JPH09501433A

JPH09501433A - 抗−分裂剤としてのエストロゲン性化合物

Info

Publication number: JPH09501433A
Application number: JP7506502A
Authority: JP
Inventors: ロバート・ジヨンダマト，; モーゼス・ジユダーフオークマン，
Original assignee: ザ・チルドレンズ・メデイカル・センター・コーポレーシヨン
Priority date: 1993-08-06
Filing date: 1994-08-02
Publication date: 1997-02-10
Also published as: ATE411029T1; DK0713393T3; US20030096800A1; ATE313327T1; EP0713393A4; EP1640009A1; CA2168850C; US6528676B1; JP2008120839A; HK1089387A1; US20060183727A1; EP0713393A1; US5892069A; US5504074A; ES2315763T3; EP1640009B1; CA2168850A1; US5661143A; HK1014504A1; ES2255704T3

Abstract

(57)【要約】本出願は、上記に見られる一般式のコルヒチン又はコンブレタスタチンＡ−４構造モチーフを有するものを含むエストラジオール誘導体を、細胞有糸分裂の阻害に十分な投薬量で投与することによる、異常な細胞有糸分裂を特徴とする哺乳類疾患の処置のための薬剤の製造法を開示する。本出願は上記方法において用いられる新規な化合物を開示する。

Description

【発明の詳細な説明】抗−分裂剤としてのエストロゲン性化合物発明の背景本発明は異常な細胞有糸分裂を特徴とする疾患状態の処置に関する。細胞有糸分裂は、細胞分裂及び複製を含む多−段階過程である（Ａｌｂｅｒｔｓ，Ｂ．ｅｔａｌ．ＩｎＴｈｅＣｅｌｌ，ｐｐ．６５２−６６１（１９８９）；Ｓｔｒｙｅｒ，Ｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９８８））。有糸分裂は、有糸分裂紡錘体及び染色体を含む細胞小器官の細胞内運動及び分離を特徴とする。細胞小器官の運動及び分離は、細胞タンパク質チューブリンの重合により促進される。微小管はα及びβチューブリン重合及びＧＴＰの加水分解から形成される。微小管形成は細胞有糸分裂、細胞運動、ならびに繊毛及び鞭毛などの高度に特殊化された細胞構造の運動に重要である。微小管は非常に変化し易い構造であり、それは多様な化学的に関連性のない抗 −分裂薬に感受性である。例えばコルヒチン及びノカダゾールはチューブリンに結合する抗−分裂薬であり、チューブリンの重合を阻害する（Ｓｔｒｙｅｒ，Ｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９８８））。単独で、又は他の治療薬と組み合わされて用いられると、コルヒチンは癌の処置に（ＷＯ−９３０３７２９−Ａ、１９９３年３月４日公開；Ｊ０３２４０７２６−Ａ、１９９１年１０月２８日公開）、神経筋機能の変更に、血圧の変化に、、交感神経機能に影響する化合物への感受性を向上させるために、呼吸の抑制に、及び痛風の軽減に（Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓＤｅｓｋＲｅｆｅｒｅｎｃｅ，ｖｏｌ．４７，ｐ．１４８７，（１９９３））用いることができる。エストラジオール及びエストラジオール代謝物、例えば２−メトキシエストラジオールは細胞分裂を阻害すると報告された（Ｓｅｅｇｅｒｓ，Ｊ．Ｃ．ｅｔａｌ．Ｊ．ＳｔｅｒｏｉｄＢｉｏｃｈｅｍ．３２，７９７−８０９（１９８９）；ＬｏｔｔｅｒｉｎｇＭ−Ｌ．ｅｔａｌ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．５２，５９２６−５９２３（１９９２）；Ｓｐｉｃｅｒ，Ｌ．Ｊ．ａｎｄＨａｍｍｏｎｄＪ．Ｍ．Ｍｏｌ．ａｎｄＣｅｌｌ．Ｅｎｄｏ．６４，１１９−１２６（１９８９）；Ｒａｏ，Ｐ．Ｎ．ａｎｄＥｎｇｅｌｂｅｒｇ，Ｊ．Ｅｘｐ．ＣｅｌｌＲｅｓ．４８，７１−８１（１９６７））。しかし活性は変化し得、複数の試験管内条件に依存する。例えばエストラジオールはいくつかの試験管内設定において細胞分裂及びチューブリン重合を阻害する（Ｓｐｉｃｅｒ，Ｌ．Ｊ．ａｎｄＨａｍｍｏｎｄ，Ｊ．Ｍ．Ｍｏｌ．ａｎｄＣｅｌｌ．Ｅｎｄｏ．６４，１１９−１２６（１９８９）；Ｒａｖｉｎｄｒａ，Ｒ．，Ｊ．ＩｎｄｉａｎＳｃｉ．６４（ｃ）（１９８３））が、他においては阻害しない（Ｌｏｔｔｅｒｉｎｇ，Ｍ−Ｌ，ｅｔａｌ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．５２，５９２６−５９２３（１９９２）；Ｒａｖｉｎｄｒｅ，Ｒ．，Ｊ．ＩｎｄｉａｎＳｃｉ．６４（ｃ）（１９８３））。２−メトキシエストラジオールなどのエストラジオール代謝物は、細胞培養添加物フェノールレッドが存在するか否か、及び細胞がどの程度エストロゲンに暴露されたかに依存する選ばれた試験管内の設定において細胞分裂を阻害する。（Ｓｅｅｇｅｒｓ，Ｊ．Ｃ．ｅｔａｌ．ＪｏｉｎｔＮＣＩ−ＩＳＴＳｙｍｐｏｓｉｕｍ．ＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＴｈｅｒａｐｙｏｆＢｒｅａｓｔＣａｎｃｅｒ．９／２５−９／２７，１９８９，Ｇｅｎｏａ，Ｉｔａｌｙ，ＡｂｓｔｒａｃｔＡ５８）。多数の疾患が異常な細胞有糸分裂を特徴とする。例えば調節されない細胞有糸分裂は癌の証明である。さらに細胞有糸分裂は、胚の正常な発生、黄体の形成、傷の治癒、炎症及び免疫応答、血管形成、ならびに血管形成関連疾患に重要である。発明の概略私は請求の範囲において下記に示す一般式の範囲内のある種の化合物が、望ましくない細胞有糸分裂を特徴とする哺乳類の疾患の処置に有用であることを見いだした。特定の理論に縛られることは望まないが、そのような化合物は一般に微小管形成及びチューブリン重合及び／又は解重合を阻害する。該阻害活性を有する一般式の範囲内の化合物が好ましい。好ましい組成物はエストロゲンレセプター結合における変化（増加又は減少）、吸収、輸送（例えば血液−脳関門及び細胞膜を介した）、生物学的安定性の向上、又は毒性の低下も示すことができる。私は又、請求の範囲の一般式により記載される、方法において有用なある種の化合物も見いだした。本明細書において定義される望ましくない細胞有糸分裂を特徴とする哺乳類疾患は、過剰な又は異常な内皮細胞の刺激（例えば動脈硬化症）、充実性腫瘍及び腫瘍転移、良性腫瘍、例えば血管腫、聴神経鞘腫、神経線維腫、トラコーマ及び化膿性肉芽腫、血管機能不全、異常な傷の治癒、炎症及び免疫障害、ベーチェット病、痛風又は痛風性関節炎、ならびに慢性関節リウマチ、乾癬、糖尿病性網膜症及び他の眼血管由来疾患、例えば未熟児網膜症（水晶体後方線維増殖症）、黄斑変性、角膜移植拒絶、血管新生緑内障及びオスラーウェーバー症候群を伴う異常な血管形成を含むが、これらに限られない。他の望ましくない血管形成は、排卵及び胞胚の着床を含む正常な過程を含む。従って上記の組成物は排卵及び胞胚の着床の阻害に、又は月経の阻害（無月経の誘導）に用いることができる。Ｃ・・・Ｃにより示される結合は不在であるか、又はＣ−−−Ｃ結合と組み合わされて、単位ＨＣ＝ＣＨである。本発明の他の特徴及び利点は、その好ましい実施態様に関する以下の説明から明らかになるであろう。好ましい実施態様の説明最初に図面を説明する。図１は下記の実施例１により記載される２−メトキシエストラジオールによるチューブリン重合の阻害を示すグラフである。図２は下記の実施例２により記載される２−メトキシエストラジオールによるチューブリンへのコルヒチン結合の阻害を示すグラフである。図３は：下記に記載するＩ．コルヒチン、２−メトキシエストラジオール及びコンブレタスタチンＡ−４、ならびにＩＩ．コルヒチン（ａ−ｃ）又はコンブレタスタチンＡ−４（ｄ）を含む種々のエストラジオール誘導体の構造モチーフを描いている。本発明の化合物下記に記載する通り、本発明に従って有用な化合物はチューブリンに結合し、微小管形成を阻害する、又は抗−有糸分裂性を示す新規なエストラジオール誘導体を含む。本発明に従う特定の化合物を下記に記載する。当該技術分野における熟練者は、本発明が下記の請求の範囲に示される式の範囲内の、上記の特性を有する他の化合物に拡張されることを認識するであろう。これらの特性は下記及び文献の他の部分で詳細に記載されるアッセイを用い、各試験化合物に関して決定することができる。特定の機構又は理論に縛られることは望まないが、微小管形成を阻害し、チューブリンに結合し、抗−有糸分裂性を示すことが知られているある種の化合物、例えばコルヒチン及びコンブレタスタチンＡ−４は、エストラジオールとある種の構造的類似性を共有すると思われる。図３はエストラジオール、コルヒチン、コンブレタスタチンＡ−４、及びチューブリンに結合して微小管アセンブリー（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅａｓｓｅｍｂｌｙ）を阻害し、抗−有糸分裂性を示す改良エストラジオール誘導体の分子式を示している。分子式は、コルヒチン、コンブレタスタチンＡ−４、エストラジオール及びある種のエストラジオール誘導体の環構造の間の構造的類似性を強調するように描かれ、方向を向けられている。エストラジオール誘導体は、エストラジオールのステロイド骨格中にコルヒチン又はコンブレタスタチンＡ−４の構造モチーフを挿入することにより作られた。図３、Ｉ部はコルヒチン、２−メトキシエストラジオール及びコンブレタスタチンＡ−４の化学式を描いている。図３、ＩＩａ−ｄ部はエストラジオール誘導体を示しており、それはコルヒチン又はコンブレタスタチンＡ−４に見いだされる構造モチーフを含む。例えばＩＩａ−ｃ部はコルヒチンに見いだされる通り、Ａ及び／又はＢ環が６〜７員炭素に拡大されたエストラジオール誘導体を示し、ＩＩｄ部はコンブレタスタチンＡ−４に見いだされる通り、部分的Ｂ環を有するエストラジオールを描いている。図３に示されているものを含むエストラジオール誘導体の各Ｃ環は２−メトキシエストラジオールに見いだされる通りに完全に飽和されていることができる。Ｒ_1-6は請求の範囲に見いだされる置換基のサブセットを示す。各Ｒ₁−Ｒ₆ は独立して−Ｒ₁、ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、 −Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨとして定義することができる。その場における抗−有糸分裂活性抗−有糸分裂活性は、改良エストラジオール誘導体が新しい血管細胞の増殖（血管形成）を阻害する能力を試験することによりその場で評価される。適したアッセイは、Ｃｒｕｍｅｔａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ２３０：１３７５（１９８５）に記載のニワトリ胚絨毛尿膜（ＣＡＭ）アッセイである。ＣＡＭアッセイを説明している米国特許第５，００１，１１６号も参照されたく、その記載事項は引用することにより本明細書の内容となる。簡単に記載すると、受精したニワトリ胚を第３又は４日にそれらの殻から取り出し、薬剤を含むメチルセルロース円板を絨毛尿膜上に移植する。胚を４８時間後に調べ、メチルセルロース円板の回りに明白な無血管領域が現れていたら、その領域の直径を測定する。このアッセイを用い、エストラジオール誘導体２−メトキシエストラジオールの１００ｍｇの円板が４８時間後に、細胞有糸分裂及び新しい血管の生長を阻害することが見いだされた。この結果は、２−メトキシエストラジオールの抗−有糸分裂作用が、細胞有糸分裂及び血管形成を阻害できることを示している。試験管内における抗−有糸分裂活性試験管内においてエストラジオール誘導体がチューブリン重合及び微小管集合を阻害する能力を調べることにより、抗−有糸分裂活性を評価することができる。微小管集合は、電子的温度コントローラーを備えたＧｉｌｆｏｒｄ記録分光光度計（モデル２５０又は２４００Ｓ）において追跡される。反応混合物（すべての濃度は０．２５μｌの最終的反応体積に関する）は１．０Ｍのグルタミン酸一ナトリウム（ｐｈ６．６）、１.０ｍｇ／ｍｌ（１０μＭ）のチューブリン、１. ０ｍＭのＭｇＣｌ₂、４％（ｖ／ｖ）のジメチルスルホキシド及び２０〜７５μ Ｍの試験されるべき組成物を含む。０．２４ｍｌの反応混合物を３７℃において１５分間インキュベートし、次いで氷上で冷却する。１０μｌの２．５ｍＭＧＴＰの添加後、反応混合物を０℃においてキュベットに移し、ベースラインを確定する。時間０において分光光度計の温度コントローラーを３７℃に設定する。微小管集合を３５０ｎｍにおける濁り度の増加により評価する。別の場合、下記の実施例２に記載する透過型電子顕微鏡により微小管集合の阻害を追跡することができる。指示本発明は異常な細胞有糸分裂を特徴とするいずれの疾患の処置にも用いることができる。そのような疾患は：異常な内皮細胞の刺激（例えば動脈硬化症）、充実性腫瘍及び腫瘍転移、良性腫瘍、例えば血管腫、聴神経鞘腫、神経線維腫、トラコーマ及び化膿性肉芽腫、血管機能不全、異常な傷の治癒、炎症及び免疫障害、ベーチェット病、痛風又は痛風性関節炎、ならびに慢性関節リウマチ、乾癬、糖尿病性網膜症及び他の眼血管由来疾患、例えば未熟児網膜症（水晶体後方線維増殖症）、黄斑変性、角膜移植拒絶、血管新生緑内障及びオースラーウェーバー症候群を伴う異常な血管形成を含むが、これらに限られない。改良エストラジオール誘導体合成本発明に従って用いられる既知化合物及び本発明の新規な化合物への前駆体類は、例えばＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｅｓ，ＳｔｅｒｏｌｏｉｄｓａｎｄＲｅｓｅａｒｃｈＰｌｕｓから購入することができ、本発明の他の化合物は公共的に入手可能な前駆体類から既知の方法に従って合成することができる。エストラジオールの化学合成は記載がある（Ｅｄｅｒ，Ｖ．ｅｔａｌ．，Ｂｅｒ１０９，２９４８（１９７６）；Ｏｐｐｏｌｚｅｒ，Ｄ．Ａ．ａｎｄＲｏｂｅｒｔｓ，Ｄ．Ａ．Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ／９．６３，１７０３（１９８０））。多−環状化合物における７−員環形成のための合成法は既知である（Ｎａｋａｍｕｒｕ，Ｔ．ｅｔａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１０，２８１（１９６２）；Ｓｕｎａｇａｗａ，Ｇ．ｅｔａｌ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．９，８１（１９６１）；ＶａｎＴａｍｅｌｅｎ，Ｅ．Ｅ．ｅｔａｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ１４，８−３４（１９６１）；Ｅｖａｎｓ，Ｄ．Ｅ．ｅｔａｌＪＡＣＳ１０３，５８１３（１９８１））。当該技術分野における熟練者は、閉環が７−員環を与えるように出発材料を適切に変更することにより、エストラジオールの化学合成を７−員環を含むように修正できることを認識するであろう。エストラジオール又はエストラジオール誘導体は、既知の化学的方法により、本発明に従う適した化学的側鎖を含むように修飾することができる。（ＴｈｅＭｅｒｃｋＩｎｄｅｘ，１１ｔｈＥｄ．，Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ．ＵＳＡ（１９８９）．ｐｐ．５８３−５８４）。投与上記の組成物は、既知の方法を用いて生理学的に許容し得る調剤として供給することができ、これらの調剤は標準的経路により投与することができる。一般に組み合わせは局所的、経口的、直腸内又は非経口的（例えば静脈内、皮下又は筋肉内）経路により投与することができる。さらに組み合わせを、持続性放出を可能にする生物分解性ポリマー類中に挿入することができ、ポリマー類はデリバリー（ｄｅｌｉｖｅｒｙ）が望まれている場所の近隣に、例えば腫瘍の部位に移植される。生物分解性ポリマー類及びそれらの利用はＢｒｅｍｅｔａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７４：４４１−４４６（１９９１）に詳細に記載されている。組成物の投薬量は処置されるべき状態、用いられる特定の誘導体、ならびに患者の体重及び状態、及び化合物の投与経路などの他の臨床的因子に依存する。しかしヒトに対する経口的投与の場合、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０１〜１ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量が一般に十分である。調剤は経口的、直腸内、鼻内、局所的（口腔及び舌下を含む）、膣内又は非経口的（皮下、筋肉内、静脈内、皮膚内、眼内、気管内及び硬膜外を含む）投与に適した調剤を含む。調剤は簡便に単位投薬形態で与えることができ、従来の製薬学的方法により調製することができる。そのような方法は、活性成分と製薬学的担体（類）又は賦形剤（類）を混合する（ｂｒｉｎｇｉｇｎｉｎｔｏａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）段階を含む。一般に調剤は活性成分を液体担体又は微粉砕固体担体、あるいは両方と均一に、及び均質に混合し、次いで必要なら製品を成形することにより調製される。経口的投与に適した本発明の調剤類は、それぞれあらかじめ決められた量の活性成分を含むカプセル、サッシェ又は錠剤などの分離された単位として；粉末又は顆粒として；水性液体又は非−水性液体中の溶液又は懸濁液として；あるいは水中油型乳液又は油中水型乳液として、及び大型丸薬などとして与えることができる。錠剤は場合により１種又はそれ以上の補助的成分を用いた圧縮又は成型により製造することができる。圧縮錠剤類は粉末又は顆粒などの易流動性の形態の活性成分を、場合により結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、防腐剤、界面活性剤又は分散剤と混合して適した機械で圧縮することにより調製される。成型錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らされた粉末状化合物の混合物を適した機械で成型することにより製造することができる。錠剤類は場合によりコーティングされるか、又は刻みを入れることができ、その中の活性成分の遅延放出又は調節された放出を与えるように調製することができる。口の中における局所的投与に適した調剤類は、矯味ベース、通常スクロース及びアラビアゴム又はトラガント中に成分を含むロゼンジ類；ゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアラビアゴムなどの不活性ベース中に活性成分を含む錠剤（ｐａｓｔｉｌｌｅｓ）類；ならびに投与されるべき成分を適した液体担体中に含む洗口剤を含む。皮膚への局所的投与に適した調剤類は、投与されるべき成分を製薬学的に許容し得る担体中に含む軟膏類、クリーム類、ジェル類及びペースト類として与えることができる。好ましい局所的配達系は、投与されるべき成分を含む経皮パッチである。直腸内投与のための調剤類は、例えばココアバター又はサリチル酸塩を含む適したベースを用いた座薬として与えることができる。担体が固体である鼻内投与に適した調剤類は、例えば２０〜５００ミクロンの範囲の粒径を有する粗い粉末を含み、それは吹入されるような方法で、すなわち鼻の近くに保たれた粉末の容器から鼻の通路を通って急速に吸入することにより投与される。例えば鼻内スプレー又は鼻内ドロップスとしての投与に適した、担体が液体である調剤は活性成分の水溶液又は油状溶液を含む。膣内投与に適した調剤類は、活性成分の他に当該技術分野において適しているとして既知の担体などを含むペッサリー類、タンポン類、クリーム類、ジェル類、ペースト類、泡類又はスプレー調剤類として与えることができる。非経口的投与に適した調剤は、酸化防止剤、緩衝液、静菌剤及び、調剤を意図されている受容者の血液と等張とする溶質を含むことができる水性及び非水性無菌注射液；ならびに懸濁剤及び増粘剤を含むことができる水性及び非水性無菌懸濁液を含む。調剤は単位−投薬又は多−投薬容器、例えば密封アンプル及びバイアル中で与えることができ、使用直前に注射用水などの無菌の液体担体の添加のみを必要とする凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）（凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ））状態で保存することができる。即席注射用液類及び懸濁液類を、前記の種類の無菌の粉末類、顆粒類及び錠剤類から調製することができる。好ましい単位投薬調剤は、投与される成分の、本明細書に上記で挙げた毎日の投薬量又は単位、毎日の細分−投薬量、あるいは適したそれらの一部を含む調剤である。特に上記で挙げた成分に加え、本発明の調剤は、問題の調剤の種類に関する技術分野において習慣的な他の薬剤を含むことができ、例えば経口的投与に適した調剤は矯味剤を含むことができる。実施例１：図１は２−メトキシエストラジオールによるチューブリン重合の阻害を示す。Ａ．各反応混合物（すべての濃度は０．２５ｍｌの最終的反応体積に関する）は１．０Ｍのグルタミン酸一ナトリウム（ｐＨ６．６）、１．０ｍｇ／ｍｌ（１０μＭ）のチューブリン、１．０ｍＭのＭＧＣｌ₂、４％（ｖ／ｖ）のジメチルスルホキシド、及び０（曲線１）、２０μＭ（曲線２）、４０μＭ（曲線３）又は７５μＭ（曲線４）の２−メトキシエストラジオールを含んだ。０．２４ｍｌの反応混合物を３７℃で１５分間インキュベートし、氷上で冷却した。１０μｌの２．５ｍＭＧＴＰの添加後、反応混合物を０℃に保たれたキュベットに移し、ベースラインを確定した。時間０において温度コントローラーを３７℃に設定した。垂直の破線により示されている時間に、温度コントローラーを示されている温度に設定した。Ｂ．各反応混合物は０．８Ｍのグルタミン酸一ナトリウム（ｐＨ６．６）、１．２ｍｇ／ｍｌ（１２μＭ）のチューブリン、４％（ｖ／ｖ）のジメチルスルホキシド、及び０（曲線１）、１．０μＭ（曲線２）、２．０μＭ（曲線３）、３．０μＭ（曲線４）又は４．０μＭ（曲線５）の２−メトキシエストラジオールを含んだ。０．２４ｍｌの反応混合物を２６℃で１５分間インキュベートし、氷上で冷却した。１０μｌの１０ｍＭＧＴＰの添加後、反応混合物を０℃に保たれたキュベットに移し、ベースラインを確定した。時間０において温度コントローラーを２６℃に設定した。垂直の破線により示されている時間に、温度コントローラーを０℃に設定した。実施例２：透過型電子顕微鏡は、２−メトキシエストラジオールの不在下又は存在下で形成される重合チューブリンの形態の間の差を示すことができる。実施例１に記載の成分を含む反応混合物の３０分間のインキュベーション（３７℃）の後、７５ μＭの２−メトキシエストラジオールを加え、アリコートを２００−メッシュの炭素コーティング銅格子上に置き、０．５％（ｗ／ｖ）の酢酸ウラニルで染色した。２３，１００Ｘから１１５，４００ＸのＴＥＭの倍率を用い、チューブリンの形態における差を視覚化した。実施例３：図２は、２−メトキシエストラジオールがチューブリンへのコルヒチン結合を阻害することを示す。反応条件は本文に記載した通りであり、各反応混合物は１．０μＭのチューブリン、５％（ｖ／ｖ）のジメチルスルホキシド、５μＭの［³ Ｈ］コルヒチン及び示されている濃度における阻害剤を含んだ。インキュベーションは３７℃において１０分間行った。記号は以下の通りである：○，２−メトキシエストラジオール；●，コンブレタスタチンＡ−４；△，ジヒドロコンブレタスタチンＡ−４。コンブレタスタチンＡ−４及びジヒドロコンブレタスタチンＡ−４は、コルヒチンに類似の抗−有糸分裂活性を有する化合物である。実施例４：表１はエストラジオール又はエストラジオール誘導体、植物抗−有糸分裂化合物、例えばコルヒチン、コンブレタスタチンＡ−４又は他の植物化合物により示される試験管内におけるチューブリン重合への阻害効果を示す。方法は実施例１に示されている。実施例５：表２は実施例３に示す方法により、チューブリンへのコルヒチン結合を阻害するエストロゲン類、エストラジオール又はエストラジオール誘導体を挙げている。ＩＣ₅₀値はチューブリン重合を５０％阻害するのに必要なエストラジオール誘導体の濃度として定義される。ＩＣ₅₀値は非阻害剤（ＩＣ₅₀＞４０μＭ）に関する少なくとも２回の独立した実験、及び阻害性化合物に関する少なくとも３回の独立して実験において得た。ＩＣ₅₀値はグラフによって得、平均値を示す。Ｓ．Ｄ．，標準偏差。反応条件は実施例３に記載され、各反応混合物は１．０μＭのチューブリン、５％（ｖ／ｖ）のジメチルスルホキシド、２μＭの［³Ｈ］コルヒチン及び１００μＭの阻害剤を含んだ。インキュベーションは３７ ℃で１０分間行った。２−メトキシエストロンの場合を除いて３回の独立した実験で得た平均値を表に示し、２−メトキシエストロンの場合は２回実験したのみであった。Ｓ．Ｄ．，標準偏差。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ０７Ｊ 9/00 7433−4ＣＣ０７Ｊ 9/00 13/00 7433−4Ｃ 13/00 31/00 7433−4Ｃ 31/00 41/00 7433−4Ｃ 41/00 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．製薬学的に許容し得る担体中に、式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_oは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_f、Ｒ_i、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は −Ｉであり；Ｒ_gは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、 −Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_f、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、− ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_i 、Ｒ_j、Ｒ_mは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_gは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁ 、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、そしてＩＩ．Ｚ’は以下の通りに定義され：Ａ）Ｚ’はＸであり、ここでＸは＞ＣＯＲ₁、である、又は −ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｘ’は上記で定義されたＸであるか；又はＸ’は＞Ｃ＝Ｏである；そしてＩＩＩ．Ｚ”は以下の通りに定義され：であり、ここでｎは０〜６である；又は −ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉである；そしてＩＶ．但し、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_i、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m及びＲ_oが各々Ｈであり；Ｒ_fが−ＣＨ₃であり；Ｒ_gが−ＯＨであり；Ｚ’が＞ＣＯＨであり；Ｚ”が＞ＣＨ₂である場合、Ｒ_aは−Ｈではなく；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基である］の細胞有糸分裂−阻害化合物を含む、異常な細胞有糸分裂を阻害することができる薬剤の製造法。２．製薬学的に許容し得る担体中に、式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_kは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_i、Ｒ_kは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁ 、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_eは−Ｒ₁ 、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_kは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、 −ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_iは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_eは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、そしてＩＩ．Ｚ’は以下の通りに定義され：Ａ）Ｚ’はＸであり、ここでＸは＞ＣＯＲ₁、である、又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｘ’は上記で定義されたＸであるか；又はＸ’も＞Ｃ＝Ｏである；そしてＩＩＩ．Ｚ”は以下の通りに定義され：であり、ここでｎは０〜６である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基である］の細胞有糸分裂−阻害化合物を含む、異常な細胞有糸分裂を阻害することができる薬剤の製造法。３．製薬学的に許容し得る担体中に、式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_oは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_f、Ｒ_i、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は −Ｉであり；Ｒ_gは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、 −Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_f、Ｒ_k、Ｒ_lは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_i、Ｒ_j 、Ｒ_m、Ｒ_oは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_gは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁ 、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、そしてＩＩ．Ｚは以下の通りに定義され：であり、ここでｎは０〜６である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基である］の細胞有糸分裂−阻害化合物を含む、異常な細胞有糸分裂を阻害することができる薬剤の製造法。４．製薬学的に許容し得る担体中に、式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_kは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_i、Ｒ_kは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁ 、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_eは−Ｒ₁ 、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_dは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_i、Ｒ_kは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_eは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、 −ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、そしてＩＩ．Ｚは以下の通りに定義され：であり、ここでｎは０〜６である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基である］の細胞有糸分裂−阻害化合物を含む、異常な細胞有糸分裂を阻害することができる薬剤の製造法。５．製薬学的に許容し得る担体中に、式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_oは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_f、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、 −Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、 −ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_d、Ｒ_f、Ｒ_j、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、− ＯＣＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_e、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_k、Ｒ_lは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、 −ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−Ｂ_r、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＣ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_f、Ｒ_j、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、− ＯＲ₁、ＯＣＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉであり、Ｒ_e、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_k、Ｒ_lは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、 −Ｆ，−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨであり；ＩＩ．Ｚは以下の通りに定義され：Ａ）ＺはＸであり、ここでＸは＞ＣＯＲ₁，である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｘ’は上記で定義されるＸであるか、又はＸ’は＞Ｃ＝Ｏであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり；Ｃ…Ｃにより示される結合は不在であるか、又はＣ−Ｃ結合と組み合わされて、単位ＨＣ＝ＣＨである］の細胞有糸分裂−阻害化合物を含む、異常な細胞有糸分裂を阻害することができる薬剤の製造法。６．製薬学的に許容し得る担体中に、式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_oは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_e、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、 −Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_e、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ1、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉであり；Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_g、Ｒ_hは各々＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、一Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、 −ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＣ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_e、Ｒ_k、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁ 、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉであり、Ｒ_h、Ｒ_iは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ1、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁ 、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁ 、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨであり；Ｉ．Ｚは以下の通りに定義され：Ａ）ＺはＸであり、ここでＸは＞ＣＯＲ₁，である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｘ’は上記で定義されるＸであるか、又はＸ’は＝Ｏであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり；Ｃ…Ｃにより示される結合は不在であるか、又はＣ−Ｃ結合と組み合わされて、単位ＨＣ＝ＣＨである］の細胞有糸分裂−阻害化合物を含む、異常な細胞有糸分裂を阻害することができる薬剤の製造法。７．一般式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_oは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_f、Ｒ_i、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は −Ｉであり；Ｒ_gは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、 −Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_f、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、− ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_i 、Ｒ_j、Ｒ_mは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、− ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_gは＝Ｏ、− Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は− Ｃ≡ＣＨである、そしてＩＩ．Ｚ’は以下の通りに定義され：Ａ）Ｚ’はＸであり、ここでＸは＞ＣＯＲ₁、である、又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであるか；又はＸ ’は上記で定義されたＸであるか；又はＸ’は＞Ｃ＝Ｏである；そしてＩＩＩ．Ｚ”は以下の通りに定義され：であり、ここでｎは０〜６である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；但し３）Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_mが各々Ｈであり；Ｒ_fが−ＣＨ₃であり；Ｒ_iが−Ｈ、−ＯＨ又は＝Ｏであり；Ｒ_oが−Ｈ又は−Ｂｒであり；Ｚ’が＞ＣＯＨであり；Ｚ”が＞ＣＨ₂又は−ＯＨである場合、Ｒ_aは−Ｆ、−Ｂｒ、−ＯＨ又は−Ｈではなく；そして４）Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_i、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_mが各々−Ｈであり；Ｒ_fが−ＣＨ₃であり；Ｒ_gが−ＯＨであり；Ｚ”が＞ＣＨ₂である場合、Ｒ_a、Ｒ_oは各々独立して又は一緒に−ＯＣＨ₃又は−Ｈではなく；そして５）Ｒ_c、Ｒ_e、Ｒ_i、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_oが各々−Ｈであり；Ｒ_aが−Ｈ又は−ＯＣＨ₃であり；Ｒ_bが−Ｈ又は−ＣＨ₃であり；Ｒ_dが−ＯＨであり；Ｒ_fが−ＣＨ₃であり；Ｒ_gが＝Ｏであり；Ｒ_iが−ＯＨ、＝Ｏ又は−Ｃ≡ＣＨであり；Ｚ”が＞ＣＨ₂である場合、ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基である］の細胞有糸分裂−阻害化合物である化合物。８．一般式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_kは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_i、Ｒ_kは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁ 、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_eは−Ｒ₁ 、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_kは各々−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁ 、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_iは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_e は＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、そしてＩ．Ｚ’は以下の通りに定義され：Ａ）Ｚ’はＸであり、ここでＸは＞ＣＯＲ₁、である、又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｘ’は上記で定義されたＸであるか；又はＸ’も＞Ｃ＝Ｏである；そしてＩＩ．Ｚ”は以下の通りに定義され：であり、ここでｎは０〜６である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基である］の細胞有糸分裂−阻害化合物である化合物。９．一般式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_oは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_f、Ｒ_i、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は −Ｉであり；Ｒ_gは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、 −Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_f、Ｒ_k、Ｒ_lは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_i、Ｒ_j 、Ｒ_m、Ｒ_oは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_gは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁ 、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、そしてＩＩ．Ｚは以下の通りに定義され：であり、ここでｎは０〜６である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基である］の細胞有糸分裂−阻害化合物である化合物。１０．一般式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_kは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_i、Ｒ_kは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁ 、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_eは−Ｒ₁ 、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_dは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_i、Ｒ_kは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_eは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、ＩＩ．Ｚは以下の通りに定義され：であり、ここでｎは０〜６である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基である］の細胞有糸分裂−阻害化合物である化合物。１１．一般式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_oは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_e、Ｒ_f、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_j、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、 −Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、 −ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_d、Ｒ_f、Ｒ_j、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉであり；Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_e、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_k、Ｒ_lは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、 −ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁ 、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＣ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_d、Ｒ_f、Ｒ_j、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、− ＯＲ₁、ＯＣＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉであり、Ｒ_e、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_k、Ｒ_lは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、 −Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨであり；Ｉ．Ｚは以下の通りに定義され：Ａ）ＺはＸであり、ここでＸは＞ＣＯＲ₁，である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｘ’は上記で定義されるＸであるか、又はＸ’は＞Ｃ＝Ｏであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり；Ｃ…Ｃにより示される結合は不在であるか、又はＣ−Ｃ結合と組み合わされて、単位ＨＣ＝ＣＨである］の細胞有糸分裂−阻害化合物である化合物。１２．一般式：［式中：Ｉ．Ｒ_a−Ｒ_oは以下の通りに定義され：Ａ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_e、Ｒ_g、Ｒ_h、Ｒ_k、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＢ）Ｒ_a、Ｒ_e、Ｒ_l、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉであり；Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_g、Ｒ_hは各々＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、 −ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨである、又はＣ）Ｒ_a、Ｒ_b、Ｒ_c、Ｒ_e、Ｒ_k、Ｒ_m、Ｒ_n、Ｒ_oは各々独立して−Ｒ₁、−ＯＲ₁ 、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ、−Ｉであり、Ｒ_g、Ｒ_hは各々独立して＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₁ 、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｒ_iは＝Ｏ、−Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＯＣＯＲ₁、−ＳＲ₁ 、−Ｆ、−ＮＨＲ₁、−Ｂｒ、−Ｉ又は−Ｃ≡ＣＨであり；ＩＩ．Ｚは以下の通りに定義され：Ａ）ＺはＸであり、ここでＸは＞ＣＯＲ₁，である；又は −Ｒ₁、−ＯＲ₁、−ＳＲ₁、−Ｆ、−ＮＨＲ₂、−Ｂｒ又は−Ｉであり；Ｘ’は上記で定義されるＸであるか、又はＸ’は＝Ｏであり；ここで上記に示した各式において、Ｒ₁及びＲ₂は各々独立して−Ｈ、あるいは炭素数が１〜６の置換もしくは非置換のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり；Ｃ…Ｃにより示される結合は不在であるか、又はＣ−Ｃ結合と組み合わされて、単位ＨＣ＝ＣＨである］の細胞有糸分裂−阻害化合物である化合物。１３．該細胞有糸分裂−阻害化合物が２−メトキシエストラジオールである請求の範囲第１項の方法。１４．該細胞有糸分裂−阻害化合物が２−フルオロエストラジオールである請求の範囲第１項の方法。１５．該細胞有糸分裂−阻害化合物が２−ブロモエストラジオールである請求の範囲第１項の方法。１６．該細胞有糸分裂−阻害化合物が２−メトキシエストロンである請求の範囲第１項の方法。１７．該有糸分裂−阻害化合物が１７−エチニルエストラジオールである請求の範囲第１項の方法。１８．該化合物がさらにことを特徴とする請求の範囲第１又は２項の方法。であることを特徴とする請求の範囲第３又は４項の方法。であることを特徴とする請求の範囲第５又は６項の方法。２１．該化合物がさらにことを特徴とする請求の範囲第７又は８項に記載の化合物。であることを特徴とする請求の範囲第９又は１０項の化合物。であることを特徴とする請求の範囲第１１又は１２項の化合物。２４．Ｒ_a−Ｒ_pの少なくとも１つが−ＯＣＨ₃である請求の範囲第１〜６項のいずれか１つに記載の方法。２５．Ｒ_a−Ｒ_pの少なくとも１つが−ＯＣＨ₃である請求の範囲第７〜１２項のいずれか１つに記載の化合物。