパラギンに対しては、保護アミノ酸に対して当モル量のＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾールを加え、溶媒としてはジメチルホルムアミドを使う、全ての結合反応はギシ７　（Ｇｉｓｉｎ　）が分析化学（Ａｎａｌ、　Ｃｈｅｗ。＾ｃｔａ、　）の５８巻、２４８〜２４９Ｆ（（１９７２年）に発表したピクリン酸試験により、９９％以上進行していた。囁みどおりのポリペプチドを合成した後、生成した保護ポリペプチド（約１グラム）を２ミリリアトルのアニソールで処理し、約２０ミリリツトルの無水フッ化水素をつかって、ドライアイス温度で、反応容器中にｐｋＮシた。生した混合物を約１時間４℃でカクハンし、保護基を切るとともに樹脂からポリペプチドをはずした。窒素気流中、４°Ｃでフッ化水素をとばしたあと、残査を無水のジエチルエーテルで３回抽出し、残査を減圧下で乾燥した。真空乾燥した物質を５％酢酸で抽出しく５０ミリリツトルで３回）、樹脂から遊離したポリペプチドを分離した。抽出物を含有する溶液を凍結乾燥して、弔−の酸化をうけていないポリペプチドを得る。生成した合成ポリペプチドは、抗ＥＢＮＡ抗体を検出する酵素結合免疫吸着法（イライザ法）での試薬として使うことができる。またその合成ポリペプチドは、渣れをキャリヤーに結合して結Ｗ杉にし、以後に議論するように生理学的に許容できる希釈剤にその有効量を分散さ仕ることによって、接種物を作るのに用いることができる。また、本発明の合成多重合体は、ひとつのポリペプチドのカルボキシル末端と別のポリペプチドのアミノ末端が”？ミド結合で端と端が（ヘッド−Ｉ・ウーティルに）結合する、本発明の複数のポリペプチドの固相合成により合成することができることに注目されよう。そのような合成多重合体は好ましいことにひとつの長いポリペプチド多重合体として合成されるが、また個々のポリペプチドとして合成し、引きつづいて水中での１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドのようなカルボジイミド試）東を用いて互いに結合させるように作ることもできる。ひとつの単一ポリペプチドとして合成するときの多重合体中に含まれるアミノ酸残基の総数は約５０ケ以下が望ましく、結果として、本発明の約８ケのポリペプチドは、単一のポリペプチドとして合成する単一のヘッド＝トゥーティル多重合体鎖の中に組み込むことができる０合成ヘッド・トウ・ティル多重合体は、より望ましくは本発明の２から約４ブロツクの結合した合成ランダム共重合ポリペプチドを含んでおり、そして総数約４０ケ以下のアミノ酸残基を含んでいる。・Ｂ、ポリマーの調製本発明のポリペプチドは互いに結合して多数のポリペプチド反復ユニットを含む抗原性もしくは免疫原性ポリマー（合成多重合体）を形成する。そのようなポリマーは典型的に増加した免疫原性及び抗原性をもつという有利さがある。加えて、重合性免疫原かつかわれるならキャリヤーは一般的に必要とはしない、ポリマーを作るさいに異なるポリペプチドモノマーが使われたなら、いくつかのεＢＮ＾抗原性決定因子に対する抗体と免疫反応をする能力が得られるゆさらに、いくつかのＥＢＮＡの抗原性決定因子と免疫反応する抗体を誘導する接種物中につかわれるとき、そのようなポリマーの能力は汀利なものである。本発明のポリマーは、」−４記のようにポリペプチドを合成し、′ジンスティン末端”ポリペプチドを作る為に、アミン末端とカルホキ、フル末端にンステイン基を含ませることにより合成する。例えば、表１のポリペプチドや表２のＤｌとＤ２のポリペプチドは、その還ノＴ：型でジンスティン末端ポリペプチドを与えるべく、アミノ及びカルボキシル末端に付加的なシスティン残基を含むよう合成する。合＋Ｌ　ｌ＆、典型的実験室規模の合成においては、１０ミリグラムのジシステインボリペプチド（非酸化型のシスティン残基を含む）を０．１Ｍのアンモニウム・ビカーボネート緩衝液２５０ミリリットルにとか一１゛。それかＣＺ）その溶解したジンスティン末端のポリペプチドを空気中で約１８時間、もしくはエルマン（ｌＥｌｌｍａｎ）試験でメルカプタンが検出されなくなるまで、そのｙＢ液をゆっくり撹拌し空気酸化さ仕る。［エルマン（ＥＩｌ＋ｎａｎ）の生化学、生物物理学の記録（Ａｒｃｈ。ｎｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、）　８２巻、７０−７７頁（１９５９年）を見よ）。そのように合成したポリマー（合成多重合体）はシスティン（シスケン）残基を酸化することによりノ（に結合した合成ランダム共重合ポリペプチド反復ユニットを複数含んでいる。典型的にはそのようなポリマーは、ヘノ）′・１つ・ヘッド及びティル・１・６・ティル型、つまり、両方のポリペプチドの末端の結合基が同一となるような、二つのポリペプチド反復ユニットのアミノ末端が、２つのカルボキシル末端のときと同様、ひとつのシスティン残基をとおして互いに結合することができる。Ｃ８±−ヤーｖ−ヤーニ二−Δ稈伍音成ポリペプチドは、リウ（１，ｉｕ）等が“生化学″　（ｌｌｉｏｃｈｅｍ、）の８ｏ、６６ｑｏｉ　（１９７９年）に発表した方法により、キャリヤーとし７てのキーホール・リンベーノ１　ヘモシアニン（Ｋ　Ｌ　Ｉ（）に結合させる。簡単に１１６と、４ミリゲご・ム（■）のキトリヤーをｎｌ−マレイミドベンゾイル−Ｎ〜ヒドロキシサクシンイミドエステル０．５１暉で活性化し、引き続いて、アミノ又はカルボキシル末端のシスティンを通して５ｒ＠のポリペプチドと反応させ、約１０から３５）ｌｆＥｉｔパーセントのポリペプチドを含む結合物を作る。合成ポリペプチドのアミノ又はカルボキシル末端に１ヶ以上のアミノ酸残基を付加し、キャリヤーへのポリペプチドの結合を助ける。前に議論したように、合成ポリペプチドのアミノ又はカルボキシル末端に付加したシスティン残基はジスルフィド結合によりポリマーを形成するのに特に有用であることが分る。しかし結合物を作る上で、この分野でよく知られている他の方法も使われる。典型的なこれ以外の結合操作には、クリブスタイン（ｋｌｉｐｓｔｅｉｎ　）等が伝染病雑誌（Ｊ　、　Ｉｎｆｅｃｔ、　Ｄｉｓ、）の１４７巻、３！８〜３２６頁（１９８３年）に報告したグルタルアルデヒドのようなジアルデヒド、ミカエル（Ｍｉｃｈａｅｌ　）付加反応生成物やその他のものの使用、もしくは合成多重合体を複数のポリペプチドを互いに結合して作るときに！Ｊ１１論したように水溶性カルボジイミドを使用してキャリヤーへのアミド結合を作るときのようなカルボジイミド技術の使用を含んでいる。有用なキャリヤーはこの分野ではよく知られており、一般的にはタンパク質そのものである。そのようなキャリヤーの典型的なものには、キーホール・ヘモシアニン（Ｋｌ、Ｈ）、エデスチン、シログロブリン、子ウシ血清アルブミン（Ｂ　Ｓ　Ａ）又はヒト血清アルブミン（Ｉ　Ｓ　Ａ）のようなアルブミン、ヒツジの赤血球（ＳＲＢＣ）のような赤血球、チクナス・テクソイド、ポリ　（Ｄ−リジュノ、Ｄグルタミン酸）のようなポリアミノ酸同様のコ１／う・トキソイド及びその他のものがある。この分野ではよく知られているように、中間的結合基をつかって合成ポリペプチドをそのキャリヤーに結合するのはしばしば有益である。上述のよらに、グルタルアルデヒドはそのよ・うな結合基の−はここで用いるように、ｍ−マレゴミ１ ′ヘンシイルーＮ−ヒドロキジサクシンイミド（ＭＢＳ）が望ましい。さらに、リウ（Ｌｉｕ　）等がジノ前に公開したように、ＭＢＳをエステル−アミド交換反応によってそのキャリヤーに最初に付加する。その後、その付加の次にマレイミトニ市結合への千オ酢酸（ＣＨ３ＣＯ３Ｈのようなブロックされたメルカプト基の付加をさせることができる。アシル保護基の切断後、ジスルフィド結合を脱保護した結合基メルカプタンと合成ポリペプチドの付加させたシスティン残基の間にジスルフィド結合を形成させる。キャリヤーの選択は抗原の決定因子領域よりは、抗原の最終的な使用に依存しており、本発明に特に含まれていない規準に基づいている。例えば、接種物が動物に使用されるならば、特別な動物中で都合の悪い反応が起こらないキャリヤーを選らぶべきだろう。Ｄ。イライザ法抗ペプチド抗体の結合や阻害の研究は酵素結合免疫吸着検定法（イラ・イザ法）により以下に述べられるように行う。簡ｆｉｔに８６と、１ミリリットル中１０マイクログラムの濃度のポリペブチ１ ′を含むｒ（１３Ｓ（Ｉｎミリモラー　（ｍＭ）のホウ酸す１−リウム（ｐ旧）、３）、１５０ｍＭ塩化ナトリウム）を１００マイクロリットル加えることによりマイクロタイターウェル（コスタ−（Ｃｏ５ｔａｒ）　Ｖ、マイアミ州、ケンゾリノジ　３５９０番）を抗原としての（固りのポリペプチドでコー１−する。ウェルと抗Ｉ夏を含むｆ３液の接触を予め決められた、典型的には１５分の間、２０℃に保ち、抗原でコ〜１・した固相を作る４、固相と液相を分離し、ＢＢＳで三匣洗浄する。非特蹟的結合部位苓各−７エルに１％の子ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を２００マイク１コリノトル加えて、別の固液用混合物を作ることにより阻害し、その固液用を３０分間２０℃に保つ。その相を分離し、過１１１で未結合のＢＳＡをＢ　Ｂ　Ｓで３崩洗って取り除く。ウェル当り、ＢＢＳで２０分の１に希釈した血清を１００マイクロリツＩ・ル加えることにより固液混合相を作り、ウサギやヒトの血清（検体試料）の抗ポリペプチド活性を検定した。希釈した血清と抗原をコートした固相の接解を１時間のような、予め決められた時間、２０℃に保ち、免疫反応物を生成さ拷る。同相液相を分離し、それから固相、この場合は抗原をコードし、免疫反応物を含むウェルをＢＢＳで三度洗う。吸着したポリペプチドと免疫反応したヒト血清中の抗体をアルカリホスファターゼを結合したヤギの抗ヒト１ｇ抗体（カリフォルニア州、バーリントン（Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ）　、タボ製（Ｔａｇｏ）　）を含む指示手段をつかって積出した。吸着したポリペプチドと免疫反応するウサギ血清中の抗体を、アルカリホスファターゼを結合したヤギの抗つサギＩｇ抗体（カーケガード（Ｋｉｒｋｃ４ａｒｄ　）とベリー（Ｐｅｒｒｙ　）研究所載、ＭＤ州、ガイサースバーグ（Ｇａｉ　ｔｈｏｒｓｈｅｒｇ）　）を含むｔ行来手段をつかって検定した。いずれの場合でも、１００マイクロリツトルのＢＢＳで３００分の１に希釈した指示抗体を各ウェルに加え、さらに固液用混合物を作る。この個液相混合物を予め決めた時間、１時間２０℃に保ぢ、固相に結合したヒ′ト抗体と指示手段との反応生成物を形成させる。その相は分ぬｔし、固相はＢＢＳで３度洗う。ポリペプチド特異的抗体へ結合したアルカリホスファターゼ結合の抗体を１）− ニトロフェニルリン酸の１）−ニトロフェニルへの酵素的加水分解を分光学的測定する。簡単にいえば、１００マイクロリットルのｐ−ニトロフェニルリンＭ、（２ｍＭ塩化マグネシウム（ｐＨ９，８）、５０ｍＭ炭酸す１−リウム中１ミリリットル当り１ミリグラムの）を各ウェルに加える。酵素反応を１時間進行さセ、カリフォルニア州イングルウッド（Ｉｎｇｌｅｗｏｏｄ　）のフロー研究所（ＦＩＯＮｌ、ａｂｏｒａｔｏｒｉｅ！ｌ）から市販されているタイターチク（ＴＩＴＥＩ？ＴＥＫ）分光光度計で４０５ｎｍの光学濃度を測定した。Ｅ、細胞培養細胞中で−１−産されたＥ　１３　Ｎ　Ａと免疫反応する本発明の受容体分子の能力を以−トに述べるようにＷ　ｌ−Ｌ　２　、ラジ（Ｒａｊ　ｉ）　、ダウン＜Ｄａｕｄｉ　）及びＢＪＡＢ細胞系列をつかって研究した。Ｗｌ−Ｌ２細胞（ＭＤ、　ヘセスダ（Ｒｅｔｈａｓｄａ　；米国培養物改築（ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅ　Ｃｕ１（ｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ）の八ＴＣＣＣＲＬ　８１５５　ＷＩＬ２−ＮＳ）は遺伝性スフェロサイティノク、貧血症のヒ１患考から抗導したＥ　ＩＥ　Ｖ陽性非産生Ｂ−リンパ球系列の１種である。レビー（Ｌｅｖｙ）等のガン（Ｃａｎｃｅｒ）　２２巻５　］　７〜５２４ＹＪ（＋９６Ｒ年）の報告をみよ。ラジ（Ｒａｊｉ）　＠胞（Ｍｌ）、ベセスダ（Ｂｅｔｈｃｓｄａ）　、米国培養物収集物、ΔＴＣＣＣＣＬ　８６）はバーキット（Ｂｕｒｋｉｔｔ　）リンパ球からのＥＶｒ３遺伝子陽性、ＥＢＮＡ崖生リンパ球様細胞の１種である。エプスタイン（ＥｐｓＬｅｉｎ　）の国際ガン研究Ｑ　（Ｊ、Ｎａｔ、ＣａｎｃｅｒＩｎｓ（）　３４巻、２３１頁（１９６５年）の報告をみよ。ダウン（Ｄａ＋＋ｄｉ　）細胞（ＭＤ、ベセスダ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ）の米国培養物収集物、八ＴＣＣＣＣＬ、２１３）もＥＢＮＡ産生細胞系列の１つである。ＢＪＡＢ細胞はカリフォルニア州、う・ジッタ（Ｌａ　Ｊｏｌｌａ）のスクリップス（Ｓｃｒｉｐｐｓ　）臨床及び基礎研究所から市販されている非ＥＢＮＡ産生のリンパ球細胞系列のひとつである。Ｊ二記細胞系列は２ｍＭの丁５−グルタミンと１０％の胎児の子ウシ血清を？ｉｌｉ　ッたＲＰＭＩ　１６４０培地（ムーア（Ｍｏｏｒｅ）の米国医学会誌（Ｊ、Ａｍ、　Ｍｅｄ、Ａｓ５ｏｃ、）　１９９Ｓ５１９−５２４頁（１９６７年）、及びモートン（Ｍａｒｔｏｎ）のイン・グイ１−口（Ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ）　、６巻８９〜１００Ｊｌ：（１９７０年）の報告を見よ）で培養した。Ｆ、倉！ｌＬ良刊Ｕ死ＥＢＮ八産へ及び非産生（コン１−ロール）細胞の抽出物を、本発明の受容体がＥＩＩＮＡ発現を診断するのに有効かどうか判断する為に調製した。上に述べた培養物からの細胞を、０．２　ｍ　Ｍのフェニルメチルスルホニルフルオライド４含むリン酸庁術食塩水（ＰＢＳ、１５０ｍ、Ｍ塩化ナトリウム、１０ｍ、Ｍリン酸すトリウム、ｐｌ＋７．４　）で洗い、網状赤血球標準緩衝液（Ｒ２Ｈ、ＩＯｍ　Ｍ塩化ナトリウム。１０ｍＭｔ−リス−塩酸、ｐｌ＋７．４．１．５　ｍ　Ｍ塩化マグネシウム、０．２ｍＭフェニルメチルスルホニルフルオライド）中５分間膨張させ、０．２〜０．３５モル濃度（Ｍ）の塩化すトリウムに羽整した３〜５倍容のＢＢＳ中で超音波処理して破壊した。水中に３０分間装いた後、その超音波処理物を細胞破片を除くために、１０，０００にｇで１５分間の遠心分離にかけた。Ｇ、免疫ブ一り天ゴガ造圧上記細胞抽出物を、本発明の抗ＥＩ３ＮＡ抗体又は典型的な受容体分子を含むと知られているヒト血清をつかってＩＥ　Ｂ　Ｎ　Ａに対する険定を行った。抽出物に２倍容のエタノールを加え、−２０℃で約１８時間処理することにより沈殿させ濃縮し、試料緩衝液（Ｓ　Ｂ。１０％グリセリン、　２％２メルカプトエタノール、１％ラウリル硫酸ナトリウム（Ｓ　Ｄ　Ｓ）　、０．００２％ブロムフェノールブルー。４０ｍＭ　Ｔｒｉｓ−ｎｃｐ　（ｐＨ７，４）にとかすか、ＳＯ３−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）の試料緩衝液で６倍に希釈した。７．５％ポリアクリルアミドゲルを作り、リムリ（１，ａｅｎｍｌｉ　）が自然（Ｎａ　ｔｕｒｅ）の２７７巻、６８０〜６８５頁（１９７０）に発表した手順に従って、レーン当り、５０〜２００マイクログラムのタンパク質♀をチャージして泳動した。電気泳動後、ＳＤＳポリアクリルアミドゲルからのタンパク質のパン１′を１− −ビン（Ｔｏｗｂｉｎ）等が米国科学会の進歩（Ｐｒｏ、Ｎａｔｌ。Ａｃａｄ、　Ｓｉｉ、Ｕ、Ｓ、Ａ、）の７６　ｙ！５４３５０〜５３５４９　（＋　９７９年）に報告した手頃に従って、ニトロセルロースソー）・（Ｍｌ、デ１−ロイド、シレイチャー・アンド・シュエル（Ｓｃｈｌｅｉｃｌ＋ｅｒ　＆　５ｃｈｕｅ１１　）製）状の固体支持体へ電気泳動的に移行させた。これは、１２．５ｍＭのトリスヒドロキサイド、９６ｍＭグリシン及び２０％メタノール中、７０ポルトで２〜３時間、バイオ・ラドＭ（［ｌｉｏ　−ＲＩ）ｄ）　ｌ・ランス・プロット装置（カリホルニ７、リッチモンド（Ｒ４ｃｈｍｏｎｄ）　、バイオラド（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）社）をつかって行った。移行につづいて、二１−ロセルロースフィルター又はプロットは、非特異的結合を減らず為にＰＢＳ中、２％ＢＳＡ（ｗ／ｖ）もしくはＰＢＳ中２％のバラグーミルク（ｗ／ｖ）ｆ６液で１時間飽和させた。そのプロットを３７℃で１時間、ＰＢＳ、又は２％ミルク２ｍｌ中にＥ［３Ｎ八陽性ヒト血清もしくはウサギの抗ポリペプチド抗体０．１ｍｌを加えた溶液で免疫反応を起こさせた。Ｅ　１３　Ｎ　Ａタンパク質に結合した抗ペプチド抗体はそのプロットを指示試桑と反応させζ）ことにより検出した。この例としては、２０１の１２５１でラベルした（ミリリットル当り毎分２００，０００カウント、ミリグラム当り毎分１０６カウント）Ｓ、アラレラム（Ａｕｒｅｕｓ）タンパク質入（カリフォルニア、う・ジッラ（Ｌａ　Ｊｏｌｌａ）カルバイオケム（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）社）を３７℃で３０分間、免疫反応物と接触させた。そのプロットをＰＢＳで洗い、−７０℃で一晩、コクツク（Ｋｏｄａｋ　）のＸＡＲｘ−線フイルムに露光させた。Ｈ，丸−一部本発明の受容体分子は上述のポリペプチドもしくは多重合体を含む接種物で免疫化することによって、そのホ乳動物内に生ずる全抗体を含んでいる。ポリペプチドも多重合体も単独か又はキーホール・リンペラ１−へモソアニン（ＫＬＨ）のようなキャリヤータンパク質に結合した形で使用される。しかし、ポリペプチドは結合体として、多重合体は単独で使われることが望ましい。ウサギは完全フレンドアトバント（ｃｏ＋＊ｐｌｅｔｅ　Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ　ａｄｊｕｖａｎｔ）中１，０■の結合体を含む接種物で免疫化され、１力月後、不完全フレンドアトバント（ｉ＋ａｃｏｍｐｌｅｔｅ　Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ　ａｄｊｕｖａｎｔ）中１．０■の結合体を含むものでさらに増進させた。各免疫は尻の皮下注射で行った。ウサギは増進接種後１から２力月で採血された。免疫学的に活性な抗体を含む血ｌＮはその分野ではよく知られている方法により、血液からつくられた。これらの抗体は本発明の口６以上のポリペプチド及びＥＢＮＡ抗原性決定因子と免疫反応を起こした。それらはＥ　Ｆ３　Ｎ　Ａを検定するシステム中で利用された。＋１６１々の接種物を次のようにＣＦＡ又はＩＦＡをつかってｊｌｌｉＩ製した。接種当りの望ましいポリペプチド量（例λばｌｔＩｇ）を与えるに１−分な結合物は、ｐＨ７、２のＰＢＳ　（約０．５　ｍｌ＞に溶かした。さらに同量のＣＦＡ又はＩＦＡを結合物溶液に混ぜ、水−油比が１対ｌの結合物、水及びアトバントを含む接種物を作った。その接種物は、その後、均一化し接種物とした。そのように調製した接種物の体祐は典型的には１ｍｌで、結合物、ＰＢＳ及びアトバントのいくらかはエマルジョン化の間に失なわれている。実質的に回収されたすべてのエマルジッンを注射筒に入れ、前述のようにウサギに導入する。ウサギに導入した接種物量はエマルジョン化の前に存在したものの約９０％あると考えられているや上記の接種物ストック溶液は本発明の接種物の実例である。ここで説明しているように、それらは、ＥＢＮＡと免疫反応する受容体分子を産生ずるのに使用することができる。 ■、免疫螢光−歴作一もう一つの検体中のＥＢＮＡを検定する方法は本発明の受容体分子と受容体−ＥＢＮＡ免疫反応産物を検出するための螢光指示手段を利用するものである。本発明において、上記のように増殖させた２Ｘ１０’１ｌＩＷＩ−Ｌ２細胞を細胞遠心１！ｌ（サイトスピン（ｅｙｔｏｓｐｉｎ）　＋　シャントン・サウザーン（Ｓｈａｎｄｏｎ　５ｏｕｔｈｅｒｎ）　＋アストモア（Ａｓｔｍｏｏｒ　）　＋ランコーン（Ｒｕｎｃｏｒｎ　）　＋チシール（Ｃｈｅｓｉｒｅ　）　＋英国）をもちいて、平坦な顕微鏡スライド上に広げた。２０℃で５分間、空気乾燥したあとで、細胞をアセトンで２分間固定し、２０℃で２分間空気乾燥する。そのスラーイドは使用するまで一２０℃で保存する。固定したｗ＋−ｔ、２ｉ胞について、ポリペプチドＰ、２７．　Ｐ２Ｏ。１）６２．Ｐ８９で生ずるウサギの抗ポリペプチド抗体（本発明の受容体）をつかってＥＢＮＡに対する検定を行った。ＶＢＳ緩衝液（１２０ｍＭバルビトールｐｌ＋７．３．　１４４ｍＭ塩化ナトリウム。２．５ｍＭ［化マグ翠ソウム、０．７５ｍＭ塩化カルシウム）で１０分の１に希釈した各ウサギ抗血清５０μｌを抗体とＥＢＮＡが免疫反応するのに」−分な予め決めた時間（例えば３０分間）、スライド」二２０℃でインキエヘートした（固定細胞と接触を保った）、陰性コントロールスーうイドを正常ウサギ血清をつかって同様の処理を行った。」−記インキュベーションの間、抗ポリペプチド抗体の一部は、固定化したＷ　Ｉ　−Ｌ　２細胞中に存在するＥＢＮＡと免疫反応した。未反応の抗体はＶＢＳで洗うことにより取り除き、スライド上には［Ｆ、　Ｂ　Ｎ　Ａ−受容体免疫反応産物が残る。１Ｆ、Ｉ’（Ｎ　Ａに結合した抗ポリベブ千ド抗体は最初はＶＢＳで１０倍に希釈したモルモ５・１・の補体（クゴ（Ｔａｇｏ）　、バーリンガム（ｌｌｕｒｌｉｎｇａｍｅ）　＋カリフルニア州）５０μβを各スライドと、その補体が受容体と結合するに十分な時間（３０分間）インキュベーションすることによって検出される。それからそのスライドを　ＶＢＳで洗浄し、ウサギの抗２１ミリペプチドＩｇＧに結合していない補体をとり除いた。フルオレセインでラベルしたヤギの抗モルモットＣ３（ラベルした抗補体抗体、カベル研究所（Ｃａｐｐｅｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、コクランビル（Ｃｏｃｂｒａｎｖｉｌｌｅ）　、Ｐ　Ａ　）をその抗原抗体補体複合体を検出するのに使った。ＶＢＳで２０倍に希釈した５０μβのｔけ示抗＋ｍ清を上記のように３０分間２０℃で各スライドについてインキュイー１−シた。未結合のヤギ抗モルモア）Ｃ３はＶＩ３３でスライドから洗い流した。それから免疫反応産物を螢光顕微鏡をつかって観察した。ポリペプチドの構造的性質を、そのポリペプチドがヒ１の抗ＥＢＮＡ抗体と免疫反応するのに必要とする二次構造を明確にするために研究した。そのポリペプチドをリン酸緩衝食塩水中にｌｑ／ｍ＋の濃度となるように溶解した。スペクトルを試料１ｍｌをつかって、デジタル・イクウィップメント・コーポレーション（旧ｇｉｔａ１．Ｅ、ｑｕｉｐ＋ｍｅｎｔＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　）　１１　／　０２　コンピューター　（デジタルイクウィップメントコーポレーション（旧ｇｉｔａｌ　Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　）、メイナード（Ｍａｙｎａｒｄ　）　、マイアミ）と連結、自動化したキャリー（Ｃａｒｙ）　６１分光偏光光度計（キャリー・インスツルメンｌ−（ＣａｒｙＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　）　、、アプライ１′・フィジックス・コーポレーション、（Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓ　Ｃｏｒｐ、　）　、モンロビア（Ｍｏｎｒｏｖｉａ）　、カルホルニア）で測定した。各ポリペプチド１０回連続スキャンの平均を図１に示したようにプロットした。前記のものは本発明の実例を示Ｌ７たものでそれを制限するものではない、多くの多様化やイー正が、本発明の新しい概念の真の精神や観点から離れることなしに有効とすることができる。ここに例としてあげられる特別のポリペプチド、抗体、それらの混合物及び使用法はなんら制限を意味したり議論したりするものではないことを理解するべきである。ＦＩＧ、　ＩＦＩＧ、　２ぺ・プラト仇ωＪＥｒａＮＡｃ　ｅ　Ｂ　１３　ｓａベインしター　−−Ｑ−Ｂ−Ｃ％ｊルペヂセＦ浩２囮ＦＩＧ、　４開拓は杓閏ＦＩＧ、　５手続補正帯（方式）％式％１、事件の表示　ＰＣＴ／［ＪＳ８５１０１４８４３、補正をする者事件との関係　出願人５、補正命令の日付　昭和６１年１０月７日６、補正の対象　明細書及び請求の範囲の翻訳文国際Ｘ１１査報告Ｗ＊″ｉ″”’　””””’　−’　ＰＯＴ／ＩＪＳ８Ｓ１０１４１１４力合衆国　カリフォルニア州　９２０１４　デルマー　ヴイスタオーシャノ−１４８２４力合衆国　カリフォルニア州　９２０２４　リューカディア　／くディ　ロード　１６１８力合衆国　カリフォルニア州　９２０７５　ソラナ　ビーチ　フアベニュー　５５８

Claims

【特許請求の範囲】１．約６から約４０のアミノ酸残基を含み、左から右にアミノ末端からカルボキシル末端の方向で式【配列があります】で示されるような５個のアミノ酸配列を含み、ここでのＲ１とＲ２は各々同じかあるいは異なるもので、共にＧｌｙである場合を除く、Ａｌａ．Ａｓ，Ａｒｇ，Ｇｌｙ，Ｌｅｕ．Ｐｒｏ，Ｓｅｒ，Ｔｈｒを含む群から選ばれたものであるような合成ランダム共重合ポリペプチドで、少なくともモル分率２５％以上のグリシン残基を含み、キャリヤーに結合し、ホ乳動物宿主に有効量導入されたとき、ＥＢＮＡと免疫反応を起こし抗体の産生をうながすことのできる上記ポリペプチド。２．アミノ酸残基配列が次に示すものからなる群から選ばれるようなものを含む請求の範囲第１項記載の合成ポリペプチド。（ｉ）【配列があります】；（ｉｉ）【配列があります】；（ｉｉｉ）【配列があります】；（ｉｖ）【配列があります】；（ｖ）【配列があります】；（ｖｉ）【配列があります】．３．上記ポリペプチドで、（ａ）少なくともモル分率５０％のグリシン残基を含み、（ｂ）左から右にアミノ末端からカルボキシル末端の方向に、式【配列があります】で示され、上記５個の残基配列とオーバーラツプする付加的な６個のアミノ酸残基を含み、（ｃ）ＥＢＮＡにより誘導されるヒトの抗体と免疫反応を起こす、請求の範囲第１項記載の合成ポリペプチド。４．上記ポリペプチドのアミノ酸残基配列が、左から右にアミノ末端からカルボキシル末端の方向に、次の式（ｉ）【配列があります】；（ｉｉ）【配列があります】；（ｉｉｉ）【配列があります】；（ｉｖ）【配列があります】；（ｖ）【配列があります】；（ｖｉ）【配列があります】；（ｖｉｉ）【配列があります】；（ｖｉｉｎ）【配列があります】，ｔｈｅで示されるものからなる群から選ばれる配列を含むもの、又その薬学的に許容される塩、及びその抗原的に関連した変化物であるような請求の範囲第３項記載の合成ポリペプチド。５．上記アミノ酸配列が約１５から約２０個のアミノ酸残基を含むような請求の範囲第３項記載の合成ポリペプチド。６．反復ユニットとして複数の結合した合成ランダム共重合ポリペプチドを含む合成多重合体。７．上記ポリペプチド反復ユニットがアミド及びジスルフィドからなる群から選ばれた結合により互いに連結しているような請求の範囲第６項記載の多重合体。８．薬学的に許容される希釈剤に溶解又は分散した請求の範囲第１項記載の合成ランダム共重合ポリペプチドを含み、ＥＢＮＡと免疫反応する抗体を誘導するのに適した合成ポリペプチド接種物で、ホ乳動物宿主中にその有効量が導入されたときに、ＥＢＮＡと免疫反応する抗体の産生をうながすことのできる上記接種物。９．上記ポリペプチドがキャリヤーに結合したような請求の範囲第８項記載の合成ポリペプチド接種物。１０．ポリベブチドカが投与当り約１０マイクログラムから約５００ミリグラム存在するような単位投与型の請求の範囲第８項記載の合成ポリペプチド接種物。１１．請求の範囲第１項の合成ランダム共重合ポリペプチドを含む合成免疫原により生ずる抗体結合部位をもつ受容体分子。１２（ａ）．請求の範囲第１項記載の合成ランダム共重合ポリペプチドによって生ずる受容体分子、や（ｂ）．Ｅ８ＮＡと受容体との免疫反応を知らせる指示手段、を含む、ＥＢＮＡの存在を検定するためのキットの形をした診断システム。１３（ａ）．検定されるべき検体を用意し、（ｂ）．請求の範囲第３項記載の合成ランダム共重合ポリペプチドと上記検体を混合し、（ｃ）．上記検体中に存在する抗ＥＢＮＡ抗体力｛上記ポリペプチドと免疫反応するに十分な予め決った時間上記混合物を維持し、（ｄ）．上記免疫反応の存在を決定する、ステップからなる検体中の抗ＥＢＮＡ固体を検定する方法。１４．上記ポリペプチドを上記混合の前に固体の支持体に固定するステップをも含めた請求の範囲第１３項記載の方法。１５．（ａ）請求の範囲第３項記載の合成ランダム共重合ポリペプチド、と（ｂ）上記ポリペプチドとＥＢＮＡに対する抗体との免疫反応を知らせる指示手段、を各々別々の包装にして含む、検体中のＥＢＮＡに対する抗体の存在を検定する、キットの形をした診断システム。１６．上記合成ポリペプチドを上記マトリックスに固定し、固体支持体を形成させたような請求の範囲第１５項記載の診断システム。１７．上記指示手段がヒトの抗ＥＢＮＡ抗体と免疫反応を起こすことのできるラベル化した抗体であるような請求の範囲第１６項記載の診断システム。１８．請求の範囲第１項記載の合成ポリペプチドによって生ずる有効量の抗体を含む、その細胞表面上にＥＢＮＡを発現するＢリンパ細胞に対する能動免疫のための処理。１９（ａ）．検定されるべき検体を用意し、（ｂ）．請求の範囲第１項記載の合成ランダム共重合ポリペプチドにより生ずる抗体結合部位をもつ受容体分子と混合し、（ｃ）上記受容体分子が上記検体中に存在するＥＢＮＡと免疫反応するに十分な予め決めた時間、上記混合物を維持し、（ｄ）．上記免疫反応の量を測定する、ステップからなる検体中のＥＢＮＡの存在を検定する方法。２０．請求の範囲第３項記載の合成ランダム共重合ポリペプチドに免疫学的に結合したヒトの抗ＥＢＮＡ抗体を含む免疫反応産物。