JPS62164621A - アンジオテンシンｉ転換酵素阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、アンジオテンシン１転換酵素阻害剤に関する
ものである。

アンジオテンシンＩ　（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ　Ｉ　
）は、アミノ酸１０個からなるデカペプチドであり、血
清中に存在する分子量約ｌＯ万のアンジオテンシンゲン
（ａｎｇｉｏｔｅｎｓ　ｉｎｏｇｅｎ）から腎臓に存在
する酵素レニンによって生成される。さらに、このアン
ジオテンシン■は、アンジオテンシン１転換酵素の作用
によって活性型のアンジオテンシン■（ａｎｇｉｏｔｅ
ｎｓｉｎ　Ｕ　）に変換される。このアンジオテンシン
Ｈは、オクタペプチドで強力な血管収縮作用を有し、腎
性昇圧物質の本体であるといわれている。また、アンジ
オテンシン１転換酵素は降圧作用を有するキニン（ｋｉ
ｎｉｎ）を分解し、不活性化させることも知られている
。従って、アンジオテンシン１転換酵素阻害剤は、昇圧
物質の生成を阻害するという点と、降圧物質の分解を阻
害するという点で、高血圧症の治療に有効である。

そこで本発明者等は、高血圧症の治療に有用な薬剤を開
発すべく、鋭意研究を重ねた結果、一般式で表される化
合物が、すぐれたアンジオテンシン１転換酵素阻害作用
を有することを見出し、これに基づいて本発明を完成す
るに至った。

すなイつち、本発明は一般式 （ＪＲ （ただし、式中Ｒは水素、低級アルキルカルボニル基、
または芳香族カルボニル基を示す。）で表される不飽和
脂肪酸誘導体およびその薬理学的に許容しうる塩を有効
成分とするアンジオテンシン１転換酵素阻害剤（以下、
本発明の薬剤という）である。

［実施例コ ９−ハイドロキシ−１０，１２，１５−オクタデカトリ
エン酸 上記一般式で表される化合物のうち、Ｒが水素である化
合物は、９−ハイドロキシ−１０，１２゜１５−オクタ
デカトリエン酸であり、たとえば漢方薬である滋陰至宝
場、清心運子飲などに配剤されている調薬の地骨皮（Ｌ
ｙｃｉｉ　Ｒａｄｒｃｉｓ　Ｃｏｒｔｅｘ）から得られ
る。地骨皮はナス科の植物クコ（Ｌｙｃｉｕｍｃｈｉｎ
ｅｎｓｅ旧ＬＬＥＲ）、あるいはその近律植物の根皮を
乾燥したものである。

９−ハイドロキシ１０，１２．１５−オクタデカトリエ
ン酸は、例えば地骨皮をクロロポルム、クロロホルム−
メタノール混合溶媒またはアセトン等の溶媒で抽出し、
抽出液より溶媒を除去し、その残留物を含水メタノール
に溶解し、これをｎ−ヘキサン、石油エーテル等で抽出
した後、含水メタノール層から溶媒を除去し、その残留
物をシリカゲル等を用いた一般的なりロマトグラフイー
および／または高速液体クロマトグラフィーに付ｔこと
により得ることができる。

この９−ハイドロキシ−１０，１２，１５−オクタデカ
トリエン酸の製造の具体例を以下に示す。

具体例Ｉ 粉末とした地骨皮１０ｋｇをクロロホルム１００文に添
加混合し、室温で抽出した後、この抽出液から溶媒を除
去してクロロホルムエキス７６ｇを得た。このクロロホ
ルムエキスを９０％（Ｖ／Ｖ）メタノール−水混合溶媒
１文に溶解した後、分液ロートに移し、ｎ−ヘキサン１
文を加えて振り混ぜた後静置して、下層を取り、溶媒を
除去して９０％（Ｖ／Ｖ）メタノール−水工キス１８ｇ
を得た。この９０％（Ｖ／Ｖ）メタノール−水工キスを
、シリカゲルを吸着剤としたカラムクロマトグラフィー
に付し、１［次ｎ−ヘキサン、ローヘキサン−ベンゼン
、ｎ−ヘキザンーエーテル、エーテル−酢酸エチル、酢
酸エチル−メタノールで溶出し、エーテル−酢酸エチル
（１：ｌ）で溶出した分画（約２ｇ）を高速液体クロマ
トグラフィー「カラム、　μｍＢｏｎｄａｐａｋ　Ｃ＋
ａ（径　８ｍｍ。

長さ　３０ｃｍ）：移動相、アセトニトリル：１％酢酸
（３：２）；流速−３ｍ１／ｍ’ｒｎコで分取して無色
油状物質０．１ｇを得た。

この無色油状物質は下記の理化学的性質を存し、文献記
載［Ｈ，Ｗ、Ｓ、Ｃｈａｎ　ａｎｄ　Ｇ、Ｌｅｖｅｔｔ
　　Ｌｉｔ）ｉｄｓ　１２９９　（１９７７）］の］９
−ハイドロキシ川０．１２．１５−オクタデカトリエン
酸の理化学的性質と一致した。

赤外線吸収スペクトルνセ”　Ｃａ１ｌ−”　’プロト
ン核磁気共鳴スペクトル（δｐｐｒｎ！ｎ　ＣＤＣｌ５
）０　．９　　８　　（３Ｈ，ｔ、Ｊ　　　＝　　７　
　　Ｈｚ）。

２．０８　（２Ｈ、ｍ）。

２．３４　（２Ｈ，ｔ、Ｊ　＝　７　Ｈｚ）。

２．９３　（２Ｈ、ｄｄ、Ｊ　＝　７．７　Ｈｚ）。

４．１７（ｌ　Ｈ，ｍ）。

５．３５　（３Ｈ、ｍ）。

５．６８　（Ｉ　Ｈ，ｄｄ、Ｊ　＝　１５．７　Ｈｚ）
。

５．９８（Ｉ　Ｈ，ｄｄ、Ｊ　＝　Ｉ　Ｉ　、ｌ　Ｉ　
Ｈｚ）。

６．５０（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝　Ｉ　１．１５）４ｚ）９
−アセトキシ−１０，１２，１５−オクタデカトリエン
酸 上記一般式で表される化合物のうち、Ｒがアセチル基で
ある化合物は９−アセトキシ川０．１２゜１５−オクタ
デカトリエン酸であり、この化合物を得るには、上記具
体例１で得た化合物を、通常行なわれるアセチル化反応
、例えば無水酢酸−ピリジンとの反応によってアセチル
化することにより得ろことができろ。

一小０−フＪ４Ｌ七４ノー１／’ｌ　　Ｉ’ｌｌ　　Ｉ
Ｃ；−す々々；カトリエン酸の製造の具体例を以下に示
す。

具体例２ 具体例１で得た９−ノ＼イドロキシ−１０，１２゜１５
−オクタデカトリエン酸３０ｍｇを、ピリジンｌｄに溶
解し、無水酢酸０．５−を加えて一夜室温で放置した。

この反応液に氷水３０−を加え、エーテル２０燻で抽出
し、エーテル層を減圧下で溶媒を除去し、反応生成物４
０＋ｎｇを得た。この反応生成物を分取中圧液体クロマ
トグラフィー［カラム、草野科学器械製作所製　Ｃ［Ｇ
プレパックカラム（径　１５ｍｍ、長さ　３０ｃｍ）；
充填剤、シリカゲル（１０μｍ破砕状）；移動相、ｎ−
ヘキサン：酢酸エチル（５：ｌ）；流速、　２　ｍｌＪ
　／　ｍｉｎ］に付し、９−アセトキシ−＋　０．１２
．１５−オフタデカシエン酸を無色油状物質として２０
ｍｇ得た。

上記一般式で表される化合物のうち、Ｒがベンゾイル基
である化合物は９−ベンゾイルオキシ−１０，１２，１
５−オクタデカトリエン酸であり、この化合物を得るに
は、上記具体例１で得た化合物を、通常行なわれるベン
ゾイル化反応、例えばベンゾイルクロライド−トリエチ
ルアミンとの反応によってベンゾイル化することにより
得ることができる。

この９−ベンゾイルオキシ−１０，１２，１５−オクタ
デカトリエン酸の製造の具体例を以下に示す。

トリエン酸２０ｍｇを４−のトリエチルアミンに溶解し
、少量のジメチルアミノピリジンと０．５−のベンゾイ
ルクロライドを加え、窒素気流下室温で１５時間撹拌し
た。この反応液に氷水２０−を加え、エーテル２０−で
抽出し、エーテル層を減圧下で溶媒を除去し反応生成物
３５ｍｇを得た。この反応生成物を分取中圧液体クロマ
トグラフィー［カラム、草野科学器械製作所製ＣＩＧブ
レパックカラム（径　１５ｍｍ、長さ　３０ｃｍ）；充
填剤、シリカゲル（１０μｍ破砕状）；移動相、ｎ−ヘ
キサン：酢酸エチル（５：１）；流速、　２　ｍｆｌ　
／　ｍｉｎ］に付し、９−ベンゾイルオキシ−１０，１
２，１５−オクタデカトリエン酸を無色油状物質として
１７ｍｇ得た。

次に本発明の薬剤の有効成分である一般式で表される化
合物がアンジオテンシン【転換酵素阻害作用を有するこ
とを実験例を挙げて説明する。

実験例 ラビットラングアセトンパウダー（シグマ社製）２ｇを
５０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ８，３）３０　ｍ！Ｊに
溶解し、３４，０ＯＯＧで４０分間遠心分離して、その
上清を透析チューブに封入し１０ｍＭリン酸緩衝液３文
で透析した後、更に５０ｍＭリン酸緩衝液で２倍に希釈
してアンジオテンシン１転換酵素液を得た。

具体例１で得た化合物を含む試料を試験管に２５越入れ
、これに基質として５０越のヒプリルヒスチジルロイシ
ン（最終濃度５ｍＭ）を加え、更に３Ｍの塩化ナトリウ
ム溶液２５成、５００ｍＭリン酸緩衝液（１）１１８．
３　）５０成を添加し、３７℃で１０分間保温後、上記
のようにして得た酵素液１００４を添加し３７℃で６０
分間反応させた。

その後！Ｎ塩酸１００７ｆｆｌｌｌを加えて反応を停止
させた後、内部標準としてベンゾイルアラニン（１ｍｇ
／ｍｆｌ）２５　ＩＩを添加し、１７の酢酸エチルを加
え、酢酸エチルエステル中に抽出されたヒブリン酸の量
を高速液体クロマトグラフィー［カラム。

μｍＢｏｎｄａｐａｋ　Ｃ＋ａ（径　４ｍｍ、長さ　３
０ｃｍ）；移動相。

アセトニトリル：メタノール：１％酢酸（１：１：８）
；流速、　Ｉ　ｍｆＪ／　ｍｉｎ；検出、紫外線（２５
４ｎｍ）コにより測定し、これを酵素活性とした。

この結果について、阻害率を次式により算出した。

Ｃ：具体例で得た化合物を含まない場合のヒプリン酸の
ピーク面積 （内部標準により補正） Ｓ：具体例で得た化合物添加の場合の ヒブリン酸のピーク面積 （内部標準により補正） これよりＩＣ５ｏを求めたところ０．９ｍＭであり、明
らかなアンジオテンシン■転換酵素阻害作用が認められ
た。

次に、本発明の薬剤の有効成分である具体例１〜３で得
た化合物の急性毒性試験をｄｄＹ系マウスを用いて行っ
たところ、いずれも２　ｇ／　ｋｇの経口および腹腔内
投与で死亡例はなかった。

このように、一般式で表される化合物は極めて毒性が低
く、安全性の高いものである。

また′、一般式で表される化合物は、その所期の効果を
達成するために、ナトリウム、カリウム、カルシウム、
アルミニウム、アンモニウム、ジエチルアミン、トリエ
タノールアミン等の医薬として慣用される塩として用い
ることもできる。

次に、本発明の薬剤の投与量および製剤化について説明
する。

一般式で表される化合物はそのまま、あるいは慣用の製
剤担体と共に動物および人に投与することができる。投
与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選択
して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤、
注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられる。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年
令、体重、疾小の程度により異なるが、通常成人で一般
式で表される化合物の重量として１日０．５〜１．０ｇ
を、３回までに分けて服用するのが適当と思われる。

本発明において錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は
常法に従って製造される。錠剤は一般式で表される化合
物をゼラチン、てん粉、乳糖、ステアリン酸マグネンウ
ム、滑石、アラビアゴム等の製剤学的賦形剤と混合し賦
形することにより製造され、カプセル剤は、上記化合物
を不活性の製剤充填剤、もしくは希釈剤と混合し、硬質
ゼラチンカプセル、軟質ゼラチンカプセル等に充填する
ことにより製造される。シロップ剤、エリキシル剤は、
一般式で表される化合物をショ糖等の甘味剤、メチルお
よびプロピルパラベン類等の防腐剤、着色剤、調味剤、
芳香剤、補助剤と混合して製造される。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、小者の
年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で一
般式で表される化合物の重量として１日５０〜３００ｍ
ｇまでの静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、デキストロース水溶液
、プロピレングリコール等を用いることができる。さら
に必要に応じて、殺菌剤、防腐剤、安定剤を加えてもよ
い。また、この非経口剤は安定性の点から、カプセル等
に充填後冷凍し、通常の凍結乾燥技術により水分を除去
し、使用直前に凍結乾燥物から液剤を再調製することも
できる。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内設・与のための坐剤等が挙げられ、常法に従っ
て製造される。

次に、用例を示して本発明を具体的に説明するが、本発
明はこれによりなんら制限されるものではない。

用例Ｉ 具体例１で得た薬剤２００ｇを１５０ｄのポリソルベー
ト８０に溶解させ、これに６０℃に加温した滅菌生理食
塩水４，８５又を加えてよく振盪し、これを無菌的にバ
イアルに具体例１で得た薬剤か３００ｍｇ含有するよう
に分配し、密封して注射剤を製造した。

本注射剤は用時振盪し、１日当たり症状に応じて１．５
〜７．５−静脈内投与する。

用例２ 具体例２で得た薬剤１００ｇを無水ケイ酸２０ｇと混合
し、これにトウモロコンデンプン７５ｇを加え、さらに
混合した。この混合物に１０％ハイドロキシプロピルセ
ルロース・エタノール溶液を１００製加え、常法通りね
つ和し、押し出し、乾燥し、篩別することにより２０〜
５０メツンユの粒子の顆粒剤を得た。

この顆粒剤は、症状に合わせて１同量０．４〜０．６ｇ
（具体例２で得た薬剤の重量として０２〜０．３ｇに相
当）として１日３回服用する。

用例３ 具体例３で得た薬剤２０ｇを無水ケイ酸２０ｇと、昆合
し、これに微結晶セルロース１０ｇ、ステアリン酸マグ
ネシウム０　、５　ｇ、乳、＠　４９　、５　ｇを加え
混合し、この混合物を単発式打鍵機にて打錠して径７ｍ
ｍ重量１００ｍｇの錠剤を製造した。

本錠剤１錠は、具体例３で得た薬剤１００ｍｇを含有す
る。本錠剤は、１回２〜３錠、１８３回服用する。

用例４ 具体例２で得た薬剤１７０ｍｇを乳糖１００ｍｇと混合
し、Ｎｏ、　Ｏのゼラチンカプセルに充填してカプセル
剤を得た。

本カプセル剤は、症状に合わせて１回１〜２カプセルを
１日３回服用する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （ただし、式中Ｒは水素、低級アルキルカルボニル基、
   または芳香族カルボニル基を示す。）で表される不飽和
   脂肪酸誘導体およびその薬理学的に許容しうる塩を有効
   成分とするアンジオテンシン I 転換酵素阻害剤。