JPS61106592A - 新規抗生物質、その製造方法および該物質を含有する医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はラセミ形若しくは光学活性形な以下の一般式■
： ただし、上記式において、ＸはＨまたはＣＩを表わし、
ＲＦｉＨまたはＣＨ３を表わす。

で表わされる薬学的に活性な化合物およびその薬学的に
許容しうる塩に関する。

また、上記式における波線は、２個の６員環糖リンダに
対する結合を表わし、且つ各糖リングに結合する置換基
がどのような立体配置であってもよいことを意味する。

また、各糖リングの配座は、チェアー型および／または
ボート型である。

上記新規化合物は、抗菌剤および抗腫瘍剤として使用す
ることができる。該新規化合物は、その抗菌作用の故に
以下において抗生物質と呼ぶが。

非抗生物質関連作用をも有するものである。

本発明は更に、該新規化合物の製造方法も含む。

該方法において使用される微生物は、以前にはアクチノ
マデユラ・フルヴア（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｆｕ
ｌｖａ）ｓｐ、ｎｏｖ、　　と称されていた。アクチノ
マデユラ・　メリアクラ（Ａａｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　
ｍｅｌｌｉａｕｒａ）　ｓｐ、ｎｏｖ。

ＳＣＣ１６５５と称されるアクチノマデユラ属にｉする
新規な放線菌である。

抗生物質ＡＴ２４３３複合体′は、上記新規微生物Ａｃ
ｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａの生物学的
に純粋な培養を用いる醗酵によって製造される。抗生物
質ＡＴ２４３３は４種の化合物の複合体であシ、その各
々は上記一般式Ｉによって表わされる。ここに該４種の
化合物の複合体を「抗生物質ＡＴ２４３３Ａ１．Ａ２．
Ｂ□およびＢ２と呼び、上記式Ｉおよび以下の第１表に
よって特定される。

本発明はまた。抗生物質ＡＴ２４３３複合体を生産する
ことができるＡｃｔｉｎｏｍａａｕｒａ　’ｍｅｕｉａ
ｕｒａ　８ｐ。

ｎｏｖ、の菌株を、同化可能な炭素源および窒素源を含
む水溶性栄養培地中において、水中の好気性条件下で、
該菌株によって該栄養培地中に抗生物質ＡＴ２４３３複
合体が生産されるようになるまで培養することを含む、
抗生物質ＡＴ　２４３３複合体の製造方法をも提供する
ものである。該抗生物質１′・　　　　　ＡＴ２４３３
複合体を回収し、抗生物質ＡＴ２４３３１′１．・ Ａ、、Ａ２．Ｂ□およびＢ２と呼ぶ４種の構成成分に分
離する。

上記式Ｉで表わされる化合物および抗生物質ＡＴ２４３
３複合体を製造する好ましい培養とは。

ＡＴＣＣ３９６９１と同定される性質を有する微生物Ａ
ｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａの生物学
的に純粋な培養である。

抗生物質ＡＴ２４３３複合体および該複合体から単離さ
れた４種の構成成分は、種々のダラム陽性菌およびダラ
ム陰性菌に対して効果があり、且つ。

例えばマウスのＰ−３８８白血病のような実験動物の腫
瘍系に対して活性を示す。

本発明は更に、ラセミ形若しくは光学活性形な上記一般
式Ｉ（ただし、式中ＸはＨまたはＣＪであシ、ＲはＨま
たはＣＨ３である）で表わされる化合物若しくは、その
薬学的く許容しうる塩と、不活性な薬学的に許容しうる
担体または賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。

本発明は他の見地からすると、悪性腫瘍に感作された哺
乳動物宿主を治療する方法を提供するも　　　　　　十
のであシ、該方法は、悪性腫瘍を有する該宿主に。

上記一般式Ｉで表わされる化合物若しくはその医薬組成
物の治療学的有効量を投与することを含むものである。

更に本発明は他の見地からすると、細菌感染症を治療す
る方法を提供するものであシ、該方法上、該感染の治療
に十分な量の上記一般式■の化合物若しくはその医薬組
成物を、かかる治療を必要とする宿主に投与することを
含む。

微生物 一般式Ｉで表わされる抗生物質ＡＴ２４３３複合体は、
Ｓｅｃ　１６５５株と称されるＡｃｔｉｎｏｍａｄｕｒ
ａｍｅｌｌｉａｕｒａ　ｓｐ、ｎｏｖ、　　を生物学的
に純粋培養する醗酵によって製造される。Ａｃｔｉｎｏ
ｍａｄｕｒａｍｅｌｌｉａｕｒａ　ＳＣ１６５５はカリ
フォルニア州プリスト　、ｚ、＝ｒ−プ（Ｂｒ１ｓｔｏ
ＩＣｏｖｅ　）で採集した±４ζ本から得られた。

上記微生物全継代培養したものが、メリーランド州ロツ
クヴイルのアメリカン　タイプカルチャー　コレクショ
ン（ＡＴＣＣ）　　の永久コレクションに加えられ、寄
託に当たって受託番号ＡＴＣＣ３９６９１号が指定され
た。

１）生産株Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕ
ｒａ　ｓｐ、　ｎｏｖ。

ＡＴＣＣ３９６９１に関する記載 ここで用いられた分類学的方法は、ゴートン（Ｇｏｒａ
ｏｎ、　Ｒ６＋ｌ　Ｅ　＠　＠′″）Ａ／　力／Ｉ／デ
ィア・マデュラ（Ｎｏｒｃａｒｄｉａ　ｍａｄｕｒａｅ
　）（Ｖｉｎｃｅｎｔ　）　Ｂｘａｎｃｈａｒｄの識別
のための基準”ジャーナル・オプ・ジェネラル・ミクロ
バイオロジー（Ｊ、Ｇｅｎ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）
、　４５　：３５５〜３６４．１９６６　）、　　リュ
ーデマンおよびプロｒスキー（Ｌｅｕｄｅｍａｎｎ、　
Ｇ、　Ｈ，、ａｎｄ　Ｂｒｏｄｓｋｙ、　Ｂ、　。

１ミクロモノスポラ−カルボナシ（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏ
ｓｐｏｒａｃａｒｂｏｎａｃｅａ）　　ｓｐ、　ｎｏｖ
、およびエイルニノマイシン生産性微生物”アンチミク
ロバイアル・エージエンツ・ケモセラビューティツクス
（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ。

Ａｇｅｎｔｓ＋　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、　）、　４７〜
５２．１９６４　）　、ホランおよびブロードスキー（
Ｈｏｒａｎ、　Ａ、Ｃ１，ａｎｄ　Ｂ、Ｃ。

Ｂｒｏｌａｋ７．、　　”新規抗生物質生産性アクチノ
マデユラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｉｕｒａ　）　、アクチノ
マデユラ・キジャニアータ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ
　ｋｉｊａｎｉａｔａ）　ｓｐ−ｎｏｖ、　、　”イン
ターナショナル・ジャーナル・オプ・システマティック
・バクテリオロジ−（工ｎｔ−Ｊ　、　５ｙｓｔ、Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｌ、。

３２　：　１９５〜２００．１９８２）、はツカ−等（
Ｂｅａｋｅｒ。

Ｂ、、Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ、　Ｍ＋Ｐ＋、　ａｎｄ
　Ｌｅａｈｅｖａｌｉｅｒ、　Ｈ，Ａ＋。

“各属若しくは好気性放線菌株から得られる細胞壁の化
学成分τアプライド゛・ミクロバイオロジー（Ａｐｐｌ
、　Ｍｉａｒｏｂｉｏｌ、、　１３　：　２３６〜２４
３．１９６６　）。

レチェバリアおよびレチェパリア（Ｌｅｃｈｅｖａｌｌ
ｅｒ。

Ｍ、　Ｐ、　ａｎｄ　Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ、　Ｈ，
Ａ、、　＠好気性放線菌の分類における基準としての化
学成分”、工ｎｔ、　Ｊ。

Ｓｙｇｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、、　２０　：　４８
’７〜４９３．１９７０）シアリングおよび！ットリー
グ（Ｓｈｉｒｋｉｎｇ、　Ｅ、Ｂ、ａｎｄＤ、Ｇｏｔｔ
ｘｉｅｘ、　”ストレプトミセｘ　（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｅ）ｅｐ＋の同定方法”、　工ｎｔ、Ｊ、　Ｓ　
ｅｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、、　１６　：３１３〜３
４０．１９６６　）およびワクスマン（Ｗａｋｓｍａｎ
　。

Ｓ、Ａ、、　”　Ｔｈｅ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔａ１
ｅａ″、第２巻、　ＴｈｅＷｉｌｌｉａｍｓ　ａｎａ　
Ｗｉｎｋｉｎｇ　Ｃｏ、、　Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、　Ｗ
ｕｌ、）による方法を引用した。

２）　Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａ
　ＡＴＣＣ３９６９１Ｏ［、、゛　　　　　　　　肉眼
による特徴３０℃で１４〜２１日間培養したところ。

Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌ、１）ａｕｒａ　Ａ
ＴＣＣ３９５９１はエマーソンのＮＺＡ−グルコース、
イーストエキス−グルコース、ｌ５Ｐ２．６および７寒
天培地上で良く成長した。他のほとんどの培地上におけ
る成長はそこそこのものである。試験した培地上では拡
散しうる色素は形成されなかった。白い固ｔｂ状の気中
菌糸がツアペック−シュークロース、イーストエキス−
グルコース、工５Ｐ−３および４寒天培地上に形成され
た。栄養菌糸体の色素は、黄褐色から金色乃至茶色であ
る。色素の記載に用いた色素基はカラー４ハーモニー・
マニュアル、第を刷。

Ｃｏｎｔａｉｎｅｒ　Ｃｏｒｐ＋ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ
、　Ｃｈｉｃａｇｏ、　　１９５８に示された色名表お
よび色名辞典、　ＣｏｎｔａｉｎｅｒＣｏｒｐ、ｏｆ　
Ａｍｅｒｉｃａ、　Ｃｈｉｃａｇｏ、　１９５０．　Ｔ
ａｙｌｏｒＨ，Ｄ、、　Ｋｎｏｃｈｅ、　Ｌ、ａｎｄ　
Ｇｒａｎｖｉｌｌｅ、　Ｗ、　Ｃ，に記載の色名に従っ
た。培養の特徴は第２表に示した。

３）　Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌ’１ｉａｕｒ
ａ　ＡＴＣＣ３９６９１の顕微鏡的特徴 水・寒地培地上で３０℃で１０〜１４日間培養したとこ
ろ、多くの、細かい（直径０．５〜０，８ミクロン）気
中菌糸が形成された。該気中菌糸の縦に沿って１０〜２
０の胞子から成る直線状或いはややかぎ形に曲がった鎖
状の長い担子器が見られた。該気中菌糸の両端には、胞
子を有する２個の担子器が特異的に観察された。胞子は
円筒状で、動かず、直径が１．０〜２．０ミクロンで滑
らかな壁面を有している。

４）　Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａ
　ＡＴＣＣ３９６９１の“生理学的特徴 Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　ｍｅｌｉａｕｒａ　　Ａ
ＴＣＣ３９５９１はイーストエキス−ダルコース寒地培
地上で約２７〜４０℃の温度範囲で成長する。至適成長
温度は約３０〜３５℃である。約１０℃および４５℃で
はほとんど成長しなかった。上記菌株の他の生理学的性
質を第３表に示した。Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅ
ｌｌｉａｕｒａＡＴＣＣ３９６９１はほとんどの糖およ
び多くの有機酸をその成長に用いることができる。炭素
利用の結果については第４表にまとめた。

第２表 注）　　Ｇ：成長 Ｓ　：表面の特徴 ＡＭ：気中菌糸 ＤＩ’Ｐ　：拡散性色素 Ｃ：色 第３表 第４表 注　１）リューデマンおよびプロトスキー（Ｌｅｕｄｅ
ｍａｎｎ＆　Ｂｒｏｄｓｋ７）の培地（Ａｎｔｉｍｉｃ
ｒｏｂ＋ＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒ、、　４７〜
５２．　１９６４　）２）ボードｙ　（Ｇｏｒｄｏｎ　
）の培地（Ｊ、Ｇｅｎ。

Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　４５　：　３５５〜３６４　、
１９６６　）５）細胞壁のアミノ酸および細胞の全糖成
分Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａ　Ａ
ＴＣＣ３９６９１の細胞壁をベラカー等（Ｂｅａｋｅｒ
　ａｔ　ａｌ＋、　Ａｐｐｌ−Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、、
　１３　：　２３６〜２４３　、１９６５　）およびヤ
マグチ（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ、　Ｊ、Ｂａｃｔｅｒｉｏ
’ｌ、、　８９　：　４４１〜４５３．１９６５）によ
って記載された方法に従って試験し、アミノ酸であるメ
ゾージアミノピメル酸が含まれていることを見い出した
。また全細胞を加水分解して得られる特徴ある糖成分は
、レチェバリアおよびレチェバリア（Ｌｅｃｈｅｖａｌ
ｌｅｒ　ａｎｄＬｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ、　Ｂｉｏｌｏ
　ｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓａｎ
ｄ　Ｒａ１ａｔｅｄ　Ｏｒｇａｎｉｓｍｓ、　１）　：
　７８〜９２　、１９７６）記載の方法に従ってマデュ
ロース（３−ｏ−メチル−Ｄ−ガラクトース）であると
同定された。

細胞壁の分析および形態的特徴から、培養物はＡｃｔ　
ｉｎｏｍａｄｕｒａ　属に属する一種であると分類され
、更にＡｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅ’ｌ’１ｉａｕ
ｒａ　ＡＴＣＣ３９６９１と命名された。上記新規なＡ
ｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａＡＴＣＣ
３９６９１をＡｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　属の既に寄
託されている１３種と比較した。Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕ
ｒａｍｅｌｌｉａｕｒａ　ＡＴＣＣ３９６９１は、寄託
されている１３種の株のうち、　　Ａ、ｈｅ’１ｖａｔ
ａ、　Ａ、ｆｌａｖａおよびＡ、　ｂｒｕｎｎｅａ　と
栄養菌糸体の色が共通であったが。

Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａ　ＡＴ
ＣＣ３９６９１は胞子鎖の形態、気中菌糸の色、メチル
−β−Ｄ−グルコシドの利用および抗生物質の生産とい
う点においてＡ、　ｈｅｌｖａｔａ　　と異なっている
。また、　　Ａｃｔｉｎｏｍａａｕｒａｍｅｌｌｉａｕ
ｒａ　ＡＴＣＣ３９６９１は気中菌糸の形成、全気中菌
子が胞子鎖に分断されているような菌糸を有している胞
子の形態、メチル−β−Ｄ−ゲルコンドの利用および抗
生物質の生産という点においてＡ、　ｆｌａｖａ　　と
異なっており、更に、気中菌子の形態および色、メチル
−β−Ｄ−グルコシド　およびマンニトールの利用、お
よび抗生物質作用という点においてＡ、　ｂｒｕｎｎｅ
ａとも異なっている。　第５表は、Ａｃｔｉｎｏｍａｄ
ｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａ　ＡＴＣＣ３９５９１を、
既に命名されているＡｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　属の他
の１　　　　　菌株と比較した表である。

Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍ５ｌ−１）ａｕｒａ　Ａ
ＴＣＣ３９６９１の特異的な形態および生理学的並びに
培養上の特徴。

更には新規抗生物質ＡＴ２４３３複合体の生産性という
点に基づいて、上記培養物はＡｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ
属の、従来種とは異なる新種であると考えられた。

Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　属に属する該新種の他の菌
株が発見されうろことが考えられるが、該菌株型は亜種
型である。

本発明は上述したＡｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｎｉ
ａｕｒａＡＴＣＣ３９６９１の特に好ましい菌株を用い
たり、或いは上記の記載に十分に応じる個体を使用する
ととに限定されない。例えば、Ｘ線照射、紫外線照射、
ナイトロジエン・マスタード処理、ファージ感染等の慣
用手段によって作製される。抗生物質ＡＴ２４３３複合
体生産性の新種菌株或いは変異株をも含むことを本質的
に意図している。

醗酵 Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａ　　（
例えば、　　ＡＴＣＣ第３９６９１号として寄託された
菌株）を適当な培地中、一定条件下で醗酵を行うと、抗
生物質ＡＴ２４３３複合体を生産し、該複合体から、上
記一般式■で表わされ、且つＡＴ　２４３３　Ａ、、　
ＡＴ　２４３３Ａ２゜ＡＴ２４３３Ｂ　およびＡＴ２４
３３Ｂ２　と命名された４種の化合物を単離した。

上記抗生物質を生産する醗酵はまず９通常２工程または
３工程で製造される活発な栄養接種材料を製造すること
から始める。かかる接種材料を製造するために適合した
培地は以下に培地Ａおよび培地Ｂとして述べる。接種お
よび醗酵は、ＰＨが約６，５〜８．５に維持された培地
中で行うが、接種はｐＨ約７．５．醗酵はｐＨ７，０で
行うことが好ましい。

正しいｐＨ値を保つためには１通常炭酸カルシウムのよ
うな適当なバッファーを培地中に加えることによって行
う。

栄養接種および醗酵は、約２７〜４０℃の温度で行う。

栄養接種材料を準備し、醗酵を行うための好ましい温度
範囲は約３０〜３５℃である。

一般に、栄養培地は滅菌し、且つ接種前に冷却した適切
な□□□酵容器またはフラスコに用意する。

しかしながら、該培地は使用前には約０℃の無菌状態で
保存する。

Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａの保存
培養物は、全液体培養基を冷凍して保存する。

１）接種材料の調製 本発明の抗生物質ＡＴ２４３３複合体を製造するために
は、活発に成長する栄養接種材料が好ましＸ、）。

一般には、接種材料の調製は、２段階若しくはそれ以上
の工程で行われる。大規模な醗酵（例えば約５０１りメ
場合には、接種材料は３段階工程で調製することが好ま
しい。

栄養接種材料を調製するために適した培地は以下の通り
である。

培地Ａ２ ビーフェキス　　　　　　　３Ｉ トリプトース　　　　　　　５Ｉ セレロース　　　　　　　　１ｙ ポテトスターチ　　　　　２４Ｉｉ イーストエキス　　　　　　５１ 炭酸カルシウム　　　　　　２Ｉｉ 蒸留水　　　　　　　　１．ＯＪ 来　必要な場合、ＮαＯＨでｐＨを７．５１Ｃ調整する
。

滅菌した培地Ａ３０１）ＬＩＫ接種するには。

Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａの５　
ｖｏｗ、％懸濁液の新たに溶かした液体培地２−を使用
する。

）Ｊ　　　　　７う３°は・約３００ｒｐで２イ７チの
振幅を有する振盪培養器上で、約３０’Ｃで約４８〜９
６時間。

好ましくは約７２時間培養する。

、２）第２段階の接種 滅菌した培地Ａ３００ｆＩＩｌを含む複数の２１の三角
フラスコ中に、上記５ｖｏ１０％の第１段階の接種材料
２５ｍを入れて培養する。第１の接種段階で記載した培
養手頴を繰り返す。

３）第３段階の接種（任意） 容量２ｊの三角フラスコ中に入れた滅菌した培地Ｂ５０
０−の各々に対して、＄２段階の接種材料２５ｄを使用
する。フラスコは約３５Ｏｒｐｍで攪拌しながら、約３
０℃で約２４〜７２時間、好ましくは約４８時間培養す
る。約０．３５空気容量／醗酵容量／分（ＶＶＭ）で通
気する。

本発明の一態様によれば、上記第３の培養工程を行わな
くともよい。抗生物質の生産は、第２の接種工程で開始
するからである。

４）抗生物質の生産（Ｒ酵） 満足出来、且つ再現しうる収量の抗生物質を製造するた
めには、培地Ｂと命名された以下の培地が適当であるこ
とがわかった。

培地Ｂ イーストエキス　　　　　５１／ＩＩ セレロース　　　　　　　１０１／Ｉｔ可溶澱粉　　　
　　　　　２０１）／７１ＮＺ７ミン（ディ７コ社）　
　　　５１／１炭酸カルシウム　　　　　　４９／ｌ 蒸留水　　　　、；１） 滅菌後のｐＴｉ　　　　　　　　７．０上述の如く準備
した第２段階の接種材料５００ａｄを含む１０ノの滅菌
培地Ｂを培養する。上記醗酵混合物を、約２７〜４０℃
、好ましくは約３０〜３５℃ノ温ｉテ、　各ｋ　約３５
Ｏｒｐｍ　＞　！ヒ０．３５ＶＶＭ　ノ攪拌および通気
を行いながら培養する。必要ならば。

希酸または希アルカリを添加して醗酵のｐＨを約６．８
〜７．５に保持する。通常は希酸若しくは希アルカリの
添加は必要としない。しかしながら、普通の醗酵では、
ｐＨはいったん約７．５に上昇し、醗酵の終わりまでに
は再び中性に戻る。

抗生物質ＡＴ２４３３の生産は、ネオｉイシンアツセイ
寒天（ＢＢＬ）中におけるミクロコツカス・ルテウス（
Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　１ｕｔｅｕｓ）　ＡＴＣＣ９
３４１また）家スタフィロコッカス・アウレウス （Ｓｔａ　ｈ　１ｏａｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）　２
０９　ｐＨ対する全液体培地ウェルアッセイによって追
跡した。

抗生物質ＡＴ　２４３３複合体は、エキスの約２倍量の
酢酸エチルのような混和しない有機溶媒を用いて、液体
培養基を２回抽出することによって液体培養基から単離
する。抽出物を集め、蒸発させ。

残渣を例えばスケリソルプＢ　（Ｅ３ｋｅｌｌｙｓｏ１
ｖｅ　Ｂ　）のような炭化水素およびメタノールに溶解
する。１゜容量のメタノール当り１部の水を加えて、抗
生物質ＡＴ　２４３３複合体の液相一液相分配を行う。

水性メタノール層を分離し１例えばスケリソシフ３２部
で抽出する。更に水：メタノールが１：３（ｖ／′ｖ）
となるように水を追加し、これを例えば等容量の４塩化
炭素で３回抽出する。次いで水：メタノールが１　：　
２　（ｖ／ｖ）となるように水を追加し、これを等容量
のクロロホルム（またはメチレンクロリド）で６回抽出
する。該クロロホルム抽出物を集めて蒸発させると残渣
が残る。該残渣を、クロロホルム：メタノール：水の４
：４：３（Ｖ／Ｖ／Ｖ　）混合液の下層を溶離剤として
用い、シリカゲルカラムで普通圧（ｍｅｄｉｕｍ　ｐｒ
ｅｓｓｕｒｅ　）液体クロマトグラフィーに付する。溶
出を行い。

ＡＴ　２４３３Ａ１およびＡ２を含む７ラクシヨ／（Ａ
１とＡ２はシリカゲルのｔｉｃ板上で似たＲｆ値を示す
）を集め蒸発すると、ＡＴ２４３３Ａ□とＡ２との混合
物を与える。同様に、ＡＴ２４３３Ｂ□とＢ２　　とを
含むフラクションを集めて蒸発することによって、　Ａ
Ｔ２４３３Ｂ１とＢ２との混合物を与える。ＡＴ　２４
３３Ａ□およびＡ２をシリカゲル上で、クロロホルム（
１ｑｌＩＮＨ４０Ｈ）と、メタノール：クロロホルム（
１嗟ＮＨ，ＯＨ）　ノ１　：　１０　（Ｖ／Ｖ）混液と
の連続濃度勾配を用いて普通圧液体クロマトグラフィー
に付す。

ＡＴ　２．４３３Ａ１とＡ２との混合物を含む７ラクシ
ヨン（ｆｉｌｅで決定する）を集め蒸発乾燥すると固体
を与える。同様にしてＡＴ２４３３Ｂ□とＢ２とを精製
する。ＡＴ　２４３３Ａ２からＡＴ２４３３Ａｔを分離
するには、シリカゲル処理したオクタデシルシラン（Ｃ
−１８シリカゲル）のカラムを用（１て、アセトニトリ
ル：メタノール：　０．ＩＭ酢酸７／％ニウム４　：　
３　：　３　（Ｖ／Ｖ／Ｖ）の溶離剤によって普通圧液
体クロマトグラフィーに付することによって行う。

溶離液をｔｌｃで追跡し、粗ＡＴ　２４３３　Ａ２とＡ
Ｔ２４３３Ａトを含むフラクションを各々回収し、蒸発
乾燥する。該粗ＡＴ２４３３Ａ２は、Ｃ−１８シリカゲ
ル上酵 り返すことによって精製する。

ＡＴ　２４３３　Ｂ１は、Ｃ−１８シリカゲル上でアセ
トニトリル：メタノール：酢酸アンモニウム４：３：３
　（ｖ／ｖ／ｖ）混液を溶離剤として用いる普通圧液体
クロマトグラフィーによってＡＴ　２４３３　Ｂ２から
分離する。

本発明の化合物９．即ちＡＴ　２４３３Ａ１．ＡＴ　２
４３３Ａ２．　ＡＴ　２４３３　Ｂ１およびＡＴ　２４
３３　Ｂ２の構−遺髪家赤外、　ＵＶｊ”Ｈ＄’よび１
３ＣＮＭＲおよびマススイクト　　　　・ルな分析する
ことによって決定した。

旦ユ旦巳ユ些ユ田り二二μｒ山２ 長４ひ旦すぜ狸！Ｉ建見 抗生物質ＡＴ２４３３Ａ□、　ＡＴ　２４３３　Ａ２．
　ＡＴ２４３３Ｂ□およびＡＴ　２４３３　Ｂｚの各種
のグラ、ム陽性菌およびダラム陰性菌に対する抗菌作用
を決定するためにｉｎ　−ｖｉｔｒｏで試験を行った。

ｉｎ　−ＶｉｔｒＯの抗菌作用試験はミュエル・ヒント
ム寒天培地（ＭＨＡ　）中、ｐＨ７，４で慣用の寒天希
釈法によって行なった。

抗生物質ＡＴ　２４３３　Ａ□、Ａ２．Ｂ工およびＢ２
はダラム陽性菌に対して活性であることが判明した。こ
れら４種の抗生物質は全て、サルシナ・ルテア（Ｓａｒ
ｃｉｎａ　１．ｕｔｅＰＬ）（ＡＴＣＣ９３４１）　　
に対して最大のｉｎ　−ｖｉｔｒｏ抗菌作用を示し、Ａ
Ｔ　２４３３　Ａ□およびＢ□は０．２５（財１／ｒｄ
、耶Ａ、４８時間）の最小阻害濃度（ＭＩＣ）を有し、
　ＡＴ２４３３Ａ２およびＢ２は夫々１．０および４．
０のＭＩＣを有していた。該４種の化合物は、バチルス
・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ　）
　（ＡＴＣＣ６６３３）ｅスタフィロコッカス・ファル
シウＡ　（４否主娶ど匹Ｌ１駐鮎叩）（ＡＴＣＣ０９７
９０）およびスタフィロコッカス・７アスカリユ（且、
１ヮエエユエ、１）４工ぎμユ）（ＡＴＣＣ２９２１２
）に対してｉｎ　−ＶｉｔｒＯで抗菌作用を有している
ことが明らかとなった。

更に抗生物質ＡＴ　２４３３　Ｂ工はダラム陰性菌であ
るエシェリヒア・コリ（Ｅ、　ｃａｄｉ　）　ＳＳ　１
４３１　に対しても１６．０　（乳ａ９肩、ｍ１ｌｌＨ
Ａ、４８時間）のＭＩＣでｉｎ　−ＶｉｔｒＯの活性を
有することが判明した。

ＡＴ２４３３Ａ１およびＡＴ２４３３Ｂ工と称される本
発明の化合物は、移植したマウスＰ−３８８白血病に対
してｉｎ　−ｖｉｔｒｏの抗腫瘍活性を示した。

抗腫瘍活性はキャンサー・ケモセラビューティツス串リ
ポート（Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｒ、　Ｒｅｐ、
、　　３　：１〜１０３．１９７２　）に発表された標
準ナショナルキャンサーインステイチュート試験によっ
て評価した。

上記試験において、マウス１区画たり１０　　個（致死
量）のＰ−３８８白血病細胞を第０日月に腹腔内投与す
る。試験化合物を逐次希釈（１：２゜１：４，１：８等
）し、腹腔内投与した。

試験結果を第６表にまとめた。

第６表 （第５表の脚注） １、腫瘍接種：１０６腹水症細胞、腹腔内）、１：□　
　　　　　２．宿主　　：　ＣＤＦ’１雄性マウス４、
毒性　　：毒性、即ち５日目にλ以下のマウスが生存 ｓ、ＭＳＴ：生存中央期間（日） ６、チＴ／Ｃ：　（治療−ＭＳＴ／対照−ＭＳＴ）　Ｘ
　１００ＡＴ２４３３Ａ□の場合、２塾勺の最大許容投
与量（５日目若しくはそれ以前に毒性の為に死亡した個
体なし）を３日毎に３回投与したところ、対照群に対す
る寿命の増加は７２％　（ＩＴ／Ｃ＝１７２）であった
。１６■／ゆの最高投与量で試験したＡＴ２４３３　Ｂ
□の場合、腫瘍増大を阻害したが、ＡＴ２４３３　Ａ□
よりは効果が小であった。抗生物質ＡＴ２４３３Ａ２お
よびＡＴ　２４３３　Ｂ２についても同様の作用が期待
される。

治療的利用 上述したように、上記式■で表わされる本発明の化合物
は、各種ダラム陽性菌に対して、またそのうちの１つ（
ＡＴ　２４３３　Ｂ、　）はダラム陰性菌に対して抗菌
作用を示す。

従って、本発明は細菌感染症を治療する方法を提供する
ものであり、該方法はかかる治療を必要とする宿主、即
ち温血前乳動物にかかる治療するのに十分な量の上記式
Ｉで表わされる本発明の化合物若しくはその医薬組成物
を投与することを含む。

本発明の化合物はまた１例えばマウスＰ−３８８白血病
のような哺乳動物の悪性腫瘍に対する抗腫瘍活性も示す
。

他の面からすると９本発明はまた悪性腫瘍に感作した哺
乳動物宿主を治療する方法を提供するものであり、該方
法は悪性腫瘍を有する該宿主に上記式Ｉで表わされる本
発明の化合物若しくはその医薬組成物の治療学的有効量
を投与することを含む。

更に他の面からすると１本発明はラセミ形若しくは光学
活性形の上記式■で表わされる本発明の化合物またはそ
の薬学的に許容しうる塩および不活性且つ薬学的に許容
しうる担体または賦形剤から成る医薬組成物を提供する
。

薬学的に許容しうる塩の典型例としては１本発明１７）
化合物Ｋ　ＨＣｌ、　Ｈ１ｉ’、　ＨＮＯ３，Ｈ２Ｓｏ
４若シ＜ハａ、ｐｏ４のような鉱酸の当量または、酢酸
、プロピオン酸、シュウ酸、吉草酸、オレイン酸　、＜
ルミチン酸、ステアリン酸、ラウリン酸、安息香酸。

乳酸、パラトルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ク
エン酸、マレイン酸、７マル酸、コノ・り酸のような有
機酸を加えることによって形成される酸付加塩である。

医薬組成物は１本発明の化合物若しくはその薬学的に許
容しうる塩と、適切な即ち、不活性な薬学的担体若しく
は賦形剤とを組み合せて製造され。

各種の処方で経口的、非経口的若しくは局所的に投与さ
れる。

適切な組成物の例としては１錠剤、カプセル。

丸剤、粉末、顆粒等の経口投与用の固形組成物。

溶液、サスペンション、エマルジョンのような経口投与
用の液体組成物を包含する。また、使用直前に滅菌水、
生理用食塩水若しくは他の注射用滅菌溶剤に溶解しうる
滅菌固形組成物の形で製造することもできる。

本発明の化合物若しくはその薬学的に許容しうる塩の実
際的に好ましい投与量は、使用される化合物の種類、配
合された組成物の種類、適用頻度および治療すべき特定
の部位、宿主および病気によって変化することに注意す
べきである。薬剤作用を変化させる多くの要因１例えば
年齢９体重。

性別１食事、投与時間、排泄率、宿主の状態、薬の組み
合せ９反応感受性および病気の重症度等が主治医の考慮
に入れられる。投与は最大許容量の範囲内で連続的に或
いは定期的に行われる。一定の条件に対する最適の投与
量は慣用の投与量決定試験を用いて主治医によって容易
に決定されうる。

以下の実施例によって特許請求の範囲に記載した発明を
説明する。

一般的方法 溶媒および試薬 カラムクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィーお
よび沈澱に使用した溶媒は再蒸留しなかった。クロロホ
ルム４塩化炭素およびメタノールは無水ＡＣＳグレード
のものであった。本明細書でいう水とは、自社のミリポ
ア４試薬グレード水システムを通した自社製の脱イオン
水（１８メグオーＡ　Ｍｉｌｌｉ　−Ｑ　−ｗａｔｅｒ
　）　を指す。アセトニトリルおよびジメチルスルホキ
シドはｈｐｌａグレードの溶媒である。テトラヒドロフ
ランは防腐剤除去のオムニソルブ（０ｍｎ１ｓｏｌｖｅ
　）　ｈｐｌｃグレート９であった。

酢酸アンモニウムは、７ツシヤー・サーテイフイード（
Ｆｉｓｈｅｒ　Ｃｅｒｔｉｆｉｅｌ）　ＡＣＳグレーｒ
であった。

カラムクロマトグラフィーから回収した溶離液（通常５
０ｍずつの分画で回収）は、ｌ５ＣＯ社のＵＶ検出器を
用いて４０５ｒＬｍおよび４３５ｆｉ７１）１７）波長
で追跡した。部とは容量部である。

薄層クロマトグラフィー（ｔｌｃ　）はワットマン（Ｗ
ｈａｔｍａｎ　）　ＬＫ５ＤＦ’またはＬＫ６ＤＦ’　
シリカゲルプレート（２０ｍＸ　２０ｃＩＩＬ、厚さ０
．２５　ｒａｍ　）を用いて行った。

プレートはダサガ（Ｄａｓａｇａ）　ｔｉｌｅ展開槽中
で展開した。展開槽には２００　ｍの溶離剤を入れ、プ
レートを入れる前に平衡にしておく。展開し、風乾した
プレートは３６６ＳｆｉのＵＶ光で観察した。

工ＲＸ４クトルはベックＷ　７　（Ｂｅｃｋｍａｎ　）
工Ｒ４２３０型で測定した。ＵＶスペクトルははツクマ
ン・アクタ（Ｂｅｃｋｍａｎ　Ａｃｔａ）　■ＵＶ測定
器で測定した。

１Ｈおよび１３ＣＮＭＲスペクトルはブルーカー（Ｂｒ
ｕｌｃｅｒ　）　ＷＭ　３６０型を用いて各々、３６０
ＭＨ２および９３ＭＨｚで測定した。メタ／を反応体ガ
スとシテ用いるＣＩマススペクトルはヒュウレット・パ
ラカード（Ｈｅｖｒｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ）　ＨＰ
　５９８５　Ｂ型で測定した。フィールド・デソープシ
ョン（ｒｌｅｌａ　Ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ　）低・高分
解能マススイクトルハパリ７　：／　（Ｖａｒｉａｎ　
）　ＭＡＴ　−７３１型を用いて測定した。

件 保存培養 Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍｅｌｌｉａｕｒａ　ＡＴ
ＣＣ３９６９１の保存培養は全液体培養基を凍結して保
存した。

接種 Ａ、第１段階−解凍したＡｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａｍｅ
ｌｌｉａｕｒａ　（ＡＴＣＣ３９６９１）の保存サス堅
ンショ／のうち、５ｖｏＡ（ｉの接種材料を用いて。

３００ｄの三角フラスコ中に入れた種母培地Ａ（ビーフ
−・エキス、３．Ｏ，！ｉ’；）リプトン、　５．０　
ＩＩ；イースト・エキス、５．ＯＪｊ；セレロース、１
−０．Ｆ：ポテト・スター千＊　２４．０１）　；　Ｃ
ａＣＯ３，２−ＯＡ’　；　　蒸留水、　１０００　ｒ
ｘｌ　；　ＮａＯＨＫてＦＨ７，５に調整）　７０ｄに
接種した。該フラスコは速度３００ｒｐｍの回転式振盪
器（振幅２インチ）上で３０℃、４８時間培養した。

Ｂ、第２段階□２１の三角フラスコ中に入れた５００ｄ
の種母培地ＡＫ、上記第１段階の接種材料２５ｍ（５ｖ
ｏ１．％）　　を接種し、実施例ＩＡで記載した手順に
従って培養した。

Ｃ６醗酵−上記第２段階で得られた５ｖｏＪ、％の接種
材料７０ｄを、１４１の醗酵タンクに入れた醗酵培地Ｂ
（イースト・エキス、　５．０　＃　；　ＮＺ−アミン
、ｓ、ｏｙ；セレロース、１０．０．９；可溶スターチ
ｅ　２０．０１　；　ＣａＣ０ｚ　、　４．０１　ｍ蒸
留水、　１０００ｓｌ；ＣｏＣ１２（Ｃ−１０Ｍ−１，
０ｍ）　）　１０１中に接種した。

醗酵は３５０ｒｐｍの攪拌および０．３５　ＶＶＭの通
気量で、３０℃で９６時間行った。

抗生物質ＡＴ　２４３３　複合体の生産は、ネオマイシ
ンアッセイ寒天培地（ＢＢＬ）上でミクロ；ツカスール
テウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｕｓ　１ｕｔｅｕｓ　）　Ａ
ＴＣＣ９３４１またはスタフィロコッカス・アウレウス
（Ｓｔａｐｈｙｘｏｎｏｃｃｕｇ　ａｕｒｅｕｓ）　２
０９Ｐに対する全液体培地フェルアッセイによって追跡
した。

Ｄ０分離−醗酵培地１）０Ａ’を醗酵エチル１）０１で
２回抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせて溶媒を減圧
蒸留すると、抗生物質複合体ＡＴ２４３３の粗固形物３
２．６＃を与える。

実施例　２ 抗生物質ＡＴ２４３３複合体のＡＴ　２４３３Ａ（ＡＩ
およびＡ２）訃よびＢ（Ｂ１およびＢ２）への分離Ａ、
抗生物質ＡＴ２４３３複合体の粗固形物の液体−液体分
配一実施例１で得られた抗生物質ＡＴ２４３３複合体の
粗固形物（３２，６１））をスケリソルプＢ２００ｍｇ
とメタノール２００ｄ中にコール・）・”：　　　　、
ｐ４）Ｖ、（。。、。−Ｐａ−ｅｒ　）　８８４５−６
０　’！ＪＨ１ｆＲ？リーナを用いて溶解した。該溶液
を１）の分液ロートに移し、水２２．２−で希釈した。

該混合物を振盪し、２層に分離するまで放置した。水性
メタノール層（下層）を第２の分液ロートに移した。該
水性メタノール層を、　１０％（’７／Ｖ）　　の水を
含むメタノール２００　ｍＪであらかじめ飽和しておい
たスケリソルプＢ２００ｄで更に２回抽出した。水性メ
タノール層を４４．４１Ｌｌの水で希釈し、２５％（Ｖ
７’Ｙ）の水を含むメタノール２００ｄであらかじめ飽
和しておいた４塩化炭素２００ｄで３回抽出した。水性
メタノール層を４１ｍの水で希釈し、クロロホルム２０
０ｄで６回抽出した。

該クロロホルムは３５９ｇ（ｖ／ｖ）の水を含むメタノ
ール２００１）Ｌｌであらかじめ飽和しておいた。上記
クロロホルム抽出物を集め、回転式エバポレータで減圧
蒸留乾燥したところ、４種の化合物ＡＴ　２４３３Ａ□
、Ａ２．Ｂ１およびＢ２を含有する混合物である残渣Ａ
　５．４５．９を得た。

Ｂ、残渣Ａのカラムクロマトグラフィー□以下の溶媒、
即ちクロロホルム２１６０　ｄ、　　メタノール２１ｆ
ｆＯｄおよび水１６２０ｍｊを６ノの分液ロート中で平
衡にした。放置すると２層に分かれる。下層をカラムお
よびｔｉｅクロマトグラフィーの溶離剤として使用した
。

内径２．０ｍ、長さ１ｏｏｃ＋ａのグレンコ（Ｇｌｅｎ
ｃｏ　）シリーズ３５００ユニノ；−サルＬＣカラムに
、ウオー／Ｌ／　Ａ　（Ｗｏｅｌｍ）シリカゲル（０，
０３２〜０．０６３ｍ）１４０１）を上記溶離剤中に入
れてスラリー充填した。残ｆｉＡ５．４５Ｉｉを溶離剤
１０ｄ中に溶解した試料を１５ｄの試料ループに入れた
。該試料ループを普通圧ＬＣシステムに接続した。約２
１Ｍ１／分の流速で溶離を開始し、以下の分画を回収し
た。

フラクション１−１８０ａｄ；フラクション２−１００
ｄ；７ラクシヨン３−５０ｄ；フラクション４以下−各
３３〜７５−〇各フラクシヨンの少量（２５μｌ）をワ
ットマンＬＫ６ＤＦ’シリカゲルｔｉｃ　　プレート上
にスポットした。各プレートを上記溶離剤で展開し％３
６６Ｂ７７ＬのＵＶ光で観察した。

フラクション７〜１４を集め、回転式二ノＺ　ｄｓレー
タで減圧蒸留し、ＡＴ　２４３３Ａ、およびＡ２の混合
物たる粗ＡＴ　２４３３Ａ（１，２ｇ）を得た。クラク
ション１４〜２１を集め、回転式エバポレータで減圧蒸
留して、　　ＡＴ２４３３Ｂ工およびＢ２の混合物たる
粗ＡＴ　２４３３　Ｂ　（１，４ｇ）を得た。

Ｃ０粗ＡＴ２４３３Ａのカラムクロマトグラフィー−内
径２゜Ｏａｎ、長さ３０−のグレンコカラムに。

ウオールム・シリカゲル（０，０６０〜０．２００露。

７０〜２３０メツシヨ）３７１）をクロロホルム２部れ
てスラリ：充填した。シリカゲルの上部４―を除去して
、粗ＡＴ　２４３３Ａ（１，７，Ｆ　）　　をクロロホ
ルム２部−メタノール１部の溶媒２００ｄ中に溶かした
溶液中に加えた。回転式エバポレータで溶媒を減圧蒸留
した。残った明るい黄色粉末をクロロホルム中にスラリ
ーしてカラムに再充填した。カラムに、水酸化アンモニ
ウムで飽和したクロロホルム（濃水酸化アンモニウム１
容量チークロロホルム９１島下層）　３００　ｄを送り
込んで平衡にした。水酸化アンモニウムで飽和したクロ
ロホルムの連続濃度勾配（濃水酸化アンモニウム１容量
チ添加）２１を用いて溶離を行い、２１ｍ１／分の流速
で４０のフラクションを回収した。溶離液を４Ｑ５＋ｚ
ｙｉで追跡した。フラクジョン３１〜３４を集め１回転
式エバポレータで減圧蒸留乾燥した。残漬をクロロホル
ム２部−メタノール１部の溶媒５０−中に溶解した。該
溶液を急速に攪拌中のスケリソルプＢ　（１７００ｄ）
中に極めてゆっくりと注ぐ。生じた沈澱を濾過によって
回収し、　ＡＴ　２４３３Ａ□およびＡ２　　の混合物
たる均質なＡＴ　２４３３Ａを６９７．５■得た。

Ｄ、粗ＡＴ　２４３３Ｂのカラムクロマトダラフイーー
内径２．０　ｃｍ　、長さ３０ｃＩＩＬのグレンコカラ
ムＩｃ。

ウオールム・シリカゲル（０，０３２〜０．０６３■）
３７Ｆをクロロホルム中に入れてスラリー充填した。シ
リカゲルの上部２部を除去して、ＡＴ２４３３　Ｂ□お
よびＢ２の混合物たる粗ＡＴ　２４３３　Ｂ５００■を
クロロホルム２部−メタノール１部の溶媒中に溶かした
溶液（５０−）中に加えた。溶媒を回転式エバポレータ
で減圧蒸留した。明るい黄色の含浸シリカゲルをクロロ
ホルムスラリ）・′ニー、、ヨＬ、’（。エヵ、４□１
え。１カ２．ヶ濃水酸化アンモニウムで飽和したクロロ
ホルム（１容量係）で平衡にした。水酸化アンモニウム
で飽和したクロロホルムの連貌濃度勾配（濃水酸化ア／
そニウム１容量チ添加＞２１を用いて溶離を行い、１６
７ラクシヨン（各々約１００ゴ）を回収した。溶離液を
４０５ｒＬｒＩＬで追跡した。

クロマトグラムの点検後、以下のフラクショ／を作製し
た。フラクション１−０〜１２１８ｄ；フラクション２
−１２１９〜１７４６　ｍおよび７ラクシヨン３−１７
６５〜２０００　ｄ。７ラクシヨン２を回転式エバポレ
ータで減圧蒸留乾燥した。

残渣ヲクロロホルム２部−メタノール１部から成る溶媒
５ｄ中に溶解した。該溶液を急速に攪拌中のスケリソル
プＢＩｌ中に注いだ。生じた沈澱を濾過によって回収し
、ＡＴ　２４３３Ａ□およ−びＡ２を含まない、　　Ａ
Ｔ　２４３３Ｂ□およびＢ２の混合物たる均質なＡＴ２
４３３Ｂを４５４■得た。

実施例　３ ＡＴ２４３３Ａ１とＡ２の分離 Ａ、内径２．６５　ｃｍ、長さ６０ｏｎのグレンコ・カ
ラムにベーカー（Ｂａｋｅｒ　）　Ｃ−１８シリカゲル
（シリカゲルにオクタデシルシランが結合）（平均粒径
０．０４０ｍ）をメタノールに入れてスラリー充填した
。カラムを普通圧ＬＣシステムに接続し、以下の溶離剤
、即ちアセトニトリル４部、メタノール３部および０．
１　Ｍ酢酸アンモニウム　３部から成る溶離剤６００ｄ
で平衡にした。実施例２Ｃで得られたＡＴ　２４３３　
Ａ　３６０１ｑをジメチルスルホキシ）’ｌｄ中に溶解
した試料を試料ループに入れ、溶離剤でカラムに送り込
んだ。溶離液を４Ｑ５　ｔｗｎおよび４３５ｎｍ　で追
跡しなから溶離を行った。約１９　ｔｔｔｌ／＋の流速
で約５０ｄずつのフラクションを回収した。溶離液のク
ロマトグラムに基いて、フラクション１２〜１６を集め
てフラクション１とし、７ラクシヨン１７〜２４を集め
てフラクション２とした。次いで、更に４回のクロマト
グラフィーを繰り返すが、各回には実施例２Ｃで得た新
たなＡＴ　２４３３　Ａを用いた（２回目、１００■；
３回目、１６７■：４回目、１６０η；５回目、１８８
■）。５回のクロマトで得た各フラクション１を集めて
、クロロホルム１０００　ｄで抽出した。抽出物（下層
）を濃縮乾燥すると粗ＡＴ２４３３Ａ２を生じた。次い
で各クロマトの７ラクシヨン２を別々に作製した。該７
ラクシヨン２を集めてクロロホルム５００ｄで抽出し、
抽出物（下層）を濃縮乾燥した。残渣をクロロホルム２
部およびメタノール１部からなる溶媒２ｄに溶解した。

該溶液を急速に攪拌中のスケリソルメＢ５００ｄ中に注
いだ。生じた沈殿を濾過によつそ回収し、ＡＴ２４３３
Ａ□を得た。

Ｂ、内径１．６５　ａｎ、長さ６０ｃｆｎのグレンコ・
カラムに、イーカーＣ−１８シリカゲルをメタノールに
入れてスラリー充填した。該カラムを普通圧ＬＣシステ
ムに挿入し、溶離剤（既述）で平衡にした。実施例３Ａ
で得た粗ＡＴ２４３３Ａ２をジメチルスルホキシド１ゴ
中に溶解した。該溶液を１５Ｍ１！の試料ループに入れ
、カラムに送り込んだ。約５０　、ａｌずつのフラクシ
ョンを回収しなから溶離を行った。溶離液を工ＳＣＯＵ
Ｖ検出器で追跡した。得られたクロマトグラムに基いて
７ラクシヨン１６〜２８を回収し、集めたフラクション
をクロロホルム１０００１ｎ！！で抽出した。Ｔ層（ク
ロロホルム）を分取し、回転式エバボータ中で減圧蒸留
乾燥した。残漬をり四ロホルム２部およびメタノール１
部から成る溶媒５ｄ中に溶解した。該溶液を急速に攪拌
中のスケリソシブＢ５００ｄ中に添加した。生じた沈殿
を濾過によって回収すると、　　ＡＴ　２４３３　Ａ２
を生じた。

ＡＴ２４３３Ａ１およびＡ２の物理化学的性質を第７表
および第８表に夫々記載する。

第７表 ＡＴ　２４３３Ａ、　：　Ｘ＝Ｃ／、Ｒ＝ＣＨ３である
上記式■の化合物 性　状　：黄色アモルファス状固体若しくは微細針状晶 分子式　”　Ｃ３４Ｈ３５ＣＩＮ４０９分子ｉ　　：６
７９．１７Ｃメタンを反応体ガスとして用いる化学的イ
オン化マススペクトル ・ｉ　　　　　　　　　　　　　（ＣニーＭＳ　−ＣＨ
４）で測定〕Ｉｆｆスペクトル：入ｒｎａ、（Ｃ，０，
０２２９０１）／ｌ　ＣＨ３０Ｈ）；吸収極大および吸
収率（括弧内） ＝２００ｎｍ（４５，５）、　２３５ｒＬｍ（５８，９
）、２８３ｎｍ（５０，６）。

３１６ｒＬｍ（６７，２）、　　３９５ｉｍ（５，７）
。

工Ｒスペクト”：　％ｃＬｚ（ＫＢｒ）　；　３４２５
．　３３６２．２９４０゜１７５０、１６９６．１５８
１．１４７５．１４６２．１４４２．１３８２゜１３３
５、１２７７、１２４２．１）９４．１）２８．１０７
８゜１０５２．７６８，７５９　ａｎ　　。

ＩＨＭ皿スペクトル（３６０ＭＨ７）：ケミカルシフト
およびスペクトルパターン　　Ｈ（ａ６−ジメチルスル
ホキシド）１０．６４（ｓ、ＩＨ，Ｎ５’−Ｈ）、９．
２７（ｄ、ＩＨ，ＣニーＨｏｒＣｌ　’　　Ｈ）　ａ　
　９−１８　（ｃｌ　−Ｉ　Ｈ−ＣＩ”　−Ｈｏｒ　Ｃ
Ｉ　−Ｈ）　ｊ７．８８（ｄ、ＩＨ，Ｃ４’−Ｈ）、７
．７３（ｍ、２Ｈ，Ｃ３−ＨａｎｄＣ３’−Ｈ）、　　
７．４９（ｍ、２Ｈ，Ｃ２−Ｈａｎｄ　Ｃ２’Ｈ）。

６．９１（ａ、ＩＨ，ＣＩ”−Ｈ）、５．４８（ｂｒｓ
、ＩＨ，Ｃ３”−０Ｒ）。

５．１３（ｍ、ＩＥ、ＣＩ”−Ｈ）、　５．０６　（ｂ
ｒａ、ＩＨ，Ｃ２”−０Ｈ）。

４．８１（ｂｒｓ、ＩＨ，Ｃ３’ζＯＨ）＋　　４−２
１（ｂｒｄ、ＩＨ、Ｃ６ａ”−Ｈ）、　　４．０８（’
ｂｒｄ、ＩＨ，Ｃ５”−Ｈ）ｔ　　３．９９（ａａ、ｘ
Ｈ。

Ｃ６１）−Ｈ）、３．７７（ａａ、ＩＨ，Ｃ３ζＨ）、
　　３．６０−３．７０（ｍ、６Ｈ，Ｃ２’−Ｈ，Ｃ３
”−Ｅ、Ｃ４”−Ｈ，０５ａ”−Ｈ，Ｃ５ｂ”−Ｈ）、
３．６８ＣＢ、３Ｈ，Ｃ４−Ｈ”−０ＣＨ）、３．４０
（ｍ。

ＩＪＣ４ζＨｏｖｅｒｌａｐｓ　ｗｉｔｈ　Ｈ２０）、
　３．２５（８＋３Ｈ＊Ｎ３−ＣＨ５）＋　２．３０（
ｍ＊２Ｈ，Ｃ４”−ＮＨ，Ｃ２”−Ｈ）。

２．２２（ｓ−３Ｈ−０４″″−ＮＯＨａ）−１，７８
（ｍ、ｌＨ，Ｃ２ｂ”’−Ｈ）。

１３ＣＮＭＲスペクトル（９０ＭＨｚ）：ケミカルシフ
トおよびアサインメントδＣ（ａ、−ジメチルスルホキ
シド）マススイクトル（ＣＩ　−Ｍ　Ｓ　−ＣＨ４）　
：　ＭＡ＝６７９　ＣＭ　＋　１　）“第８表 ＡＴ　２４３３　Ａ２：　Ｘ＝ＣＩ、　Ｒ＝Ｈである上
記式■の化合物性　状：黄色　アモルファス状固体 分子式：Ｃ３３Ｈ３３Ｃバ、０゜ 分子量：　６６５．１０（ＦＤ−ＬＲマスス４クトルお
よびＦ’Ｄ−ＨＲマスス堅クりルで測定） ＵＶｘぺ／）ｋ：）’−、、ａｘ（’；、０．０１５８
１７１　ＣＨ３０Ｈ）ｅ吸収極大および吸収率（括弧内
） ＝１９８ｗｎ（４５，９）、　　２３３．５編（５８，
２）ｔ２８６？８（５０，６）、　　３１４間（６６，
１）。

３９４Ｗｆｉ（５，２）。

工Ｒスはクトル：入、ＬｔＬ、：（ＫＢｒ）；　３４２
０，３３５５，２９３０゜１７４５、１６９１．１５７
５．１４７２．１４５８．１４３８゜１３８０、１３３
０．１２７８．１２４０．１）４０．１）２０゜１０ｇ
０．１０４５．７６５．７５５ｃｒｎ　　。

１ＨＮＭＲスペクトル（３６０ＭＨｚ）：ケミカルシフ
トおよびスペクトルパターンδＨ（ａ６−ジメチルスル
ホキシド）１０．６４（ｓ、　ＩＨ，Ｎ５’−Ｅλ　９
．２７　（ｄ　、　ＩＨ，ＣＩ−ＨｏｒＣＩ’−Ｈ）、
９．１８（ｄ、ＩＨ，Ｃ１°−Ｈｏｒ　ｃｌ−Ｈ）。

７．８８Ｃｔｌ、ＩＨ，Ｃ４’−Ｈ）、　　７．３３（
ｍ、２Ｈ，Ｃ３−ＨａｎｄＣ３’−Ｈ）、　７．４９（
ｍ、２Ｈ，Ｃ２−Ｈａｎｄ　Ｃ２’−Ｈ）。

６．９１（ｄ、ＩＨ，Ｃ１”−Ｈ）、　５．４８（ｂｒ
ｓ、ＩＨ，Ｃ３”−０Ｈ）。

５．１４（ｍ、ＩＨ，ＣＩ”−Ｈ）、　５．０６（ｂｒ
ｓ、ＩＨ，Ｃ２”−０Ｈ）。

４．８１（ｂｒｓ、ＩＨ，Ｃ３”−０Ｈ）　、　４．２
１（ｂｒｄ、ＩＨ，Ｃ６ａ”−Ｈ）、　４．０８（ｂｒ
ｄ、ＩＨ，Ｃ５”−Ｈ）、　３−９９（ｄａ、ＩＨ，Ｃ
６ｂ”−Ｈ）、　３．６８（ａ、３Ｈ，Ｃ４“−０ＣＨ
３）、　３．７２−３．３０（ｍ、７Ｈ，Ｃ２”−Ｈ，
Ｃ３”−Ｈ，Ｃ４”−Ｈ，Ｃ３”−Ｈ，Ｃ４”−ＪＣ５
ａ”−Ｈ，Ｃ５ｂ”−Ｈｏｖｅｒｌａｐ’ｓ　ｗｉｔｈ
　Ｂ２０）。

３．２５（ｅ＝３　Ｈ−Ｈ８−ｃＨｓ）　、　２−５５
（ｍ−２Ｉｌ−Ｃ４”−ＮＨｚ）−２，３２（ｍ、　Ｉ
Ｈ，Ｃ２ａ″−”）　ｅ　１．７３　（ｍ　、　ＩＨ、
Ｃ１２ｂ’　−Ｈ）Ｏマススにクトル：フィールド・デ
ソープション低・高分解能マスによる測定 Ｆ’Ｄ−ＬＲ−ＭＳ　：　ｍ／ｚ　６６４（ＭＥ”ｍ／
ｚ　６８７（Ｍ＋Ｎａ）” Ｆ’Ｄ−ＨＲ−ＭＳ　：　ｍ／ｚ　６６４．１７９５　
（測定値）６６４．１９３６（Ｃ３３”３３Ｃｌ”４０
ｓとし□□　　　　　　　　　　　　　　　　た場合の
計算値）実施例　４ ＡＴ　２４３３　Ｂ１とＢ２の分離 Ａ、内径２．６５　ｃｍ、長さ６０　ｃｔｎのグレンコ
・カラムには−カー（Ｂａｋｅｒ　）　Ｃ−１８シリカ
ゲル（平均粒径０．０４０ｍ＋）をメタノールに入れて
スラリー充填した。該カラムを普通圧ＬＣシステムに挿
入し、以下の溶離剤、即ちアセトニトリル３部、メタノ
ール３部および０．１Ｍ酢酸アンモニウム４部から成る
溶離剤６００ｍ１を用いて平衡にした。実施例２Ｄで得
たＡＴ　２４３３　Ｂ　３６０■をジメチルスルホキシ
ド９２ｄ中に溶解し元試料を試料ループに入れて、溶離
剤でカラムに送り込んだ。工ＳＣＯＵＴ検出器を用いて
波長４Ｑ５　ｒｇＩＬおよび４３５騨で溶離液を追跡し
な４がら溶離を行い、５０ｄずつのフラクションを回収
した。７ラクシヨン１４〜１９の少量（５μＪ）　ヲ。

マイクロボンダパック（ｐ　−Ｂｏｎｄａｐａｋ　）　
Ｃ−１８カラムと、アセトニトリル４部、メタノール３
部および０．１Ｍ酢酸アンモニウム３部から成る溶離剤
とを用いる高速液体クロマトグラフィー（ｈｐｌｃ　）
によってアッセイした。フラクション１４〜１６を集め
　　　　　゛てクロロホルム５００　ｍで抽出した。下
層（クロロホルム層）を分離し、濃縮乾燥するとＡＴ２
４３３Ｂ２を生じた。７ラククヨン１７〜２４を集めて
クロロホルム５００ｄで抽出した。下層（クロロホ／Ｉ
／　Ａ層）を分離し、濃縮乾燥して粗２４３３　Ｂ１を
得た。

該粗ＡＴ　２４３３Ｂ□を再度クロマトグラフィーに付
し、上記手順と全く同様にして単離し、精製ＡＴ２４３
３　Ｂ□を約１８０■得た。

ＡＴ２４３３Ｂ□およびＢ２の物理化学的性質を夫夫、
第９表および第１０表に示した。

第９表 ＡＴ　２４３３　Ｂ、　：　ｘ＝ａ　、　Ｒ＝ＣＨ３テ
アル上記式Ｉ　ノ（論物性　状：黄色アモルファス状固
体 分子式：　Ｃ２，Ｈ３，Ｎ、Ｏ３ 分子量：　６４４．６８（Ｆ’Ｄ−ＬＲ−ＭＳ、Ｆ’Ｄ
−ＨＲ−ＭＳおよびＣＩ−ＭＳ−ＣＨ４で測定） ＵＶスペクトル：入ｍａｘ（Ｃ，０，０２２２Ｊ／ｌ　
　ＣＨ３０Ｈ）；吸収極大および吸収率（括弧内） ＝２０２ｒｇｆＬ（４５，０）、　　２３４騨（６４，
１）。

２８４ｒｖＩＬ（５２，２）、　　３１６ｙｃｍ　（７
２，９）。

４００Ｗｆｉ（６，３）。

工Ｒスペクトル：λｍａｒ（ＫＢｒ）；３３６３，２９
４０．１７５０゜１６９２、１５７５．１４７５．１４
６０．１４３５．１３８０゜１３３２、１２４０．１）
８５．１）０５．１０１０．７５０信　。

’ＨＮＭＲｘ−！！クトｋ（３６０ＭＨｚ）：ケミカル
シフトおよびスペクトルパターンδＨ（（１６−シメチ
ルスルホキシ）４）１０．５０（ｂｒｓ、ＩＨ，Ｎ５’
−Ｈ）、９．３２（ｄ、ＩＨ，Ｃ１−ＨｏｒＣ１’ＪＩ
）、　　９．２１（ｄ、ＩＨ，ＣＩ’　−Ｈｏｒ　ｃｉ
−Ｈ）Ｂ８．１４（ａ、ＩＨ，０４−Ｈ）、７．８６（
ａ、ＩＨ，Ｃ４’−Ｈ）。

７．６８（ｍ、２Ｈ，Ｃ３−Ｈａｎｄ　Ｃ３’−Ｈ）、
７．４８（ｍ。

２Ｈ，Ｃ２−Ｈａｎｄ　Ｃ２’−Ｅ）、６．４４（ｄ、
ＩＨ，ＣＩ’−ＨＬ５．６−４．６（ｂｒ、ｍ、４Ｈ，
Ｃ３°’−ＯＨ，Ｃ１’−Ｅ、Ｃ２”−ＯＢ。

Ｃ３”−０Ｈ）、　　４．３−３．２（ｍ、ＩＯＨ，Ｃ
２”−Ｈ，Ｃ３”−Ｈ。

Ｃ４”−Ｈ，Ｃ５”−Ｈ，Ｃ６ａ”−Ｈ，Ｃ６ｂ”−Ｈ
，Ｃ３”−Ｈ。

Ｃ４”’−Ｈ，Ｃ５ａ”−Ｈ，Ｃ５ｂ”−Ｈ）、　３．
６８（ｓ、３Ｈ。

Ｃ４”−０ＣＲ，）、３．２５（ｓｓ３Ｈ，Ｎ３−ＯＨ
５）ｅ　　２．３５（ｍ、ＩＨ，Ｃ４″’−ＮＵｔｓ　
　２．３０（８ｓ３Ｈｅｃ４”−ＩＪｃＨ３）。

２．０３（ｍｊＩＨ，Ｃ２ａ”−Ｈ）、１．６０（ｍ、
ＩＨ，Ｃ２ｂ”−Ｈ）。

１３０　ＮＭＲスペクトル（９０ＭＨｚ）：ケミカルシ
フト（ＰＰＭ）’Ｃ（ａ、−ジメチルスルホキシド） １６９．６　、１６９．５　、１４０．５　、１３９．
５　、１２７．４　、１２７Ｌ２゜１２７．０．１２６
．７．　１２４．５．１２４．３．１２４．２．１２０
．９゜１２０．３．１）４．７．　１）１．７．　９７
．８．８６．５．７９．１゜７６．２．７６．０．７１
．１．６６．３．６５．７．　６１．９．６０．３．６
０．０゜３８．０．　２３．６゜ マススペクトル： ＣＩ　−ＭＳ　−ＣＨ４：　ｒｎ７’ｚ　；６４５．Ｃ
Ｍ＋１　）”Ｆ’Ｄ−ＬＲ−ＭＳ　：　ｍ／ｚ＝６４４
．（Ｍ）”’Ｗ’Ｚ＝６６７、（Ｍ十Ｎａ）” Ｆ’Ｄ−ＨＲ−ＭＳ　　ニル４ニ６番４．２４０１（測
定値）６４４．２４７６　（０３４Ｈ３６Ｎ、Ｏ，トシ
た場合の計算値） 第１０表 ＡＴ　２４３３　Ｂ　２　：　Ｘ　＝Ｈ、Ｒ＝Ｈテアル
上記式Ｉ　ノ化合物性　状；黄色アモルファス状固体 分子式”　Ｃ３３Ｈ３４Ｎ４０９ 分子量：　６３０．６５（Ｆ’Ｄ−ＬＲ−ＭＳおよびｌ
’Ｄ−皿−ＭＳで測定） ＵＶ　、Ｘ−！り）Ａ／：λｍａｗ（’　、０．０１８
４１／ｌ　　ＣＨ３０Ｈ）；（□　　　　　　　吸収極
大および吸収率（括弧内）・１ ＝２０１ｒｇＩＬ（４８，９）、　　２３３３７Ｋ（６
５，２）。

２８２　ｙｍ（５３，０）　、　３１５　ｎｘ（７４，
５）　。

４０ＯｎＩｎ（６，３）。

ＩＲ、ｘ、ベクトル二λｗｔＬｓ（ＫＢｒ）　：　３５
００ｓｈ、　　３３６５゜２９４０．１７５０，１６９
２．１５７８，１４７８，１４６２゜１４３７．１３８
１，１３３２，１２７７．１２４１，１）１５゜１０８
５．１０５５，１０１２，９９５，７５０ｃ１ｎ　。

’ＨＮＭＲスペクトル（３６０ＭＨｚ）：ケミカルシフ
トおよびスペクトルイターンδａ（ａ、−ジメチルスル
ホキシド）１０．５０（ｂｒｅ、ＬＨ，Ｎ５’−Ｈ）、
　　９．３２（（Ｌ、ＩＨ，Ｃ１−Ｈｏｒ　ＣＩ’−Ｈ
）、　　９．２１（ｄ、ＩＨ，ＣＩ’−Ｈｏｒ　ＣＩ−
Ｈ）。

８．１４（ｄ、ＩＨ，Ｃ４−Ｈ）、　　７．８６（ｄ、
ＬＨ，Ｃ４’−Ｈ）。

７．６８（ｍ、２Ｈ，Ｃ３−Ｈａｎｄ　Ｃ３’−Ｈ）、
　　７．４８（ｍ、２Ｈ。

Ｃ２−Ｈａｎｄ　Ｃ２’−Ｈ）、　　６．４４（ｄ、Ｌ
Ｈ，Ｃ１’−Ｈ）。

５．６−４−６　（ｂｒｌｍ、Ｃ３”−ＯＨ，Ｃ１”−
Ｈ，Ｃ２”−ＯＨ。

Ｃ，３”−０Ｈ）、　４．３−３．２（ｍ、ＩＯＨ，Ｃ
２ζＨ，Ｃ３”−Ｈ。

Ｃ４”−Ｈ，Ｃ５’−Ｈ，Ｃ６ａ”−Ｈ，Ｃ６ｂ”−Ｈ
，Ｃ３”’−Ｈ。

Ｃ４”−Ｈ，０５ａ”−Ｈ’、Ｃ５’ｂ”−Ｈ）、３．
６８（ｓ、３Ｈ。

０４″−〇〇）！、）、　３．２５（８，３Ｈ，Ｎ３−
ＯＨ５）、　２．５５（ｍ　ｓ　２Ｈ、Ｃ４”　−利ｚ
　）、２．０３（ｍ、ＩＨ，Ｃ２ａ”−Ｈ）。

１．６０（ｍ、ＩＨ，Ｃ２ｂ″′−Ｈ）。

マススペクトル； Ｆ’Ｄ−ＬＲ−ＭＳ　：　ｍＨｚ　＝　６３０　（Ｍ）
”ｍＨｚ　＝ｓｓａ　　（Ｍ十Ｎａ）” ＦＤ−ＨＲ−ＭＳ　：　Ｉｌｌ／Ｚ　＝６３０．２２２
４　（測定値）６３０．２３１６　ＣＣ３３Ｈ３４Ｎ４
０．とした場合の計算値） （外５名）

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. （１）ラセミ形若しくは光学活性形な以下の一般式 I
   ： ▲数式、化学式、表等があります▼　 I ただし、上記式において、ＸはＨまたはＣｌを表わし、
   ＲはＨまたはＣＨ＿３を表わす。 を有する化合物若しくはその薬学的に許容しうる塩。
2. （２）上記化合物が（ａ）ＸがＣｌでＲがＣＨ＿３であ
   り、アモルファス状固形物で、本質的に第７表で示され
   る物理的性質を有する、ＡＴ２４３３Ａ＿１と称される
   化合物であるか、（ｂ）ＸがＣｌでＲがＨであり、アモ
   ルファス状固形物で、本質的に第８表に示される物理的
   性質を有する、ＡＴ２４３３Ａ＿２と称される化合物で
   あるか、（ｃ）ＸがＨでＲがＣＨ＿３であり、アモルフ
   ァス状固形物で、本質的に第９表に示される物理的性質
   を有する、ＡＴ２４３３Ｂ＿１と称される化合物である
   か、（ｄ）ＸがＨでＲがＨであり、アモルファス状固形
   物で、本質的に第１０表に示される物理的性質を有する
   、ＡＴ２４３３Ｂ＿２と称される化合物であるか、（ｅ
   ）上記４種の化合物（ａ）〜（ｄ）より成るＡＴ２４３
   ３複合体であるか、（ｆ）ＡＴ２４３３Ａ＿１およびＡ
   Ｔ２４３３Ａ＿２から成る混合物であるか、或いは（ｇ
   ）ＡＴ２４３３Ｂ＿１およびＡＴ２４３３Ｂ＿７から成
   る混合物であることを特徴とする特許請求の範囲第１項
   に記載の化合物およびその薬学的に許容しうる塩。
3. （３）アクチノマデユラ・メリアウラ（￥Ａｃｔｉｎｏ
   ｍａｄｕｒａ￥　￥ｍｅｌｌｉａｕｒａ￥）ＡＴＣＣ３
   ９６９１の醗酵によつて得ることができる特許請求の範
   囲第１項または第２項に記載の化合物およびその薬学的
   に許容しうる塩。
4. （４）哺乳動物の悪性腫瘍の治療に利用することのでき
   る特許請求の範囲第１項乃至第３項のいずれか１項に記
   載の化合物およびその薬学的に許容しうる塩。
5. （５）細菌感染症の治療に利用することのできる特許請
   求の範囲第１項乃至第３項のいずれか１項に記載の化合
   物およびその薬学的に許容しうる塩。
6. （６）上記化合物を生産しうる能力を有する￥Ａｃｔｉ
   ｎｏｍａｄｕｒａ￥　￥ｍｅｌｌｉａｕｒａ￥の菌株を
   、水溶性栄養培地中において、実質的な抗生物質作用が
   該菌株に付与されるようになるまで培養し、特許請求の
   範囲第１項乃至第３項のいずれか１項に定義した化合物
   の少なくとも１種を、該化合物自体若しくはその薬学的
   に許容しうる塩として単離することを含む、特許請求の
   範囲第１項乃至第３項のいずれか１項に定義する化合物
   およびその薬学的に許容しうる塩の製造方法。
7. （７）￥Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ￥　￥ｍｅｌｌｉａ
   ｕｒａ￥　ＡＴＣＣ　３９６９１、若しくはその変異株
   を培養することを特徴とする特許請求の範囲第６項に記
   載の方法。
8. （８）特許請求の範囲第６項または第７項のいずれかに
   記載した方法によつて得られる化合物。
9. （９）有効成分として特許請求の範囲第１項乃至第３項
   および第８項のいずれか１項に記載した少なくとも１種
   の化合物と、薬学的に許容しうる担体または賦形剤とを
   含む医薬組成物。
10. （１０）好気性条件下、水溶性栄養培地中において、醗
    酵によつて特許請求の範囲第１項乃至第３項のいずれか
    １項に定義する化合物を、回収しうる量で生産すること
    のできる、ＡＴＣＣ　３９６９１と同定される性質を有
    する微生物￥Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ￥　￥ｍｅｌｌ
    ｉａｕｒａ￥の生物学的に純粋な培養。