JPH11199494A - 腸溶性カプセルを用いた免疫賦活剤 - Google Patents
腸溶性カプセルを用いた免疫賦活剤Info
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- JPH11199494A JPH11199494A JP10014880A JP1488098A JPH11199494A JP H11199494 A JPH11199494 A JP H11199494A JP 10014880 A JP10014880 A JP 10014880A JP 1488098 A JP1488098 A JP 1488098A JP H11199494 A JPH11199494 A JP H11199494A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】ドラッグデリバリーシステムを応用した、少量
で効果の高い経口免疫賦活剤を提供する。 【構成】免疫賦活作用を有する乳酸菌を腸溶性カプセル
に封入することによって、少量で、白血球の抗体産生細
胞機能の上昇などの免疫賦活効果が得られる。
で効果の高い経口免疫賦活剤を提供する。 【構成】免疫賦活作用を有する乳酸菌を腸溶性カプセル
に封入することによって、少量で、白血球の抗体産生細
胞機能の上昇などの免疫賦活効果が得られる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、免疫賦活作用を有する
ことが知られている乳酸菌を、腸溶性カプセルに封入す
ることによって、少量で効率の良い免疫賦活効果を得る
ことができる免疫賦活剤に関するものである。
ことが知られている乳酸菌を、腸溶性カプセルに封入す
ることによって、少量で効率の良い免疫賦活効果を得る
ことができる免疫賦活剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】腸管は消化吸収に重要な場所であるだけ
でなく、腸内細菌を中心とした種々の微生物抗原や、食
物抗原などの外来抗原が接触している場であり、免疫臓
器として注目を浴びている。最近の研究により、腸管に
は全末梢リンパ球の５０〜６０％が集中して、パイエル
板や腸間膜リンパ節などの消化管関連リンパ組織が、全
身の免疫応答を制御していることが明らかにされてき
た。そのため、腸管を通して免疫賦活作用を高めようと
する試みが行われている。
でなく、腸内細菌を中心とした種々の微生物抗原や、食
物抗原などの外来抗原が接触している場であり、免疫臓
器として注目を浴びている。最近の研究により、腸管に
は全末梢リンパ球の５０〜６０％が集中して、パイエル
板や腸間膜リンパ節などの消化管関連リンパ組織が、全
身の免疫応答を制御していることが明らかにされてき
た。そのため、腸管を通して免疫賦活作用を高めようと
する試みが行われている。
【０００３】乳酸菌には整腸効果があることが以前から
知られていたが、そのほかにも免疫に関する効果がある
ことが各菌種で報告されている。たとえば、白血球の増
加、貪食能の増強、サイトカイン産生量の増加及びＩｇ
Ａ産生の増加などが、論文や学会発表などで報告されて
いる。
知られていたが、そのほかにも免疫に関する効果がある
ことが各菌種で報告されている。たとえば、白血球の増
加、貪食能の増強、サイトカイン産生量の増加及びＩｇ
Ａ産生の増加などが、論文や学会発表などで報告されて
いる。
【０００４】薬剤の投与方法として、経口投与は体に対
する負担もなく一番好ましい投与方法である。しかし、
消化管を通ることによる物理・化学的影響によって、薬
物が変性および分解される場合がある。そのため、投与
量が静脈・筋肉内投与と比較して増加する傾向がある。
する負担もなく一番好ましい投与方法である。しかし、
消化管を通ることによる物理・化学的影響によって、薬
物が変性および分解される場合がある。そのため、投与
量が静脈・筋肉内投与と比較して増加する傾向がある。
【０００５】最近の医薬品などの研究において、新薬を
開発することのほかに、既存薬をいかに効率よく体内の
必要な場所に輸送できるかという研究もされている。そ
の考えに基づいてドラッグデリバリーシステムという分
野ができ、注目を浴びている。この分野では、薬物の動
態を制御することによって必要最小量の薬物で十分な効
果が得られるように、その薬物の特性に適合した投与経
路、投与剤型の研究・開発が行われている。そのドラッ
グデリバリーシステムの考え方に基づいて作製された剤
型の一つが腸の中で溶解することによって、体内への吸
収率を高める腸溶性カプセルである。
開発することのほかに、既存薬をいかに効率よく体内の
必要な場所に輸送できるかという研究もされている。そ
の考えに基づいてドラッグデリバリーシステムという分
野ができ、注目を浴びている。この分野では、薬物の動
態を制御することによって必要最小量の薬物で十分な効
果が得られるように、その薬物の特性に適合した投与経
路、投与剤型の研究・開発が行われている。そのドラッ
グデリバリーシステムの考え方に基づいて作製された剤
型の一つが腸の中で溶解することによって、体内への吸
収率を高める腸溶性カプセルである。
【０００６】腸溶性カプセルの中に乳酸菌を封入した薬
剤は存在するが、その薬剤のほとんどは、乳酸菌を生き
たまま多量に腸に到達させ、整腸効果を高めるものであ
る。現在、腸管の免疫賦活を目的として死菌体を腸溶性
カプセルに封入した商品は存在しない。
剤は存在するが、その薬剤のほとんどは、乳酸菌を生き
たまま多量に腸に到達させ、整腸効果を高めるものであ
る。現在、腸管の免疫賦活を目的として死菌体を腸溶性
カプセルに封入した商品は存在しない。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】免疫賦活剤を腸溶性カ
プセル内に封入した薬剤として、各種病原菌のワクチン
を封入して経口投与を行えるようにしたものがある。Ｂ
ＣＧワクチンを腸溶性カプセルに封入して、脳腫瘍の治
療を経口投与によって行った症例報告がある（松岡浩司
ら、ＢＣＧ免疫療法誌Vol.10 39-45 (1986)）。この方
法をとることによって、ＢＣＧの副作用が軽くなり、生
存日数の延長がみられたと報告されている。しかし、こ
のワクチンは、生菌でないと効果が得られず、効果失活
の問題や投与量及び期間などに課題が残る。また、もと
もと注射剤として開発されているため、経口投与に対す
る安全性及び効果に不安がある。
プセル内に封入した薬剤として、各種病原菌のワクチン
を封入して経口投与を行えるようにしたものがある。Ｂ
ＣＧワクチンを腸溶性カプセルに封入して、脳腫瘍の治
療を経口投与によって行った症例報告がある（松岡浩司
ら、ＢＣＧ免疫療法誌Vol.10 39-45 (1986)）。この方
法をとることによって、ＢＣＧの副作用が軽くなり、生
存日数の延長がみられたと報告されている。しかし、こ
のワクチンは、生菌でないと効果が得られず、効果失活
の問題や投与量及び期間などに課題が残る。また、もと
もと注射剤として開発されているため、経口投与に対す
る安全性及び効果に不安がある。
【０００８】注射剤などの非経口投与による免疫賦活剤
は発熱や発疹など、何らかの副作用が多くの症例でみら
れる。そのため、患者に負担の少ない投与方法である経
口投与が可能な免疫賦活剤で、副作用がなく、安全であ
り、かつ少量で効果のみられるものが求められている。
は発熱や発疹など、何らかの副作用が多くの症例でみら
れる。そのため、患者に負担の少ない投与方法である経
口投与が可能な免疫賦活剤で、副作用がなく、安全であ
り、かつ少量で効果のみられるものが求められている。
【０００９】
【課題を解決するための手段】免疫賦活剤としての効果
がある乳酸菌は、静脈内投与などの非経口投与のみなら
ず、経口投与でも同様の効果がみられる。これらの乳酸
菌は、腸管内の消化管関連リンパ組織に到達し、一部が
取り込まれ、細胞を刺激することによって免疫賦活作用
を示すと推測されている。そこで、安全性の高い乳酸菌
を用いて、効率良く免疫賦活作用を得られるか研究した
ところ、抗癌剤などの要因により免疫力が落ちている個
体に対して、乳酸菌を腸溶性カプセルに封入した薬剤を
用いることにより、乳酸菌単体よりも強い免疫賦活作用
を示すことが判明し、本発明を完成することができた。
がある乳酸菌は、静脈内投与などの非経口投与のみなら
ず、経口投与でも同様の効果がみられる。これらの乳酸
菌は、腸管内の消化管関連リンパ組織に到達し、一部が
取り込まれ、細胞を刺激することによって免疫賦活作用
を示すと推測されている。そこで、安全性の高い乳酸菌
を用いて、効率良く免疫賦活作用を得られるか研究した
ところ、抗癌剤などの要因により免疫力が落ちている個
体に対して、乳酸菌を腸溶性カプセルに封入した薬剤を
用いることにより、乳酸菌単体よりも強い免疫賦活作用
を示すことが判明し、本発明を完成することができた。
【００１０】本発明に用いる腸溶性カプセルの製造方法
としては、内容物に乳酸菌の油脂（融点３０℃以上）懸
濁物を用いて、従来のソフトカプセルの製造法が適用で
きる。そのような製造法としては、カプセル皮膜シート
を用いて、ロータリー式充填機で内容物を封入し、カプ
セル製剤を成型する方法、又は滴下法により、シームレ
スカプセルを製造する方法が挙げられる。
としては、内容物に乳酸菌の油脂（融点３０℃以上）懸
濁物を用いて、従来のソフトカプセルの製造法が適用で
きる。そのような製造法としては、カプセル皮膜シート
を用いて、ロータリー式充填機で内容物を封入し、カプ
セル製剤を成型する方法、又は滴下法により、シームレ
スカプセルを製造する方法が挙げられる。
【００１１】カプセルへの腸溶性の付与には、ゼラチン
に腸溶化剤を配合した皮膜を用いてカプセル充填を行う
方法、又は通常のゼラチン皮膜の外側に腸溶性コーティ
ングを行う方法のいずれかを用いることができる。
に腸溶化剤を配合した皮膜を用いてカプセル充填を行う
方法、又は通常のゼラチン皮膜の外側に腸溶性コーティ
ングを行う方法のいずれかを用いることができる。
【００１２】配合する腸溶化剤としてはペクチン、アル
ギン酸、セルロース類（例えば、カルボキシメチルセル
ロース、セルロースアセテートフタレートなど）、メタ
クリル酸コポリマーなどが挙げられ、腸溶性コーティン
グ剤としてはメタクリル酸コポリマー、ヒドロキシプロ
ピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピル
メチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシ
メチルセルロース、セルロースアセテートフタレート、
シェラックなどが挙げられるが、これらに限定されるも
のではない。またコーティングは、公知の方法で行うこ
とができる。
ギン酸、セルロース類（例えば、カルボキシメチルセル
ロース、セルロースアセテートフタレートなど）、メタ
クリル酸コポリマーなどが挙げられ、腸溶性コーティン
グ剤としてはメタクリル酸コポリマー、ヒドロキシプロ
ピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピル
メチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシ
メチルセルロース、セルロースアセテートフタレート、
シェラックなどが挙げられるが、これらに限定されるも
のではない。またコーティングは、公知の方法で行うこ
とができる。
【００１３】
【実施例】以下実施例を示すが、本発明はこれらの実施
例の記載によって何ら制限されるものではない。
例の記載によって何ら制限されるものではない。
【００１４】実施例１．（エンテロコッカスの培養） エンテロコッカス・フェカリス(Enterococcus faecali
s)ＮＦ−１０１１（微工研菌寄第１２５６４号）を、以
下に示す組成のロゴサ液体培地に接種し、（菌数：１０
6個/ｍｌ）、３７℃で１０〜１６時間培養し、生菌数約
１０9個/ｍｌの培養液を得た。得られた培養液を１２０
００×ｇで２０分間遠心分離して集菌し、蒸留水で２回
洗浄して菌体を得た。この菌体を蒸留水で懸濁し、１１
０℃で１０分間加熱して死菌体懸濁液を得た。次に凍結
乾燥法で乾燥処理し、乾燥死菌体を得た。
s)ＮＦ−１０１１（微工研菌寄第１２５６４号）を、以
下に示す組成のロゴサ液体培地に接種し、（菌数：１０
6個/ｍｌ）、３７℃で１０〜１６時間培養し、生菌数約
１０9個/ｍｌの培養液を得た。得られた培養液を１２０
００×ｇで２０分間遠心分離して集菌し、蒸留水で２回
洗浄して菌体を得た。この菌体を蒸留水で懸濁し、１１
０℃で１０分間加熱して死菌体懸濁液を得た。次に凍結
乾燥法で乾燥処理し、乾燥死菌体を得た。
【００１５】ロゴサ液体培地の組成を示す。 トリプチケース １０g 酵母エキス ５g トリプトース ３g リン酸一カリウム ３g リン酸二カリウム ３g クエン酸三アンモニウム ２g ツイーン８０（界面活性剤） １g システイン塩酸塩 ０．２g 塩類溶液（１のとおり） ５ml 蒸留水 １０００ml （pH７．０に調整、１２１℃で１５分間加熱滅菌）
【００１６】実施例２．（腸溶性カプセル製剤の作製） カプセル皮膜形成溶液及び内容物溶液をそれぞれ、表１
に示した組成を混合することで調製した。次に、それら
をシームレスカプセル充填機（森下仁丹株式会社製）を
用いて、乳酸菌を含有した腸溶性カプセル製剤を製造し
た。
に示した組成を混合することで調製した。次に、それら
をシームレスカプセル充填機（森下仁丹株式会社製）を
用いて、乳酸菌を含有した腸溶性カプセル製剤を製造し
た。
【００１７】
【００１８】実施例３．（白血球の抗体産生細胞数の回
復作用） （１）抗体産生細胞の調製 １０週齢のＣ３Ｈ／ＨｅＮ 雌性マウス（日本ＳＬＣ株
式会社）を実施例１で作製した乾燥死菌体を投与する群
（以下菌体投与群）、実施例２で作製した腸溶性カプセ
ル製剤を投与する群（以下腸溶剤投与群）、無処置群及
び対照群の４群（ｎ＝６）に分けた。乾燥死菌体及び腸
溶性カプセル製剤は６０ｍｇ／マウス量を胃ゾンデを用
いて経口投与し、無処置群及び対照群には生理食塩水を
胃ゾンデを用いて経口投与を行った。投与開始７日後に
菌体投与群、腸溶剤投与群及び対照群にフルオロウラシ
ル（５−ＦＵ：協和発酵株式会社）を８０ｍｇ／ｋｇ量
腹腔内投与した。同日に、全群に羊赤血球（ＳＲＢＣ：
コスモバイオ株式会社）を５×１０7個量腹腔内投与し
た。
復作用） （１）抗体産生細胞の調製 １０週齢のＣ３Ｈ／ＨｅＮ 雌性マウス（日本ＳＬＣ株
式会社）を実施例１で作製した乾燥死菌体を投与する群
（以下菌体投与群）、実施例２で作製した腸溶性カプセ
ル製剤を投与する群（以下腸溶剤投与群）、無処置群及
び対照群の４群（ｎ＝６）に分けた。乾燥死菌体及び腸
溶性カプセル製剤は６０ｍｇ／マウス量を胃ゾンデを用
いて経口投与し、無処置群及び対照群には生理食塩水を
胃ゾンデを用いて経口投与を行った。投与開始７日後に
菌体投与群、腸溶剤投与群及び対照群にフルオロウラシ
ル（５−ＦＵ：協和発酵株式会社）を８０ｍｇ／ｋｇ量
腹腔内投与した。同日に、全群に羊赤血球（ＳＲＢＣ：
コスモバイオ株式会社）を５×１０7個量腹腔内投与し
た。
【００１９】５−ＦＵ及びＳＲＢＣの投与４日後にマウ
ス脾臓を採取して、脾細胞数が１×１０7個／ｍｌにな
るようＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥＭ培地（日水製薬株式会
社）に浮遊させた。
ス脾臓を採取して、脾細胞数が１×１０7個／ｍｌにな
るようＥａｇｌｅ’ｓ ＭＥＭ培地（日水製薬株式会
社）に浮遊させた。
【００２０】（２）プラーク法による抗体産生細胞（Ｐ
ＦＣ）の検出 ＳＲＢＣを生理食塩水で３回洗浄した後、３０％（ｖ／
ｖ）となるように、生理食塩水に浮遊させた。０．０５
％のＤＥＡＥデキストランを含む２倍濃度のＥａｇｌ
ｅ’ｓ ＭＥＭ培地を等量の１．６％寒天溶液に添加
し、４５℃に保温したまま、２ｍｌづつ試験管に分注し
た。この試験管に、ＳＲＢＣ浮遊液０．１ｍｌおよびモ
ルモット補体溶液（極東製薬株式会社）２０μｌを添加
し、予め脾細胞浮遊液を１×１０6個づつ分注しておい
たプラスチックシャーレ中に試験管の中身を入れ、すば
やく混和して均一の層にした。このプレートを３７℃の
恒温器内で３時間保持した。ＳＲＢＣが溶血して透明に
透けている場所（溶血斑）を数えて脾細胞１０6個当た
りの抗体産生細胞（ＰＦＣ）数を算出した。
ＦＣ）の検出 ＳＲＢＣを生理食塩水で３回洗浄した後、３０％（ｖ／
ｖ）となるように、生理食塩水に浮遊させた。０．０５
％のＤＥＡＥデキストランを含む２倍濃度のＥａｇｌ
ｅ’ｓ ＭＥＭ培地を等量の１．６％寒天溶液に添加
し、４５℃に保温したまま、２ｍｌづつ試験管に分注し
た。この試験管に、ＳＲＢＣ浮遊液０．１ｍｌおよびモ
ルモット補体溶液（極東製薬株式会社）２０μｌを添加
し、予め脾細胞浮遊液を１×１０6個づつ分注しておい
たプラスチックシャーレ中に試験管の中身を入れ、すば
やく混和して均一の層にした。このプレートを３７℃の
恒温器内で３時間保持した。ＳＲＢＣが溶血して透明に
透けている場所（溶血斑）を数えて脾細胞１０6個当た
りの抗体産生細胞（ＰＦＣ）数を算出した。
【００２１】結果を図１に示す。無処置群の脾細胞１０
6個中には１６４０±４００個の羊赤血球に対するＰＦ
Ｃが存在した。しかし５−ＦＵ処置によって、対照群で
は３５０±１３０個まで低下した。これに対して、菌体
投与群のＰＦＣ数は、５７０±２００個に増加し、乾燥
死菌体を投与することによって免疫賦活効果がみられ
た。さらに、乾燥死菌体量として換算すると約１０分の
１量である７ｍｇ／マウス量を投与したことになる腸溶
剤投与群でも、菌体投与群と同等の５６０±１６０個の
ＰＦＣ数が得られ、腸溶剤化することによってより少量
で免疫賦活作用がみられた。
6個中には１６４０±４００個の羊赤血球に対するＰＦ
Ｃが存在した。しかし５−ＦＵ処置によって、対照群で
は３５０±１３０個まで低下した。これに対して、菌体
投与群のＰＦＣ数は、５７０±２００個に増加し、乾燥
死菌体を投与することによって免疫賦活効果がみられ
た。さらに、乾燥死菌体量として換算すると約１０分の
１量である７ｍｇ／マウス量を投与したことになる腸溶
剤投与群でも、菌体投与群と同等の５６０±１６０個の
ＰＦＣ数が得られ、腸溶剤化することによってより少量
で免疫賦活作用がみられた。
【００２２】
【発明の効果】実施例に示すように、免疫賦活作用のあ
ることが知られている乳酸菌を腸溶性カプセルに封入す
ることによって、少量で強力な免疫賦活効果が得られる
腸溶性カプセル製剤を作製することができる。この製剤
を食品に添加する事によって、かぜなどに代表される感
染症の予防食品としても用いることができる。
ることが知られている乳酸菌を腸溶性カプセルに封入す
ることによって、少量で強力な免疫賦活効果が得られる
腸溶性カプセル製剤を作製することができる。この製剤
を食品に添加する事によって、かぜなどに代表される感
染症の予防食品としても用いることができる。
【図１】マウス脾臓細胞中の抗体産生細胞数を表した図
である。
である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 能味 堂郎 三重県阿山郡伊賀町大字柘植町3353−１ アーバンライフ柘植308号 (72)発明者 山本 哲郎 三重県阿山郡阿山町大字円徳院1406−69 (72)発明者 春原 秀基 大阪府大阪市中央区玉造１丁目１番30号 森下仁丹株式会社内 (72)発明者 小崎 敏雄 大阪府大阪市中央区玉造１丁目１番30号 森下仁丹株式会社内 (72)発明者 吉門 正智 大阪府大阪市中央区玉造１丁目１番30号 森下仁丹株式会社内 (72)発明者 水谷 勝史 大阪府大阪市中央区玉造１丁目１番30号 森下仁丹株式会社内
Claims (4)
- 【請求項１】乳酸菌菌体又はその処理物を腸溶性カプセ
ルの中に封入することを特徴とする免疫賦活剤 - 【請求項２】乳酸菌がエンテロコッカス属、ラクトバチ
ルス属、ビフィドバクテリウム属、ストレプトコッカス
属、ロイコノストック属、ペディオコッカス属、ラクト
コッカス属及びそれらの亜属に属する１種又は２種以上
の乳酸菌であることを特徴とする請求項１記載の免疫賦
活剤 - 【請求項３】免疫賦活効果が白血球の抗体産生能を亢進
させるものである請求項１記載の免疫賦活剤 - 【請求項４】抗ガン剤による免疫機能低下を回復させる
ことを特徴とする請求項１記載の免疫賦活剤
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10014880A JPH11199494A (ja) | 1998-01-10 | 1998-01-10 | 腸溶性カプセルを用いた免疫賦活剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10014880A JPH11199494A (ja) | 1998-01-10 | 1998-01-10 | 腸溶性カプセルを用いた免疫賦活剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11199494A true JPH11199494A (ja) | 1999-07-27 |
Family
ID=11873338
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10014880A Pending JPH11199494A (ja) | 1998-01-10 | 1998-01-10 | 腸溶性カプセルを用いた免疫賦活剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11199494A (ja) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001323001A (ja) * | 2000-05-16 | 2001-11-20 | Asahi Denka Kogyo Kk | 免疫増強作用を有する低分子化βグルカン |
| JP2002241292A (ja) * | 2001-02-15 | 2002-08-28 | Yakult Honsha Co Ltd | インターロイキン１５産生促進剤、消化器障害予防・治療剤及び飲食品 |
| JP2005097280A (ja) * | 2003-08-27 | 2005-04-14 | Aaku Giken:Kk | 抗腫瘍活性剤 |
| JP2006298783A (ja) * | 2005-04-18 | 2006-11-02 | Nisshin Sugar Mfg Co Ltd | 免疫賦活組成物 |
| JP2009102324A (ja) * | 2008-11-27 | 2009-05-14 | Morishita Jintan Kk | 乳酸菌含有血中アンモニア低減剤 |
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| WO2010119936A1 (ja) | 2009-04-17 | 2010-10-21 | 株式会社アネロファーマ・サイエンス | 偏性嫌気性に変異化された乳酸菌およびその作製方法ならびに偏性嫌気性乳酸菌で機能する発現ベクター |
| WO2011111783A1 (ja) | 2010-03-12 | 2011-09-15 | カルピス株式会社 | 大腸におけるビフィズス菌の増加及び減少抑制剤 |
| JP2016079111A (ja) * | 2014-10-14 | 2016-05-16 | 株式会社五葉 | 経口免疫機能調整組成物 |
| KR102196561B1 (ko) * | 2019-08-20 | 2020-12-29 | (주)필인터내셔널 | 피막층 내 사균체를 포함하는 연질캡슐제 |
-
1998
- 1998-01-10 JP JP10014880A patent/JPH11199494A/ja active Pending
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