JPS5953503A - 微生物多糖類をそれらの脂肪族アミン付加体より単離する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、微生物の多糖類をそれらの脂肪族アミンとの
付加体からｔｐ離するための方法に関する、 発酵によシ産生される微生物の菌体外多糖類は、それら
の優良な特性により工業においてシックナー、ゲル化剤
または懸濁剤、保鵬コロイドまたは氷結合剤として用い
られる。それらの調製方法がこれらの産物を高価ならし
め、そして高価格の一因は現存の技術的に複、雑な単離
方法である。

米国特許第３，９２８，３１６号明細書は、細菌キサン
トモナスカンペストリスのＮＲＲ，Ｌ　Ｂ−１４５９株
を用いる発酵により得られるアニオン性のへテロ多糖類
を、酸性化された希薄な発酵溶液から、水に不溶な長鎖
のｍ１級アミン塩の形で早船することを開示している。

もしこの塩を分解しようと意図するならば、それはアル
コール性水酸化カリウム溶液によシなされてカリウム塩
を生ずるが、しかしそれはいまだにアミンを含有する。

西独特許出願Ｐ第３２３０３０６．２号においては、一
般式 ％式％ （ただし式中Ｒ１は炭素原子１０〜２０個を有するアル
キルであυそしてＲ２およびＲ６は同一あるいは異なシ
てメチルまたはエチルを表わす）のアミンを用いること
からなる、微生物の多糖類を長鎖アルキルアばンとの付
加体の形で水性溶液から酸性の媒液中で沈殿せしめる方
法に関する。

アミン伺加俸を分解するだめの既知の方法は、若干の場
合には完結にまで進行せず、塩を含有するポリマーを生
ずるのでさらに精製操作を実施する必要があり、そして
それは流出液の処理のだめに技術的に少なからず複５で
「である。付加体全価アルカリで処理すｆＬば、ポリマ
ーを損傷することがあり得る。

西独ｌ持許出願Ｐ第３２３０３０２．５号は、アルカリ
性剤としてアンモニアまたは高度にｒｔｔｔ発性のアミ
ンを用いることよりなる、微生物の多糖類を炭素原子１
〜３個を有する１価のアルカノールの存在下でアルカリ
剤を用いて処理することによりアミンとのイ・１加体か
ら”ｌ′１．ｌ’ｉｉ＋する方法に関する。

対照的に、本発明はアミン付加体をアルコールの存在下
でそのアルコールに可溶であるかまたは熱的に直ちに解
離するアンモニアオたは高度に１ｆ発性のアミンの塩で
処理することよりなる微生物多Ｑ４　ｐのそれらのアミ
ン付加俸よりの単離方法に関する。

下記に本発明の好捷しい具現化をさらに詳細に明示すイ
）。

好捷しい出発物質はＶ″夕生物多糖類としてのキサンタ
ンおよび第１級あるいは第６級の脂肪族アルキルアミン
（２個の短鎖アルキル基を有する）よシ由ｌ１３する付
加体でｔ）る、こｈらの伺加体ｔｉ好１Ｌ７くれｊ湿潤
状態、例えば発酵溶液から微生物多糖類を早喘する経過
において得られるプレスケーキ状において有利に用いら
れる、付方ロ体の乾燥は、著しく多上：°のエネルギー
を要するのみでなく付加体の溶’ｈ４　ｆｉｌ：および
膨か１性を損なうので省略される。、湿潤な付加物が用
いられるときに導入される少貝の水は本発明による方法
を妨害しない。

適当なアルコールとは、上記の塩に対して充分な溶解力
を有するかまたはそれらにおいて上記の塩類が熱的に直
ちに解１ｉｉ１＃Ｌ得るすべてのアルコール類をいう。

大気圧下で１００℃棟での沸点を有するアルコールで債
に低級アルカノ−ル類特定的にｄ、メタノール、エタノ
ールまたはノルマルあるいはイソプロピルアルコールが
好適である。用いられるアルコール類は、市販の工業用
叫級のものが有利であり、これらのアルコール類が含有
する小月の水は本発明による分離の方法に悪影響を及ぼ
さないことは真実である、しかしながら、遊離の微生物
多糖類特にキサンタンは水に可溶であるがアルコールに
不溶であるために、著しい月の水は不オリである。媒液
中の水分含量が比較的多いことりｌｌ、後処理に際して
ｖｌ［問題を生ずることかあυ刊る。

本発明の目的のためにその塩が用いられる高度に揮発性
のアミン類は、第一層重に大気圧下において１５０℃以
下において沸騰するものである。これよりも高い沸点を
有するアばン類の塩はあ寸り推奨されない。この理由に
より、好適な塩は炭素原子数が６　（［ｉ’ｒｌまでの
アルキル基を有する第１級アルキルアミンの塩、炭素原
子数が４個までの同一または異なるアルキル基を有する
第２級アミンの塩および炭素原千載が３細首でのｒｌ、
３−甘たは異なるアルキル基をイイする第３級アミンの
塩である。トリメチルア（ン、トリメチルアζン、ジメ
チルエチルアミンおよびジエチルメチルアミンの塩が４
：ＴＫ　ｆｉ了適である。

好適な塙類とは炭酸アンモニウム、蟻酸アンモニウム＼
、酉１三酸アンモニウム、ｔｌ″１酸トリニゲルアンモ
ニウム、蟻１＋１４７トリメチルアンモニウムおよび蟻
酸トリエグールアンモニウムのように熱的に直ちに解離
され得る生成物である。

熱的によシ安定な塩類の場合には、それらは選ばれた処
理ｎ：！を度においてアルコールに充分可溶なことが重
宛であシ、そのことは簡単な予備実験により確かめられ
得る、 もし第１Ｍ才たは第２級の脂肪族アミンの伺加体が分解
されるかあるいは使用嘔れる容易に解離される塩がアン
モニアまたは第１級あるいは第２級アミンより誘導され
る々らば、そのとき遊離されるアミンが微生物多糖類の
反応性基特にエステル部分と反応することを確実ならし
めるように注意を払わねばならない。この理由により、
そのような場合には低温または中温において操作するこ
とが推奨される。

もし第３級アミンの塩で特に容易に解離される塩が用い
られ、そして才た紀３級アミンの付加体が用いられるな
らば、それにも拘わらず生成物を損傷することなしに高
温において操作することが可能である。高温は処理操作
の時間を著しく短縮するので好適である。

反応は反応混合物の還流温度において有利に実施される
。特に低級アルコールが月１いられる場合には大気圧を
超える圧力下において操作することが口」１］にである
。

付加体全分肪・するためには、何カ１１体中のアミンの
含４１おに対して少なくとも等モル量の塩刀工用いらノ
１．る。しかし多少な９とも計シ得る番よどの過ｉ：（
Ｉ　、例えばモル量の２〜１０倍量を用いるのが有′Ａ
１］である。放出された微生物多糖類はアルコール性の
ｊｉ　ｐ９（ｉ溶液に不溶であるから、過剰の塩はそれ
が溶液中にとどする限り妨害にならず、溶液Ｖ」、操作
ｊ背幅へもどされ得る。この操作子ｊ）直は連続処［１
（方式を実施するのに適する。

微生物多＋１．！ｉ　Ｅｌ’ｌは′６易に分１１１ト可
能な形で取得され、乾ｔ：！ｍ　ｔ、たときには大部分
が遊離酸の形である。生成物はルだ好都合な粘度特性に
より判別される、 アルコールお上ひ遊離されたアミンを含有する液体相は
蒸留により容易に後処理される。付加体から遊離された
アミンは的ちに７４）び微生物多Ｆ類を発酵溶液から分
離するために用いられる、アルコールは操作過程にもど
され得る。

下記の実施例中において部およびパーセントは別に示す
以外はすべてＷｔ１基準である。リットルがキログラム
に関係して用いられるように容量部がＮｐ部に関係して
用いられる２第１に付加体がキサンタンと第３級脂肪族
アミンとから調製される従来文献に報告されたことのな
い方法（西独特許出願ｐ第３２３０３０６号）を記述す
る。

用いられた生産菌株はキサントモナス・カンペストリス
ＮＲＲＬＢ−１４５９株である。グルコース／ズブトン
培地の寒天培養から酌を初発培養に移し、次に３０℃に
おいて振盪機」二で保湿（インキュば一ト）シた。この
培養物は１０ｔの発酵槽の接種菌（３％）として用いら
れ２、その栄養培地はグルコースまたはサッカロース６
〜５チ、コーンスチープ０．１５〜０．２５％、硝酸ナ
トリウム０．１〜０．２％、燐酸二カリウムＯ６１％お
よび硫酸マグネシウム水和物０．０５桑を含有１７た。

接種された発酵槽は２８℃に保温され、４σ分１０ｔの
空気■および攪拌（毎分４００回）により通気された。

、ＦＪ５６時間後に発酵培地はキサンタン１８〜２０　
ｆ／ｌを含有した、 タロウアルキルジメチルアミン（タロウアルキル基中の
炭素鎖の分布はＣ１４が約５％、Ｃ１６が約３０％、Ｃ
＋ａが約６５％）力、８５グを、多糖類含有Ｊλが約１
．８％のキサンタン溶液約１００２中へｊ社拌混合した
。２規定の酢酸２．５２を加え、得られた分散物を凝固
せしめ、そして付加体は当初著しく膨４１シた扁平なケ
ーキ状に沈殿したが、それは感らに攪拌したとき速やか
に離液した、付加体けｐ過分腓され、脱イオン水で洗浄
され、その水は圧搾によｐ除去さｉＬフこ、これにより
キサンタン１．８％およびアミン０，４３２を合宿する
湿潤ツレスケ−キロ、２ｙが得られた。

実施例　１ キサンタン（キサンタン官有吊３２％）／ヘキサデシル
ジメチルアミン付加体よりなる湿潤プレスケーキ１００
部は、ロータリカッターを装備しメタノール４．０００
　ｔｉｔＳを人りたミキサー中で細断され、それに臭化
アンモニウム１００部が加えられ、混合物は６時間Ｒｒ
ＡＬされた。この操作過程において繊維状に遊離された
キサンタンは濾過分離され、メタノールで臭化物が実質
的になくなるまで洗浄された。沖過されたケーキは乾燥
され細断された。キサンタンの収量は実剪上定−Ｉ羨的
（３１，９部＊まｄ）であった。生成物は脱イオン水中
に完全に可溶であった。

実施例　２ キサンタン／ヘキサデシルアミン付加体の湿潤プレスケ
ーキ、メタノール３，２００部および酢酸アンモニウム
１００部を用いることを除いては実施例１が反復された
、央賀上定量的な収量で得られたキサンタンは脱イオン
水中に光全に可溶であった。

実施例３〜７は、表に示した変更以外は実施例１と同様
に実施された。それぞれにおいて付加体１００部が用い
られた。生成９スノは常に脱イオン水中に可溶であった
。

キルアミン　　　アルコール　　　ルアンモニウム （２，５００）　　　　　（１７０） （４，０００）　　　　　（１２０） 八−リーンタンニ（寸　　　　アルコール５　　　ベキ
１デシル　　メタノール　　炭［水素７ンｊ゛ミン　　
　　　　　　　　　　　モニウム（３，０００）　　　
　　（　　８０）６　　　　大ｓ？．アルキル ジメチルつ′ミ　　　　　　　　　　　エチルアンモン
　　　　　　　　　（３．５　０　［Ｊ　）　　　　ニ
ウム（１８０） ７　　　タロウｒルキ　　メタノール　　土入Ａ付）リ
エヂルジメチルア　　　　　　　　　　　ルアンモニウ
ムミン　　　　　　（５，ダ旧１）　　　　（２（１０
）／ｌ−’ｔ’許出願出願人へキスト・アクチェンゲ七
ルシャフト１７ー

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）微生物多糖類の脂肪族アミン付加体をアルコールの
   存在下においてそのアルコールに可溶であるかまたは熱
   的に直ちに解離されるアンモニアまたは高度に揮発性の
   アミンの塩を用いて処理することよシなる、微生物多糖
   類をそれらの脂肪族アミン付加体より単離するだめの方
   法。 ２）使用されるアルコールが大気圧下において糸’ｙ　
   １　ｏ　ｏ℃までの沸点を有する　４．５許請求の範囲
   第１〜６頂の方法。 ３）アルコールが低級アルカノールである、〆１；ｒ許
   ｔＹＩ求の範囲第１〜２項のいずれが一つに記載の方法
   、 ４）高度に揮発性のアミンが大気圧下において１５０℃
   」９丁の沸点を有する、特許請求の範囲第１〜３類のい
   ずれか一つに記載の方法。 ５　）　　Ｗ　Ｌ？、、がノえ比況合液の還流温度にお
   いて実施される、’Ｉ”Ｆ　ｎ請求の範囲第１〜４項の
   いずれか一つに記載の方法。 ６）微生物多糖類がキサンタンである、特許請求の範囲
   第１〜５］ｌＪｉのいずれか一つに記載の方法、 ７）脂肪族アミンが第１級脂肪族アルキルアミンである
   、特許請求の範囲第１〜６頂のいずれか一つに記載の方
   法。 ８）脂肪族アミンが２個の短Ｎアルキル基を有する第３
   級脂肪族アルキルアミンである、特詐Ｒｒｆ求の範囲第
   １〜６唄のいずｉｌか一つに記載の方法。