JPS6190041A - 光強度ゆらぎを用いる免疫反応測定方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （技術分野） 本発明は、抗原−抗体反応に基く免疫反応を、微粒子に
よる散乱光の強度ゆらき′を利用してより定量る免疫反
応測定方法に関するものである。

（従来技術） 免疫物質、ホルモン、医薬品、免疫調節笠生体内微吊成
分の測定法として免疫反応の特異的連携反応を利用した
免疫分析法があり、大別−すると酵素や放射性アイソト
ープを標識物質として用いるｉ票識免疫分析法と、抗原
・抗体複合体を直接測定する非標識免疫分析法の２方法
がよく知られている。

前者の標識免疫分析法としてはラジオイムノアッセイ（
ＲＩＡ）、酵素免疫分析（Ｅ　ＩＡ）、螢光免疫分析（
ＦＩＡ＞等がよく知られＣいる。しかし、これらの分析
方法は高感度であるが測定に長時間を要するうえに標識
試薬が高価であるため、検査コストが高い等の欠点があ
り、また特にＲＩＡにＪ３いてはアイソトープの取り扱
い、廃采物処理等の種々の制限がある。

また、後者の非標識免疫分析法としては免疫電気泳動法
、免疫拡散法、沈降法等が知られている。

しかし、これらの分析法は簡便であるが感度、定量性、
再現性の点で精密測定としては不充分である。このよう
な免疫分析法に関しては「臨床検査法提要」　（金井泉
原著、金井正光編著、金属出版）や、「臨床１査Ｊ　Ｖ
Ｏｆ、　２２．　Ｎｏ　、　５（１９７８）、第４７１
〜４８１頁に詳しく説明されている。

また、「ｌ　ｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙＪ　、　Ｖ
ｏ　１　、１２゜Ｎｏ　、４　（１９７５）、第３４９
〜３５１頁には、抗体または抗原を表面に担持させた粒
子を抗原または抗体と反応させ、凝集粒子の大きさに比
例して減少するブラウン運動の指標となる平均拡散定数
を、レーザ光の散乱光のスペクトル幅の変化から求める
ことにより抗原または抗体を定石分析する方法が開示さ
れている。この分析方法では標識試薬を用いない利点は
あるが、粒子のブラウン運動によるドツプラ効果によっ
て入射光のスペクトルが広がるのを分光計を用いて検出
しているため、！　　　　　装置が大形で高価となる欠
点があると共に分光計を警幾械的に駆動する際に誤差が
生じ、精度および再現性が悪くなる欠点がある。

上述したように従来の免疫分析方法では、高価な漂識試
薬を用いるため分析のランニングコストが高価となると
共に液体の取扱いおよび処理が面倒となったり、α押時
間が長くなる欠点があったり、高価で人形な分光計を必
要とすると共に精度や再現性も悪いという欠点があった
。

（発明の目的） 本発明の目的は、微粒子による散乱光の強度ゆらぎが抗
原−抗体反応と密１ａな関係にあることを利用して抗原
−抗体反応を測定することにより、上述した従来の欠点
を除去し、高価な標識試薬や高価でかつ大形な分光計を
用いずに、高い精度および再現性を以って測定を行なう
ことができ、しかも測定時間の短縮、抗原−抗体反応測
定の自動化ができる免疫反応測定方法を提供しようとづ
るものである。

（発明の概要） 本弁明の免疫反応測定方法は、少なくとも抗原および抗
体を含む抗原−抗体反応液に輻射線を投射し、抗原−抗
体反応により生成される微粒子による散乱光または反応
液に加えた抗体または抗原を固定した微粒子の抗原−抗
体反応によって生ずる散乱光をホモダイン的にまたはへ
テロダイン的に検知し、この検知出力を演算処理して強
度ゆらぎのバ【ノースベクトル密度の緩和周波数を自動
的に求め、このＭ和周波数に基いて抗原−抗体反応を測
定することを特徴とするものである。

（実施例） 第１図は本発明の免疫反応測定り法を実施する装置の一
例の構成を示す図である。本例においでは、光源１とし
て波長６３２．８ｎｍのコヒーレント光を放出する＋１
Ｏ−Ｎｅガスレーザを用いる。コヒーレント光を放射す
る光源１としては、このようなガスレーザの他に半導体
レーザのような固体レーザを用いることしできる。光源
１から放射されるレーザ光束２は、半透鏡３により光束
４と光束５とに分離し、一方の光束４を集光レンズ６に
より集光して透明な廿ルアに投射させ、他方の光束５を
シリコンフォトダイオードより成る光検出器８に入射さ
せて光源１の出力光強度の変仙を表わすモニタ信号に変
換する。

セルフの中に（３１、表面に抗体９したは抗［工：！を
ｉ、１１合した微粒子９を分散させた緩衝液と、抗原ま
たは抗体を含む被検液との混合物（−ある抗原−抗体反
応液を収容する。したがってＬルア中で抗原−抗体反応
が起こり、微粒子間にイ目互作用が生じ！こり、微粒子
が相互に付着するため、ブラウン運動の状態が変化する
ことになる。セルフ中の微粒子９によって散乱された散
乱光は、一対のピンホールを有するコリメータ１０を経
て光電子増倍管より成る光検出器１１に入射させる。光
検出器８の出力モニタ信号は低雑音増幅器１３を経てデ
ータ処理装置１４に供給し、また光検出器１１の出り信
号は低雑音増幅器１５および低域通過フィルタ１６を経
てデータ込叩装置１４に供給する。データ処理装置１４
にはΔ７・′Ｄ変換部１７．高速フーリエ変換部１８お
よびｉｐｉ　Ｑυ理部１９を設け、後述するような信号
処理を行ない、抗原−抗体反応の測定結果を出力する。

この測定結果は表示装置２０に供給して表示する。

本例では、レル７からの散乱光強度を、光検出器８から
の光源強度モニタ信号の短１侍間Ｔ均値出力によ−）て
、光源１から放ｕＪされるレーＩＦ光強度の変動を除去
して規格化したｉ景、その散乱光の強度ゆらぎのパワー
スペクトル密度の緩和周波数を求め、これに基いてセル
フ中での微粒子９の凝集状態、したがって抗原−抗体反
応の測定を行なう。

第２図は第１図に示したコリメータ１０の詳細な）ｔ１
成を示す図である。本例のコリメータ１０は空胴構造と
なっており、空胴１０ａは外光の影響を除くために暗箱
構造となっており、その内面は反射防止構造となってい
る。空胴１０ａの前後に（まピンホール＋ｏｂおよび１
０ｃを形成する。今、これらピンホール＋ｏｂおよび１
０ｃの半径をそれぞれａおよびａ、ピンホール間の距離
を１．空胴１０ａの内部媒体の屈折率を０．波長をλと
するとき、次式（１）を満足するように構成する。

本発明では、上述したように散乱光の強度ゆらぎのパワ
ースペクトル密度の緩和周波数を求めるが、パワースペ
クトル密度は、微粒子が波長程度の距離を拡散してゆく
ことによる１−四成分のゆらぎによる項と、散乱体積へ
の微粒子の出入りによって生ずる粒子数のゆらぎにＪ、
る項とから成っている。この内、干渉による散乱光のゆ
らぎｉよスペックルパターンの空間的なゆらぎとして観
測されるが、これをそのまま広い受光面を持った光検出
器１１に入射させると、受光面の面積に亘って空間的な
平滑化が行なわれるので、検出されるゆらぎは小さくな
ってしまう。そこで上述したようなピンホールを有する
コリメータ１０を用いて光検出器１１の視野を限定する
ことにより、ゆらぎを高感度で検出することができるよ
うになる。本実施例において上式（１）を満足させるに
は、空１１１０ａ内の媒体は屈折率ｎ＝４の空気で十分
実用的である。

すなわち、直径０．３ｍ１ｌｌのビンボール１０ｂ　、
　１０ｃを３０ｃｍ離したコリメータ１０を用いれば上
式（１）は満足されることになる。

上述した実施例においては、セルフに入用する光束４の
方向と、コリメータ１０の光軸方向とを９０°とし、入
射光束は直接光検出器１１に入射しないホモダイン法を
採用しＩこが、入射光束の一部を光検出器１１に入射さ
せるヘテロダイン法を採用することもできる。すなわら
、本発明にＪ３いては、第３図に示すようにセルフへの
入射光束４とコリメータ１０の光軸との成ず角度θは任
意にとることかで・きる。ここでホモダイン的に散乱光
を検出する場合には、光電子増倍管より成る光検出器１
１の出力信号は、散乱光の電界強度をＥ８とすると、そ
の自乗の平均１直Ｆ−Ｓ２に比例したものとなり、散乱
光と入射光とを併わせで検出するヘテロダイン的検出の
場合には、直接の入射光の電界強度をＥｅとすると、光
検出器１１の出力信号は、となる。ここで４はゆらぎが
ない（もしあったとしてｂ散乱光のゆらぎに比べて緩つ
くりしている）ので、光検出器１１の出力の変動成分は
殆んど第２項２　Ｅｅ・［Ｓに等しい。つまり、散乱光
の電界強度Ｅ８にほぼ比例した出力信号が得られること
になる。

また、ＴＩリメータ１０し上述した構成に限定されるも
のではなく、光検出器１１の視野を１スペツク１ルパタ
ーン以下に制限できるものであれば任意の構成とするこ
、とができる。

上述した装置を用い、光検出器１１の出力信号を低域通
過フィルタ１６を経てデータ処理装置１４へ供給し、光
検出器８からのモニタ信号とバに処理をして散乱光の強
度ゆらぎのパワースペクトル密度を求めた結果を次に説
明する。ここで定常確立過程ｘ（ｔ）のパワースペクト
ル密度Ｓ（［）は、次のように表わすことができる。

この（２）式をｂとに高速フーリエ変換を用いてパワー
スペクトル密度の計鋒を行なう。ずなわら、光検出器１
１からの出力信号を低雑音増幅器１５により、データ処
理装置１４におＩＪるΔ／Ｄ変換のω子化レベルを信号
の固成ができるだけ広くおおうように増幅し、この量子
化したデータをマイクロプロセッサによっＣ演算処理し
てパワースペクトル密度を求めた。このようにして求め
たパワースペクトル密度から免疫反応の進行状況を表示
装買２０で数値的に表示した。

第４図ａ３よひ第５図は、粒径がそれぞれ０．１８８μ
ｍおよび０．３０５／ｆｍのラテックス粒子を分散させ
た液をセル７に収容したときに得られるパワースペク１
−ル密度を示すものであり、これはローレンツ型バ１ノ
ースベクトル密疫を表わすものであり、散乱光の強度ゆ
らぎのパワースペクトル密度の内、干渉効果によるもの
である。これらのパワースペク１−ル密度の緩和周波数
（よ微粒子の直ｉ￥に反比例することがわかる。すなわ
ち、散乱光の強度ゆらぎは上述したように微粒子の運動
に基くコヒーレント尤の干渉による成分と、散乱体積内
の粒子数の変動による成分との合成されたものとなるが
、本実施例では干渉成分が主として検出されており、パ
ワースペクトル音度の緩和周波数は粒子が光の１　　　
　　波長の距離を移動する時間の逆数となるので、粒径
が大きくなると移動時間は長くなり、緩和周波数が減少
することになる。

第６図は横軸に粒径をμｍの単位でとり、縦軸にｊ−天
和周波教をとってそれぞれ対１２目盛りで示したもので
ある。すなわち、粒径０，０９１！ｉμｍ１７）粒子の
緩和周波数は約４００１１ｚ　、　　０．１８８μｍで
−（Ｊ釣２００１＋２　、　０．３０Ｊｚ、ｍ　′ｃは
約１００１１７．どなる。この第６図のグラフから明ら
かなように、パワースペクトル密度の緩和周波数は粒径
に反比例するので、この緩和周波数の変化から抗原−抗
体）こよる凝集の有無や凝集の程度を検出することがで
きる。

７Ａ７図および第８図は、粒径０，３μｍｎのラテック
ス粒子を緩衝液中に０．１小川％およびｏ、ｏｑ＜ｒｔ
ｍ％の濃度で分散さけたときのパワースペクトル密度を
示すグラフであり、ともにローレンツ型のパワースペク
トル密度が１ｑられていることがわかる。上ｊホしたよ
うに、散乱光の強度ゆらぎは粒？のブラウン運動による
１渉性成分と、散乱体（ζ目）・１０粒子数の変化によ
る非干渉性成分との和（こなるが、散乱体積内の粒子数
が少なくイｉす、干渉ｆ４成分が少なくなって、非干渉
性成分と同程度となるど、粒子のブラウン運動による散
乱光強度変化以外の成分も検出してしまい、抗原−抗体
反応を精度よく検出することはできなくなる。したがっ
て、粒子の濃度は、散乱体積内での入射光強度が十分前
られる程度に低く、かつ干渉性成分か非干渉性成分より
も大きくなるような範囲に選ぶ必要がある。

が、散乱体の粒径が一定−Ｃあれば相当広い粒子潤度に
口って相対ゆらぎは一定となる。

第１０図および第１１図は、直杆０．３μｍのラテック
ス粒子の表面に免疫グロブリンＧの抗体を固定したｂの
を、Ｔｒｉｓ　−１−ＩｃＪ！でＰ　ｌ−１７に調整し
た緩衝液に分散させたものに、抗原として１０−４　ｑ
　、、、／ｍｆｌおよび１Ｏ−９（＋　／ｍ　Ａの濃度
の免疫グロブリンＧを加えた抗原−抗体反応液をセルに
収容し、抗原−抗体反応の開始前と開始後（１５分後）
のパワースペクトル密度を示すものである。第１０図に
示す抗原濃度１０′□’（Ｊ／ｍｆ２の揚台には、反応
前の緩和周波数が約５０１１７．であるのに対し、反応
１５分後の緩和周波数が１０１１ｚに変化している。こ
れに対し、抗原濃度が１０−９ｇ　、、／　ｍ　、Ｑの
場合には、反応開始前の緩和周波数は約９５１７．で、
反応後の緩和周波数は約４０＋１１となっている。した
がって、抗原−抗体反応前後の緩和周波数の比Ｆを、 と定義し、この値を幾つかの抗原濃度についてう１ミめ
ると次表のようになる。

また、この関係をグラフに示づと第１２図に示すＪ、う
になる。すなわち、第１２図において横軸Ｌｉ抗原濃度
をとり、縦軸は緩和周波数の比Ｆの１１１°１をど−）
で示すものであるが、緩和周波数の比［を求めることに
より抗原濃度を検出することがＣさる。

一方、第１０図および第１１図において、抗Ｅ　−ＩＩ
Ｌ体反不反応１股にａ３ける相対ゆらぎの比（「〈）が
抗原濃度と一定の関係を右り゛ることもわかる。次（こ
このことについて説明４る。第１図におい（、尤険吊器
１１によって散乱光を変換しＬ：電気信号を以Ｔ・に小
・）ような伝達＋ｙ＋故を白りる低域通過フィルタに通
４’ ここに［Ｃは低域通過フィルタのカットオフ周波数であ
り、緩和周波数ｆｒよりも十分低い周波数とする。この
どき、低域通過フィルタの出力として得１られるｔ　ｉ
λｌのゆらぎのパリアンスは、〈δＩ＞　２＝に２　＜
Ｎ＞　　←に２　〈Ｎ〉２ｆｏ′［ｒ・・・（４） となる。ただしＫは定数、〈Ｎ〉は散乱体積中の平均粒
子数である。したがって、低域通過フィルタの出力電流
の相対ゆらぎとして次式（５）が成人γする。

ここて′Ｙは比例定数である。ここＣ散乱体（１″ｌ中
の粒子数は十分に大きいとすると、（５）式（，１次の
ように占き直りことができる。

したがって、パワースペクトル密度の緩和周波数ｆｒを
求めることにより相対ゆらぎを９出′？［ることができ
る。このとき相対ゆらぎ比Ｒは次式て表わりことができ
る。

この（７）式により相対ゆらぎ比Ｒを求め、これと抗原
濃度との関係をグラフにして求めたのが第１３図である
。このグラフより明らかなように、抗原−抗体反応前後
における相対ゆらぎの比Ｒを求めることにより未知の抗
原濃度を知ることができる。すなわら、測定に先立って
既知の異なる抗原濃度の標準サンプルについて相対ゆら
ぎ比］くを求めて第１３図のように検量線を求めておき
、未知の抗原淵［復の被検体にｐいて相対ゆらぎ比Ｒを
求め、先に求めた検量線に阜いて抗原濃度を知ることが
できる。

１ズ［のように、抗原−抗体反応前後の散乱光の強度ゆ
らき′のパワースペクトル密度の緩和周波数［ｒをそれ
ぞれ求めることにＪ、す、それらの比Ｆあるいは緩和周
波数「１に暴く相対ゆらぎ比Ｒから抗原；１度を知るこ
とができる。

以下、緩和周波数「ｒを自動的に終用する演算鷺埋部１
９の回路（１゛４成を説明する。

第１４図はその一例を示すしので、本例では高速フーリ
１変換部１８からのデータのうち緩和周波数ｒｒかｆｒ
在づる中間周波数部分よりも低い低周波部分のデータを
低周波ブ【」ツクメ［す３１に、中間周波部分よりも高
い高周波部分のデータを高周波ブ（１ツクメモリ３２に
それぞれ格納し、低周波ブ「］ツクメモリ３１に格納し
たデータから直線近似回路３３’ｒ：　、１３い−（−
次の最小自乗ｄ、により曲線のスペクトル密度を求め、
また１３周波ブロックメモリ３２に格納したデータから
曲線近似回路３４においてＴ次の最小自乗法により曲線
のスペクトル密度を求めて、ぞれらのスペクトル密度の
交点の周波数を交点検出回路３５において緩和周波数ｆ
ｒとして求めて表示装置２０に表示させる。

すなわら、散乱光のパワースペクトル密度は、ト述した
ようにロールンツ型となるから、低周波域（ｒ　＜　ｆ
ｒ　）では白色スペクトルつまり直線となる。そこで、
本例ぐはｆｌｔ周波ブロックメモリ３１に格納されたデ
ータを、周波数の低いデータから順に読出して直線近似
回路３４にＪ３いて、（ただし、Ｖｉは測定値を、ｂ＋
、ｔＭ似埴を示３１）の−次の最小自乗法により直線の
スペクトル密度へ５１こめる。

また、高周波ブロックメモリ３２に格納したＪ゛−タか
らは、Ｘｌを周波数、ｙｌを測定１１１’＋として曲線
近似回路３４において次の二次最小自乗法に」、って曲
線のスベク１ヘル方度を求める。すなわら、最小自乗法
による近似曲線の方程式を、 ｙ　＝ａｘ’　＋ｂｘ→−Ｃ・・・（９）とし、測定頭
の曲線を ｙｉ＝ａｘ、：　＋ｂｘ＋ｃ　　　　・＜１０）として
、 を演算し、これによって求めたａ、ｂ、ｃを式（１０）
に代入して曲線のスペクトル密度を求める。

このようにして、直線近似回路３３および曲線近似回路
３４において求めた直線のスペクトル密度と曲線のスペ
クトル密度との交点の周波数を交点検出回路３５におい
て緩和周波数１ｒとして求める。

第１５図は演算処理部１９の他の回路構成を示すもので
ある。本例では、以下のローレンツ型スペク１ヘルの理
論式を用いて緩和周波数「ｒを求める。

このため、第１４図の場合と同様に、高速−ノーリ１変
換部１８からのｆ−タのうち、緩和周波数［ｒ／）ＶＹ
＋’存する中間周波部分よりし低い低周波部分の１−タ
を（Ｌ（周波ブロックメモリ３１に、中間周波部分より
も高い高周波部分のデータを高周波ブロックメモリ３２
にそれぞれ格納し、低周波ブロックメｔす３１に格納さ
れたデータから平均δＢ）回路３Ｇにおいてパワースペ
クトル密度の平均１＋ｍ５（０）を→出する。この低周
波ブロックメｔす３１に格納する７゛−タは緩和周波数
ｆｒよりも確実に小さいものとし、そのデータ数は１個
でもよいが高（ス頼性を得るには複数個とするのがよい
。

また、高周波ブロックメモリ３２に格納したデータは、
スムージング回路３７においてスムージング処理した後
その任意の周波数ｆおよびそのパワースペクトル密度Ｓ
（［）をメモリ３８に格納する。

スムージング処理は、順次のデータをａｌ、ａ２゜ａ３
＋ａ４．ａ５＋”、、とすると、スムージング処理を１
回行なった後のデータａ’１．　ａ’２　、　ａ’３　
。

ａ’４　、　ａ’５　、ａ’６として、例えばｔ−ａ２
＋ａ３＋ａ４ａ６−　ａ６ ′　のように順に計締して行なう。なお、好適には再度
同様にスムージング処理する。このようにすれば、更に
データの列のバラツキが少なくなり、よりローレンツ型
の曲線に近づき計算値の信頼性を高めることができる。

平均計算回路３６で求めた平均値Ｓ　（０）　、メ七り
３８に格納した高周波部分のＥ［愈の周波数ｆｒおよび
そのパワースペクトル密１１ｆｆＳ　（ｆ　）は［篩土
回路３９に供給し、ここで上記（１２）式に基いて緩和
周波数ｒｒを締出して表示装置２０に表示させる。

なお、第１４図および第１５図において、低周波部分お
よび高周波部分は予め設定しておくか、あるいは測定値
に基いて自動的に設定するようにする。

本発明は上述した例にのみ限定されるものではなく、幾
多の変形または変更が可能である。例えば、第１４図に
おいては、−次の最小自乗法による直線近似回路３３に
代えて第１５図に示したようイτ甲均計算回路によって
直線のスペクトル密度を求めるようにしてもよいし、二
次の最小自乗法による曲線近似回路３４に代えて一次の
最小自乗法による直線近似回路によって高周波部分のデ
ータを直線近似してもよい。また、第１５図においては
、゛１乙均計締回路３６に代えて第１４図に示すような
一次の最小自乗法による直線近似回路によって平均値Ｓ
　　　　−（０）を求めるようにしてもよい。更に、表
示装置２０での表示は緩和周波数［ｒに限らず、パワー
スペクトル密度データをも合わＵて表示してもよいし、
演算により求めた緩和周波数ｒｒｔ二基いて更に所要の
演算を行なって抗原濃度を表示させるようにしてもよい
。また、上述した説明は免疫グロブリンＧ（ＴＯＧ＞に
ついて例示したが、免疫グ１−１１リンＡ（ＩｇＡ）、
Ｉｃ＋Ｍ、Ｉ（ＩＤ、ｌリド。

オーストラリア抗原、梅毒抗原、インシー１リンなど抗
原−抗体反応によって凝集を生ずるすべでの物！１の測
定に適用することができる１、更に、」述した実施例で
は、微粒子の表面に抗体を固定しで、被検体中の抗原を
検出４るようにしたが、微粒子の表面に抗原を固定し、
被検体中の抗体を検出することも′Ｃ−きる。ＪＥだ、
上述した実施例では微粒子としてポリスチレンラテック
ス粒子を用いたが池の有機物粉子や、ガラスなどの無機
物粒子を用いることもできる。更に、上；ホした実施例
（・は抗唄−抗体反応液の中には最初から微粒子を存在
させたか、このような微粒子を用いずに、抗原−抗体反
応の結果として生ずる微粒子状生成物による散乱光を利
用することもできる。このような抗原−抗体反応の実施
例としては、抗原としてヒト絨毛ゴナドトロピン（ＨＣ
Ｇ＞を用い、抗体として抗ヒト絨毛ゴナドトロピン（抗
１−（ＣＧ　）を用いる反応があり、この反応により生
成される抗原〜抗体複合体は微粒子として扱うことがで
きる。また、抗原そのものを粒子として用いることもで
きる。

このような抗原−抗体反応としては抗原として力ンディ
ダ・アルビカンス（酵ｆｆ１）を用い、抗体として抗カ
ンディダ・アルビカンスを用いる例や、他に１＋球、ｍ
胞、微生物などを粒子として用いることらてきる。更に
、第１図に示す実施例では抗原−抗体反応液をセルに収
容して測定を行なうバッチ方式としたが、抗原−抗体反
応：１々を連続的に流しながら測定を行なうフロ一方式
どすること１−）勿論可能である。

（発明の効果） 以ト述べたように、本発明においては、ｙ／１粒子によ
る散乱光の強度ゆらぎが抗原−抗体反応と密接な関係に
あることを利用し、この強度ゆらぎのパワースペクトル
密度の緩和周波数を自動的に求め、この緩和周波数に基
いて抗原−抗体反応を測定するものであるから、高価な
標識試薬や高価でかつ大形な分光計を用いずに、高い精
瓜および再現性を以って測定を行なうことができ、しか
も測定時間の短縮、抗原−抗体反応測定の自動化が容易
に達成できる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の免疫反応測定方法を実施する装置の一
例の構成を示１線図、 第２図は同じくそのコリメータの詳細な構成を示Ｉノ線
図、 第３図は本発明のＱ疫反応測定り法を実施する装置の他
の例の要部の構成を示す線図、７Ａ４図Ｊ′ｉよび第５
図はそれぞれ粒径が０．１８８μｍ、１５よび０．３０
５μｍの微粒子に対するパワースペクトル密度を示リグ
ラフ、 第６図は粒径と、パワースペクトル密度の緩和周波数と
の関係を示すグラフ、 第７図および第８図はそれぞれ粒子濃度が０．１重量％
および０．０９重け％のときのパワースペクトル密度を
示すグラフ。 第９図は粒子濃度と緩和周波数との関係を示すグラフ、 第１０図および第１１図はそれぞれ抗原ｉＲ度が１０−
４ｇ　、’ｍ　（ｌおよび１０−３ｇ　／ｍ　１に対す
る抗原−抗体反応前および後のパワースペクトル密度を
示すグラフ、 第１２図は抗原潤度と緩和周波数の比との関係を示ずグ
ラフ、 第１３図は抗原）１度と相対ゆらぎ比どの関係を示リグ
ラフ、 第１４図は緩和周波数を自動的に求める演粋処理部の一
例の構成を示すブロック図、 第１５図は同じく他の例の構成を示すブロック図である
。 １・・・レーザ光源　　　２．　４．　５・・・光束３
・・・半透鏡　　　　　６・・・集光レンズ７・・・セ
ル　　　　　　８・・・光検出器９・・・微粒子　　　
　　１０・・・コリメータ１１・・・光検出器　　　　
１３．１５・・・低雑音増幅器１４・・・データ処理装
置　１６・・・低域通過フィルタ１７・・・Ａ／Ｄ変換
部　　１８・・・高速フーリエ変換部１９・・・演算処
理部　　　２０・・・表示装置３１・・・低周波ブロッ
クメモリ ３２・・・高周波ブロックメ七り ３３・・・直線近似回路　　３４・・・曲線近似回路３
５・・・交点検出回路　　３６・・・平均計粋回路３７
・・・スムージング回路 ３８・・・メモリ　　　　　３９・・・［ｒＱ出回路第
１Ｏ図 第１１図 第１２図 抗原１度ｒ＊／ｖｒｉ）’ 第１３図

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、少なくとも抗原および抗体を含む反応液に輻射線を
   投射し、抗原−抗体反応により生成される微粒子による
   散乱光または反応液に加えた抗体または抗原を固定した
   微粒子の抗原−抗体反応によって生ずる散乱光をホモダ
   イン的にまたはヘテロダイン的に検知し、この検知出力
   を演算処理して強度ゆらぎのパワースペクトル密度の緩
   和周波数を自動的に求め、この緩和周波数に基いて抗原
   −抗体反応を測定することを特徴とする免疫反応測定方
   法。