JPS5840555B2 - アドリアマイシンルイノ セイホウ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアドリアマイシン、そのβ−アノマーα−およ
びβ−アノマーの４′−エピ−アドリアマイシン混合物
およびそれぞれの単一アノマーの新規な化学的合成法お
よびそれにより得られる新規生成物に関する。

アドリアマイシンおよびアドリアマイシノンは本発明者
等による英国特許第１１６１２７８号および同第１２１
７１３３号各明細書中に記載されている。

４′−エピ−アドリアマイシンα−アノマーの化学名は
７−Ｑ −（３’アミノ−２′・３′・６′−トリデオ
キシ−α−Ｌ−アラビノへキンピラノシル）−アドリア
マイシノンである。

４′−エピ−アドリアマイシンβ−アノマーの化学名は
７−Ｑ−（３’−アミノ−２′・３′・６′〜トリデオ
キシ−β−Ｌ−アラビノへキンピラノシル）−アドリア
マイシノンである。

本発明の方法は側鎖の第１級水酸基を閉塞したアドリア
マイシノンの保護誘導体を製造し、この保護されたアド
リアマイシノンをノ・ロゲン置換されたダウノサミンあ
るいは４′−エピダウノサミンと縮合させてグリコシド
結合を生成し、糖残基の保護基を除去しついで側鎖保護
基を除去して遊離グリコシドを得ることからなる。

より詳細には、アドリアマイシノン（これも英国特許第
１１６１２７８号明細書に記載されている）を酸の存在
下でジメトキシプロパンと反応せしめてジオキンラン誘
導体■を良好な収率で得るのが好ましい。

アドリアマイシノンそれ自体の代わりにアドリアマイシ
ノンの低級（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルエステルを使用して
もよいし、またジメトキシプロパンは同様に置換された
高級アルカン（Ｃ８までで鎖状あるいは環状、飽和ある
いは不飽和であってよい）で置き換えてもよい。

化合物■は置換ヘキソースＩＩ［ａあるいはｍｂ、たと
えばＬ−リキソあるいはＬ−アラビノ構造を有する１−
クロロ−２・３・６−ドリデオキシー３−トリフルオロ
アセトアミド−４−トリフルオロアセトキシーヘキンピ
ラノースと一緒に使用されて、第２水銀化合物触媒（た
とえば臭化第２水銀）および塩化水素受容体（たとえば
酸化第２水銀）および脱水剤（モレキュラーシーブ）の
存在下でケーニツヒスークノル縮合してグリコシドＩＶ
ａあるいはＩＶｂになる。

これらの保護されたグリコシドからＶａあるいはｖｂが
２工程（すなわち希アルカリでＮ−）リフルオロアセチ
ル基を除去する第１工程および希酸で側鎖環状ケタール
を加水分解する第２工程）で得られる。

縮合反応（第２工程）中でβ−グリコシド類似体（アナ
ヨーグ）もまた生、成され、したがって最終生成物Ｖａ
およびｖｂはアグリコン残基およびグリコシド酸素原子
（ＯＲとして示される）がＶｉａおよび■ｂにおいて示
されるような赤道配向を有するβ−類似体と共に得られ
る。

上記のβ−類似体は生物学的作用を有しそしてα−およ
びβ−グリコシドの分離はたとえば分別晶出および／ま
たはクロマトグラフィーにより容易に行なうことができ
る。

本発明方法により得られるアドリアマイシノングリコシ
ドのそれぞれの化学構造は次のとおりである。

アドリアマイシン そのβ アノマー ４′−エピ−アドリアマイシン およびそのβ アノマー 次に本発明を実施例により説明する。

実施例 １ ジオキサン（’１０ＷＬｌ）およびクロロホルム（２０
０ｒＩｌｌ）中におけるアドリアマイシノン（１ｙ）を
ジメトキシプロパン（８０ｄ）およびｐ−トルエンスル
ホン酸（０，１７ｆ）で処理スる。

混合物を室温で２４時間放置する。

ついで炭酸水素ナトリウム（０，３４Ｐ）を加え、混合
物を５分間攪拌する。

有機層を繰り返し水で抽出して中性にし、無水硫酸ナト
リウム上で乾燥させ、ろ過しそして減圧下で蒸発させる
。

残留物を珪酸カラムの頂上に置き、そしてクロロホルム
−アセトンＣＩＯ：１（容量）〕の溶媒系を使用して溶
離させる。

分析薄層クロマトグラフィーにより同定される主要反応
生成物（シリカゲルプレートおよび上記溶媒系を使用し
てＲｆ＝０．３８）は９．−Ｔ−デスアセチル−９−（
２’・２′−ジメチル−４′−メトキシ−４′−ジオキ
ンラニル）−ダウノマイシノン（ＩＩ）エピマーの混合
物である。

化合物■は以下のＮＭＲｌＩＲおよび質量スペクトルを
有する。

ＮＭＲ（ＣＤＣｌ２）： １．４８ｅ１．６５（２ｆ固のｓ、 ｇｅｍ、
ＣＨ３）３．４７ （ｓ、、ＣＨ３０’Ｃ（１３） ）
４．０ ４．６ （ｍ、 Ｃ（１４） Ｒ２）１３．０
２ ｅ １３．７１ （２ｍのｓ、Ｃ−６およびＣ−１
１においてキレート化された０Ｈ）ＩＲ（ＫＢｒ）： １７２５ｃｗｌ−１においてアドリアマイシノンを代表
するカルボニル吸収は存在しない ＭＳ（ＤＩＳ）： ４８６ ｍ／ ｅ （Ｍ＋） ４５４ 〃 （Ｍ−３２＝Ｍ−ＣＨ３０Ｈ）４５０
〃 （Ｍ−３６−Ｍ−２Ｈ２０）４３８ 〃 （Ｍ−
５８＝Ｍ−Ｃ）（３ＣＯＣＨ３）１３１ 〃 置換ジオ
キンラニル メチレンジクロライド（３ｒＩＬｌ）における■（４０
１ｎ９）の溶液を酸化第２水銀（８０１ｎ９）、臭化第
２水銀（２０■）およびモレキュラーシーブ（３Ａ、メ
ルク）で処理する。

室温で１時間攪拌後置換ヘキンース■ａ （４０１１１
９）を加える。

２時間攪拌後さらにＩＩＩ ａ （４０■）を加える。

６時間攪拌後クロロホルム（２０ｍｌ）を加え、その懸
濁液をろ過する。

澄明溶液を減圧下で蒸発させる。残留物を０．ＩＮ水酸
化ナトリウム（１５ｒｆＬｌ）中に溶解する。

室温で３０分放置後水性溶液のｐＨを０．ＩＮ塩酸で８
．４に調整する。

この水性溶液をクロロホルムで繰り返し抽出する。

溶媒抽出液を一緒にし、これを無水硫酸ナトリウム上で
乾燥させ、ろ過しついで蒸発させる。

残留物を０．ＩＮ塩酸水溶液（２０ｒｄ）と共に溶液中
に入れ、室温で２４時間放置する。

特量のクロロホルムを加えそして攪拌しながらｐＨを０
．ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液で８．４に上げる。

アドリアマイシン（Ｖａ ）および第２成分〔アドリア
マイシンＶＩａのβ−アノマーＰｒｅｌｏｇ Ｅｘｐｅ
ｒｉｅｎｔｉａ （１９５６）第１２巻、第８１頁の
命名法により１’−（Ｓ）−アドリアマイシンとも称さ
れる〕により代表される最終生成物はクロロホルム相中
に回収される（全収率８０％）。

溶液を蒸発させて０．５ ｗＬｌにし、ついで１滴の希
メタノール性塩化水素を添加して主要成分（Ｖａ、アド
リアマイシン）の結晶性塩酸塩を得る。

ｍ、ｐ、２５０℃（分解）、Ｒｆ−０，４５ｏアドリア
マイシンβ−アノマー（ＶＩａ ） ： Ｒ４＝０．３
５゜これらのＲｆ値はＭ／１５ホスフェート緩衝液でｐ
Ｈ７に緩衝されたシリカゲルプレート上のＴＬＣにより
決定された。

溶媒系はクロロホルム／メタノール／＊（容量比１３／
６／１）であった。

実１リ ２ メチレンジクロライド（３５ｒＬｌ）中における■（０
，７ＳＦ）（実施例１のように製造された）の溶液を酸
化第２水銀（１，４ｆＩ）、臭化第２水銀（０，３５０
５？）および脱水剤としての過剰のモレキュラーシーブ
（３Ａ１メルク）で処理する。

混合物を室温で攪拌し、そして１時間後および３時間後
のそれぞれに置換ヘキソースｍｂ（それぞれ０．３５５
’）の２回の添加を行なう。

１夜攪拌を続ける。

クロロホルム（５０ｒｎＪ）を加える。反応混合物をろ
過して生ずる溶液を真空下で蒸発させ、残留物を０．Ｉ
Ｎ水酸化ナトリウム（５０ｒＩＬｌ）およびアセトン（
１０ＷＬｌ）中に溶解させる。

室温で３０分放置後そのｐＨを希塩酸水溶液で８．４に
調整する。

溶液をクロロホルムで繰り返し抽出する。抽出液を一緒
にしこれを無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過しつい
で真空下で蒸発させる。

残留物を０．ＩＮ塩酸水溶液（５０ＷＬｌ）中に入れ、
室温で３６時間放置する。

この酸溶液をクロロホルムでの抽出により洗浄しく痕跡
量のアグリコンを除去するため）、ついで攪拌しながら
クロロホルム（５０ｒｒＬ０の存在下で０．ＩＮ水酸化
ナトリウム水溶液を徐々に加えることによりｐＨ８，６
にする。

有機相を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させついで
濃縮して１０ｒｒＬｌにする。

メタノール性塩化水素を注意深く添加すると赤色沈殿が
得られ、これを集め、ジエチルエーテルで洗浄しついで
乾燥させる。

生成物（２２０Ｉｎ９）は７０： ３０の割合でのαグ
リコシドとβグリコシドとの混合物としての４′−エピ
アドリアマイシン塩酸塩である。

［ｃｃ）’ｐ”＋２５８° （Ｃは２０％の０．ＩＮ塩
酸水溶液を含有するメタノール中において０．０５であ
る）。

あるいはまた、遊離のα−およびβ−アノマーグリコシ
ド塩基の混合物が最初に珪酸カラム上でのクロマトグラ
フィーにより分離され′、そしてつづいてメタノール性
塩化水素の添加によりそれらそれぞれの塩酸塩として純
粋な形で単離された。

４′−エピ−アドリアマイシン塩酸塩α−アノマー：ｍ
、ｐ、１８５℃（分解）、〔α〕■−十２７４゜（ｃ＝
０．０１．メタノール）、ｐＨ７（０，０６７Ｍホスフ
ェート）で緩衝されたシリカゲルプレート上のＴＬＣＲ
ｆ＝０．５５゜ ４′−エピ−アドリアマイシン塩酸塩β−アノマー：ｍ
、ｐ、１９０〜１９３℃（分解）、ｃ ａ 〕ｇ＝＋２
９０° （ｃ＝０．０１、メタノール）、ｐＨ７★★（
０，０６７Ｍホスフェート）で緩衝されたシリカゲルプ
レート上のＴＬＣＲｆ＝ ０．４３゜両者の化合物に対
してＴＬＣ溶媒系はクロロホルム／メタノール／水（容
量比１３０：６０：１０）であった。

以下の抑制帯がペーパーディスク法により寒天−バチル
スズブチリス板上に得られた（ｒ／１７１Ｌにおける直
径が与えられる。

化合物は塩酸塩として分析された。

４′−エピ−アドリアマイシン（７０：３０のαアノマ
ーとβ−アノマーとの混合物あるいはαアノマー）の生
物学的作用がアドリアマイシンとの比較において試験管
内試験でマウスにおけるいくつかの移植腫瘍に関して評
価された。

結果は以下の表に示されている。

腹水症肉腫１８０ ※ ※ これらの試験は１０匹のマウス（スイスＣＤＩ）の
群に関して行なわれた。

１匹の動物当たり１×１０６個の腫瘍細胞を腹腔内経路
により接種した翌日試験化合物を動物の腹腔内に投与し
た。

対照（＝１００）との比較における平均生存時間のパー
センテージおよび長期生存数が表１に示されている。

移植されたグロス白血病 同系交配したＣ３Ｈ／Ｈｅマウスに静脈内経路によりマ
ウス１匹当り２．５ｘｘｏ’Ｍ固の白血病細胞を接種し
、これを接種から第１日日から第５日★★目までにおい
て静脈内に試験化合物で処理した。

対照（＝ｉｏｏ）との比較における平均生存時間のパー
センテージおよび長期生存数が表２に示されている。

Ｌ、２．。

白血病同系交配したＢＤＦ、マウスにマウス１匹当り１
０５個の白血病細胞を腹腔的接種し、これらを腫瘍移植
後第１日および第２日にわたり５回（２＊＊時間毎）試
験化合物で腹腔肉処理した。

対照（−； １００）との比較における平均生存時間
のパーセンテージおよび長期生存数が表３に示されてい
る。

充実性肉腫１８０ スイスＣＤ Ｉ系マウスに新生物組織の断片を皮下経路
で移植し、これらを種々のスケジュールにしたがって静
脈内において処置した。

腫瘍生長は＊＊腫腫瘍移植後１口 評価された。

対照（＝１００）との比較における腫瘍生長抑制および
平均生存時間のパーセンテージに関する結果は表４に示
されている。

モロネイ肉腫ビールス（ＭＳＶ） による病巣形成に
ついての試験管内試験 化合物はＭＳＶで感染されたあるいは感染されないマウ
スの胚線維芽細胞培養上で試験された。

３日間の処置後抑制投与量（ ＩＤ５０ ）が未感染培
養中の細胞増殖（細胞毒性作用）および感染培養中にお
けるＭＳＶ病巣形成に関して検討された。

結果は表５に示されている。

ＭＳＶ生産における作用 ＭＳＶ感染培養を３日間処置し、そしてビールス収量を
白血病ビールスの存在下での病巣分析により細胞および
上澄液媒体中において測定した。

結果は表６に示されている。

表中ｒ ＦＦＵ／ｗＬｌＪはａ当りの病巣形成数であっ
てＭＳＶ感染された培地上に対する試験化合物の作用を
示す。

★ＨｅＬａ 細
胞の分枝系効率に対する試験管内試験２時間、８時間あ
るいは２４時間処置後ＨｅＬａ細胞を植えつげ（１プレ
ート当り２００個の細胞）そしてコロニーの数を８日後
に読み取った。

■Ｄ５ｏは５０％のコロニー抑制を与える投与量を表わ
す。

得られた結果は表７および表８に示されている。

心臓毒作用についての試験管内試験 心臓毒作用がＢＡＬＢ／ｃあるいはＣＤ Ｉ新生マウス
の心筋層細胞に関して試験管内で試験された。

（ＩＲＣ８第２巻第１２９３頁（１９７４）基間）。

アドリアマイシンはＯ１５μり／ｗＬｌの投与量で２時
間後に５０％の搏動減少を生ずる。

５μｆ／ｍｌの投与量まで４′−エピ−アドリアマイシ
ン（α＋βアノマー）は搏動速度を変えなかった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 構造式 （式中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は同じかあるいは異なってそれ
   ぞれ水素、１〜４個の炭素原子を有する低級アルキル基
   であり、あるいはＲ２とＲ３は飽和あるいは不飽和の環
   を表わすことができる）で表わされるアドリアマイシノ
   ン誘導体をＬ−ワキンあるいはＬ−アラビノ構造を有す
   る１−クロロ−２・３・６−ドリデオキシー３−トリフ
   ルオロアセトアミド−４−トリフルオロアセトキシヘキ
   ンピラノースと反応させ、そして生成されたグリコシド
   中の保護基を除去することを特徴とする、アドリアマイ
   シン、そのβ−アノマー、４′−エピ−アドリアマイシ
   ンおよびそのβ−アノマーからなる群より選択されるア
   ドリアマイシノングリコシドの製法。