JPS62253389A

JPS62253389A - Ｌ−２−アミノ−４−（ヒドロキシメチルホスフイニル）−酪酸の製造方法

Info

Publication number: JPS62253389A
Application number: JP8104986A
Authority: JP
Inventors: Satoshi Imai; 敏今井; Toshinori Saito; 斉藤　敏則; Hiroshi Ogawa; 弘小川; Hideaki Takebe; 英日武部; Atsuyuki Sato; 篤行佐藤; Yasuaki Ogawa; 小川　安昭; Shunzo Fukatsu; 深津　俊三; Akira Okada; 明岡田
Original assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Current assignee: Meiji Seika Kaisha Ltd
Priority date: 1986-04-10
Filing date: 1986-04-10
Publication date: 1987-11-05
Also published as: JPH0561913B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［発明の目的］（産業上の利用分野）本発明は、除草活性を有し除草剤として有用なＬ−２−
アミノ−４−（ヒドロキシメチルホスフィニル）−酪酸
（以下Ｌ−ＡＭＦＢと称する）の製造方法の改良に関す
る。

（従来の技術）Ｌ−ＡＭＦＢの製造法としては、Ｌ− ＡＭＰＢを構成成分として含み、除草活性を有する５Ｆ
−１２９３物質（特公昭５１−６３９号公報参照）すな
わちＬ−２−アミノ−４−（ヒドロキシメチルホスフィ
ニル）−ブチリル−Ｌ−７ラニルーＬ−アラニンを酸分
解する方法（特開昭４８−８５５３８号公報参照）ある
いは微生物酵素で分解する方法（特開昭４９−３１８９
０号公報参照）のほか化学的合成法（特開昭４８−９１
０１９号および特開昭５４−８４５２９号公報参照）に
よりラセミ体を得、これを微生物酵素で光学分割する方
法等が知られている。更に近年、本発明者らによってス
トレプトミセス属に属するＬ−ＡＭＦＢ生産菌の培養液
から直接Ｌ−ＡＭＦＢを採取する方法が報告されている
（特開昭５７−４７４８５号公報参照）。

（発明が解決しようとする問題点）Ｌ−ＡＭＦＢのような除草活性を有する物質を除草剤と
して開発、商品化してゆくためには、その安全性、効力
面での開発研究とあわせ、低価格でしかも大量に生産す
るための製造法の改良研究が不可欠である０合成法で製
造されたＡＭＰＢにはＤ−ＡＭＦＢが含まれるが、Ｄ−
ＡＭＰＢには殆ど除草活性はなく、また非天然型である
事から土壌細菌による分解が遅く環境汚染の原因となる
場合がありうる。しかるに微生物による製造法では天然
型であるＬ−ＡＭＦＢのみを得ることが出来る。

天然型であるＬ−ＡＭＦＢは土壌細菌により容易に分解
代謝される点で環境汚染のない理想的な除草剤と考えら
れる。

微生物の生産する除草剤でこれまでに実用化されたのは
前述した５Ｆ−１２９３物質（商品名バービーエース）
唯一つであるが、これは微生物の生産する二次代謝物を
収量良く多量に製造することが困難なことも理由の一つ
である。

本発明は、以上のような問題点に着目してＬ−ＡＭＦＢ
の製造法の改良方法を確立し、これを解決しようとする
ものである。

［発明の構成コ（問題点を解決するための手段）本発明者らは、Ｌ−ＡＭＦＢの製造法の改良を目的とし
てＬ−ＡＭＰＢ生産菌を用いたＬ−ＡＭＰＢ生産培養時
に各種有機リン化合物の添加を行い、Ｌ−ＡＭＦＢ生産
量との関係を調べたところ、３−（ヒドロキシホスフィ
ニル）−２−オキンプロピオン酸、２−アミノ−３−（
ヒドロキシホスフィニル）−フロピオン酸、４−（ヒド
ロキシホスフィニル）−２−オキソ酪酸、２−アミノ−
４−（ヒドロキシホスフィニル）−２−オキソ酪酸、２
−ホスフィノメチルリンゴ鼓などの物質添加により大幅
なＬ−ＡＭＦＢの生産性向上が一認められる事を見いだ
した。これら有機リン化合物は公知の物質で、その製造
法や物理化学的性状については、特開昭５８−４７９３
、特開昭５８−１４６５９１、特開昭５８−２１９１９
１、特開昭５８−２１９１９２、特開昭５６−９２８９
７、特開昭６１−２１０９０の各号公報に記載されてい
る。これら有機リン化合物はこれまで５Ｆ−１２９３物
質の生産を高める物質として注目されていたが、Ｌ−Ａ
ＭＦＢの生産時においても著しい生産向上効果がある事
を見い出し本発明を完成した。

すなわち、本発明は、Ｌ−ＡＭＦＢ培養生産時にＬ−Ａ
ＭＦＢの生産を高める各種有機リン化合物を添加するこ
とにより、Ｌ−ＡＭＰＨの増収をはかるものである。

以下に、本発明を更に詳細に説明する。

Ｌ−ＡＭＦＢの増収法に用いる本発明の製造方法におい
て使用される生産菌としては、Ｌ−ＡＭＦＢを生産する
任意の放線菌株が用いられる。例えば、ストレプトミセ
ス・ハイグロスコピクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　
ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）　Ｓ　Ｆ　−１２９３株
（ＦＥＲＭ−ＢＰ１３０．ＡＴＣＣ−２１７０５）があ
げられる、この５Ｆ−１２９３株の菌学的性状は、特公
昭５１−６３９号公報に明記されている。また、５Ｆ−
１２９３株は、他のストレプトミセス属の菌株の場合に
見られるようにその性状が変化しやすく、例えば、紫外
線、Ｘ＠、薬品等を用いる人工的変異手段で容易に変異
することがあるが、このような変異株であっても、Ｌ−
ＡＭＦＢの生産能を有する、あるいは本発明の各種有機
リン化合物の添加によりＬ−ＡＭＦＢの生産能を示す放
線菌であれば、すべて本発明に使用することができる。

本発明の製造方法においては、５Ｆ−１２９３株を通常
の微生物が利用しうる栄養物を含有する培地で培養する
。栄養源としては、従来ストレプトミセス属の菌の培養
に利用されている公知のものが使用される０例えば、炭
素源としては、グルコース、澱粉、グリセリン、シュー
クロス、水飴、糖蜜等があげられる。これらは単独ある
いは組み合わせて用いられる。また、窒素源としては、
大豆粉、小麦胚芽、肉エキス、ペプトン、乾燥酵母、コ
ーンステイープリカー、硫酸アンモニウム、硝酩アンモ
ニウム等が単独あるいは組み合わせて用いられる。その
他、必要に応じて炭酸カルシウム、食塩、塩化カリウム
、燐酸塩等の無機塩類を添加することができる。

上述したようなＬ−ＡＭＦＢ生産培生産培養石有機リン
化合物を添加して、Ｌ−ＡＭＦＢの増収をはかることが
できる。

添加方法は、一括して行うよりも分割して行う方がより
効果的である。また、各種有機リン化合物を添加する場
合には、通常のＬ−ＡＭＦＢ生産培生産培養石濃度のう
すい培地を使用する事ができ、製造コストの低減に寄与
するのできわめて有利である。この有機リン化合物の使
用量は臨界的ではないが、通常、生産培地に対し、約０
．１〜２０＋ａｇ／ｄである。使用量がこの範囲を外れ
ると本発明の効果である経済的な面での十分な増収効果
は望みにくい、好ましくは０．５〜５ｆｆｉｇ／−であ
る。培養法としては、液体培養法、特に深部培養法が最
も適している。培養は、好気的条件下で行われ培養に適
した温度は２５〜３５℃であるが、多くの場合２８〜３
２℃付近で培養する。培養日数は、通常のＬ−ＡＭＰＢ
生産培養より短くすることができ、４〜６日が適当であ
る。その他培養法自体の詳細についてはＬ−ＡＭＦＢの
製造法である前記特開昭５７−４７４８５号公報を参照
されたい。

培養液中のＬ−ＡＭＦＢの定量には、アミノ酸分析装置
を用いて行う、すなわち、培養液をｐ）Ｉ２．０に調整
後遠心分離（３００Ｏｒｐｍ、１５分）、あるいは濾過
により上清を得、アミノ酸分析器（アトー社製ＭＬＣ−
７０３型、保持時間１２分）により分離定量を行う。

本発明により得られた培養液からのＬ−ＡＭＦＢの精製
法については、通常のＬ−ＡＭＦＢ培養液からの精製法
と同一であり、詳細については前記特開昭５７−４７４
８５号公報を参照されたい。

以下、実施例により本発明を更に詳しくは説明するが、
本発明はこれに限定されるものではない。

（実施例）支土主」５Ｆ−１２９３株の１変異株を前培養培地（可溶性澱粉
２．０％、ポリペプトン１．０％、肉エキス０．３％、
リン醜水素二カリウム０．０５％、ｐＨ７、０）　　１
０ｗＪに接種した。これを２８℃で２４時間振盪培養し
さらに同培地８０−に継代して２８℃で２４時間振盪培
養したものを種母として３％の割合でグルコース７．０
％、小麦胚芽３．９％、サングレイン２．５％、リン酸
二水素−カリウム０．３％、塩化コバルト０．０００１
％の組成からなる生産培地に植菌し、３０°Ｃで振盪培
養した。各種有機リン化合物を表に示した濃度と方法で
添加した。

培養液を酸性にした後、遠心分離して（３００Ｏｒｐｍ、１５分）上清を得、アミノ酸アナラ
イザー（アトー社製ＭＬＣ−７０３型、保持時間１２分
）によりＬ−ＡＭＦＢの生産量を測定した。

その結果を第１表に示す。

第一１−表第１表に示すように、各種有機リン化合物の添加効果は
明らかである。

！」１１ヱ実施例１と同じ前培養培地で培養したものをジャーファ
ーメンタ−の種母として２％の割合で実施例１と同じ生
産培地及びその７０％濃度培地に植菌した。ジャーファ
ーメンタ−（２文仕込量／３文、いわしや製ミニＪａｒ
）では３０℃通気攪拌培養を行い、各種有機リン化合物
の添加効果について実施例１と同様な方法で調べた。但
し、有機リン化合物は、ペリスタポンプとインターラッ
パーを用いて半連続的に添加した。その結果を第２表に
示す。

第２表に示すように、ジャーファーメンタ−においても
Ｌ−ＡＭＦＢ生産向上の効果は明らかである。

［発明の効果］実施例に示したようにＬ−ＡＭＦＢの生産培養時に各種
有機リン化合物を添加する事により、Ｌ−ＡＭＦＢの生
産量の増大をはかる事が可能である事が明らかとなった
。

各種有機リン化合物の添加培養の場合には、通常の生産
培養時よりもうすい浸度の培地を使用することができ原
材料費の低減に寄与するのできｂめて有利である。また
、通常のＬ−ＡＭＦＢの生産培養よりも生産のラップが
速いため培養時間の短縮が可能であり、タンク稼動に必
要な電力、蒸気などの用役費の低減をはかることができ
るとともに培養タンクあたりの年間生産量を増大するこ
とが可能である。このことは本発明が除草剤のように低
価格でしかも大量に生産する事が必要な物質の生産法と
して極めて有効な方法であることを示すものである。

Claims

【特許請求の範囲】１、Ｌ−２−アミノ−４−（ヒドロキシメチルホスフィ
ニル）−酪酸を生産する放射菌に有機リン化合物を添加
して培養することを特徴とするＬ−２−アミノ−４−（
ヒドロキシメチルホスフィニル）−酪酸の製造方法。２、有機リン化合物が、次式（１）： ▲数式、化学式、表等があります▼（１）で示される３−（ヒドロキシホスフィニル）−２−オキ
ソプロピオン酸、その塩、そのアミドまたはそのエステ
ル体である特許請求の範囲第１項記載の製造方法。３、有機リン化合物が、次式（２）： ▲数式、化学式、表等があります▼（２）（式中、Ｒは、水素または炭素数１〜５のアシルを表す
）で示される２−アミノ−３−（ヒドロキシホスフィニル
）−プロピオン酸もしくはそのＮ−アセチル体、それら
の塩、それらのアミドまたはそれらのエステル体である
特許請求の範囲第１項記載の製造方法。４、有機リン化合物が、次式（３）： ▲数式、化学式、表等があります▼（３）で示される４−（ヒドロキシホスフィニル）−２−オキ
ソ酪酸、その塩、そのアミドまたはそのエステル体であ
る特許請求の範囲第１項記載の製造方法。５、有機リン化合物が、次式（４）： ▲数式、化学式、表等があります▼（４）（式中、Ｒは、前記と同義である）で示される２−アミノ−４−（ヒドロキシホスフィニル
）−酪酸もしくはそのＮ−アセチル体、それらの塩、そ
れらのアミドまたはそれらのエステル体である特許請求
の範囲第１項記載の製造方法。６、有機リン化合物が、次式（５）： ▲数式、化学式、表等があります▼（５）で示される４−（ヒドロキシメチルホスフィニル）−２
−オキソ酪酸、その塩、そのアミドまたはそのエステル
体である特許請求の範囲第１項記載の製造方法。７、有機リン化合物が、次式（６）： ▲数式、化学式、表等があります▼（６）で示される２−ホスフィノメチルリンゴ酸、その塩、そ
のアミドまたはそのエステル体である特許請求の範囲第
１項記載の製造方法。