JPS62271A - 新規な微生物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はアルスロバクター（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ
　ｌ　属（て属し、５置換ヒダントイン及びＮ−カルバ
モイルアミノ酸を対応するそれぞれのＬ−アミノ酸に転
換する能力を有する新規な微生物に関するものである。

なお、本発明において、特に断わらない限シ５＃換ヒダ
ントイン及びＮ−カルバモイルアミノ酸なる化合物名は
、各々Ｄ体、Ｌ体、ＤＬ体の総称を意味する。

〔従来の技術及び問題点〕

従来、ＤＬ−５置換ヒダントイン類を酵素的にＬ−アミ
ノ酸に転換する方法については、特公昭４２−１３８５
０号以降多くの特許出願がなされており、特に芳香族ア
ミノ酸の製造方法としては、７ラボバクテリウム　アミ
ノゲ坏ス（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍａｍｉｎｏｇ
ｅｎｅｓ　ｌ　ＦＥＲＭ　−３１３３及びその変異株Ｆ
ＥＲＭ−３１３４、ＦＥＲＭ　−３１３５を５置換ヒダ
ントインに作用させる方法が知られている。

また、Ｌ−Ｎ−カルバモイルアミノ酸全酵素的ＦＣＬ−
アミノ酸に転換す己方法としては、Ｌ−又はＤ　Ｌ　−
Ｎ−カルバモイルメチオニンにコリネバクテリウムセベ
ドニカム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　５ｅｐｅ
−ｄｏｎｉｃａｒｎ　）　Ｉ　Ｆ　０３３０６等を作用
させて、含まれるＬ−Ｎ−カルバモイルメチオニンをＬ
−メチオニンに転換する方法が知られている（特公昭５
５−２９６７８号）。しかし、この方法によって転換す
ることができるのはＬ体のみであってＤ体をＬ−メチオ
ニンに転換することはできな１ハ。

更にまた、従来の＃素法によるし一アミノ酸の製造法で
は、５置換ヒダントインを原料とする場合とＮ−カルバ
モイルアミノ酸を原料とする場合とでは、各々別種の微
生物を使用する必要があり、５ｆｉｌ’！ヒタ゛ントイ
ンとＮ−カルバモイルアミノ酸の両方に作用し、対応す
るそれぞれのし一アミノ酸に転換しうる微生物は見出さ
れていなかった。

従って、ＤＬ−５置換ヒダントイン類を原料とする場合
には、その原料の製造の際に副生じたＤＬ−Ｎ−カルバ
モイルアミノ酸を除去する必要があり、またＤＬ−Ｎ−
カルバモイルアミノ酸を原料とする場合にはＤ−Ｎ−カ
ルバモイルアミノ酸が反応系に混入するのを防止する措
置又は反応終了後残存するＤ−Ｎ−カルバモイルアミノ
酸を分取、ラセミ化するための煩雑か工程を採らざるを
得なかった。更に％ＤＬ−Ｎ−カルバモイルアミノ酸を
水溶性塩として用いれば反応液濃度を高くできるため反
応を有利に行ない得るはずであるが、Ｄ体のＮ−カルバ
モイルアミノ酸に作用してＬ−アミノ酸に転換し得る微
生物がなく操作の単純化は不可能であった。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、５置換ヒタ゛ントイン類の微生物による
分解機作について研究中、発明者らが土壌中より新たに
分離した微生物がヒダントイン化合物を開裂し、アミノ
酸を生成する際にＬ−Ｎ−カルバモイルアミノ酸とＤ−
Ｎ−カルバモイルアミノ酸を生成すること、そして逐次
的に生成してくるアミノ酸が５体でちることから、この
微生物が従米知られていない能力を有する新規微生物で
あることを見出し、別途出願した。

この微生物は、アルスロバクタ−属に属し、５１１％ヒ
ダントイン及びＮ−カルバモイルアミノ酸を対応するそ
れぞれのし一アミノ酸に転換する能力を有する新菌種ア
ルスロバクタ−エスピー（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ　
ｓｐ、　）　Ｄ　Ｐ　−Ｂ　−１００１（微工研菌寄第
８１９０号）である。

本発明の微生物は、このＤ　Ｐ　−Ｂ　−１００１株か
ら誘導された変異株であって、Ｄ　Ｐ　−Ｂ　−１００
１株と同様の能力を有する。

すなわち本発明は、アルスロバクタ−属に属し、５置換
ヒダントイン及びＮ−力ルパモイルアミノ酸を対応する
それぞれのし一アミノ酸に転換する能力を有する新菌種
アルスロバクタ−エスピー（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ
　ｓｐ、　ｌ　Ｄ　Ｐ　−Ｂ　−１００２（微工研菌寄
第８１９１号）でちる。

次ニ、アルスロバクタ−エスピー　ＤＰ−Ｂ−１００２
の菌学的性質を同ＤＰ−Ｂ−１００１のそれと共に示す
。

表から明らかな々口く、ＤＰ　−Ｂ　−１００２株はＤ
Ｐ−８１００１１７が有するマ＝ン酸とβ−アラニンの
８化能力を失った以−￥はＤＰ−Ｂ−１００１株と同様
の菌字的性貫を有する。

また、表からＤ　Ｐ　−Ｂ　−１００１株及びＤＰ−Ｂ
−１００２株の菌学的諸性質の特徴として、１１）ダラ
ム染色性妙；償閣性でちり、培養の経過とともに変化し
、形態的にも特徴ちる多形性を示すこと、（２）胞子を
つくらないこと、（３）細胞壁の塩基性アミノ酸がリジ
ンでちること等が挙げられる。

これらの性貝を基準にしてパーシーズ・マニュヤ・オブ
・デターミネーテイブ・バクテリオロー　（Ｂｅｒｇｅ
ｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉ
ｖｅ　Ｂａｃｔｅ−りＩＱｇＹ　ｌ　第８版にて検索す
ると、ＤＰ−Ｂ−０１株及びＤ　Ｐ　−Ｂ　−１００２
株はアルスロバクタ属に属する細菌であると当Ｊ！！ｆ
ｒされる。しかし、ルスロバクター属に含まれる種につ
いて、更に索を行なってもＤ　Ｐ　−Ｂ　−１００１株
及びＤＰ−−１００２株と一致する菌種の記載を見出せ
ない。

パーシーズ・マニュアル・オブ・デタミネーテイブ・バ
クテリオロジー第８仮の記載によると、アルスロバクタ
−属に属する微生そに、ビタミン。

要８性等に二９７種に分類さ几ていす。ＤＰ−Ｂ−１０
０１株及びＤＰ−Ｂ〜１００２株はビチオンのみ全要求
している点はアルスロバクタ−グロビフオルミス（Ａｒ
ｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ　ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ　ｌに
一致しているが、Ｄ　Ｎ　ＡのＧＣ含量が５９．３壬で
あリアルスロバクター　グロとフォルミスの６０〜６４
．４壬の範囲になく明らかに相違する。更に、ＤＰ−Ｂ
−１００１株が５置換ヒダントインとＮ−カルバモイル
アミノ酸の両方に作用して対応するそれぞれのし−アミ
ノ酸に転換する能力も本発明の微生物の特徴である。

そこで、本発明者らはＤ　Ｐ　−Ｂ　−１００２株をＤ
Ｐ−Ｂ　−１００１株と同様アルスロバクタ−属に属す
るｆ？菌種と認め、アルスロバクタ−エスピーＤＰ−Ｂ
−１００２と命名し、前記した如く工業技術院微生物工
業技術研究所に寄託した。

このアルスロバクタ−エスピーＤＰ−Ｂ−１００２は、
例えば後記実施例に記載の方法により土壌中より分離さ
れたアルスロバクタ−エスピー　　Ｄ　Ｐ　−Ｂ　−１
００１をｐ−ジメチルアミンベンゼンジアゾスルホン酸
ナトリウムを加えた液体培地にて培養した後、特に高い
アミノ酸生成活性を有する変異株として単離された。

本発明のアルスロバクタ−エスピー　ＤＰ−Ｂ　−１０
０２を用いてＬ−アミノ酸を製造するには、例えばこれ
を過当な培地中で培養して得た培養物を酵素源としてＮ
−カルバモイルアミノ酸又は／及び５置換ヒダントイン
に作用させる。

培地としては、炭素源、窒素源、無機塩類等を含有する
通常の培地を１更用することができる。炭素源としては
、例えばグルコース、フラクトース、シュークロース、
マルトース等のｍ　：　りＩＪセリン、マンニット等の
糖アルコール；フマル酸、クエン酸等の有機酸が適宜使
用できる。窒素源としては、肉エキス、酵母エキス、ポ
リペグトン、コーンステイープリカー等の天然有機窒素
源の他、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、リン酸
アンモニウム等の無機アンモニア源及びフマル酸アンモ
ニウム、クエン酸アンモニウム等の有機酸のアンモニウ
ム塩を使用することができる。また、無機塩類としては
、リン酸−ナトリウム、リン酸−カリウム、硫酸マグネ
シウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸第一鉄、
硫ソマンガン等が使用できる。さらに酢酸コバルトなど
の有機塩類も適宜使用することができる。

培養は、常法に従って実施することができ、例えば培地
のｐＨは５〜９、好ましくは６〜８．５の範囲に調節し
、菌株を接種した後、約２０〜３５℃、好ましくｆｉ２
６〜３０″Ｃの範囲で通気攪拌下、１６〜７２時Ｉ［］
′ｌ培養する方法が採用される。

斯くして得られた培養物は、そのま°ま酵素源として用
いることができるが、培養液、粗酵素標品１製酵素標品
は勿論、該培養液から採取した薄体又は例えば凍結乾燥
菌体、アセトン乾燥菌体、菌体破砕物、洗浄画体等の該
菌坏の処理物等の形預で便用することもできる。更に菌
体あるいは菌体帆理物を例えばポリアクリルアミド、ア
ルギン酸カルシウム、カラギーナン、光架橋樹脂等に公
知の方法により周定化して用いることもできる。

また、Ｎ−カルバモイルアミノ酸又は／及び５喧美ヒダ
ントインを対応するそれぞれのし一アミノ酸に転換する
反応は、例えばと自らの化合物と上記培養物とぎ水性媒
体〒に共存せしつることにより実施される。

この場合、本発明の微生物の特異な能力から、Ｎ−カル
バモイルアミノ酸及び５置換ヒダントインは、それぞ几
り体、Ｌ体、ＤＬ体のいずれであっても対応するそれぞ
れのし一アミノ酸に転換することかでさる。従って、本
発明の微生物を用いてＬ−アミノ酸を製造するだめの原
料化合物としては、対応するし一アミノ酸が同一のＮ−
カルバモイルアミノ酸又は５寛藺ヒダントインのＤ体、
Ｌ体、ＤＬ体あるいはこれらの任意の組合せからなる混
合物を使用することができる。なお、Ｎ−カルバモイル
アミノ酸１仁、そのナトリウム塩等の水溶性項の形で反
応に供することもできる。

反応はｐＨ６〜１１、好フしくけｐＨ６，５〜９．５の
範囲で行なうのが好適でちるっ　ｐＨの調整は、リン涼
暖・菌液、アンモニウムｒｉ債銭等の通常使用さ几てい
る緩衝液が使用できるっ反応温度は１０〜５０°Ｃ，ｈ
−ｚ　しくｔｔ３０〜４０°Ｃｖｄ　Ａ　Ｋ　調ｍする
のが好ｉ″′ｃろるっ なお、反応ばに鉄、マンガン、コバルト等の無機イオン
又は亜硫酸ナトリウム等の還元性′勿賀を添加、あるい
は窒素ガスの吹き込みを竹なうと、反る速度が増大ない
しけ培養物の算木活性を安定化することができ好ましい
結果を与える。まだ、酒坏の反応ばからの回収、反応へ
の再使用が可能になる。無機イオンは０．１〜１０ｍき
１にｉる：うに添加するのが好ましい。

また、反応液に加えられる５置換ヒダントインの債はそ
の溶Ｍ度以上であっても、不溶分は反応進行に伴ない溶
解し逐次Ｌ−アミノ酸に転換されてゆくため反応に支障
は生じない。更にまた、Ｎ−カルバモイルアミノ酸は水
溶性塩の形で添加できるため、原料濃度を高く保つこと
ができる。従って、固定化菌体をカラムに充填した反応
器に原料溶液を流下させる方法により反応を行なう場合
、５　！Ｗ換ヒダントインのみではな（、Ｎ−カルバモ
イルアミノ酸の水溶性塩を原料として使用できるため、
殺菌操作を行なう場合も含め操作を容易かつ高濃度で効
率よく行なうことかできる。

かくして反応は数時間〜８０時間程度で終了し、反応に
供した５＃換ヒタ゛ントイン及びＮ−カルバモイルアミ
ノ酸は完全にＬ−アミノ酸に転換され、反応液中に蓄積
される。生成したＬ−アミノ酸は通常の結晶化法、イオ
ン交換樹脂法その他公知の方法ｋ　４宜使用することに
より、容易に分離鞘製することができる。特に、高濃度
で反応を行なつた場合には、反応液の冷却、ｐＨＵ整に
よってＬ−アミノ酸を容易に結晶として得ることができ
る。

なお、得られたアミノ酸が目的とするし一アミノ酸であ
ることは、ロイコノストックメゼンテロイデスを用いた
バイオアッセイ法及び高速液体クロマトグラフィー、ア
ミノ酸分析計を用いて確認することができる。

〔作用〕

本発明のフルスロバクター　エスピー　ＤＰ−Ｂ　−１
００２は、後記試験例に示す如く５置換ヒダントイン及
びＮ−カルバモイルアミノ酸を０体、５体、ＤＬ体の如
何を問わず対応するそれぞれのし一アミノ酸に転換する
作用を有する。

〔発明の効果〕

本発明の新規微生物は紙上の如き能力を有するため、こ
れをＬ−アミノ酸の製造に用いれば、その生産性の飛開
的な向上を図ることができる。すなわち、 （１）従来、適当な微生物がなく使用し得ながったＤ−
Ｎ−カルバモイルアミノ酸をも対応するＬ−アミノ酸製
造の出発原料にできる。

（２）化学的に５置換ヒダントインを製造する際に副生
ずるＤＬ−Ｎ−カルバモイルアミノ酸を反応系から除去
する必要がないため、工業的に容易かつ安価に得られる
ＤＬ−５置換ヒダントインとＤＬ−Ｎ−カルバモイルア
ミノ酸の混合物から一段の反応で定量的にＬ−アミノ酸
を製造することができる。それ故、従来のＤＬ−５［換
ヒタ゛ントイン類を出発原料にするＬ−アミノ酸製造工
程トて必要であったＤＬ−５置換ヒダントインへのＤ−
Ｎ−カルバモイルアミノ酸の混入を防止する措置及び反
応終了後残存するＤ−Ｎ−力ルパモイルアミノ酸を分取
、ラセミ化するための煩雑な工程が全く不要となり、製
造工程が極めて単純化されると共に目的とするＬ−アミ
ノ酸を話収率で製造できるようになった。

（３１ＤＬ−Ｎ−カルバモイルアミノ酸の水溶性塩を原
料として固定化菌体カラムを用いて反応を行ない得るの
で、製造工程の連続化が容易である。

（４）　　アルスロバクタ−エスピー　ＤＰ−Ｂ−１０
０２株は活性が高いので、沼津活性を高めるための活性
のインデューサーとなる物質を培養液に添加する必要が
全く不要な変異株であるため、これを用いた不発明方法
は従来法に比べ培養コストを大幅に低減し得ると共に培
養管理を簡略化でき工業的に非常に有利である。

〔実施例〕

次に参考例、夾乃例及び試験例を挙げて説明する。

参考例１ アルスロバクター　エスピー　〇　Ｐ　−Ｂ−１００１
（微工研菌寄第８１９０号）株は、栃木県日光市の土壌
から以下の方法でスクリーニングを行なった悟果単敲さ
れた。

土壌的０．５１を滅菌水５Ｍに懸濁し希釈した後トリプ
トソイ球天平板上に塗布し、２８°Ｃにて培養を行って
菌を得た。このようにして得た菌をグルコースｔｏ？／
−ｇ、酵母エキス５？／形、ポリペプトン５　Ｐ／、８
、肉エキス２蝕先、Ｒ４ｇＳＯ４゜７搗０　０．４５Ｌ
／−６、Ｆｅ５０．　・７Ｈ，００，０１？　／　Ｊ、
ＭｎＳＯ４・５）（ｔＯ０，０１？　／−１３から成り
ｐＨ１ニア、０に調節した液体培地に接種し、２８℃２
日間振とう培養を行ない菌体を得た。菌体は１０Ｌ？／
、！３のＮ−力ルバモイルアミノ酸（例えばＤＬ−Ｎ−
カルバモイルトリプトファン）又は５謹換ヒダントイ／
（例えばＤＬ−５−インドリルメチルヒダン′トイ／）
を含む０．２Ｍアンモニウム緩衝液（ｐＨ９，０）に添
加し、３７℃に２４時間保温した。保温後緩衝液上消中
のＬ−アミノ酸をロイコノストック・メゼンテロイデス
Ｐ　−６０１（用いたバイオアッセイ法及びノリ力ゲル
グレートによる薄層クロマトグラフィーにより測定した
所、特に高いアミノ酸生成活性を与えた菌株として本面
が得られた。

実施例１ アルスロバクタ−エスピー　Ｄ　Ｐ　−Ｂ−１００２株
は、参考例１で得た同Ｄ　Ｐ　−Ｂ　−１００１株の変
異株で以下の方法により単離されたものでちる。

１）　Ｐ　−Ｂ　−１００１株を参考例１で用いたもの
と同じ液体培地に１η／　ｗ＋ｌのｐ−ジメチルアミン
ベンゼンジアゾスルホン酸ナトリウムを加えた液体培地
にて培養した後トリブトンイ寒天平板上に塗布し、２８
℃にて培養を行って菌を得、参考例１と同様の方法によ
りアミノ酸生成活性を測定し、非常に高いアミノ酸生成
活性を与えた変異株として本面を得た。

試験例１ ＋＋）種菌の培養、菌体作成 参考例１で用いたものと同じ液体培地を５００ｍ１容三
角フラスコに２００ｍ１分注し、滅菌後実施例１で得た
アルスロバクタ−エスピー　ＤＰ−Ｂ　−１００２株を
接種し、２８℃で７２時間振とり培養した。培養液から
１８０００Ｇ　１０分間の遠心により菌体を集め、生理
食塩水により１回洗浄し、湿菌体を得、酵素反応に用い
る洗浄菌体とした。

（２）酵素反応 （１）で得られた洗浄菌体１０Ｌ？を精製水５Ｑｍに懸
ｉ蜀したものに、０．８　Ｍ　ＮＨ，０Ｈ−ＮＨ，ＣＡ
　（ｐＨ８，０１４ｍＭ　Ｆｅ５０．　・７Ｈ，Ｏ及び
４昂ｉ　Ｍｎ５Ｏ，−５Ｈ，Ｏナル組成の緩衝望２５ｍ
ｊを加え、更に原料として■Ｄ−Ｎ−カルバモイルフェ
ニルアラニン２００５’／β、■Ｄ−Ｎ−力ルバモイル
３−０−メチルドーパ２０ｚ／β、■Ｄ−Ｎ−カルバモ
イルチロシン２　ＯＬ？／４３、■Ｄ−Ｎ−カルパモイ
ルトリプトファ：’　２０　Ｐ／Ｊ３、■Ｄ−Ｎ−カル
バモイルメチオニ／２０Ｐ、／Ｊ：３、■Ｄ−Ｎ−カル
ノ（モイルノくリン２０　’？／１３、■Ｄ−Ｎ−カル
バモイルロイシン２０Ｐ／１３の各ナトリウム項溶液２
５ｍ１ｆＫ：加え、Ｎ、気流を吹き込み、３７℃に４８
時間保温した。

反応終了後、菌倶を遠心分離に：り除き、遠心上清〒の
アミノ酸を日立６３８−５０型、反応型液体クロマトグ
ラフィー（カラム：日立ゲルＸ２６１９．４ｐ１φ×１
５０正、溶出液：クエン酸ナトリウム緩’ＬｆＬ０．４
ｍ１１分、アッセイ；ニンヒドリ／反応５７０ｎｍ）及
びロイコノストックメゼンテコイデスを用いたバイオア
ッセイ法にて定量したところ、次の第１表に示す量のＬ
−アミノ酸が蓄積していた。

第１表 ＊アミノ酸分析計による測定値。

試験例２ 試験例１の（１）と同様にして得たＤ　Ｐ　−Ｂ　−１
００２株の洗浄菌体１０？を水ｓｏｒ、ｔＫ懸濁したも
のに１０、４　Ｍ　ＮＨ４ｆＪ−ＮＨ，ＯＨ（ｐＨ９，
Ｏｌ　、　２　ｍＭ　Ｆｅ５０゜・７Ｈ，Ｏ１２ｍＭ　
ＭｎＳＯ４−ｓＨ，Ｏなる組成の緩衝液５０ｍ１を加え
１００　ｍｌとした。これに■ＤＬ、−５−ベンンルヒ
タ゛ントイ／１０ｚ１■ＤＬ−５−（３’−メトキシ４
′−ヒドロキシベンジル４）ヒダントイン１０？、＠Ｄ
Ｌ−５＋４’ヒドロキシベンジル）ヒダントイン１？、
Ｑ　Ｄ　Ｌ　−５−インドリルメチルヒダントイン１ｙ
−１ＱＤＬ−５−メチルメルカプトエチルヒダントイ／
１７．ＣＩＤＩ、−５−イングロビルヒダ／トイン１？
、θＤＬ−５−インブチルヒダントイン１？をそれぞれ
懸濁し、Ｎ、気流を吹き込み、３７℃に４８時間保温し
た。

反応終了後、菌体を遠心分離により除き、遠心上演中の
アミノ酸を試験例１と同様にして定量したところ、次の
第２表に示す量のし一アミノ酸が蓄積していた。

第２表 ＊　第１衣と同じ。

試験例３ グルコース１０９−／１３、ツー／ステイープリカー　
２０　Ｐ／Ｅを含有する培地をｐＨ７，０に調整し、３
に容ミニジャーファーメンタ−に２．８分注し、アルス
ロバクタ−エスピー　ＤＰ−Ｂ−１００２株を接種し、
１６／分の通気、７００　ｒｐｍの攪拌下、２８°Ｃで
３６時間培養した。培養終了後、遠心によυ菌体を集め
、７８Ｐの湿菌体を得た。

上記湿菌体を８００　ｒｎ２の精製水に懸濁し、１．２
ｍＭの酢酸コバルト溶ｉ４００ｄと８０　’？／、１．
のＤＬ−Ｎ−カルバモイルフェニルアラニン４０Ｏｙｒ
ｌを加え、Ｎ、気流吹き込み下、ｐＨを塩酸とアンモニ
アで６．７に調節しつつ３７℃に２２時間保温した。反
応終了後、菌体は遠心により回収し、再び上記反応液作
成方法に従い新たな反応に用いた。

以上の操作を７回にわたって行った結果、下表に記す量
のＬ−フェニルアラニンを含む上清液が得られた。

以下余白 第３表 試験例４ グルコース１０　Ｐ／Ｕ、ニー／ステイブリカー２０？
／ぶ、ＤＬ−５−インドリルメチルヒダ／トイン１．５
５’／ぷを含有するｐＨ７，０の培地を３Ｌ容ミニジャ
ーファーメンタ−に２ぷ仕込み、アルスロバクタ−エス
ピー　Ｄ　Ｐ　−Ｂ　−１００１株を接種し、別にグル
コース１０　Ｐ／１３、コーンステイープリカー２０５
’／Ａ’ｃ含有するｐ）Ｉ７．Ｏの培地に、同様にアル
スロバクタ−エスピー　ＤＰ−８−１００２株を接種し
た。そして、各々のミニジャーファーメンタ−を１６／
分の通気、７００ｒｐｍの撹拌のもと、２８°Ｃ１４０
時間の培養を行った。培養ｇ、５０　ｍｌから遠心によ
り菌体を集め、生理食塩水で洗浄し、各々の洗浄薄体を
得た。

反応は、５０’？／ＡＤＬ７５ペンジルヒダントイ／、
１　ｍＭ　Ｆｅ５０．　Ｈ７Ｈ２Ｑ、１　ｍＮｉ　Ｍｎ
５Ｏ＜　、５Ｈ２０，０、２Ｍ　ＮＨ，Ｃ６−ＮＨ，Ｏ
Ｈ（ｐＨ９，０＋　’ｃ金含有る反応ｆＬ１０　ｍｔ及
びｓ　ｏ　’ｉｔ／ＡＤ−Ｎ−カルバモイルフニニルア
ラニ／、１　ｍＭ　Ｆｅ５０．・７Ｈ２０、ｌ　ｍＭ　
Ｍｎ５Ｏ。

・５鴇Ｏ１０，２Ｎｉ　ｈ孔Ｃ石−さ孔０）（（ｐＨ８
，０＋を含有する反応液１０ゴの２種類の反応液を調製
し、ＤＰ−Ｂ　−１００１株又はＤ　Ｐ　−Ｂ　−１０
０２株の上記洗浄菌体を各々等量ずつ加えて密栓をし、
３７°Ｃに２４時間保温して行った。

反応終了後、遠心により菌体を除き、上？′ｉ′を液を
得、含まれるし一フェニルアラニンを定量した。

その結果を第４表に示す。

第４表から、１）Ｐ−Ｂ−１００２株の万が活性が昼い
ことが判る。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、アルスロバクター属に属し、５置換ヒダントイン及
   びＮ−カルバモイルアミノ酸を対応するそれぞれのＬ−
   アミノ酸に転換する能力を有する新菌種アルスロバクタ
   ーエスピーＤＰ− Ｂ−１００２（微工研菌寄第８１９１号）。