JPH0561913B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

［発明の目的］ （産業上の利用分野） 本発明は、除草活性を有し除草剤として有用な
Ｌ−２−アミノ−４−（ヒドロキシメチルホスフ
イニル）−酪酸（以下Ｌ−AMPBと称する）の製
造方法の改良に関する。 （従来の技術） Ｌ−AMPBの製造法としては、除草活性を有
するSF−1293物質（特公昭51−639号公報参照）
すなわちＬ−２−アミノ−４−（ヒドロキシメチ
ルホスフイニル）−ブチリル−Ｌ−アラニル−Ｌ
−アラニンを酸分解する方法（特開昭48−85538
号公報参照）あるいは微生物酵素で分解する方法
（特開昭49−31890号公報参照）のほか化学的合成
法（特開昭48−91019号および特開昭54−84529号
公報参照）によりラセミ体を得、これを微生物酵
素で光学分割する方法等が知られている。更に近
年、本発明者らによつてストレプトミセス属に属
するＬ−AMPB生産菌の培養液から直接Ｌ−
AMPBを採取する方法が報告されている（特開
昭57−47485号公報参照）。 （発明が解決しようとする問題点） Ｌ−AMPBのような除草活性を有する物質を
除草剤として開発、商品化してゆくためには、そ
の安全性、効力面での開発研究とあわせ、低価格
でしかも大量に生産するための製造法の改良研究
が不可欠である。合成法で製造されたAMPBに
はＤ−AMPBが含まれるが、Ｄ−AMPBは殆ど
除草活性はなく、また非天然型である事から土壌
細菌による分解が遅く環境汚染の原因となる場合
がありうる。しかるに微生物による製造法では天
然型であるＬ−AMPBのみを得ることが出来る。 天然型であるＬ−AMPBは土壌細菌により容
易に分解代謝される点で環境汚染のない理想的な
除草剤と考えられる。 微生物の生産する除草剤はこれまでに実用化さ
れたのは前述したSF−1293物質（商品名ハービ
ーエース）唯一であるが、これは微生物の生産す
る二次代謝物を収量良く多量に製造することが困
難なことも理由の一つである。 本発明は、以上のような問題点に着目してＬ−
AMPBの製造法の改良方法を確立し、これを解
決しようとするものである。 ［発明の構成］ （問題点を解決するための手段） 本発明者らは、Ｌ−AMPBの製造法の改良目
的としてＬ−AMPB生産菌を用いたＬ−AMPB
生産培養時に各種有機リン化合物を添加した培地
に培養Ｌ−AMPB生産量との関係を調べたとこ
ろ、３−（ヒドロキシホスフイニル）−２−オキソ
プロピオン酸、２−アミノ−３−（ヒドロキシホ
スフイニル）−プロピオン酸、４−（ヒドロキシホ
スフイニル）−２−オキソ酪酸、２−アミノ−４
−（ヒドロキシホスフイニル）−２−オキソ酪酸、
２−ホスフイノメチルリンゴ酸などの物質添加に
より大幅なＬ−AMPBの生産性向上が認められ
る事を見いだした。これら有機リン化合物は公知
の物質で、その製造法や物理化学的性状について
は、特開昭58−4793、特開昭58−146591、特開昭
58−219191、特開昭58−219192、特開昭56−
92897、特開昭61−21090の各号公報に記載されて
いる。これら有機リン化合物はこれまでSF−
1293物質の生産を高める物質として注目されてい
たが、Ｌ−AMPBの生産時においても著しい生
産向上効果がある事を見い出し本発明を完成し
た。 すなわち、本発明は、Ｌ−AMPB培養生産時
にＬ−AMPBの生産を高める各種有機リン化合
物を添加することにより、Ｌ−AMPBの増収を
はかるものである。 以下に、本発明を更に詳細に説明する。 Ｌ−AMPBの増収法に用いる本発明の製造方
法において使用される生産菌としては、Ｌ−
AMPBを生産する任意の放線菌株が用いられる。
例えば、ストレプトミセス・ハイグロスコピクス
（Streptomyces hygroscopicus）SF−1293株
（FERM−BP130.ATCC−21705）があげられる。
このSF−1293株の菌学的性状は、特公昭51−639
号公報に明記されている。また、SF−1293株は、
他のストレプトミセス属の菌株の場合に見られる
ようにその性状が変化しやすく、例えば、紫外
線、Ｘ線、薬品等を用いる人工的変異手段で容易
に変異することがあるが、このような変異株であ
つても、Ｌ−AMPBの生産能を有する、あるい
は本発明の各種有機リン化合物の添加によりＬ−
AMPBの生産能を示す放線菌であれば、すべて
本発明に使用することができる。 本発明の製造方法においては、SF−1293株を
通常の微生物が利用しうる栄養素を含有する培地
で培養する。栄養源としては、従来ストレプトミ
セス属の菌の培養に利用されている公知のものが
使用される。例えば、炭素源としては、グルコー
ス、澱粉、グリセリン、シユークロス、水飴、糖
蜜等があげられる。これらは単独あるいは組み合
わせて用いられる。また、窒素源としては、大豆
粉、小麦胚芽、肉エキス、ペプトン、乾燥酵母、
コーンステイープリカー、硫酸アンモニウム、硝
酸アンモニウム等が単独あるいは組み合わせて用
いられる。その他、必要に応じて炭酸カルシウ
ム、食塩、塩化カリウム、燐酸塩等の無機塩類を
添加することができる。 上述したようなＬ−AMPB生産培養時に各種
有機リン化合物を添加して、Ｌ−AMPBの増収
をはかることができる。 添加方法は、一括して行うよりも分割して行う
方がより効果的である。また、各種有機リン化合
物を添加する場合には、通常のＬ−AMPB生産
培養時よりも濃度のうすい培地を使用する事がで
き、製造コストの低減に寄与するのできわめて有
利である。この有機リン化合物の使用量は臨界的
ではないが、通常、生産培地に対し、約0.1〜20
mg／mlである。使用量がこの範囲を外れると本発
明の効果である経済的な面での十分な増収効果は
望みにくい。好ましくは0.5〜５mg／mlである。
培養法としては、液体培養法、特に深部培養法が
最も適している。培養は、好気的条件下で行われ
培養に適した温度は25〜35℃であるが、多くの場
合28〜32℃付近で培養する。培養日数は、通常の
Ｌ−AMPB生産培養より短くすることができ、
４〜６日が適当である。その他培養法自体の詳細
についてはＬ−AMPBの製造法である前記特開
昭57−47485号公報を参照されたい。 培養液中のＬ−AMPBの定量は、アミノ酸分
析装置を用いて行う。すなわち、培養液をPH2.0
に調整後遠心分離（3000rpm，15分）、あるいは
濾過により上清を得、アミノ酸分析器（アート社
製MLC−703型、保持時間12分）により分離定量
を行う。 本発明により得られた培養液からのＬ−
AMPBの精製法については、通常のＬ−AMPB
培養液からの精製法と同一であり、詳細について
は前記特開昭57−47485号公報を参照されたい。 以下、実施例により本発明を更に詳しく説明す
るが、本発明はこれに限定されるものではない。 （実施例） 実施例 １ SF−1293株（FERM−BP130）を前記培養地
（可溶性澱粉2.0％、ポリペプトン1.0％、肉エキ
ス0.3％、リン酸水素二カリウム0.05％、PH7.0）
10mlに接種した。これを28℃で24時間振盪培養し
さらに同培地80mlに継代して28℃で24時間振盪培
養したものを種母として３％の割合でグルコース
7.0％、小麦胚芽3.9％、サングレイン2.5％、リン
酸二水素ーカリウム0.3％。、塩化コバルト0.0001
％の組成からなる生産培地に植菌し、30℃で振盪
培養した。各種有機リン化合物を表に示した濃度
と方法で添加した。 培養液を酸性にした後、遠心分離して
（3000rpm，15分）上清を得、アミノ酸アナライ
ザー（アート社製MLC−703型、保持時間12分）
によりＬ−AMPBの生産量を測定した。 その結果を第１表に示す。

【表】 第１表に示すように、各種有機リン化合物の添
加効果は明らかである。 実施例 ２ 実施例１と同じ前培養培地で培養したものをジ
ヤーフアーメンターの種母として２％の割合で実
施例１と同じ生産培地及びその70％濃度培地に植
菌した。ジヤーフアーメンター（２仕込量／３
、いわしや製ミニJar）では30℃通気攪拌培養
を行い、各種有機リン化合物の添加効果について
実施例１と同様な方法で調べた。但し、有機リン
化合物は、ペリスタポンプとインターラツパーを
用いて半連続的に添加した。その結果を第２表に
示す。

【表】 第２表に示すように、ジヤーフアーメンターに
おいてもＬ−AMPB生産向上の効果は明らかで
ある。 ［発明の効果］ 実施例に示したようにＬ−AMPBの生産培養
時に各種有機リン化合物を添加する事により、Ｌ
−AMPBの生産量の増大をはかる事が可能であ
る事が明らかとなつた。 各種有機リン化合物の添加培養の場合には、通
常の生産培養時よりもうすい濃度の培地を使用す
ることができ原材料費の低減に寄与するのできわ
めて有利である。また、通常のＬ−AMPBの生
産培養よりも生産のラツプが速いため培養時間の
短縮が可能であり、タンク稼動に必要な電力、蒸
気などの用役費の低減をはかることができるとと
もに培養タンクあたりの年間生産量を増大するこ
とが可能である。このことは本発明が除草剤のよ
うに低価格でしかも大量に生産する事が必要な物
質の生産法として極めて有効な方法であることを
示すものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ ストレプトミセス属に属するＬ−２−アミノ
   −４−（ヒドロキシメチルホスフイニル）−酪酸生
   産菌を、３−（ヒドロキシホスフイニル）−２−オ
   キソプロピオン酸、その塩、そのアミドおよびそ
   のエステル体；２−アミノ−３−ヒドロキシホス
   フイニル）−プロピオン酸もしくはそのＮ−アシ
   ル体、それらの塩、それらのアミドおよびそれら
   のエステル体；４−（ヒドロキシホスフイニル）−
   ２−オキソ酪酸、その塩、そのアミドおよびその
   エステル体；２−アミノ−４−（ヒドロキシホス
   フイニル）−酪酸もしくはそのＮ−アシル体、そ
   れらの塩、それらのアミドおよびそれらのエステ
   ル体；４−（ヒドロキシメチルホスフイニル）−２
   −オキソ酪酸、その塩、そのアミドおよびそのエ
   ステル体；２−ホスフイノメチルリンゴ酸、その
   塩、そのアミドおよびそのエステル体よりなる群
   から選ばれる有機リン化合物を添加した培地に培
   養し、培養液からＬ−２−アミノ−４−（ヒドロ
   キシメチルホスフイニル）−酪酸を採取すること
   を特徴とするＬ−２−アミノ−４−（ヒドロキシ
   メチルホスフイニル）−酪酸の製造方法。 ２ 有機リン化合物が、３−（ヒドロキシホスフ
   イニル）−２−オキソプロピオン酸、その塩、そ
   のアミドまたはそのエステル体である特許請求の
   範囲第１項記載の製造方法。 ３ 有機リン化合物が、２−アミノ−３−（ヒド
   ロキシホスフイニル）−プロピオン酸もしくはそ
   のＮ−アシル体、それらの塩、それらのアミドま
   たはそれらのエステル体である特許請求の範囲第
   １項記載の製造方法。 ４ 有機リン化合物が、４−（ヒドロキシホスフ
   イニル）−２−オキソ酪酸、その塩、そのアミド
   またはそのエステル体である特許請求の範囲第１
   項記載の製造方法。 ５ 有機リン化合物が、２−アミノ−４−（ヒド
   ロキシホスフイニル）−酪酸もしくはそのＮ−ア
   シル体、それらの塩、それらのアミドまたはそれ
   らのエステル体である特許請求の範囲第１項記載
   の製造方法。 ６ 有機リン化合物が、４−（ヒドロキシメチル
   ホスフイニル）−２−オキソ酪酸、その塩、その
   アミドまたはそのエステル体である特許請求の範
   囲第１項記載の製造方法。 ７ 有機リン化合物が、２−ホスフイノメチルリ
   ンゴ酸、その塩、そのアミドまたはそのエステル
   体である特許請求の範囲第１項記載の製造方法。