JPS5846243B2 - 血清学的診断試薬用ラテツクスの製造方法 - Google Patents
血清学的診断試薬用ラテツクスの製造方法Info
- Publication number
- JPS5846243B2 JPS5846243B2 JP13104380A JP13104380A JPS5846243B2 JP S5846243 B2 JPS5846243 B2 JP S5846243B2 JP 13104380 A JP13104380 A JP 13104380A JP 13104380 A JP13104380 A JP 13104380A JP S5846243 B2 JPS5846243 B2 JP S5846243B2
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- Japan
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- latex
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- water
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- Macromonomer-Based Addition Polymer (AREA)
- Polymerisation Methods In General (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は免疫血清学的診断試薬に用いるラテックスの製
造方法に関する。
造方法に関する。
ポリスチレンラテックスに抗原又は抗体を感作させ、こ
れを用いて血清中の対応する抗体又は抗原を、ラテック
スの凝集反応として検出する免疫血清学的診断法は、そ
の簡便性と迅速性の故に臨床検査の分野において多くの
種類の抗原又は抗体の検出に拡大適用され今日に至って
いる。
れを用いて血清中の対応する抗体又は抗原を、ラテック
スの凝集反応として検出する免疫血清学的診断法は、そ
の簡便性と迅速性の故に臨床検査の分野において多くの
種類の抗原又は抗体の検出に拡大適用され今日に至って
いる。
この目的に用いられるポリスチレンラテックスは、一般
に粒径が０．０５ないし１ミクロンであり、粒径分布が
狭く粒径の揃ったものが望ましい。
に粒径が０．０５ないし１ミクロンであり、粒径分布が
狭く粒径の揃ったものが望ましい。
このようなラテックスは通常公知の乳化重合の方法を用
いて製造できるとされている。
いて製造できるとされている。
その方法とは、例えば水中にアニオン系、ノニオン系又
はカチオン系の乳化剤の何れか１種又は２種以上を混合
しタモのに、スチレンモノマー及び水溶性ラジカル重合
開始剤等を共存させて、好ましくは酸素を除いた雰囲気
で、適当な温度に適当な時間保つことである。
はカチオン系の乳化剤の何れか１種又は２種以上を混合
しタモのに、スチレンモノマー及び水溶性ラジカル重合
開始剤等を共存させて、好ましくは酸素を除いた雰囲気
で、適当な温度に適当な時間保つことである。
このようにして得られるポリスチレンラテックスにおい
ては、その安定性に寄与する乳化剤の存在形態が重要で
ある。
ては、その安定性に寄与する乳化剤の存在形態が重要で
ある。
一般には、重合の際に用いた乳化剤の一部はポリスチレ
ンラテックス粒子の表面に吸着されており、他はラテッ
クス中に遊離の状態で存在しており、これらの状態の間
には乳化剤のポリスチレンラテックス粒子表面に対する
吸着脱着平衡が成立している。
ンラテックス粒子の表面に吸着されており、他はラテッ
クス中に遊離の状態で存在しており、これらの状態の間
には乳化剤のポリスチレンラテックス粒子表面に対する
吸着脱着平衡が成立している。
このように通常の方法で製造されるポリスチレンラテッ
クスにあっては、乳化剤は安定なラテックスの形成に不
可欠である。
クスにあっては、乳化剤は安定なラテックスの形成に不
可欠である。
しかしながら、遊離の乳化剤は前述の抗原又は抗体によ
るラテックスの凝集反応に対しては不都合な影響を与え
るのである。
るラテックスの凝集反応に対しては不都合な影響を与え
るのである。
すなわち、ラテックス試薬を製造するには、まず前述の
如くポリスチレンラテックスに抗原又は抗体を感作させ
る必要があるが、遊離の乳化剤を含むラテックスを用い
ると、この段階ですでに凝集してしまうことがある。
如くポリスチレンラテックスに抗原又は抗体を感作させ
る必要があるが、遊離の乳化剤を含むラテックスを用い
ると、この段階ですでに凝集してしまうことがある。
次に、抗原又は抗体を感作させたラテックスを用いて、
この抗原又は抗体に対応する抗体又は抗原をラテックス
の凝集反応によって検出する際には、検出されるべき抗
体又は抗原を含む血清（陽性血清）と接触すれば感作ラ
テツクスは凝集し、かかる抗体又は抗原を含まない血清
（陰性血清）と接触しても感作ラテツクスは凝集しない
ことが必須要件である。
この抗原又は抗体に対応する抗体又は抗原をラテックス
の凝集反応によって検出する際には、検出されるべき抗
体又は抗原を含む血清（陽性血清）と接触すれば感作ラ
テツクスは凝集し、かかる抗体又は抗原を含まない血清
（陰性血清）と接触しても感作ラテツクスは凝集しない
ことが必須要件である。
しかし、遊離の乳化剤を含む感作ラテツクスの場合には
陰性血清と接触しても凝集してしまい非特異的な凝集反
応となることがはなはだ多いのである。
陰性血清と接触しても凝集してしまい非特異的な凝集反
応となることがはなはだ多いのである。
勿論、ラテックスに含まれる遊離の乳化剤は、例えばイ
オン交換法や透析法＊＊の技術を用いて除くことは可能
である。
オン交換法や透析法＊＊の技術を用いて除くことは可能
である。
しかし、遊離の乳化剤をラテックスから除いてしまった
場合、前述の如く遊離の乳化剤との間の吸着脱着平衡の
成立によってラテックスが安定化されているために、ラ
テックスの安定性は極端にわるくなり、実際上は使用不
可能となってしまうのである。
場合、前述の如く遊離の乳化剤との間の吸着脱着平衡の
成立によってラテックスが安定化されているために、ラ
テックスの安定性は極端にわるくなり、実際上は使用不
可能となってしまうのである。
蒸上の如く、免疫血清学的診断試薬に用いるラテックス
としては、通常の乳化重合法で製造したポリスチレンラ
テックスは遊離の乳化剤を含む点において実用上大きな
難点を有しているのである。
としては、通常の乳化重合法で製造したポリスチレンラ
テックスは遊離の乳化剤を含む点において実用上大きな
難点を有しているのである。
本発明は上記の如き欠点のない免疫血清学的診断試薬と
して用いられるラテックスを提供することを目的として
鋭意研究せる結果なされたものであり、その要旨は、ス
チレンと一般式 （上式中Ｒ１はＨ又はＣＨ３，Ｒ２はＨ又はＣＨ３であ
り、ｘ、ｙ、ｚはそれぞれＯ又は１００以下の整数であ
って１≦ｘ ＋ ｙ ＋ ｚ≦１００の関係にある）で
表わされる化合物とスチレンスルホン酸の塩とを無水珪
酸の超微粒子の存在下に水溶性ラジカル開始剤を用いて
水中で共重合させることを特徴とする血清学的診断試薬
用ラテックスの製造方法に存する。
して用いられるラテックスを提供することを目的として
鋭意研究せる結果なされたものであり、その要旨は、ス
チレンと一般式 （上式中Ｒ１はＨ又はＣＨ３，Ｒ２はＨ又はＣＨ３であ
り、ｘ、ｙ、ｚはそれぞれＯ又は１００以下の整数であ
って１≦ｘ ＋ ｙ ＋ ｚ≦１００の関係にある）で
表わされる化合物とスチレンスルホン酸の塩とを無水珪
酸の超微粒子の存在下に水溶性ラジカル開始剤を用いて
水中で共重合させることを特徴とする血清学的診断試薬
用ラテックスの製造方法に存する。
本発明に用いられる前記一般式で表わされる化合物とし
ては などが好適な例としてあげられる。
ては などが好適な例としてあげられる。
これらの化合物のスチレンモノマーに対する使用割合は
０．１ないし７０重量φであるが、好ましくは１ないし
５０重量φ、より好ましくは３ないし３０重量最多ある
。
０．１ないし７０重量φであるが、好ましくは１ないし
５０重量φ、より好ましくは３ないし３０重量最多ある
。
また、本発明に用いるスチレンスルホン酸の塩としては
、スチレンスルホン酸ソーダ、スチレンスルホン酸カリ
ウム、スチレンスルホン酸リチウム、スチレンスルホン
酸アンモニウム等があげられ、これらの化合物のスチレ
ンモノマーに対する使用割合は１０重量幅がよいが、さ
らに好ましくは０．０００１から１０重量最多とりわけ
好ましくは０．００１から５重量係である。
、スチレンスルホン酸ソーダ、スチレンスルホン酸カリ
ウム、スチレンスルホン酸リチウム、スチレンスルホン
酸アンモニウム等があげられ、これらの化合物のスチレ
ンモノマーに対する使用割合は１０重量幅がよいが、さ
らに好ましくは０．０００１から１０重量最多とりわけ
好ましくは０．００１から５重量係である。
又、本発明における無水珪酸の超微粒子としては、粒径
が５〜５０ｍμ程度の超微粒子になされた無水珪酸が用
いられ、例えばアエロジル（商品名、日本アエロジル（
株）社製）が好適に用いられる。
が５〜５０ｍμ程度の超微粒子になされた無水珪酸が用
いられ、例えばアエロジル（商品名、日本アエロジル（
株）社製）が好適に用いられる。
また、該超微粒子無水珪酸を水中に分散させたコロイド
溶液、例えばスノーテックス（商品名、日産化学工業（
株）社製）も好適に用いられる。
溶液、例えばスノーテックス（商品名、日産化学工業（
株）社製）も好適に用いられる。
そしてこの超微粒子状無水珪酸の使用量はスチレンに対
して０．０１〜１０重量多の割最多するのがよいが、０
．０５〜５重量咎とくに０．０８〜２重量係重量るのが
好ましい。
して０．０１〜１０重量多の割最多するのがよいが、０
．０５〜５重量咎とくに０．０８〜２重量係重量るのが
好ましい。
又、上記コロイド溶液として用いる場合は、無水珪酸含
有量が３５重量φ以下、酸化ナトリウム含有量０．６重
量饅以下、粘度が１０センチポイズ以下にしてｐＨ８〜
１０のものを用いるのが好ましい。
有量が３５重量φ以下、酸化ナトリウム含有量０．６重
量饅以下、粘度が１０センチポイズ以下にしてｐＨ８〜
１０のものを用いるのが好ましい。
又、本発明における水溶性ラジカル開始剤としては、過
硫酸カリウム、過硫酸アンモニウム、過硫酸ナトリウム
等の過硫酸塩、２．２’−アゾビス（２−アミジノプロ
パン）鉱酸塩、アブビスシアツブアレリン酸およびその
アルカリ金属塩およびアンモニウム塩等のアゾ化合物、
酒石酸−過酸化水素、ロンガリットー過酸化物、アスコ
ルビン酸−過酸化物等のレドックス系開始剤等があげら
れ、過硫酸塩が好適に用いられる。
硫酸カリウム、過硫酸アンモニウム、過硫酸ナトリウム
等の過硫酸塩、２．２’−アゾビス（２−アミジノプロ
パン）鉱酸塩、アブビスシアツブアレリン酸およびその
アルカリ金属塩およびアンモニウム塩等のアゾ化合物、
酒石酸−過酸化水素、ロンガリットー過酸化物、アスコ
ルビン酸−過酸化物等のレドックス系開始剤等があげら
れ、過硫酸塩が好適に用いられる。
本発明方法によりラテックス製造のための共重合を行う
には、水が仕込まれた反応器内にスチレンモノマー、前
記一般式で表わされる化合物の伺れか１種以上、スチレ
ンスルホン酸の塩、無水珪酸の超微粒子および水溶性ラ
ジカル開始剤を加えて撹拌しながら加熱すればよく、そ
の際の重合反応温度は通常５０ないし１００℃で、好ま
しくは６０ないし８５℃の範囲とするのがよい。
には、水が仕込まれた反応器内にスチレンモノマー、前
記一般式で表わされる化合物の伺れか１種以上、スチレ
ンスルホン酸の塩、無水珪酸の超微粒子および水溶性ラ
ジカル開始剤を加えて撹拌しながら加熱すればよく、そ
の際の重合反応温度は通常５０ないし１００℃で、好ま
しくは６０ないし８５℃の範囲とするのがよい。
また重合反応に要する時間はモノマー組成、モノマー濃
度、開始剤濃度等の条件により変わるが通常５ないし５
０時間の範囲である。
度、開始剤濃度等の条件により変わるが通常５ないし５
０時間の範囲である。
かくして本発明の方法により、平均粒径が０．０５ない
し２ミクロンで、粒径のばらつきが変動係数（粒径の標
準偏差／平均粒径）で表わして０，０５以下である粒径
が非常によく揃った単分散ラテックスが得られる。
し２ミクロンで、粒径のばらつきが変動係数（粒径の標
準偏差／平均粒径）で表わして０，０５以下である粒径
が非常によく揃った単分散ラテックスが得られる。
本発明によって得られるラテックスは、乳化剤が全てラ
テックス粒子に化学的に結合した状態にあり、極めて安
定で粒径は非常によく揃っており、免疫血清学的診断試
薬用ラテックスとして前述の遊離の乳化剤を含むラテッ
クスに見られた欠点が全くなく、この目的に用いられる
ラテックスとしですぐれたものである。
テックス粒子に化学的に結合した状態にあり、極めて安
定で粒径は非常によく揃っており、免疫血清学的診断試
薬用ラテックスとして前述の遊離の乳化剤を含むラテッ
クスに見られた欠点が全くなく、この目的に用いられる
ラテックスとしですぐれたものである。
そして本発明においては、とくに無水珪酸の超微粒子が
スチレン、スチレンスルホン酸塩、前記一般式で表わさ
れる化合物と共に用いられるので、得られるラテックス
は免疫血清学的診断試薬として調整されて該診断に用い
られた際には非常に高い感度を示すのである。
スチレン、スチレンスルホン酸塩、前記一般式で表わさ
れる化合物と共に用いられるので、得られるラテックス
は免疫血清学的診断試薬として調整されて該診断に用い
られた際には非常に高い感度を示すのである。
次に本発明の実施例について説明する。
実施例 １
スチレンモノマー６５ｇ、化学式
％式％
る化合物４．５ｇ、スチレンスルホン酸ソーダ０．５ｇ
１無水珪酸の超微粒子（平均粒径的２０ｍμ）０．０６
ｇを水中に分散させたコロイド溶液０．１８ ｇイオン
交換水４５０ｇを反応容器に仕込み、容器を窒素ガスで
５０分置換し反応温度７０℃で３０時開業重合した。
１無水珪酸の超微粒子（平均粒径的２０ｍμ）０．０６
ｇを水中に分散させたコロイド溶液０．１８ ｇイオン
交換水４５０ｇを反応容器に仕込み、容器を窒素ガスで
５０分置換し反応温度７０℃で３０時開業重合した。
このようにして得られたラテックスの平均粒径は０．４
６９ミクロン、粒径のばら付きは変動係数で表わして０
．０３であった。
６９ミクロン、粒径のばら付きは変動係数で表わして０
．０３であった。
かくして得られたラテックスをｐＨ８°５のグリシン緩
衝液に分散させたラテックス分散液ｌ容に対し、グリシ
ン緩衝液で０．１％に希釈したヒトガンマグロブリン溶
液１容を混合し、３０℃に１５分保った後、２６，０Ｏ
ＯＸＧで遠心分離して未吸着＊＊のヒトガンマグロブリ
ンを除き、沈降したラテックス粒子をグリシン緩衝液に
再分散して均一な感作ラテツクス分散液とした。
衝液に分散させたラテックス分散液ｌ容に対し、グリシ
ン緩衝液で０．１％に希釈したヒトガンマグロブリン溶
液１容を混合し、３０℃に１５分保った後、２６，０Ｏ
ＯＸＧで遠心分離して未吸着＊＊のヒトガンマグロブリ
ンを除き、沈降したラテックス粒子をグリシン緩衝液に
再分散して均一な感作ラテツクス分散液とした。
この１滴とグリシン緩衝液で種々の倍率に求釈したリウ
マチ因子を含む血清１滴とをガラス板上で混合し、３分
間ガラス板をゆるやかに前後左右に傾けて凝集反応の強
さを観察し次表の結果を得た。
マチ因子を含む血清１滴とをガラス板上で混合し、３分
間ガラス板をゆるやかに前後左右に傾けて凝集反応の強
さを観察し次表の結果を得た。
で表わされる化合物１５ｇ、スチレンスルホン酸ソーダ
１ｇ、無水珪酸の超微粒子（平均粒夜釣２ｍμ）０．０
３６ｇを水中に分散させたコロイド溶液０．１．ｐ、過
硫酸カリウム０．０５７．イオン交換水４５１を反応容
器に仕込み容器を窒素ガスで６０分置換し反応温度７５
℃で３５時間共重合し沫米た。
１ｇ、無水珪酸の超微粒子（平均粒夜釣２ｍμ）０．０
３６ｇを水中に分散させたコロイド溶液０．１．ｐ、過
硫酸カリウム０．０５７．イオン交換水４５１を反応容
器に仕込み容器を窒素ガスで６０分置換し反応温度７５
℃で３５時間共重合し沫米た。
このようにして得られたラテックスの平均粒径は０．５
３５ミクロン、粒径の変動係数は０．０３であった。
３５ミクロン、粒径の変動係数は０．０３であった。
このラテックスを用いて実施例１と同じ方法で免疫血清
学的診断試薬を調製し、リウマチ因子を含む血清による
凝集反応の強さを観察し、次表の結果を得た。
学的診断試薬を調製し、リウマチ因子を含む血清による
凝集反応の強さを観察し、次表の結果を得た。
また、リチウム因子を含まない血清を用いて実施例１と
全く同じ試験をした場合、凝集は全く観察されなかった
。
全く同じ試験をした場合、凝集は全く観察されなかった
。
実施例 ３
スチレンモノマー６５ｇ
ＨＣＨ８
１
化学式ＣＨ２＝ Ｃ−ＣＯＯ（ＣＨＣＨ２０） ａｏ
Ｈで表わされる化合物１０ｇ、スチレンスルホン酸ソー
ダ０．５ｇ、無水珪酸の超微粒子（平均ね夜釣３０ｍμ
）０．０７ｇを水中に分散させたコロイド溶液＝０．２
ｇ、過硫酸カリウム０．１ｇ、イオン交換水４５０ｇを
反応容器に仕込み、容器を窒素ガスで６０分置換し、反
応温度８０℃で２０時間共重合した。
Ｈで表わされる化合物１０ｇ、スチレンスルホン酸ソー
ダ０．５ｇ、無水珪酸の超微粒子（平均ね夜釣３０ｍμ
）０．０７ｇを水中に分散させたコロイド溶液＝０．２
ｇ、過硫酸カリウム０．１ｇ、イオン交換水４５０ｇを
反応容器に仕込み、容器を窒素ガスで６０分置換し、反
応温度８０℃で２０時間共重合した。
このようにして得られたラテックスの平均粒径は０．３
８１ミクロン、粒径の変動係数は０．０５であった。
８１ミクロン、粒径の変動係数は０．０５であった。
このラテックスを用いて実施例１と全く同じ方法で免疫
血清学的診断試薬を調製し、リウマチ因子を含む血清に
よる凝集反応の強さを観察し、次表の結果を得た。
血清学的診断試薬を調製し、リウマチ因子を含む血清に
よる凝集反応の強さを観察し、次表の結果を得た。
また、リウマチ因子を含まない血清を用いて実施例１と
全く同じ試験をした場合、凝集は全く観察されなかった
。
全く同じ試験をした場合、凝集は全く観察されなかった
。
比較例
スチレンモノマー９１ｇ、ノニオン乳化剤（第−工業製
薬会社製、商品名エマルジット４９）２ｇ、過硫酸カリ
ウム０．３，９．イオン交換水４４０ｇを反応容器に仕
込み、容器を窒素ガス置換し反応製本中度７０℃で２４
時間重合した。
薬会社製、商品名エマルジット４９）２ｇ、過硫酸カリ
ウム０．３，９．イオン交換水４４０ｇを反応容器に仕
込み、容器を窒素ガス置換し反応製本中度７０℃で２４
時間重合した。
得られたラテックスの平均粒径は０１４８１ミクロン、
粒径の変動係数は０．１５であった。
粒径の変動係数は０．１５であった。
このラテックスを用いて実施例と全く同じ方法で免疫血
清学的診断試薬を調製し、リウマチ因子を含む血清によ
る凝集反応の強さを観察し、次表の結果を得た。
清学的診断試薬を調製し、リウマチ因子を含む血清によ
る凝集反応の強さを観察し、次表の結果を得た。
また正常ヒト血清１，０００例をこのラテックス試薬を
用いて試験したところ９６例の非特異凝集が観察された
。
用いて試験したところ９６例の非特異凝集が観察された
。
これらの結果から明らかなように、本発明の方法によっ
て得られたラテックスを用いて調製した免疫血清学的診
断試薬は感度が高く、かつ非特異的な凝集反応を起こさ
ないすぐれたものである。
て得られたラテックスを用いて調製した免疫血清学的診
断試薬は感度が高く、かつ非特異的な凝集反応を起こさ
ないすぐれたものである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ スチレンと一般式 （上式中Ｒ１はＨ又はＣＨ３，Ｒ２はＨ又はＣＨ３であ
り、Ｘ１ｙｌＺはそれぞれ０又は１００以下の整数であ
って１≦ｘ ＋ ｙ ＋ ｚ≦１００の関係にある）で
表わされる化合物とスチレンスルホン酸の塩とを無水珪
酸の超微粒子の存在下に水溶性ラジカル重合開始剤を用
いて水中で共重合させることを特徴とする血清学的診断
試薬用ラテックスの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13104380A JPS5846243B2 (ja) | 1980-09-19 | 1980-09-19 | 血清学的診断試薬用ラテツクスの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13104380A JPS5846243B2 (ja) | 1980-09-19 | 1980-09-19 | 血清学的診断試薬用ラテツクスの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5755908A JPS5755908A (en) | 1982-04-03 |
| JPS5846243B2 true JPS5846243B2 (ja) | 1983-10-15 |
Family
ID=15048678
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13104380A Expired JPS5846243B2 (ja) | 1980-09-19 | 1980-09-19 | 血清学的診断試薬用ラテツクスの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5846243B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0442892B2 (ja) * | 1986-07-31 | 1992-07-14 | Fujitsu General Ltd |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2124636B (en) * | 1982-07-29 | 1985-08-07 | Ici Plc | Polymerisation process |
| ZA836922B (en) * | 1982-10-01 | 1984-06-27 | Ici Plc | Polymerisation process |
| JPS59217702A (ja) * | 1983-05-24 | 1984-12-07 | Nippon Paint Co Ltd | 水性塗料組成物 |
| US4605686A (en) * | 1984-03-13 | 1986-08-12 | Sekisui Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Latex for immunoserological tests and a method for the production of the same |
| US9371923B2 (en) | 2008-04-04 | 2016-06-21 | Correlated Magnetics Research, Llc | Magnetic valve assembly |
| US9404776B2 (en) | 2009-06-02 | 2016-08-02 | Correlated Magnetics Research, Llc. | System and method for tailoring polarity transitions of magnetic structures |
| US8704626B2 (en) | 2010-05-10 | 2014-04-22 | Correlated Magnetics Research, Llc | System and method for moving an object |
| US9711268B2 (en) | 2009-09-22 | 2017-07-18 | Correlated Magnetics Research, Llc | System and method for tailoring magnetic forces |
| US9245677B2 (en) | 2012-08-06 | 2016-01-26 | Correlated Magnetics Research, Llc. | System for concentrating and controlling magnetic flux of a multi-pole magnetic structure |
-
1980
- 1980-09-19 JP JP13104380A patent/JPS5846243B2/ja not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0442892B2 (ja) * | 1986-07-31 | 1992-07-14 | Fujitsu General Ltd |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5755908A (en) | 1982-04-03 |
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