JPS62294096A - Ｄｌ−パントラクトンの光学分割法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、発明の詳細な説明 （産業上の利用分野） 本発明ＨｂＬ−パントラクトンの光学分割法に関する。

（従来の技術） 従来、化学的に合成され７’（ＤＬ−パントラクトンを
光学分割することによシ、Ｄ−パントラクトンが得られ
ている。しかしな刀為らこの分割にはキニーネ、ブルシ
ン等の高価な有機塩基が必要であり、その回収も容易で
ない等の欠点をｊ有していな。

一方、ラセミパントラクトンの生化学的分割法としては
特公昭≠７−／り７弘ｊ号公報、特開昭７７−／ｊλざ
り５号公報記載の方法がある。曲者は微生物の作用によ
りＬ−パントラクトン倉完全に消化させるととによ）、
Ｄ−パントラクトンを収得するものであＩり、基質の半
量が損失するという欠点を有する。

後者はう七ミ体にロドトルラ（ｕｈｏａｏｔｏｒｕｘａ
）属に属する微生物を作用させ１？！異的にＬ一体のみ
を加水分解させＤ一体を分離収得する方法である。後者
の方法は、加水分解物であるＬ−パント酸をラセミ化処
理し、基質として得利用することによシ収惠よくＤ−パ
ントラクトンを得ることができる。

（発明が解決しよりとする問題点） しかし、Ｌ−パントラクト／１７Ｘａ累分解するそこで
ｐＨ保持の為にリン酸緩衝液を用いズし力為し、この様
な緩衝液を用い念場合、化学反応による加水分解によシ
目的とするＤ−パントラクトンも加水分解され収率が低
下する難点がある。

（問題を解決するための手段） そこで、本発明者らは、上記の難点を解決すべく鋭意研
究金石つ７’（結果、無機の塩基性化合物の水溶液を滴
下することによシ、生じたＩ、　−パント８を中和させ
、はとんど化学的に目的とするＤ−パントラクトンを加
水分解させるととなくし一パントラクトンを特異的に加
水分解酵素により分解させることがで六ることを見騒だ
し本発明にだし室した。

すなわち、本発明の要旨けＤＬ−パントラクトンに無機
の塩基性化合物の水溶液を用いてｐＨ全μ〜７・よに保
持させながら微生物の加水分解酵素を作用させることを
％徴とするＤＬ−パントラクトンの光学分割法に存する
。

以下、本発明の詳細な説明する。

本発明に訃ける微生物は、Ｌ−パントラクトンを特異的
に加水分解することのできる酵素を持つ念微生物であれ
ばいずれでも有用である。

例えばロドトルラ（Ｒｈｏａｏｔｏｒｕｌａ）属が挙げ
られる。その代表例としては、ロドトルラ・ミヌーり・
パール・チクセン２ス（ｆｌｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍ
ｌｇｕｔａＶａｒ　ｔｅｘｅｎ日１ｅ）エアＱ　０４１
１２　　ロドトルラ・ルブラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ
　ｒｕｂｒａ）工Ｆ６０＆９ｉ＜　　などが挙げられる
。

これら微生物の冶讐罠際して使用される培地は、特忙制
限されない。炭素源としては、種々の炭水化物、有機酸
等が挙げられ、窒素源としては、有機アンモニウム塩、
無機アンモニウム塩、尿素等を用いることができる。ま
た、必要に応じ、無機物として、各種リン酸塩、マグネ
シウム塩等を使用することができ、必要に応じ各種有機
栄養物を添加することもできる。

培養は通常／２時間〜７日間程度、好気的条件下に行な
われる。培地のｐａは３〜１０．温度は２０−４０℃程
度から選ばれる。

本発明において、ＤＬ−パントラクトンに前記微生物の
加水分解酵素を作用させる方法としては、液体培地に菌
株を培養した培養物、培養液から分離した菌体、あるい
は菌体又は培養物を処理して得られる乾燥菌体もしくは
固体化菌体ならびに酵素液又は、固定化酵素等のいずれ
うことかできる。反応に際しては、通常ラセミパントラ
クトン濃度が１０〜．？　００　ｗ／ｖＳ＠度が採用さ
れる。反応温度は通常％１０−１０℃ｐＨはμ〜７．ｊ
１好ましくは６〜７程度に保持される。ｐＨを保持する
ための無機塩基は、通常に、　Ｎａなとのアルカリ金属
、（４，Ｂａなどのアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸
塩、好ましくカリの濃度は反応条件等により異なるが、
通常ｏ、ｉ〜３規定程度から選ばれる。

反応時間は反応条件等によプ異なるが、通常、回分式の
とき、数時間〜３日間程度から選ばれる。反応終了後、
−Ｄ−パントラクトンは分別晶析、溶媒抽出などの操作
で分離取得することができる。反応液に残つ一７’５Ｌ
−パント酸は、酸性条件下に加熱してＬ−パントラクト
ンとＬ７を後、溶媒抽出等によシ回収される。とのＬ−
パントラクトンは常法によシラセミ化した後回収するこ
ともできる。

（実施例） 以下実施例によ）１本発明をさらに詳しく説明する。

実施例１ 下記組成の培地ｊＯ−の入ったλ００−三角フラスコを
用いて、ロドトルラ書ミヌータ・バール−チクセンシス
（Ｒｈｏａｏｔｏｒｕｌａ　ｍ１ｎｕｔａ　Ｖａｒｚｅ
ｘｅｎｓｉｓ）エフ００１７１２　５２１℃で４Ｌｒ時
間培誉した。

培地ニゲルコース　　　　１０９ ペプトン　　　　　！ｌ 酵母エキス　　　　　ｊｌｌ コーンステイープリカー　　　　！Ｉ 水　　　　　　　　　　　１００ｍ１ （ｐＨ、ｇ、ｊ　　） 培養後、遠心分離によシ集画した。蒸留水で一〇〇洗Ｍ
、ＤＬ−パントラクトン八θｇを加え蒸留水でｊＯｗｌ
とし、０．３Ｎ　Ｍ６０Ｈ水溶液を滴下することによｈ
　ｐｌｉコントロール（ｐＨｔ、ｚ〜７．０　）　Ｌな
がら３０℃で一≠ｈｒ反応を行った。

反応液から遠心分離によって菌体を除去した後、ベンゼ
ン２００ｄｋ用いて抽出し、抽出液からベンゼンを減圧
留去し、Ｄ−バントラクト７４！１０Ｗ９ｔ−得た。一
方抽残液を塩酸でｐＨ２，０に調整し、１００℃で７０
分間加熱処理し穴径。

ベンゼン２００ｄを用いて抽出し、Ｌ−パントラクトン
４Ｌ２０Ｗ９を得た。

なおり及びＬ−パントラクトンの分析はガスクロマトグ
ラフィーを用いて行なった。

（Ａｎａｌ、　ＢｉＱｃｈｅｍ、、　／／２　ターｔ６
　　（ｔ９ｒ〕）記載の方法によった。） 比較例１ 実施例１と同様にロドトルラ・ミヌータ・バール・チク
センシス（ｆｔｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍ１ｎｕｔａ　
Ｖａｒｔｅｘｓｎｓｉｓ）　ＩＦｏ　０ｕ／コを培養し
ｆ、次に反応液ｔ　ＮｔｔＯＨでｐＨコントロールする
代りにｏ、ｍのリン酸緩衝液を用いて反応させる以外は
実施例／と同様に反応及び後処理を行った。

結果Ｄ−パントラクトンは３ｊ０１！９しか得られなか
った・ 実施例λ 実施例／と同様にロドトルラ・ミヌーターバール・テク
センシｘ　（！’ｊｈｏａｏｔｏｒｕｘａ　ｍｔｎｕｔ
ａ　Ｖａｒ１ジ四旦源」つＩＦＯ／１０コを培養した。

次にアルカＩ）ｆＯ，λＩＪ　ＫＯＨ水溶液に代える以
外は実施例１と同様に反応及び後処理を行った。

結果Ｄ−パントラクトン４ＡＯ７ｎｉ％Ｌパントラクト
ン≠３０■を得た。

（発明の効果） 本発明方法によれば、目的とするＤ−パントラクトンを
高収高で得ることができる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）ＤＬ−パントラクトンに無機の塩基性化合物の水
   溶液を用いてｐＨを４〜７．５に保持させながら微生物
   の加水分解酵素を作用させることを特徴とするＤＬ−パ
   ントラクトンの光学分割法。