JPH08313443A - 改良型化学発光測定方法 - Google Patents
改良型化学発光測定方法Info
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- JPH08313443A JPH08313443A JP14524895A JP14524895A JPH08313443A JP H08313443 A JPH08313443 A JP H08313443A JP 14524895 A JP14524895 A JP 14524895A JP 14524895 A JP14524895 A JP 14524895A JP H08313443 A JPH08313443 A JP H08313443A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 合成化学発光物質を標識とする化学発光測
定方法において同時再現性の向上と量子収率の改善を同
時に実現すること。 【構成と効果】 発光時に、非イオン系界面活性剤とヘ
キサデシルトリメチルアンモニウムブロマイドを含有さ
せることで、同時再現性の向上と量子収率の改善を同時
に実現できる。
定方法において同時再現性の向上と量子収率の改善を同
時に実現すること。 【構成と効果】 発光時に、非イオン系界面活性剤とヘ
キサデシルトリメチルアンモニウムブロマイドを含有さ
せることで、同時再現性の向上と量子収率の改善を同時
に実現できる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は化学発光測定方法に係る
もので、固相担体を使用する不均一系化学発光免疫測定
方法を含み、合成化学発光物質を標識とする化学発光測
定方法における測定感度ならびに測定精度の改良に関す
るものである。
もので、固相担体を使用する不均一系化学発光免疫測定
方法を含み、合成化学発光物質を標識とする化学発光測
定方法における測定感度ならびに測定精度の改良に関す
るものである。
【０００２】
【従来の技術】アクリジニウムエステル、ルミノール、
過シュウ酸エステル等の合成化学発光物質を使用する一
般の無機化学発光反応において、ヘキサデシルトリメチ
ルアンモニウムブロマイド（以下ＣＴＡＢと略記する）
等の陽イオン系界面活性剤がミセル触媒効果（ミセル増
感効果とも称される）を有することが報告されている。
（生物発光と化学発光 今井一洋編 広川書店刊（昭和
６４年）第１１６頁〜１１７頁、第２６０頁）一方、パ
ーオキシダーゼ（酵素）を触媒とし、ルミノールを用い
た化学発光免疫分析において、発光強度測定時に、反応
液中に非イオン系界面活性剤及び糖アルコール、脱脂粉
乳等を共存させることにより、Ｓ／Ｎ（シグナル／ノイ
ズ）比を改良させることが開示されている。（特開平６
−２２７９５）
過シュウ酸エステル等の合成化学発光物質を使用する一
般の無機化学発光反応において、ヘキサデシルトリメチ
ルアンモニウムブロマイド（以下ＣＴＡＢと略記する）
等の陽イオン系界面活性剤がミセル触媒効果（ミセル増
感効果とも称される）を有することが報告されている。
（生物発光と化学発光 今井一洋編 広川書店刊（昭和
６４年）第１１６頁〜１１７頁、第２６０頁）一方、パ
ーオキシダーゼ（酵素）を触媒とし、ルミノールを用い
た化学発光免疫分析において、発光強度測定時に、反応
液中に非イオン系界面活性剤及び糖アルコール、脱脂粉
乳等を共存させることにより、Ｓ／Ｎ（シグナル／ノイ
ズ）比を改良させることが開示されている。（特開平６
−２２７９５）
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上述の
方法を検体中の被検物質を直接的あるいは間接的に合成
化学発光物質で標識し、その合成化学発光物質を発光開
始試薬により発光させ、発光量を測定することにより、
被検物質の定量を行う化学発光測定方法に適用した場
合、総発光量（発光開始時点より終了時点までの発光強
度の積分値）は確実に増大するが、テーリングが長引
き、それに伴って、ノイズ量が増大する。結果として、
測定感度は向上しているが、精度の悪化を招く。測定性
能を向上させるためには、ノイズ量を減少させる必要が
ある。
方法を検体中の被検物質を直接的あるいは間接的に合成
化学発光物質で標識し、その合成化学発光物質を発光開
始試薬により発光させ、発光量を測定することにより、
被検物質の定量を行う化学発光測定方法に適用した場
合、総発光量（発光開始時点より終了時点までの発光強
度の積分値）は確実に増大するが、テーリングが長引
き、それに伴って、ノイズ量が増大する。結果として、
測定感度は向上しているが、精度の悪化を招く。測定性
能を向上させるためには、ノイズ量を減少させる必要が
ある。
【０００４】発光量の情報は、測定対象物の量に固有で
特異的なものとして表現されなければならない。そのた
めには、測定時間を発光が終了するまで延ばす必要があ
るが、測定時間を長くすれば、それだけノイズ量が増加
することになり、同時再現性の悪化につながる。逆にノ
イズを抑えるために測定時間を短くすれば、測定対象物
の正確な量が発光量に反映されなくなる。これらの点を
勘案すれば、測定時間を短くする手段には限界があり、
短くするだけでは同時再現性に十分な効果は得られな
い。そこで、測定時間を短くしても発光量のもつ情報量
に影響をおよぼさないようにするには、発光そのものの
終了時間を早くする手段を探究することが必要である。
特異的なものとして表現されなければならない。そのた
めには、測定時間を発光が終了するまで延ばす必要があ
るが、測定時間を長くすれば、それだけノイズ量が増加
することになり、同時再現性の悪化につながる。逆にノ
イズを抑えるために測定時間を短くすれば、測定対象物
の正確な量が発光量に反映されなくなる。これらの点を
勘案すれば、測定時間を短くする手段には限界があり、
短くするだけでは同時再現性に十分な効果は得られな
い。そこで、測定時間を短くしても発光量のもつ情報量
に影響をおよぼさないようにするには、発光そのものの
終了時間を早くする手段を探究することが必要である。
【０００５】本発明者らは、アクリジニウム等の合成化
学発光物質を標識とする化学発光測定方法において、上
記の諸問題を解決すべく、前記のごとき発光パターンに
着目し、研究を推進した。即ち、可及的に発光ピークが
高く、テーリングが少なく、かつ短時間に発光反応を終
了させるような試薬を探究し続けた。その結果、本発明
方法に到達したのもである。
学発光物質を標識とする化学発光測定方法において、上
記の諸問題を解決すべく、前記のごとき発光パターンに
着目し、研究を推進した。即ち、可及的に発光ピークが
高く、テーリングが少なく、かつ短時間に発光反応を終
了させるような試薬を探究し続けた。その結果、本発明
方法に到達したのもである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明は、検体中の被検
物質を直接的あるいは間接的に合成化学発光物質で標識
し、その合成化学発光物質を発光開始試薬により発光さ
せ、発光量を測定することにより、被検物質の定量を行
う化学発光測定方法において、非イオン系界面活性剤お
よびＣＴＡＢを用いることを特徴とする感度ならびに精
度の改良された化学発光測定方法、 また被検物質が検
体中の抗原または抗体であり、その被検物質を固相担体
に結合させることを特徴とする化学発光免疫測定方法で
あり、そして好ましくは非イオン系界面活性剤およびＣ
ＴＡＢの発光時の濃度がそれぞれ５重量／容量パーセン
ト以下である化学発光測定方法、またＣＴＡＢの発光時
の濃度が０．００１〜２重量／容量パーセントである化
学発光測定方法、あるいは合成化学発光物質がアクリジ
ニウムエステル、ルミノール、または、過シュウ酸エス
テルのいずれがである化学発光測定方法であり、さらに
固相担体が繊維集合体であることが好ましい上記化学発
光測定方法を提示するものである。
物質を直接的あるいは間接的に合成化学発光物質で標識
し、その合成化学発光物質を発光開始試薬により発光さ
せ、発光量を測定することにより、被検物質の定量を行
う化学発光測定方法において、非イオン系界面活性剤お
よびＣＴＡＢを用いることを特徴とする感度ならびに精
度の改良された化学発光測定方法、 また被検物質が検
体中の抗原または抗体であり、その被検物質を固相担体
に結合させることを特徴とする化学発光免疫測定方法で
あり、そして好ましくは非イオン系界面活性剤およびＣ
ＴＡＢの発光時の濃度がそれぞれ５重量／容量パーセン
ト以下である化学発光測定方法、またＣＴＡＢの発光時
の濃度が０．００１〜２重量／容量パーセントである化
学発光測定方法、あるいは合成化学発光物質がアクリジ
ニウムエステル、ルミノール、または、過シュウ酸エス
テルのいずれがである化学発光測定方法であり、さらに
固相担体が繊維集合体であることが好ましい上記化学発
光測定方法を提示するものである。
【０００７】本発明の測定方法においては、用いる非イ
オン系界面活性剤および、ＣＴＡＢにより、特に繊維集
合体固相担体への試薬の浸透性を促進し、発光パターン
を著しくシャープにさせ、発光時間の短縮、テーリング
解消効果をもたらし、これにより測定中のノイズを極力
低位に抑制することができる。さらに、このことは非特
異吸着を含むバックグランドのピークと発光量のピーク
の分離が容易となり、同時再現性及びＳ／Ｎ比の向上を
もたらす。
オン系界面活性剤および、ＣＴＡＢにより、特に繊維集
合体固相担体への試薬の浸透性を促進し、発光パターン
を著しくシャープにさせ、発光時間の短縮、テーリング
解消効果をもたらし、これにより測定中のノイズを極力
低位に抑制することができる。さらに、このことは非特
異吸着を含むバックグランドのピークと発光量のピーク
の分離が容易となり、同時再現性及びＳ／Ｎ比の向上を
もたらす。
【０００８】本発明方法において、非イオン系界面活性
剤とＣＴＡＢを併用せずに、非イオン系界面活性剤だけ
を使用した場合は、発光量は、増大するが、相伴って、
ノイズ量も大きくなる。一方、ＣＴＡＢは発光時間を短
縮することで、テーリングの少ない、上りシャープな発
光パターンを形成する。さらに、これら異なった性質を
持つ両者を組合せた時、互いに効果を打ち消しあうこと
なく、互いの効果を生かした方向に働くということが判
明した。即ち発光量は増大させた状態で、発光パターン
を鋭くシャープにする。
剤とＣＴＡＢを併用せずに、非イオン系界面活性剤だけ
を使用した場合は、発光量は、増大するが、相伴って、
ノイズ量も大きくなる。一方、ＣＴＡＢは発光時間を短
縮することで、テーリングの少ない、上りシャープな発
光パターンを形成する。さらに、これら異なった性質を
持つ両者を組合せた時、互いに効果を打ち消しあうこと
なく、互いの効果を生かした方向に働くということが判
明した。即ち発光量は増大させた状態で、発光パターン
を鋭くシャープにする。
【０００９】本発明方法に使用する合成化学発光物質と
しては、アクリジニウム、ルミノール等、それ自体が発
光開始試薬により励起され、発光する合成化合物、また
は過シュウ酸エステルの如く、それ自体は励起されても
発光しないが、その励起エネルギーを共存させた蛍光物
質へ移動させ、励起発光させる合成化合物のいずれでも
適宜使用することができる。
しては、アクリジニウム、ルミノール等、それ自体が発
光開始試薬により励起され、発光する合成化合物、また
は過シュウ酸エステルの如く、それ自体は励起されても
発光しないが、その励起エネルギーを共存させた蛍光物
質へ移動させ、励起発光させる合成化合物のいずれでも
適宜使用することができる。
【００１０】本発明方法に使用する発光開始試薬の発光
誘発種としては、合成化学発光物質（例えば、ルミノー
ル、アクリジニウムエステル、過シュウ酸エステル等）
を励起させる公知の発光誘発種（たとえば過酸化水素、
オゾン、ハロゲンなど）を使用することができる。
誘発種としては、合成化学発光物質（例えば、ルミノー
ル、アクリジニウムエステル、過シュウ酸エステル等）
を励起させる公知の発光誘発種（たとえば過酸化水素、
オゾン、ハロゲンなど）を使用することができる。
【００１１】本発明方法に使用する、非イオン系界面活
性剤は、ポリオキシエチレンソルビタン高級脂肪酸エス
テル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、
ポリオキシエチレンアルキルエーテル等であり、例えば
市販品ではトゥイーン（ ナカライテスク社製）、トリ
トンＸ（和光純薬社製）、ソフタノール（日本触媒社
製）等を例示することができる。
性剤は、ポリオキシエチレンソルビタン高級脂肪酸エス
テル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、
ポリオキシエチレンアルキルエーテル等であり、例えば
市販品ではトゥイーン（ ナカライテスク社製）、トリ
トンＸ（和光純薬社製）、ソフタノール（日本触媒社
製）等を例示することができる。
【００１２】本発明方法に使用する発光時のＣＴＡＢの
濃度は、少なくとも発光量の低下を招かない濃度、すな
わち、５重量／容量パーセント（以下％と略記する）以
下にしなければならないが、通常ＣＴＡＢ濃度は発光時
の濃度で０．００１〜２％とすることが好適である。
濃度は、少なくとも発光量の低下を招かない濃度、すな
わち、５重量／容量パーセント（以下％と略記する）以
下にしなければならないが、通常ＣＴＡＢ濃度は発光時
の濃度で０．００１〜２％とすることが好適である。
【００１３】本発明方法に使用する固相担体としては、
ビーズ、試験管、マイクロプレート、マイクロパーティ
クル、ガラス繊維集合体（例えばガラスろ紙）、セルロ
ース繊維集合体等があるが、ガラス集合体が好適であ
る。これは、ガラスが測定対象物質や試薬に対して活性
を持たないという点と、繊維集合体は同体積の固体と比
較して表面積が大きく、測定対象物や試薬の保持に優れ
ていること、さらに、発光及び蛍光検出においての透過
性が良いためである。
ビーズ、試験管、マイクロプレート、マイクロパーティ
クル、ガラス繊維集合体（例えばガラスろ紙）、セルロ
ース繊維集合体等があるが、ガラス集合体が好適であ
る。これは、ガラスが測定対象物質や試薬に対して活性
を持たないという点と、繊維集合体は同体積の固体と比
較して表面積が大きく、測定対象物や試薬の保持に優れ
ていること、さらに、発光及び蛍光検出においての透過
性が良いためである。
【００１４】次に本発明方法を、実施例及び比較例を掲
示し具体的に説明するが、本発明の技術思想はこれによ
り限定されるものではない。
示し具体的に説明するが、本発明の技術思想はこれによ
り限定されるものではない。
【００１５】実施例１ Ｉ． アビジン結合ガラス繊維ろ紙（ＮＨＳ−ビオチン
法）作製方法 ガラス繊維ろ紙（ワットマン Ｆ１４５−０３、直径９
ｍｍ、厚さ１．２ｍｍ）を３−アミノプロピルトリエト
キシシランの２％アセトン溶液中に、室温で１時間浸漬
してガラスと３−アミノプロピルトリエトキシシランを
反応させ、アミノ化ガラス繊維ろ紙を得た。アミノ化ガ
ラス繊維ろ紙を、ＮＨＳ−ＬＣ−ビオチン（ピアース
［ＰＩＥＲＣＥ］社製）０．０１２５ｍｇ／ｍｌを含む
０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（以下ＮａＰＢとい
う）（ｐＨ８．０）中に、室温で浸漬し、反応させた。
蒸留水で洗浄した後、ビオチンを導入したガラス繊維ろ
紙をアビジン溶液（アビジン０．１ｍｇ／ｍｌ、ｐＨ
７．０、０．１Ｍ、ＮａＰＢ）に４℃で３０分以上浸漬
した。
法）作製方法 ガラス繊維ろ紙（ワットマン Ｆ１４５−０３、直径９
ｍｍ、厚さ１．２ｍｍ）を３−アミノプロピルトリエト
キシシランの２％アセトン溶液中に、室温で１時間浸漬
してガラスと３−アミノプロピルトリエトキシシランを
反応させ、アミノ化ガラス繊維ろ紙を得た。アミノ化ガ
ラス繊維ろ紙を、ＮＨＳ−ＬＣ−ビオチン（ピアース
［ＰＩＥＲＣＥ］社製）０．０１２５ｍｇ／ｍｌを含む
０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（以下ＮａＰＢとい
う）（ｐＨ８．０）中に、室温で浸漬し、反応させた。
蒸留水で洗浄した後、ビオチンを導入したガラス繊維ろ
紙をアビジン溶液（アビジン０．１ｍｇ／ｍｌ、ｐＨ
７．０、０．１Ｍ、ＮａＰＢ）に４℃で３０分以上浸漬
した。
【００１６】ＩＩ． 合成化学発光物質アクリジニウム
エステルを用いた化学発光免疫測定によるＡＦＰの測定 １）５μｇ／ｍｌのＡＦＰ（アルファフェトプロテイ
ン）試料５２μｌ、ビオチニル化抗ＡＦＰモノクローナ
ル抗体２．６μｇ（６．５μｌ）及びアクリジニウムエ
ステル標識抗ＡＦＰポリクローナル抗体０．０６５μｇ
（６．５μｌ）を混合し、室温１５分間反応させる。 ２）上記反応液６５μｌを、Ｉで得た直径９ｍｍ、厚さ
１．２ｍｍのアビジン結合ガラス繊維ろ紙（ＮＨＳ−ビ
オチン法）に添加し、室温で１０分間インキュベートす
る。
エステルを用いた化学発光免疫測定によるＡＦＰの測定 １）５μｇ／ｍｌのＡＦＰ（アルファフェトプロテイ
ン）試料５２μｌ、ビオチニル化抗ＡＦＰモノクローナ
ル抗体２．６μｇ（６．５μｌ）及びアクリジニウムエ
ステル標識抗ＡＦＰポリクローナル抗体０．０６５μｇ
（６．５μｌ）を混合し、室温１５分間反応させる。 ２）上記反応液６５μｌを、Ｉで得た直径９ｍｍ、厚さ
１．２ｍｍのアビジン結合ガラス繊維ろ紙（ＮＨＳ−ビ
オチン法）に添加し、室温で１０分間インキュベートす
る。
【００１７】３）反応終了後のガラス繊維ろ紙をＰＢＳ
−Ｔｗｅｅｎにより洗浄し（Ｂ／Ｆ分離）、これに非イ
オン系界面活性剤（ソタノール２００）０．５％、ＣＴ
ＡＢ（和光純薬社製）０．１％を含有させた０．３％過
酸化水素溶液（０．１Ｍクエン酸リン酸水溶液中）（以
下下線部をバッファーＡとする）を添加し室温で５分間
放置した後、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を添加することによ
りアクリジニウムエステルを発光させ、ろ紙上の発光量
を自社製フォトンカウンターにより測定した。結果を第
１表、第２表、および第１図で示した。
−Ｔｗｅｅｎにより洗浄し（Ｂ／Ｆ分離）、これに非イ
オン系界面活性剤（ソタノール２００）０．５％、ＣＴ
ＡＢ（和光純薬社製）０．１％を含有させた０．３％過
酸化水素溶液（０．１Ｍクエン酸リン酸水溶液中）（以
下下線部をバッファーＡとする）を添加し室温で５分間
放置した後、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を添加することによ
りアクリジニウムエステルを発光させ、ろ紙上の発光量
を自社製フォトンカウンターにより測定した。結果を第
１表、第２表、および第１図で示した。
【００１８】比較例１ 実施例１において、バッファーＡ中に界面活性剤を含有
させなかった以外は、すべて同様にして測定した。結果
を表１、表２、図１で示した。
させなかった以外は、すべて同様にして測定した。結果
を表１、表２、図１で示した。
【００１９】比較例２ 実施例１において、バッファーＡ中に非イオン系界面活
性剤（ソフタノール２００）だけを、０．５％含有させ
た以外は、すべて同様にして測定した。結果を表１、
表２、図１で示した。
性剤（ソフタノール２００）だけを、０．５％含有させ
た以外は、すべて同様にして測定した。結果を表１、
表２、図１で示した。
【００２０】表１および図１より、の同時再現性が最
もよい測定時間３ｓｅｃで比較すると、に対しては
悪化しているが、は改善されていることが解る。言い
換えると、非イオン系界面活性剤だけ含有させた場合は
同時再現性は悪化する。それは、発光パターンの変化に
より測定時間が現行の３ｓｅｃでは不足しているためで
ある。そこで測定時間を５ｓｅｃに延長してみるとは
若干同時再現性を改善した。これも測定時間の不足を裏
づけている。の場合は、発光パターンからも解るよう
に３ｓｅｃで発光がほぼ終了している。測定時間が５ｓ
ｅｃの場合、よりも格段に同時再現性は改善され、測
定時間３ｓｅｃではよりも同時再現性よく測定でき
た。また、において測定時間３ｓｅｃよりも５ｓｅｃ
の方が同時再現性が悪化したのは、ノイズ成分の影響で
あると考えられる。このように測定時間を長くするのは
同時再現性に悪影響を及ぼす。
もよい測定時間３ｓｅｃで比較すると、に対しては
悪化しているが、は改善されていることが解る。言い
換えると、非イオン系界面活性剤だけ含有させた場合は
同時再現性は悪化する。それは、発光パターンの変化に
より測定時間が現行の３ｓｅｃでは不足しているためで
ある。そこで測定時間を５ｓｅｃに延長してみるとは
若干同時再現性を改善した。これも測定時間の不足を裏
づけている。の場合は、発光パターンからも解るよう
に３ｓｅｃで発光がほぼ終了している。測定時間が５ｓ
ｅｃの場合、よりも格段に同時再現性は改善され、測
定時間３ｓｅｃではよりも同時再現性よく測定でき
た。また、において測定時間３ｓｅｃよりも５ｓｅｃ
の方が同時再現性が悪化したのは、ノイズ成分の影響で
あると考えられる。このように測定時間を長くするのは
同時再現性に悪影響を及ぼす。
【００２１】表２および図１より、 において測定
時間１ｓｅｃでの発光量は、５ｓｅｃでの発光量と比較
して約５０％しかなく、３ｓｅｃでも５ｓｅｃの時の約
９７％しか得られない。しかし、においては測定時間
１ｓｅｃでの発光量は、５ｓｅｃでの発光量の８０％以
上がすでに存在し、３ｓｅｃでは９９％以上存在してい
た。よってでは３ｓｅｃで十分な発光量を得ることが
できる。以上からであれば測定時間を必要最小限に短
くし、最大限ノイズの影響を排除してもシグナルは十分
確保できる。つまり、シグナルの持つ検体の特異性が反
映している測定値が得られることになる。
時間１ｓｅｃでの発光量は、５ｓｅｃでの発光量と比較
して約５０％しかなく、３ｓｅｃでも５ｓｅｃの時の約
９７％しか得られない。しかし、においては測定時間
１ｓｅｃでの発光量は、５ｓｅｃでの発光量の８０％以
上がすでに存在し、３ｓｅｃでは９９％以上存在してい
た。よってでは３ｓｅｃで十分な発光量を得ることが
できる。以上からであれば測定時間を必要最小限に短
くし、最大限ノイズの影響を排除してもシグナルは十分
確保できる。つまり、シグナルの持つ検体の特異性が反
映している測定値が得られることになる。
【００２２】
【表１】 下線部は各、、において最も良好な同時再現性。
同時再現性とは変動係数（ＣＶ，％）を意味し、式標準
偏差／平均，％で算出する。
同時再現性とは変動係数（ＣＶ，％）を意味し、式標準
偏差／平均，％で算出する。
【００２３】
【表２】 発光量とは発光開始後各時間までの発光強度の積分値で
ある。
ある。
【００２４】
【図１】実施例１、比較例１および２の測定結果（発光
パターン）である。
パターン）である。
【符号の説明】 非イオン系界面活性剤およびＣＴＡＢを含有させた
場合 界面活性剤なしの場合 非イオン系界面活性剤だけ含有させた場合
場合 界面活性剤なしの場合 非イオン系界面活性剤だけ含有させた場合
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成７年７月２６日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正内容】
【００１７】３）反応終了後のガラス繊維ろ紙をＰＢＳ
−Ｔｗｅｅｎにより洗浄し（Ｂ／Ｆ分離）、これに非イ
オン系界面活性剤（ソフタノール２００）０．５％、Ｃ
ＴＡＢ（和光純薬社製）０．１％を含有させた０．３％
過酸化水素溶液（０．１Ｍクエン酸リン酸水溶液中）
（以下下線部をバッファーＡとする）を添加し室温で５
分間放置した後、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を添加すること
によりアクリジニウムエステルを発光させ、ろ紙上の発
光量を自社製フォトンカウンターにより測定した。結果
を第１表、第２表、および第１図で示した。
−Ｔｗｅｅｎにより洗浄し（Ｂ／Ｆ分離）、これに非イ
オン系界面活性剤（ソフタノール２００）０．５％、Ｃ
ＴＡＢ（和光純薬社製）０．１％を含有させた０．３％
過酸化水素溶液（０．１Ｍクエン酸リン酸水溶液中）
（以下下線部をバッファーＡとする）を添加し室温で５
分間放置した後、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液を添加すること
によりアクリジニウムエステルを発光させ、ろ紙上の発
光量を自社製フォトンカウンターにより測定した。結果
を第１表、第２表、および第１図で示した。
Claims (6)
- 【請求項１】 検体中の被検物質を直接的あるいは間
接的に合成化学発光物質で標識し、その合成化学発光物
質を発光開始試薬により発光させ、発光量を測定するこ
とにより、被検物質の定量を行う化学発光測定方法にお
いて、非イオン系界面活性剤およびヘキサデシルトリメ
チルアンモニウムブロマイドを用いることを特徴とする
感度ならびに精度の改良された化学発光測定方法。 - 【請求項２】 被検物質が検体中の抗原または抗体であ
り、その被検物質を固相担体に結合させることを特徴と
する請求項１に記載の化学発光免疫測定方法。 - 【請求項３】 非イオン系界面活性剤およびヘキサデ
シルトリメチルアンモニウムブロマイドの発光時の濃度
がそれぞれ５重量／容量パーセント以下であることを特
徴とする請求項１〜２に記載の化学発光測定方法。 - 【請求項４】 ヘキサデシルトリメチルアンモニウム
ブロマイドの発光時の濃度が０．００１〜２重量／容量
パーセントである請求項１〜２に記載の化学発光測定方
法。 - 【請求項５】 合成化学発光物質がアクリジニウムエス
テル、ルミノール、または、過シュウ酸エステルのいず
れかである請求項１〜４に記載の化学発光測定方法。 - 【請求項６】 固相担体がビーズ、試験管、マイクロプ
レート、マイクロパーティクル、ガラス繊維集合体およ
びセルロース繊維集合体の中から選ばれたものである請
求項１〜５に記載の化学発光測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14524895A JPH08313443A (ja) | 1995-05-19 | 1995-05-19 | 改良型化学発光測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14524895A JPH08313443A (ja) | 1995-05-19 | 1995-05-19 | 改良型化学発光測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08313443A true JPH08313443A (ja) | 1996-11-29 |
Family
ID=15380749
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14524895A Pending JPH08313443A (ja) | 1995-05-19 | 1995-05-19 | 改良型化学発光測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08313443A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007077941A1 (ja) * | 2006-01-06 | 2007-07-12 | Lumica Co., Ltd. | 残留洗剤の検出方法および残留洗剤検出具 |
| US7977493B2 (en) | 2006-07-28 | 2011-07-12 | Osamu Nozaki | Chemiluminescent reagents |
| JP2016524140A (ja) * | 2013-05-14 | 2016-08-12 | シーメンス・ヘルスケア・ダイアグノスティックス・インコーポレーテッドＳｉｅｍｅｎｓ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｉｎｃ． | 分解可能なカチオン界面活性剤および化学発光を増強するためのその利用 |
-
1995
- 1995-05-19 JP JP14524895A patent/JPH08313443A/ja active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007077941A1 (ja) * | 2006-01-06 | 2007-07-12 | Lumica Co., Ltd. | 残留洗剤の検出方法および残留洗剤検出具 |
| JP2007183139A (ja) * | 2006-01-06 | 2007-07-19 | Lumica Corp | 残留洗剤の検出方法および残留洗剤検出具 |
| US7955860B2 (en) | 2006-01-06 | 2011-06-07 | Lumica Corporation | Method of detecting residual detergent and device for detecting residual detergent |
| US8110145B2 (en) | 2006-01-06 | 2012-02-07 | Lumica Corporation | Method of detecting residual detergent and device for detecting residual detergent |
| US7977493B2 (en) | 2006-07-28 | 2011-07-12 | Osamu Nozaki | Chemiluminescent reagents |
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| US10073039B2 (en) | 2013-05-14 | 2018-09-11 | Siemens Healthcare Diagnostics, Inc. | Degradable cationic surfactants and use thereof in enhancing chemiluminescence |
| US10859504B2 (en) | 2013-05-14 | 2020-12-08 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Degradable cationic surfactants and use thereof in enhancing chemiluminescence |
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