JPS6083580A - シユ−ドモナス属細菌の培養方法 - Google Patents
シユ−ドモナス属細菌の培養方法Info
- Publication number
- JPS6083580A JPS6083580A JP58191636A JP19163683A JPS6083580A JP S6083580 A JPS6083580 A JP S6083580A JP 58191636 A JP58191636 A JP 58191636A JP 19163683 A JP19163683 A JP 19163683A JP S6083580 A JPS6083580 A JP S6083580A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- nitrile hydratase
- bacteria
- cystine
- ability
- genus pseudomonas
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/78—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/874—Pseudomonas
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
発明の背景
本発明は、ニトリルヒドラターゼ活性の高いシ生産する
方法に関する。
方法に関する。
近年、固定化酵素または固定化微生物に関する技術の急
速な進歩と共に微生物寸たは酵素ある込はその固定化物
を種々の単位化学反応や複合化学反応の触媒として利用
しようとする動きが活発化しつつある。
速な進歩と共に微生物寸たは酵素ある込はその固定化物
を種々の単位化学反応や複合化学反応の触媒として利用
しようとする動きが活発化しつつある。
ニトリルヒドラターゼは、ニトリル類を水和して相当す
るアミド類を生成せしめる酵素として、本発明者の中の
山田らに見出されており［Ａｇｒｌｃ。
るアミド類を生成せしめる酵素として、本発明者の中の
山田らに見出されており［Ａｇｒｌｃ。
Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、 １７６ ／／６３ （／り♂
２）参照〕、その具体的利用例としてニトリルヒドラタ
ーゼを有する細菌を用いアクリロニトリルからアクリル
アミドを生成させることが提案されている〔特開昭ｓｇ
−ｒｔｏり３号公報（特願昭、タＡ−／Ｉグ１．♂ざ号
）、Ａｇｒｉｃ、 Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、’１６ ／／
ざ３ （／り♂２）参照〕０このような場合に、ニトリ
ルヒドラターゼ活性の高いシー−トモナス属菌体が高収
量で取得できれば、稗益するところは大きい。
２）参照〕、その具体的利用例としてニトリルヒドラタ
ーゼを有する細菌を用いアクリロニトリルからアクリル
アミドを生成させることが提案されている〔特開昭ｓｇ
−ｒｔｏり３号公報（特願昭、タＡ−／Ｉグ１．♂ざ号
）、Ａｇｒｉｃ、 Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、’１６ ／／
ざ３ （／り♂２）参照〕０このような場合に、ニトリ
ルヒドラターゼ活性の高いシー−トモナス属菌体が高収
量で取得できれば、稗益するところは大きい。
このような観点から、本発明者らは既に一つの提案をな
してｂる（特願昭５ｔｒ−ｉり！７７号）。この提案に
かかるシー−トモナス属細菌の培養方法は、シー−トモ
ナス属に属してニトリルヒドラターゼを産生ずる能力を
有する細菌をニトリルヒドラターゼ酵素が誘導される条
件で培養Ｉ７てニトリルヒドラターゼ酵素活性を有する
細菌菌体を製造するに際し、培地中にシスティンおよび
（−！たは）シスチンを存在させること、からなるもの
である。
してｂる（特願昭５ｔｒ−ｉり！７７号）。この提案に
かかるシー−トモナス属細菌の培養方法は、シー−トモ
ナス属に属してニトリルヒドラターゼを産生ずる能力を
有する細菌をニトリルヒドラターゼ酵素が誘導される条
件で培養Ｉ７てニトリルヒドラターゼ酵素活性を有する
細菌菌体を製造するに際し、培地中にシスティンおよび
（−！たは）シスチンを存在させること、からなるもの
である。
発明の概要
要旨
本発明は上記の点に解決を与える（を目的とし、上記シ
スティンおよびシスチン以外のα−アミノ酸にも同様な
効果が見出さハたことに基いて上記と同様の手段によっ
てこの目的を達成しようとするものである。
スティンおよびシスチン以外のα−アミノ酸にも同様な
効果が見出さハたことに基いて上記と同様の手段によっ
てこの目的を達成しようとするものである。
従って、本発明によるニトリルヒドラターゼ活性の高い
シー−トモナス属細菌の培養方法は、シー−トモナス（
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ）属に属してニトリルヒドラ
ターゼを産生ずる能力を有する細菌をニド、リルヒドラ
ターゼ酵素が誘導される条件で培養してニトリルヒドラ
ターゼ酵素活性を有する細菌菌体を製造するに際し、培
地中に少なくとも一種のα−アミノ酸（システィンおよ
びシスチンのそれぞれ単用およびこれら両者のみの併用
を除く）を存在させること、を特徴とするものである。
シー−トモナス属細菌の培養方法は、シー−トモナス（
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ）属に属してニトリルヒドラ
ターゼを産生ずる能力を有する細菌をニド、リルヒドラ
ターゼ酵素が誘導される条件で培養してニトリルヒドラ
ターゼ酵素活性を有する細菌菌体を製造するに際し、培
地中に少なくとも一種のα−アミノ酸（システィンおよ
びシスチンのそれぞれ単用およびこれら両者のみの併用
を除く）を存在させること、を特徴とするものである。
効果
培地にα−アミノ酸を添加してシー−トモナス属細菌の
培養を行なうと、単位培養液当シのニトリルヒドラター
ゼ活性が顕著に増大する。たとえば、α−アミノ酸を添
加すると、無添加の場合に比較して単位培養液当りのニ
トリルヒドラターゼ活性の収量を約２〜５倍近くまで向
上させることができる。
培養を行なうと、単位培養液当シのニトリルヒドラター
ゼ活性が顕著に増大する。たとえば、α−アミノ酸を添
加すると、無添加の場合に比較して単位培養液当りのニ
トリルヒドラターゼ活性の収量を約２〜５倍近くまで向
上させることができる。
この単位培養液当シのニトリルヒドラターゼ活性の増大
は、菌体の濃度（すなわち、菌体の収量）および菌体自
体の活性（すなわち、菌体内のニトリルヒドラターゼの
量）の増大に因るものと解される。
は、菌体の濃度（すなわち、菌体の収量）および菌体自
体の活性（すなわち、菌体内のニトリルヒドラターゼの
量）の増大に因るものと解される。
本発明において使用する細菌は、ニトリルヒドラターゼ
活性を有し、ニトリル、特にアクリロニトリル、を水和
して対応アミド、特にアクリルアミド、を生成すること
ができるシー−トモナスｊ、何の細菌である。具体的に
は、例えば′、前記特願昭Ｓ乙−Ｉｆ弘ｔｌｒｇ号の明
細書に記載のシー−トモナス・クロロラフイスＢ２３
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｇ ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ
Ｂ２Ｊ）微工研条寄第ｔｔｒ７号およびシー−トモナス
ｓｐ＋ＰＳ ／ （Ｐ’ｇｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ、
ＰＳ ／ ）微工研条寄第１Ｉざ号などを挙げることが
できる。こＪｌら両画の詳細は、前記特開昭ｓｇ−ｇｔ
ｏり３号公報（特願昭５６−／ｆグｔｇｒ号明細書）に
記載されている。
活性を有し、ニトリル、特にアクリロニトリル、を水和
して対応アミド、特にアクリルアミド、を生成すること
ができるシー−トモナスｊ、何の細菌である。具体的に
は、例えば′、前記特願昭Ｓ乙−Ｉｆ弘ｔｌｒｇ号の明
細書に記載のシー−トモナス・クロロラフイスＢ２３
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｇ ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ
Ｂ２Ｊ）微工研条寄第ｔｔｒ７号およびシー−トモナス
ｓｐ＋ＰＳ ／ （Ｐ’ｇｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ、
ＰＳ ／ ）微工研条寄第１Ｉざ号などを挙げることが
できる。こＪｌら両画の詳細は、前記特開昭ｓｇ−ｇｔ
ｏり３号公報（特願昭５６−／ｆグｔｇｒ号明細書）に
記載されている。
活性向上剤
本発明においては、活性向上剤としてシスティンおよび
シスチン以外のα−アミノ酸の−ｆｉｉｉまたは二種以
上を使用する。これらは、それぞれ単独にまたは併用混
合して、使用することができる。
シスチン以外のα−アミノ酸の−ｆｉｉｉまたは二種以
上を使用する。これらは、それぞれ単独にまたは併用混
合して、使用することができる。
本発明において使用するα−アミノ酸は、Ｄ一体、Ｌ一
体およびり、Ｌ一体温合物のいずれでもよく、これらは
それぞれ単独で用いてもよく、甘た、２種以上混合して
用いてもよいことは上記した通りである。なお、効果の
点ではＬ一体が好ましいが、人手容易性の点からり、Ｌ
一体温合物が好ましいとめえよう。
体およびり、Ｌ一体温合物のいずれでもよく、これらは
それぞれ単独で用いてもよく、甘た、２種以上混合して
用いてもよいことは上記した通りである。なお、効果の
点ではＬ一体が好ましいが、人手容易性の点からり、Ｌ
一体温合物が好ましいとめえよう。
α−アミノ酸はソリラパク構成員として知られているも
のが適当である。このよりなα−アミノ酸の好ましい具
体例は、後記実施例１にお込てその効果を示したもので
ある。なかでも、アラニン、バリン、メチオニン、アス
パラギン酸、フェニルアラニン、プロリンおよびグルタ
ミン酸が特に好１しく、これらのうちでもメチオニン、
アスパラギン酸およびグルタミン酸は活性が比較的安定
している点で有利である。これらのα−アミノ酸を併用
してもよいことは前記したところであるが、併用の相手
方としてシスティンおよび（または）シスチンを選ぶこ
とも本発明の範囲内である。
のが適当である。このよりなα−アミノ酸の好ましい具
体例は、後記実施例１にお込てその効果を示したもので
ある。なかでも、アラニン、バリン、メチオニン、アス
パラギン酸、フェニルアラニン、プロリンおよびグルタ
ミン酸が特に好１しく、これらのうちでもメチオニン、
アスパラギン酸およびグルタミン酸は活性が比較的安定
している点で有利である。これらのα−アミノ酸を併用
してもよいことは前記したところであるが、併用の相手
方としてシスティンおよび（または）シスチンを選ぶこ
とも本発明の範囲内である。
培養一本発明の実施
本発明の一般的実施態様を示すと次の通りであるＯ
すなわち、炭素源、例えばグルコース、フラクトース、
シュークロース、デキストリン、クリセリン、エタノー
ルおよびコノ〜り酸など、窒素源、例えばアンモニア、
硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウ
ムおよび尿素など、有機栄養源例えば酵母エキス、肉エ
キス、麦芽エキス、カゼイン分解物およびペプトンなど
、および無機塩、例えばリン酸塩、マグネシラノ・、カ
リウム、鉄、その他微量金属など、その他、を適宜含有
する培地にα−アミノ酸の少なくとも７種を一時にある
いは逐次的に添加して０．／〜ｔｏ Ｍ ／ ！Ｊソト
ル、好１しくはｏ、ｓ−ｇ、ｏ９／リットル、の濃度で
存在させ、この培地にニトリルヒドラターゼ活性を有す
るシー−トモナス属の細菌を接馴して、好気的条件下に
培養を行なう。この培養は、酵素誘導剤を添加して、ニ
トリルヒドラターゼ酵素が誘導される条件で行なわれる
。酵素誘導剤としては、例えば、プロピオニトリル、イ
ンブチロニトリル、プロピオンアミドおよびインブチル
アミド（特願昭６７− ／ワタフタ０号）ならびにアク
リルアミド、メタクリルアミド、クロトンアミドおよび
ｎ−ブチルアミド（同時提出特許願（２））などが挙げ
られる（これらの酵素誘導剤は、培養中にその濃度が通
常／３．１９ ／ Ｕットル未満、好筺しくはｉｏｉ／
リットル以下、となるように添加すれば効果的である）
。培地のｐＨはｔ〜り程度、好１しくは７〜ｒ程度、培
養温度はπ〜、？７℃程度、好１しくは２Ｊ〜３０℃程
度、培養時間は１〜３日程度で充分である。
シュークロース、デキストリン、クリセリン、エタノー
ルおよびコノ〜り酸など、窒素源、例えばアンモニア、
硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウ
ムおよび尿素など、有機栄養源例えば酵母エキス、肉エ
キス、麦芽エキス、カゼイン分解物およびペプトンなど
、および無機塩、例えばリン酸塩、マグネシラノ・、カ
リウム、鉄、その他微量金属など、その他、を適宜含有
する培地にα−アミノ酸の少なくとも７種を一時にある
いは逐次的に添加して０．／〜ｔｏ Ｍ ／ ！Ｊソト
ル、好１しくはｏ、ｓ−ｇ、ｏ９／リットル、の濃度で
存在させ、この培地にニトリルヒドラターゼ活性を有す
るシー−トモナス属の細菌を接馴して、好気的条件下に
培養を行なう。この培養は、酵素誘導剤を添加して、ニ
トリルヒドラターゼ酵素が誘導される条件で行なわれる
。酵素誘導剤としては、例えば、プロピオニトリル、イ
ンブチロニトリル、プロピオンアミドおよびインブチル
アミド（特願昭６７− ／ワタフタ０号）ならびにアク
リルアミド、メタクリルアミド、クロトンアミドおよび
ｎ−ブチルアミド（同時提出特許願（２））などが挙げ
られる（これらの酵素誘導剤は、培養中にその濃度が通
常／３．１９ ／ Ｕットル未満、好筺しくはｉｏｉ／
リットル以下、となるように添加すれば効果的である）
。培地のｐＨはｔ〜り程度、好１しくは７〜ｒ程度、培
養温度はπ〜、？７℃程度、好１しくは２Ｊ〜３０℃程
度、培養時間は１〜３日程度で充分である。
実験例
実施例／
（１）菌の培養
下記の前培養条件で生育させた菌（シー−トモナス・ク
ロロラフイスＢ２３（微工研条寄第１♂７号））、２Ｖ
！を、下記の本培養条件で培養して、アクリルアミド生
成活性を調べた。
ロロラフイスＢ２３（微工研条寄第１♂７号））、２Ｖ
！を、下記の本培養条件で培養して、アクリルアミド生
成活性を調べた。
（１）前培養条件
ＭＹ培地（ペプトンｓＥ／リットル、酵母エキス３！ｑ
／リツトル、麦芽エキス３，９／リツトル、グルコース
ｓｉ／リットル、ｐＨ７，乙）、培養温度２ｇ”Ｃ１培
養時間ｉｓ時間、ｓｏｏｍ！、坂ロフラスコ（実容量１
００ｍ１）使用 （２）本培養条件 培地（シュクロース ｔｏｌ／リットル、ＫＨ２ＰＯＩ
ＩＯ，ｊ／ｉ／リットル、Ｋ２ＨＰＯＩＩＯ１ｊ 、！
９ ／リットル、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０２０ｒｎｇ−／
リットル、α−ｙｔ）酸２．９ ／ Ｉ）ットル）、イ
ンブチロニトリル タｍｌ／リットル）、ｐＨ７，６、
培養温度、：）、３’Ｃ，Ｘ 夕θＯｍｌ坂口フラスコ
（実容量１００ｍ１）使用。
／リツトル、麦芽エキス３，９／リツトル、グルコース
ｓｉ／リットル、ｐＨ７，乙）、培養温度２ｇ”Ｃ１培
養時間ｉｓ時間、ｓｏｏｍ！、坂ロフラスコ（実容量１
００ｍ１）使用 （２）本培養条件 培地（シュクロース ｔｏｌ／リットル、ＫＨ２ＰＯＩ
ＩＯ，ｊ／ｉ／リットル、Ｋ２ＨＰＯＩＩＯ１ｊ 、！
９ ／リットル、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０２０ｒｎｇ−／
リットル、α−ｙｔ）酸２．９ ／ Ｉ）ットル）、イ
ンブチロニトリル タｍｌ／リットル）、ｐＨ７，６、
培養温度、：）、３’Ｃ，Ｘ 夕θＯｍｌ坂口フラスコ
（実容量１００ｍ１）使用。
（２） ヒドラターゼ活性の測定
アクリロニトリル水和によるアクリルアミド生成のヒド
ラターゼ活性は、培養液／ｍｌと’／ｌｏ Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ７ｊ））≠ｍｌとを混合し、これにさらに’
／１０ Ｍリン酸緩衝液（ＰＨｑ、ｏ ） ｒｍｌを加
えて、７０℃でＩＯ分間反応させ、菌体を沢別してから
、ガスクロマトグラフィーでアクリルアミド（ＡＡ）を
定量することによって行なった。
ラターゼ活性は、培養液／ｍｌと’／ｌｏ Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ７ｊ））≠ｍｌとを混合し、これにさらに’
／１０ Ｍリン酸緩衝液（ＰＨｑ、ｏ ） ｒｍｌを加
えて、７０℃でＩＯ分間反応させ、菌体を沢別してから
、ガスクロマトグラフィーでアクリルアミド（ＡＡ）を
定量することによって行なった。
活性は、比活性（ＳＡ）および全活性（ＴＡ）について
調べた。これらは、下記の通りに定義される。
調べた。これらは、下記の通りに定義される。
ＳＡ：μモルＡＡ／ダー菌体／分
ＴＡ二μモルＡ Ａ ／ ｔｎｌ−培地／分結果は、第
１表に示す通りであった。なお、活性は、得られた最高
活性の値で示した。
１表に示す通りであった。なお、活性は、得られた最高
活性の値で示した。
第１表
アミノ酸 培養時 菌体濃度＊２ 活 性ＤＬ−Ａｌａ
１１２ ３，０１１ ＋２３．Ｊ７ ７０．Ａ２Ｌ−
Ｖａｌ ＩＩ ３，０７ ２３．３タ ７／ＪＩＬ−Ｍ
ｅｔ ３１ ２．０１１ ３６１３ ７＋２，４１１Ｌ
−Ａｓｐ ３６ ’１．’ｌｒ ＩＡ、ｒｌ ７Ｊ’、
２ｒＬ−Ｌｙｅ ’ＩＩ ＋２．＋２１ ２１１３！
３９９７Ｌ−Ｐｈｅ １１２ ２、り０．２♂、／タ
ｇｉ３ｊ′Ｌ−Ｐｒｏ ３１ ｊ、／ノ ２３，７２
ｆ／、７ＹＬ−Ｔｒｐ グー ２．／ｌ ２３，２Ａ
！０，２１ＩＬ−Ｌｅｕ ３タ ３．／ｌ ／ｊｔ、ざ
ＩＩ ｊＴＯ，ＯＳ；Ｌ−１１ｅ ３２ ３，２♂ ／
’１．１０ ’ｌｔ、２ｊＬ−Ｇｌｕ ２乙 ３．３ｔ
２３，０６ ７７、ｌＩ３Ｌ−Ａｒｇ ２Ａ ３．！
’！ ／７．りθ １，３．３７Ｌ−Ｈｉａ ３＋２３
，０１１ ／７．Ｏ！ ！／、７７Ｌ−Ｔｙｒ ｊＪ
、２．／／ 、２３．０６ ’Ｉ１．ＡＡ（Ｌ−Ｃｙｓ
３２ ２．’ｌ’ｌ ２Ａ、０１ Ａ３．Ａす（Ｌ−
ＣｙａＳ ３０ ．２．ｌＩＩ ３１１．ｑ７ ７３．
７＆）−＊５ １１２ １．１０ ＋２２．２２ グ０
．００＊ｌ Ａｌａ：アラニン Ｖａｌ：バリン Ｍｅｔ：メチオニン Ａｓｐ：アスパラギン酸 Ｌｙｓ： リジン Ｐｈｅ：フェニルアラニン Ｐｒｏニブロリン Ｔｒｐ： ）リプトフ７ン Ｌｅｕ：ロイシン １１ｅニイソロイシン Ｇｌｕ：グルタミン酸 Ａｒｇ：アルギニン Ｈｉｓ：ヒスチジン Ｔｙｒ：チロシン Ｃｙｓニジスティン ＣｙａＳ：ビスチン ＊２乾保菌体基準 ＊５アミノ酸無添加 実施例λ 実施例／で特に有効であったα−アミノ酸トシステイン
とを組合せて実施例１と同じ培養を行なった。たたし、
α−アミノ酸およびシスティンはそれぞれ、２ｇ ／
リットルの濃度でｍ−た。なお、活性は、得られた最高
活性の値で示した。
１１２ ３，０１１ ＋２３．Ｊ７ ７０．Ａ２Ｌ−
Ｖａｌ ＩＩ ３，０７ ２３．３タ ７／ＪＩＬ−Ｍ
ｅｔ ３１ ２．０１１ ３６１３ ７＋２，４１１Ｌ
−Ａｓｐ ３６ ’１．’ｌｒ ＩＡ、ｒｌ ７Ｊ’、
２ｒＬ−Ｌｙｅ ’ＩＩ ＋２．＋２１ ２１１３！
３９９７Ｌ−Ｐｈｅ １１２ ２、り０．２♂、／タ
ｇｉ３ｊ′Ｌ−Ｐｒｏ ３１ ｊ、／ノ ２３，７２
ｆ／、７ＹＬ−Ｔｒｐ グー ２．／ｌ ２３，２Ａ
！０，２１ＩＬ−Ｌｅｕ ３タ ３．／ｌ ／ｊｔ、ざ
ＩＩ ｊＴＯ，ＯＳ；Ｌ−１１ｅ ３２ ３，２♂ ／
’１．１０ ’ｌｔ、２ｊＬ−Ｇｌｕ ２乙 ３．３ｔ
２３，０６ ７７、ｌＩ３Ｌ−Ａｒｇ ２Ａ ３．！
’！ ／７．りθ １，３．３７Ｌ−Ｈｉａ ３＋２３
，０１１ ／７．Ｏ！ ！／、７７Ｌ−Ｔｙｒ ｊＪ
、２．／／ 、２３．０６ ’Ｉ１．ＡＡ（Ｌ−Ｃｙｓ
３２ ２．’ｌ’ｌ ２Ａ、０１ Ａ３．Ａす（Ｌ−
ＣｙａＳ ３０ ．２．ｌＩＩ ３１１．ｑ７ ７３．
７＆）−＊５ １１２ １．１０ ＋２２．２２ グ０
．００＊ｌ Ａｌａ：アラニン Ｖａｌ：バリン Ｍｅｔ：メチオニン Ａｓｐ：アスパラギン酸 Ｌｙｓ： リジン Ｐｈｅ：フェニルアラニン Ｐｒｏニブロリン Ｔｒｐ： ）リプトフ７ン Ｌｅｕ：ロイシン １１ｅニイソロイシン Ｇｌｕ：グルタミン酸 Ａｒｇ：アルギニン Ｈｉｓ：ヒスチジン Ｔｙｒ：チロシン Ｃｙｓニジスティン ＣｙａＳ：ビスチン ＊２乾保菌体基準 ＊５アミノ酸無添加 実施例λ 実施例／で特に有効であったα−アミノ酸トシステイン
とを組合せて実施例１と同じ培養を行なった。たたし、
α−アミノ酸およびシスティンはそれぞれ、２ｇ ／
リットルの濃度でｍ−た。なお、活性は、得られた最高
活性の値で示した。
第、２表
ＤＬ−Ａｌａ ３／ ３．！Ｉ ２７．３！ タフ、り
／Ｌ−Ｖａｌ ３／ ３，３１１ ２７．３Ｙ ５Ｐ／
、４ｔＩＬ−Ｍｅｔ ３７ ３．５２ ＋２１１ＪＩＩ
ＩＡ、７３Ｌ−Ａｓｐ ３／ ｊ、ｌＩＩ ＩＡ、９
’ｌ ９２Ｊ３Ｌ−Ｐｈａ ３／ ３．１０ ３０．７
／ タ！１．２ＯＬ−Ｐｒｏ ｊ／ ３．ｊｒ ２り、
Ｏタ １ｏ１１．１ｉｉＬ−Ｇｌｕ ３／ ＩＩ、Ｏ！
＋２９３３ １０３ＡｌＯ−＊ ３２ ２．１１１１
．２ｔ、（Ｈｔｊ、ｔ’ｌ＊Ｌ−システィンのみ 実施例３ 実施例コで有効であったＣｙａ−Ｇｌｕの組合せにいく
つかのα−アミノ酸を組合せて、芙力吊例コと同じ培養
を行なった。ただし、システィン、グルタミン酸および
α−アミノ酸は、それぞれ、２ＩＩ／リツトルの濃度で
用いた。なお、活性は、得られた最高活性の値で示した
。
／Ｌ−Ｖａｌ ３／ ３，３１１ ２７．３Ｙ ５Ｐ／
、４ｔＩＬ−Ｍｅｔ ３７ ３．５２ ＋２１１ＪＩＩ
ＩＡ、７３Ｌ−Ａｓｐ ３／ ｊ、ｌＩＩ ＩＡ、９
’ｌ ９２Ｊ３Ｌ−Ｐｈａ ３／ ３．１０ ３０．７
／ タ！１．２ＯＬ−Ｐｒｏ ｊ／ ３．ｊｒ ２り、
Ｏタ １ｏ１１．１ｉｉＬ−Ｇｌｕ ３／ ＩＩ、Ｏ！
＋２９３３ １０３ＡｌＯ−＊ ３２ ２．１１１１
．２ｔ、（Ｈｔｊ、ｔ’ｌ＊Ｌ−システィンのみ 実施例３ 実施例コで有効であったＣｙａ−Ｇｌｕの組合せにいく
つかのα−アミノ酸を組合せて、芙力吊例コと同じ培養
を行なった。ただし、システィン、グルタミン酸および
α−アミノ酸は、それぞれ、２ＩＩ／リツトルの濃度で
用いた。なお、活性は、得られた最高活性の値で示した
。
第３表
Ｌ−Ｐｈｅ ３３ ｊ、１１．２ ２！、１１ ／４１
０．３Ｌ−Ｐｒｏ’ ３／ ６，０！ ２！、１１ ／
Ｓ；７．１１Ｌ−Ａｓｐ ３３ ９１’ｌ 、２０．Ｉ
Ｊ ／２０．ＡＤＬ−Ａｌａ ３３ Ａ、０２ ＋２．
２．ｊ／ ／３ｊｊ−＊ ３／ グ、０３ ．２！、Ｊ
３ １０３．ＩＩ＊Ｌ−システィン＋Ｌ−グルタミン酸
のみ手続補正書 昭和５９年２月ｌψ［」 昭和５８年 特許願 第１９１６３６号３、補正をする
者 事件との関係 特許出願人 山 １） 秀 明 （ほか１名） ４、代理人 （郵便番号１００） 東京都千代田区丸の内三丁目２番３号
０．３Ｌ−Ｐｒｏ’ ３／ ６，０！ ２！、１１ ／
Ｓ；７．１１Ｌ−Ａｓｐ ３３ ９１’ｌ 、２０．Ｉ
Ｊ ／２０．ＡＤＬ−Ａｌａ ３３ Ａ、０２ ＋２．
２．ｊ／ ／３ｊｊ−＊ ３／ グ、０３ ．２！、Ｊ
３ １０３．ＩＩ＊Ｌ−システィン＋Ｌ−グルタミン酸
のみ手続補正書 昭和５９年２月ｌψ［」 昭和５８年 特許願 第１９１６３６号３、補正をする
者 事件との関係 特許出願人 山 １） 秀 明 （ほか１名） ４、代理人 （郵便番号１００） 東京都千代田区丸の内三丁目２番３号
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ｌ シー−トモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ） 属
に属してニトリルヒドラターゼを産生ずる能力を有する
細菌をニトリルヒドラターゼ酵素が誘導される条件で培
養してニトリルヒドラターゼ酵素活性を有する細菌菌体
を製造するに際し、培地中に少なくとも一種のα−アミ
ノ酸（ただし、システィンおよびシスチンのそれぞれ単
用およびこれら両者のみの併用を除く）を存在させるこ
とを特徴とする、シー−トモナス属細菌の培養方法。 ２培地中のα−アミノ酸の濃度が０．／〜ｔｏｅ／リッ
トルである、特許請求の範囲第１項記載の培養方法。 ゼを産生ずる能力を有する細菌がシー−トモナス・り０
０ラフイスＢ 、ＺＪ （Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｈ
ｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ Ｂ２３）微工研条寄第１ざ７号
またはシュードモナスｇｐ、 ＰＳ ／ （Ｐｇｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ ｓｐ。 久 α−アミノ酸が、アラニン、バリン、メチオニン、
アスパラギン酸、リジン、フェニルアラニン、フロリン
、ドリフトファン、ロイシン、インロイシン、グルタミ
ン酸、アルギニン、ヒスチジン、チロシン、システィン
およびシスチンからなる群から選ばれる（ただし、シス
ティンおよびシスチンの単用およびこれら両者のみの併
用を除く）、特許請求の範囲第１〜３項のいずれか７項
に記載の培養方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58191636A JPS6083580A (ja) | 1983-10-13 | 1983-10-13 | シユ−ドモナス属細菌の培養方法 |
| BR8400054A BR8400054A (pt) | 1983-01-10 | 1984-01-06 | Processo para cultivar bacterias pseudomonas |
| US06/569,021 US4661456A (en) | 1983-10-13 | 1984-01-09 | Method for cultivation of pseudomonas bacteria |
| DE8484100191T DE3472418D1 (en) | 1983-01-10 | 1984-01-10 | Method for cultivation of pseudomonas bacteria |
| EP84100191A EP0115781B1 (en) | 1983-01-10 | 1984-01-10 | Method for cultivation of pseudomonas bacteria |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58191636A JPS6083580A (ja) | 1983-10-13 | 1983-10-13 | シユ−ドモナス属細菌の培養方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6083580A true JPS6083580A (ja) | 1985-05-11 |
| JPS6143998B2 JPS6143998B2 (ja) | 1986-09-30 |
Family
ID=16277948
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58191636A Granted JPS6083580A (ja) | 1983-01-10 | 1983-10-13 | シユ−ドモナス属細菌の培養方法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4661456A (ja) |
| JP (1) | JPS6083580A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5866379A (en) * | 1997-01-28 | 1999-02-02 | Novus International | Enzymatic conversion of α-hydroxynitriles to the corresponding .alpha. |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0822221B2 (ja) * | 1988-12-28 | 1996-03-06 | 日東化学工業株式会社 | シュードモナス属細菌の培養法 |
| US5593871A (en) * | 1990-09-20 | 1997-01-14 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Process for the preparation of enantiometric 2-alkanoic acid amides from nitriles |
| JP2003277416A (ja) * | 2002-03-22 | 2003-10-02 | Daiyanitorikkusu Kk | 糖類を含むアクリルアミド水溶液 |
| EA032896B1 (ru) * | 2017-06-15 | 2019-07-31 | Акционерное Общество "Биоамид" | Способ культивирования штамма rhodococcus rhodochrous m33 |
| JP2019176835A (ja) * | 2018-03-30 | 2019-10-17 | 三井化学株式会社 | アミド化合物の製造方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3989592A (en) * | 1973-11-23 | 1976-11-02 | Mobil Oil Corporation | Water-soluble polymers and utilization thereof |
| FR2294999A1 (fr) * | 1974-12-18 | 1976-07-16 | Anvar | Procede de preparation d'amides par hydrolyse biologique |
| JPS5835077B2 (ja) * | 1979-05-02 | 1983-07-30 | 日東化学工業株式会社 | 微生物によるアクリルアミドまたはメタアクリルアミドの連続製造法 |
| JPS594987B2 (ja) * | 1980-09-30 | 1984-02-02 | 日東化学工業株式会社 | ニトリラ−ゼ活性の高い細菌菌体の製造法 |
| JPS5843433B2 (ja) * | 1981-06-27 | 1983-09-27 | 住友金属工業株式会社 | 石炭液化法 |
-
1983
- 1983-10-13 JP JP58191636A patent/JPS6083580A/ja active Granted
-
1984
- 1984-01-09 US US06/569,021 patent/US4661456A/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5866379A (en) * | 1997-01-28 | 1999-02-02 | Novus International | Enzymatic conversion of α-hydroxynitriles to the corresponding .alpha. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4661456A (en) | 1987-04-28 |
| JPS6143998B2 (ja) | 1986-09-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS6143999B2 (ja) | ||
| KR0131276B1 (ko) | 니트릴 하이드라타제를 생성하는 신규한 균주-로도코커스 로도코러스 | |
| Maestracci et al. | Activity and regulation of an amidase (acylamide amidohydrolase, EC 3.5. 1.4) with a wide substrate spectrum from a Brevibacterium sp. | |
| Ogawa et al. | β‐Ureidopropionase with N‐carbamoyl‐α‐l‐amino acid amidohydrolase activity from an aerobic bacterium, Pseudomonas putida IFO 12996 | |
| Tsugawa et al. | Production of l-Glutamic Acid from dl-Hydantoin-5-propionic Acid by Microoganisms: Part I. Screening of l-Glutamic Acid-Producing Microorganisms and Some Optimal Conditions for Production of l-Glutamic Acid | |
| Kuramitsu et al. | The biosynthesis of D-amino acids in Bacillus licheniformis | |
| JPS6083580A (ja) | シユ−ドモナス属細菌の培養方法 | |
| FR2586702A1 (fr) | Procede pour la production de l-amino-acides | |
| Dundas et al. | Arginine metabolism in Halobacterium salinarium, an obligately halophilic bacterium | |
| JPH0329399B2 (ja) | ||
| US4234691A (en) | L-Lysine α-oxidase | |
| FR2491086A1 (fr) | Procede pour produire des bacteries ayant une forte activite nitrilasique | |
| White | [160] Diaminopimelate decarboxylase (Escherichia coli) | |
| EP0115781B1 (en) | Method for cultivation of pseudomonas bacteria | |
| JPS6126357B2 (ja) | ||
| JP2670838B2 (ja) | Ｌ―α―アミノ酸類の製造方法 | |
| EP1394260A1 (en) | Enzyme from Streptomyces sp. for synthesis and hydrolysis of amide, in particular amides derived from amine and fatty acid, and method for producing the enzyme | |
| US4783404A (en) | L-aminoacid oxidase from yeasts of the genus cryptococcus, their preparation and use | |
| JPS59130182A (ja) | シユ−ドモナス属細菌の培養方法 | |
| WO2002008439A1 (fr) | Procede d'elaboration d'acides 2-amino | |
| KR870001336B1 (ko) | L-세린의 제조방법 | |
| Dunlap | [14] TMP synthetase from lactobacillus casei | |
| Fukatsu et al. | Optimum culture conditions for the production of N-substituted formamide deformylase by Arthrobacter pascens F164 | |
| US5134073A (en) | Microbiologically produced n-acetyl-2,3-didehydroleucine acylase | |
| US5212069A (en) | Method of using N-acetyl-2,3-Didehydroleucine acylase for the preparation of D- or L-tryptophyl glycine, D- or L-tryptophyl-D-methionine or L-tryptophyl-D-cysteine |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |