JPS60260595A - Ｇｒｆ類似体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はヒトおよびその他の動物の下垂体の機能に影響
を及ぼす〈プチド類に関する。特に、本発明は下垂体か
らの成長ホルモンの分泌を促進するはプチドに関する。

発明の背景 生理学者達は長い間視床下部がそこで産生される特別の
物質（下垂体ホルモンの分泌を刺激または抑制する）に
よって膝下垂体の分泌機能をコントロールすることを認
めてきた。視床下部阻害因子は成長ホルモン（ＧＨ）の
分泌を抑制するソマトスタチンの形で１９７２年に性状
決定がなされた。

１９８２年にヒトの膵臓（腫瘍）放出因子（ｈｐＧＲＦ
）がヒトの膵臓腫瘍の抽出物から単離され、精製され、
性状決定がなされ、合成され、試験され、そして下垂体
からのＧＨの放出を促進することが見出された。これら
の下垂体刺激因子は両方とも全合成によって再、生産さ
れ、そして自然界に存在する構造の類似体が合成された
。ヒト視床下部ＧＩ（放出因子は正確に同じ構造をもつ
と思われ、それ故以後はｈＧＲＦという略語を用いる。

対応するラット視床下部ＧＨ放出因子（ｒＧＲＦ　）、
対応するブタ視床下部ＧＨ放出因子（ｐＧＲＦ）および
対応するウシ視床下部ＧＨ放出因子（ｂＧＲＦ　）もま
た性状決定がなされて合成された。

発明の要約 今や、培養された下垂体細胞からＧＨ′ｆ：、放出させ
、体内での酵素による分解に少なくとも部分的に抵抗し
、そして実質的に高められた効力を示すホリペプチド類
が合成された。これらのはプテド２位にＮａＣＨ３−Ｄ
−Ａｉａ（Ｄ−ＮＭＡ）および／または１４位にＤ−Ｌ
ｅｕおよび／または２９位にＤ−Ａｒｇを有し、そして
好適には２７位にＮｌｅを有する。Ｄ−Ｇｅｕが１７位
および／または２３位に存在してもよく、Ｄ−Ｇｌｕま
たはＤ−Ａｓｐが２５位に存在してもよい。これらのペ
プチドはまた１位に次の残基：　Ｔｙｒ、Ｄ−Ｔｙｒ。

Ｍｅｔ　、　Ｐｈｅ　、　Ｄ−ｐｈｅ、ｐｃｌ−Ｐｈｅ
、’Ｌｅｕ、ＨｉｓおよびＤ−Ｈｉｓのうちの１つをも
つことができミ前記残基は場合によりそのα−炭素原子
またはα−７ミノ基にメチル置換を有していてもよい。

これらのＲプテドはまた３位にＤ−Ａｓｐおよび／また
は８位にＤ−ＡｒｇまたはＤ−８ｅｒおよび／または１
０位にＤ−Ｔｙｒおよび／または１５位にＤ−Ａ］、ａ
を有していてもよい。それら鉦また２７位のＮｌｅまた
はＭｅｔの代わりにＤ−ＭｅｔまたはＮｖａをもつこと
もできる。

本発明による医薬組成物は、長さが約２７〜４４個のア
ミノ酸残基からなるこの種の類似体またはその無毒性塩
を、薬学的もしくは獣医学的に許容される液体または個
体の担体に分散して含有する。

このような医薬組成物は臨床医学において用いられ、治
療または診断目的のためにヒトまたは動物に投与される
。さらに、それらは温血動物（鶏を含む）の成長を促進
させるのに用いられ、また冷血動物（例えば魚、ウナギ
など）の養殖にも用いられる。

好適な実施態様の詳細な記述 にプテドを定義するのに用いられる命名法は５ｃｈｒｏ
ｄｅｒ　＆　Ｌｕｂｋｅの”Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ
”、アカデミツクプレス（１９６５）により明示された
ものでｉ、ここでは慣用の表示法に従ってＮ−末端の１
ミノ基が左にそしてＣ−末端のカルボキシル基が右に記
載される。天然アミノ酸とは蛋白質中に見出せる自然界
に存在するふつうのアミノ酸であって、Ｃ１ｙ　、　Ａ
ｌａ　、　Ｖａｌ　、　Ｌｅｕ　、　Ｉｌｅ　、　Ｓｅ
ｒ　、　Ｔｈｒ　、　Ｌｙｓ　。

Ａｒｇ　、　Ａｓｐ、　Ａｓｎ、　Ｇｌｕ　、　Ｇｉｎ
　、　Ｃｙｓ　、　Ｍｅｔ　、　Ｐｈｅ　、　Ｔｙｒ　
。

Ｐｒｏ、　、　ＴｒｐおよびＨｉｓ　のうちの１−を意
味する。

Ｎｌｅはノルロイ７ンを、そしてＮｖＢはノルバリンを
意味する。アミノ酸残基が異性体形をもつ場合、もし他
に特定して示されない限５Ｌ体のアミノ酸を表わす。Ｄ
−ＨＭＡはα−１ミノ基がメチル基で置換されているア
ラニンのＤ−異性体を表わす。

本発明は次の配列（１）を有する合成はプチドを提供す
る。

Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３−Ａｌａ−Ｉ　１　ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈ
ｒ　−ＲＢ　−８ｅ　ｒ−Ｒ１ｏ−Ａｒ　ｇ−Ｒ１２−
Ｒ１３−Ｒ１４−Ｒ１５−Ｇｌｎ−Ｒ１７−Ｒ１８−Ａ
ｌａ−Ａｒｇ−ＬｙＳ−Ｌｅｕ−Ｒ２３−Ｒ２４−Ｒ２
５−Ｉ　１　ｅ−Ｒ２７−Ｒ２Ｂ−Ｒ２ｇ　−Ｇｌｎ−
Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−ｅｌｍ−Ｒ３４−Ａｓｒｒ−ＣＩｎ−
Ｇｌｕ−Ｒ３ｇ　−Ｒ３ｇ　−Ｒ４ｏ−Ａｒｇ−Ｒ４２
−Ｒ４３−Ｒ４４（式中、Ｒ１はｃａＭｅまたはＮαＭ
ｅ置換を有してい。

でもよいＴｙｒ　、　Ｄ−Ｔｙｒ　、Ｍｅｔ　、　Ｐｈ
ｅ　、　Ｄ−Ｐｈｅ　、　ｐｃｌ−Ｐｈｅ　。

Ｌｅｕ、ＨｉｓまたはＤ−Ｈｉｓであり；Ｒ２はＡｌａ
、Ｄ−ＡｌａまたはＤ−ＮＭＡであり；Ｒ３はＡｓｐま
たはＤ−Ａ、ｓｐであり；馬はＳｅｒ　、　Ａｓｎ　、
　Ｄ−３ｅｒまたはＤ−Ａｓｎテ５１）ｐＲｌｏはＴｙ
ｒまたはＤ−Ｔｙｒであり；Ｒ１２はＡｒｇまたはＬｙ
ｓで６’）；Ｒｌｓは１１ｅまたはＶａｌでアシ；Ｒ１
４はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕで；ｈ　’）　、’　Ｒｌ
ｓはＧｌｙまたはＤ−ＡｌａＴあり；Ｒ１７はＬｅｕま
たはＤ−Ｌｅｕであシ；Ｒ１８はＴｙｒまたはｓｅｔで
あり；Ｒ２３はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕであり；Ｒ２４
はＨｉｓまたはＧｌｎで’）　’）　ｐ　ＲｚｓはＧｌ
ｕ’、　Ａｓｐ　、　Ｄ−ＧｌｕまたはＤ−Ａｓｐであ
’）　ｙ　Ｒ２７はＭｅｔ　、　Ｄ−Ｍｅｔ　、　Ａｌ
ａ　、　Ｎｌｅ　、　Ｉｌｅ　、　Ｌｅｕ　、　Ｎｖａ
またはＶａｌであり；Ｒ２８はＡＳｎまたは５ｆ３ｒで
あり；Ｒ２９はＡｒｇまたはＤ−Ａｒｇであ”）　ｐ　
Ｒ３４はＡｒｇまたはｓｅｒであ’）　；　Ｒ３８はＧ
ｕｎまたはＡｒｇで６　”）　ｌ　Ｒ３９はＡｒｇまた
はＧｌｙで６　、！７　ｓ　Ｒ４０はＳｅｒまたはＡｌ
ａでアク；Ｒ４２はＰｈｅ　、　ＡｌａまたはＶａｌで
Ｉ＞Ｆ）；Ｒ４３はＡｓｎまたはＡｒｇであり；そして
Ｒ４４は天然アミノ酸である；ただしＲ２８とＲ４４の
間の残基のうちいずれかまたは全部は欠失されてもよく
、またＲ２はＤ−ＮＭＡでありかつ／またＲ１４はＤ　
−Ｌｅｕであり逅つ／またＲ２９はＤ−Ａｒｇ　”ｔ’
　６　ル）以後、Ｃ−末端のアミノ酸残基のカルボキシ
ル部分を表わすのに′Ｙ”が用いられ、Ｙは次の基ニー
ＧＯＯＲ、−ＣＲＯ、−ＣＯＮＨＮＨＲ、−ＣＯＮ　（
Ｒ）　（Ｒ’）　’！　？、：ハーＣＨ２０Ｒで１得、
ここでＲおよびＲ′は低級アルキル基１、フルオル低級
アルキル基または水素原子であり、メチル、エチルおよ
びゾロピルが好適な低級アルキル基である。通常、４４
位にアミノ酸残基が存在する場合Ｋ、２量体の形成ある
いは前記合成ペプチドと他のペプチドとの結合を望まな
い限９　Ｃｙｓ以外のアミノ酸が選ばれる。１位にＭｅ
ｔ、が存在する場合には２７位に別の残基が存在するの
が好ましい。

前述のように、Ｎ−末端から残基−２７まで延びるはプ
テド断片は下垂体からのＧＨの放出をうながすという生
物学的効力を青し、この種の生物学的に活性な断片は本
発明の範囲内に含まれると考えられる。このはプテト９
断片が残基２７または２８まで延びる場合、Ｙは−Ｃｏ
ＮＨ２または置換アミ１である方がよい。この断片が残
基２９〜３９のうちの１つまで延びる場合、Ｙは好まし
くはアミドまたは置換アミドであるが−Ｃ○○Ｈであっ
てもよい。この断片が４０またはそれ以上の残基を有す
る場合、Ｃ−末端のカルボキシル部分には特に好適なも
のが存在するわけではない。

はプテドは適当な方法（例えば、固相法のみ、部分的固
相法、断片縮合または基本的溶液カンプリング法）によ
り合成される。最近開発された組換えＤＮＡ法も天然ア
ミノ酸残基のみを含む類似体の一部分（これはその後短
いＮ−末端Ｒプテドに結合される）を作るのに用いるこ
とができる。例えば、固相合成法は５ｔｅｖａｒｔ　＆
　Ｙｏｕｎｇの”５ｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ　Ｐｅｐｔｉ
ｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ”ｙＦｒｅｅｍａｒ］　＆Ｇ
Ｏ０，サンフランシスコ（１９６９年）に記載されてお
り、またＶａｌｅらの米国特許第４１０５６０３号（１
９７８年８月８日付）に開示されている。基本的溶液カ
ンプリング法は”Ｍｅｔｈｏｄｅｎ　４ｅｒＯｒｇａｎ
ｉｓｃｈｅｎ　Ｇｈｅｍｉｅ　（Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙ
ｌ）　：５ｙｎｔｈｅｓｅ　ｖｏｎ　Ｐｅｐｔｉｄｅｎ
”、　Ｅ＋Ｗｕｎｓｃｈ　（編集）。

Ｇｅｏｒｇ　Ｔｈｉｅｍｅ　Ｖｅｒｌａｇ　、　Ｓｔｕ
ｔｔｇａｒｔ　、Ｗ、　Ｇｅｒに詳細に説明されている
。断片縮合法は米国特許第３９７２８５９号（１９７６
年８月３日付〕に例示されている。その他の利用可能な
合成法は米国特許第３８４２０６７号（１９７４年１０
月１５日付）および同第３８６２９２５号（１９７５年
１月２８日付）に例示される。

このような合成法に共通する点は、各種アミノ酸部分の
不安定な側鎖基を適当な保護基（その保護基が除去され
るまでその部位での焦学反応を阻止する）を用いて保護
することである。また、アミノ酸またはペプチド断片が
カルボキシル基の部分で反応する間そのα−アミノ基を
保護することも普通のことであシ、その後α−アミノ保
護基はその部位で次の反応を行わせるべく選択的に除去
される。従って、ペプチド８鎖中に意図する配列で配置
された各アミノ酸残基を含みかつ側鎖保護基が適当なア
ミノ酸残基に結合されている中間体化合物が合成の一段
階として製造されることも普通のことである。

次の式（ＩＩ）で表わされる中間体は本発明の範囲内で
あると考えられる。

Ｘｌ−Ｒ１（ＸまたはＸ２）−Ｒ２−Ｒ３（ＩＸ３）−
Ａｌａ−１１ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ　（Ｘ’　）−ＲＢ　
（Ｘ’またはＸ５）−３ｅｒ（Ｘ’）−ＲＨ）（Ｘ２）
−Ａｒｇ（Ｘ６）−Ｒｔ　２　（Ｘ６ｉ　ｔ、−ｈ　Ｘ
７）−Ｒ１３−Ｒ１４−Ｒ１５’４１ｒｌ　（Ｘ５）−
Ｒ１□−Ｒｔ　ｓ　（Ｘ２）−Ａｌａ−Ａｒｇ（Ｘ６）
−Ｌｙｓ　（Ｘ７）−Ｌｅｕ−Ｒ２３−Ｒ２４（Ｘまた
はＸ５）−Ｒ２５（Ｘ３）−Ｉ　１１Ｂ−Ｒ２７−Ｒ２
８（Ｘ’またはＸ５）−Ｒ２ｇ　（Ｘ６）−Ｇｌｎ　（
Ｘ”　）−Ｇｉｎ　（Ｘ５）−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ（Ｘ３）
−Ｒ３４（Ｘ’またはＸ６）−Ａｓｎ（Ｘ５）−Ｇｌｎ
（Ｘ５）−Ｇｌｕ（Ｘ３）−−Ｒ３ｇ（Ｘ”またはＸ６
）−Ｒ３９（Ｘ６）−Ｒ４ｏ　（Ｘ’　）−Ａｒｇ　（
Ｘ６）−Ｒ４２−Ｒ４３（Ｘ５またはＸ６）−Ｒ４４（
Ｘ８）−Ｘ９ここでＸ”ｌｄ水素原子またはα−アミノ
保護基である。Ｘｌによって意図されるα−アミノ保護
基はポリハプテドの段階合成法の分野で有用であるとよ
く知られたものである。Ｘｌとして使用できるα−アミ
ン保護基の例には、（１）芳香族ウレタン型保護基、例
えばフルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆ′ＭＯＣ
）、インジルオキシカルボニル（Ｚ）および置換２（例
えばＰ−クロルベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロ
ベンジルオキ７カルボニル、ｐ−ブロムベ・ンジルオキ
７カルボニルおよびｐ−メトキクベンジルオキシカルボ
ニル）；（２）ＪＩＷ肪族ウレタン型保護基、例えばｔ
−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）　、ジインプロピ
ルメチルオキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボ
ニル、エトキシカルボニルおよびアリルオキシカルボニ
ル；および（３）　シクロアルキルウレタン型保護基、
例えばシクロはンテルオキシカルボニル、アダマンチル
オキシカルボニルおよびシクロヘキシルオキシカルボニ
ル；が含まれる。好適なα、−、アミノ保護基は、Ｎａ
Ｍｅ−置換アミノ酸残基が１位で使用されるときでさえ
もＢＯＣである。

Ｘは水素原子またはＨｉｓのイミダゾール窒素のための
保護基、例えばＴＯ８である。

Ｘ２ハＴｙｒノフエノール性ヒトゝロキシル基のための
適当な保護基、例えばテトラヒドロピラニル、ｔ−ブチ
ル、トリチル、ＢＺＩ　、　ＣＢＺ、４Ｂｒ　−ＣＢＺ
おヨヒ２．６−ジクロルベンジル（ＤＣＢ）で１１）う
る。

好適な保護基は２．６−：）クロルベンジルでおる。

では水素原子であってもよく、この場合はその゛位置の
アミノ酸残基に側鎖保護基が存在しないことを意味する
。

Ｘ３は水素原子またはＡｓｐもしくはＧｌｕのカルボキ
シル基のための適当なエステル形成性保護基、例えばベ
ンジル（ｃｉＢｂ））、２．６−ジクロルベンジル、メ
チルおよびエチルである。

Ｘ４はＴｈｒまたはＳｅｒのヒト８０キシル基のための
適当な保護基、例えばアセチル、ベンゾイル、ｔ−ブチ
ル、−トリチル、テトラヒト８０ピラニル、Ｂｚｌ、２
．６−ジクロルベンジルおよびＣＢＺであシうる。好適
な保護基はＢｚｌである。Ｘ４は水素原子であってもよ
く、この場合はヒドロキシル基に保護基が存在しないこ
とを意味する。

Ｘ５は水素原子またはＡＳｌｌもしくはＧｌｎの側鎖ア
ミド基のための適当な保護基である。それは好適にはキ
サンチル基（Ｘａｎ）である。

Ｘ６はＡｔｇのグアニジノ基のための適当な保護基、例
えばニトロ、Ｔｏｓ、　ＣＢＺ、アダマンチルオキシカ
ルボニルおよびＢＯＣで、１）、Ｘ６はまた水素原子で
ありうる。

ｘ７は水素原子またはＬｙｓの側鎖アミノ基のための適
当な保護基である。適当な側鎖アミノ保護基の例は２−
クロルベンジルオキシカルボニル（２−ｃ４−　ｚ）、
Ｔｏｓ、ｔ−アミルオキシカルボニルおよびＢＯＣであ
る。

Ｘ８は水素原子または一般的に先に示した適当な側鎖保
護基である。

Ｍｅｔは場合により酸素原子で保護すれるが、好ましく
は保護されないままである。　−側鎖アミノ保護基の選
択は一般に合成中のα−アミノ保護基の除去の際に除去
されないものが選ばれるという条件があるが限定的では
ない。しかしながら、ある種のアミノ酸（例えばＨｉｓ
　）にとって、カンプリング完了後は一般に保護を必要
とせず、これらの保護基が同じものであってもよい。

ｘ９ハＣ−末端カルボキシル基のための適当な保護基、
例えばエステル形成性保護基Ｘ３であるか、または固体
樹脂支持体への結合のために固相合成で使用される定着
結合であるか、あるいはｄｅｓ　−Ｘ９であり、この場
合にＣ−末端のアミノ酸残基は、先に定義した通シのカ
ルボキシル部分Ｙｌ有する。

固体樹脂支持体が用いられる場合、それは当技術分野で
知られたもののいずれか、例えば次式ニー　Ｏ−ＣＨ２
−樹脂支持体、−即−ベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ、
）樹脂支持体または−ＮＨＮパーメチルベンズヒドリル
アミン（ＭＢＨＡ）樹脂支持体で表わされる１つであシ
得る。未置換アミドゝが望まれる場合にはＢＨＡまたは
ＭＢＨＡの使用が好ましく、何故なら開裂により直接ア
ミドを生成するからである。

Ｎ−メチルアミドゝが望まれる場合に、それはＮ−メチ
ルＢＨＡ樹脂から生成される。Ｃ−末端でその他の置換
アミド８が望まれる場合、または遊離酸以外の基が望ま
れる場合にはＨｏｕｂｅｎ　−Ｗｅｙｌの教本に記載さ
れるような基本的方法を用いてにプテドを合成すること
が好ましい。

中間体のための式（ＩＩ）において、Ｘ基のうちの少な
くとも１つは保護基であるかまたはＸ９が樹脂支持体を
含む。こうして、本発明はまた興味ある纜プテドの製造
方法を提供し、その方法は（ｃｌ　式（ＩＩ）　Ｃ；ｃ
　コテＸ、Ｘ”　、Ｘ２．Ｘ３．Ｘ’　、Ｘ５゜ｘ６．
ｘ７およびＸ８は各々水素原子または保護基であり、Ｘ
は保護基、樹脂支持体への定着結合またはｄｅｓ−Ｘ９
（この場合Ｃ−末端のアミノ酸残基はカルボキシル部分
Ｙ６もつ）である〕で表わされる少なくとも１つの保護
基を有する投プテドを形成し； （ｈ）　式（ＩＩ）のペプチドから１つまたはそれ以上
の保護基を除去するか、あるいは楚着結合を切り離し；
そして （ｃ）所望によシ、得られた配列（Ｉ）Ωペプチドをそ
の無毒性塩に変換する； ことから成る。

深プテド合成の際に用いる特定の側鎖保護基を選択する
場合、次の一般規則に従う：（ａ）側鎖保護基はその保
護特性を保持するのが好ましく、カンプリング条件下に
切断されない；（ｂ）側鎖保護基は試薬に対して安定で
あるべきであシ、かつｘａｎを除いて、合成の各段階で
α−アミノ保護基を除去するために選ばれた反応条件下
に安定である；そして（ｃ）側鎖保護基は、目的とする
アミノ酸配列を含むｄｆチトゝ合成の完了時点に、その
ペプチド″鎖を変性させない反応条件で除去できなけれ
ばならない。

投プテドが組換えＤＮＡ技術を使って製造されない場合
、それらは例えばＭｅｒｒｉｆｉｅｌｉ　＋７）　Ｊ、
　Ａｍ　。

Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、、　８５　、２１４９頁（，１９
６３年）に一般的に記載されるような固相合成法を用い
て製造するのが好適でおるが、先に述べたように当技術
分野で知られたその他の同様の化学合成法も使用できる
。固相合成法は保護したα−アミノ酸を適当な樹脂にカ
ンシリングさせることにより啄ブチ１のＣ−末端から開
始される。この種の出発物質はα−アミノ保護アミノ酸
をエステル結合でクロルメチル化樹脂またはヒト９０キ
シメチル樹脂へ結合させるか、あるいはアミド結合でＢ
ＨＡ樹脂またはＭＢＨＡ樹脂へ結合させることにより製
造できる。

ヒト９０キシメチル樹脂の製造はＢｏｄａｎｓｋｙらの
Ｃｈｅｍ、　Ｉｎｄ、　（ロンドン）３８．１５９７〜
１５９８頁（１９６６年）に記載されている。クロルメ
チル化樹脂はカリフォルニア州、リッチモンドのＢｉｏ
　Ｒａｄ研究所およ、びＬａｂ、Ｓ’、ｙｓｔｅｍｓ、
　Ｉｎｃ、から市販されている。この種の樹脂の製造は
Ｓｔｅｗａｒｔらの”５ｏｌｉｄ　Ｐｈａｓｅ　Ｐｅｐ
ｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ”（Ｆｒｅｅｍａｎ、　
＆　Ｃｏ、、サンフラ７Ｖス：７　ｔ　１９６９年）。

第１章、１〜６頁に記載されている。ＢＨＡおよびＭＢ
ＨＡ樹脂支持体は市販されておシ、一般に合成される目
釣のポリベゾテドがＣ−末端に未置換アミドを有する場
合にのみ使用され泡。

４３−残基ベプテドを合成しようとする場合、ＢＯＧお
よびＸａｎで保護されたＣ−末端アミノ酸（例えばＡｓ
ｎ　）は、最初にに、ＨｏｒｉｋｉらのＣｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　、　１６５〜１６８頁（１９７
８年）に記載の方法に従って、攪拌下約６０℃でＤ■゛
中のＫＦを用いて２４時間処理することによジクロルメ
チル化樹脂へカップリングされる。ＢＯＧ保護アミノ酸
の樹脂支持体へのカップリング後に、塩化メチレン中の
トリフルオル酢酸（ＴＦＡ）ｉ使って、またはＴＦＡの
みを使ってα−アミノ保護基を除去する。その保護基の
除去は約Ｏ℃から室温までの温度で実施される。特定の
α−アミノ保護基を除去するための他の標準開裂試薬（
例えばジオキサン中のＨＧＩ　）および反応条件は５ｃ
ｈｒｏｄｅｒ　＆Ｌｕ　ｂｋ　ｅの”Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔ
ｉｄｅｓ”、１．７２〜７５頁（アカデミツクプレス、
１９６５年〕に記載されている。

α−アミノ保護基の除去後、残シのα−アミノ−および
側鎖−保護アミノ酸を意図する順序で段階的にカンシリ
ングさせて先に定義した中間体化合物を得るか、あるい
は各アミノ酸を合成中別々に付加する方法の別法として
、それらのうちの数個を固相反応器へ添加する前に互い
にカップリングさせてもよい。適切なカップリング試薬
の選択は当分野の技術の範囲内である。Ｎ、Ｎ’−ジシ
クロへキンル力ルボジイミ）’　（ＤＣＣＩ）はカンプ
リング試薬として特に適するものである。

はプテドの固相合成法で用いる活性化試薬はイプテドの
分野で周知である。適切な活性化試薬の例はＮ、Ｎ／−
ジインプロピルカルボジイミドおよびＮ−エテル−Ｎ’
−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドなど
のカルボジイミド類である。

その他の活性化試薬およびイプチドカンプリングにおけ
るそれらの使用については５ｃｈｒｏｄｅｒ’　＆Ｌｕ
　ｂｋ　ｅの上記文献（第１章）およびＫａｐｏｏｒの
Ｊ、　Ｐｂａｒ、　Ｓｃｉ、、　５９　、１〜２７頁（
１９７０年）に記載されている。

各保護アミツタまたはアミノ酸配列は約４倍過剰量もし
くはそれ以上で固相反応器内に導入され、そして力、ツ
ブリングがジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）　：　ＣＨ
２Ｃ／２　（１：　１　）またはＤ臂Ｆ単独もしくはＣ
Ｉ（２Ｃ］２単独の媒体中で実施される。不完全なカッ
プリングが生ずる場合に、そのカンプリング方法は次の
アミノ酸のカンプリングに先立つα−アミノ保護基の除
去前に繰り返し行われる。合成の各段階でのカンプリン
グ反応の結果は、もしそれが手動で行われる場合には、
Ｅ、　ＫａｉｓｅｒらのＡｎａｌ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、
　３４　、５９５頁（１９７０年）に記載されるような
ニンヒビリン反応によって監視するのが好ましい。カン
プリング反応は例えばＲｉｖｉｅｒらの二組り主５ｒｍ
ｅｒｓ　、　１７　、１９２７〜１９３８頁（１９７８
年ンに報告されるプログラムを用いて自動的に（例えば
、ペックマン９９０自動合成機、）行うことができる。

目的とするアミノ酸配列が完了した後、中間体にブチ［
パは液状弗化水素のような試薬で処理することにより樹
脂支持体から切り離され、この液状弗化水素ははプテド
を樹脂支持体から切シ離すばかりでなく、残存する全て
の側鎖保護基ｘ、ｘ２゜ｘ　、ｘ　、ｘ　、ｘ　、ｘ　
、ｘ　および定着結合Ｘ９ならびにα−アミン保護基Ｘ
　が使用されるときにはそれをも切断して遊離酸の形の
ペプチドを与える。

Ｍｅｔがその配列に存在す多場合、ＢＯＣ保護基はにプ
チドをＨＦ樹脂から切シ離す前にトリフルオル酢酸（Ｔ
ＦＡ）　／エタンジチオールを用いて初めに除去してお
き、起こりうるＳ−アルキル化を排除するのが好ましい
。切シ離しのために弗化水素を用いるときには、反応容
器内にスキャベンジャ−としてアニソールおよびメチル
エチルスルフィ１を加える。

以下の実施例は固相法による好適なにプテド合成法を示
す。対応する短い投プテド断片はにプチド鎖のいずれか
の末端で必要数のアミノ酸ヲ単に゛減らすことにより同
じ方法で合成されることはもちろん理解されるだろう。

しかしながら、目下のところ生物学的に活性な断片は示
したＮ−末端の配列を含むべきであると思われる。

実施例　■ 次式： ％式％ で表わされるペプチド〔ＮαＭｅＴｙｒ’　、Ｄ−ＮＭ
Ａ２．Ｄ　−Ｌ６ｕ”’］−ｒＧＲＦ（１−４３）−Ｏ
Ｈは、ｋツクマン９９０はプテド合成機を使って、約０
．１〜０．５ミリモル／Ｉ（樹脂）の置換範囲をもクク
ロルメチル化樹脂上で段階的に合成された。ＢＯＣ−Ａ
ｓｎ　（Ｘａｎ　）の樹脂へのカンプリングは、Ｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　（上記参照〕に記載の
一般方法によシ、攪拌下約６０℃でＤＭＦ中のＫＦを用
いて２４時間行われた。それは樹脂ｌＩ当たシ約０．３
５ミＩＪモルのＡＳＤの置換をもたらした。

保積基の除去および中和後に、４ゾテ）鎖は樹脂上に段
階的に付加された。保護基の除去、中和および各アミノ
酸の付加は一般にＪＱＲｉｖｉｅｒのＪ、Ａｍｅｒ、　
Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、、　９６　、２９８６〜２９９２
頁（ｉ９７４年）に詳細に記載される方法に従って行わ
れた。使用する全ての溶媒は、Ｍｅｔ残基の硫黄を酸化
−するので望ましくない酸素を確実に追い出すべく、不
活性ガス（例えばヘリウムまたは窒素）を散布して注意
深くガス抜きした。

保護基の除去は次のスケジュールＡに従って実施された
。

１．６ｏ％ＴＦＡ／２％エタンジチオールｌＯ２，６０
％ＴＦＡ／２％エタンジチオール　１５３、ＩＰＡ７１
％エタンジチオール　０５４、Ｅｔ３Ｎ（１０％）／Ｇ
Ｈｚ　０１３２　０．５５、ＭｅＯＨＯ，５ ５、Ｅｔ３Ｎ（１０％）／ＣＨ２Ｇ＃２　０．５７、　
ＭｅＯＨ（２回）０．５ ｓ、　ＧＨ２Ｇｉ２（２回）０５ カツプリングは次のスケジュールＢのようにして好適に
実施された。

、９．　ＤＣＣＩ　− １０、Ｂｏｃ−アミノ酸　５０−９０ １１、ＭδＯＨ（２回）０．５ １２、　０Ｈ２Ｇ７２（２回）０．５ １３、ＡＣ２０（３Ｍ　）　／　ＣＨ２Ｃ１ｚ２　１５
．０１．４．　ＣＨ２Ｃ１ｚ　Ｏ，５ １５、ＭｅＯＨ０，５ １６、ａＨ２ａａｚ（２回〕０．５ 簡単に述べると、樹脂ＩＦ当たシおよび塩化メチレン中
０．１モルＤＣＣＩ　１当量当たりＢＯＣ−保護アミノ
酸１〜２ミリモルが２時間にわたって用いられた。ＢＯ
Ｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）をカンプリングさせる場合には、
５０％ＤＭＦと塩化メチレンの混合物が使用された。Ｂ
ｚｌエーテルはＳｅｒおよびＴｈｒのヒトゝロキシル側
鎖保護基として用いた。ＡＳｎまたはＧｌｎのアミド基
は、ＤＣＣカンプリングを行う場合（この方が好ましい
）に、Ｘａｎで保護した。また、ＡＳｎまたはＧｌｎの
カルボキシル基端を活性化スるのにｐ−ニトロフェニル
１ステル（ＯＮｐ　）が使用され、例えばＢＯＣ−Ａｓ
ｎ　（ＯＮｐ）はＤＭＦと塩化メチレンの５０％混合物
中ＨＯＢｔ　１当ｔ’ｒ用いて一部カツブリングされ、
この場合ＤＣＣは添加されない。２−クロルインジルオ
キシ力ルボニル（２ＣＡ’−Ｚ）ＨＬｙｓ側鎖の保護基
として用いた。Ｔ’ｏｓはＡｒｇのグアニジノ基および
Ｈｉｓのイミダゾール窒素を保護するのに用いられ、ま
たＧｌｕもしくはＡｓｐの側鎖カルボキシル基は０Ｂｚ
ｌで保護された。Ｔｙｒのフェノール性ヒトゝロキシル
基は２，６−ジクロルベンジル（ＤＣＢ）で保護した。

合成の終シに次の組成：ＢＯＣ−ＮａＭｅＴｙｒ（Ｘ２
）−Ｄ−ＮＭＡ−Ａｓｐ（Ｘ３）−Ａｌａ−１１ｅ　−
ＰＴｈｅ−Ｔｈｒ（Ｘ’）−８ｅｒ（Ｘ’）−８ｅｒ（
Ｘ’）−Ｔｙｒ（Ｘ２）−Ａｒｇ（Ｘ６）−Ａｒｇ（Ｘ
６）−ＩＩｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ（Ｘ”）−Ｌｅ
ｕ−Ｔｙｒ　（Ｘ２）　−Ａ］、ａ−Ａｒ　ｇ　（Ｘ６
）　−Ｌｙｓ　（Ｘ７）　−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｈｉ
ｓ（Ｘ）−Ｇｌｕ（Ｘ３）−１１ｅ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ　
（Ｘ５）−Ａｒｇ（Ｘ６）−Ｇｌｎ（Ｘ５）−Ｇｌｎ（
Ｘ５）−Ｇｌｙ−Ｃ１ｕ（Ｘ３）−Ａｒｇ（Ｘ６）−Ａ
ｓｎ（Ｘ５）−Ｇｌｎ（Ｘ”）−Ｇｌｕ（Ｘ３）−Ｇｌ
ｎ（Ｘ５）−Ａｒｇ（Ｘ６）−３ｅｒ（Ｘ’　）−Ａｒ
ｇ（Ｘ６）−Ｐｈｅ−Ａｓｎ（Ｘ５）−Ｘ９（式中、Ｘ
［ＤＣＢでｉ、Ｘは０Ｂｚ７であり、Ｘ４はＢｚ７であ
り、Ｘ”ｉ”１Ｘａｎでアシ、Ｘ６は’ｒｏｓであり、
Ｘ７は２　Ｃ６−Ｚであり、そしてＸ９は−０−ＣＨ２
−樹脂支持体である）で表わされる中間体が得られた。

Ｘａｎはα−アミノ保護基の除去の際に用いられたＴＦ
Ａ処理によって一部または全部除去されてもよい。

この保護投ゾテド一樹脂から深プテドヲ切シ離しかつ保
護基を除去するために、Ｋプチド一樹脂１ｇ当たｔ）ア
ニソール１５ｍ１．メチルエチルスルフィト″０．５ｍ
ｌおよび弗化水素（ＨＦ）　１５　ｍｌを用いて。

−２０℃で３０分、０℃で３０分処理した。高真空下で
ＨＦを排除した後、樹脂−ペプチド残留物は乾燥ジエチ
ルエーテルおよびクロロホルムで交互に洗い。その後投
プテドをガス抜きした２Ｎ酢酸水溶液で抽出し、濾過す
ることにより樹脂から分離した。

樹脂から切り離しかつ保護基を除去したにプテビは次に
０〜５％酢酸に溶解して、七ファデスクスＧ’−５０微
細ゲル沖過を伴う精製にかけた。

このＲプチトゝはさらにＲｉｖｉｅｒらのＰｅｐｔｉｄ
ｅｓ：５ｔｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃ
ａｌ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　、１２５〜１２８頁（１９７
９年〕およびＭａｒｋｉらのＪ、Ａｍ。

Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、、　１０３．３１７８頁（１９８１
年）に記載されるような調製的または半調製的ＨＰＬＣ
により精製した。カートリッジを備、ｔ　タＷａｔｅｒ
ｓＡｓｓｏｃｉａｔｅｓ　ｐｒｅｐ　ＬＣ−５００にＶ
ｙｄａｃ社からのＣｔＳシリカ（３００Ａ）を充填した
。ＴＥＡＰ中のＣＨ３０Ｎの勾配はＪ、　Ｒｉｖｉｅｒ
のＪ　、　Ｌｉｑ　、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ。

１　、３４３〜３６７頁（，１９７８年）に記載される
ような低圧Ｅｌｄｅｘ勾配調製機によって調製した。ク
ロマトグラフィー分画はＨＰＬＣで注意深く監視し、そ
して実質的純度を示す分画のみをプールした。別個に純
度を調べた精製分画の脱塩は０，１％ＴＦＡ中のＣＨ３
ＣＮの勾配を用いて達成された。その後、中央溶出分を
凍結乾燥して目的のＲプチドを得、この純度は９８％以
上であった。

合成はＭＢＨＡ樹脂を用いて繰シ返し行われ、Ｖａｌｅ
らの米国特許第４２９２３１３号に一般的に記載される
初期、方法を用いてＡＳｎをＭＢＨＡ樹脂に結合させる
ことによりアミド化Ｃ−末端をもつ同一のＲゾテドを製
造した。

実施例　■ 次式： ％式％ で表わされる４〇−残基アミド化啄プチド（ＣαＭｅＨ
ｉｓ’、Ｄ−ＮＭＡ２．Ｄ−Ｌｅｕ２３）−ｈＧＲＦ（
］−４０）　−ＮＨ２は、インクマン９９０ペプチドゝ
合成機を使って、Ｖａｌｅらの米国特許第４２９２３１
３号に一般的に記載されるようにＭＢＨＡ樹脂上で段階
的に合成した。この投ブチ白ｄ　ＴＬＣおよびＨＰＬＣ
により実質的に純粋であることが判明した。

実施例　■ 次式： Ｈ−Ｈｉｓ−Ｄ−ＤＮＭＡ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１１ｅ−
Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−３ｅｒ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａ
ｒ　ｇ−工１　ｅ−Ｌｅｕ−Ｃｉｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−
Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈ
ｉ、；−Ｇｌｕ−Ｉ　１ｅ−Ｎｌｅ−Ａｓｎ　−Ａｒｇ
−Ｇｌｎ−Ｇ１１１−Ｇｌｙ−Ｇ］−ｕ−Ａｒｇ−Ａｓ
ｎ　−Ｇｌｎ　−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ　−３ｓｒ−
Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ　−ＯＨで表わされるＲブチｌ
−’　［Ｄ−ＨＭＡ２．Ｎｌｅ”］−ｒＧＲＦ（１−４
３）−ＯＨは、ベックマン９９０ペプチドゝ合成機を使
って、実施例Ｉに記載の方法により段階的に合成した。

このにプテドはＴＬＣおよびＨＰＬＣによシ実質的に純
粋であることが判明した。

実施例　■ 次式： ％式％ で表わされるｈＧＲＦ類似体断片［Ｄ−ＨＭＡ　、Ｎｌ
ｅ　：］−ｈＧＲＦ　（１−３２）　−ＮＨｚは、ベッ
クマン９９０Ｒプテド合成・涜ヲ使って、実施例Ｈのよ
うにしてＭＢ）ＩＡ樹脂上で段階的に合成した。この類
似体断片・はＴＬＣおよびＨＰＬＣにより実質的に純粋
であることが判明した。

合成音２回繰シ返して行って［Ｄ−ＨＭＡ２．Ｄ−Ｍｅ
ｔ２７］−ｈＧＲＦ　（１−３２）−ＮＨｚおよび（Ｄ
−ＨＭＡ２．Ｄ−Ｌｅｕ２３゜Ｎ１ｅ２７〕−ｈＧＲＦ
　（１−３２）−ＮＨｚを製造した。

実施例　Ｖ 次式： ％式％ で表わされるｈ　ＧＲＦ類似体断片〔Ｄ−ＨＭＡ２．Ｎ
１ｅ２７〕−ｈｒ、ｒＲＦ　（ｌ−２９）−ＮＨｚは、
インクマン９９ｏペプチド合成機を使って、実施例■の
ようにしてＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。このイ
プテド［ＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋であるこ
とが判明した。

この合成金繰シ返し行って［Ｄ−ＨＭＡ２．Ｎ１ｅ２７
〕−ｈＧＲＦ　（１−２７）−ＮＨｚを製造した。

実施例　■ 次式： ％式％ で表わされる一？ｊチド［−Ｄ−ＨＭＡ２．Ｎ１ｅ２７
］　−ｒＧＲＦ（１−２９）−ＮＨｚは、はツクマン９
９０投プテド合成機を使って、実施例■のようにしてＭ
ＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。このＲプテドはＴＬ
ＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋であることが判明した
。

この合成を繰シ返し行って［Ｄ−ＨＭＡ２．Ｄ−Ｌｅｕ
”’。

Ｎ１ｅ２７〕−ｒＧＲＦ　（１−２９）　−ＮＨｚ　’
ｅ　製造シタ。

実施例　■ 次式： ％式％ （１−２９）−ＮＨｚは、はンクマン９９０　Ｋプテド
合成機を使って、実施例■のようにしてＭＢＨＡ樹脂上
で段階的に合成した。このイプチドはＴＬＣおよびＨＦ
ＬＣで実質的に純粋であることが判明した。

実施例　■ 次式： ％式％ （１−２９）−ＮＨｚは、はツクマン９９０イプチド合
成機を使って、実施例ＨのようにしてＭＢＨＡ樹脂上で
段階的に合成した。この深プチドはＴＬＣおよびＨＰＬ
Ｃで実質的に純粋であることが判明した。

実施例　■ 次式： ％式％ で表わされる（Ｄ−Ｐｈｅｌ、Ｄ−ＮＭＡ２．Ｄ−Ｌｅ
ｕ２３）−ｐＧＲＦ（１−４４）−ＮＨ２は、ベックマ
フ９９０＝プチド合成機を使って、■ａｌｅらの米国特
許第４２９２３１３号に一般的に記載されるようにＭＢ
ＨＡ樹脂上で段階的に合成した。このペプチドゝはＴＬ
ＣおよびＩ（ＰＬＯで実質的に純粋であることが判明し
た。

実施例　Ｘ 次式： ％式％ ン９９０−！！プテト８合成機を使って、実施例Ｉに記
載の方法で段階的に合成した。このにプテドはＴＬＣお
よびＨＰＬＣによシ実質的に純粋であることが判明した
。

実施例　Ｍ 次式： ％式％ ） →旧２は、はツクマン９９０投プテド合成機を使って、
実施例■のようにしてＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成し
た。この類似体はＴＬＣおよびＨＰＬＣによシ実質的に
純粋であることが判明した。

実施例　■ 次式： ％式％ −ｂＧＲＦ　（１−２９）−ＮＨ２は、ベックマン９９
０　はゾテド合成機を使って、実施例ＨのようにしてＭ
ＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。この類似体はＴＬＣ
および）ＴＰＬＣで実質的に純粋であると判明した。

実施例　ＸＪ［ 次式： ％式％ ４プテド合成機を使って、実施例■に記載の方法によジ
クロルメチル比樹脂上で段階的に合成した。

この−くプテドはＴＬＣおよびＨＰＬＣによシ実質的に
純粋であると判明した。

実施例　ＸＩＶ 次式： ％式％ で表わされるｒＧＲＦ類似体断片すなわち〔ＮαＭｅＴ
ｙｒ１゜Ｄ−ＮＭＡ２．Ｄ−Ｇｌｕ２５］−ｒＧＲＦ　
（１−２９）−ＮＨ２は、インクマン９９０−ｓプチト
ゝ合成機を使って、実施例■のようくしてＭＢＨＡ樹脂
上で段階的に合成した。このはプテドはＴＬＣおよびＨ
ＰＬＣにょシ実質的に純粋である−と判明した。

実施例　Ｗ 次式： ％式％ クラン９９０投プテド合成磯を使って、実施例Ｈのよう
にしてＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。このイプチ
ドはＴＬＣおよびＨＰＬＣにより実質的に純粋であると
判明した。

実施例　ＸＶＩ 次式： ％式％ ） −ＮＨ，ｄｊ：、はツクマン９９０はプテトゝ合成機を
使って、Ｖａｌｅらの米国特許第４２９２３１３号に記
載されるようにＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。

この−ぐプナトゝはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純
粋であると判明した。

実施例　■ 次式： ％式％ （１−４４）−ＮＨ２は、ベックマン９ヴ０−！！プチ
ド合成機を使って、Ｖａｌｅらの米国特許第４２９２３
１３号に記載されるようにＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合
成した。このはプテドはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的
に純粋であることが判明した。

実施例　罵 次式： ％式％ ） −ＮＨ２は、ベックマン９９０にプチトゝ合成機を使っ
て、Ｖａｌｅらの米国特許第４２９２３１３号に記載の
ようにしてＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。

この投プテトゝはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋
であると判明した。

実施例　ＸＩＸ 次式： ％式％ ド合成機を使って、実施例■のようにしてＭＢ）ＴＡ樹
脂上で段階的に合成した。この投プチドはＴ１．、ＩＧ
およびＨＰＬＣで実質的に純粋であると判明した。

実施例　豆 次式： ％式％ （１−４Ｑ−ＮＨ２は、ベックマｙ９９０’プテト９合
成機を使って、Ｖａｌｅらの米国特許第４２９２３１３
号に記載のようにＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。

この−々プチトゝはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純
粋であると判明した。

実施例　ＸＸ［ 次式： ％式％ ］ ド合成機を使って、Ｖａｌｅらの米国特許第４２９２３
１３号に記載のようにＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成し
た。このペプチドゝはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に
純粋であると判明した。

実施例　劇 次式： ％式％ で表わされるｈＧＲＦ類似体断片［Ｄ−ＮＭＡ２．　Ｌ
ｅｕ２７゜Ａｓｎ　２８］−ｈＧＲＦ　（１−３２）−
ＮＨｚは、はツクマ合成機０ペプチド合成機を使って、
実施例■のようにしてＭＢＨＡ樹脂−ヒで段階的に合成
した。この類似体（・よＴＴ、Ｃ訃よびＨＰＬＣで実質
的に純粋であると判明した、 合成を２回繰り返し行って［Ｄ−ＮＭＡ　、Ｎｖａ　）
−ｈＧＲＦ（１−３２）−ＮＨｚおよび［Ｄ−ＮＭＡ２
．　Ｉ　１゜１３゜Ｎ４ｅ２７］−ｈＧＲＦ　（１−３
２）−ＮＨｚを製造した。

実施例　可■ 次式： ％式％ （１ ２９）−Ｎｔ（２ハ、ベックマン９９０にプテド合成機
を使って、実施例口のようにしてＭＢ′ＨＡ樹脂上で段
階的に合成した。このペプチドはＴＬＣおよびＨＰＬＣ
で実質的に純粋であると判明した。

合成を繰り返し行って［Ｄ−ＮＭＡ２．Ｖａｌ工３．Ｓ
ｅｒ！８’］−ｒＧＲＦ（１−２９）−Ｎ）Ｔｚを製造
した。

実施例　ＸＸｆｆ 次式； ％式％ で表わされるｈＧＲＦ類似体断片ＣＤ−Ｎ？ｖｔＡ２．
Ａｒｇ１２゜１１ｅ２７］−ｈＧＲＦ　（１−２９）−
ＮＨｚは、（ツクマン９９ル投プテド合成機を使って、
実施例ＨのようにしてＭＢＨＡ樹脂上樹脂層的に合成し
た。このＲプチドはＴＬＣおよび）ＴＰＬＣで実質的に
純粋であると判明した。

実施例　ＸＸｖ 次式： ％式％ ：） −ｂＧＲＦ　（１−２９）−ＮＨｚは、ペックマン９９
０投プテド合成機を使って、実施例ＨのようにしてＭＢ
ＨＡ樹脂上樹脂層的に合成した。この類似体はＴＬＣお
よびＨＰＬＣで実質的に純粋であると判明した。

実施例　創 次式： ％式％ （１−３２）−ＮＨｚは、ベックマン９９０ズプチトゝ
合成機を使って、実施例ＨのようにしてＭＢＨＡ樹脂上
樹脂層的に合成した。この類似体はＴＬＣおよびＨＰＬ
Ｃで実質的に純粋であると判明した。

実施例　ｘｘｖｕ 次式： ％式％ ：］ 合成機を使って、実施例■のようにしてＭＢＨＡ樹脂上
樹脂層的に合成した。この被プテドはＴＬＣおよびＨＰ
ＬＣで実質的に純粋であると判明した。

実施例　ＸＸｉ’１ 次式： Ｈ−’Ｄ−Ｈｉｓ−Ｄ−ＮＭＡ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１１
ｅ−Ｐｂｅ−Ｔｈｒ−Ｉ）−Ａｓｎ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−
Ａｒｇ−Ａｒｇ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌ
ｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ、−Ｌ
ｅｕ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−Ｉ］、ｅ−Ｎｌｅ−Ａｓｎ−Ａ
ｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−３ｅｒ−Ａｓ
ｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ａｒｇ
−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｈ で表わされる［Ｄ−Ｈｉｓ　’　、Ｄ−ＮＭＡ２．Ｄ−
Ａｓｎ８．Ｎ１ｅ２７゜５ｅｒ３’　、Ａｌａ４０］−
ｒＧＲＦ　（１−４３）　−〇Ｈは、Ｋツクマフ９９０
ハプテド合成機を使って、実施例Ｉに記載の方法により
クロルメチル化、閏脂上で段階的に合成した。このＲプ
テドはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋であると判
明した。

実施例　ＸＸＸ 次式： ％式％ （１−３２）−ＮＨｚは、ベックマン９９０ペプチド９
合成機全使って、実施例■のようにしてＭＢＨＡ樹脂上
で段階的に合成した。この類似トドはＴＬＣおよびＨＰ
ＬＣで実質的に純粋であると判明した。

実施例　ＸＸＸ 次式： ％式％ ９９０啄プテド合成機を使って、実施例Ｈのようにして
ＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。この類似体はＴＬ
ＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋であると判明した。

次式： ％式％ （２３ ９９０Ｒプチド合成機を使って、実施例■に記載の方法
によりクロルメチル化樹脂上で段階的に合成し、次にエ
チルアミンを用いて樹脂から切シ離すことにより置換ア
ミド深プテトゝを製造した。このペプチドはＴＬＣおよ
びＨＰＬＣで実質的に純粋であると判明した。

実施例　酬 次式： ％式％ で表わされるｒＧＲＦ類似体断片すなわち〔ＮαＭｅＴ
ｙｒ　１　。

Ｄ−Ｌｅｕ１４．Ｄ−Ｇ１ｕ２５〕−ｒＧＲＦ（１−２
７）−ＮＨｚは、ベックマン９９０−′−！′プテトゝ
合成機を使って、実施例ＨのようにしてＭＢＨＡ樹脂上
で段階的に合成した。

このビプチトゞはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋
であると判明した。

実施例　ＸＸＸＩ 次式： ％式％ ］ −ｐＧＲＦ　（１−４４）−ＮＨｚは、ベックマン９９
０にプテド合成機を使って、Ｖａｌｅらの米国特許第４
２９２３１３号に記載のようにＭＢＨＡ樹脂上で段階的
に合成した。このペプチドはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実
質的に純粋であると判明した。

実施例　ＸＸＸＩＶ 次式： ％式％ ン９９０ヘプテド合成機を使って、実施例■のようにし
てＭＢｌ［’ｌＡ樹脂樹脂膜階的に合成した。このはプ
チトゝはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋であると
判明した。

実施例　窟双 次式： ％式％ はプテド合成機を使って、Ｖａｌｅらの米国特許第４２
９’２３１３号に記載のようにＭＢＨＡ樹脂上で段階的
に合成した。このはブチ＋−”Ｈ’ｒＬｃおよびＨＰＬ
Ｃで実質的に純粋であると判明した。

実施例　ＸＸｘＶＩ 次式： ％式％ （１−２９）−ＮＦ２は、ベックマン９９０−！′プチ
ド合合成を使って、Ｖａｌｅらの米国特許第４２９２３
１３号に記載のようにＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成し
た。このペプチドはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純
粋であると判明した。次にこのにプチドを水に溶解し、
ＩＮ酢酸を加え、得られた溶ｉ’ｌ！を凍結乾燥するこ
とによシ酢酸塩を製造した。

実施例　ＸＸＸＶＩＩ 次式： ％式％ で表わされるｈＧＲＦ類似体（Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ１ｅ２
７．Ｄ−Ａｒｇ２９：］　−ｈＧＲＦ　（１−２９）　
−ＮＦ２は、ペックマン９９０投プチド合成機を使って
、実施例ＨのようにＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した
。この類似体はＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋で
あると判明した。

合成を繰り返し行って［Ｄ−ＮＭＡ２．Ｄ−Ｌｅｕ１４
．Ｎ１ｅ２７゜Ｄ−Ａｒｇ２９）−ｈＧＲＦ（１−３２
）−ＮＦ２を製造した。

実施例　豆罵 次式： ％式％ ） ＮＨ２は、ベックマフ９９０ペプチドゝ合成機を使って
、実施例ＨのようにしてＭＢ）ＴＡ樹脂上で段１昔的に
合成した、このペプチドはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質
的に純粋であると判明した。

合成を繰り返し行って（Ｄ−ＮＭＡ２．’Ｄ−Ｌ６ｕ”
、Ｎ１ｅ２７〕−ｒＧＲＦ　（１−−２９）−ＮＦ２を
製造した。

実施例　ＸＸＸＩＸ 次式： ％式％ で表わされるｈＧＲＦ類似体〔Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ工。２
７．Ａｓｏ２８〕−ｈＧＲＦ　（１−２９）　−ＮＦ２
は、ベック−’７７９９０−’ｅプチド合成機ヲ使って
、実施例ＨのようにしてＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成
した。この（プテドはＴＬＣおよび）ＴＰＬＣで実質的
に純粋であると判明した。

次式： Ｈ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａ１＋ｔ−Ａｓｐ−Ａ、１ａ−１１ｅ
−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−
Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌ、ｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｕｎ−Ｌｅｕ−
３ｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇ
ｌｎ−Ｄ−Ｇｌｕ−１１ｅ−Ｎｌｅ−３ｅｒ−Ｄ−Ａｒ
ｇ−Ｎｌ２ で表わされる［Ｄ−Ａｌａ”　、Ｄ−Ｇｌｕ２５．Ｎ１
６２７．Ｄ−Ａｒｇ２９］−ｈＧＲＦ　（１−２９）−
Ｎｌ２は、くツクマン９９０投プテド合成機を使って、
実施例■のようにしてＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成し
た。樹脂から切り離して保護基を除去した後、このペプ
チドはＩＮ酢酸で処理してその酢酸塩を製造し、そして
凍結乾燥した。このはプチドはＴＬＣおよびＨＰＬＣで
実質的に純粋であると判明した。

実施例　ＸＬＩ 次式： ％式％ ）（２ ） ＮＨ２は、ペン、クラン９９０−！！プテド合成機を使
って実施例■のようにしてＭＢ）ＴＡ樹脂上で段階的に
合成した。このはプチドはＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質
的に純粋であると判明した。

実施例　ｘＬ■ 次式： ％式％ ９９０にプチド合成・濃ヲ使って、実施例Ｉに記載の方
法によジクロルメチル化樹脂上で段階的に合成した。こ
のベプブート″′はＴＬＣおよびＨＰＬＣ，で実質的に
純粋であると判明した。

実施例　ＸＬ［ 次式： ％式％ で表わされるｈＧＲＦ類似体断片［Ｄ−ＮＭＡ２．Ｄ−
Ｔｙｒｌｏ。

Ｎ１ｅ２７）−ｈＧＲＦ（＋−２９）−Ｎｌ２は、４ツ
クマフ　９９０はプチド合成機を使って、実施例■のよ
うにしてＭＢＨＡ樹脂上で段階的に合成した。このはプ
テドＴＬＣおよびＨＰＬＣで実質的に純粋であると判明
した。

合成を繰シ返し行って（Ｄ−ＮＭＡ２．Ｄ−Ｌｅｕ１７
．Ｎ１ｅ２７：）−ｈＧＲＦ　（１−２’７　）−Ｎｌ
２を製造した。

実施例　ＸＬｒＶ 次式： ％式％ で表わされるｈＧＲＦ類似体断片（Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ１
ｅ２７：１−ｈＧＲＦ　（１−２９）−ＮＨＥｔは、イ
ンクマン９９０イゾチト゛合成機を使って、実施例Ｉの
ようにしてクロルメチル化樹脂上で段階的に合成した。

このはプテトｅはエチルアミンでの処理によるアンモノ
リシスによって樹脂から切シ離した。このペプチドはＴ
ＬＣｂよび）ＴＰＬＣで実質的に純粋であると判明した
。

」■１−一」山Ｌ′ 次式： ％式％ ） ＮＨ２は、ベンクマン９９ｏ−＜プチド合成機全使って
、実施例■のようにしてＭＢ）ＴＡ樹脂上で段階的に合
成した。このはプテドはＴＬＣおよびＨＰＬＧで実質的
に純粋でるると判明した。

実施例　ＸＬＶＩ 次式： Ｈ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−ＮＭＡ−Ａｓｐ−Ａｌａ、−１１
ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ　−３ｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒ
ｇ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ
−８ｅｒ　−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ
−Ｇ］、ｎ−Ａｓｐ−Ｉ　１ｅ−Ｎ］、ｅ−３ｅｒ　−
Ｄ−Ａｒｇ−ＮＨ２ で表わされるｆｉＧＲＦ類似体断片［Ｄ−Ｔｙｒｌ、Ｄ
−ＮＭＡ２゜Ｎ１６２７．Ｄ−Ａｒｇ２９］−ｈＧＲＦ
　（１−２９）−ＮＨ２は、くンクマンｇｇ□′−！！
プチド合成機を使って、実施例■のようにしてＭＢＨＡ
樹脂上で段階的に合成した。この啄プチト５はＴＬＣお
よびＨＰＬＣで実質的に純粋であると判明した。

合成を繰り返し行って［Ｍｅｔ’　、Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ
１ｅ２７）−ｈＧＲＦ　（１−２７）−ＮＨ２を製造し
た。

実施例　℃■ 次式： ％式％ で表わされるｂＧＲＦ類似体断片（：Ｄ−Ｎ’ＭｅＴｙ
ｒ”　、Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ１−３２７）−ｈＧＲＦ　（
１−２９）−ＮＨ２は、インクマン９９０−’！プチド
合成機を使って、実施例ＨのようにしてＭＢＨＡ　樹脂
上で段階的に合成した。このはプテト・はＴＬＣおよび
ＨＰＬＣで実質的に純粋−Ｃあると判明した。

実施例　ＸＬ■ 次式：、 Ｈ−Ｈｉｓ−Ｄ−ＮＭＡ−Ａｓｐ−Ａ１ａ７１１ｅ−Ｐ
ｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ　−３ｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｌ
ｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−８ｅ
ｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇ１ｎ
７Ａｓｐ−Ｉ　１ｅ−Ｎ　１　ｅ−８ｓ　ｒ　−Ａ　ｒ
　ｇ　−ＮＨ２で表わされるｈＧＲＦ類似体断片ＣＨ１
ｓ’　、Ｄ−ＮＭＡ２゜Ｎ１ｅ２７〕−ｈＧＲＦ　（１
−２９）−ＮＨ２は、ベックマン９９０−′−！′プチ
ド合成機を使つ゛〔、実施例ｊ１のようにしてＭＢＨＡ
樹脂上で段階的に合成した。この４ブチ１−゛はＴＬＣ
および）ＴＰＬＣで実質的に純粋であると判明した。

合成２９り返し行って［Ｈｉｓ’　、Ｎ１ｅ２７．Ｄ−
Ａｒｇ２９）−ｈＧＲＦ　（１−２９）　−ＮＨ２を製
造した。

実施例で製造された合成Ｒプテドはインビト・ワ検定に
おいて合成り、ｐｃＲＦ　（１−４０）−ＯＨと比較さ
れ、そしてＧＨの分泌に対してより強い効力を示すこと
が見出された。これらの合成間プチドは全て生物学的に
活性であり、そして下垂体からのＧ［（の放出を刺激す
るのに有用であると考えられる。

ある種の代表的合成投プテドの成長ホルモン放出を促進
させる相対的有効性を決定するためにインヒドロ検定が
行われ、等モル濃度の合成された代表的類似体との比較
のための標準として合成ｈｐＧＲＦ（１−４０）−０８
が用いられた。３〜５日前にあらかじめ摘出したラット
の下垂体細胞を含む培養物が使用される。この種の培養
物は成長ホルモンの分泌にとって最適であると考えられ
、そしてＶａ、ｌｑらのＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、
　９１　、５６２〜５７２頁（１９７２年）に記載され
かつＶａｌｅらのＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１１２
．１５５３〜１５５５頁（１９８３年〕により詳細に記
載される一般方法によシ比較試験のために使用される。

試験すべき物質とのインキュに一ジョンは３〜４時間実
施され、そして培地のアリコートと取り出して、ラジオ
イムノアッセイでそ、れらの免疫反応性ＧＨ（ｉｒ　Ｇ
Ｈ）含有量全測定する。

等モル濃度でのこの比較試験の結果を表Ｉに示すつ 表　■ Ｒゾチド　比較％ ｈＧＲＦ　（１−４Ｑ）　−０Ｈ （この試験のための標準）　１００％ ［Ｄ−ＮＩＶＩＡ２．Ｎｌｅ”３−ｈＧＲＦ　（１−２
９）−ＮＨ２１３３０％（Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ１ｅ２７）
−ｈＧＲＦ（１−２７）−ＮＨ２１５’Ｏ％［Ｄ−ＮＭ
Ａ２．Ｎｌｅ”］−ｈＧＲＦ（１−２９）−ＮＨＥｔ　
１１３０％［：Ｄ−ＮＭＡ”　、Ｎ１ｅ２７．Ａｓｎ２
８］−ｈＧＲＦ　（１−２９）−Ｎ）Ｔ２　５２０％［
Ｄ−Ｌｅｕ”　’　、Ｎ１ｅ２７］　−ｒＧＲＦ　（１
−２ｇ）−Ｎ）Ｔ２１２０％［Ｎ１ｅ２７．Ｄ−Ａｒｇ
２９］−ｒＧＲＦ″（１−２９）−ＮＨ２３８６％〔Ｄ
−ＮＭＡ２．Ｎ１ｅ２７〕−ｒＧＲＦ（１−２９）−Ｎ
）Ｔ２　９００％［Ｄ−ＮＭＡ２．Ｄ−Ｔｙｒｌｏ、Ｎ
１ｅ２７］−ｂＧＲＦ（１−２９）−Ｎ）（２２７０％
［Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ１ｅ２７．Ｄ−Ａｒｇ２９］−ｈＧ
ＲＦ　（１−２９）−ＮＨ２５８０％［Ｄ−Ｔｙｒ”、
Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ１ｅ２７．Ｄ−Ａｒｇ２９）−ｈＧＲ
Ｆ（１−２９）−ＮＨ２６０％［：Ｄ−Ｎ’ＭｅＴｙｒ
”　、Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ１ｅ２７）→ＧＲＦ（１−２９
）−ＮＨ２３０％［：Ｈｉｓ　’　、Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎ
ｌｅ”　）−ｈＧＲＦ　（１−２９）−ＮＨ２２６・ｑ
％これらの合成、ペプチドのインビトロ試験は、これら
の多くがｈｌ）ＧＲＦ（１−４０）−０Ｈ、ｌニジも驚
くほど強い生物学的効力をもつことを示しており、例え
ば［Ｄ−ＮＭＡ２．Ｎｌｅ”］−ｈＧＲＦ（１−２９）
　−ＮＨｚ　（７）最小有効濃度は約１ピコモルである
。

成長ホルモンの分泌についてのインビトロ試験に加えて
インビボ実験が行われ、合成はプテドをウレタン麻酔し
た雄ラットに静脈注射し、それらが外因性ＧＦｔＦに対
する応答をやめないで（、Ｈの自然分泌を抑制すること
を測定する。血液サンプルが注射の直前、注射後１０分
、３０分および９０分に採取される。ラジオイムノアッ
セイで測定シたときのＧＨ血中濃度は、合成［Ｄ−ＮＭ
Ａ２．Ｎ１ｅ２７］−ｈＧＲＦ　（１−２９）　−ＮＨ
ｚが静脈注射の１０分および３０分後に下垂体ＧＨＱ血
中濃度に関してｈＧＲＦ（１−４０）−ＯＨよりも約６
倍以上の効力を有することを示す。ＧＨ分泌を検出する
のに有効であることが知られている他の既知ＧＲＦイン
ビボ試験はこれらの結果を確認するのに用いられる。体
重ｌ　ｋｇ当たりこれらのイゾテトゝを約５０ナノゲラ
ムシよび約５マイクログラムの間で投与することが、Ｇ
Ｈ分泌を起こさせるのに効果的であると考えられる。生
物学的インビトロ効力が標準に等しいかあるいはそれよ
り劣る梗プテドの中には、標準よシもかな９優れたイン
ビボ効力を示すものがある。。

この種の合成ｈＧＲＦ類似体そして多分子ＧＲＦ　。

ｂＧＲＦ　？よびｐＧＲＦも臨床医がＧＨＱ産生を高め
ることを望む場合のヒトへの適用に対して有用であると
思わ＋１．る。この種の類似体によるＧＨ分泌の刺激は
、内因性ＧＲＦの産生不足が原因で、ひこる完全また・
′ハ相対的ＧＨ欠損症の患者にとって興味があることで
ある。さらに、ＧＨ分泌の増加およびそれに伴う成長促
進は正常のＧＨ＠度を有するヒトまたは動物にも表われ
るだろうつその上、この種のペプチドの投与は体内の脂
肪含有量を変え、またその他のＧＨ依存性の代謝、免疫
および発生過程を変更するだろう。例えば、これらの類
似体は火傷を負った後などの情況下にあるヒトの同化（
ａｎａｂｏｌｉｃ）過程を刺激する手段として有用であ
るかもしれない。他の例として、これらの類像、体はこ
れらの有効量を与えることによって成長を、促進しかつ
蛋白質対脂肪の比を高めるために、商業上の温血動物（
例えば鶏、七面鳥、ブタ、ヤギ、ウシおよびヒツジ〕に
投与されてもよく、また魚やその他の冷面動物（例えば
ウミガメやウナギ）、ならび（で両生類の養殖に使用さ
れてもよい１、ヒトに投与する場合、これらのはプテト
ゞは少なくとも約９３％、好適には少なくとも９８％の
純度をもつべきである。この場合の純度とは目的とする
Ｒプチトゝが存在する全４プチビおよびペプチドゝ断片
′の表示重量％を占めることを意味する。この種。

の合成ベプナドヲ成長促進および脂肪含有量の低減のた
めに商業上の動物へ投与する場合には、約５％程度の低
い純度、またはｏ、ｏ　ｉ％の純度でさえも許容される
だろう。

これらの合成ハプテドマたはそれらの無毒性塩は、医薬
組成物を調製すべく薬学的または獣医学的に許容される
担体と組み合わされて、動物（ヒトを含む）へ静脈内、
皮下、筋肉内、経皮的（例えば鼻腔内）あるいは経口的
にさえも投与される。

投与は治療を受けようとする患者がＧＨの放出を必要と
する場合にこの種の治療処置を行うべく臨　。

床医によって行われる。必要とされる投与量は治療すべ
き特定の状態、その状態の程度および治療の持続期間に
よシ変化するだろう。

この種の４プテトゝはしばしは無毒性塩、例えば酸付ノ
ｎ塩−または亜鉛、鉄などの金属との錯体（本明細書で
はこ：ｌ］、も塩として考えス）の形で投与される。こ
のような酸付加塩の例としては塩酸塩、臭化水素酸塩、
ｒｎ党ｊ９１話、燐酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエ
ン酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、リンゴ酸塩、アスコ
ルビン酸塩、酒石酸塩などがある。活性成分が錠剤の形
で経口的に投与される場合に、その錠剤は結合剤（例え
ばトラガカント、トウモロコシ殿粉またはゼラチン）、
崩壊剤（例えばアルギン酸〕、および滑沢剤（例えばス
テアリン酸マグネシウム〕を含みうる。液剤の形での投
与が望まれる場合には甘味料および／または風味料が使
用され、また等張塩水や燐酸緩衝液での静脈内投与も行
われる。

被プテドは臨床医の指導のもとでヒ）Ｋ投与されるべき
であり、そして医薬組成物は通常ペプチドと共に薬学的
に許容される固体または液体の慣用担体を含むだろう。

一般に、非経口投与量は患者の体重１ｋｇ当たりはプチ
ド約００１〜１μｇであるだろう。

本発明は発明者らが現在のところ最もよいと考える好適
な実施態様に関して述べてきたが、当技術分野で通常の
知識を有する者にとって明らかな種々の変更ならびに修
飾が、添付の特許請求の範囲に記載される本発明の範囲
から逸脱することなくなされうろことは理解されるだろ
う。例えば、イフテド鎖の修飾（特にペプチドゝのカル
ボキシル末端から始まってだいたい２７位まで延びるペ
ゾテド鎖の欠失）はペプチドの生物学的効力の全てまた
は実質的部分を保持するペプチド８もしくはイプチド断
片を作るための今までに知られた実験的慣用手段に従っ
て行うことができ、この種のペプチドも本発明の範囲内
に含まれると考える。さらに、どちらか一方の末端また
は両方の末端での付加が行われ、かつ／また４プテド化
学の全分野でよく知られるように、自然界に存在するア
ミノ藪残基の代わりに同等のアミノ酸残基全使用して、
本発明の範囲から逸脱することなくポリはプテドの効力
の少なくとも実質的部分を保持する他の類似体を製造す
ることができる。さらに、今日の当技術分野の発達水準
に従ってＣ−末端の好適な−ＮＨ２基に対して修飾がな
され、′例えばＣ−末端のアミノ酸残基のカルボキシル
部分は一〇〇〇Ｒ。

−ＣＲＯ、−ＣＯＮ）（ＮＨＲ、−ＣＯＮ　（Ｒ）　（
Ｒ勺または−ＣＨ２０Ｒ（ここでＲおよびＲ′は低級ア
ルキル基、フルオル低級アルキル基または水素原子であ
る〕であり得る。このような修飾は本発明の範囲から逸
脱することなく同等の合成ペプチドをもたらす。

（外５名） ９８４

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）次の配列： Ｒ１−Ｒ２−Ｒ３−Ａｌａ−Ｉ　１ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ
   −ＲＢ−８ｅｒ−Ｒ１ｏ−Ａｒｇ７Ｒ１２−Ｒ１３−Ｒ
   Ｉ４−Ｒ４５−Ｇｌｎ−Ｒ１７−ＲＩ　Ｂ　−Ａｌａ−
   Ａｒ　ｇ７Ｌｙｓ−Ｌｅｕ＝Ｒｚ　３−Ｒ２４−Ｒ２ｓ
   　−Ｉ　１ｅ−Ｒ２７−Ｒ２Ｂ　−Ｒ２ｇ　−Ｇｌｎ−
   Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｒ３４−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇ
   ｌｕ−Ｒ３Ｂ　−Ｒ３ｇ　−Ｒ３ｇ　−Ｒ４ｏ−Ａｒｇ
   −Ｒ４２−Ｒ４３””Ｒ４４ （式中、Ｒ１はＣαＭｅまたはＮａＭｅ置換を有してい
   てもよいＴｙｒ　、　Ｄ−Ｔｙｒ　、　Ｍｅｔ　、　Ｐ
   ｈｅ　、　Ｄ−Ｐｈｅ　、　ｐ（Ｊ−Ｐｈｅ　、　Ｌｅ
   ｕ　、　ＨｉｓまたはＤ−Ｈｉｓであ’）　；ＲｚはＡ
   ｌａ、Ｄ−ＡｌａまたはＤ−ＮＭＡで；ｈ　’）　；　
   Ｒ３はＡｓｐまたはＤ−Ａｓｐ　テ；ｈ　’）　；　Ｒ
   ｓはＳｅｒ　、　Ａｓｎ　、　Ｄ−８ｅｒまたはＤ−Ａ
   ｓｎであり　；　ＲｌｏはＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒでら
   り；Ｒ１２はＡｒｇまたはＬｙｓであり；Ｒ１３は１１
   ｅまたはＶａｔであり；Ｒ１４はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅ
   ｕであり；Ｒ１５はＧｌｙまたはＤ−Ａｌａ　テロ　’
   ）　ｔＲ１７はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕであ’）　＋　
   ＲｌｓはＴｙｒまたはＳｅｒであ’）　ｐ　ＲｚａはＬ
   ｅｕまたはＤ−Ｌｅｕであり；Ｒ２４はＨｉｓまたはＧ
   ｌｎであ’）　、’　ＲｚａはＧｌｕ　。 Ａｓｐ、Ｄ−ＧｌｕまたはＤ−Ａｓｐであり；Ｒ２７は
   Ｍｅｔ。 Ｄ−Ｍｅｔ＋、Ａｌａ、Ｎｌｅ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｎｖ
   ａまたはＶａｌであ’）　；ＲｚｓはＡＳｎまたは５ｅ
   ｌｒであり；Ｒ２９はＡｒｇまたはＤ−Ａｒｇで’＋　
   ’）　；Ｒ３４はＡｒｇまたはＳｅｒであり；Ｒ３８は
   ＧｌｎまたはＡｒｇ　Ｔ’６　’）　；　Ｒ３９はＡｒ
   ｇまたはＧｌｙで”　’）　ｐ　Ｒ４０はＳｅｒまたは
   Ａｌａであり；Ｒ４２はＰｈｅ　、　ＡｌａまたはＶａ
   ｌであり；Ｒ４３はＡｓｎまたはＡｒｇであシ；そして
   Ｒ４４は天然アミノ酸である；ただしＲ２８とＲ４４の
   間のアミノ酸残基のいずれかまたは全部は欠失されても
   よく、またＲ２はＤ−ＮＭＡでありかつ／またＲ１４は
   Ｄ−Ｌｅｕでありかつ／またＲ２９はＤ　−Ａｒｇであ
   る） で表わされる合成投プテドまたはその無毒性塩。 ｆ２）　ＩＲ２はＤ−ＮＭＡである特許請求の範囲第１
   項記載の４プチド。 （３）　Ｒ２９はＤ−Ａｒｇである特許請求の範囲第１
   ・項または第２項記載のイゾチド。 ＜４）　Ｒ１４はＤ　−Ｌｓｕである特許請求の範囲第
   １〜３項のいずれか１項に記載のペプチドゝ。 （５）　Ｒ２５はＤ−Ｇｌｕである特許請求の範囲第１
   〜４項のいずれか１項に記載のはプテトゝ。 （６）　Ｒ２７はＮｌｅである特許請求の範囲第１〜５
   項のいずれか１項に記載の（プテド。 （力　Ｒ１７はＤ−Ｌｅｕである特許請求の範囲第１〜
   ６項のいずれか１項に記載のペプチドゝ。 （８）　Ｒ２５はＤ　−Ａｓｐ　′″Ｃある特許請求の
   範囲第１〜４項のいずれか１項に記載のペプチド。 （９）　Ｒ１７はＤ　−Ｌｅｕであシ、Ｒ２３はＤ−Ｌ
   ｅｕで６Ｄ、Ｒ２５はＡｌｐでｌ）、Ｒ２７はＮｌｅで
   ｓｂ、そしてアミノ酸残基３０〜４４は欠失される特許
   請求の範囲第１〜４項のいずれか１項に目ピ載のベフナ
   ト。 （Ｉｔ）　ＲＩＩｔｓ　Ｈｉｓであり、Ｒ：４はＡｓｐ
   　テあシ、Ｒ８はｓｅｒであり、ＲＩＧはＴｙｒであり
   、Ｒ１２はＡｒｇであシ、Ｒ１３はＩｌｅでｓｂ、Ｒ１
   ５はＧｌｙであり、Ｒ１８はＴｙｒで、１、Ｒ２４はＴ
   （ｉｓであり、Ｒ２ＢはＡｓｎであり、Ｒ３４はＡｒｇ
   であり１、Ｒ３８はＧ１］１であり１Ｒ３９はＡｒｇで
   ６Ｄ、Ｒ４０はｓｅｒであシ、Ｒ４□はＰｈｅでアシ、
   Ｒ４３はＡｓｎであシ、そしてＲ４４は欠失される特許
   請求の範囲第１〜７項のいずれか１項に記載のペプチド
   。 Ｑｌ）　Ｒ１７はＤ−Ｌｅｕでｌ）、Ｒ２３はＤ　−Ｌ
   ｅｕであり、Ｒ２５はＤ−Ｇｌｕであり、Ｒ２７はＮ１
   ｓであり、そしてアミ／酸残基３０〜４４は欠失される
   特許請求の範囲第１〜４項のいずれか１項′に記載のは
   プテド。 α２１Ｒ３はＡｓｐであり、Ｒ８はＡｓｎで、あり、Ｒ
   １゜はＴｙｒで６１１）、Ｒ１２はＬｙｓであシ、Ｒ１
   ３はＶａｌであシ、Ｒ１５はＧｌｙであり、Ｒ１８はＳ
   ｅｒであシ、Ｒ２４はＧｌｎ　Ｔ　；ｈ　’）　、　Ｒ
   ２８はＳｅｒでｓｂ、Ｒ３４はＳｅｒでｓｂ、Ｒ３８は
   Ａｒｇでｌ、Ｒ３９はＣ１−ｙでＲ２ＯはＡｌａであり
   、Ｒ４２はＡｌａであり、Ｒ４３はＡｒｇであり、そし
   てＲ４４はＬｅｕである特許請求の範囲第１〜４項のい
   ずれか１項に記載のにゾテド。 ａ′５　特許請求の範囲第１項記載の投プチドまたはそ
   の無毒性塩、および薬学的または獣医学的、に許容され
   る液体または固体の担体を含有して。 なる動物における成長ホルモンの放出を刺激するための
   医薬組成物。