JPS6258335B2

JPS6258335B2 -

Info

Publication number: JPS6258335B2
Application number: JP12361679A
Authority: JP
Inventors: Takao Nishi; Kazuyuki Nakagawa
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1979-09-25
Filing date: 1979-09-25
Publication date: 1987-12-05
Also published as: JPS5646810A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、新規なテトラゾリルプロポキシカル
ボスチリル誘導体を有効成分とする血小板凝集抑
制剤に関する。本発明の血小板凝集抑制剤に有効成分として含
有されるテトラゾリルプロポキシカルボスチリル
誘導体は、一般式〔式中、Ｒは低級アルキル基またはシクロアル
キル基を示す〕で表わされる。従来、一般式〔〕の化合物に類似した構造を
有する化合物としては特開昭54−30183号に記載
の化合物が知られている。上記公開公報記載の化
合物は、抗菌作用、消炎作用、血小板凝集抑制作
用および血液中の脂質含有物質、とくにコレステ
ロール、ホスホリピド、トリグリセリドなどの血
中濃度を低下させる作用を有し、抗菌剤、消災
剤、血栓予防薬、動脈硬化症の治療および予防薬
として知られている。しかしながら、本発明者らは種々研究を重ねた
結果、一般式〔〕の化合物が、上記公開公報記
載の化合物に比し、顕著な血小板凝集抑制作用を
有することを見い出し、本発明を完成した。すなわち、本発明は、一般式〔〕の化合物を
有効成分として含有することを特徴とする血小板
凝集抑制剤に関する。本発明の血小板凝集抑制剤は、その血小板凝集
抑制作用により、血小板機能亢進の認められる各
種の疾患に対して予防および治療剤として有用で
ある。たとえば、脳血栓の発作にともなう一過性脳循
環不全などの脳血管疾患、心筋梗塞などの虚血性
心疾患、糖尿病、人工心肺や人工腎臓などの人工
材料に伴なう血栓症、静脈血栓症などの末稍血管
血栓症、その他血栓性血小板減少性紫斑病、細血
管障害性溶血貧血、急性進行性糸球体腎炎、腎臓
移植における局所血栓性病変、高血圧、レイノー
ド病、多発性硬化症、妊娠中毒症、高脂血症など
の血小板機能亢進の認められる疾患に有用であり
（日本臨牀第36巻、第12号（1978年12月号）、“特
集・血小板研究の進歩”を参照）、さらに血小板
の異常が重要な関係を有しているといわれる（内
科、第44巻、第３号、409〜414頁（1979年９月）
を参照）動脈硬化症の予防および治療にも有用で
ある。上記一般式〔〕において、低級アルキル基と
しては例えばメチル、エチル、プロピル、イソピ
ロピル、ブチル、イソブチル、tert−ブチルなど
が包含され、また、シクロアルキル基としては、
例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロ
ペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シ
クロオクチルなどが包含される。本発明の代表的な化合物としては以下のものが
挙げられる。６−〔３−（１−メチルテトラゾール−５−イ
ル）プロポキシ〕カルボスチリル、６−〔３−（１−エチルテトラゾール−５−イ
ル）プロポキシ〕カルボスチリル、６−〔３−（１−プロピルテトラゾール−５−イ
ル）プロポキシ〕カルボスチリル、６−〔３−（１−イソブチルテトラゾール−５−
イル）プロポキシ〕カルボスチリル、６−〔３−（１−シクロペンチルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル、６−〔３−（１−シクロヘキシルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル、６−〔３−（１−シクロヘプチルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル、６−〔３−（１−シクロプロピルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル、６−〔３−（１−シクロオクチルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル。一般式〔〕の化合物は各種の方法で製造で
き、例えば、本願出願人の出願にかかる特願昭53
−107869号（特開昭55−35019号）に記載される
ように、下記反応式〔式中、Ｘはハロゲン原子を示し、Ｒは前記に
同じ〕で示されるように、公知の６−ヒドロキシカル
ボスチリル〔〕とテトラゾール誘導体〔〕と
を常法により脱ハロゲン化水素反応に付して製造
される。一般式〔〕の化合物はそのままであるいは慣
用の製剤担体と共に動物および人に投与すること
ができる。投与単位形態としては特に限定がな
く、必要に応じ適宜選択して使用される。かかる
投与単位形態としては、錠剤、カプセル剤、顆粒
剤、各種経口用液剤などの経口剤、注射剤、坐剤
などの非経口剤などを例示できる。投与されるべ
き有効成分の量としては特に限定がなく広い範囲
から適宜選択されるが、所期の効果を発揮するた
めには１日当り体重１Kg当り0.06〜10mgとするの
がよい。また、投与単位形態中に有効成分を１〜
500mg含有せしめるのがよい。本発明において錠剤、カプセル剤、経口用液剤
などの経口剤は常法に従つて製造される。即ち錠
剤は本発明化合物をゼラチン、澱粉、乳糖、ステ
アリン酸マグネシウム、滑石、アラビアゴムの製
剤学的賦形剤と混合し、賦形される。カプセル剤
は、本発明化合物を下活性の製剤充填剤もしくは
希釈剤と混合し、硬質ゼラチンカプセル、軟質カ
プセルなどに充填される。経口用液剤のシロツプ
剤およびエリキシル剤は本発明化合物をシヨ糖な
どの甘味剤、メチル−およびプロピルパラベン類
などの防腐剤、着色剤、調味剤などと混合して製
造される。また非経口剤は常法にしたがつて製造
され、例えば、本発明化合物を滅菌した液状担体
に溶解して製造される。好ましい担体は水または
塩水である。所望の透明度、安定性および非経口
使用の適応性を有する溶剤は約１〜500mgの有効
成分を、水および有機溶剤に溶解し、さらに分子
量200〜5000のポリエチレングリコールに溶解し
て製造される。かかる液剤にはナトリウムカルボ
キシメチルセルローズ、メチルセルローズ、ポリ
ビニルピロリドン、ポリビニルアルコールなどの
潤滑剤が配合されるのが好ましい。さらには上記
液剤中にベンジルアルコール、フエノール、チメ
ロサールなどの殺菌剤および防カビ剤、さらに必
要に応じ、シヨ糖、塩化ナトリウムなどの等張
剤、局所麻酔剤、安定剤、緩衝剤などが含まれて
いてもよい。また、非経口投与用薬剤は、その安
定性の観点から、カプセルなどに充填後、冷凍
し、通常の凍結乾燥技術により水を除去し、使用
直前に凍結乾燥粉末から液剤を再調製することも
できる。さらに、本発明の血小板凝集抑制剤は、作用持
続性に優れるほか、きわめて毒性も低く、例え
ば、心博数増加、心血管肥厚、心筋障害などの副
作用もきわめて弱い特徴を有している。つぎに、一般式〔〕の化合物の製造例、薬理
試験、急性毒性データならびに製剤例を挙げて本
発明をさらに具体的に説明する。製造例１乾燥ベンゼン200mlにＮ−γ−クロロブチリル
シクロヘキシルアミン30.6ｇを加え、外部を氷冷
して内温を20℃以下に保ちながら、PCl₅36ｇを
撹拌下に添加する。添加後、室温にて２時間撹拌
後、反応液をエバポレーターにて、浴温を50℃以
下で、約半量まで濃縮する。濃縮した液に10％
HN₃を含むベンゼン140mlを、撹拌下、内温を15
℃以下に保ちつつ90分を要して滴下する。滴下
後、反応液を１夜室温で放置する。この混合液を
撹拌下に３時間還流したのち、濃縮する。得られ
た濃縮液はクロロホルム200mlを加えて抽出す
る。クロロホルム層を５％NaHCO₃水および水で
洗浄し、Na₂SO₄で乾燥する。乾燥剤を去後、
母液を濃縮し、残渣を含水イソプロパノールから
再結晶して無色針状晶の１−シクロヘキシル−５
−γ−クロロプロピルテトラゾール28ｇを得る。
融点82〜85℃ 製造例２上記製造例１と同様にして下記の化合物を得
る。１−エチル−５−γ−クロロプロピルテトラゾ
ール、無色液体、沸点160〜163℃／2.0mmHg。製造例３ジメチルホルムアミド200mlに、６−ヒドロキ
シカルボスチリル3.2ｇ、炭酸カリウム3.3ｇおよ
び１−シクロヘキシル−５−γ−クロロプロピル
テトラゾール7.7ｇを加えて、70〜80℃にて４時
間撹拌する。反応後、ジメチルホルムアミドを減
圧下に留去し、残渣にクロロホルム300mlを加え
て抽出し、有機層を希NaOH水および水で洗浄
し、Na₂SO₄で乾燥する。乾燥剤を去し、母液
を濃縮後、残渣をクロロホルムから再結晶して無
色針状晶の６−〔３−（１−シクロヘキシルテトラ
ゾール−５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル
3.54ｇを得る。融点211〜212℃ 製造例４製造例３と同様にして下記の化合物を得る。６−〔３−（１−エチルテトラゾール−５−イ
ル）プロポキシ〕カルボスチリル、淡黄色粉末状
晶、融点179〜181.5℃ ６−〔３−（１−シクロペンチルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル、無色針
状晶、融点196.5〜197.5℃ ６−〔３−（１−シクロオクチルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル、無色針
状晶、融点220〜220.5℃ ６−〔３−（１−イソプロピルテトラゾール−５
−イル）プロポキシ〕カルボスチリル、無色針状
晶、融点202〜203℃ 〔薬理試験〕血小板凝集抑制作用：本発明の化合物の血小板凝集抑制作用をボーン
の方法〔G.V.R.Born，Nature927〜929頁（1962
年）〕より測定した。その際、AG−型凝集計
（aggregometer）〔ブライストン・マニユフアク
チユアリング・カンパニー（Bryston
Manufacturing Co.）製〕を用いて測定した。ウサギから採取した血液に、3.8％クエン酸ナ
トリウム水溶液〔3.8％クエン酸ナトリウム水溶
液と血液との混合比率＝１：９（容量比）〕を加
えた血液試料を1000rpm（200×ｇ）で10分間遠
心分離して、上澄部分の血小板濃度の高い血漿
（platelet rich plasma）を分離する。この分離
された血漿を以下、PRP−１と略称する。上記PRP−１を分離した残りの血液試料をさら
に3000rpm（1500×ｇ）で15分間遠心分離して上
澄部分を採取して血小板濃度の低い血漿
（platelet poor plasma）を得る。この分離され
た血漿を以下、PPPと略称する。前記PRP−１中に含まれている血小板の数をブ
レツチヤー・クロンカイト法（Brecher Clonkite
method）〔J.Appl.Physiol.３，365−375
（1950）〕にて測定する。アデノシン・ジホスフエート−誘発凝集抑制試
験（以下、ADP−誘発凝集抑制試験と略称す
る）に供するため、PRP−１をPPPで希釈して
300000mm^３の血小板を含む試料を調製した（この
調製試料を以下PRP−２と略称する）。また、コ
ラーゲン−誘発凝集抑制試験に供するため、PRP
−１をPPPで希釈して450000／mm^３の血小板を含
む試料を調製した（この調製試料を以下PRP−３
と略称する）。 ADP−誘発凝集抑制試験：回転子を入れた血小板凝集測定用セルに試験す
べき化合物を予め定めた濃度で含有する溶液0.01
mlと前記PRP−２ 0.6mlを加え、このセルを37
℃に保温された血小板凝集計のセル室に入れ（回
転子の回転速度は1100rpmに調節する）、１分
後、7.5×10^-5M ADP溶液0.07mlを添加し、光の
透過度の変化を記録した。上記試験で使用する7.5×10^-5M ADP溶液は、
ADP粉末（シグマ社製）をオーレン・ベロナー
ル緩衝液（PH7.35）に加えて調製した。血小板の凝集が最大となつた時点（光の透過度
が最大となつた時点）の凝集率を下記の式により
算出した。凝集率＝ｃ_１−ａ_１／ｂ_１−ａ_１×100 a₁：PRP−２の光の透過度 b₁：PPPの光の透過度 c₁：上記の方法で血小板凝集を起させて血小板
凝集が最大となつたときの光の透過度上記の方法において試験化合物溶液の代りに試
験化合物を溶解した溶媒のみを加えて同様に血小
板を凝集させ、同様にして凝集率を求め、これを
コントロールの凝集率とした。上記で得られた試験化合物の凝集率とコントロ
ールの凝集率とから、下記の式にしたがつて、試
験化合物の血小板凝集阻止率を算出した。阻止率（％）＝Ａ_１−Ｂ_１／Ａ_１×100 A₁：コントロールの凝集率 B₁：試験化合物の凝集率コラーゲン−誘発凝集抑制試験：回転子を入れた血小板凝集測定用セルに試験す
べき化合物を予め定めた濃度で含有する溶液0.01
mlと前記PRP−３ 0.6mlを加え、このセルに37
℃に保温された血小板凝集計のセル室に入れ（回
転子の回転速度は1100rpmに調節する）、１分
後、7.5×10^-5Mコラーゲン溶液0.07mlを添加し、
光の透過度の変化を記録した。上記試験で使用する7.5×10^-5Mコラーゲン溶
液は、コラーゲン100mgをすりつぶしてオーレ
ン・ベロナール緩衝液（PH7.35）５mlに加え、得
られた上澄液を分離して調製した。血小板の凝集が最大となつた時点（光の透過度
が最大となつた時点）の凝集率を下記の式により
算出した。凝集率＝ｃ_２−ａ_２／ｂ_２−ａ_２×100 a₂：PRP−３の光の透過度 b₂：PPPの光の透過度 c₂：上記の方法で血小板凝集を起させて血小板
凝集が最大となつたときの光の透過度上記の方法において試験化合物溶液の代りに試
験化合物を溶解した溶媒のみを加えて同様に血小
板を凝集させ、同様にして凝集率を求め、これを
コントロールの凝集率とした。上記で得られた試験化合物の凝集率とコントロ
ールの凝集率とから、下記の式にしたがつて、試
験化合物の血小板凝集阻止率を算出した。阻止率（％）＝Ａ_２−Ｂ_２／Ａ_２×100 A₂：コントロールの凝集率 B₂：試験化合物の凝集率上記で得られた阻止率（％）をもつて血小板凝
集抑制作用をみた。コラーゲン−誘発凝集に対する抑制作用を第１
表に、ADP−誘発凝集に対する抑制作用を第２
表に示す。なお、試験化合物は以下のとおりであ
る。これらの化合物中、Ａ〜Ｃが本発明の化合
物、またＤ〜Ｇが比較化合物である。試験化合物Ａ：６−〔３−（１−シクロヘキシルテトラゾール
−５−イル）プロポキシ〕カルボスチリルＢ：６−〔３−（１−イソプロピルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリルＣ：６−〔３−（１−シクロオクチルテトラゾール
−５−イル）プロポキシ〕カルボスチリルＤ：アスピリンＥ：６−〔３−（５−メチルチオテトラゾール−１
−イル）プロポキシ〕−３，４−ジヒドロカル
ボスチリルＦ：６−〔３−（５−メチルチオテトラゾール−２
−イル）プロポキシ〕−３，４−ジヒドロカル
ボスチリルＧ：６−〔３−（テトラゾール−１−イル）プロポ
キシ〕−３，４−ジヒドロカルボスチリル

【表】

【表】急性毒性試験化合物Ａ，ＢおよびＣを各々マウスに経口
投与してその急性毒性（LD₅₀）を測定したとこ
ろ、いずれも1000mg以上であつた。製剤例１錠剤の調製配合量（ｇ）６−〔３−（１−シクロヘキシルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル
５乳糖（日本薬局方品） 50 コーンスターチ（日本薬局方品） 25 結晶セルローズ（日本薬局方品） 25 メチルセルローズ（日本薬局方品） 1.5 ステアリン酸マグネシウム（日本薬局方品）
１上記本発明の化合物、乳糖、コーンスターチお
よび結晶セルローズを充分混合し、メチルセルロ
ーズの５％水溶液で顆粒化し、200メツシユの篩
に通して注意深く乾燥し、これを常法により打錠
して錠剤1000錠を調製する。製剤例２カプセル剤の調製配合量（ｇ）６−〔３−（１−シクロヘキシルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル
10 乳糖（日本薬局方品） 80 澱粉（日本薬局方品） 30 滑石（日本薬局方品）５ステアリン酸マグネシウム（日本薬局方品）
１上記成分を細かく粉末にし、均一な混合物にな
るように充分撹拌したのち所望の寸法を有する経
口投与用のゼラチンカプセルに充填し、カプセル
1000個を調製する。製剤例３注射剤の調製配合量（ｇ）６−〔３−（１−シクロヘキシルテトラゾール−
５−イル）プロポキシ〕カルボスチリル
１ポリエチレングリコール（分子量：4000）（日
本薬局方品） 0.3 塩化ナトリウム（日本薬局方品） 0.9 ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート
（日本薬局方品） 0.4 メタ重亜硫酸ナトリウム 0.1 メチル−パラベン（日本薬局方品） 0.18 プロピル−パラベン（日本薬局方品）
0.02 注射用蒸留水 100（ml）上記パラベン類、メタ重亜硫酸ナトリウムおよ
び塩化ナトリウムを撹拌しながら80℃で上記の約
半量の蒸留水に溶解し、その溶液を40℃まで冷却
し、本発明の化合物、ポリエチレングリコールお
よびポリオキシエチレンソルビタンモノオレエー
トをその溶液中に溶解し、その溶液に注射用蒸留
水を加えて最終の容量に調製し、適当なフイルタ
ーペーパーを用いて滅菌過することにより滅菌
して注射剤を調製する。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式〔式中、Ｒは低級アルキル基またはシクロアル
キル基を示す〕で表わされるテトラゾリルプロポキシカルボスチ
リル誘導体を有効成分として含有することを特徴
とする血小板凝集抑制剤。