JPH08511007A

JPH08511007A - タンデム合成ｈｉｖ−１ペプチド

Info

Publication number: JPH08511007A
Application number: JP7501144A
Authority: JP
Inventors: シーア、チャールズ、ディー．、ワイ．; チョン、ペレ; クライン、マイケル、エイチ．
Original assignee: コノートラボラトリーズリミテッド
Priority date: 1993-06-09
Filing date: 1994-06-08
Publication date: 1996-11-19
Also published as: US5759769A; WO1994029339A1; RU2201421C2; US5876731A; BR9406821A; CA2164818C; US5800822A; US5817754A; US5795955A; US5639854A; CN1128538A; AU693098B2; AU6967394A; EP0702693A1; CN1111540C; US5951986A; KR960703136A; CA2164818A1

Abstract

(57)【要約】ＨＩＶ−１に対する候補ワクチンであり、かつ診断的応用に有用な新規な合成ペプタイド類が提供されている。このペプタイド類はＨＩＶ−１のギャグ（ｇａｇ）蛋白のＴ−細胞エピトープ（ｅｐｉｔｏｐｅ）のアミノ酸配列、特にＨＩＶ−１アイソレート（ｉｓｏｌａｔｅ）のＶ３ループ（ｌｏｏｐ）蛋白のＢ−細胞エピトープのアミノ酸配列に直接連結しかつ配列ＧＰＧＲを含んでいるｐ２４Ｅおよび／または配列ＥＬＫＤＷＡを含んでいるｇｐ４１よりなる。タンデム（ｔａｎｄｅｍ）合成ペプタイド類の多様的（ｍｕｌｔｉｍｅｒｉｃ）形態類が提供されている。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称タンデム合成ＨＩＶ−１ペプチド関連出願のリファレンス本出願は、１９９３年６月９日に出願された米国特許出願０８／０７３３８７号の一部継続出願である。技術分野本発明は、免疫学の分野に関し、更に詳細には、人のイムノデフィシエンシイビールスプロテンインからのＴ−及びＢ−セルエピトープを含む合成ペプチドと関連する。背景技術ＡＩＤＳは、病気の人のイムノデフィシエンシイビールス（ＨＩＶ）との伝染の最終結果である病気である。現在、ＨＩＶ感染から人のポピュレーションを保護する有効なワクチンが無いので、有効なＨＩＶワクチンの向上が早急に要求されている。予めＨＩＶ−１粒子は化学処理により徹底的に不活性化され、ＨＩＶ −１の全てのエンベローププロテイン（ｇｐ１６０）をエンコードするワクチニアベクター、及び、精製されたレコンビナントｇｐ１２０は、キャンディデートＨＩＶワクチンとして評価される。不活性のＨＩＶ−１ビールス合成は、人中のＴ−セル−メディエートディレイド−タイプハイパーセンシティビティ（ＤＴＨ）反応を引き出す。そして、ワクシニア／ｇｐ１６０及びｇｐ１２０レコンビナントワクチンキャンディデートはビールスニュートラライジングアンチボディを減少させ、これらイムノゲンの何れも、効果的な人のＨＩＶワクチンとして示されていない（参照１−明細書の最後にリストされる参考文献を参照）。発明者のＨＩＶワクシノロジイの関心は、ワクチン中に組合せるための合成ＨＩＶ−１ペプチドを向上することであり、かつこれらＨＩＶ−１ペプチドワクチンと組合せて用いられるワクチニアＨＩＶ−１レコンビナントスブニットは、ＨＩＶ−１に対するより有効なイムネレスポンスのエリシテーションを引き起こすことも考慮する。合成ＨＩＶワクチンキャンディデートをデザインする為、バイラルアイソレート間の高度のコンサーブドシークエンスを含むイムノゲニックバイラルＢ−セルニュートラリゼーションエピトープ（ＢＥ）は、官能性Ｔ−ヘルパーセルデターミナント（ＴＨＤ）にリンクされて、強くかつ長いラスティングクロス−プロテクティブアンチボディレスポンスを引出す。更に、ＨＩＶ−スペシフィックサイトトキシックＴ−リムフォサイト（ＣＴＬ）エピトープは、合成コンストラクション中に含まれ、ＨＩＶ伝染に対するセル−メディエイテッドイムニティを引き起こしてもよい。あるＴ−及びＢ−セルエピトープ間の特定の好適なスペーシャルな関係は、タンデムエピトープが効果的に進行しそれによりイムノゲニックを示すのに必要かもしれない。したがって、ＨＩＶ−１中の適当なＴ−及びＢ−セルエピトープシークエンスを特定し、それらオプティマルコンフィグレーション中で組合せることは重要であり、それによりＴ−及びＢ−セルメモリーの両方が、所望のスペシフィシティプロダクトのエフェクティブリー及びアンチボディを示される。ＴＨＤはユニバーサルでなく見出され、かつ特有のメジャーヒストコンパチビリティコンプレックス（ＭＨＣ）クラスＩＩと関連するときだけ、免疫学的作用がある。Ｔ−エピトープドミナンスの特徴的なヒエラルキーが存在する。したがって、効果的な合成ＡＩＤＳワクチンを向上するために、種々のＨＩＶ−１、ｇｐ１６０、ｇａｇ、ｐｏｌ及び他のｇｅｇｅプロダクトのモストポテントなＴＨＤを利用することが重要である。最近のスタディディは、ｇａｇｇｅｇｅプロダクトはＨＩＶ感染に対するイムネレスポンスを引出すクルーシャルロールを演ずるかもしれないことを示している。したがって、ＡＩＤＳのクリニカルプログレッションは、ｇａｇｐ２４プロテインに対するサークラトリーアンチボディの減少と関連し、かつイムノドミナントｇａｇｐ１７ペプチドに対し増加しに対するアンチボディは、ＨＩＶ−１感染の抑制が可能である（参照２、３）。我々の刊行された国際特許出願ＷＯ９０／１３５６４中、コアプロテインのＴ −セルエピトープ、ＨＩＶ−１のｐ２４Ｅ、及び、ＨＩＶ−１のコアプロテインまたはエンベロープのＢ−セルエピトープのアミノ酸シークエンスにリンクされたＴ−セルエピトープのアミノ酸シークエンスを含む合成キメリックペプチドの構造の特定及び特徴の記載がある。Ｂ−セルエピトープをＴ−セルエピトープにリンクすることより、Ｂ−セルエピトープに対するイムネレスポンスは引き起こされる。そこでは、Ｂ−セルエピトープがそのようにリンクされないとそのようなレスポンスは観察されない。ｐ２４Ｂ−セルエピトープ、ＢＥ３エピトープ、ＥＮＶエピトープ及びＶ３Ａエピトープ、エピトープ間のリンカーシークエンスと共にまたは無しの、ＨＩＶ−１／ＬＡＶアイソレートからの全ての誘導体に関する、その発行された出願中に、データが存在する。その発行されたＷＯ出願中でテストされた特定の構造は、ダイレクトカップリングによりｐ２４ＥのＣ−ターミナルエンドに対し、または、二つのプロリンレシデュによりまたはダイレクトカップリングによりｐ２４ＥのＮ−ターミナルエンドに対し、リンクされたＢＥ３、二つのプロリンレシデュによりｐ２４ＥのＣ −ターミナルエンドおよびＮ−ターミナルエンドに対しリンクされたＥＮＶ、および、二つのプロリンレシデュによりｐ２４ＥのＮ−ターミナルエンドに対しリンクされたＶ３Ａである。ＨＩＶ−１／ＬＡＶアイソレートからのＨＩＶ−１ｇｐ１２０の種々のループの発行物（レシデュー３０８−３２７）テストされたＶ３Ａシークエンスは、プロライン−プロラインリンカーと共にｐ２４ＥのＮ−ターミナウスに対し分子をリンクすることによりイムノゲニックにされる。リコンビナントミーンズにより、ｇａｇプロテインからのアミノ酸１５−５１２及びＨＩＶ−１のＬＡＶアイソレートのｅｎｖプロテインの４４−１４０（ＨＴＬＶ−ＩＩＩ）、すなわち、如何なる合成ペプチドよりも長い、１０９３アミノ酸を含むポリペプチドまたはプロテインを含むフュージョンプロテインを、提供することが、米国特許４９２５７８４（Ｃｒｏｗｌ）から知られている。これは、長さが１５０アミノ酸を越えず、かつ一般には５０アミノ酸を越えない。そのような長い分子フュージョンプロテインは、ダイアグノスティックアップリケーション及びワクチンマテリアルに有用として記載されている。人のイムノデフィシエンシイビールス（ＨＩＶ）のエンベロープグリコプロテイン（ｅｎｖ）は、独立したアイソレート間で高度にバリアブルであり、またシングルインフェクテッドインディビジュアルからのシークエンシャルアイソレートもまたそうである。ｅｎｖ中のアミノ酸のバリアビリティは特定の種々のレジオン中で、他の少ないバリアブルのレジオンとともに濃縮される（殆どは、イニシャルｇｐ１６０ｇｅｎｃプロダクトにより生成したｇｐ１２０表面部）。しかし、殆どの種々のレジオンは、しばしばニュートラライジングェピトープを含み、それによりビールスは、部分的に、ホストのイムネをまぬがれ、パーシステントインフェクションを示す。このバリアビリティは、通常ＨＩＶ−１のテストサンプルとして用いられるセパレートされたまたはミックスされたリエージェントとともに、特定のインテラクションに基づくダイアグノステック技術に問題がある。このバリアビリティはまた、いくらかの適当な試薬がＨＩＶ−１の多くのストレインに対してレスポンスを与えなければならないので、ワクチンまたはイムネセラピーの可能性において問題がある。したがって、多くの免疫学上独立したＨＩＶアイソレートのホスト中のイムネレスポンスの発生において、二つの問題が存在する。第１に、アウトブレッドポピュレーション中のいかなる特有のホストは、特有のＨＬＡハプロタイプセルエピトープを有し、したがって相違的に、特有のＴ−セルエピトープに対しレスポンドする。第２に、アンチボディは、理解されないであろうし、また多数の免疫学上独立したＨＩＶアイソレートを中和する。そして、それは特有のＨＩＶアイソレート中で、プライマリーフィールドアイソレートとして患者からフレッシュに収穫される。ダイアグノウス、イムノロジカルリエージェントの生成、ＨＩＶに対するトリートメント及びバクシネーション、Ｔ−セルエピトープ合成ペプチド、（それに対し多数のホストがリスポンドする）、及び異なるプライマリーフィールドアイソレートを含むＨＩＶアイソレートプロテインからのＢ−セルエピトープを提供することが有利である。発明の開示本発明は、合成ペプチドの提供に対し関連し、特に、合成ＨＩＶ−１ペプチドであって、ＨＩＶによる感染に対してイムネレスポンスのマウンティングに有用なもの、またはＨＩＶ感染の発見に有用なものに関する。そこにおいて、合成ＨＩＶ−１ペプチドはＨＩＶ−１コアプロテインのＴ−ヘルパーデターテミナント（Ｔ−セルエピトープ）を含み、特に、アミノ酸シークエンスＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫのｐ２４Ｅ（ＳＥＱＩＤＮＯ：２）、及びＨＩＶ−１プロテインからのＢ−セルエピトープに対応するアミノ酸シークエンス、特に、ｇｐ１６０，ｇａｇ及びｐｏｌプロテイン、そのような合成ＨＩＶ−１ペプチド、及び組成物の少なくとも一つを含むＡＩＤＳに対するワクチンである。本発明は、工程及びそのような合成ＨＩＶ−１ペプチドを用いたＨＩＶアンチゲンの発見のためのダイアグノスチックキットに関する。ここで用いられる「合成ペプチド」の語により、後に記載する実施例１中に示されるようなペプチド合成プロセスを用い、アミノ酸シークエンスを含むＢ−セルエピトープに対しアミノ酸シークエンスを含むＴ−セルエピトープを組合せ、合成Ｔ−ＢまたはＢ−Ｔコンストラクトを形成する意味となる。北アメリカ及び西ヨーロッパのＡＩＤＳポピュレーション中で見出されたプリバレントＨＩＶ−１ステインは、ＨＩＶ−１（ＭＮ）アイソレートに属する。したがって、このセロタイプに対し保護できる合成ＨＩＶワクチンはＴＨＤとしてｐ２４Ｅを含んでもよく、Ｂ−セルエピトープとしてＨＩＶ−１（ＭＮ）プロテインのエピトープの中和を含む。ＨＩＶ−１（ＭＮ）エンベローププロテイン、ｇｐ１２０のエクストラセルラー成分中の二つのリージョンまたはエピトープクルスタースは、ビールスに対するニュートラライジングアンチボディを引き起こす事が示されている。これら二つのリージョンのうちの一つは、ｇｐ１２０（ＭＮ）のアミノ酸レシデュー３０１−３３５を包む第３のハイパーバリアブル（ｖ３）ループである（参照４）。ストレイン及びグループ−スペシフィックモノクロナールアンチボディは、ＭＮアイソレートと共に、示され、Ｖ３ループのクラウンリージョンでの異なるコアアミノ酸シークエンスとして理解されている（参照５）。中和する抗体類を引き出すｇｐ１２０のその他のエピトープ群（ｃｌｕｓｔｅｒ）はそのＣＤ４結合位置（ｓｉｔｅ）である。ＨＩＶ−１で感染した個体（人）およびチンパンジーから単離したモノクロナル抗体についての研究はそのＣＤ４結合位置における中和エピトープ類はｇｐ１２０の多数の位置からの非隣接アミノ酸残留物（ｒｅｓｉｄｕｅｓ）によって形成される。加うるに、これら２つのタイプの中和する抗体類についての結果はＨＩＶ−１ビールスの一定のドーズのｉｎｖｉｔｒｏの中和は、そのＣＤ４結合位置に対して反応しているそれのよりもＶ３−特異（ｓｐｅｃｉｆｉｃ）な中和するモノクロナル抗体のはるかに低い濃度によって達成されうることを示した。本発明の合成ペプタイド類の構築の際、本発明者らはそのＶ３（ＭＮ）ループのクラウン領域においてそのＴＨＤのアミノ（Ｎ−）もしくはカルボキシ（Ｃ− ）末端にリンクした高度に保存された（ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ）配列（ＧＰＧＲ− ＳＥＱＩＤＮＯ：１）に隣接する異種のフランキング配列類、ｐ２４Ｅ（ＧＰＫＥＰＲＤＹＶＤＲＦＹＫ−ＳＥＱＩＤＮＯ：２）を含む線状合成ＨＩＶ −１（ＭＮ）ペプタイド類（下記表Ｉに示す−表類は記述テキストの終りに現われる）のパネルを化学的に合成した。加うるに、発明者らは線状合成ペプタイド類の追加的パネル類（下記表ＶＩ，ＶＩＩ，ＩＸ，ＸおよびＸＩに示す）を合成した。加うるに、図１に示したような配列類を含むＢ−細胞エピトープがｐ２４ＥのＣ−末端にリンクされた５つの四量体ペプチッド類が調製されかつ研究された。すなわち、線状ｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮ配列を含むｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮ（ＭＡＰ）、線状ＣＬＴＢ−３４配列を含むＣＬＴＢ３４（ＭＡＰ）、線状ＣＬＴＢ−３６配列を含むＣＬＴＢ−３６（ＭＡＰ）、線状ＣＬＴＢ−９１配列を含むＣＬＴＢ− ９１（ＭＡＰ）、および線状ＶＰ配列を含むＶＰ−Ｔ−Ｂ（ＭＡＰ）であり（図１参照）、各ＶＰ配列はＨＩＶ−１（ＭＮ）およびＨＩＶ−１（ＢＲＵ）アイソレートのそれぞれ３０７から３１６および３１５から３２５残留物（ｒｅｓｉｄｕｅｓ）のハイブリッドＶ３配列を含み、ｐ２４ＥのＣ−末端にリンクしている。本発明の一態様によれば、そのＮ−末端もしくはＣ−末端において、ＨＩＶアイソレートのエンベロープ（ｅｎｖｅｌｏｐ）蛋白のＶ３ループのＢ細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列にリンクした人の免疫欠乏（ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ）ビールス（ＨＩＶ）アイソレートのギャグ（ｇａｇ）蛋白のＴ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列よりなる合成ペプタイドが提供され、その際、該Ｎ−末端に位置した場合は配列を含むＢ −細胞エピトープおよび配列を含むＴ−細胞エピトープは直接カップルされている。かかる合成ペプタイド類は新規であり前述のＷＯ９０／１３５６４には開示されていない。本発明のもう一つの態様によれば、そのＮ−末端もしくはＣ−末端において、配列Ｘ₁ＬＫＤＷＸ₂、但しＸ₁はＥ、Ａ、ＧまたはＱでありＸ₂はＡまたはＴであり、特にＥＬＫＤＷＡ（引例１０参照）またはＨＩＶ特異的抗漿液（ａｎｔｉｓｅｒｕｍ）を引き出すことができかつ配列Ｘ₁ＬＫＤＷＸ₂を認識する（ｒｅｃｏｇｎｉｚｉｎｇ）配列よりなるＨＩＶアイソレートのｇｐ４１蛋白のＢ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列にリンクした人の免疫欠乏ビールス（ＨＩＶ）アイソレートのギャグ蛋白のＴ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列よりなる合成ペプタイドが提供される。かかる合成ペプタイド類は新規であり前述のＷＯ９０／１３５６４には開示されていない。本発明の更なる態様によれば、複数の個々の怪物的（ｃｈｉｍｅｒｉｃ）合成ペプタイド類がリンクして形成された多様的（ｍｕｌｔｉｍｅｒｉｃ）分子よりなり、該個々の合成ペプタイドの各々は、ＨＩＶアイソレートのギャグまたはエンベロープ蛋白のＢ−細胞エピトープよりなるアミノ酸配列にリンクした人の免疫欠乏ビールス（ＨＩＶ）アイソレートのギャグまたはエンベロープ蛋白のＴ− 細胞エピトープよりなるアミノ酸よりなっている合成ペプタイド分子が提供される。かかる多様的分子類は新規であり前述のＷＯ９０／１３５６４には開示されていない。本発明は更にこゝに提供した合成ペプタイド類のどれかに特異的な抗体類およびこゝに提供した合成ペプタイドのための核酸配列類のコーディングよりなり、その核酸配列類は表示ベクトル中に組み入れられうる。本発明が関係しているＨＩＶアイソレートは一般にＨＩＶ−１アイソレートである。配列を含むＴ−細胞およびＢ−細胞エピトープの配列よりなる合成ペプタイド類のアミノ酸配列類は、ＬＡＶ，ＢＲＵ、ＭＮ、ＳＦ２、ＲＦ、ＰＲＩ、１７１４、２０５４、ＨＸＢ２、Ｚ６、ＢＸ０８、ＩＩＩＢおよびＳＣを含む種々のＨＩＶ−１アイソレート類のアミノ酸配列でありうる。異なるアイソレート類のコンセンサス配列類もまた採用されうる。そのＢ−細胞エピトープ含有アミノ酸配列がＶ３ループ蛋白からのものである本発明の実施態様においては、そのアミノ酸配列は好ましくはＸ₁がＰまたはＺ、Ｘ₂がＲ、ＫまたはＱである配列ＧＸ₁ＧＸ₂もしくはＨＩＶ特異的抗漿液を引き出すことができかつ配列ＧＸ₁ＧＸ₂、とりわけ配列ＧＰＧＲを認識する配列よりなっている。配列を含むＢ−細胞エピトープは少なくとも２つの異なるＨＩＶ −１アイソレート類がらのＶ３ループ配列類を含むＢ−細胞エピトープよりなることができ、また少なくとも２つのＨＩＶ−１一次アイソレート類のＶ３ループのコンセンサス配列よりなることができる。本発明の種々の実施態様において、アミノ酸配列を含むＴ−細胞エピトープは好ましくはｐ２４蛋白の配列、たとえばＰ２４Ｅ、Ｐ２４Ｎ、Ｐ２４Ｌ、Ｐ２４ＭおよびＰ２４Ｈ、特にＰ２４Ｅよりなっている。ＨＩＶ−１アイソレートのなかに高度に保存されているこれらのペプタイド類の配列類は後記する表ＩおよびＩＸ中に記載されている。かかる配列類は選択された配列類のどれかの一部、変種（ｖａｒｉａｔｉｏｎ）もしくは突然変異種（ｍｕｔａｎｔ）であって選択された配列のＴ−細胞の性質を保持しているものも含んでいる。Ｂ−細胞エピトープよりなるアミノ酸配列はＴ−細胞エピトープよりなるアミノ酸配列のＣ−末端アミノ酸に直接カップルすることができる。配列を含むＢ−細胞エピトープは追加的に更にＨＩＶＴ−細胞エピトープを含むアミノ酸配列にリンクすることができ、それはＨＩＶのギャグもしくはエンベロープ蛋白のアミノ酸配列であることができる。配列を含むＢ−細胞エピトープはまたＨＩＶのＢ−細胞エピトープを含むアミノ酸配列に更にリンクすることができる。ｇｐ４１蛋白のＢ−細胞エピトープ類でＸ₁ＬＫＤＷＸ₂配列を含むものは互いにジョイントするかまたはＶ３ループのＢ−細胞エピトープを含むアミノ酸配列類とジョイントすることができる。こゝに提供した多様的分子類は同一の個々の怪物的合成ペプタイド類の複数よりなることができ、そして好ましくは上に定義した合成ペプタイド類よりなっている。本発明はさらに本発明に従って提供された少なくとも１つの合成ペプタイドもしくは合成ペプタイド類のどれか１つをエンコードする（ｅｎｃｏｄｉｎｇ）少なくとも１つの核酸分子の免疫効果のある（ｉｍｍｕｎｏｅｆｆｅｃｔｉｖｅ）量とそのための薬学的に許容できるキャリアよりなる免疫のための（ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ）組成物を提供するものである。加うるに、宿主（ｈｏｓｔ）にこゝに提供した免疫のための組成物を投薬することよりなる宿主、好ましくは人という宿主に免疫性を与える方法を提供するものである。その免疫のための組成物は複数の免疫学的に区別できる（ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ−ｄｉｓｔｉｎｃｔ）ＨＩＶ−１アイソレート類に対して免疫応答を提供するために選択された、そして好ましくはどんな特殊なＴ−細胞エピトープに対してもそれぞれ特異的に応答しうる複数の宿主中で免疫応答を提供するために選択された合成ペプタイド類の複数の組成物よりなることができる。免疫のための組成物中で使用しうる特に有用なペプタイド類の”カクテル”は、下記の表中でＣＴＬＢ−３６、ＣＴＬＢ−９１およびＢＸ０８と記されているペプタイド類よりなっている。この組成物は下記表ＸＩ中でＭＰＫ−２について記されているペプタイドをさらに含んでいる。免疫のための組成物は粘膜的投薬もしくは非経口的投薬のためにフォーミュレートしてもよい。免疫のための組成物はさらに少なくとも１つの他の免疫的もしくは免疫刺激的物質、特にリン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウムのようなアジュバントを含んでいてもよい。本発明は試験サンプル中のＨＩＶ特異的抗体類を検出するために有用な診断キット類にも及ぶ。そのキットは次のものよりなっている：（ａ）表面（ｓｕｒｆａｃｅ）；（ｂ）その表面上に固定されたＨＩＶ−特異的抗体類に対してエピトープ的に（ｅｐｉｔｏｐｉｃａｌｌｙ）特異なアミノ酸配列を有し、そしてここに開示したような少なくとも１つのペプタイド；（ｃ）その抗体類とその少なくとも１つの免疫化された（ｉｍｍｕｎｏｂｉｌｉｚｅｄ）ペプタイドとを接触させてコンプレックスを形成させる手段；および（ｄ）そのコンプレックスを検出する手段。本発明のさらなる態様においては、試験サンプル中のＨＩＶ抗原を検出するための診断キットが提供され、そのキットは次のものよりなっている：（ａ）表面；（ｂ）その表面上に固定されたＨＩＶ抗原の個々の（ｄｉｓｔｉｎｃｔ）エピトープ類に対してエピトープ的に特異でかつ相互反応的でなく（ｎｏｎ−ｃｒｏｓｓｒｅａｃｔｉｖｅ）、かつこゝに開示したペプタイド類に対してレイズされた（ｒａｉｓｅｄ）抗体；（ｃ）その抗体類とそのＨＩＶ抗原とを接触させてコンプレックスを形成させる手段；および（ｄ）そのコンプレックスを検出する手段。図面の簡単な説明図１は、マイス及び／又はモルモットにおいてＨＩＶ−１に対して多間代けいれん抗体応答を誘出可能な４量体ペプチドの構造を示す。図２は、実施態様に示すように、非感染、非反復性ＨＩＶ−１（ＩＩＩＢ）− 類似の粒子により免疫化し、続いてＨＩＶ−１ペプチドカタテルでブースト（ｂｏｏｓｔ−ｉｎｇ）した、モルモットの抗体応答をグラフ化したものを含む。図３は、実施態様に示すように、非感染、非反復性ＨＩＶ−１（ＩＩＩＢ）− 状の粒子でプライミング（ｐｒｉｍｉｎｇ）後にあがり、さらにＨＩＶ−１ペプチドカクテルでブーストした、モルモット抗血清の反応性をグラフ化したものを含む。発明の一般的説明一実施態様において、本発明は、ＨＩＶ−１核蛋白質、Ｐ２４の高度に保護されたＴ−セルエピトープ、Ｐ２４ＥのＮ−又はＣ−終末に連結したＶ３ループの抗原性決定因子に相当する、アミノ酸シーケンスを有する、ペプチドを構成する（表Ｉに示す）。これらのペプチドは、それぞれ、アミノ酸シーケンスを含むＴ −セルエピトープとしてＰ２４Ｅ（ＨＩＶ−１（ＭＮ）核蛋白質、Ｐ２４）のＮ −及びＣ−終末に連結した、肉太活字で印刷したＶ３（ＭＮ）ループのアミノ酸３１１−３２５に相当する、シーケンスＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫ（Ｖ３ＭＮ−Ｐ２４Ｅ−シーケンスＩＤ番号：１０）及びＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（Ｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮ−シーケンスＩＤ番号：９）を、例えば持つことができる［本明細書中、特に断らない限り、肉太のシーケンスはＢ−セルエピトープ含有アミノ酸シーケンスである］。また、これらのペプチドは、例えば、それぞれＰ２４ＥのＮ−及びＣ−終末に連結した、肉太活字で印刷したＶ３（ＭＮ）ループのアミノ酸に相当するシーケンス、ＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫ（ＣＬＴＢ−３２−シーケンスＩＤ番号：１３）及びＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦ（ＣＬＴＢ−２８−シーケンスＩＤ番号：１２）を持つこともできる。これらのペプチドはまた、それぞれＮ−及びＣ− 終末に連結した、肉太活字で印刷した、Ｖ３（ＭＮ）ループのアミノ酸３０９− ３２５に相当するシーケンス、ＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫ（ＣＬＴＢ−３５−シーケンスＩＤ番号：７）及びＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＬＴＢ−３４−シーケンスＩＤ番号：６）を持つこともできる。これらペプチドは、また、それぞれＮ−及びＣ−終末に連結した、肉太活字で印刷したＶ３（ＭＮ）ループのアミノ酸３０７−３２５に相当するシーケンス、ＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫ（ＣＬＴＢ−３７−シーケンスＩＤ番号：４）及びＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＬＴＢ−３６−シーケンスＩＤ番号：３）を持つこともできる。これらペプチドは、マイス、モルモット及びモンキーにおいて、ポリクロナルなＨＩＶ−特定抗体応答を引き出すことが可能である。他の実施態様において、本発明は、マイス又はモルモットにおいてＨＩＶ−１に対してポリクロナルな抗体応答を誘い出すことのできる（表ＸＩＩＩ）、４量体ペプチド（図１に開示している）などの多量体分子を構成する。これら多量体分子は、例えば、今後Ｐ２４−Ｖ３ＭＮ（ＭＡＰ−多抗原性ペプチド）と呼ぶ、リシン（溶解素）分岐ペプチド合成技術を使用して４量体化した４つの線状Ｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮシーケンス（シーケンスＩＤ番号：９）を持つことができる。これらの４量体はまた、例えば、今後ＣＬＴＢ−３４（ＭＡＰ）と呼ぶ、４つのリシン−分岐ＣＬＴＢ−３４シーケンス（シーケンスＩＤ番号：６）を含むことができる。これら４量体はさらに、例えば、以後ＣＬＴＢ−３６（ＭＡＰ）と呼ぶ４つのリシン−分岐ＣＬＴＢ−３６シーケンス（シーケンスＩＤ番号：３）を含むこともできる。これら４量体はまた、例えば、以後ＣＬＴＢ−９１（ＭＡＰ）と呼ぶ４つのリシン−分岐ＣＬＴＢ−９１シーケンス（シーケンスＩＤ番号：２０）を含んでいてもよい。これら４量体はまた、例えば、Ｐ２４Ｅ（シーケンスＩＤ番号：２）のＣ−終末に連結した、ハイブリッドＶ３シーケンス、ＶＰ（ＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ−シーケンスＩＤ番号：１６）からなる、４つのリシン−分岐ＶＰ−Ｔ−Ｂ線状シーケンス、ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（シーケンスＩＤ番号：１５）を含むこともできる。ハイブリッドＶ３シーケンスは、それ自身、そのＣ−終末端を経由して、肉太活字で示したＶ３（ＭＮ）ループのアミノ酸シーケンス３１５−３２５（ＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ−シーケンスＩＤ番号：１８）のＮ−終末端に連結した、肉太活字で印刷したＶ３（ＢＲＵ）ループのアミノ酸３０７−３１６（ＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲ−シーケンスＩＤ番号：１７）を構成する。本発明の新規な免疫原性組成物は、ＨＩＶ−１の細胞外膜領域、ｇｐ１２０、ｇｐ４１及び核蛋白質ｐ２４から特定の抗原性決定因子を連結するペプチドとしてつくられた、ＨＩＶの免疫原性Ｔ−及びＢ−セルエピトープを含むペプチドを構成する。これらの組成物は、以下の実施例にあげたデータにみられるように、マイス、モルモットならびにモンキーで実験証明する哺乳動物に投与したとき、ＨＩＶ−特定体液免疫性応答を引き出す免疫処置のために利用できる。ペプチドの合成合成ペプチド−ベースＨＩＶ免疫原をデザインするために、Ｔ−セルエピトープを含むペプチドのＮ−又はＣ−終末のいずれかに連結する、Ｖ３ループ及びｇｐ４１からのシーケンスを含む線状ペプチドを、実施例１に記載したように、自動化したＡＢＩ４３０Ａ固相ペプチド合成器を用いて化学的に合成した。哺乳動物においてＨＩＶ−特定免疫性応答を誘い出す能力を比較するために、フロイント補助薬（Ｆｒｅｕｎｄ’ｓａｄｊｕｖａｎｔ）（ＦＡ）又はリン酸アルミニウム（ａｌｕｍ）中で異なる組合せを調整した。各線状直列式エピトープ、すなわち、Ｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮ、ＣＬＴＢ−３４、ＣＬＴＢ−３６、ＣＬＴＢ−９１及びＶＰ−Ｔ−Ｂのリシン分岐ペプチド合成技術を用いる４量体化により生成した、Ｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮ（ＭＡＰ）、ＣＬＴＢ３４（ＭＡＰ）、ＣＬＴＢ−３６（ＭＡＰ）、ＣＬＴＢ−９１（ＭＡＰ）及びＴ−Ｂ−ＶＰ（ＭＡＰ）と呼ばれる５つの多量体分子も製造した。これらをアルム（ａｌｕｍ）又はＦＡ中で投与した際の、哺乳動物におけるＨＩＶ特定免疫応答を引き出す能力を検討した。哺乳動物における線状ＨＩＶペプチドの免疫原性動物において抗体応答を引き出す線状ＨＩＶペプチドの能力を、ＦＡ中で乳化したか又はアルムに吸着した各個有のペプチドで、マイス、モルモット又はモンキーを免疫処置することによって調べた。各１００μｇの４回の皮下注射後、ペプチド−特定ＥＩＡ及び試験管中の合胞体−ブロック定量法（ｓｙｎｃｙｔｉａ −ｂｌｏｃｋｉｎｇａｓｓａｙ）によってＩｇＧ抗体応答を決定した（表ＩＩ、ＩＩＩ，ＩＶ、Ｖ、ＸＩＩ）。Ｖ３（ＭＮ）ループの冠部（ＧＰＧＲ）に接する（ｆｌａｎｋ）がｐ２４Ｅシーケンスを欠く、異なるシーケンスを含む４つの異なるＶ３（ＭＮ）ペプチド、すなわち、Ｖ３ＭＮ、ＣＬＴＢ−２９、ＣＬＴＢ−５５及びＣＬＴＢ−５６は、これらがＦＡ中又はリン酸アルミニウム（ａｌｕｍ）中で注入するか否かにかゝわらず非免疫性又は殆んど免疫性がなかった（表ＩＩＩ参照）。これらのペプチドの非免疫原性を強めるためのキャリヤー機能を、Ｔ−セルエピトープ及びＢ−セルエピトープからなるそれぞれの合成ＨＩＶ−１ペプチドで行った研究により示した。このようにして、Ｔ−Ｂ配向にある合成ＨＩＶ−１ペプチドは、各フリーのＶ３（ＭＮ）ペプチド又はＢ−Ｔ相当物よりも極めて大きくＶ３（ＭＮ）−特定抗体応答を引き出した（表ＩＩＩ）。これら研究の成果は、それ故、ｐ２４Ｅに関するＶ３（ＭＮ）ペプチドの配向が、本発明の合成ＨＩＶ−１ペプチドの免疫原性に影響を与えたことを示した。ＦＡ又はリン酸アルミニウム中で投与した個々の合成ＨＩＶ−１に対して生じた、ネズミ及びモルモットの抗血清中において測定された各抗−Ｖ３ペプチド抗体滴定量の比較により、モルモット及びマイスにおいてＣＬＴＢ−３６が最も免疫原性のあるペプチドであることがわかった（表ＩＩＩ）。ＣＬＴＢ−３６の免疫原性は、抗体がウイルスを無力化する霊長類において、強力なペプチド−特定抗体応答を引き出すために補助薬ＩＳＡ５１中で調剤した際のこのペプチドの能力によってさらに証明された（表ＩＶ）。重要なことに、ＣＬＴＢ−３４及びＣＬＴＢ−３６に対してあがったネズミとモルモットの抗血清は、各種のＨＩＶ−１血清型のＶ３ペプチドに対して交差反応できることであった。免疫原性Ｔ−Ｂペプチドの構築のためのｐ２４Ｅ及びＶ３シーケンスの新規な使用は、ｐ２４Ｅ−ＳＰ１０（Ａ）、ＣＬＴＢ−９１、ＣＬＴＢ−８４及びＴ１−ＳＰ１０（Ａ）−ＭＮ（表Ｉ）と呼ばれる３つの別のキメラペプチドで行った研究によってさらに説明される。以下の表ＩＩＩの結果は、ＦＡ又はアルムで投与したとき、ｐ２４ＥのＣ−終末に連結したＶ３（ＭＮ）ループのＮ−終末端（ＣＴＲＰＮＹＮＫＲＫＲＴＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫ −シーケンスＩＤ番号：２０）からなるシーケンスＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＣＴＲＰＮＹＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫ（シーケンスＩＤ番号：１９）をもつｐ２４Ｅ−ＳＰ１０（Ａ）が、モルモットにおいて良好な滴定量のＣＬＴＢ−５６−特定抗体を生じさせることができたことを示した。アルムで調剤したｐ２４Ｅ−ＳＰ１０（Ａ）は、同様にバルブ（Ｂａｌｂ）／ｃ（Ｈ−２ｄ）において高い抗−ＣＬＴＢ−５６抗体応答を引き出した。これに対してＴ− セルエピトープ、Ｔ１（ＫＱＩＩＮＭＷＱＥＶＥＫＡＭＹＡ−シーケンスＩＤ番号：２２）のＣ−終末に連結したＶ３（ＭＮ）ループの同じＮ−終末端を含むシーケンスＫＱＩＩＮＭＷＱＥＶＥＫＡＭＹＡＣＴＲＰＮＹＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫ（シーケンスＩＤ番号：２１）を有するＴ１−ＳＰ１０（Ａ） −ＭＮ［文献（Ｒｅｆ．４）中に報告されている］は、モルモット及びバルブ／ｃ（Ｈ−２ｄ）マイスで免疫性が殆んどないことがわかった。これらデータは、ｐ２４ＥがＴ１よりも、Ｖ３（ＭＮ）ループのＮ−末端シーケンスのための、より有効なキャリヤーとして役立つことを示唆したものである。さらに、Ｔ１はＣＬＴＢ−５６の免疫原性の強化を仲立ちすることがわかった。この結果は、ＦＡ又はアルム中のＴ−セルエピトープＴ１に連結したＣＬＴＢ−５６からなる、シーケンスＫＱＩＩＮＭＷＱＥＶＥＫＡＭＹＡＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（シーケンスＩＤ番号：２３）のＣＬＴＢ−９１ペプチドにより免疫性にしたモルモットの血清サンプル中で測定した高いＣＬＴＢ−５６−特定抗体滴定量と、アルム中のＣＬＴＢ−９１で注入したマイスによって示された。ＣＬＴＢ −９１は、Ｔ１−ＳＰ１０（Ａ）−ＭＮとはＴ１のＣ−終末に連結したＶ３（ＭＮ）シーケンスにおいてのみ異なるものであるから、これらデータは、Ｔ１−ＳＰ１０（Ａ）−ＭＮにおいて使用されるＶ３（ＭＮ）ループのＮ−末端よりもＣＬＴＢ−５６が、より良好なＢ−セルエピトープであることを示している。さらに、別のＴ−セルエピトープのＣ−終末に連結したＣＬＴＢ−５６シーケンスを含むＣＬＴＢ−８４及びｐ２４のシーケンスＧＨＫＡＲＶＬＡＥＭＳＱＶＴ（シーケンスＩＤ番号：３０）からなるＰ２４Ｍをアルムで投与したとき、これらもまたモルモットで極めて免疫性が高いことがわかった。ＨＩＶ−１合成ペプタイドの他の５個のパネルが製造された。表ＶＩ（ＳＥＱＩＤＮＯＳ：３８から４７）に示された第１のパネルにおいて、２つの異なるＵ．Ｓ．クリニカルＨＩＶ単離体のＶ３シーケンス，１７１４（ＮＴＲＫＲＩＨＭＧＰＧＲＡＦＹＡＴＧＤＩＩＧ−ＳＥＱＩＤＮＯ：４８）および２０５４（ＮＴＲＫＧＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＧＥＩＶＧＤＩＲＱ−ＳＥＱＩＤＮＯ：４９）はＰ２４ＥおよびＴ１のＣ−末端にリンクされてＰ２４Ｅ−１７１４およびＴ１−２０５４をそれぞれ形成する。さらにニューヨークおよびアムステルダム単離体のコンセンサスであるＶ３コンセンサスシーケンス（共通配列），ＰＲＩ（ＮＴＲＫＳＩＰＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＧ−ＳＥＱＩＤＮＯ：５０）はｐ２４Ｅ、Ｔ１又はｐ２４ＭのいずれかにリンクしてそれぞれＣＬＴＢ−ＰＲＩ、Ｔ１−ＰＲＩおよびｐ２４Ｍ−ＰＲＩのＴ−Ｂペプタイドを形成する。さらに、３個の他のＴ−Ｂペプタイドがｐ２４ＥがＬＡＩ（ＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＩＧ−ＳＥＱＩＤＮＯ：５１）、ＲＦ（ＮＴＲＫＳＩＴＫＧＰＧＲＶＩＹＡＴＧＱＩＩＧ−ＳＥＱＩＤＮＯ：５２）のＶ３シーケンスおよび、ＭＮおよびＲＦ（ＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＶＩＹＡＴＧＱＩＩＧ−ＳＥＱＩＤＮＯ：５３）のハイブリッドＶ３シーケンスとリンクすることにより、それぞれＣＬＴＢ−Ｖ３Ｂ、ＣＬＴＢ−Ｖ３ＲＦおよびＣＬＴＢ−ＨＢコンストラクトを形成する。コンストラクトの第２のパネル表ＶＩＩに示されている（ＳＥＱＩＤＮＯＳ：５４から６８）。これらのコンストラクションに用いられたパーティキュラーｇｐ４１シーケンスは、引例６に記載されている中性化エピトープ（ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎｅｐｉｔｏｐｅ），ＥＬＤＫＷＡ（ＳＥＱＩＤＮｏ：６９）を分担する。表ＶＩＩＩの結果は、これらのペプタイドがヒトの中性化モノクロナル抗体，２Ｆ５（引例６）によって認識されたことを示した。表ＩＸは、構成された第３のペプタイドのパネル（ＳＥＱＩＤＮＯＳ：７０から８４）を示す。ｇａｇからの３種の異るＴ−セルエピトープすなわちＰ２４Ｎ（ＱＭＲＥＰＲＧＳＤＩＡＧＴＴＳＴＬ−ＳＥＱＩＤＮＯ：７０）、Ｐ２４Ｌ（ＥＥＭＭＴＡＣＱＧＶＧＧＰＧＨＫ−ＳＥＱＩＤＮＯ：７３）およびＰ２４Ｍ（ＧＨＫＡＲＶＬＡＥＡＭＳＱＶＴ−ＳＥＱＩＤＮＯ：７６）のＮ又はＣ−末端とリンクしてＢ−Ｔ又はＴ−Ｂ合成ペプタイドをそれぞれ形成するためにＣＬＴＢ−５６シーケンスの使用をこのコンストラクションは含んでいる。さらにニューヨークおよびアムステルダム単離体の共通配列ＰＲＩ（ＮＴＲＫＳＩＰＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＧ−ＳＥＱＩＤＮＯ：８０）もまたＴ−セルエピトープ、Ｐ２４Ｈ（ＰＩＶＱＮＩＱＧＱＭＶＨＱＡＩ−ＳＥＱＩＤＮＯ：７９）又はＴ５（ＶＫＹＫＶＶＫＩＥＰＬＧＶＡＰ−ＳＥＱＩＤＮＯ：８２）のＮ又はＣ−端末とリンクしてそれぞれＢ−Ｔ又はＴ−Ｂペプタイドを形成する。作られたペプタイドの第４のパネルは表Ｘに示されている（ＳＥＱＩＤＮＯＳ：８５から９２）。ペプタイドＣＬＴＢ−１０２およびＣＬＴＢ−１０５は、Ｔ−ヘルパー（ｈｅｌｐｅｒ）エピトープｐ２４ＥのＣおよびＮ−端末にそれぞれリンクされたｇｐ４１（ＥＬＩＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦ−ＳＥＱＩＤＮＯ：９３）およびＣＬＴＢ−５６のハイブリッドシーケンスを含む。ＣＬＴＢ− １０３およびＣＬＴＢ−１０７はＰ２４ＥのＣおよびＮ端末にそれぞれリンクしたＣＬＴＢ−５６および同ｇｐ４１シーケンスを含むペプタイドである。ＣＬＴＢ−１６０およびＣＬＴＢ-１６１のコンストラクトのために、ロンドン、インドおよびパリ分離体のコンセンサス（ＬＩＰ）からのＶ３シーケンス、タイウイルス（ＨＩＶ−１）のＶ３シーケンス（ＴＨＡＩ）およびニューヨークおよびアメルダムで見出されたプライマリーアイソレートのコンセンサスがＴ−セルエピトープ、ｐ２４ＥおよびＴ１とそれぞれリンクするために使われた。構成されたペプタイドの第５のパネルは表ＸＩに示されている（ＳＥＱＩＤＮＯ：９４から９７）。ペプタイドのＭＰＫ−１はＧＰＧリンカーシーケンスを経てそのＮおよびＣ端末でそれぞれＴ１およびｐ２４ＥＴ−セルエピトープとそれぞれリンクしている。ペプタイド、ＭＰＫ−２は、Ｔ１とＰ２４Ｅのオリエンテーションが逆であることをのぞいてＭＰＫ−１と同じである。ＭＰＫ−３およびＭＰＫ−４のコンストラクションはＭＰＫ１をＴ１およびｐ２４Ｅか、又はｐ２４ＥおよびＴ１のどちらかと、そのＮ又はＣ端末とそれぞれリンクさせるためにｇｐ４１シーケンスＥＬＤＫＷＡＳの２つのコピーの使用を含んでいる。ＨＩＶ−１ペプタイドカクテルの免疫原性本発明の５つのペプタイドを含むカクテルの免疫原性はギニヤピグで評価された（表ＩＩ）。これらのタンデム（ｔａｎｄｅｍ）ペプタイドはｐ２４ＥのＣ端末とリンクしたＨＩＶ１（ＳＦ２）単離体のＶ３シーケンスを含むＣＬＴＢ−７０、ｐ２４ＥのＣ端末にリンクされたＨＩＶ−１（ＩＩＩＢ）のＶ３シーケンスを含むＣＬＴＢ−７２、ｐ２４ＥのＣ端末とリンクされたＨＩＶ−１（ＲＦ）のＶ３シーケンスを含むＣＬＴＢ−７４、ｐ２４ＥのＣ端末とリンクされたＨＩＶ −１（Ｚ６）のＶ３シーケンスを含むＣＬＴＢ−７６およびｐ２４ＥのＣ端末とリンクされたＨＩＶ−１（ＢＲＵ）のｇｐ４１シーケンスを含むｐ２４Ｅ−ＧＰ４１Ｃから成る。表ＩＩに示された結果は、ＦＡ又はアラム中で処方されたカクテルで免疫化された動物は、５つのタンデムペプタイドのそれぞれに対して高い抗体反応を引き出したことを示している。それゆえ、上述の結果は、アラムに吸着されたとき、４つの異るＨＩＶ−１単離体（ＳＦ２、ＩＩＩＢ、ＲＦおよびＺ６）およびＨＩＶ−１（ＢＲＵ）のｇｐ４１シーケンスのＶ３ループに対して強い抗体反応を引き出す能力がそのペプタイドカクテルにあることを示す。ＣＬＴＢ−３６、ＣＬＴＢ−９１、ＣＬＴＢ−８４（表Ｉに示した）、およびＣＬＴＢ７０（表ＩＩに示した）、そして１９９１年５月に公表されたＷＯ９１／０５８５６４に記載されたようなＨＩＶ−１の自己集合した（ｓｅｌｆ−ａｓｓｅｍｂｌｅｄ）、複製のない（ｎｏｎ−ｒｅｐｌｉｃａｔｉｎｇ）、非伝染性のＨＩＶ類似の粒子からなるＨＩＶ−１ペプタイドカクテルを用いた免疫スケジュールも研究された。図２に描かれた結果は、あらかじめ不完全なフロイドの補助剤中に乳化されたＨＩＶ−類似の粒子で免疫され、アラムに吸着されたカクテルでブーストされたギニアピッグはＣＬＴＢ−５６ペプタイドに対して強い抗体反応がひき出されることがわかることを示している。２番目の、カクテルによる補助注射（ｂｏｏｓｔｏｒｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）の後のＭＮ分離体に対する抗血清のウイルス中和力価は１，０９１であった。非常に有意なことに、図３に描かれた結果は、ペプタイドカクテルで二度目にブーストされたあとの動物から集められた抗血清が、数種の実験室で培養されたウイルスおよびプライマリークリニカルアイソレートのＶ３シーケンスを含むペプタイドに対して強い交叉反応性をもさらに示している。他のペプタイドカクテルは合成ペプタイドを含む開示されたペプタイドのどの免疫有効量から成ることができる。その合成ペプタイドはそのＮ又はＣ端末でシーケンスＸ₁ＬＫＤＷＸ₂、ここにＸ₁はＥ，Ａ、Ｇ又はＱであり、Ｘ₂はＡ又はＴ又はＨＩＶ−スペシフィックアンチセラムを発現できるシーケンスである、を含み、シーケンスＸ₁ＬＫＤＷＸ₂および特にペプタイドＭＰＫ−２（ＳＥＱＩＤＮＯ：９５，表ＸＩ）が認識されるＨＩＶ単離体のｇｐ４１のＢ−セルエピトープを含む少なくとも一つのアミノ酸シーケンスとリンクされた、ヒトの免疫欠損ウイルス（ＨＩＶ）単離体のｇａｇプロテインのＴ−セルエピトープを含む少なくとも一つのアミノ酸シーケンスを含むものである。合成ＨＩＶ−１ペプタイドに対して創生された抗血清の機能的活性が、ホモログＨＩＶ−１（ＭＮ）分離体により誘発されたシンシテイアフォーメーション（ｓｙｎｃｙｔｉａｆｏｒｍａｔｉｏｎ）抑制の能力を試験することによって研究された。４つのＶ３（ＭＮ）ペプタイドでＢ−セルエピトープを含むシーケンスのみを含むもの、すなわちＶ３ＭＮ、ＣＬＴＢ−２９、ＣＬＴＢ−５５およびＣＬＴＢ−５６を、ＦＡかリン酸アルミニウム（アラム）のいずれかに入れて、免疫を与えた後のネズミの抗血清はシンシチアーブロッキング活性は失われていた（下表、表ＸＩＩを見よ）。ＦＡ中に処方したＣＬＴＢ−５６、しかし、リン酸アルミニウム（アラム）ではない、に対して創生されたギアナピッグの抗血清は、１０中１の濃度において９０％以上のシンシチア抑制活性を示すことがわかった。ネズミとギニアピッグの、Ｂ−Ｔタンデム合成ペプタイドすなわちＶ３ＭＮ−ｐ２４Ｅ、ＣＬＴＢ−３２およびＣＬＴＢ−３５のＦＡ又はアラム中のものに対して生起した抗血清は、これはＢ−セルエピトープを含むそれぞれのペプタイドすなわちＶ３ＭＮ、ＣＬＴＢ−２９およびＣＬＴＢ−５５に対する抗体力価は小さかったが、同様にシンシチアーブロッキング活性はないことがわかった。しかしながら、ＣＬＴＢ− ３７のＦＡ又はリン酸アルミニウム（アラム）中で処理したものに対して創生されたギニアピッグの抗血清は、ＣＬＴＢ−５６−スペシフィック抗体力価がそれぞれ１，２５０中１および４５０中１を含んでいたが、ともにシンシチアー抑制力価が１０中１であることがわかった。免疫原性Ｔ−Ｂ合成ペプタイドに対して生起された抗血清で行われた機能的研究の結果は、ネズミとギニアピッグ両方のＴ−Ｂ合成ペプタイド、ＣＬＴＢ−３６のＦＡ又はリン酸アルミニウム（アラム）中のものに対して生起された抗血清は、ホモロガス（ＭＮ）ウイルスによってひきおこされたシンシチアーフォーメーションを強く抑制することを明らかにした。加えて、ＩＳＡ５１中に処方されたＣＬＴＢ−３６に対してシノモルガスモンキー（ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｕｓｍｏｎｋｅｙｓ）中に生起した抗血清が、ＭＮ分離体に対して良い中和力価を有する（両動物において２７８および４３０）こともわかった（表ＩＶを見よ）。ｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮおよびＣＬＴＢ−３４のＦＡ中のものに対して生起されたネズミおよびギニアピッグの抗血清で、アラム中のそのペプタイドに対して生起されるそれぞれの抗血清よりもＶ３ＭＮ−およびＣＬＴＢ−５５−スペシフィック抗体の高い力価を含むものが、有効なシンシチアーブロッキング活性を有することがわかった。また免疫用に用いた動物の種はＶ３（ＭＮ）−スペシフィックファンクショナル抗体の産生に影響を与えることが観察された。この影響は、例えば、ＦＡ中のＴ−Ｂタンデム合成ペプタイドＣＬＴＢ−２８はネズミとギニアピッグに同じ抗−ＣＬＴＢ−２９抗体の力価を誘起するが、後者において生起される抗血清のみがシンシチアー抑制活性の高力価を有したという事実によって例証された。哺乳動物中の多重結合分子の免疫原性多重結合分子ＣＬＴＢ−３６（ＭＡＰ）、ＣＬＴＢ−９１（ＭＡＰ）、ＣＬＴＢ−３４（ＭＡＰ）、ｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮ（ＭＡＰ）およびＶＰ−ＴＢ（ＭＡＰ）、（これらのそれぞれの配列については図１に示した）、の哺乳動物における抗体反応を引き出す能力を、それら分子をＦＡ又はアラム中に乳化させたものを使って免疫化したマウスおよびギニアピッグによって調べた。１００μｇごとの４投与後ＩｇＧ抗体反応をペプタイド−スペシフィックＥＬＩＳＡおよびインビトロのシンシチアーブロッキングアッセイによって測定した。マウスおよび／またはモルモットで多重結合分子を用いて実施した免疫原性試験の結果を以下の表ＸＩＩＩに示した。ＦＡまたはアルムのいずれかに入った４量体ＣＬＴＢ−３６（ＭＡＰ）で免疫感作したマウスとモルモットのいずれにおいても、高いＣＬＴＢ−５６特異ペプチド抗体力価が得られている。ＦＡまたはアルムのいずれかで製剤されたＣＬＴＢ−９１（ＭＡＰ）も同様に、それらの動物において高いＣＬＴＳ− ５６特異抗体力価を誘発した。４量体のＴ−Ｂタンデム合成ペプチドであるＣＬＴＢ−３４（ＭＡＰ）、ｐ２４Ｅ−Ｖ２ＭＮ（ＭＡＰ）またはＶＰＴＢ（ＭＡＰ）をＦＡに入れて投与しても、モルモットにおいて、それぞれ高力価のＣＬＴＢ −５５、Ｖ３ＭＮおよびＶＰ特異抗体を誘導することができた。ＦＡまたはアルムのいずれかでのＣＬＴＢ−３６（ＭＡＰ）に対して形成されたマウスおよびモルモットの抗血清は、ＨＩＶ−１（ＭＮ）ウイルス誘発のシンシチウム生成を阻害した（以下の表ＸＩＶ）。ＦＡ中の分岐ペプチドＣＬＴＢ−３４（ＭＡＰ）およびＶＰ−Ｔ−Ｂ（ＭＡＰ）に対して形成されたモルモット抗血清も同様に、強力なシンシチウム遮断活性を示した。本発明の各種実施態様が、ワクチン生成、診断、ＨＩＶ感染治療および免疫薬生成の分野で多くの応用場面を有することは当業者にとっては明らかである。そのような場面での用途についてのさらに広い考察に関して、以下に詳細に示す。ワクチンの生成および用途以上では、本発明によるペプチドが免疫応答を誘発できることを明らかにした。従って、その分子の考えられる用途の一つは、ＡＩＤＳおよびＡＩＤＳ関連の状態に対する強力なワクチンの基礎としてのものである。そこで、さらに別の態様では、本発明は、本発明による分子を有してなるＡＩＤＳおよびＡＩＤＳ関連の状態に対するワクチンを提供するものである。ワクチンとしての使用に好適な免疫原性組成物は、本願明細書に開示の免疫原性ペプチドから得ることができる。その免疫原性組成物は、オプソニン作用性または抗ウイルス性の抗体を産生する免疫反応を誘発する。ワクチン投与した被験者がＨＩＶによる攻撃を受けた場合、その抗体がそのウイルスに結合し、それによって、そのウイルスを不活化する。ペプチドを含有するワクチンは当業界で良く知られており、例を挙げると、米国特許４，６０１，９０３；４，５９９，２３１：４，５９９，２３０および４，５９６，７９２などがある。ワクチンは、注射剤、溶液または乳液として調製することができる。そのペプチドは、そのペプチドに適合する医薬的に許容される賦形剤と混合することができる。賦形剤の例としては、水、生理食塩水、デキストロース、グリセリン、エタノールおよびそれらの併用したものなどがあり得る。そのワクチンにはさらに、湿潤剤または乳化剤などの補助剤、ｐＨ緩衝剤、あるいはそのワクチンの有効性を高めるための佐剤などが含有されていてもよい。そのワクチンに対する補助効果を得る方法には、水酸化アルミニウムまたはリン酸アルミニウム（アルム）の使用などがあり、いずれの場合でも、０．０５〜０．１％のリン酸緩衝生理食塩水溶液として使用する。ワクチンの投与は、非経口的に、皮下注射または筋肉注射によって行うことができる。それ以外の場合は、坐剤および経口用製剤などの他の投与形態が望ましい。坐剤の場合、結合剤およびキャリアを含んでいてもよく、その例としては、ポリアルカレングリコールやトリグリセリドなどがある。経口用製剤には、例えば医薬用のサッカリン、セルロースおよび炭酸マグネシウムなどの通常使用されるインシピエント（ｉｎｃｉｐｉｅｎｔ）を用いることができる。その組成物は、溶液、懸濁液、錠剤、丸薬、カプセル、徐放性製剤または粉末の形態を取ることができ、ペプチドを１０〜９５％含有させることができる。ワクチンの投与は、製剤に適合した方法で、治療上有効で、予防効果があり、免疫原性を持つだけの量で行う。投与量は、投与する被験者によって決まり、例えば、その被験者におけうる抗体を合成し、細胞介在性免疫応答を生じさせる免疫系の能力などによって決まる。投与に必要な有効成分の正確な量は、医師の判断によって決まるものである。しかしながら、好適な投与範囲は、当業者であれば容易に決定できるものであり、ペプチドの量をミリグラムのレベルとすることができる。第１回投与およびブースター投与の好適な投与法も異なり得るものであるが、第１回投与とそれに続く免疫感作、例えば、本譲受人に譲渡されたＷＯ９１／０５８５６４に記載のもののような自己集合性、非感染性、非増殖性のＨＩＶ様パーティクルによる少なくとも１回のプレペプチド（ｐｒｅ−ｐｅｐｔｉｄｅ）免疫感作、それに続く本発明のペプチドによる少なくとも１回の二次免疫感作などがある。ワクチンの用量は、投与経路によっても決まり得るものであり、宿主の大きさによって変り得るものである。本発明のペプチドをコードする核酸分子はさらに、例えば注射によって直接その核酸分子を投与するか、あるいは最初にサルモネラ、ＢＣＧ、アデノウィルス、ポックスウィルス、ワクシニアまたはポリオウィルスなどの生ベクターを形成してから、そのベクターを投与することによって直接免疫感作に使用することもできる。免疫系に異種抗原を運搬するために使用されているいくつかの生ベクターについての議論は、例えば、オー’ハガン（Ｏ’Ｈａｇａｎ）（１９９２）の報告中で行われている（参考文献１０）。遺伝的免疫感作のために被験者にＤＮＡを直接注射する方法については、例えば、ウルマー（Ｕｌｍｅｒ）ら（１９９３）の報告に記載されている（参考文献１１）。本発明のペプチドをｉｎｖｉｖｏで使用するには、そのペプチド自体の血清および／または組織中での半減期が十分ではないと考えられることから、そのペプチドの修飾を行う必要がある。従って、本発明の分子を、キャリア分子に結合させることもでき、その結合の方法としては、配列の保持されたアミノ酸の官能基を介するものや、あるいはＣ末端またはＮ末端で付加させた別のアミノ酸を介するものが考えられる。例えば、チロシン残基の側鎖を用いて、多くの好適な結合が知られている。好適なキャリアには、例えば、スカシガイのヘモシアニン（ＫＬＨ）、血清アルブミン、精製ツベルクリン蛋白誘導体（ＰＰＤ）、卵白アルブミン、非蛋白性キャリア等多くのものがある。さらに、そのペプチドの修飾を行って、その分子にコンホメーション上の制限を与えることが有利である場合がある。それは例えば、天然蛋白の関連でそのペプチドの天然のコンホメーションを模倣することによって、誘発されたエフェクター免疫応答を至適化する上で有用であると考えられる。修飾したペプチドを、ここではペプチド「類縁体」と称する。「類縁体」という言葉は、本発明の実施に関してのｉｎｖｉｖｏまたはｉｎｖｉｔｒｏでの安定性および／または有効性の上昇を特徴とするペプチドと機能的および／または構造的に等価なものを含むものである。「類縁体」という言葉はさらに、本明細書では、本発明のペプチドのアミノ酸誘導体についても適用されるものである。本願明細書で取り挙げるペプチドの類縁体は、側鎖を修飾したもの、合成アミノ酸の組み込まれたものおよび／またはその誘導体、非アミノ酸系単量体ならびに架橋体などがあるが、それらに限定されるものではない。ペプチドまたはその類縁体にコンホメーション上の制限を与える他の方法も考えられる。本発明のペプチドは、それの機能的に重要な免疫原性挙動にさほど影響を与えることなく、各種の異なった方法で修飾できることは明らかである。そのペプチド配列に対して可能な修飾には、以下のものがあり得る。１以上の個々のアミノ酸を、同等または類似の性質を有するアミノ酸によって置換することができる。従って、ＶはＩで置換することができ、ＴはＳで置換することができ、ＫはＲで置換することができ、ＬはＩ、ＶまたはＭで置換することができる。本発明のペプチドの１以上のアミノ酸を、「逆転化（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｇｏ）」アミノ酸、すなわちＷＯ９１／１３９０９に述べられているようなアミノ酸に相当する官能基を有する二官能性アミンによって置換することができる。１以上のアミノ酸を削除することができる。そのペプチドと三次元構造が類似する構造的類縁体を、そのペプチド自体の代りに使用することができる。本発明で考えられる側鎖修飾の例としては、アルデヒトとの反応の後、ＮａＢＨ₄を用いた還元による還元的アルキル化などのアミノ基の修飾；アセトイミド酸メチルによるアミジン化；無水酢酸によるアシル化；シアン酸化合物によるアミノ基のカルバモイル化；２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢＳ）によるアミノ基のトリニトロベンジル化；無水コハク酸およびテトラヒドロフタル酸無水物によるアミノ基のアシル化；ピリドキサール−５’−リン酸化合物によるリジンのピリドキシル化とそれに続くＮａＢＨ₄による還元などが挙げられる。アルギニン残基のグアニジノ基は、２，３−ブタンジオン、フェニルグリオキサールおよびグリオキサールなどの試薬による複素環縮合生成物の形成によって修飾することができる。カルボニル基は、Ｏ−アシルイソウレア生成を介してのカルボジイミド活性化とそれに続く相当するアミド等への誘導体化によって修飾することができる。フルフォヒドリル基は、ヨード酢酸やヨードアセトアミドでのカルボキシメチル化、システイン酸への過ギ酸酸化、他のチオール化合物との混合ジスルフィド類の生成、マレイミド、無水マレイン酸または他の置換マレイミドとの反応、４ −クロロ水銀ベンゾエート、４−クロロ水銀フェニルスルホン酸、塩化フェニル水銀、２−クロロ水銀−４−ニトロフェノール及び他の水銀剤類を用いた水銀の誘導体の生成、及びアルカリｐＨでのシアナートとのカルバモイル化などの方法で改質されても良い。トリプトファン残基は、例えば、Ｎ−ブロモスクシンイミドを用いた酸化あるいは２−ヒドロキシ−５−ニトロベンジルブロミドやスルフェニルハライドを用いたインドール環のアルキル化によって改質されていても良い。ヒスチジン残基のイミダゾール環の改質は、ヨード酢酸誘導体を用いたアルキル化やジエチルピロカーボネートを用いたＮ−カルボエトキシ化によって達成される。ペプチド合成の間に導入される不自然な（ｕｎｎａｔｕｒａｌ）アミノ酸及び誘導体の例としては、限定されるものではないが、ノルロイシン、４−アミノ酪酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ−５−フェニル吉草酸、６−アミノヘキサン酸、ｔ−ブチルグリシン、ノルバリン、フェニルグリシン、オルニチン、サルコシン、４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸、２−チエニルアラニン、及び／またはアミノ酸のＤ−異性体が挙げられる。例えば、三次元コンフォメーションを安定にするために架橋剤を用いることができ、ｎが１〜６の（ＣＨ₂）_nの空間基を有する二官能イミドエステル類、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル類の様なアミノ反応性成分や、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドやマレイミド、ジチオール（ＳＨに対して）あるいはカルボジイミド（ＣＯＯＨに対して）などのアミノ基以外の基に特に反応性のある成分を通常含んでいるヘテロ二官能試薬などのホモ二官能性架橋剤を用いることができる。加えて、ペプチド類は、例えば、α−メチルアミノ酸類の取り込み、アミノ酸類の隣合う炭素原子の間への二重結合の導入、ＮとＣ末端の間、２つの側鎖の間、あるいは側鎖とＮまたはＣ末端との間にアミド結合を生成するような共有結合の導入によって環状ペプチドや類似体の生成によって立体配座的に抑制させることもできる。本発明のペプチド類またはその類似体は単列（ｓｉｎｇｌｅｌｅｎｇｔｈ）または多数のタンデムまたは非タンデムリピートとして起こるかも知れない。シングルタイプのペプチドまたは類似体はリピートを形成しても良く、そのリピートは適したキャリア分子を含む様々な分子から構成されていても良い。本発明のペプチド類の免疫原性または脂質化ペプチドを生成するように脂肪酸成分にカップリングさせる事によって調整することができる。便利な脂肪酸成分は糖脂質類似体、Ｎ−パルミチル−Ｓ−（２ＲＳ）−２，３−ビス（パルミトイルオキシ）プロピル−システイニル−セリン（ＰＡＭ₃Ｃｙｓ−Ｓｅｒ）、Ｎ− パルミチル−Ｓ−［２，３−ビス（パルミトイルオキシ）プロピル−［Ｒ］−システイン（ＴＰＣ）またはジパルミチル−リジン成分などが挙げられる。ペプチド類はまた、オクタデシルチロシン（ＯＴＨ）を含むチロシンなどの芳香酸のオタタデシルエステルのような脂質化アミノ酸に共役させても良い。本発明による分子は更に、ヒトや動物細胞へのＨＩＶウイルスの結合を置き換える為に作用する、あるいはそのウイルスの三次元組織をかき乱すことによってエイズ（ＡＩＤＳ）や関連する条件の処理（予防や治療）への使用が見いだされるかも知れない。本発明の更なる態様は、つまり本発明によるペプチドの有効量を投与することからなるエイズまたは関連する条件の予防または処理のための方法を提供する。免疫分析（Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ）本発明のペプチド類は、免疫原として有用であり、酵素関連免疫吸着分析（ＥＬＩＳＡ）、ＲＩＡその他の酵素非関連の抗原結合分析、または抗ＨＩＶ抗体の検出法として斯界に知られているものを含む免疫分析手法における抗原として有用である。ＥＬＩＳＡ分析では、ペプチド類が、例えばポリスチレン微量滴定板のくぼみのようなペプチド結合性を有する或る選ばれた面上に固定される。完全には吸着していないペプチド類を洗浄除去した後、供試試料に関しては抗原的に中性であることが知られているウシ血精アルブミン（ＢＳＡ）またはカゼインのような、非特異的プロテノンを、この選ばれた面上に結合させてもよい。こうすると、固定させる面上の非特異的吸着点が閉塞されることとなり、その結果、この面上への抗血精の非特異的結合の生起原因を減少させることになる。複数のＨＩＶ単離体（ｉｓｏｌａｔｅ）を認識できる抗体の同定が望ましい診察法に応用する場合には、複数の本発明ペプチド類が、前記の選ばれた面上に固定される。これとは違い、本発明のあるペプチドのＢ細胞エピトープが、いろんなＨＩＶ単離体中に高度に保持されているとき（例えば、ｇａｇまたはｇｐ４１のＢ細胞エピトープ）、単一または限られた数のペプチドを固定してもよい。更に、単一のＨＩＶ単離体（例えば、ＢＲＵ、ＭＮまたは、ＳＦ２）を認識する抗体の特異的同定が望ましい診断手法においては、本発明のペプチドの単一種を固定してもよい。この手法は、抗体生産の帰因とすべき特定のＨＩＶ単離体の決定が重大であるような医学、臨床試行、法医学などの分野で、格別に有用である。普通、ペプチドの持つ残基の数は、約１２以上で、上限は約１４ないし約４０である。ペプチド類の混合物も、ワクチンなどにおける免疫原、または診断剤のいずれにも使用できる。場合によっては、複数の保持領域および／又は複数の非保持領域からのペプチド類の混合物が、単離体交差の保護（ｃｒｏｓｓ−ｉｓｏｌａｔｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）および／又は診断の用に充てられる。この場合、ペプチド免疫原混合物は、免疫原性組成物または診断剤として用いられるカクテル調剤（”ｃｏｃｋｔａｉｌｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）と通称される。前記の固定化させる面は、次いで、供試される臨床的または生物学的材料のような試料と接触させられ、免疫複合体（免疫原／抗体）形成を結果させるようにする。それには、試料をＢＳＡ、ウシガンマグロブリン（ＢＧＧ）、および／又はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）／Ｔｗｅｅｎなどの溶液で希釈する。次に、試料は２５℃ないし３５℃程度の温度で、約２ないし４時間、培養に付される。その後、試料と接触した面を洗浄して、免疫複合体化していない材料を除去する。洗浄には、ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎまたは、ほう酸塩緩衝液のような溶液を用いてよい。供試試料と結合されるペプチドとの間の、特異な免疫複合体の形成、および続いての洗浄の後で、該免疫複合体を第一の抗体に対して特異性を持つ第二の抗体に当てることによって、免疫複合体形成の生起さらにはその量までが決定できる。供試試料がヒト起源であれば、第二の抗体は、ヒト免疫グロブリンに対する特異性を持つ抗体であり、一般にはＩｇＧである。検知手段付与のために、該第二の抗体には、例えば適当な色原体基体上での培養によって発色を生起させる酵素活性のような関連活性を持たせてもよい。そうすれば、例えば分光光度計を用いて発色度を測定することにより、定量が達成されることになろう。他の用途本発明の基礎となっている、維持された配列（ｃｏｎｓｅｒｖｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅ）特に抗体、抗体の関連分子およびその構造的類縁体と結合する分子もまた、ＡＩＤＳおよび関連症状の処置および診断に利用の可能性がある。キメラ抗体（ｃｈｉｍｅｒｉｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）、ヒト化抗体（ｈｕｍａｎｉｚｅｄａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）、ベニヤ抗体（ｖｅｎｅｅｒｅｄａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）および設計された抗体（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）のような抗体変異体（抗原結合点をも含む）で、本発明のペプチドと結合するものも、本発明の範囲内に含まれる。本発明のペプチドと結合できる抗体および他の分子は、治療（予防および治癒）および診断の目的で、いろいろ違った用法があるが、その中には下記のようなものがある。：ＨＩＶ患者に対する、抗体（多分ヒト化抗体）の適当な投与による受動免疫。適当なサブクラスまたはアイソタイプ（できる限り適当な抗体工学により得られた）の抗体を使用して抗体依存細胞の細胞毒性（ＡＤＣＣ）を活性化し、補完し、または媒介して所望の機能をはたすことを可能とすること。直接または間接に、例えばｇｐ１２０またはｇｐ４１のターゲット保存シーケンスに結合するために、例えば抗体と細胞毒性部分との接合を含む免疫トキシンを用いて、トキシンまたは他の剤を目標を定めて送り出すことに対して。ＨＩＶ感染細胞の表面に、高度に免疫原性物質を目標を定めて送り出して、宿主の体液または細胞の免疫系のいずれかによって、このような細胞を起りうるアブレーション（ａｂｌａｔｉｏｎ）に導くことに対して。例えば、種々の免疫測定技術を用いるＨＩＶの検出に対して。さらに診断上の態様において、本発明のペプチド（個々に、またはカクテル製剤を含む混合物として）は、ＨＩＶ抗原に対して特異な抗体（モノクローナル抗体を含んで）の発生に有用である。この抗体はＨＩＶまたは抗原の検出、または生物的試料を含めて試料中のＨＩＶの中和に使用しうる。他の診断上の態様において、本発明のペプチドは、生物的試料、例えばＨＩＶ感染個体におけるＨＩＶ特異性Ｔ−細胞を特異的に刺激するのに使用しうる。上記の開示は包括的に本発明を記述するものである。より完全な理解は、以下の特種な実施例を参照することにより得られる。これらの実施例は、単に説明の目的でのみ記載されており、本発明を限定しようとするものではない。形態における変更と均等物の置換は、状況が示唆するか、または適切であるときには、意図される。特殊な用語がこゝで採用されるが、このような用語は記述的な意味を意図するもので、限定的な目的で用いられるものではない。実施例ペプチド合成法、酵素免疫測定法（ＥＩＡ）およびデューク大学（ＮＣ、ＵＳＡ）のトーマス・マシュース博士のグループにより用いられた、試験管中シンシティアーブロッキング測定法（ｒｅｆ．７）−これらの方法はこの開示中に明確に記載されていない−は科学文献中に十分に報告されており、当該技術に精通した人々の知識の範囲内にある。実施例１この実施例は洗浄のペプチドの合成を説明する。以下の表Ｉ，ＩＩ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＩＸ、ＸおよびＸＩに示したペプチドが、ＡＢＩ（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＩｎｃ）４３０Ａペプチド合成器と、製造者により記載された、最適化されたｔ−Ｂｏｃ化学とを用いて、こゝで同定された種々のＨＩＶ単離物について報告されたアミノ酸シーケンスに従って合成された。粗ペプチドは、フッ化水素酸処理により樹脂から除去され、ＶｙｄａｃＣ４半調製カラム（１×３０ｃｍ）を用いた逆相高速液体クトマトグラフィーにより、０．１％（ｖ／ｖ）のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中、アセトニトリル勾配１５−５５％で、２ｍｌ／ｍｉｎの流速で４０分にわたって展開して精製された。免疫学的試験および免疫化の研究において用いられた全ての合成ペプチド（以下の表１）は、ＨＰＬＣ分析により判断して９５％を越える純度をもっていた。ＷａｔｅｒｓＰｉｃｏ−Ｔａｇシステム上で行われたアミノ酸組成分析の結果は理論組成とよく一致した。実施例２この実施例は分岐ペプチドの合成を示す。図１に示される合成分岐ＨＩＶ−１ペプチド（ＭＡＰ）はＡＢＩ４３０Ａ合成機を用いて、前記のＴＡＭ（文献８）の方法によって合成した。ＭＡＰペプチドは実施例１で述べたようにＲＰ−ＨＰＬＣで生成した。実施例３この実施例はＨＩＶ−ｌｃｈｉｍｅｒｉｃペプチドの免疫試験に用いた取り決め（ｐｒｏｔｏｃｏｌ）を述べる。ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒ動物農園（モントリオール、カナダ）、Ｈａｚｅｌｔｏｎ動物農園（デンバー、ＵＳＡ）から各々購入した、生後６−１２週間のＢｌｌｂ／ｃ（Ｈ−２^d）マウス又は生後６−８週間の雌ＤｕｎｃａｎＨｅｒｔｌｙｇｕｉｎｅａ豚を別々に１００μｇのつぎのフリーペプチドで免疫にした。動物はＦｒｅｕｎｄ’s ｃｏｍｐｌｅｔｅａｄｊｕｖａｎｔ（ＣＦＡ）に乳化されたペプチド又は硫酸アルミニウム（ａｌｕｍｕ）の３ｍｇに吸着して皮下からペプチドが投与された。次いで、効能促進服用がＦｒｅｕｎｄ’s ｃｏｍｐｌｅｔｅａｄｊｕｖａｎｔ（ＣＦＡ）に乳化されたペプチド又は硫酸アルミニウム（ａｌｕｍｕ）の３ｍｇに吸着して、同じ量で同じペプチドを３週間後に行われた。雌マウスは各々の助剤で調製された同じペプチドを同量を更に、３週間間隔で２回効能促進された。実験マウスとｇｕｉｎｅａ豚の血清は効能促進後９日目と１４日目に集められ、標準ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏａｂｓｏｒｂａｎｔａｓｓａｙ（ＥＩＡ）を用いてｐｅｐｔｉｄｃ−ｓｐｅｃｉｆｉｃＩｇＧ抗体及びｕｃｈｉｄｏ−及びｓｙｎｃｙｔｉａ−ｂｌｏｃｋｉｎｇ活性が評価した。実施例４この例は酵素免疫評価（Ｅｎｚｙｍｅｉｍｍｕｎｏａｓｓｙ：ＥＩＡ）を用いて抗ペプチド抗体試験を説明する。表１の下及び前記文献９の方法でウエルあたり１μｇにおいて図１で示されているように、異なった構造のＶ３ペプチドに反応性の抗体のＥＩＡの検出はＶ３ペプチドを含む各々のＥＢの塗布されたＥＩＡプレート（Ｃｏｖａｌｉｎｋ，Ｎｕｎｃ、Ｄｅｎｍａｒｋ）で行われた。３０分後、４℃培養し、結合しないペプチドは洗浄緩衝液（ｐｈｏｐｈａｔｅ −ｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅ（ＰＢＳ）、ＰＨ７．０、Ｔｗｅｅｎ２０− ０．０２５％含有）で３回プレートを洗浄して除いた次いで、５０の中の１つから始めて、スキムミルクを０．０５含有するＰＢＳ中に各実験の血清試料３倍に薄めて、次いで１００μリットルの希釈血清をペプチド塗布ウェルに加えた。各血清試料の希釈液は２回評価した。免疫ペプチドへのＶ３ペプチド特定抗体の免疫ペプチドの結合は室温で１時間培養することによって行った。未結合の抗体は洗浄緩衝液でプレートを３回洗浄して除いた。製造者の指示のように、山羊の抗ネズミＩｇＧ抗体ホースラディシュ接合体（ＪａｃｋｓｏｎＬａｂ．，）１００μリットルを洗浄緩衝液中で５０００倍に希釈し、次いで各試験ウオールに目標のペプチドへの抗Ｖ３ペプチド抗体の特定の結合を検出した。室温の１時間の培養後、未結合の抗体接合体は洗浄緩衝液で４回洗浄して除いた。テトラメチルベンジディジン（ＴＭＢ）と過酸化水素の混合物（製造者（ＡＤＩＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓＩｎｃ．，Ｗｉｋｋｏｗｄａｌｅ，Ｃａｎａｄａ）の指示通り、１部のＴＭＢを９部の過酸化水素）の１００μリットルを加えることで結合した接合体を分析した。室温、暗所に１０〜１５分で発色し、１Ｎ硫酸１００μリットルの添加で停止させた。酵素反応の光学密度は４５０ｎｍにおけるＴｉｔｅｒｔｅｋＭｕｌｔｉＳｋａｎスペクトロメーター（ＭＣＣ／３４０型）で読みとった。結果を表３に示し、平均ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌｔｉｔｒｅｓとして表される。通常のマウスの平均ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌｔｉｔｒｅｓハプロタイプにかかわりなく常に５０以下であった。要約この開示の要約において、本発明はあるＨＩＶ−１のＴ−ｃｅｌｌｅｐｉｔｏｐｅｓのアミノ酸シークエンスとｅｎｖｅｌｏｏｐｅプロテインのＶ３ループに対応するある種の合成ペプチドを提供する。そしてそれはＧＰＧＲシークエンス及び／又はＥｌｋｄｗａシークエンスよりなるｇｐ４１．ＨＩＶ−１感染に免疫対応できるｔｅｔｒａｍｅｒｉｃ型のペプチド、タンデム合成ペプチドより成るワクチン組成物を含む。変性は本発明の範囲内に含めることができる。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年９月１１日【補正内容】（１）我々の刊行された国際特許出願ＷＯ９０／１３５６４中・コアプロテインのＴ −セルエピトープ、ＨＩＶ−１のｐ２４Ｅ、及び、ＨＩＶ−１のコアプロテインまたはエンベロープのＢ−セルエピトープのアミノ酸シークエンスにリンクされたＴ−セルエピトープのアミノ酸シークエンスを含む合成キメリックペプチドの構造の特定及び特徴の記載がある。Ｂ−セルエピトープをＴ−セルエピトープにリンクすることより、Ｂ−セルエピトープに対するイムネレスポンスは引き起こされる。そこでは、Ｂ−セルエピトープがそのようにリンクされないとそのようなレスポンスは観察されない。ｐ２４Ｔ−セルエピトープ、ＢＥ３エピトープ、ＥＮＶエピトープ及びＶ３Ａエピトープ、エピトープ間のリンカーシークエンスと共にまたは無しの、ＨＩＶ−１／ＬＡＶアイソレートからの全ての誘導体に関する、その発行された出願中にデータが存在する。（２）表ＩＸは、構成された第３のペプタイドのパネル（ＳＥＱＩＤＮＯＳ：７０から８４）を示す。ｇａｇからの３種の異るＴ−セルエピトープすなわちＰ２４Ｎ（ＱＭＲＥＰＲＧＳＤＩＡＧＴＴＳＴＬ−ＳＥＱＩＤＮＯ：７０）、Ｐ２４Ｌ（ＥＥＭＭＴＡＣＱＧＶＧＧＰＧＨＫ−ＳＥＱＩＤＮＯ：７３）およびＰ２４Ｍ（ＧＨＫＡＲＶＬＡＥＡＭＳＱＶＴ−ＳＥＱＩＤＮＯ：３０，７６）のＮ又はＣ−末端とリンクしてＢ−Ｔ又はＴ−Ｂ合成ペプタイドをそれぞれ形成するためにＣＬＴＢ−５６シーケンスの使用をこのコンストラクションは含んでいる。さらにニューヨークおよびアムステルダム単離体の共通配列ＰＲＩ（ＮＴＲＫＳＩＰＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＧ−ＳＥＱＩＤＮＯ：５０，８０）もまたＴ−セルエピトープ、Ｐ２４Ｈ（ＰＩＶＱＮＩＱＧＱＭＶＨＱＡＩ−ＳＥＱＩＤＮＯ：７９）又はＴ５（ＶＫＹＫＶＶＫＩＥＰＬＧＶＡＰ−ＳＥＱＩＤＮＯ：８２）のＮ又はＣ−端末とリンクしてそれぞれＢ−Ｔ又はＴ−Ｂペプタイドを形成する。作られたペプタイドの第４のパネルは表Ｘに示されている（ＳＥＱＩＤＮＯＳ：８５から９２）。ペプタイドＣＬＴＢ−１０２およびＣＬＴＢ−１０５は、Ｔ−ヘルパー（ｈｅｌｐｅｒ）エピトープｐ２４ＥのＣおよびＮ−端末にそれぞれリンクされたｇｐ４１（ＥＬＩＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦ−ＳＥＱＩＤＮＯ：９３）およびＣＬＴＢ−５６のハイブリッドシーケンスを含む。ＣＬＴＢ− １０３およびＣＬＴＢ−１０７はＰ２４ＥのＣおよびＮ端末にそれぞれリンクしたＣＬＴＢ−５６および同ｇｐ４１シーケンスを含むペプタイドである。ＣＬＴＢ−１６０およびＣＬＴＢ−１６１のコンストラクトのために、ロンドン、インドおよびパリ分離体のコンセンサス（ＬＩＰ）からのＶ３シーケンス、タイウイルス（ＨＩＶ−１）のＶ３シーケンス（ＴＨＡＩ）およびニューヨークおよびアムステルダムで見出されたプライマリーアイソレートのコンセンサスがＴ−セルエピトープ、ｐ２４ＥおよびＴ１とそれぞれリンクするために使われた。（３）合成ＨＩＶ−１ペプタイドに対して創生された抗血清の機能的活性が、ホモログＨＩＶ−１（ＭＮ）分離体により誘発されたシンシテイアフォーメーション（ｓｙｎｃｙｔｉａｆｏｒｍａｔｉｏｎ）抑制の能力を試験することによって研究された。４つのＶ３（ＭＮ）ペプタイドでＢ−セルエピトープを含むシーケンスのみを含むもの、すなわちＶ３（ＭＮ）、ＣＬＴＢ−２９、ＣＬＴＢ−５５およびＣＬＴＢ−５６を、ＦＡかリン酸アルミニウム（アラム）のいずれかに入れて、免疫を与えた後のネズミの抗血清はシンシチアーブロッキング活性は失われていた（下表、表ＸＩＩを見よ）。ＦＡ中に処方したＣＬＴＢ−５６、しかし、リン酸アルミニウム（アラム）ではない、に対して創生されたギアナピッグの抗血清は、１０中１の濃度において抑制率９０％以上のシンシチア抑制活性を示すことがわかった。ネズミとギニアピッグの、Ｂ−Ｔタンデム合成ペプタイドすなわちＶ３ＭＮ−ｐ２４Ｅ、ＣＬＴＢ−３２およびＣＬＴＢ−３５のＦＡ又はアラム中のものに対して生起した抗血清は、これはＢ−セルエピトープを含むそれぞれのペプタイドすなわちＶ３ＭＮ、ＣＬＴＢ−２９およびＣＬＴＢ−５５に対する抗体力価は小さかったが、同様にシンシチアーブロッキング活性はないことがわかった。しかしながら、ＣＬＴＢ−３７のＦＡ又はリン酸アルミニウム（アラム）中で処理したものに対して創生されたギニアピッグの抗血清は、ＣＬＴＢ−５６−スペシフィック抗体力価がそれぞれ１，２５０中１および４５０中１を含んでいたが、ともにシンシチアー抑制力価が１０中１であることがわかった。免疫原性Ｔ−Ｂ合成ペプタイドに対して生起された抗血清で行われた機能的研究の結果は、ネズミとギニアピッグ両方のＴ−Ｂ合成ペプタイド、ＣＬＴＢ−３６のＦＡ又はリン酸アルミニウム（アラム）中のものに対して生起された抗血清は、ホモロガス（ＭＮ）ウイルスによってひきおこされたシンシチアーフォーメーションを強く抑制することを明らかにした。加えて、ＩＳＡ５１中に処方されたＣＬＴＢ−３６に対してシノモルガスモンキー（ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｕｓｍｏｎｋｅｙｓ）中に生起した抗血清が、ＭＮ分離体に対して良い中和力価を有する（両動物において２７８および４３０）こともわかった（表ＩＶを見よ）。ｐ２４Ｅ−Ｖ３ＭＮおよびＣＬＴＢ−３４のＦＡ中のものに対して生起されたネズミおよびギニアピッグの抗血清で、アラム中のそのペプタイドに対して生起されるそれぞれの抗血清よりもＶ３ＭＮ−およびＣＬＴＢ−５５−スペシフィック抗体の高い力価を含むものが、有効なシンシチアーブロッキング活性を有することがわかった。また免疫用に用いた動物の種はＶ３（ＭＮ） −スペシフィックファンクショナル抗体の産生に影響を与えることが観察された。この影響は、例えば、ＦＡ中のＴ−Ｂタンデム合成ペプタイドＣＬＴＢ−２８はネズミとギニアピッグに同じ抗−ＣＬＴＢ−２９抗体の力価を誘起するが、後者において生起される抗血清のみがシンシチアー抑制活性の高力価を有したという事実によって例証された。（４）（５）（６）請求の範囲１．表ＩＸ中に示すそれぞれのアミノ酸配列を有するＰ２４Ｎ、Ｐ２４Ｌ、Ｐ２４ＭおよびＰ２４Ｈから選択された人の免疫欠乏ビールス（ＨＩＶ）アイソレートのギャグ蛋白のＴ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列、または選択された配列類のどれかの一部、変種もしくは突然変異種であって該選択された配列のＴ−細胞の性質を保持しており、そのＣ−末端エンドにおいてＨＩＶアイソレートのエンベロープ蛋白のＶ３ループのＢ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列にリンクしたものよりなる合成ペプタイド。２．前記ＨＩＶ単離体がＨＩＶ−１単離体である請求項１の合成ペプチド。３．前記Ｖ３ループが、ＬＡＶ、ＢＲＵ、ＭＮ、ＳＦ２、ＲＦ、ＰＲＩ、１７１４、２０５４、ＨＸＢ２、Ｚ６、ＢＸ０８、ＩＩＩＢ及びＳＣからなる群より選択されたＨＩＶ−１単離体の一つにおけるものである請求項２の合成ペプチド。４．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、ＧＸ₁ＧＸ₂配列（ここでＸ₁ はＰまたはＬ、Ｘ₂はＲ、ＫまたはＱ）を有するか、またはＨＩＶに特異的な抗血清を誘導し、かつＧＸ₁ＧＸ₂配列を認識し得る配列を有する請求項３の合成ペプチド。５．アミノ酸配列を含む該Ｂ−細胞エピトープが配列ＧＰＧＲよりなるかもしくはＨＩＶ−特異的抗血清を引き出すことができかつ配列ＧＰＧＲを認識する配列よりなる請求項５の合成ペプタイド。６．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、前記アミノ酸配列を含むＴ細胞のＣ末端に直接連結されている請求項５の合成ペプチド。７．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞が、配列ＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＴＬＢ−５６）、ＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（Ｖ３ＭＮ）、ＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦ（ＣＴＬＢ−２９）、ＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＴＬＢ−５５）ＮＴＲＫＳＩＹＩＧＰＧＲＡＦＨＴＴＧＲ（ＳＦ２）、ＮＴＲＫＲＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＶＴＩＧＫ（ＬＡＩ）、ＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＩＧ（ＩＩＩＢ）、ＮＴＲＫＳＩＴＫＧＰＧＲＶＩＹＡＴＧＱ（ＲＦ）、ＮＴＲＫＳＩＴＫＧＰＧＲＶＩＹＡＴＧＱＩＩＧ（ＲＦ）、ＮＴＲＱＳＴＰＩＧＬＧＱＡＬＹＴＴＲＧ（Ｚ６）、ＮＴＲＫＧＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＧＥＩＶＧＤＩＲＱ（２０５４）、ＮＴＲＫＲＩＨＭＧＰＧＲＡＦＹＡＴＧＤＩＩＧ（１７１４）及びＮＴＲＫＳＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＡＴＧＥＩＩＧ（ＢＸ０８）からなる群より選択されたアミノ酸配列、あるいは、該配列の一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を含む請求項６の合成ペプチド。８．少なくとも２つの異なるＨＩＶ−１アイソレート類からのハイブリッドＶ３ループ配列よりなるＢ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列に対してそのＣ−末端エンドにおいてリンクした人の免疫欠乏ビールス（ＨＩＶ）アイソレートのギャグ蛋白のＴ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列を含む合成ペプタイド。９．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、配列ＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＶＰ）またはＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＶＩＹＡＴＧＱＩＩＧ（ＨＢ）、あるいはこれらの一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項８の合成ペプチド。１０．少なくとも２つのＨＩＶ−１プライマリーアイソレート類のＶ３ループのコンセンサス配列よりなるＢ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列に対してそのＣ−末端エンドにおいてリンクした人の免疫欠乏ビールス（ＨＩＶ）アイソレートのギャグ蛋白のＴ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列を含む合成ペプタイド。１１．該Ｂ−細胞エピトープの該アミノ酸配列が配列ＮＴＲＫＳＩＰＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＧ（ＰＲＩ）ＮＴＲＫＳＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＧＥＩＩＧＣ（ＦＲＥ）、ＫＳＩＨＩＧＰＧＫＴＬＹＡＴ（ＬＩＰ）、ＲＫＳＩＰＩＧＰＧＲＡＦＹＴＳＧ（ＮＹＡ）、もしくはそれらの一部、変種または突然変異種であってその配列のＢ−細胞の性質を保持しているものよりなる請求項１０の合成ペプタイド。１２．配列を含むＢ−細胞エピトープが追加的にさらにＨＩＶのギャグ蛋白またはエンベロープ蛋白のＴ−細胞エピトープを含むアミノ酸配列にリンクしている請求項１の合成ペプタイド。１３．Ｂ−細胞エピトープよりなる少なくとも２つのアミノ酸配列にそのＣ−末端エンドにおいてリンクした人の免疫欠乏ビールス（ＨＩＶ）アイソレートのギャグ蛋白のＴ−細胞エピトープよりなる少なくとも１つのアミノ酸配列を含んでおり、該アミノ酸配列類はそれぞれが別のＨＩＶ−１アイソレートもしはＨＩＶ −アイソレートコンセンサス配列類からのＶ３ループ配列よりなっている合成ペプタイド。１４．該少なくとも２つのアミノ酸配列にＨＩＶ−アイソレートからのもう１つのＶ３ループ配列からのＢ−細胞エピトープからなるアミノ酸配列もしくはもう１つのＨＩＶ−アイソレートコンセンサス配列がリンクしている請求項１３の合成ペプタイド。１５．表Ｘに示すアミノ酸配列を有するＣＴＬＢ−１６０またはＣＴＬＢ−１６１、もしくはそのペプチド類のＴ−およびＢ−細胞の性質を保持するそれらの一部、変種もしくは突然変異種である請求項１４の合成ペプチド。１６．Ｘ₁ＬＫＤＷＸ₂アミノ酸配列（ここでＸ₁はＥ、Ａ、ＧまたはＱ、Ｘ₂はＡまたはＴ）、またはＨＩＶに特異的な抗血清を誘導し、かつＸ₁ＬＫＤＷＸ₂配列を認識し得る配列を有する、ヒト免疫不全（ＨＩＶ）単離体のｇｐ４１タンパクのＢ細胞エピトープを有するアミノ酸配列の少なくとも１つと、該アミノ酸配列に、そのＣ−末端エンドにおいて連結されたＨＩＶ単離体のｇａｇタンパクにあるＴ細胞エピトープを有するアミノ酸配列の少なくとも１つとを有する合成ペプチド。１７．前記ＨＩＶ単離体がＨＩＶ−１単離体である請求項１０、１３又は１６の合成ペプチド。１８．前記ｇｐ４１タンパクが、ＬＡＶ、ＢＲＵ、ＭＮ，ＳＦ２、ＲＦ、ＰＲＩ、１７１４、２０５４、ＨＸＢ２、Ｚ６、ＢＸ０８、ＩＩＩＢ及びＳＣからなる群より選択されたＨＩＶ−１単離体の一つにおけるものである請求項１７の合成ペプチド。１９．前記Ｔ細胞エピトープ含有アミノ酸配列が、表Ｉ及びＩＸに示されたアミノ酸配列Ｐ２４Ｅ、Ｐ２４Ｎ、Ｐ２４Ｌ、Ｐ２４Ｍ及びＰ２４Ｈからなる群より選択された一つ、あるいは、該選択された配列の一部、変化体または変異体であって該選択配列のＴ細胞特性を維持した配列を有する請求項１８の合成ペプチド。２０．前記アミノ酸配列を含むＴ細胞エピトープがｐ２４Ｅ、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞特性を維持した配列を有し、前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープがＥＬＫＤＷＡ配列を有するか、あるいはＨＩＶに特異的な抗血清を誘導し、かつＥＬＫＤＷＡ配列を認識し得る配列を有する請求項１６の合成ペプチド。２１．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、前記アミノ酸配列を含むＴ細胞のＣ末端に直接連結されている請求項２０の合成ペプチド。２２．前記アミノ酸配列を有するＢ細胞が、配列ＥＱＥＬＬＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦＤＩＴ（ＣＬＴＢ−９２Ａ）、ＥＬＬＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦＤＩＴ（ＣＬＴＢ−９４）、ＥＬＤＬＷＡＳＬＷＮＷＦＤＩＴ（ＣＬＴＢ−９６）、ＥＱＥＬＬＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦ（ＣＬＴＢ−９７Ａ）、ＥＬＬＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦ、ＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦ、ＥＱＥＬＬＥＬＤＫＷＡ、ＥＬＬＥＬＤＫＷＡ、ＥＬＤＬＷＡＳ及びＧＰＧＥＬＬＥＬＤＬＷＡＳＬからなる群より選択された配列、あるいは、該配列の一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を含む請求項２０の合成ペプチド。２３．前記配列を含むＢ細胞エピトープが、ＨＩＶ単離体のエンベロープタンパクのＶ３ループのＢ細胞エピトープの少なくとも１つを有するアミノ酸配列に追加的に連結されている請求項１６の合成ペプチド。２４．表Ｘに記述したＣＴＬＢ−１０２、ＣＴＬＢ−１０３、ＣＴＬＢ−１０５、ＣＴＬＢ−１０７、ｐ２４Ｅ−ＫＡＴ４、もしくはそのペプチドのＴ−およびＢ−細胞の性質を保持するそれらの一部、変種もしくは突然変異種である請求項２３の合成ペプチド。２５．前記配列を含むＢ細胞エピトープが、ＨＩＶのｇａｇタンパクまたはエンベロープタンパクのＴ細胞エピトープを含む更なるアミノ酸配列に追加的に連結されている請求項１９の合成ペプチド。２６．該Ｔ−細胞エピトープ類がＴ−細胞に対して複数の相異なる宿主に対し応答できるような免疫応答を提供するよう選択されている請求項２５の合成ペプチド。２７．前記配列を含む更なるＴ細胞エピトープが、ＨＩＶ里離体のｇｐ４１またはＶ３ループエンベロープタンパクのＢ細胞エピトープを含む更なるアミノ酸配列の少なくとも１つと追加的に連結されている請求項２５の合成ペプチド。２８．表ＸＩに示されたアミノ酸配列の一つ、あるいは、その配列の一部、変化体または変異体であって該配列のＴ−およびＢ−細胞特性を維持した配列を有する請求項２５の合成ペプチド。２９．多重分子を形成するように連結された、個々の合成ペプチドの複数を有する合成ペプチド分子であって、各合成ペプチドが、ヒト免疫不全（ＨＩＶ）単離体のｇａｇタンパクまたはエンベロープタンパクのＢ細胞エピトープを有するアミノ酸配列と、該アミノ酸配列に連結されたＨＩＶ単離体のｇａｇタンパクまたはエンベロープタンパクにあるＴ細胞エピトープを有するアミノ酸配列とを有する合成ペプチド分子。３０．前記多重分子中の各合成ペプチドが同じである請求項２９の合成ペプチド分子。３１．個々の合成ペプチドが請求項１〜１７の合成ペプチドから選択されたものである請求項２９の合成ペプチド分子。３２．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２９の合成ペプチド分子。３３．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２９の合成ペプチド分子。３４．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２９の合成ペプチド分子。３５．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＫＱＩＩＮＷＱＥＶＥＫＡＭＹＡＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２９の合成ペプチド分子。３６．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２９の合成ペプチド分子。３７．合成ペプチドの複数を含む免疫原性組成物であって、該合成ペプチドの各々が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）のタンパクのＢ細胞エピトープを含むアミノ酸配列の少なくとも１つと、該アミノ酸配列にそのＣ末端で結合したＨＩＶのタンパクのＴ細胞エピトープとを含み、前記合成ペプチドの複数は、免疫学的に異なるＨＩＶ−１単離体の複数に対する免疫応答を与えるために選択され、更にＴ細胞エピトープに対して異なる応答を示す複数の宿主中において前記免疫応答を与えるために選択されたものである免疫原性組成物。３８．前記複数の合成ペプチドが、表Ｉ及びＩＩの相当するアミノ酸配列を有するＣＴＬＢ−３６及び／またはＣＴＬＢ−８４、ＣＴＬＢ−９１及びＣＴＬＢ− ７０の混合物を含む請求項３７の免疫原性組成物。３９．前記複数の合成ペプチドが、表ＸＩのアミノ酸配列を有するペプチドＭＰＫ−２を更に含む請求項３８の免疫原性組成物。４０．請求項１、８、１０、１３、１６及び２９のいずれか１つに記載された合成ペプチドの少なくとも１つ、あるいはこれらいずれか１つの合成ペプチドをコードする核酸分子の少なくとも１つの免疫有効量と、薬学的に許容され得る担体とを含む免疫原性組成物。４１．粘膜または非口経投与用に製剤化された請求項４０の免疫原性組成物。４２．他の免疫原性の、または免疫増強性の物質の少なくとも１つを更に含む請求項４１の免疫原性組成物。４３．前記少なくとも１つの他の物質がアジュバントである請求項４２の免疫原性組成物。４４．前記アジュバントがリン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウムである請求項４３の免疫原性組成物。４５．ヒト用のワクチンとして製剤化された請求項３６の免疫原性組成物。４６．請求項４０の免疫原性組成物の免疫有効量を宿主に投与することを含む宿主を免疫する方法。４７．前記免疫原性組成物が粘膜または非口経投与用に製剤化されている請求項４６の方法。４８．前記免疫原性組成物が、他の免疫原性の、または免疫増強性の物質の少なくとも１つを更に含む請求項４７の方法。４９．前記少なくとも１つの他の物質がアジュバントである請求項４８の方法。５０．前記アジュバントがリン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウムである請求項４９の方法。５１．前記宿主がヒトである請求項４９の方法。５２．前記宿主は、自己形成性であるが、非感染性及び非複製性のＨＩＶ様粒子による前ペプチド免疫の少なくとも１回で１次免疫され、かつ、前記免疫原性組成物の投与が前記宿主の２次免疫の少なくとも１つとして行われる請求項４６の方法。５３．テスト試料中のＨＩＶ特異性抗体の検出に有用な診断用キットにおいて、（ａ）表面、（ｂ）前記表面に固定されたＨＩＶに特異的な抗体に対してエピトープ的な特異性をもつアミノ酸配列を有するペプチドの少なくとも１つで、該ペプチドは請求項１、８、１０、１３、１６及び２９のいずれか１つのペプチドであり、（ｃ）前記抗体と前記少なくとも１つの固定化ペプチドとを接触させて複合体を形成する手段、及び（ｄ）前記複合体を検出する手段を有する診断用キット。５４．テスト試料中のＨＩＶ特異性抗原検出用の診断用キットにおいて、該キットは、（ａ）表面、（ｂ）前記表面に固定された抗体で、該抗体は、ＨＩＶ抗原の異なるエピトープに対してエピトープ的に特異性でありかつ非交叉性であり、請求項１、８、１０、１３、１６及び２９のいずれか１つのペプチドにより生じたものであり、（ｃ）前記抗体と前記ＨＩＶ抗原とを接触させて複合体を形成する手段、及び（ｄ）前記複合体を検出する手段を有する診断用キット。５５．請求項１、８、１０、１３、１６及び２９のいずれか１項に記載の合成ペプチドをコードする核酸分子。５６．請求項１、８、１０、１３、１６及び２９のいずれか１項に記載の合成ペプチドのいずれかに特異的な抗体。（７）【図１】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＧ０１Ｎ 33/53 8310−2ＪＧ０１Ｎ 33/569 Ｈ 33/569 9162−4ＢＣ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ (72)発明者クライン、マイケル、エイチ. カナダ国エム２ピー１ビー９オンタリオ州ウィロウダール、マンドブールヴァード 16

Claims

【特許請求の範囲】１．ヒト免疫不全（ＨＩＶ）単離体のエンベロープタンパクのＶ３ループにあるＢ細胞エピトープを有するアミノ酸配列の少なくとも１つと、該アミノ酸配列に、そのＮ末端またはＣ末端において連結されたＨＩＶ単離体のｇａｇタンパクにあるＴ細胞エピトープを有するアミノ酸配列の少なくとも１つとを有し、Ｎ末端側に位置する場合は、前記配列を含むＢ細胞エピトープと前記配列を含むＴ細胞エピトープとが直接連結されている合成ペプチド。２．前記ＨＩＶ単離体がＨＩＶ−１単離体である請求項１の合成ペプチド。３．前記Ｖ３ループが、ＬＡＶ、ＢＲＵ、ＭＮ、ＳＦ２、ＲＦ、ＰＲＩ、１７１４、２０５４、ＨＸＢ２、Ｚ６、ＢＸ０８、ＩＩＩＢ及びＳＣからなる群より選択されたＨＩＶ−１単離体の一つにおけるものである請求項２の合成ペプチド。４．前記アミノ酸配列を含むＴ細胞エピトープが、表Ｉ及びＩＸに示されたアミノ酸配列Ｐ２４Ｅ、Ｐ２４Ｎ、Ｐ２４Ｌ、Ｐ２４Ｍ及びＰ２４Ｈからなる群より選択された一つ、あるいは、該選択された配列の一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞特性を維持した配列を有する請求項３の合成ペプチド。５．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、ＧＸ₁ＧＸ₂配列（ここでＸ₁はＰまたはＬ、Ｘ₂はＲ、ＫまたはＱ）を有するか、またはＨＩＶに特異的な抗血清を誘導し、かつＧＸ₁ＧＸ₂配列を認識し得る配列を有する請求項４の合成ペプチド。６．前記アミノ酸配列を含むＴ細胞エピトープが、ｐ２４Ｅ、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞特性を維持した配列を有し、前記Ｂ細胞エピトープがＧＰＧＲ配列を有するか、あるいはＨＩＶに特異的な抗血清を誘導し、かつＧＰＧＲ配列を認識し得る配列を有する請求項５の合成ペプチド。７．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、前記アミノ酸配列を含むＴ細胞のＣ末端に直接連結されている請求項６の合成ペプチド。８．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、配列ＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＴＬＢ−５６）、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項６の合成ペプチド。９．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞が、配列ＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＴＬＢ−５６）、ＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（Ｖ３ＭＮ）、ＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦ（ＣＴＬＢ−２９）、ＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＴＬＢ−５５）ＮＴＲＫＳＩＹＩＧＰＧＲＡＦＨＴＴＧＲ（ＳＦ２）、ＮＴＲＫＲＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＶＴＩＧＫ（ＬＡＩ）、ＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＩＧ（ＩＩＩＢ）、ＮＴＲＫＳＩＴＫＧＰＧＲＶＩＹＡＴＧＱ（ＲＦ）、ＮＴＲＫＳＩＴＫＧＰＧＲＶＩＹＡＴＧＱＩＩＧ（ＲＦ）、ＮＴＲＱＳＴＰＩＧＬＧＱＡＬＹＴＴＲＧ（Ｚ６）、ＮＴＲＫＧＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＧＥＩＶＧＤＩＲＱ（２０５４）、ＮＴＲＫＲＩＨＭＧＰＧＲＡＦＹＡＴＧＤＩＩＧ（１７１４）及びＮＴＲＫＳＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＡＴＧＥＩＩＧ（ＢＸ０８）からなる群より選択されたアミノ酸配列、あるいは、該配列の一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を含む請求項５の合成ペプチド。１０．前記配列を含むＢ細胞エピトープが、少なくとも２つの異なるＨＩＶ−１単離体からのＶ３ループ配列を含むＢ細胞エピトープを有する請求項３の合成ペプチド。１１．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、配列ＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＶＰ）またはＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＶＩＹＡＴＧＱＩＩＧ（ＨＢ）、あるいはこれらの一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項１０の合成ペプチド。１２．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、少なくとも２つのＨＩＶ− １一次単離体のＶ３ループにおける共通配列を有する請求項３の合成ペプチド。１３．前記Ｂ細胞エピトープのアミノ酸配列が、配列ＮＴＲＫＳＩＰＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＧ（ＰＲＩ）ＮＴＲＫＳＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＧＥＩＩＧＣ（ＦＲＥ）、あるいは、これらの一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項１２の合成ペプチド。１４．前記アミノ酸配列を含むＴ細胞のＣ末端に連結した請求項８〜１３のいずれか一つの合成ペプチド。１５．前記配列を含むＢ細胞エピトープが、ＨＩＶのｇａｇタンパクまたはエンベロープタンパクのＴ細胞エピトープを含む更なるアミノ酸配列に追加的に連結されている請求項４の合成ペプチド。１６．Ｘ₁ＬＫＤＷＸ₂配列（ここでＸ₁はＥ、Ａ、ＧまたはＱ，Ｘ₂はＡまたはＴ）、またはＨＩＶに特異的な抗血清を誘導し、かつＸ₁ＬＫＤＷＸ₂配列を認識し得る配列を有する、ヒト免疫不全（ＨＩＶ）単離体のｇｐ４１タンパクのＢ細胞エピトープを有するアミノ酸配列の少なくとも１つと、該アミノ酸配列に、そのＮ末端またはＣ末端において連結されたＨＩＶ単離体のｇａｇタンパクにあるＴ細胞エピトープを有するアミノ酸配列の少なくとも１つとを有する合成ペプチド。１７．前記ＨＩＶ単離体がＨＩＶ−１単離体である請求項１６の合成ペプチド。１８．前記ｇｐ４１タンパクが、ＬＡＶ、ＢＲＵ、ＭＮ、ＳＦ２、ＲＦ、ＰＲＩ、１７１４、２０５４、ＨＸＢ２、Ｚ６、ＢＸ０８、ＩＩＩＢ及びＳＣからなる群より選択されたＨＩＶ−１単離体の一つにおけるものである請求項１７の合成ペプチド。１９．前記Ｔ細胞エピトープ含有アミノ酸配列が、表Ｉ及びＩＸに示されたアミノ酸配列Ｐ２４Ｅ、Ｐ２４Ｎ、Ｐ２４Ｌ、Ｐ２４Ｍ及びＰ２４Ｈからなる群より選択された一つ、あるいは、該選択された配列の一部、変化体または変異体であって該選択配列のＴ細胞特性を維持した配列を有する請求項１８の合成ペプチド。２０．前記アミノ酸配列を含むＴ細胞エピトープがｐ２４Ｅ、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞特性を維持した配列を有し、前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープがＥＬＫＤＷＡ配列を有するか、あるいはＨＩＶに特異的な抗血清を誘導し、かつＥＬＫＤＷＡ配列を認識し得る配列を有する請求項１６の合成ペプチド。２１．前記アミノ酸配列を含むＢ細胞エピトープが、前記アミノ酸配列を含むＴ細胞のＣ末端に直接連結されている請求項２０の合成ペプチド。２２．前記アミノ酸配列を有するＢ細胞が、配列ＥＱＥＬＬＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦＤＩＴ（ＣＬＴＢ−９２Ａ）、ＥＬＬＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦＤＩＴ（ＣＬＴＢ−９４）、ＥＬＤＬＷＡＳＬＷＮＷＦＤＩＴ（ＣＬＴＢ−９６）、ＥＱＥＬＬＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦ（ＣＬＴＢ−９７Ａ）、ＥＬＬＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦ、ＥＬＤＫＷＡＳＬＷＮＷＦ、ＥＱＥＬＬＥＬＤＫＷＡ、ＥＬＬＥＬＤＫＷＡ、ＥＬＤＬＷＡＳ及びＧＰＧＥＬＬＥＬＤＬＷＡＳＬからなる群より選択された配列、あるいは、該配列の一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を含む請求項２０の合成ペプチド。２３．前記配列を含むＢ細胞エピトープが、ＨＩＶ単離体のエンベロープタンパクのＶ３ループのＢ細胞エピトープの少なくとも１つを有するアミノ酸配列に追加的に連結されている請求項１６の合成ペプチド。２４．前記Ｂ細胞エピトープが、表Ｘに記載の配列の一つ、あるいは、その配列の一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列である請求項２３の合成ペプチド。２５．前記配列を含むＢ細胞エピトープが、ＨＩＶのｇａｇタンパクまたはエンベロープタンパクのＴ細胞エピトープを含む更なるアミノ酸配列に追加的に連結されている請求項１９の合成ペプチド。２６．前記配列を含む更なるＢ細胞エピトープが、ＨＩＶ単離体のｇｐ４１またはＶ３ループエンベロープタンパクのＢ細胞エピトープを含む更なるアミノ酸配列の少なくとも１つと追加的に連結されている請求項２５の合成ペプチド。２７．表ＸＩに示されたアミノ酸配列の一つ、あるいは、その配列の一部、変化体または変異体であって該配列のＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２５の合成ペプチド。２８．多重分子を形成するように連結された、個々の合成ペプチドの複数を有する合成ペプチド分子であって、各合成ペプチドが、ヒト免疫不全（ＨＩＶ）単離体のｇａｇタンパクまたはエンベロープタンパクのＢ細胞エピトープを有するアミノ酸配列と、該アミノ酸配列に連結されたＨＩＶ単離体のｇａｇタンパクまたはエンベロープタンパクにあるＴ細胞エピトープを有するアミノ酸配列とを有する合成ペプチド分子。２９．前記多重分子中の各合成ペプチドが同じである請求項２８の合成ペプチド分子。３０．個々の合成ペプチドが請求項１〜１７の合成ペプチドから選択されたものである請求項２８の合成ペプチド分子。３１．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２８の合成ペプチド分子。３２．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２８の合成ペプチド分子。３３．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＮＴＲＫＳＩＲＩＱＲＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２８の合成ペプチド分子。３４．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＫＱＩＩＮＷＱＥＶＥＫＡＭＹＡＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２８の合成ペプチド分子。３５．前記多重分子が、アミノ酸配列［ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ］₄、あるいはその一部、変化体または変異体であって該配列のＴ細胞及びＢ細胞特性を維持した配列を有する請求項２８の合成ペプチド分子。３６．請求項１、１６及び２８のいずれか１つの記載された合成ペプチドの少なくとも１つ、あるいはこれらいずれか１つの合成ペプチドをコードする核酸分子の少なくとも１つの免疫有効量と、薬学的に許容され得る担体とを含む免疫原性組成物。３７．免疫学的に異なるＨＩＶ−１単離体の複数に対する免疫応答を与えるために選択された前記合成ペプチドの有効量の複数を含む請求項３６の免疫原性組成物。３８．前記合成ペプチドの有効量の複数が、Ｔ細胞エピトープに対して異なる応答を示す複数の宿主中において前記免疫応答を与えるために更に選択されたものである請求項３７の免疫原性組成物。３９．前記合成ペプチドの複数が、ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＴＬＢ−３６）、ＫＱＩＩＮＭＷＱＥＶＥＫＡＭＹＡＮＫＲＫＲＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＴＴＫＮ（ＣＴＬＢ−９１）、ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＮＴＲＫＳＩＨＩＧＰＧＲＡＦＹＡＴＧＥＩＩＧ（ＢＯＸ０８）を含む請求項３８の免疫原性組成物。４０．前記合成ペプチドの複数に、ＧＰＫＥＰＦＲＤＹＶＤＲＦＹＫＧＰＧＥＬＤＫＷＡＳＧＰＧＫＱＩＩＮＭＷＱＥＶＥＫＡＭＹＡ（ＭＰＫ−２）が更に含まれる請求項３９の免疫原性組成物。４１．粘膜または非口経投与用に製剤化された請求項３６の免疫原性組成物。４２．他の免疫原性の、または免疫増強性の物質の少なくとも１つを更に含む請求項４１の免疫原性組成物。４３．前記少なくとも１つの他の物質がアジュバントである請求項４２の免疫原性組成物。４４．前記アジュバントがリン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウムである請求項４３の免疫原性組成物。４５．ヒト用のワクチンとして製剤化された請求項３６の免疫原性組成物。４６．請求項３６の免疫原性組成物の免疫有効量を宿主に投与することを含む宿主を免疫する方法。４７．前記免疫原性組成物が粘膜または非口経投与用に製剤化されている請求項４６の方法。４８．前記免疫原性組成物が、他の免疫原性の、または免疫増強性の物質の少なくとも１つを更に含む請求項４７の方法。４９．前記少なくとも１つの他の物質がアジュバントである請求項４８の方法。５０．前記アジュバントがリン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウムである請求項４９の方法。５１．前記宿主がヒトである請求項４９の方法。５２．前記宿主は、自己形成性であるが、非感染性及び非複製性のＨＩＶ様粒子による前ペプチド免疫の少なくとも１回で１次免疫され、かつ、前記免疫原性組成物の投与が前記宿主の２次免疫の少なくとも１つとして行われる請求項４６の方法。５３．テスト試料中のＨＩＶ特異性抗体の検出に有用な診断用キットにおいて、（ａ）表面、（ｂ）前記表面に固定されたＨＩＶに特異的な抗体に対してエピトープ的な特異性をもつアミノ酸配列を有するペプチドの少なくとも１つで、該ペプチドは請求項１、２６及び２８のいずれか１つのペプチドであり、（ｃ）前記抗体と前記少なくとも１つの固定化ペプチドとを接触させて複合体を形成する手段、及び（ｄ）前記複合体を検出する手段を有する診断用キット。５４．テスト試料中のＨＩＶ特異性抗原検出用の診断用キットにおいて、該キットは、（ａ）表面、（ｂ）前記表面に固定された抗体で、該抗体は、ＨＩＶ抗原の異なるエピトープに対してエピトープ的に特異性でありかつ非交叉性であり、請求項１、１６及び２８のいずれか１つのペプチドにより生じたものであり、（ｃ）前記抗体と前記ＨＩＶ抗原とを接触させて複合体を形成する手段、及び（ｄ）前記複合体を検出する手段を有する診断用キット。５５．請求項１、１６及び２８のいずれか１つの合成ペプチドをコードする核酸配列。５６．請求項１、１６及び２８のいずれか１つの合成ペプチドのいずれかに特異的な抗体。