JPS6165143A - 免疫反応の測定方法および装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （従来技術） 本ｊを明は、抗原−抗体反応に基く免疫反応を、（散粒
子による散乱光の強度ゆらぎを利用して測定する方ン去
および装置に関するものである。

免疫物質、ホルモン、医薬品、免疫調節等生体内微量成
分の測定法として免疫反応の特異的選択反応を利用した
免疫分析法があり、大別すると酵素や敢Ｑ’Ｊ性アイソ
トープを標識物質として用いる標識免疫分析法と、抗原
・抗体複合体を直接測定する非標識免疫分析法の２方法
がよく知られている。

前者の標識免疫分析法としてはラジオイムノアラレイ（
ＲＩＡ＞、酵素免疫分析（ＥＩＡ）、螢光免疫分析（Ｆ
ＩＡ）等がよく知られており、高感度であるがアイソト
ープの取り扱い、廃棄物処理等の種々の制限があり、又
ＩＱ定に長時間を要するうえに標識試薬が高価であるた
め検査コストが高い等の欠点がある。

後者の非標識免疫分析法には免疫電気泳動法、免疫拡散
法、沈降法等があり、簡便な分Ｉｆ′ｒ法であるか感度
、定量性、再現性の点で精密測定としては不充分である
。このような免疫分析法に関しては「臨床検査法提要」
　（金井泉原著、金井正光編茗、金属出版）や、「臨床
検査ＪＶｏλ、２２゜Ｎｏ　、５　（１９７８）　、第
４７１〜４８１頁に詳しく説明されている。

ま　Ｉこ　、　　　ｒ　　Ｉ　　ｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙＪ　　　、　　　Ｖｏ　　　ｊ２　　、　　１
２゜Ｎｏ　、４　（１９７５）、第３４９〜３５１＠に
は、抗体または抗原を表面に担持させた粒子を抗原また
は抗体と反応させ、凝集粒子の大きさに比例して減少す
るブラウン運動の指標となる平均拡散定数を、レーザ光
の散乱光のスペクトル幅の変化から求めることにより抗
原または抗体を定量分析する方法が開示されている。こ
の分析方法では標識試薬を用いない利点はあるが、粒子
のブラウン運動によるドツプラ効果によって入射光のス
ペクトルが広がるのを分光計を用いて検出しているため
、装置が大形で高価となる欠点があると共に分光計を機
械的に駆動する際に誤差が生じ、箱度および再現性が悪
くなる欠点がある。また、この方法では光のスペクトル
幅から平均拡散定数を求めているだけであり、情報量が
少ないという欠点もある。

上述したように従来の免疫分析方法では、高価な標識試
薬を用いるため分析のランニングコストか高価となると
共に液体の取扱いおよび処理が面削となったり、処理時
間が長くなる欠点があったり、高価で大形な分光計を必
要とすると共に精度や再現性も悪く、冑られる情報量も
少ないという欠点があった。

このような欠点を除去するために、微粒子による散乱光
の強度ゆらぎが抗原−抗体反応と密接な関係にあること
を利用して抗原−抗体反応を測定することにより、上）
ホした従来の欠点を除去し、高価な標識試薬や高価でか
つ大形な分光計を用いずに、高い精度および再現性を以
って測定を行なうことができ、しかも測定時間の短縮、
抗原−抗体反応測定の自動化か可能であると共に抗原−
抗体反応について多くの有用な情報を得ることができる
免疫反応測定方法およびこのような方法を実施する装置
が特願昭５９−１４８８７８号において提案されている
。

この免疫反応測定方法は、少なくとも抗原および抗体を
含む抗原−抗体反応液に輻射線を投射し、抗原−抗体反
応により生成される微粒子による散乱光または反応液に
加えた抗体または抗原を固定した微粒子の抗原−抗体反
応によって生ずる散乱光をホモダイン的にまたはヘテロ
ダイン的に検知し、この検知出力の強度ゆらぎのパワー
スペクトル密度に暴いて抗原−抗体反応を測定するもの
である。

このような免疫反応測定方法においては、抗原−抗体反
応の結果として生成される微粒子による散乱光または抗
体または抗原を表面に固定した微粒子の抗原−抗体反応
によって生ずる散乱光の強度が、光の干渉によりゆらぐ
ため、この強度ゆらぎのパワースペクトル密度に粒子の
形状や大きさの依存性があることに着目し、強度ゆらぎ
のパワースペクトル密度を検知することにより抗原−抗
体反応の有無、抗原または抗体の定量、抗原−抗（Ａ反
応に、よる微杓子の凝集状態（粒径かイ１ｉ　）などの
多くの有用な情報を１ｑることかできる。このような方
法では散乱光を光検出器で受光し、その出力信号強度の
ゆらぎを検知するものであるから、標識試薬を用いる必
要はないと共に散乱光のスペクトル分析を行なうもので
はないので分光計を用゛いる必要もない。また、散乱光
の強度ゆらぎのパワースペクトル密度の緩和周波数が粒
子の大きさに依存することを利用して、抗原−抗体反応
の＋ｉｉｊ後における緩和周波数の比を求め、この比の
値から抗原−抗体反応を測定したり、散乱光の強度ゆら
ぎのパワースペクトル密度の低周波数側の周波数に関す
る積分値が粒子の大きさに依存することを利用して、抗
原−抗体反応の前後における積分値の比を求め、この比
の値から抗原−抗体反応を測定したりすることができる
。

しかし、このように散乱光の強度ゆらぎのパワースペク
トル密度に基いて抗原−抗体反応を測定する場合、散乱
光のエネルギーは小さいのでパワースペクトル密度を表
わす信号はノイズの影響を受は易くそのＳ　’Ｎは小さ
く、例え（ば？）ｉ　ｆ［１周波数を正確に求めること
か困難となり、測定精度か低くなる欠点がある。

（発明の目的） 本発明の目的は、上述した散乱光の強度ゆらぎを利用し
た免疫反応測定方法の利点はそのまま帷持し、その欠点
を有効に除去し、信号のＳ　、／　Ｎを向上することに
より測定精度を高くすることができるｍｌ定方法および
測定装置を提供しようとするものである。

（発明の概要） 本発明の測定方法は、抗原および抗体を含む反応液に輻
射線を投射し、抗原−抗体反応により生成される微粒子
による散乱光または反応液に加えた抗体または抗原を固
定した微粒子による散乱光を時間的に間隔を置いて複数
回検出し、各回の光電変換出力信号を処理して散乱光の
強度ゆらき゛のパワースペクトル密度を求め、これらパ
ワースペクトル密度を平均化して得られるパワースペク
トル密度に基いて抗原−抗体反応を測定することを特徴
とするものである。

また、本発明の測定装置は、抗原および抗体を含む反応
液に光を投射し、抗原−抗体反応により生成される微粒
子による散乱光または反応液に加えた抗体または抗原を
固定した微粒子による散乱光を検知し、この検知出力の
強度ゆらぎのパワースペクトル密度に基いて抗原−抗体
反応を測定する装置において、 前記抗原−抗体反応を行なう反応液を収容するセルと、 コヒーレントな光を放射し、これを前記セルに入射させ
る光源装置と、 前記セルからの散乱光を単独または入射光と共に受光す
る光検出装置と、 この光検出装置からの出力信号をＲ間を置いて複数回に
亘って受け、その強度ゆらぎのパワースペクトル密度を
求める手段と、 これらのパワースペクトル密度を記憶する記憶手段と、 この記憶手段からパワースペクトル密度を続出して平均
化したパワースペクトル密度を求める手段と、 この平均化したパワースペクトル密度に基いて抗原−抗
体反応を測定する手段とを具えることを特徴とするもの
である。

（実施例） 第１図は本発明による免疫反応ｍｌｌ表装置一実施例の
構成を示す図である。本例においては、コヒーレント光
を放出する光源として波長６３２．８ｎｌｌのＨｅ−４
４ｅ刀スレーザ１を設ける。コヒーレント光を放射する
光源としては、このようなカスレーザの他に半導体レー
ザのような固体レーザを用いることもできる。光源１か
ら放射されるレーザ光束２を半透鏡３により光束４と光
束５とに分画する。一方の光束４を集光レンズ６により
集光して透明なセル８に投射する。他方の光束５をシリ
コンフォトダイオードより成る光検出器９に入射させ、
光源１の出力光強度の変動を表わすモニタ信号に変換す
る。

セル８の中には、表面に抗体または抗原を結合した微粒
子７を分散ざぜた援′ＰｆＪ液と、抗原または抗体を含
む被検：（夕との混合物である抗原−抗体反応（（夕を
収容する。したがってセル８中で抗原−抗体反応か起こ
り、微粒子間に相互作用が生じたり、微粒子が相互に付
着するため、ブラ・クン運動の状態が変化することにな
る。セル８中の微粒子７によって散乱されｌζ散乱光を
、一対のピンホールを有するコリメータ１０を経て例え
ば光電子増倍管より成る光検出器１１に入射させる。光
検出器１１の出力信号は低雑音増幅器１２を経てＡ／Ｄ
変換器１３に供給Ｊる。このＡ／Ｄ変換部１３では各測
定サイクルタイム中Ｐ個のデジタル信号をサンプリング
して〜１ビットのデジタル信号に変換し、これらを第１
の記憶手段を構成する第１のメモリ１４に記憶する。し
たがってメモリ１４の容ｆｆｌ　４．ｔ　Ｐ　Ｘ　Ｍビ
ット以」二必紗で必る。

次に第１のメモリ１４に記憶された２個のデジタル信号
をデバイダ１５に供給する。このデバイダ１５には光検
出器９の出力を、低雑音増幅器１６．Ａ／Ｄ変換器１１
およびメモリ１８を介して供給する。これら△／′Ｄ変
換器１７およびメモリ１８の）幾能は、上述したＡ／Ｄ
変換器１３およびメモリ１４とまったく同様であり、Ａ
／Ｄ変換器１７において各々が１′ｖ１ビツトのデジタ
ル信号を２個作り、これらをメモリ１８に記憶する。デ
バイダ１５からは光源１の出力変動分が補正された信号
が得られる。次にこの信号を高速フーリエ変換器１９に
供給し、高速フーリエ変換を行なって散乱光強度ゆらぎ
のパワースペクトル密度を求める。本発明ではこのよう
な処理を複数回繰返して複数のパワースペクトル密度を
求め、これらをデマルチプレクサ２０を経て第２の記憶
手段を構成する第２のメモリ２１−１〜２１−Ｎに次々
と記憶する。これらの第２のメモリの各々の容量もＰＸ
Ｍビット以上あればよい。このようにして全てのパワー
スペクトル密度を求めた後、これらをメモリ２１−１〜
２１−Ｎから読出してノーマライザ２２に供給して平均
化し、平均化したパワースペクトル密度を演算処理部２
３に供給する。、演算処理部２３では平均化されたパワ
ースペクトル密度に基いて演算処理を行ない、凝集反応
の有無、試料中の抗原または抗体の濃度などの測定結果
を求め、これをプリンタ２４に供給して測定結果を表示
する。また、平均化したパワースペクトル密度の波形は
陰極線管２５によりモニタすることができる。

第２図は第１図に示したコリメーター０の詳細な構成を
示す図である。本例のコリメーター０は空胴構造となっ
ており、空に１０ａは外光の影ν２を除くために暗箱構
造となっており、その内面は反射防止構造となっている
。空胴１０ａの前後にはピンホール１０ｂ６よび１０ｃ
を形成する。今、これらピンホール１０ｂおよびｉＱｃ
の半径をそれぞれａおよびａ、ピンホール間の距離をり
、空胴１０ａの内部媒体の回折率をｎ、波長をλとする
とき、次式（１）を満足するように構成する。

Ｌ　≧４１　ａ１ａ２．　、　、　、　（１゜λ 本発明では、上述したように散乱光の強度ゆらぎのパワ
ースペクトル密度を検出するか、このパワースペクトル
密度は、微粒子が波長程度の距離を拡散してゆくことに
よる干渉成分のゆらき′による項と、散乱体積への微粒
子の出入りによって生ずる粒子数のゆらぎによる項とか
ら成っている。

この内、干渉による散乱光のゆらぎはスペックルパター
ンの空間的なゆらぎとして観測されるが、これをそのま
ま広い受光面を持った光検出器１１に入射ざぜると、受
光面の面積に亘って空間的な平滑化が行なわれるので、
検出されるゆらぎは小さくなってしまう。そこで上Ｊし
たようなピンホールを有するコリメータ１０を用いて光
検出器１１の視野を限定することにより、ゆらぎを高感
度で検出することができるようになる。本実施例では上
式（１）を満足させるには、空ｙＡ１０ａ内の媒体は屈
折率１）＝１の空気で十分実用的である。すなわち、Ｍ
径０．３ｍｍのピンホール１０ｂ　、　１０ｃを３０ｃ
ｍ離したコリメータ１０を用いれば上式（１）は満足さ
れることになる。

本発明においては上述したように、複数回に亘ってデー
タの取込みを行なって複数個のパワースペクトル密度を
求め、これらを平均化するので、Ｓ／Ｎは箸しく向上す
ることになる、　ＱＱにＮ回に亘ってデータの取込みを
行なうとＳ７・、＼は爪（８となる。したがって例えば
１００回行なえばＳ／＼は１０倍高くなる。

上述した実施例においては、セル８に入射する光束４の
方向と、コリメーター０の光軸方向とを９０°とし、入
射光束は直接光検出器１１に入ＱＪ　Ｉ、ないホモダイ
ン法を採用したが、入射光束の一部を光検出器１１に入
射させる・＼テロダイン法を採用することもてきる。こ
こてホモタイン的に散乱光を検出する場合には、光電子
増倍管より成る光検出器１１の出力信号は、散乱光の電
界強度をＥとすると、その自乗の平均１直戸　に比例し
たものとなり、散乱光と入射光とを併わせで検出するヘ
テロダイン的検出の場合には、直接の入射光の電界強度
をＥｅとすると、光検出器１１の出力信号は、となる。

ここで妬はゆらぎがない（もしあったとしても散乱光の
ゆらぎに比べて緩つくりしている）ので、光検出器１１
の出力の変動成分は殆んど第２項２Ｅｏ−Ｅｓに等しい
。つまり、散乱光の電界強度百、に（Ｊぼ比例した出力
信号か得られること【こ／ヱる。

また、コリメータ１０も上述した構成に限定されるもの
ではなく、光検出器１１の視野を１スペツクルパターン
以下に制限できるものであれば任意の構成どすることが
できる。

上述した装置を用い、光検出器１１の出力信号を高速フ
ーリエ変換して散乱光の強度ゆらぎのパワースペクトル
密度を求めた結果を次に説明するっここで定常１ｉｆｒ
立過程Ｘ（ｔ）のバワースベク１〜ル密度Ｓ（［）は、
次のように表わすことができる。

この（３）式をもとに高速フーリエ変換を用いてパワー
スペクトル密度の計停を行なう。しかし、１回のデータ
取込みにより得られるパワースペクト・層密度はＳ／Ｎ
が低く、第３図Ａに示すようなものとなり、曲線の肩の
部分の周波数である緩和周波数を正確に求めることは困
難となるが、本発明のようにＮ回に亘って取込んだデー
タから得られるパワースペクトル密度を平均化すると第
３図Ｂに示すようにノイズが著しく低減したパワースペ
クトル密度が得られ、これから緩和周波数「を正確に求
めること、ができる。

第４図および第５図は、粒径がそれぞれ０１８８μｎ１
および０．３０５μｍのラテックス粒子を分散さけた液
をセル８に収容したときに（ｑられる平均化したパワー
スペクトル密度を示すものであり、これ（五ローレンツ
型パワースペクトル密度を表わすものＣあり、散乱光の
強度ゆらぎのパワースペクトル密度の内、干渉効果によ
るものである。これらのパワースペク片ル密度の緩和周
波数は微粒子の直（￥に反比例することがわかる。すな
わち、散乱光の強１腿ゆらぎは上ｊホしたように微粒子
の）■動に暴くコヒーレント光の干渉による成分と、散
乱体積内の粒子数の変動による成分との合成されたもの
となるが、本実施〃１では干渉成分が主として検出され
ており、パワースペクトル密度の緩和周波数は粒子が光
の波長の距離を移すｊする時間の逆数となるので、粒径
が大きくなると移動時間は長くなり、緩和周波数が減少
することになる。このように、パワースペクトル密度の
緩和周波数は粒径に反比例するので、この緩和周波数の
変化から抗原−抗体による凝集の有無や凝集の程度を検
出することができる。

上述したように、散乱光の強度ゆらきは粒子のブラウン
運動による干渉性成分と、散乱体積内の粒子数の変化に
よる非干渉性成分との和になるが、散乱体積内の粒子数
が少なくなり、干渉性成分が少なくなって、非干渉性成
分と同程麿となると、粒子のブラウン運動による散乱光
強度変化以外の成分も検出してしまい、抗原−抗体反応
を゛積度よく検出することはできなくなる。したがって
、粒子の１農度は、散乱体積内での入射光強度が十分１
ｑられる程度に低く、かつ干渉性成分か鉗子、歩性成分
よりも大ぎくなるような範囲に選ぶ必要があるが、散乱
体の粒ｉ￥が一定であれば相当広い粒子濃度に亘って相
対ゆらぎは一定となる。

第６図Ｊ５よび第７図は、直径０．３μｍのラテツクス
粒子の表面に免疫グロブリンＧの抗イホを固定したもの
を、Ｔｒｉｓ−ＨＣρでＰ　Ｈ７に調整したＮ　ｔ（＋
＋液に分［ｉ（させたものに、抗原として１０−ｇ７ｍ
りおよび１０−ｇｇ／ｍ℃の濃度の免疫グロブリンＧを
加えた抗原−抗体反応液をセルに収容し、抗原−抗体反
応の開始前と開始後のパワースペクトル密度を示すもの
である。第６図に示す抗原１度１０−’　！、ｌ、’ｍ
　、＋２の場合には、反応前の緩和周波数が杓！１０１
１２であるのに対し、反応後の緩和周波数が１０Ｈｚに
変化している。これに対し、抗原濃度が１０−９υ、／
１ＩＩｆ！、の場合には、反応開始前の緩和周波数は杓
９５　Ｈ２て、反応後の緩和周波数は約４０１４ｚとな
っている。したかって、抗原−抗体反応前後の緩和周波
数の比［を、 と定透し、この伽を幾つかの抗原濃度について求めてグ
ラフに示すと第８図に示すようになる。す４ｊわら、第
８図において横軸は抗原濃度をとり、縦軸は緩和周波数
の比Ｆの直をとって示ずものであるか、ｉｎ　Ｔ’Ｏ周
波周波比Ｆを求めることにより抗原濃度を検出すること
ができる。

一方、第６図および第７図において、抗原−抗体反応の
前後における相対ゆらぎの比（Ｒ）か抗原濃度と一定の
関係を有することもわかる。ツなわら、パワースペクト
ル密度のグラフから緩和周波数［を求めることにより相
対ゆらぎを弾出することがてぎる。このとき相対ゆらぎ
比Ｒば次式で表わ−４ことができる。

この（４）式により相対ゆらぎ比Ｒを求め、これと抗原
濃度との関係をグラフにして求めたのが第９図である。

このグラフより明らかなように、抗原−抗体反応前後に
おける相対ゆらぎの比Ｒを求めることにより未知の抗原
濃度を知ることができる。すなわら、測定に先立って既
知の異なる抗原濃度の標準サンプルについて相対ゆらぎ
比Ｒを求めて第９図のように検量線を求めてＪ５き、未
知の抗原濃度の被検体について相対ゆらぎ比Ｒを求め、
先に求めた検量線に基いて抗原濃度を知ることができる
。通常の測定においては１０−８〜１０’ｇ／（ｌ１℃
の抗原濃度付近で正確な測定を行なうことが必要である
が本発明によればこのような要求を十分に満足している
。

一方、（４）式による相対ゆらき′比Ｒは第６図および
第７図に示すパワースペクトル密度の低周波帯域におけ
る積分値の変化の比としても求めることができる。づな
わら、 に棋いＣ（門灯ゆらぎ比Ｒを求めることができる。

ここて抗原−抗体反応ｔ）ηのパワースペクトル密度の
積分賄Ａおよび反応後の積分１直１３は、１０−１−１
０’ｌ！ｚの低周波帯域にあける積分値である。したが
って低域通過フィルタは１０’ｌｌｚ以下の周波数を通
過づるものとする。

粒径が一定の場合にはパワースペクトル密度はローレン
ツ型であり、緩和周波数より大ぎい周波数においては周
波数の自乗に反比ゆ１して減少する。

ところが、粒径が分布している場合には、それぞれの粒
径に対応した緩和周波数を持ったローレンツ型スペクト
ルを重ね合わせたものが観測されるので高周波部分にお
けるパワースペクトル密度は最早や周波数の自乗に反比
例しなくなる。したがってこの部分の形状から逆に反応
によって凝集した粒子の粒径分布を知ることができる。

このようなデータは従来は得られなかったものであり、
抗原−抗体反応の状態を解析する上で有用な情報である
。

本発明は上述した実施例にのみ限定されるものではなく
、幾多の変形や変更が可能である。上述した３１明は免
疫グロブリンＧ　（１＋ｌ　Ｇ＞について例示したが、
免疫グロブリン△（ｔｇＡ）。

１（ｌ　Ｍ、［ｑ　Ｄ、ｒｇＥ、オーストラリア抗原、
梅毒抗原、インシュリンなど抗原−抗体反応によって凝
集を生ずるすべての物質の測定に適用づることかできる
。また、上述した実施例で（ユ、徹ｆＱＹの人１ｍに’
Ａ　ｆホを固定して、彼：■（イー中の抗原を検出する
ようにしたか、微粒子の表面に抗原を固定し、被検体中
の抗体を検出することしてぎる。さらに、上述した実施
例では微粒子としてポリスチレンラテックス粒子を用い
たが他の有機物粒子や、ガラスなどの無機物粒子を用い
ることもてきる。

さらに上Ｊした実施例では抗原−抗体反応液の中には最
初から微粒子を存在させたが、このような微粒子を用い
ずに、抗原−抗体反応の結果として生ずる微粒子状生成
１力による散乱光を利用することもてきる。このような
抗原−抗体反応の実施例としては、抗原としてヒト絨毛
ゴナドトロピン（ＨＣＧ）を用い、抗体として抗ヒト絨
毛ゴナドトロピン（抗ＨＣＧ）を用いる反応があり、こ
の反応により生成される抗原−抗体複合体は微粒子とし
て扱うことができる。さらに抗原そのものを楊子として
用いることもできる。このような抗原−抗体反応として
は抗原としてカンディダ・アルビカンス（酵母）を用い
、抗体として抗カンディダ・アルビカンスを用いる例や
、池に血球、細胞、ｉａ　ｉ’ｃ　１ｉ　４Ｃとを１立
子として用いることしてきる。また第１図に示す実施例
では抗原−抗１本反応液をセルに収容して測定を１１な
うバッチ方式どしたが、抗原−抗体反応液を連続的に流
しながら測定を行なうフロ一方式とすることも勿論可能
であるっ（発明の効果） 上述した本発明の効果を要約すると以上の通りである。

（１）酵素やラジオアイソｉ〜−プのような瞭識試薬の
ような高１曲で、取扱いの面倒な試薬を用いる必要がな
いので、安価かつ容易に実施ηることかできる。

（２）免疫電気泳動法、免疫拡散法、沈降法なとの非標
識免疫分析法に比べ精度か高く、再現性が高いので（ｉ
頼性の高い測定結果を高苗摩で得ることかできる。

（３〉微粒子のブラ「クン運動に塞く散乱光の強度ゆら
ぎを検出するものであるから、超１ｆｆｌの被検体で高
精度の測定ができると共に測定時間も短時間となる。

（４）平均拡散定数を散乱光のスペクトル幅の変化から
求めることにより抗原または抗体を定量する方法に比べ
分光計が不要であるので装置は小形かつ安価となると共
に精度および信頼性の高い測、定結果がｉｑられる。

（５）光ゆらぎのパワースペクトル密度に基いて測定を
行なうため、抗原−抗体反応についての多くの有用な情
報を得ることができる。

（６）腹教回に亘って散乱光を受光し、各回の光重変換
出力信号から散乱光の強度ゆらぎのパワースペクトル密
度をそれぞれ求めた蛋、これらの平均化したちのを求め
、これに颯いて抗原−抗体反応の測定を行なうので、Ｓ
／Ｎを「１１くすることができ、測定精度を向上するこ
とができる。

【図面の簡単な説明】

第１ｆｌＬｔ本発明による免疫反応測定装置の一実施例
の構成を示す線区、 第２図ｉ；ｉ］Ｉノメータの慴造を示ず線図、第３図△
およびＢ（よ同じくその効果を示す線図、第４図および
第５図はそれぞれ粒ｉ￥が０．１８８μｍおよび０．３
０５μｍの微粒子に対するパワースペクトル密度を示す
グラフ、 第６図および第７図はそれぞれ抗原濃度が１０−４ｇ／
ｍ℃および１０’ｇ　７ｍ　Ｊ２に対する抗原−抗体反
応前および後のパワースペクトル密度を示すグラフ、 第８図１よ抗原１度と緩和周波数の比との関係を示ずグ
ラフ、 第９図は抗原濃度と相対ゆらき比との関係を示すグラフ
である。 １・・・レーザ光源　　　２．　４．　５・・・光束３
・・・半透鏡　　　　　　６・・・集光レンズ７・・・
微粒子　　　　　８・・・セル９・・・光検出器　　　
　１０・・・コリメータ１１・・・光検出器　　　　４
２．１６・・・低雑＆増幅器１３・・・Ａ　、、−’　
Ｄ変換器　　１４・・・メモリ１５・・・デバイタ　　
　　１９・・・高速フーリエ変換器２１−１〜２１−Ｎ
・・・メモリ ２２・・・ノーマライザ　　２３・・演仁）思理部？４
・・・プリンタ　　　　２５・・・陰極線管。 同　　　　弁理ｔ　　　　杉　　　　村　　　　興　　
　　作第２図 第３図 Ａ　　　　　　　Ｂ 周波数　　−周波数　７− 第４図 １ｉ１濱数（Ｈ２） 第５図　。 ／！？ミビ欽（Ｈアン 第６図 、１７　ニーｒ獣（Ｈ，ン 第７図 周句灯Ｈ，） 第８図 第９図 抗原１ｌＫ（籠ｌ）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、抗原および抗体を含む反応液に輻射線を投射し、抗
   原−抗体反応により生成される微粒子による散乱光また
   は反応液に加えた抗体または抗原を固定した微粒子によ
   る散乱光を時間的に間隔を置いて複数回検出し、各回の
   光電変換出力信号を処理して散乱光の強度ゆらぎのパワ
   ースペクトル密度を求め、これらパワースペクトル密度
   を平均化して得られるパワースペクトル密度に基いて抗
   原−抗体反応を測定することを特徴とする免疫反応測定
   方法。 ２、抗原および抗体を含む反応液に光を投射し、抗原−
   抗体反応により生成される微粒子による散乱光または反
   応液に加えた抗体または抗原を固定した微粒子による散
   乱光を検知し、この検知出力の強度ゆらぎのパワースペ
   クトル密度に基いて抗原−抗体反応を測定する装置にお
   いて、 前記抗原−抗体反応を行なう反応液を収容 するセルと、 コヒーレントな光を放射し、これを前記セ ルに入射させる光源装置と、 前記セルからの散乱光を単独または入射光 と共に受光する光検出装置と、 この光検出装置からの出力信号を時間を置 いて複数回に亘って受け、その強度ゆらぎのパワースペ
   クトル密度を求める手段と、 これらのパワースペクトル密度を記憶する 記憶手段と、 この記憶手段からパワースペクトル密度を 読出して平均化したパワースペクトル密度を求める手段
   と、 この平均化したパワースペクトル密度に基 いて抗原−抗体反応を測定する手段とを具えることを特
   徴とする免疫反応測定装置。