JPS59196870A - 腫瘍細胞の成長および転移の形成の防除におけるピラゾロン誘導体類およびこのための薬物および新規なピラゾロン誘導体類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、転移いｎｅｔａｓｔａｓｅｓ　）の形成を防
」−するための腫瘍の治療におけるある独の１−１行換
ピラゾルー５−オン誘導体類の使用に関する。また、本
発明は、治療学的に活性な量のビラソ゛ロン誘導体類を
首肩することを特徴とする抗新生物形成（ａｎｔｉｎｅ
ｏｐＬａｓｔｓｃ、　）および抗転移（ａｎｔｉ−ｔｔ
ｔｅｔａｓｔａｔｉｃ　）薬物に関する。

癌処−′の主な目的は、１次腫瘍の成長の処１ｒ７・よ
び防除でｂる。しかしながら、この処置と同時に、転移
の形成を防止することが８女である。転移は１次ｊ屋瘍
細胞の移動および引き続くリンノシ系または血管中への
浸透として定義され、腫瘍細胞は体の他の区域へ移送さ
れる。このような広がりは、内皮壁（ｅｒｂｄｏｔｈｅ
ｌｉａｌ　ｗａｌｌ　）　ヘの接着および引き続く浸透
、２次腫瘍の血管周囲組織中への侵入および、最後に、
腫瘍細胞の離れた組織への播ｉｉ　（ｄｉｓｓｅｍｉｎ
ａｔｉｏｎ　）　（ｔｃよシ起こシうる。

転移過程の化学的発現は多く知られているが、転移に関
与する生化学的、免疫学的、遺伝学的およびホルモン的
機構はほんのわずかしか仰られていない。とれに関して
、転移は複頼４な過程の序列に基つく単一の徴候として
見なすことができる。

１次腫瘍の処置および転移の防止の両者は重装であるた
め、癌の研究者らは腫瘍の成長２よび転移に関連する相
互作用を明らかｅこする目的で広範な研究を実施しでき
ている。

腫瘍細胞が有すると思われる生物学的性質の１つは、宿
主血小板と相互作用しかつそれに結佇し、これにより腫
瘍の潜在性を増加して、−截小脈管系におい一〇それ自
体をイ！ｉ立しかつ脈管内皮へそれ自体を結合するイ］
シカである。報告されたそれ以上のＩＩＪ′能性（・ま
、Ｊ紐瘍細胞が確立されるようにガつ／こ後、瞼傷ｇ＋
＋＋胞がそれを取り囲みかつ保護する血小板血栓の形成
を開始するということである。有効な転移が起こりうる
ように、転移細胞はまず脈管内皮上にそれ自体を舗立し
かつそれ自体を脈管内反へ結合し、そして曲りの組織中
へ浸透するまで脈管内にとど１らなくてはならない。

腫瘍細胞の確立および内皮への結合および非肺瘍血栓の
形成に参加する過程の間Ｖこ類似性が次〕るために、多
くの研究者らは血小板はある方法で役割を演すると結論
した。血小板のこの関与に基づいて、抗凝固剤の治療に
よる転移への効果を決定するために多数の研究がなされ
てきた。後に引用する研究は、血小板凝集の効力のある
阻害剤である抗凝固剤化合物の投与からなっていた。し
かし、結果は矛盾するものである。

ヘハリンは転移を、ことに肺において、減少しかつ増加
することが報告された（　Ｃｅ１１．ｌ：）ｉｏｌ。

Ｉｎｔ　ｌ　、ノイＱ、２．８ｌ−８６（１，９６３）
＄−，１：びＡｒｃ　ノｂ、ｓｕｒｇ、９　１　　、　
６　２　５　−　６　２　９　　（１９６５）参照〕。

アスピリンは混合結果を与えた（ＩＥｖ、ｒ。

Ｊ、Ｃａｎｃｅｒ　８　、３４７−３５２　’（１９７
２）およびＩｎｔｌ、Ｊ、Ｃａｎｃｅｒ　１１　、７０
４−７１８　（１９７３）参照〕。ワルファリン（ｗａ
ｒｆｃｔｆｉｎ　）は、腫瘍細胞の静脈内注射後および
自発的に転移する腫瘍中において、有意の抗転移作用を
生ずることを示したＣ　Ｃ’ａｎｃｅｒ　：３５　、５
−１４　（１９７５）およびＣａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、３
　？　、　２７２−２７７　（１９７１）参照〕。Ｂ−
１６ａ黒色腫細胞の静脈内投与により８発された転移は
、抗凝固剤グロスタブイクリンの投与により防１Ｆでさ
ることが発見された［Ｃｅ１ｌ　Ｂｉｏｌ、　８７　、
６４９　（１９８０）参照〕。

赳瘍治療のための抗凝固剤の使用についての概観は、　
　ＡＩ　、　　Ｈ、ｌノｏｎａｔ　ｉ　　ｅｔ　　ａｌ
、　　Ｍａｔｉｇｎｃｔｎ、ｃｙ　　ａ、ｎ、ｃｉｔｈ
ｅ　　ノｊｅｍｏｓｔａｔｉｃ　　５ｙｓｔ　ｅ′１７
１．ｐａｇｅｓ　　１　０　３　−　１２０　　。

Ｒａｖｅｎ　１）ｒｅｓ８．１９８１に記載されている
。

抗凝固剤による治療の使用は、抗凝固剤が喝、異性Ｖこ
欠けるため２よび抗凝固剤のめるものが血小根の所望の
作用を全体的に消去する作用を、腫瘍細胞自体に対し、
こうして転移に対して引き起こすために、満足すべき結
果を部分的に提供しなかった。

今回、ある種のビジゾロン誘導体類が効力のあ４抗転移
剤でありかつ抗新生細胞活性をも有することが見出され
た。

米国特計明細カニ第３．１４７．２７６号は、抗炎症伯
ユケ有するある杓ｉの１−１６換ピラゾル−５−オン類
を名己叔している。壕だ、多数のヒ”ラン゛ル−５−オ
ン誘導体類を抗利尿剤、抗高血圧剤および抗血イ仝剤と
して使用できることは知られている（ドイツ国も許出願
公開明細書第２．３１９．２８０号、同第２．５５４．
７０１号、同第２，３６３，５１１−号および同第２．
５　ｓ　４，７０３−Ｉ）。

こＪ’Ｌ−、＋で、最も強力な抗血栓剤は３−メチル−
１−４２−（ナフチルオキシ）−エチルクー２−ピラゾ
リン−５−オン〔“Ｎａｆａｚａｔｒｏｍ”　　（“ナ
ノアザトロム゛）〕であることがＥｎＪらかにされ、こ
れはドイツ国特許出願公告明糺傅第’２，２４７，２７
２号（米国特許明細書第４．０５３．６２１号）に記載
されている。また、ナ７アザ）ｏムはきわめてすぐれた
抗転移および抗新生物形成作用全有しかつ脈管内皮から
の内生グロスタサイタリンのシ？（１撒剤（ＰＧＩ２　
）として作用しうろことも開示されている（欧州特許、
４０，０６２，３１９号参照）〔〆ｅｒｍｙｌｅｎ　　
ｅｔ　　ａｔ、、　　Ｌａｎｃｅｔ　　　Ｉ、　　５　
１　８　　、　１　９７０　、　Ｃｈａｔｎｏｎｅ　ｅ
ｔ　ａｌ、　、　１１ａｅｒｒｒ、ｏｓｔａｓｉｓ　１
０　。

２９７　、１９８１　、　Ａｆｃｌｎ、ｔｙｒｅおよび
Ｓａ　ｌ　ｚｍａｎ　。

ＴＩＬｒｏｍｂｏｓｉｓ　ａｎｄ　Ｂａｅｍｏｓｔａｓ
ｉｓ、　４６　、　Ａｂｓｔｒ。

Ａ４５．（１９８１））。

ナンアザトロムの抗血栓作用は例外的な程贋に構造に依
存することが発見された：すなわち、た中 とえは、ナファザトロムの３位置においてメチルをエチ
ルで１６−換すると、血栓症の予防作用はイソ１／３０
に減少し、−力対応する３−ベンジル、３−インプロピ
ル、３−７Ｌ−プロピルまたは３，４−ジメチル訪導体
を用いる賜金、投与亦：をナファザトロムの１００倍に
増加したときでさえ、抗血栓作用は検出さｆなかった。

したかつて、このような抗血栓的に不活性な化合物およ
び才た構造的にさらにかけ離れているビジゾロン誘導体
類が、抗新生物形成および抗転移作用の１４Ｆ質ＶＣ関
して少なくともナファザトロムと（６」竹であるという
ことは、例外的に駕くべきことでるると見なされる。

小発明に従って使用するピラゾロン誘導体類は、一般式 式中、 １＜はアリール基寸たはへテロアリール基を表わし、前
記アリール基およびヘテロアリール基は４〜１２Ｃ原子
を有しかつ適宜ハロゲン、トリフルオロメチル、アルキ
ル、アルケニル、アルコキシ、アルキルアミン、シアン
、トリフルオロメチルシ、ニトロ、ヒドロキシル、５Ｏ
３ｊＩＸＳＯｎ−アｋ　キ／ｌ／　（ｊＬ＝０〜２）お
よび５ｏｎ−トリフルオロメチル（ｎ−０〜２）からな
る群よりの同一もし７くは相異なる置換基の１〜３個を
？有していてもよく、前記アルキルぐアルケニルおよび
アルコキシの各々は１〜４Ｃ原子を有し、 Ｒ’　およびｊ＜２は同一もしくは相異なり、−ｆ：Ｌ
、て水素、ＮｌＩ２捷たは炭化水素基をｌりわし、前記
炭化水素基は１〜１８、好ましくは１〜８　Ｃ’原子を
有しかつ適宜ヒドロキシル、エーテル、エステルまたは
カルボキシル基を含有してもよくかつ１〜３１１ωのハ
ロゲン原子を含有してもよく、 ＲＢは水素徒たけメチル基を表わし、そして Ｘは化学結合あるいは基−０−Ｃ’１ｉ２−　ＣＤ２−
　。

−Ｃ″Ｂ２−ＣＤ、　、−Ｃｌノ’ｉ”！たは−ＣＭ−
の１つ量 ｃＨ３ を表わし、前記酸素原子は是Ｊ＜へ結合しており、 ただしＲ−β−ナフチル、　／＜　’　＝　Ｃ”Ｒ３か
っＲ２−ノイ３．＝ＩＪのときＸは−０−Ｃ，Ｒ２−Ｃ
Ｄ２を表わさないものとする、 に相当する。

本発明に従って使用するために好ましい一般式（１）の
化合物は、記号が次の意味を有するものでりる： Ｒｉｄ適ｉ！換されていてもよいナフチル、ジフエニノ
へチェニル、フェノキシフェニル捷たはフェニル基、と
くに好ましくはα−またはβ−ナフチル基を表わす。こ
れらの基は好ま１．、〈ｌ′ｉ０．１寸たは２個の置換
基、とくに１３τ、ｃｔ　、ｃＨ，、ｏｃｕ、または５
Ｏ３Ｕを有する。

本発明に従って使用するためにさらに好ましい一般式（
１）の化合物は、各記号が次の意味を有するものである
： ＲＩ　にＬアミン基、または脂肪族炭化水素基、好臘し
くは１〜４Ｃ原子を有しかつ適宜ヒドロキシル、エーテ
ルまたはエステル基を含有していてもよい基、とくに好
ましくは分枝鎖でりってもよいＣ，−Ｃ４−アルキル基
を表わし、そして Ｒ２は１＜１　の好ましい意味（ただじアミノ基は除く
）を有し、あるいは寸だ水素を表わす。とくに好唸しく
は、基Ｒ１またはＲ２の１つは水素以外であり、そして
Ｒ’、ｊｉ２およびＲ３は一緒になって２〜４　Ｃ’原
子を含有する。

最後に、不発明に従い同様に好ましい化合物は、記号が
次の意味を有するものである： Ｘは化学結合、−０−Ｃ，Ｒ２−Ｃｊｉ２−　、−Ｃ１
１２−ＣＨ２−祉たけ−Ｃ’１ｊ−１とくに化学結合、
−０−Ｃｆ１２−　Ｃ１１２−Ｃ１ｌ。

ぼたは−Ｃ″Ｊｌｌ−を表わす。

こ７１３ また、本発明は、Ｒ２またはＲ３のいずれもが水素紮表
わさない一般式（１）の新規な化合物に関する。

Ｒ３＝ＪＪのとき、＋：兄明に従って使用する化合物は
、一般式（１）で弐わされる形に加えて、次の互変異性
体の１つであるいは可ロヒな互変異性体の混合物として
存在することもできる：本発明に従って使用する一般式
（１）のピラゾロン誘導体は、ドイツ国特許出願公開明
絢沓第２゜０４、２．６６３号（米国特許明細置薬３．
７６４．３２１号）、ドイツ国慣・許出願公側明細書泥
λ３１９．２８０号（米国特許明細置薬３．９５７．８
１４号）、ドイツ国特許出願公開明細置薬２．３６３．
５１１号（米ｌ：！！Ｉ特許明癲置薬４．００２．６４
１号）、ドイツ国特許出願公開明細所第２．５５４．７
０１号およびドイツ国特許出願公開明卸１書第４５５４
．７０３号から知られているか、めるい（はこれらの明
１ｉ１１省、中１／Ｃ詳述されている）３法に類似する
方法にまり裏逅することができる。

式（１）の化合物は、 Ａ）式 ％式％（） 式中、 ＲおよびＸは上に定義したとおシである、のヒドラジン
類を、式 （） ％式％） 式中、 Ｒ’、Ｒ２およびｌ（３は上に定在したとおりで次）す
、そして Ｙは離脱性基、たとえは、ヒドロギシノペアルコキシ、
アラルコキシ、アミノ−１ｆＣｔまアルキルアミ７基を
衣わず、 と、過当ならは不活性溶媒および塩基性葦たは酸性の触
媒、たとえば、アルカリ全域の水酸化物および炭酸塩ま
たはアルカリ土類金民の水酸化物および炭酸塩あるいは
、たとえは、ハロケン化水素畝、鉱酸まｆＣはスルホン
酸の存在下に、１０〜２００℃の温度ぐこおいて反応さ
せるが、るるいはＢ）式 ％式％） 式中、 ｌ＜およびＸは上（ｆこ定義しブことおりであり、そし
て Ａ　ｒＪ　ｒｉｋ　ＩＩ吃１生是、たとえはハロゲン址
／（はシアル扼ルオキソニウム、ジアルキルスルホニウ
ム盪たはトリアルキルアンモニウム基あるいはアリール
〜またはトリフルオロメチル−スルホン酸基を衣わす、 の化合物を式 ％式％（） Ｒ’、Ｒ２およびＲ３は上に定義したとおりである、 のピラゾル−５−オン詠導体類と、適当ならば不活性溶
媒および無機またケま有様の塩基、たとえばアルカリ金
属の水酸化物、旅臥塩、アルコラード、水素化物または
アミドの存在下に、１０〜２００℃の温度において反応
さぜるか、あるいは（Ｊ？２＝　Ｒ３＝　１．ｉのとき
） Ｃ）式 ％式％（） 式中、 Ｒ′およびＹは上に定義したとお沙でるる、のアセチレ
ンカルボン岐肪導体を、上記式（１１）のヒドラジン類
と、適当ならば不活性溶媒および無根または有機の塩基
の存在下に、５０〜２００℃の温度において反応させる
、 方法によって得られる。

本発明による薬物は、本発明に従って使用するピラゾロ
／易導体類に加えて、製薬学的に計容されうるイ６釈剤
まだは賦形剤をまた含南する。これらの布釈剤または賦
形剤は、活性化合物と混合した後、投与ＶＣ適する形態
の薬物を生ずる無毒例二の物質であると理解すべきであ
る。この用語は、他の製薬学的に要求される成分、たと
えば、等張配合物の―、ｉＪ製のために正しい量の塩類
、緩価剤、界面活性剤、着色剤、香味物質および防腐剤
が存在しないかぎシ、好球しくは、水および化学合成に
通常用いられる低分子量の有機溶媒を排除する。

過当な固体壕だは液体の揃釈剤および賦形剤の例は次の
とおりでめる：水含有緩衝剤、これはグルコースまたは
塩類の添加により等張とすることができる；無毒性の有
機溶媒、たとえばパラフィン、植物油、アルコールおよ
びグリコール；天然岩石鉱物（たとえは、カオリン、酸
化アルミニウム、タルクまたはチョーク）粉砕物；合成
岩石（たとえは、都度に分散したケイ酸−また幻、ケイ
酸塩）粉末。

本発明による薬物は、概して、０５〜９５重量係、好ま
しくＩ″１１〜９０重量係、とくに好１しくに５〜５０
重景襲の本発明に従い使用するピラゾロン訪４体類を含
有する。

経口的投与は、固体または液体の投与形態、たとえは、
粉末、錠剤、糖剤、カプセル剤、粒剤、）旨濁液、溶液
などを用いて実′ｂ市することができる。

過当ならば、投与単位形態は、活性成分の放出を長期−
」にわたって遅煤化することを目的として、たとえは、
粒状１勿質全ポリマー、ワックスなどでコーティングす
るかあるいはその中に埋め込むことにより、経口的投与
のためにマイクロカプセル化することができる。

非経口的投与は、液体の投与形態、たとえば、皮下、筋
肉内または静脈内の注射を意図して無菌の溶液捷だは懸
濁液を用いて実施することができる。これらは測定量の
活性化合物を注射に適する無毒性の液体増量剤たとえば
水性または油性の媒質中に懸１＠または溶解させ、そし
てこの懸濁液または溶液を戴置することによって調製さ
れる。安定剤、防鳥剤および乳化剤を加えることもでき
る。

一般に、人間において、活性化合物のＩＨの投与量は、
体重に基づいて、非経口的投与にはｏ、ｏｉ〜５０ｙ９
／ｋｇ、好ましくは０．１〜１０　ｘｑ　／　１１　テ
＄ムそして経口的投与には０．１〜５００　Ｑ　／　ｋ
ｇ、好ましくは０．５〜１ｏｏ牧／ｋｌ？、とくＶ′ｃ
１〜５０ｍｙ　／　ｋｇである。

投与単位（錠剤、カプセル剤など）は概して１〜１００
叩、好１しくは５〜５　Ｑ　〜９　Ｎ　　とくケこ好ま
しくは１０〜３０ｍ９の本発明に従って使用するピラゾ
ロン誘導体を含有する。

次の手順を用いて、本発明に従って用いるビシゾロン鴇
導体の］′）を転移および抗新生物形成特性を決定した
。

−４，胛瘍系統の生体内維持 欧州％許Ａ　Ｏ，０６４３１９号において使用されてい
るのと同一の腫瘍系統を使用し、そして同一方法で牛体
内において維持する。

Ｂ、腫瘍の単離および懸濁液 次いでｌ１ｆｆｌｉ細産を宿主マウスから無菌条件下で
切除し、後述するように、順次のコラゲナーゼの消イヒ
を用いて分散させた。切除した腫瘍を立方体（４Ｘ　４
　ｖ、ａ　）に分割し、そして立方体の組織を６〜８　
個（７）　ホ＋）カーボネート’ｌＡコニカルフラスコ
間に分けた（約５ｏｏｔｎｇ／フラスコ）。１０ｍ４の
量の［腫瘍分散溶液ｊ　　（ＴＤＳ）を谷フラスコへ加
えた。

Ｔ　Ｄ　Ｓは後述する組成物Ａおよび組成物Ｂを混合す
ることにより調製した。

組成物Ａ （ｚ’を基準） ９、５　ｇ　／　ｅの無菌イーグル（Ｅａｇｌｅ　）　
　ｒ最小必須培地（ｍｉｎｉｍｗｙｎ、　ｅｓｓｅｔＩ
ｔｉａｌ　ｒｎ、ｅｄｉｗｎ　）　（Ｊ（Ｆ＃ｉ　）　
（Ｇｉｂｃｏ、　Ｇｒａｎｄ　ｌ５ｌａｎｄ、　Ａ’ｅ
ｗ　￥ｏｒｋから鈴朶的に人手できる）、１０　ｎｒｌ
／　＃の非必須アミノ酸（Ｇｉｂｃｏ　）、 １０ｉｔのピルビン散ナトリウム、 ０．３５ｇ／ｌのν【炭酸ナトリウム（１５ミリモル）
、 ５、９　ｇ　／　ｌ　（／、）　１１　Ｅ　ｐ　Ｌ′Ｓ
　（２５ミリモル）　＝　４−（２−ヒドロキシエチル
）−１−ピペラジン−エタン−スルホン酸（有機緩衝液
；　５ｉｑｒｎαＣ’ｈｅ−ｍｃｉａｌ、　Ｓｔ、Ｌｏ
ｕｉｓ、　Ｍｉｓｓｏｕｒｉから人手できる）、１５０
年位／　ｎｕ２のペニシリン、および１００μｇ　／　
Ｔｎｔ！のネオマイシン硫酸塩。

抗生物質を加えてバクテリアの汚染が起こらないことを
保証した。

組成物Ｂは、次の成分を昔有する乾燥混合物で１、）；
５：はんのわずかのクロストリペイン（ｃｌｏｓ−ｔｒ
ｉｐａｉｎ　）および他のタンパク貿加水分解活性をも
つコラゲナーゼ；デオキシリボヌクレアーゼ（Ｄｉｖａ
Ｓｅ）、振部された＋；：＋Ｂ　Ｉｆｉｕ核から遊離さ
れたデオキシリボヌクレオプロティンを分解するため：
アオイマメまたは大豆のトリズシン阻害剤、残留するか
も知れないトリプシン作用を排除するため；およびヒト
血清アルブミン、非特異性活性を排除しかつ損１為され
た膜により遊離されたペルオキシおよびヒドロペルオキ
シ脂肪酸を吸収する／ζめ。

糸は成り勿Ｂ ＤＮａｓｅ　　ｌ　　　（Ｓｉｇｍａ　　Ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ）　　　ｓ　　Ｏｐ＆大豆トリブ７ノ阻害剤　　　
　　　１００μｙ（Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｘ） ヒｔ・、１ｆｌＬ　ｉＸｉアルブミン（脂肪酸不含；　
１０〜５１ｇｎ１ａ　Ｃｈｅｓｉｃａ、ｌ　）組成Ｑ＄
　ｌｉを秤量し、フラスコに導入し、次いで１００フｔ
ｒＩの組成物Ａを加え′ｋ。

次いでＴ　Ｉ）　Ｓ中の立方体の組織をダブノツフ（Ｊ
’）ｕｂｎｏｊ’ｊ’　）代謝振とう器（９０振動／分
）内で空気（３０分；３７°（ツ）のもとに分散し７た
。上澄み故を；、Ｉｊ扉ｊの５０　ｒｍｇ容の丸底遠心
’Ｈｆ内のポリカーボネートｌ　（ｚ（ｇに〕４布ケ辿
して集め、そしてソルノ＜−ル（Ｓｏｒｖａｌｌ）ＳＳ
−３４ｏ−ター内で１０分間遠心（７たＣ９００／分（
１００＆）および２５°Ｃにおい−こ）。遠心後、上沿
みの分画を廃菓した。

得られる細ＩＫ’ｉ材料（ベレット）をＡｉ　Ｅ　Ｍ溶
液で２回洗浄し、ＭＥＡｆ中に再び懸濁させ、４℃で貯
蔵した。

１０１７７１’のセｉ−のＴ　Ｉ）　Ｓを残留する立方
体の組織へ加え、そして、組数を、期Ｉｆ」が６０分で
ある以外前述のようにして、代謝振と９器内でインＡ′
ユベーンヨンした。遠心を反復し、そして再懸濁した斧
１１１胞を合わせた。

細胞の生活力を、生体染料わ［除法（υ１ｔａｌｄｙｅ
ｓｔｒｔｆｆ　ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ　ｎ１ｅｔｈ、ｏｄ
　）　［Ｅ’ｘｐｔｌ。

Ｃｅ１１Ｒｅｓ、１３，３４Ｌ−３４７（１９５７）参
照〕により決ン［した。細胞の計数は、血球ｉ丁によ　
　′り決定した。

このようにして得られたｕ　−１６ａ　４％’、色卸組
胞を、後、ボするように用いて仙死すべき化合物の抗転
移法＝ｌｆｔおよび抗新生物形成活性を試験した。

（＋１　ＱＪ　（Ａｉｅｔ（Ｌｓｔａｓｉ８　）すでに
述べたように、転移はある数の複雑な過程（Ｃよυ引き
起こされる単一の現象である。現在、２つの「モデル」
糸が生体内転移の４ｉＪｆ　＝ｉの１こめに広く用いら
れている。第１モデル系は腫瘍細胞の動物への皮下ε射
からなる。原動８（Ｉ胞の皮下注射および引き続く１次
１匝瘍の発生、次いで自発的転移は「完全な」転移であ
ると考えられる。他のモデル系は尾静脈を経る鞘瘍細胞
の注射からなる。

転移の複雑性から見て、尾静脈の注射は、転移の最後の
部分の間の過程を再現するだけであるので、部分的モデ
ル系たけでおる。しかしながら、他方において、尾静脈
モデル系は実験条件の標準化に関して例外的に好都合で
ある（　”　、Ａｆｅｔｈｏｄｓ　１ｎＣａｎｃｅｒ　
Ｒｅ５ｅａｒｃｈ′、ｃｈａｐｔｅｒ■、　Ａｃａｄｅ
？＋＋、１ｃｐｒｅｓｓ、Ｉｎｃ、、　１９７８参照〕
。

対照動物として、（未処置）　Ｃｓ　７　ＪＪ　１／　
ａ　Ｊマウスを医の手順により完全な転移について研究
Ｌ／６１マウスの右１１ｉ＊区、賊に皮下注射した（０
．６６鮒＝２６ケージの釦；０．２ηｒｉ　）。５　Ｘ
　ｌ　Ｏ’　〜Ｉ　Ｘ　１０’Ｚｄ力包のＩＩＩ包し旧
のオ東々の童の４＋Ｕ＋胞懸ン蜀液を注射した。腫瘍細
胞を（未処置）対照マウスに尾舒Ｐ＃、を経て注射する
ことにより、部分的転移の実験を実施した。動物を温度
、九の作用期間、栄養などの同一条件下に保持した。１
７〜３０［＝ｌの観察期間後、完全転移および部分的転
移に使用した動物分殺し、そして肺、肝、腎および牌を
切除した。

各器上′における転移の細胞小集合体（ｎｏｄｒｂｌｅ
）の数を決定した。転移の細胞小集合体についての対照
マウスの検査は、動物の１００チーにおいて転移した肝
性ｊ止瘍に関して陽性の所見を示した；このような転移
の形成についての潜伏詩画はＢ−ｘ６ａ腫瘍＃ｌＢ胆に
ついて２３〜３０日であった。可視の細胞小乗合体は肝
、腎および牌において観察されなかった。

（２）抗新生物形成活性（ｙｌ？１．ｔｉｎｅｏｐｌａ
ｓｔｉｃ　ａｃｔｉ−τｉｔｙ　） 抗新生物形成活性は、マウスに愈瘍Ｉ！ＩＩ胞召二皮下
注躬し、そして未熟ｂ゛対照動物およびピラゾロン化合
物で処１θした動物におけるへΦ瘍細胞の成長の存在お
よび成長している腫瘍細胞の重量を決定することにより
実施した。

Ｊ比瘍則胞の尾注射ぐこより引き起とはれた１区移およ
びｊｊ１ルｙ細胞の皮下注射に基づく完全転移について
の本発明に従い使用するピラゾロン誇導体類の作用を、
実施９１ｊ　１〜４に示す。

実施例１ ５１１１９の特定のピラゾロン誘導体を０．５係強度の
タイロース（ｔｙｌｏｓｅ　）中９に取り、次いで超音
波処理（３０秒）により溶解した。この物質の最終良度
は、この浴液を０．５幅強度のクイロースでｌｒ−釈す
ることにより調節した。

シンジエネイツク（ｓｙ／ｎｇｅｎｅｉｃ　）　Ｃ５７
Ｂ　Ｌ／６Ｊマウスを、０．２　ｍｌの０，５φ強度の
タイロース中のｏ、　ｏ　ｏ　５ｐｇ／ｋｙ　〜ｓ　ｒ
ｎｙ／ｋｇの２種の物質で３口筒にわたって経口的に処
ｊ？ｌ　Ｌだ。対照動物に０、２７ｎＩ！の０５係タイ
ロースを毎日投与した。第４日に、５ｘｔｏ’　Ｂ−１
６ａ耽瘍細胞の懸濁液を予備処憤゛シたマウスと対照マ
ウスに尾静脈を経て注射した。対照マウスおよび処（ベ
マウスを、温度、光の作用期１ｄ」、栄養などの同一条
件下に保持した。

尾静脈中に注射後２４日に、マウスを殺し、マウスの肺
組織を検査した。転移の程度を、巨視的に川−視の転移
の数および大きさに従って点数１〜１０ケ用いて評価し
た。これらの点数は、転移でおおわれた器官の区域と転
移を含まない器官の区域との間の関係を表わす。点数は
次のガイドラインの規準に従って与えられる：１−ちょ
うど認めることかできる１〜２の転移、５−器官の氷面
の約５０’％が転移で針おわれている、および１０−器
官の「常な表面をほとんど視ることかできない。

表１に記載するデータから明らかなように、転移の数お
よび大きさは、ピラゾロン誘導体類を、とくＶこＯ，Ｏ
Ｏ５ＩＩ＋９〜５〜／ｋｇの範囲において、投与するこ
とにより減少される。

化＠物Ａ 化合物Ｂ １−Ｃ２−＜２−ナフトキシ）エチル’：ｌ　−３、４
゜４−トリメチルピラゾリン−５−オンの合成５ｇ（０
，０２５モル）の２〜（２−ナフトキシ）エテルヒドラ
ジンおよび３．６　ｇ（０，０２５モル）の２，２−ジ
メチルアセト酢酸メチルエステルの混合物を、４０　＋
ｈ（’、の無水エタノール中で還流下に４時間加熱する
。冷却後、との浴液を回転蒸発器内で鎖線し、そして残
留物をエーテル中に取る。

この溶液を２Ｎの水酸化ナトリウムで２回抽出し、有機
相ｆ：Ｍｊ　ｍすｌ−ＩＪウムで乾燥し、そして溶媒を
兵を蒸留する。残留物音エーテルから衿結晶化し、そし
てエタノールから３回再結晶化する。

収量：１．９．９（理論量の２６襲）；融点＝１１５−
１１７℃。

実施例２ ５〜の％−丸のピラゾロン誘導体を０５％強度のタイロ
ース（ｔｙｌｏｓｅ　）中に取シ、次いで超音波処理（
３０秒）により溶解した。この物質の最終線度は、この
溶畝を０．５　％強匿のタイロースで希釈することによ
シ調節した。

シンジエネイツク（Ｓｙｎｇｅｎｅｉｃ　）　Ｃ５７Ｂ
　Ｌ／６Ｊマウスを、０．２ｍ１４の０．５係強度のタ
イロース中の０．００５〜／ｋｙ〜５■／に９／日の２
種の物質で腫瘍注射前３日および原動注射後２日の期間
にわたって経口的に処置した。対照動物にＯ６２ｎｔｌ
の０．５％タイロースを投与した。第４日に、５×１０
’　Ｂ−１６α腫揚細胞の懸濁液を予備処置したマウス
と対照マウスに尾静脈を経て注射した。

衣２に記載するデータから明らかなように、転移の数お
よび大きさは、ビシゾロン誘導体類を、とくに０．００
５１ｖ〜５〃り／に９の範囲において、投与することに
よ）減少される。

化合ｖＪＣ’ １ノ 化合物り 実施例 ２　Ｑ　ＴｎＬＪの特定のピラゾロン訪導体を０．５係
強度のタイロース（ｔｙｌｏｓｅ　）中に取り、次いで
超音波処理（３０秒）により溶解した。この′＋Ｉ／Ｊ
暫の最終濃度は、このｄ液を０５多強度のタイロースで
で’６釈することによりＪ、１節した。

シンジエネイツク（Ｓｇｎｇｅ？１ｅｉｃ　）動物を、
０−２、、ｅ＜／）　０．５１強度のタイロース中の２
　ｖｑｉ　／　ｋｙ　−２０ＯＲ？７に４７日の物質で
腫瘍注射前３日間にわゾとって経口的に処ｔｔｒ　Ｌ、
た。対照動物に０．２　ｍ／！の０，５係タイロースを
投与した。江１４日に、５Ｘ１０’／；１−１６（Ｚ腫
瘍細胞の懸濁液を予備処置したマウスと対照マウスに尾
静脈を経て注射した。

表ａ　ＶＣ記載するテークから明らかなように、転移の
数および太き芒は、ピラゾロン誘導体類を、と＜　ｉ／
（２η〜２００ａ＋り／ｋｇの範囲において、投与する
こと１（よシ減少される。

化合物Ｅ １ 化合物１＝’ ＼ ＼。

ゝへ、 −，１−−一−−−−−−−１ １３−１６（Ｌ黒色Ｉｉ（Ｍの転移の肺コロニーの数へ
の長期間にわ／こるピラゾロン化合物リ一の投与の効果
を、後述するように化合物Ａについて決定した。

１０勺の化合物７４を０５ヂ強度のタイロース（ｔｙｌ
ｏｓｅ　）中に取９、次いで超音波処理（３０秒）によ
り溶ｊＩｌイした。この物価の最終濃度は、この溶液を
０．５係強度のタイロースで祁釈することにより幽節し
た。この物質の溶液を毎日調製した。

シンジエネイツク（ＳｙｔＬｇｅｎｅｉｃ　）　Ｃ５７
ＪＪ　Ｌ／′６Ｊマウスに、前述のようにして調製した
１、０Ｘ１０５Ｂ−１，６ａ細胞の懸濁液を皮下注射し
た。

加シ瘍細胞を注射後１日月から出発し、マウスに１日１
−０〜１００ｍ９７ｋｇのピラゾロン化合物を２７日１
ｉ４ｊ　＋７４％ロ的Ｖ（−投与した。対照マウス・お
よび処置マウスを、温度、光の作用期間、栄養などの同
一条件下に保持した。２８日後にマウスを殺し、そして
肺内の転移細胞小集合体の数および大きさを決定した。

肺組＃Ｓを検査して得られた実験データを、下表４に記
載する。

＼ ＼ ＼ アー ドイツ連邦共和国デー４０１０ヒル ドイツ連邦共和国デー５６２ｏフェ ルベルト・カントシュトラーセ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．１厘瘍の治療および転移の形成の防除における、−
   ・般式（１） 式中、 Ｒはアリール基またはへテロアリール基を衣わし、前記
   アリール基およびヘテロアリール基は４〜１２Ｃ原子を
   有しかっ適′扛ハロゲン、トリフルオロメチル、アルキ
   ノペアルケニル、アルコキシ、アルキルアミノ、シアン
   、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ヒドロ＜−シ／Ｌ、
   、ＳＯ３，ｌｊ　Ｘ５ｕｎ　−−ｆ　ルキシ（ｎ−０〜
   ２）および５ｏｎ−トリフルオロメチル（ｎ−０〜２）
   からなる群よｐの同一もしくは相異なる訪、換基の１〜
   ３個を昔イイしていてもよく、前Ｂ己アルキル ニルおよびアルコキシの各々は１〜４Ｃ原子を有し、 Ｒ’およびノイ２は同一もしくは相異なシ、そして水素
   、ＮＩＩ２または炭化水素基を表わし、前記炭化水素基
   は１〜１８Ｃ原子を有シカつ適宜ヒドロキシル、エーテ
   ル、エステル寸たはカルボキシル基を含有してもよくか
   つ適宜１〜３個のハロゲン原子を含有してもよく、 Ｒ３は水素またはメチル基を表わし、ぞして Ｘは化学結合あるいは基−Ｏ−ＣｌＩ２−　Ｃ’Ｈ２−
   。 −（、’ＪＩ２−　ＣＪＩ□、−Ｃｌ）、−址たは−ｃ
   ｈ−の１つＥ３ を表わし、前記ば素原子は基Ｉ？に結合してνす、ただ
   しＲ二β−ナフチル；パ’＝Ｃ’＃３かつ／イ’ｌ＝Ｊ
   イ”＝ＩｉのときＸは−０−ＣＨ２−Ｃ１１２を表わさ
   ス（いものとする、 の化合物の使用。 ２一般式（１） 式中、 ｌ？はアリール基またはへテロアリール基を表わし、ｏ
   ｉｌ］８己アリール基およびヘテロアリール基は４〜１
   ２Ｃ原子を有しかつ適宜ノ・ロゲン、トリフルオロメチ
   ル、アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルキルアミ
   ノ、シアン、トリフルオロメトキシ、ニトロ、ヒドロキ
   シルへ　Ｓｏ、１１，５ｏｎ−アルキル（ｎ＝０〜２）
   および５Ｏｎ−トリフルオロメチル（ｎ−０〜２）から
   なる群からの同一もしくは相異なる置換基の１〜３個を
   含有していてもよく、前記アルキル、アルケニルおよび
   アルコキシの各々は１〜４Ｃ原子を有し、 Ｒ１およびＲ２は同一もしくは相異なり、そして水素、
   Ｎ１１２または炭化水素基を衣わし、前記炭化水素基は
   １〜１８Ｃ原子を有しかつ適宜ヒドロキシル、エーテル
   、エステルオたはカルボキシル基を含有してもよくかつ
   適宜１〜３個のハロゲン・原子を含有してもよく、ただ
   しＲ２は・水素を表わさ々いものとし、 Ｒ３はメチ／Ｉ／基を表わし１そして Ｘは化学結合るるいは基−０−Ｃ１ｆ２−　Ｃ’Ｈ２−
   。 −Ｃ１ｉ２−Ｃ’ｌ１２．−０ｆｆ２−まだは−ＣＭ−
   の１つ６ノノ。 を表わし、前記峨累原子（−Ｊ、基Ｒに結合している、 の化合物。 ３、　　ｔ−［：２−（２−ナフトキシ）エチル〕−３
   、４、４−１−リメテルービラゾリンー５−オンである
   符計１□Ｆ’ｌ求のｉｉ・α１ム］ε１３２項記載の化
   合物。 ４　治療竿的に活性な賛の特許請求の範囲−）２または
   ３項記載の化合物を含有することケ躬″徴とする抗層生
   物形成および抗転移系物。 ５、　　Ｒか適に１〜２個の−、俟基、と（（ＣＣ’　
   ｌ。 Ｄｒ、　Ｃ１１３，０Ｃ１ｊ３−５．たはＳ　Ｏ８Ｈで
   一１換されていてもよい、ナフチル、ジンエニノへチェ
   ニルまたは、フェノキシフェニルまたはフェニル基を表
   わす特許請求のＡＤＤ囲でづ２項ａ己販の式（＋）の化
   合物を含有することを特徴とする特許請求の祁、囲第４
   項記】寂の条物。 ６、　　Ｒが適宜ｉへ換されていてもよいナフチル基？
   ｒ：表わす；とを特徴とする酌−凶１１劃求の従囲第５
   項記載の薬物。 ７、　　／ｌ”およびｊり２が水素または炭化水素基、
   好寸しくは枝分れしていてもよいＣ”、二Ｃ４−アルキ
   ル基を表わし、前記炭化水素基が１〜８Ｃ原子な有しが
   つ適宜ヒドロキシル、エーテルまたはエステル基を廿有
   していてもよく、１？２がＨ以外でめる物許Ｈ’？４求
   の軸囲第２項記載の式（１）の化合物を含有することを
   特徴とする特１作請求の範囲第４〜６項のいずれかに記
   載の梁上〇。 ８、　　Ｒ’　、　Ｒ２およびＲ３が合δ−１２〜４Ｃ
   原子を含有する特許請求の範囲第２項記Ｊ成の式（１）
   の化合物を含有することを特徴とする特許請求の範間第
   ４〜７項のいずれかに記載の薬物。 ９．　経口投与に適する形態を有することを特徴とする
   特許計Ｊ求の範囲第４〜８項のいずれ力・に１己載の薬
   物。 １０　非経口投与に適する形態を有することを特徴とす
   る特許拍求の範囲給４〜８項のいずれ力ｊにｂ己１１戊
   の梁９勿。 １１１〜ｌｏｏｍ９の式（１）の化合物を含南゛する錠
   剤の形態で多ることを特徴とする’ｆ：ｊ’　ｉｔ’Ｆ
   　ｎ’！’ｊ刀くの１；１）間第９項記載の架物。