JPH10505612A - 酵母からの低分子活性成分エキスおよびその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は酵母菌目（Saccharomycetes）の酵母菌からの活性成分の低分子代謝活性化混合物に関し、それらは酵母菌目（Saccharomycetes）の酵母を３７℃の開始温度において数時間培養し、最高４５℃までに加熱し、ついで冷却し、粉砕し、以下それ自体既知の方法で処理して得られることを特徴とする。

Description

【発明の詳細な説明】 酵母からの低分子活性成分エキスおよびその製造方法 本発明は、酵母からの低分子活性成分およびその製造方法に関する。 酵母菌目（Saccharomycetes）の酵母菌からの酵母エキス、ならびにそれらの 同化および呼吸剌激作用、一般的な代謝活性化作用については周知である。この ようなエキスを得る方法は、たとえばＥＰ−Ｂ ０ ０６５ ２４６号に記載さ れている。この方法では、至適発酵時に蛋白分解酵素を添加したのち、酵母菌の 懸濁液は、温度が顕著に上昇するまで超音波処理に付される。酵母細胞の透析に 超音波を使用することはエキスの取得に効率的な手段ではあるが、水溶液中の事 実上すべての化合物が多かれ少なかれ著しい酸化に曝されることから、超音波処 理には全くネガティブな副作用があることが見出された。すなわち、超音波処理 の過程では細胞から真の活性物質は抽出されず、一般に、それらは化学的に変化 した化合物である。 酵母エキス、ならびに可能な限り真の生成物が得られ、その製造方法により変 化した物質の含量を可能な限り最低に抑えるそれらの製造方法には、依然として 需要がある。 この目的を達成するため、請求項１による酵母エキスならびに請求項２による それらの製造方法を提案する。 培養液を特定の様式で温度変化に付すと、驚くべきことに、定性的および定量 的に改善された形で代謝活性化作用を有する酵母エキスを製造できることが見出 されたのである。本発明によれば、培養液の調製に先立って約１５℃に維持され た酵母を、酵母：水の比が約１：２になるように水に懸濁する。ついで、各酵母 と発酵できるある量の糖、とくにサッカロースを５重量％になるように混合する 。混合物をついで、３７〜３８℃の至適培養温度に加熱し、この温度に少なくと も３時間保持し、所定の間隔で短時間の攪拌と通気を行う。酵母の世代時間は約 ６０分である。 ３時間培養したのち、次に混合物を比較的速やかに最高４５℃に加熱し、この 温度に６０分間保持する。ついで、懸濁液を６０分を要して徐々に２５℃に放冷 し、この温度に約６０分間保持する。したがって、製造過程に要する時間は合計 約６時間である。 酵母の温度耐性は、世代時間の間に培養温度を最高４５℃に上昇させることに よって改良され、総代謝は明らかに増大する。低分子代謝活性成分の収率の増加 は増殖温度の上昇時における新陳代謝の増大の結果であると推定される。この推 定は、活性成分濃縮物中に熱ショック蛋白質が見出されることにより支持される 。略号ｈｓｐの熱蛋白質は、熱または化学ストレス時に生存細胞により、著しく 高速度で短時間合成される蛋白質である。それらの正確な機能はまだ不明ではあ るが、それらはストレス状態を生残するために必須であり、それらは変性蛋白質 のＡＴＰ依存性リフォールディングを開始または支持すると推定される。ｈｓｐ ファミリー６０および７０の蛋白質が酵母水解物中に含まれている。ｈｓｐの単 離および証明はたとえば、Nature（London）337，655-659および44-47（1989） に記載されている。 酵母としてはSaccharomyces cerevisiaeおよびその様々な純粋培養型またはSa ccharomyces uvarumもしくはSaccharomyces roseiの使用が好ましい。 約６時間の総培養時間ののちに、混合物は、適当な機械的ミルたとえばコロイ ドミルを用いて粉砕する。必要に応じて、粉砕は酵素の添加後に行うこともでき る。ついで、混合物を蛋白分解酵素またはこの種の酵素の混合物と約37〜38℃で 反応させる。この場合、酵素とバイオマスの比は約０．０３：１とする。反応時 間は用いた蛋白分解酵素の種類の関数であり、一般には約１８０分である。パパ イン、フィシンまたは細菌もしくはカビのプロテアーゼの使用が好ましい。 可溶化後、酵素を活性化するため、全懸濁液を３０分以内８５℃に加熱し、こ の温度に３０分間保持する。冷却後、混合物を遠心分離し、この場合、必要に応 じて沈降物をさらに１回洗浄してもよい。求める活性成分を含有する残留物をろ 過し、真空中４０℃を越えない温度で濃縮する。ついで、この溶液を通常の既知 の噴霧乾燥顆粒化に付すことができる。 本発明の活性成分混合物は、これまで知られている他の方法で製造された活性 成分混合物と比較して明らかな代謝活性の上昇を示し、線維芽細胞試験では現在 までに知られている生成物の場合より一般に明らかに高く、一部では５０〜１０ ０％高い値を示す。 本発明の活性成分混合物はヒト医薬および動物用薬として、代謝の活性化が必 要なすべての場合、たとえば治癒の遅い創傷の治癒の促進、とくに畜産および養 魚において食餌の利用度の改善に使用できる。使用の他の領域には、食品を処理 する場合の微生物の活性の刺激がある。 本発明を実施例により以下に詳細に説明する。 Saccharomyces cerevisiaeの下面発酵型酵母１０ｋｇを飲用品質の精製してろ 過した水２０ｋｇを反応器で反応させた。この懸濁液に５重量％のサッカロース を供給し、攪拌してよく混合させた。ついで、懸濁液を３７〜３８℃に加熱し、 この温度に少なくとも３時間保持し、この間、ほぼ半時間の間隔で短時間攪拌と 通気を行う。こののち、混合物を４５℃に加熱し、この温度に６０分間保持し、 ついで６０分を要して再び２５℃に冷却し、この温度に６０分間保持する。 ついで、均衡生育懸濁液を適当量のパパインと反応させる。この場合、酵素： バイオマスの比は０．０３：１としなければならない。酵素を添加しながら同時 に酵母を粉砕したのち、混合物を３７〜３８℃で1８０分間攪拌する。ついで混 合物を３０分以内に８５℃に加熱し、この温度に３０分間保持し、ついで冷却し 、遠心分離する。遠心分離された材料を吸引ろ過し、沈降物を再び洗浄し、再度 、遠心分離する。遠心分離された材料を合わせろ過したのち、好ましくは真空蒸 留器を用いて４０℃未満の温度で濃縮する。細胞を含まない濃縮溶液をついで、 それ自体既知の方法で噴霧乾燥顆粒化に付す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．熱ショック蛋白質とくにｈｓｐファミリー６０の含量が増加していること を特徴とする酵母菌目（Saccharomycetes）の酵母菌からの活性成分である低分 子代謝活性化混合物。 ２．酵母菌目（Saccharomycetes）の酵母菌からの活性成分である低分子代謝 活性化混合物であって、酵母を数時間３７〜３８℃において培養し、ついで最高 ４５℃までに加熱し、ついで２５℃に冷却し、粉砕し、酵素により可溶化し、以 下それ自体既知の方法で処理する酵母菌目の酵母からの抽出工程によって得るこ とを特徴とする混合物。 ３．酵母を数時間３７℃の温度で開始して培養し、ついでそれ自体既知の方法 で処理する酵母菌目（Saccharomycetes）の酵母菌から活性成分の低分子代謝活 性化混合物を製造する方法において、最初の工程では酵母を３７〜３８℃で培養 し、ついで温度を最高４５℃までに上昇させ、培養液をこの温度に数時間保持し たのち再び２５℃に徐々に冷却し、この温度に数時間保持することを特徴とする 方法。 ４．培養液は３７〜３８℃の温度に２〜６時間保持し、ついで最高４５℃まで に加熱してこの温度に４０〜８０分間保持し、続いて４０〜８０分間以内で再び ３７℃に冷却してこの温度に約４０〜８０分間保持することを特徴とする「請求 項２」による方法。 ５．５％量の発酵可能な糖を培養時の懸濁液に添加することを特徴とする「請 求項２または３」による方法。 ６．３７〜３８℃における第二の培養工程に続いて、酵素による可溶化および 粉砕をこの温度で蛋白分解酵素を用いて行い、ついで混合物を酵素の活性化のた めに８０℃以上に加熱し、ついで遠心分離し、残留物をそれ自体既知の方法でさ らに処理することを特徴とする「請求項２〜４」による方法。 ７．蛋白分解酵素としてパパインを用いることを特徴とする「請求項２〜５」 による方法。 ８．蛋白分解酵素と基質の比は重量で約０．０３：１とすることを特徴とする 「請求項２〜６」による方法。 ９．酵母としてSaccharomyces cerevisiaeを使用することを特徴とする「請求 項２〜６」による方法。