JPS62263197A - Ｎ−保護−Ｌ−α−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンの製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はＮ−保１−Ｌ−α−アスパルチル−し一フェニ
ルアラニンの製法に関する。更に詳しく応させる際、ア
ルカリ金属あるいはアルカリ土類金属の無機酸塩や有機
酸塩を存在させることを特徴とするＮ−保護−Ｌ−α−
アスパルチルーＬ−フェニルアラニンの製法に関する。

Ｌ−α−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエ
ステルは優れた甘味剤として知られており、その製造法
も種々しられている０例えばＮ−保護−Ｌ−α−アスパ
ルチル−し−フェニルアラニンは公知の技術により容易
にＬ−α−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチル
エステルに導くことができることが知られている（特開
昭５３二８２７５２、特開昭５９−２１９２５８）、従
ってＮ−保護−Ｌ−α−アスパルチル−し−フェニルア
ラニンを高収率、簡便な方法でえることが可能であれば
Ｌ−α−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエ
ステルの工業的な製法として極めて有利である。

従来Ｎ−保１−Ｌ−α−アスパルチル−し−フェニルア
ラニンの製法としては、Ｌ−フェニルア　。

ラニンをＮ−保護−Ｌ−α−アスパラギン酸無水物とを
反応させる方法（特公昭５５−２６１３３）λく知られ
ているが、これは反応を有機溶媒であり腐食性の強い酢
酸中で行なうため、溶媒の分離回収装置の必要なこと、
装置材質の腐食の面から工業的な製法としては必ずしも
満足なものとは言えなかった。

さきに本発明者らは、かかる欠点を有しないＮ−保４９
−Ｌ−α−アスパルチル−し一フェニルアラニンの製法
を開発したが（特願昭６Ｏ−１４４１３７）収率の面で
十分といえるものでなかった。即ちＮ−保護−Ｌ−アス
パラギン酸無水物とＬ−フェニルアラニンとの反応では
目的とするＮ−保護−Ｌ−α−アスパルチル−し−フェ
ニルアラニンの他にＮ−保護−Ｌ−β−アスパルチル−
し−フェニルアラニンが副生ずるが、上記方法では、後
者の生成を抑えると言う点では不十分であった。そこで
、本発明者らはＮ−保１１１−Ｌ−β−アスパルチル−
し一フェニルアラニンの生成を抑えＮ−保護−Ｌ−α−
アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンとＮ−保護−Ｌ−
β−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンの生成比（以
下、α／βと略記する。）を向上させる方法に関して鋭
意検討の結果、驚くべきことにＮ−保護−Ｌ−アスパラ
ギン酸無水物　。

とＬ−フェニルアラニンを水性媒体中反応させる際、ア
ルカリ金属あるいはアルカリ土類金属の無機酸塩や有機
酸塩を存在させることにより、Ｎ−保護−ｔ、、−β−
アスパルチル−し−フェニルアラ見いだし、本発明を完
゛成させるに至った。

本発明方法に於いて用いられるＮ−保護−Ｌ−アスパラ
ギン酸無水物の保護基としては、通常のペプチド合成に
使用される保護基、例えば、ホルミル基、アセチル基、
ベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル
基、１−メチル−２−アセチルビニル基、アセトアセチ
ル基が用いられ、中でもホルミル基が好適に用いられる
。

本発明に於いて用いられるアルカリ金属塩あるいはアル
カリ土類金属塩としては塩化ナトリウム、塩化カリウム
、塩化カルシウム等の無機酸塩及び酢酸ナトリウム、酢
酸カリウム等の有機酸塩が好適に用いられる。又、その
使用量については特に制限はないがＮ−保護−Ｌ−アス
パラギン酸無水物あるいはＬ−フェニルアラニンに対し
て０．５〜２０倍モル、より好ましくは１〜１０倍モル
の範囲で使用することができる。

本発明に於いて用いられる溶媒としては水及び水と有機
媒体との混合物が使用できる。このような有機溶媒とし
ては反応物と不当に反応しない溶媒なら特に制限されず
、メタノール、エタノール等のアルコール類、酢酸エチ
ル、酢酸メチル等のエステル類、アセトン、メチルエチ
ルケトン等のケトン類、テトラヒドロフラン、ジオキサ
ン等のエーテル類、ジメチルホルムアミド、ジアセチル
アミド等のアミド類が挙げられる。

反応温度としては一３０〜８０℃より好ましくは一２０
〜６０℃が好適に用いられる。

反応時間には特に制限はないが、Ｎ−保１−Ｌ−α−ア
スパラギン酸無水物とＬ−フェニルアラニン塩との反応
速度は大きく、長時間行なう必要はなく通常は試薬の混
合が完了して２時間以内に反応は完了する。

用いられるＮ−保護−Ｌ−アスパラギン酸無水物とＬ−
フェニルアラニンのモル比は０．５〜３．０゜より好ま
しくは０．８〜２．０の範囲で使用することができる。

又、反応液のｐＨは７以上の範囲で任意に選択する事が
出来る。

本発明に於いては、Ｎ−保１ｌ−Ｌ−α−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニンは塩の形で得られ、塩酸、硫酸
等の酸で中和した後、晶析により、結晶のＮ−保護−Ｌ
−α−アスパルチル−し−フェニルアラニンを得ること
が出来るが、一方、単離する事なく溶液状態のままＬ−
α−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステ
ルへの変換反応に供することも出来る。

以下実施例に於いて詳細に説明するが、本発明の実施の
態様はこれに限定されないことは勿論である。

実施例１ Ｌ−フェニルアラニンナトリウム塩ｌ水和物１２．４　
ｇ　（０，０６０モル）および塩化ナトリウム１７．６
　ｇ　（０，３００モル）を水６５ＩＩ１１に溶解し、
−２０℃に冷却した。同温度で攪拌下にＮ−ホルミルー
Ｌ−アスパラギン酸無水物９．５　ｇ　（０，０６６モ
ル）を１時間かけて添加した。その間、反応液のｐＨを
４ＮＮａＯＨ水溶液により１２．０〜１２．５の間に保
った。

その後、反応液中のＮ−ホルミル−し−α−アスパルチ
ル−し−フェニルアラニン（以下、Ｆｏｒ−α−ＡＰと
略記する。）をＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフ４ｖ
：Ｈｉｇｈ　Ｐｅｒｆｏｒｎ＋ａｎｃｅ　Ｌｉｑｕｉｄ
Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）により定量したところ
、Ｌ−フェニルアラニンナトリウム塩１水和物に対し７
３．５％の収率で生成していた。他にＮ−ホルミル−Ｌ
−β−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（以下、Ｆ
ｏｒ−β−ＡＰと略記する。）が２４．３％副生じてい
た。

実施例２ Ｌ−フェニルアラニン９．９　ｇ　（０，０６０モル）
及びＮａＯＨ２，４ｇ　（０，０６０モル）を水６５ｍ
１に溶解した。塩化ナトリウム１７．６　ｇ　（０，３
００モル）を添加し、−２０℃に冷却した後、攪拌下に
Ｎ−ホルミル−し−アスパラギン酸無水物９．５ｇ（０
，０６６モル）を１時間かけて添加した。その間４ＮＮ
ａＯＩＩ水溶液を添加して、反応液のｐＨを１２．０〜
１２．５の間に保った。

その後、反応液中のＦｏｒ−α−ＡＰをＨＰＬＣにより
定量したところ、Ｌ−フェニルアラニンに対し、７３．
５％の収率で生成していた。一方、Ｆｏｒ−β−ＡＰは
２４．５％で副生していた。

実施例３ Ｌ−フェニルアラニン９．９ｇ（０，０６０モル）を水
５０ＩＩＩｌに懸濁し、４ＮＮａＯ１１水溶液でｐＨを
１２．０に調製した。塩化ナトリウム１７．６　ｇ（０
，３００モル）を添加し、−２０℃に冷却した後、攪拌
下にＮ−ホルミル−Ｌ−アスパラギン酸無水物９．９　
ｇ　（０，０６９モル）を１時間かけて添加した。その
間４ＮＮａＯＨ水溶液を添加して、反応液のｐＨを１２
．０〜１２．５に保った。

その後、反応液中のＦｏｒ−α−ＡＰをＨＰＬＣにより
定量したところ、Ｌ−フェニルアラニンに対し、７３．
２％の収率で生成していた。一方、Ｆｏｒ−β−ＡＰは
２４．４％で副生じていた。

実施例４ Ｌ−フェニルアラニン９．９　ｇ　（０，０６０モル）
を水８０ｍ１に懸濁した後、塩化カリウム２２．４ｇ（
０，３００モル）を加え、４ＮＮａＯＨでｐｎ　＝　１
２．０に調整した。−１Ｏ℃に冷却し、攪拌下にＮ−ホ
ルミル−し−アスパラギン酸無水物９．５　ｇ　（０，
０６６モル）を４０分かけて添加した。その間、４ＮＮ
ａＯ１１を添加して、反応液のｐＨを１２．０〜１２．
５の間に保った。

その後、反応液中のＦｏｒ−α−ＡＰをＨＰＬＣにより
定量したところ、Ｌ−フェニルアラニンに対し、７４．
４％の収率で生成していた。一方、Ｆｏｒ−β−ＡＰは
２３．９％副生していた。

実施例５ Ｌ−フェニルアラニン９．９　ｇ　（０，０６０モル）
を水８０ａ＋１に懸濁した後、酢酸ナトリウム２４．６
ｇ（０，３００モル）を加え、４ＮＮａＯＨでｐＨ＝１
２．０に調整した。５℃に冷却し、撹拌下にＮ−ホルミ
ル−し−アスパラギン酸無水物９．５　ｇ　（０，０６
６モル）を１時間かけて添加した。その間、４ＮＮａＯ
Ｈを添加して、反応液のｐＨを１２．０〜１２．５の間
に保った・ その後、反応液中のＦｏｒ−α−ＡＰをＨＰＬＣにより
定量したところ、Ｌ−フェニルアラニンに対し、７１．
３％の収率で生成していた。一方、Ｆｏｒ−β−ＡＰは
２６．４％副生じていた。

実施例６ Ｌ−フェニルアラニン９．９　ｇ　（０，０６０モル）
を水５０１１Ｉに懸濁した後、塩化ナトリウム１７．６
ｇ（０，３００モル）を加え、４ＮＮａＯ１１でｐＦｌ
　＝　１０．０に調整した。−２０℃に冷却し、攪拌下
にＮ−ホルミル−し−アスパラギン酸無水物９．５　ｇ
　（０，０６６モル）を１時間かけて添加した。その間
、４Ｎ　ＮａＯＨを添加して、反応液のｐＨを１０．０
〜１Ｏ０５の間に保った・ その後、反応液中のＦｏｒ　−ａ−ＡＰをＨＰＬＣによ
り定量したところ、Ｌ−フェニルアラニンに対し、７１
．５％の収率で生成していた。一方、Ｆｏｒ−β−ＡＰ
は２６．３％副生じていた。

実施例７ Ｌ−フェニルアラニン９．９ｇ（０，０６０モル）を水
５０ｍ１に懸濁した後、塩化カリウム１３．４（０，０
１８モル）を加え、４　Ｎ　Ｎａ、Ｏｔｌ　”ｉ？ｐｔ
ｌ　＝　１２．０に調整した。−１５℃に冷却し、攪拌
下にＮ−ホルミル−し−アスパラギン酸無水物９．５　
ｇ　（０，０６６モル）を１時間かけて添加した。その
間、４Ｎ　ＮａＯＨを添加して、反応液のｐＨｆｃｌ　
２．０〜１２．５の間に保った。

その後、反応液中のＦｏｒ−α−ＡＰをＨＰＬＣにより
定量したところ、Ｌ−フェニルアラニンに対し、７１．
９％の収率で生成していた。一方、Ｆｏｒ−β−ＡＰは
２５．２％副生じていた。

実施例８ Ｌ−フェニルアラニン９．９　ｇ　（０，０６０モル）
を水６５＋ｊ！に懸濁した後、塩化ナトリウム１７．′
６ｇ（０，３００モル）を加え、４Ｎ　ＮａＯＨテｐＨ
＝１２．０に調整した。−２０℃に冷却し、撹拌下にＮ
−ベンジルオキシカルボニル−し−アスパラギン酸無水
物９．５ｇ（０，０６６モル）を１時間かけて添加した
。その間、４ＮＮａＯＨを添加して、反応液のｐＨを１
２．０−１２．５の間に保った。

その後、反応液中のＮ−ベンジルオキシカルボニル−し
−α−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンヲＨＰ　Ｌ
　Ｃにより定量したところ、Ｌ−フェニルアラニンに対
し、７２．６％の収率で生成していた。一方、Ｎ−ペン
ジルオシキカルボニルーし一β−アスパルチルーし一フ
ェニルアラニンは２４．５％副生じていた。

実施例９ Ｌ−フェニルアラニン９．９　ｇ　（０，０６０モル）
を水６５ＩＩ１１に懸濁した後、塩化ナトリウム１７６
６ｇ　（０，３００モル）を加え、４　Ｎ　ＮａＯＨテ
ｐＨ＝　１２．０に調整した。−２０℃に冷却し、攪拌
下にＮ−アセチル−し−アスパラギン酸無水物９．５　
ｇ　（０，０６６モル）を１時間かけて添加した。その
間、４Ｎ　ＮａＯＨを添加して、反応液のｐＨを１２．
０〜１２．５の間に保った。

その後、反応液中のＮ−アセチル−Ｌ−α−アスパルチ
ル−Ｌ−フェニルアラニンをＨＰＬＣにより定量したと
ころ、Ｌ−フェニルアラニンニ対し、６３．２％の収率
で生成していた。一方、Ｎ−アセチル−β−アスパルチ
ル−し−フェニルアラニンは２１．３％副生していた。

実施例１Ｏ Ｌ−フェニルアラニン９．９　ｇ　（０，０６０モル）
を水５０ＩＩｌ、メタノール１５ｎ１１の混合溶媒に懸
濁した後、塩化ナトリウム１７．６　ｇ　（０，３００
モル）を加え、４ＮＮａＯＨでｐｌ＋＝　１２．０に調
整した。

−２０℃に冷却し、攪拌下にＮ−ホルミル−し−アスパ
ラギン酸無水物９．５　ｇ　（０，０６６モル）を１時
間かけて添加した。その間、４ＮＮａＯＨを添加して、
反応液のｐＨを１２．０−１２．５の間に保った。

その後、反応液中のＦｏｒ−α−ＡＰをＨＰＬＣにより
定量したところ、Ｌ−フェニルアラニンに比較例Ｉ Ｌ−フェニルアラニンナトリウム塩・ｌ水和物１２．４
　ｇ　（０，０６０モル）を水６５ＩＩ１１に溶解し、
５℃に冷却した。同温度で攪拌下にＮ−ホルミル−Ｌ−
アスパラギン酸無水物９．５　ｇ　（０，０６６モル）
を１時間かけて添加した。その間反応液のｐＨを４ＮＮ
ａＯＨ水溶液により１２．０−１２．５の間に保った。

その後反応液中のＮ−ホルミル−し−α−アスパルチル
−し−フェニルアラニン（以下、Ｆｏｒ−α−ＡＰと略
記する）をＨＰ　Ｌ　Ｃ（Ｈｉｇｈ　Ｐｅｒｆｏｒ−ｍ
ａｎｃｅ　Ｌｉｑｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ
ｙ　ｓ高速液体クロマトグラフィー）により定量したと
ころ、Ｌ−フェニルアラニンナトリウム塩・１水和物に
対し６８．２％の収率で生成していた。他にＮ−ホルミ
ル−Ｌ−β−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンが３
０．０％等が副生じていた。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. Ｎ−保護したＬ−アスパラギン酸無水物とＬ−フェニル
   アラニンとを、水性媒体中ｐＨ７以上の領域で反応させ
   る際、アルカリ金属あるいはアルカリ土類金属の無機酸
   塩や有機酸塩を存在させることを特徴とするＮ−保護−
   Ｌ−α−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンの製法。