JPS5823627A - 抗コクシジウム剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、抗生物質ｑｔ−ｉｉ物質を有効成分として含
有することを特徴とする抗コクシジウム剤に関するもの
である。

コクシジウム症は、エイメリア（Ｅｉｍｅｒｉａ　）属
の原生動物の感染によって起こる病気であり、家禽類に
、下痢及び栄養障害を起こさせて、ついには死に至らし
める伝染病である。

この原虫の一世代であるオーシス）　（０ｏｃｙｓｔ　
）は、家禽類の糞と共に排泄され、胞子形成を行い、次
々と伝染する。これらの種の内、特に有名なものは、エ
イメリア−テネラ（Ｅ、ｔ・ｎｅｌｌａ　）、エイメリ
ア−アケルブルナ（Ｅ、ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ　）、エ
イメリア響ネカトリクス（Ｅ、ｎｅｃａｔｒｌｘ　）、
エイメリア・ブルネツチ（Ｅ、ｂｒｕｎｅｔｔｉ）及び
エイメリア・マキシマ（Ｅ、ｍａｘｌｍａ　）等である
。これらの感染を受けたものは、その市場的価値が極め
て低゛下する。

従って、コクシジウム症を予防することは、産業上極め
て重要なことである。

そのため、従来から多くの予防治療剤が提案され、又広
範な研究がなされている。例えば、ヒ素剤、ニトロフラ
ン剤、ビスフェノール剤、サルファ剤、サイアジン誘導
体、キノリン誘導体、ピリジン誘導体、グアニジン等が
提案ざ、もているが、いずれもその効果は充分ではなく
、又これらに対して、耐性分有する原虫が出現しており
、祈念な有効薬剤の出現が待たれている。

そこで、本発明者らは、上記の趣旨に鑑み、家禽類のコ
クシジウム症に対して有効な薬剤につき鋭意開発研究を
行った結果、ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｌａ　）属に
属する微生物を培養して得られる新規抗生物質７１．−
／／動物質以下、ｒ７Ａ−／／動物質と称する。）が、
家禽類のコクシジウム症に対して極めて有効であること
を見出し、本発明の抗コクシジウム剤を完成するに至っ
たものである。

以下に本発明を詳述する。

本発明の有効成分である７乙−／／動物質、本発明者ら
によってはじめて開発された新規抗生物質であり、その
製造法及び理化学的性質について以下に説明する。

まず、前記ｑｔ−ｉｉ物質生産能を有する微生物は、ノ
カルディア属に属する新菌種であり、例えば、ノカルデ
ィア・エスピー・７Ａ−／／（Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｓｐ
、７　Ａ　−／　／　）　（以下、「７１．−１７株」
と称する。）と称される微生物が前記の特性分有する新
菌株として７乙−／／動物質有利に生産することができ
る。

又、前記ｑｔ−ｉｉ株の自然的及び人工的変異株は勿論
、ノカルディア属に属する菌種で、７１、−／／物質生
産能を有する微生物は、すべて使用することができる。

前占己７乙−／／株は、島根県益田市の土壌試料中より
分離された微生物であって、工業技術院微生物工業技術
研究所に昭和、！−３年ｇ月２７日に寄託され、その微
生物受託番号は微工研菌寄第３Ａｔｇ号である。７１．
−１／株は次の菌学的性質を有する。

り乙−１７株の各種培地上の性質は特許庁産業別審査基
準に従って各種の培地を調製し、２０〜３０日後に殻察
した。又以下の色調の記載に於て０内の記号はディスク
リグチイブ・カラー・ネーム・ディクショナリー（Ｄ、
Ｃ，Ｎ、Ｄ　）の色名記号に従った。

り形態的特徴 ７１、−１７株は、オートミール寒天培地、マルトエキ
ス・イーストエキス寒天培地上に生育するが他の培地上
に於ては生育しないか、又は生育が極めて悪いので、オ
ートミール寒天培地、マルトエキス・イーストエキス寒
天培地及びオートミール３チの液体培地上の形態１に観
察した。

その結果は次の通りである。

／）基生菌糸 基生菌糸は寒天培地上及び液体培地上によく伸長し分岐
する。長期間培養すると分断し、楕円形の胞子を形成す
る。その大きさはｏ、ｇ〜７．２μ×７．５〜７．７μ
である。

気菌糸は各種培地上に於て形成しない力；、オートミー
ル寒天培地上に於て３３℃２０日間以上培養すると白色
の気菌糸を薄く形成する事があるが屈曲し、紐状又は束
状で分岐は少く胞子の形成は見られない。

２）気菌糸 各種培地上に着生しないか僅かに、オートミール培地上
に於て３０日以上培養すると着生する場合がある。その
気菌糸の状態は不規則に屈曲し、電子顕微鏡下において
も胞子の形成は観察されない。

Ｉ）菌体組成 本菌株をグルコース／Ｌ％、イーストエキストラクトフ
チ、オートミールθ、７％の培地で３３℃７日間振盪培
養し菌体を集め洗浄し、菌体組成の分析の資料とし、ジ
アミノビメ１ノン酸及び糖組成を検討した。前者に於て
はメソ体のノアミノピメリン酸が後者に於てはガラクト
ースの存在が認められた。

璽）各種培地上の性質 ／）シュークロース硝酸塩寒天培地 生育：極めて悪く、３０日後の観察に於て、生育が見ら
れる。透明、表面の色は明るい／」・変色＜　、ｚ　ｅ
ａ　＞である。裏面の色は明るい象牙色（コｃａ　）で
ある。

気菌第二着生しない。

可溶性色素：生成しない。

２）グルコース・アスパラギン寒天培地生育しない。

３）グリセリン争アスパラギン寒天培地生育しない。

リ　無機塩拳澱粉寒天培地 生育：極めて悪く、３０日後の観察に於てわずかに生育
がみとめられる。明るい黄褐色（３ｉｅ　）、で裏面の
色は黄褐色（３ｉｅ）を呈する。　　　　− 気菌糸：着生しない。

可溶性色素：生成しない。

３）チロシン寒天培地 生育：極めて悪く淡い黄色（３Ｃａ　）ｔ−呈する。

裏面の色は明るい象牙色（，２ｃａ）である。

気鉋糸：着生しない。

乙）栄養寒天培地 生育：極めて悪く、３０日後の観察で明るい象牙色を呈
する。裏面の色は明るい象牙色（２ｃａ　）を呈する。

気菌第二着生しない。

可溶性色素：主成しない。

７）イースト・エキストラクト・マルトエキストラクト
轢天培地 生育：良好、表面にしわのある硬い被膜状の生育ケし、
表面の色は淡褐色（，２ｎｅ）時に青み（＃）ｔｅｎお
びてくる。裏面の色は淡褐色（，２ｎｅ）、時に青み（
１０１ｅ）ｉ帯びてくる。

気菌糸：形成しないが時に長期間培養すると備かに白色
の気菌糸が形成される事がある。

可溶性色素：生成しない。

ｇ）オートミール寒天培地 生育：良好で表面平滑、被膜状の生育が見られ、表面の
色は青藍色（／θｉｅ　）裏面の色は白色會経て青藍色
（／　Ｏｎｅ　）となる。

気菌糸＝３θ日後の観察に於て、時に白色の気菌糸會生
戊する。

可溶性色素−生成しない。

９）−１！ニア’トン・イースト・鉄寒天培地生育：生
肯しない。

１０）脱脂粉乳（３７℃） 生育：生育遅く、凝固、−！′グトン化する。

／／）グルコース　ペプトン０ゼラチン培地（，２０℃
） 生育；極めておそく液化かみられる。

璽）生理的性質 ／）　生育温度＝２７℃〜３７°Ｃに旦って生育するが
３３℃〜３７℃に於て最も良好な生Ｗ〃（見られる。

、２）ゼラチンの液化：液化する。

３）澱粉分解カニ分解しない。

帽　脱脂粉乳；凝固する。ペプトン化弱い。

５）メラニン様色素の生成：生成しない。

６）抗酸性：抗酸性−である。

■）各種炭素源の利用性 プリダノ・ム糖試験培地（ディフコ製）に各種の糖ケ添
カルて７乙−７７株を培養した〃工いづれの培地におい
ても生育が見られなかったのでプリダノ・ム糖試験培地
に酵母エキス０．／Ｓｋ添加して試験した。その結果を
次に示す。

Ｌ−アラビノース　　　　　　　　刊＋Ｄ−キシロース
　　　　　　　　旧÷ Ｄ−グルコース　　　　　　　　　＋ＨＤ−フラクトー
ス　　　　　　　刊→ シュークロース　　　　　　　　Ｈ ｌ−１ノシトール　　　　　　　妊 し−ラムノース　　　　　　　　刊＋ ラフィノース　　　　　　　　　　せ マンニトール　　　　　　　　　什什 無際加　　　　　　　　　　　　　士 什什：非常によ〈生育する。

←；よく生育する。

−）＋：生冑する。

±　：対照。

〈７乙−７７株の特徴〉 上記の如＜７Ａ−７７株の菌株の特徴は次の通りである
。

／）形態　り乙−７７株は、気菌糸を通常形成しないが
、長期間培養する事により僅かに形成する。基生菌糸は
屈曲し、培養稜期に断裂し、楕円形の細胞を形成する。

菌糸にダラム陽性、抗酸性がある。

刀　各種培地上の性質 特許庁産業別審査基準にもとずく各糧培地上に於て、オ
ートミール寒天培地、イーストエキストラクト・マルト
エキストラクト・寒天培地以外の寒天培地上における生
育は極めて悪いか全く生育しない。

本菌はオートミール寒天培地上において最もその特性を
よく示し、培養３〜ｌＩ週間で青藍色の水に不浴性の函
体内色素ケ形成する。

３）生理的性質 ３３℃より３７℃でよく生育し、ゼラチン液化は弱く脱
脂乳の凝固、ベゾトン化陽性である。メラニン色素は生
成しない。

ｌｌ）糖の利用性 ｆ　ＩＪダハムの糖試験培地にイーストエキス０、／Ｓ
ｋ添加して試験した結果、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシ
ロース、Ｄ−グルコース、Ｄ−フラクトース、シューク
ロース、Ｉ−イノシトール、Ｌ−ラムノース、ラフィノ
ース、マンニトールの何れもよく利用した。

上記の如＜７７、−７７株は胞子及び送糸の形態的％徴
、各種培地上の生育の特性及び細胞壁構成成分より放線
菌ノカルディア属に−する菌種であると考えられる。し
かしながら、ワックスマン著デ・アクチノミセス＜／９
Ａ／）及びデターミネイティブ・パクテリオロジイ第ｇ
版に記載きれているノカルディア属に属する菌種の諸性
質と７１．−７７株のそれとを照合すると、７１、−７
７株の如く、オートミール培地上に於て青紫色の菌体内
色素を生産する菌種は記載されていない。そこで７６−
７７株はノカルディア属に属する一新菌褌であると結論
した。

次に、７Ａ−／／物ＩＪｋを生産するに当っては、新仇
生物質７１．−／／物質生産菌全、抗生物質を生産する
通常の方法で培養することができる。

培養の形態は、液体培養でも固体培養でもよく、工業的
に有利に培養するためには、前記生産菌の培養的体又は
培養液を培地に接種し、通気攪拌培養を行えばよい。

培地の栄養源としては特に限定されることはなく、微生
物の培養に通常用いられる炭素源、窒素源その他を培地
中に含有させることができる。炭素源としては、澱粉、
デキストリン、グリセリン、グルコース、シュークロー
ス、ガラクトース、イノシトール、マンニトールなどが
、また窒素源としてはオートミール、酵母、ペプトン、
大豆粉、肉エキス、米ぬか、皺、尿素、コーンステイー
プリカー、アンモニウム塩、硝酸塩、その他の有機また
は無機の屋素化合物が用いられる。その他、無機塩類、
たとえば、食塩、燐酸塩類、カリウム、カルシウム、亜
鉛、マンガン、鉄等の金属塩類等を適宜に添加して本よ
く、必要に応じて消泡剤として、動、植、鉱物油等？添
加してもよい。培養温度、培養時間等の培養条件は使用
菌の発育に適し、しかもｑｂ−ｉｉ物質の生産が最高と
なるような条件が選ばれる。たとえば培地のｐＨは１Ｉ
−９、特に中性付近がよく、培養の適温はａ！−３’ｓ
℃程度がよい。

しかし、これらの培養組成物、培地の水素イオン濃度、
培養温度、攪拌条件などの培養条件は使用する菌株の種
類や、外部の条件などに応じて好ましい結果が得られる
ように適宜調如されるべきであることはいうまでもない
。このよう・にして得られる培養物から、７乙−／／動
物質得るには代謝産物を採取するのに通常用いられる手
段ケ適宜に利用して採取し得る。たとえば、７６−／／
動物質不純物との溶解度差を利用する手段、吸着親和力
の差を利用する手段のいずれも、それぞれ単独で、また
は組合わせて、あるいは反復して使用される。具体的に
は、７Ａ−／／動物質培養Ｐ液及び菌体に存在するが、
その有機溶剤への溶解性の性質全利用して酢酸エチル、
酢酸ブチル、クロロホルム、ブタノールなどを用いて培
養炉液より抽出することができる。菌体は含水アセトン
又は含水メタノールで抽出し減圧下に有機溶剤を留去し
、残った水溶液より酢酸エチルその他を用いて抽出する
ことができる。両袖出液を合せ減圧下に濃縮すると、７
１．−／／動物質粗抽出物が得られる。

このものは多量の不純物を含んでいるので、シリカゲル
、アルミナ等の吸着クロマトグラフィーに付して、更に
精製する。例えば、シリカゲルのカラムケベンゼンで調
製しておき、これに前記粗抽出物を少量のベンゼンに浴
力・したものを流し込む。引き続きベンゼンで次いでベ
ンゼン−酢酸エチルの混合溶剤を用いて、順次酢酸エチ
ルの含量を上げながら展開溶出を行う。溶出液全フラク
ションコレクターにて一定量づつ分取する。生物活性を
示すフラクション？集めて濃縮すると精製粉末が得られ
る。更に精製を行うために、同様のシリカダルクロマト
グラフィーｉ＜ｂ返して行う。更に必要に応じ調製用薄
層クロマトグラフィーによって鞘裏會行う。

減圧濃縮により精製物を得、これをメタノールの少量に
溶解し、冷蔵することにより７６−／／動物質無色の結
晶として析出する。これをｐ取乾珠することによって７
乙−／／動物質純品を得ることができる。

かくして得られた７６−／／動物質理化学的性質及び生
物学的性状は次のとおりである。

〔’／ｌ、−／／物質の理化学的性質及び生物学的性状〕

（１１元素分析値 遊離酸 炭素　６゛コ、６／チ 水素　　ざ、２．７Ｔ。

窒素　　　　　０− Ｎａ塩 炭素　１，０　、３７％ 水素　　ざ、ｏｔｉチ 窒素　　　　　θ慢 （２）　　分子量 ｇｌ１３　（滴定車量による） ｇ’７．７（Ｆｏマススペクトルによる）（３）　　融
点 遊離酸　１０ｇ−／／２゜ Ｎａ　塩　２／θ−，２／２°（分解）（４（比施光度 〔α）Ｖ　＋３乙、乙０（Ｃ＝０．３ｇ２．クロロホル
ム）（５）　　紫外線吸収スペクトル：極大値メタノー
ル及び塩酸々性メタノール中；λｍａｘ　＝　２／　？
ｍμ（Ｅ’％３０３）／ｌ ／チ ２６２ｍμ（Ｅ、。７ｇ２） ３０！ｍμ（Ｅ／／二乙ｇ） アルカリ性メタノール中： λｍａｘ　＝　、）ｌ、Ｑｒｎμ＜Ｅ’、：、ｇ７）（
６）　　赤外線吸収スペクトル（Ｊｌ、化カリ錠剤中の
主な極大値） 遊離酸：　３’１３θ、２９乙０、／７２０、／６ダ０
．１６１０、／！；’Ｉｇ。

／１ＩＩＩ乙、／３ｇｏ、／３／左、 ／２９コ、／：１３０、／２０９、 ／／Ｓ／、／／θ０．１０３５． ９７！；、９グ０ 偏−１ Ｎａ　　塩”、３３９０．２ｑ乙θ、７７７ｇ、／乙ｔ
ｌＯ１／６０ｑ、／！；７ｇ。

／’１．！ｔθ、７３ｇｏ、／３’ＩＯ。

／３／乙、／；１６；０、／／９７、 ／／Ｓ２．７１０ｇ、／θ９２． １０６θ、１０４ｔＯ１１００２， ９ｇｏ、デ３０ 山１．−１ （７１溶解性 ベンゼン、クロロホルム、酢酸エチル、アセトンに易溶
、 メタノール、エタノール、ノメチルホルムアミドに可溶
、水、ヘキサンに難溶。

（８１呈色反応 過マンガン酸カリ溶液を脱色し、塩化鉄反応は黄色を埜
するが過沃素酸−村ンジソン反応は陰性。

（９）塩基性、中性、酸性の区別 酸性物質でｐにａ′はダ、乙 （ろ乙、７チジオキサン中） ０１澱　物質の色 無色結晶 （ｉｌｌ　　抗菌活性 ブイヨン寒天培地を使用し最少発育阻止撥度を求めた結
果は次の通シである。

スタフィロコッカス・アウレウス、２０９Ｐ　　　　　
　　　　　　　０．９スタフイロコツカス・アウレウス
（多剤耐性菌）とハゲバチルス・ズブチリス　ＰＣｌ、
２／？　　　　　　　　　　　　　　。、ｌＩバチルス
ーズノチリス　ＨＩ３　　　　　　　　　　　　　　　
　　　θ、ｌＩバチルス・ズブチリス　Ｍ９５（ＤＮＡ
修復能欠損株）　　　　　　　　　ｏ、ｌＩ ミコバクテリウム・エスピー・乙θ２　　　　　　　　
　　　　　　θ　、グミコパクテリウム・フライ　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　θ、ｌｌミコバクテ
リウム　アビアム　　　　　　　　　　　　　　　　　
　θ、ｌｌエシェリキア・コリ　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　〉１０゜サルモネラ０チフイム
リウム　　　　　　　　　　　　　　　　’＞７０θ０
２　　腫瘍細胞に対する作用 ／〜／θＱ　ｍｃｇ／　ｄの濃度でフレンド白血病細胞
及び骨髄性白血病細胞に対して分化誘導作用を示した。

０階　マウスに対する毒性 ＣＭＣ＠濁液をマウス腹腔内投与したとζろ、Ａ；０，
１００．及ヒ、２００　ｍｇ／　Ｋ５１　（Ｄ　’＆　
与テ毒性を示さなかった。

以上の７１．−／／物質の理化学的性質及び生物学的性
状を既知の抗生物質と比較すると、酸性物質でそのＮａ
　　塩が脂溶性である点、ダラム陽性菌及び抗酸性菌に
対して強い活性を示す点、又、その分子組成に窒素を含
まない等の諸点に於て、所謂ポリエーテル系イオノフオ
ア抗生物質に分類されると思われる。しかしながら前述
の７１．−／／物賀の理化学的性質、特に特徴ある紫外
部吸収に一致する物餉は見当らず、’７／、−／／物質
ケ新抗生物質と結論した。

以上によシ、本発明の有効成分である７６−／／物質は
、文献未載の新規抗生物質であることが明らかにされ、
上記の通り命名された。

次に、７６−／／物質の製造方法の一例を参考例として
以下に説明する。

〔参考例〕

オートミー・３ｑｂ、グリセリン／、５チ、肉エキスｏ
、ｓｑｂよりなる培地にあらかじめ斜面培養した前記り
６−７１株（微工研菌寄第５６７ｇ号）を接種し、２ｇ
℃／／日間振盪培養する。この培養液を３紅つつ新たな
同組成の培地に連醸し、更に７日間間条件で振嗜培譬を
行う。

この培養液／ｌＡＯｍｔを、同一組成のｊヅ地ｉｇｅに
接種し、ジャーファーメンタ−を用いて２　／　０時間
、２ｇ″Ｃで通気攪拌培養を行う。このときの通気ｉ＃
は毎分／ｇｅ、攪拌回攪拌回転数ｎ３軒０培養終了佐う
・ジオライト７θθを１７００ｇ加え培養’ｔｉｆ遠心
Ｐ−ｉｆ４する。ｐｉ（／４ｅ，ｐｉｆ’７．ｇ）ｔｇ
ｅ及びｓｅの酢酸エチルを用いて二度抽出する。一方、
菌体はアセトンｑ１１及び６ｅを用いて二度抽出する。

抽出液を減圧製動して水浴液コｅｆ：得る。この水浴液
（ｐＨｇ）を酢酸エチルｌｅでコ回抽出する。先の培養
Ｐ液よりの酢酸エチル抽出液と合し、減圧濃縮する。残
漬を少量のベンゼンに溶かし、予めベンゼンで調製した
シリカゾルカラム（３１径×ｓＯ／Ｍ）にかける。ベン
ゼン２ｅ、ベンゼン−酢酸エチル（５：／）／ｅ、ベン
ゼン−酢酸エチル（／：／）／ｌを用いて１１次展開溶
出する。活性費１・分はベンゼン−酢酸エチル（／：／
）の浴出画分に沖れるのでこの部分を集めて減圧濃縮し
てメタノールを処理すると粗結晶的／ｙが得られる。こ
れをメタノールより数〔岨再結晶して’／ｌ、−／／物
質Ｎａ坦の純結晶４００嘘を得る。

本発明の有効成分を、抗コクシジウム剤として使用する
場合は、そのオま直接投与するか、あるいは飼料に添加
して投与するのがよい。飼料となりうるものとしては、
例えば、大麦粉、小麦粉、裸麦粉、とうもろこし粉、大
豆粉、大豆粕、菜種粕、米ぬか、脱脂ぬか、馬れいしよ
粉、かんしょ粉、その他各種の皺粉類、とうふ粕、酵母
、魚粉、醗酵残留物等を挙げることができる。又、通常
用いられている飼料添加物、例えば各種ビタミン類、ミ
ネラル類、防腐剤、酵素製剤、たん白質、炭水化物、ア
ミノ酸類、解熱剤、鎮静剤、消炎剤、殺菌剤などに配合
して用いてもよい一 有効成分の配合割合は、家禽の種類、症状、退会等によ
り異なるが、約Ｓθ〜２００　ｐｐｍが適当である。

本発明は、佐述の試験例に示される如く、家禽類のコク
シジウム症に対して極めて有効であり、且つ毒性及び副
作用を示さない優れた抗コクシジウム剤を提供するもの
である。

以下、本発明を試−例によって示すが、本発明に、何ら
これらに限定されるものではない。

試験例 （供試薬剤） 本試験例に用いた薬剤は、いずれも所定濃度となるよう
抗コクシジウム剤無添加・パｌ幼すう用完全配合飼料（
オリエンタル酵母■触、成分は第１表に示す。）Ｋ均等
に混和し、オーシストの感染２日前より試験終了日（感
染ｇ日後）−１で自由給餌で与えた。なお対照薬剤は、
サリノマイシンを用いた。

第　　ｌ　　表 、ウニ。３．／ｌ、／、２” 小　　　友　　　扮　　　　　　　　　　　　　　　５
．１３白　　　絞　　　油　　　　　　　　　　　　　
　　　３．０７大豆ミール　　　　　　　　　　　１５
．ｌＩフィツシュミール　　　　　　　　７０．３ルー
サンミール（牧草末）　　　　　　３．０’７炭酸カル
シウム　　　　　　　　　０．３食　　　　　　　塩　
　　　　　　　　　　　　　Ｏ６Ｓビタミンミックス　
　　　　　　　　１．θ３（供試ひな） 本試験例に使用したひなは、産卵鶏種（シェーバ−・ス
タークロス）の雄ひなで、コクシジウムの感染を完全に
防止して餉育した７日令（感染時９日令）の健康なひな
を、７群Ｓ羽ずつ用いた。

（接種オーシストと接種量） 感染に使用したオーシストは、エイメリア・テネラの感
受性株で、それぞれの接種量は、ひな７羽あたり成熟オ
ーシスト５　Ｘ　／　０’個を金属ゾンデにて経口的に
素のり内に接種した。

（効果の判定） 効果の判定は、ひなの相対増体率、生存ギ、オーシスト
値及びｐ！に管の病変値より抗コクシジウム指数（八Ｃ
１）を計算し、指数値による判定を行った。

抗コクシ・ゾウム拮数（Ａｃｔ）　＝　（相対増体率＋
生存率）＝（オーシスト値＋病変値） ｌ）体Ｍ測定 体重は、投与開始時（−ユ日）、接種時、ユ、ダ、Ｓ、
Ａ、７及び３日後に測定した。試験終了時に、各試験群
毎の増体量を求め、無感染無投与対照群を１００として
相対増体率を求めた。

２）オーシスト値 感染ｇ日後に、腸管ホモジネートにより盲腸内オーシス
トを数え、オーシストｌ′ｉ＃ハ下記の如く定めた。

〔腸管ホモジネートによる方法〕

３）腸管病変度 ひなは試験終了時（感染３日後）に解剖して、腸管を肉
眼的に精査して病変度を判定した。なお、病変度は次の
暗く定め、病質値は、平均病変度の値を７０倍した値と
した。

０、（−）・・・盲腸は全く正常。出血斑があれば十と
する。

八（＋）・・・盲−腸の形は正常。内容物はやや流動性
を蛍び色も黄色がかる。盲腸粘膜 は部分的に軽度の腫張があり白つほ くなる。

コ、　＜＋＋）・・・盲腸の形１へはｌ’！正常。粘膜
の腫張は全面にみられる。内容に出血はなく、 粘液は黄色みをおび褪色している。

粘膜内には少数の白色点状壊死巣や 出血斑が見られる。

３、（柑）・・・盲腸の萎縮・変形は明瞭で直腸よりも
やや長い椎度となる。正常な内容 物は全くなく、凝血または灰白色チ ーズ状の変性物が充満していること が多い。盲腸壁の肥厚Ｆｉ、顕著でもろくなり、点状出
血斑がまだ残ってい ることもある。病変は盲腸基部にま で達するが直腸にまで達しない。

ｑ、＜ｍ＞・・・盲腸の萎縮、変形は顕著。一般にソー
セージ状を呈し、その長さは置部 と同じかまたは熾かくなっている。

病変は直腸のハルへ位の所にまで達 する。その他は（３１と同様である。

ｑ）飼料要求率 各試験群毎に投与開始時から試験終了時までＩＯ日日間
飼料摂取量を求め、該摂取量と平均増体量より＠料要求
率を算出した。

これらのか；験紹来を第２表、躬３表に示す。

〔考察〕

本薬剤は、感染無投薬対照群に比べて、血便、盲腸病変
及び検出オーシスト数とも著しい改擲効１−が認められ
た。

又、本薬剤投与によれば、感染後本急性コクシジウムの
症状は全く発現せず、エイメリア・テネラのオーシスト
の発育は、顕著に抑制されていることが認められ、本発
明の薬剤は、抗コクシジウム剤として極めて有効である
ことが分った。

特許出願人　理化学研究所 科研化学株式会社 手　　続　　補　　正　　書 、、　　、ｆ、、５ａ１４−７　　。

特許庁長官　　島　１）春　樹　　殿 １　事件の表示　昭和ｓｌ１年特許願第７．２２λＩＯ
号２、発明の名称　　抗コクシジウム剤 ３４　　補正をする者 事件との関係　　　出願人 ４、代理人 住　所　　東京都千代田区九〇内３丁目３番１号（１！
話代表２１１−８７４１番）で・ｊパ−氏名（５９９５
）弁理士　中　　村　　　　稔；、。

５、補正命令の日付　　自　　発 ６゜ Ａ　明細書第７９頁第３〜第≠行の１し、塩化鉄反応は
黄色を呈」を削除する。

、２．微生物保管委託申請書受理番号票を補充する。

９、添付１類の目録

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 抗生物質７６−／／動物質有効成分として含有すること
   １に特徴とする抗コクシジウム剤。