JPS6047266B2 - Ｎ↑２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類またはその酸付加塩の製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は血液凝固系に関与する重要なたんぱく質分解酵
素の一つであるトロンビンに対し強い阻害作用を有する
Ｎ２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類またはそ
の酸付加塩の製造方法に関する。

七Ｎ２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類または
その酸付加塩はトロンビンの阻害剤として強い抗トロン
ビン作用を示し、医薬上血液凝固を抑制する特異な生理
活性物質であり、抗トロンビン作用が持続的であるとい
う特徴を有する。

本発明はこのように有用なＮ２−クマリンスルホニルア
ルギニンアミド類またはその酸付加塩の製法を提供する
ことを目的とするものであり、この目的は下記一般式（
１）（上記一般弐（１）中でＸおよびＹは水素原子また
はニトロ基、トシル基、トリチル基およびオキシカルボ
ニル基から選ばれるグアニジノ基の保護基を表わし（た
だしＸおよびＹのうち少なくとも一つはグアニジノ基の
保護基を表わす。

）、Ｒは（式中Ｒ，およびＲ，は水素原子、アルキル基
、アラルキル基またはアルコキシカルボニ〕［ルアルキ
ル基を表わす。

）、４−アルキルピペリノ基、４−モルフォリノ基また
はアルキル基もしくはアシル基で置換された４一置換−
１−ピペラジニル基を表わし、Ｒ゛は水素原子またはア
ルキル基を表わす。）て表わされるＮＣ一置換−Ｎ２−
クマリンスルホニルアルギニンアミド類またはその酸付
加塩のグアニジノ基の保護基であるＮＣ一置換基を分解
除去して下記一般式（Ｈ）（上記一般式（ｎ）中でＲお
よびＲ゛は上記一般式（１）におけると同じ意義を有す
る。

）で表わされるＮ２−クマリンスルホニルアルギニンア
ミド類またはその酸付加塩を得ることによつて達成され
る。本発明を詳細に説明すると、本発明で原料として用
いられるＮＣ一置換−Ｎゝ−クマリンスルホニルアルギ
ニンアミド類は上記一般式（１）で表わされる。

上記一般式（１）中、Ｒは、式 Ｒ，およびＲ２は水素原子、通常炭素数１０以下のアル
キル基、通常炭素数１５以下のアラルキル基、または通
常炭素数１０以下のアルコキシカルボニル基で置換され
た通常炭素数１０以下のアルキル基を表わす。

さらに具体的にはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基
、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｎ−
ペンチル基、ｎ−ヘキシｔル基、ｎ−ヘプチル基などの
アルキル基；ベンジル基、フェネチル基、３−フェニル
プロピル基などのアラルキル基；エトキシカルボニルメ
チル基、２−エトキシカルボニルエチル基、２−メトキ
シカルボニルエチル基、３−エトキシカルボニｌルプロ
ピル基などのアルコキシカルボニル基で置換されたアル
キル基を挙げることができる。）、通常炭素数１０以下
のアルキル基で置換された４−アルキルピペリジノ基（
さらに具体的には、４−メチルピペリジノ基、４−エチ
ルピペリジノ基、４一（ｎ−プロピル）ピペリジノ基、
４−イソプロピルピペリジノ基など）、４−モルフォリ
ノ基または通常炭素数１０以下のアルキル基もしくはア
シル基で置換された４一置換−１−ピペラジニル基（さ
らに具体的には、４−メチルー１−ピペラジーニル基、
４−アセチルー１−ピペラジニル基など）を表わす。ま
た、上記一般式（１）中のＲ″は水素原子または通常炭
素数１０以下のアルキル基を表わし、具体的にはメチル
基、エチル基、ｎ−プロピル基などが挙げられる。

クマリンスルホニル基および３一置換クマリンスルホニ
ル基としては通常６−クマリンスルホニル基、７−クマ
リンスルホニル基および８−クマリンスルホニル基なら
びにそれらの３一置換体が挙げられる。

上記一般式（１）中でＸおよびＹは水素原子またはグア
ニジノ基の保護基を表わすが、ｘおよびＹのうち少なく
とも一つはグアニジノ基の保護基を表わすが、Ｘおよび
Ｙのうち少なくとも一つはグアニジノ基の保護基を表わ
す。

グアニジノ基の保護基としてはニトロ基、トシル基、ト
リチル基またはベンジルオキシカルボニル基、Ｐ−ニト
ロベンジルオキシカルボニル基、Ｐ−メトキシベンジル
オキシカルボニル基もしくはｔ−ブチルオキシカルボニ
ル基などのオキシカルボニル基が挙げられる。ＮＣ一置
換−Ｎ２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類の酸
付加塩としてはＨＦ，ＨＢｒ，ＨＣｌ等の鉱酸の塩；ギ
酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、Ｐ−トルエンスルホン酸
等の有機酸の塩を挙げることができる。

上記一般式（１）で表わされるＮＣ一置換−Ｎ２ークマ
リンスルホニルアルギニンアミド類またはその酸付加塩
は通常、ＮＣ一眞換−Ｎ２一置換アルギニン（Ｎ２一置
換基は通常ベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブチルオ
キシカルボニル基等のアミノ保護基である。

）とアミンを酸アジド法、混合酸無水物法、活性化エス
テル法、カルボジイミド法等によつて縮合させて後、Ｎ
２一置換基のみを接触水素化分解または酸加水分解によ
つて選択的に分解除去して得られるＮＣ−置換アルギニ
ンアミドまたはその酸付加塩とクマリンスルホニルハロ
ゲニドたとえば６−クマリンスルホニルクロリドまたは
３一置換クマリンスルホニルハロゲニドたとえば３一置
換−６−クマリンスルホニルクロリドを溶媒中でで塩基
の存在下反応させることによつて得られる。塩基として
はトリエチルアミン、ピリジン等の有機塩基：水酸化ナ
トリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナ
トリウム等の一般的な無機塩基を挙げることができる。
無機塩基は通常水溶液として用いられる。塩基はＮＣ一
置換アルギニンアミドに対し通常当量以上使用される。
原料としてＮＧ一置換アルギニンアミドの酸付加塩を使
用する場合は酸付加塩を中和するに十分な量の塩基を追
加して用いることが好ましい。

クマリンスルホニルハロゲニドまたは３一置換）−クマ
リンスルホニルハロゲニドはＮＣ一置換アルギニンアミ
ドまたはその酸付加塩に対し通常等モル使用される。溶
媒としては水；塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭
素などの塩素系溶媒：ベンゼン、ト５ルエン、キシレン
などの芳香族炭化水素；エーテル、テトラヒドロフラン
、ジオキサンなどのエーテル系溶媒：アセトン、メチル
エチルケトン、シクロヘキサノンなどのケトン系溶媒；
ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、テトラ
メチＯル尿素、Ｎ−メチルピロリドン、ピリジン、キノ
リンなどの塩基性溶媒またはこれら溶媒を２以上混合し
たものが用いられる。

塩基性溶媒を用いると、これら溶媒は酸受容剤として作
用するので塩基を添加する必要はない。

反応温度は使用するＮＣ一置換アルギニンアミドおよび
塩基によつて異なるが一般には−１０℃から溶媒の沸点
までの温度から選ばれる。反応時間は使用するＮＣ一置
換アルギニンアミド、塩基および反応温度によつて異な
るが通常５分から２４時間の範囲から選ばれる。

反応終了後、溶媒および塩基類を留去し、生成した塩類
を水洗して除去した後ＮＯ一置換−Ｎ２一クマリンスル
ホニルアルギニンアミド類を適当な溶媒て再結晶あるい
は再沈澱させることにより精製する。

なお反応終了後溶媒を留去した反応混合物をクロマトグ
ラフィーによつて精製分離することも可能である。クロ
マトグラフィー展開溶媒としては一般にクロロホルムも
しくは塩化メチレン等の塩素系溶媒またはアルコールを
含有したこれらの塩素系溶媒が用いられる。本発明方法
ては、既述のとおり上記一般式（１）で表わされるＮ６
一置換−Ｎ２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類
またはその酸付加塩のグアニジノ基の保護基であるＮＣ
一置換基を分解除去することにより、上記一般式（■）
で表わされるＮ２−クマリンスルホニルアルギニンアミ
ド類またはその酸付加塩が製造される。

その分解除去方法としては、一般に、酸分解あるいほ水
素化分解が適用される。酸分解に使用される酸としては
塩化水素、臭化水素、フッ化水素などのノ和ゲン化水素
：トリフルオロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸、
ギ酸、酢酸などの有機酸を挙げることができる。

酸分解は上述した酸の存在下、無溶媒あるいはメタ５ノ
ール、エタノールなどのアルコール；テトラヒドロフラ
ン、ジオキサン、アニソールなどのエーテル；酢酸など
の有機酸；酢酸エチルなどのエステル等の有機溶媒中−
１０′Ｃ〜１００′Ｃ１通常は室温でＮＯ一置換−Ｎ２
−クマリンスルホニルアルギニ３ンアミド類またはその
酸付加塩を処理することによつて行われる。酸分解に要
する時間は使用する酸および溶媒、保護基であるＮＣ一
置換基の種類ならびに処理温度によつて異なるが、１紛
なしル２柵間である。分解終了後、溶媒および過剰の酸
４を除去するかあるいはエーテル、石油エーテル、炭化
水素などの不活性溶媒を反応混合物中に加えて生成する
沈澱をＰ過することによりＮ２−クマリンスルホニルア
ルギニンアミド類またはその酸付加塩が得られる。通常
、酸を過剰に用いるので保護基を除去して得られるＮ２
−クマリンスルホニルアルギニンアミド類は使用した酸
と酸付加塩を形成するが、これを中和することによりＮ
２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類が容易に得
られる。水素化分解は一般的な還元水素化によつて行わ
れるが接触的水素化分解が有利である。

接触的水素化分解は水素活性化触媒の存在下水素雰囲気
中フで行われる。水素活性化触媒としては通常、ラネー
ニツケル、パラジウム、白金等が用いられる。反応溶媒
としてはメタノール、エタノールなどのアルコールニジ
オキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル；酢酸、
プロピオン酸などの有機酸・およびこれら２以上の混合
溶媒などの不活性溶媒を用いることができる。反応温度
はグアニジノ基の保護基および触媒の活性に応じて適宜
選ばれるが、通常０゜Ｃないし溶媒の沸点である。水差
圧は反応温度および触媒の活性によつて異なるが１気圧
以上であれば十分である。反応時間は触媒の活性、反応
温度、水素圧等によつて大きく異なるが、２時間から１
加時間程度てある。水素化分解後触媒を？去して溶媒を
留去するとＮ２−クマリンスルホニルアルギニンアミド
類またはその酸付加塩が得られる。

Ｎ２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類の酸付加
塩を中和すると、容易にＮ２−クマリンスルホニルアル
ギニンアミド類が得られる。Ｎ２−クマリンスルホニル
アルギニンアミド類およびその酸付加塩は水、エーテル
、アルコール、アセトン等の溶媒を２以上混合した溶媒
を用いて再結晶することにより、あるいはこれをアルコ
ール等の溶媒に溶解して後エーテルを加えて、これを沈
澱させることにより精製される。

次に本発明方法によつて得られるＮ２−クマリンスルホ
ニルアルギニンアミド類およびその酸付加塩の薬理効果
を説明する。

既述のとおりＮ２−クマリンスルホニルアルギニンアミ
ド類およびその酸付加塩は抗トロンビン作用を有するの
て、診断薬として使用されるほか、血栓症などの予防ま
たは治療に使用され得る。

そこで既知の抗トロンビン剤であるＴＡＭＥ（Ｎ２−（
Ｐ−トリルスルホニル）上−アルギニン、メチルエステ
ル）とＮ２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類お
よびその酸付加塩の抗トロンビン作用をフィブリノーゲ
ン凝固時間を測定して比較した。

フィブリノーゲンの凝固時間の測定は次のようにして行
つた。

牛フィブリノーゲン（コーンフラクシヨン１（ＣＯｈｎ
ＦｒａｃｔｉＯｎｌ）アーマー（ＡｒｍＯｕｒ）社製）
１５０ｍｇを４０ｍ１のボレートサラインバツフア（Ｂ
ＯｒａｔｅＳａＩｌｎｅＢｕｆｆｅｒ（ＰＨ７．４））
に溶解した溶液０．８ｍ１と０．１ｍ１のボレートサラ
インバツフア（対照試料）または試料溶液を氷冷下で混
和し、さらに５ｕｎｉｔｓ／ｍｌのトロンビン（持田製
薬（株）製試薬）０．１ｍｔを氷冷下で添加してよく混
和し直ちに２５℃の恒温槽に移す。

恒温槽に入れた瞬間にストップウォッチを始動させ、フ
ィブリン系を認めた時までの時間を測定した。試料無添
加の場合（対照実験）の凝固時間は５０〜５醗てあつた
。実験結果を表−１に示す。

表−１で凝固時間を２倍に延長する濃度とは、対照実験
での凝固時間５０〜５５秒を凝固時間１００〜１１叩２
に延長するのに必要な濃度を表わす。ＴＡＭＥについて
は、その凝固時間を２倍に延長する濃度は１１００ｐＭ
てあつた。

なお下記表−１においてＮ２−クマリンスルホニルアル
ギニンアミド類は表中のＲ，Ｒ″および付加物を特定す
ることによつて表わす。

次に本発明を実施例にて具体的に説明するが、その要旨
を超えない限り、本発明はこれら実施例に限定されない
。

実施例１ ４−エチルー１−（ＮＣ−ニトローＮ２−（６一クマリ
ンスルホニル）上−アルギニル）ピペリジン１．０８ｇ
（０．００２０モル）にアニソール０．６４ｆ（０．０
０６０モル）およびフッ化水素３ｍ１をドライアイスー
アセトン冷却下加え、氷冷下３＠間撹拌する。

氷冷下フッ化水素を減圧留去し、残存している油状物質
に無水エーテル１００ｍＬを加え、よく洗浄する。エー
テル層をデカンテーシヨンにより除き、得られた粉末を
メタノールに溶解し、エーテルを加えて再沈澱すると７
８％の収率で粉体状の４一エチルー１−（Ｎ２−（６−
クマリンスルホニル）上−アルギニル）ピペリジンのフ
ッ化水素塩が得られる。元素分析：Ｃ２２Ｈ３ｌＯ５Ｎ
５Ｓ−ＨＦとして実施例２４−（ＮＣ，ＮＣ−ジベンジ
ルオキシカルボニルーＮ２−（６−クマリンスルホニル
）上−アルギニル）モルホリン１．４４ｙ（０．００２
モル）を２８％ＨＢｒ／ＣＨ３ＣＯＯＨｌＯｍｔに溶解
し、室温で１時間放置後、エーテルを加えて沈澱を得る
。

これを水に溶かしＮａＯＨでＰＨｌｌ〜１２にすると沈
澱が生じる。この沈澱を淵過により集め、エタノールと
水との混合溶媒て再結晶すると、４−（Ｎ２−（６−ク
タマリンスルホニル）上−アルギニル〕モルホリンが粉
末状物質として収率６５％で得られる。元素分析：Ｃｌ
９Ｈ２５Ｏ６ＮＳとしてＶ 八ＩＡｌ！ ＼′υ
ノその他各種のＮ２−クマリンスルホニルアルギニンア
ミド類を上記実施例の方法に従つて合成した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 下記一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）（上記一般
   式（ I ）中でＸおよびＹは水素原子またはニトロ基、
   トシル基、トリチル基およびオキシカルボニル基から選
   ばれるグアニジノ基の保護基を表わし（ただしＸおよび
   Ｙのうち少なくとも一つはグアニジノ基の保護基を表わ
   す。 ）、Ｒは式▲数式、化学式、表等があります▼（式中Ｒ
   ＿１およびＲ＿２は水素原子、アルキル基、アラルキル
   基またはアルコキシカルボニルアルキル基を表わす。）
   、４−アルキルピペリジノ基、４−モルフォリノ基また
   はアルキル基もしくはアシル基で置換された４−置換−
   １−ピペラジニル基を表わし、Ｒ′は水素原子またはア
   ルキル基を表わす。）で表わされるＮ＾Ｇ−置換−Ｎ＾
   ２−クマリンスルホニルアルギニンアミド類またはその
   酸付加塩のグアニジノ基の保護基であるＮ＾Ｇ−置換基
   を分解除去することを特徴とする下記一般式（II）▲数
   式、化学式、表等があります▼（II）（上記一般式（I
   I）中でＲおよびＲ′は上記一般式（ I ）におけると同
   じ意義を有する。 ）で表わされるＮ＾２−クマリンスルホニルアルギニン
   アミド類またはその酸付加塩の製造法。