JPH0791310B2 - オリゴ糖およびその製造方法 - Google Patents
オリゴ糖およびその製造方法Info
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- JPH0791310B2 JPH0791310B2 JP5740693A JP5740693A JPH0791310B2 JP H0791310 B2 JPH0791310 B2 JP H0791310B2 JP 5740693 A JP5740693 A JP 5740693A JP 5740693 A JP5740693 A JP 5740693A JP H0791310 B2 JPH0791310 B2 JP H0791310B2
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- JP
- Japan
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- oligosaccharide
- amylase
- enzyme
- cellooligosaccharide
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- Saccharide Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、甘味料，医薬品，保水
剤，安定化剤，ビフィズス菌増殖因子，食物繊維，飼
料，酵素活性測定用基質，酵素阻害剤，合成用試薬，植
物体賦活剤等の用途に有用な新規オリゴ糖およびその製
造方法に関するものである。
剤，安定化剤，ビフィズス菌増殖因子，食物繊維，飼
料，酵素活性測定用基質，酵素阻害剤，合成用試薬，植
物体賦活剤等の用途に有用な新規オリゴ糖およびその製
造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】まず、高等植物の細胞壁の主成分を成す
構造多糖であるセルロースに酵素アミラーゼを作用させ
加水分解して得られるセロオリゴ糖は、人のもつ消化酵
素によっては分解されないことから、血糖値を上昇させ
ないことが知られている。また、非還元末端にβ−グル
コシル基を有しているセロオリゴ糖は、甘味度が著しく
低くて食品甘味剤として利用することができないととも
に、難水溶性であることも知られている。
構造多糖であるセルロースに酵素アミラーゼを作用させ
加水分解して得られるセロオリゴ糖は、人のもつ消化酵
素によっては分解されないことから、血糖値を上昇させ
ないことが知られている。また、非還元末端にβ−グル
コシル基を有しているセロオリゴ糖は、甘味度が著しく
低くて食品甘味剤として利用することができないととも
に、難水溶性であることも知られている。
【０００３】一方、デンプンに麦芽またはアミラーゼを
作用させて得られるマルトオリゴ糖は、易水溶性で甘味
度が高いことが知られている。また、人のもつ消化酵素
であるアミラーゼによって容易にグルコースまで分解さ
れることから、血糖値を上昇させるとともに、ストレプ
トコカッス ミュータンス（Streptococcus mutans）等
の虫歯菌を増殖させ抗う歯性が低いことも知られてい
る。
作用させて得られるマルトオリゴ糖は、易水溶性で甘味
度が高いことが知られている。また、人のもつ消化酵素
であるアミラーゼによって容易にグルコースまで分解さ
れることから、血糖値を上昇させるとともに、ストレプ
トコカッス ミュータンス（Streptococcus mutans）等
の虫歯菌を増殖させ抗う歯性が低いことも知られてい
る。
【０００４】さらに、シクロデキストリングルカノトラ
ンスフェラーゼによってショ糖にα−グルコシル残基を
結合させたカップリングシュガーも、甘味度は高いもの
の、消化酵素により分解されて血糖値を上昇させること
が知られている。また、原料にショ糖を使用することか
ら、抗う歯性を高めるには製品からショ糖を除去する精
製操作が必要であることも知られている。
ンスフェラーゼによってショ糖にα−グルコシル残基を
結合させたカップリングシュガーも、甘味度は高いもの
の、消化酵素により分解されて血糖値を上昇させること
が知られている。また、原料にショ糖を使用することか
ら、抗う歯性を高めるには製品からショ糖を除去する精
製操作が必要であることも知られている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】前述のように、グルコ
ースのみからなるセロオリゴ糖およびマルトオリゴ糖、
言い換えれば従来のオリゴ糖について見れば、（ｉ）高
い甘味度，（ii）難消化性，（iii)高い水溶性および
（iv）高い抗う歯性の全てを同時に満たすことはできな
いという問題点がある。また、カップリングシュガーに
ついても、未反応原料の除去および血糖値上昇等の問題
点がある。
ースのみからなるセロオリゴ糖およびマルトオリゴ糖、
言い換えれば従来のオリゴ糖について見れば、（ｉ）高
い甘味度，（ii）難消化性，（iii)高い水溶性および
（iv）高い抗う歯性の全てを同時に満たすことはできな
いという問題点がある。また、カップリングシュガーに
ついても、未反応原料の除去および血糖値上昇等の問題
点がある。
【０００６】本発明は、このような問題点を解消するこ
とを目的として、（ｉ）高い甘味度，（ii）難消化性，
（iii)高い水溶性および（iv）高い抗う歯性のすべてを
同時に満たす新規なオリゴ糖およびその製造方法を提供
しようとするものである。
とを目的として、（ｉ）高い甘味度，（ii）難消化性，
（iii)高い水溶性および（iv）高い抗う歯性のすべてを
同時に満たす新規なオリゴ糖およびその製造方法を提供
しようとするものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者は、前述の目的
を達成するに際して研究の結果、オリゴ糖の非還元末端
側にα−グルコシル基を有させば、（ｉ）高い甘味度お
よび（iii)高い水溶性が得られ、また還元末端側にβ−
グルコシル基を結合させることによって（ii）難消化性
および（iv）抗う歯性を賦与させ得られることを見い出
した。
を達成するに際して研究の結果、オリゴ糖の非還元末端
側にα−グルコシル基を有させば、（ｉ）高い甘味度お
よび（iii)高い水溶性が得られ、また還元末端側にβ−
グルコシル基を結合させることによって（ii）難消化性
および（iv）抗う歯性を賦与させ得られることを見い出
した。
【０００８】要するに、本発明によるオリゴ糖は、一般
式
式
【化２】 で示されるオリゴ糖である。言い換えれば、
【化３】 である。なお、ｎ≧１，ｎ′≧１である。本発明による
オリゴ糖の性質を、特に実施例３において得られたオリ
ゴ糖を例にして、甘味度，消化性，水溶性および抗う歯
性等について試験を行なった。 ・甘味度 ショ糖の甘味度を１００とした場合に、セロビオースの
甘味度が１５であるのに対して本オリゴ糖の甘味度は４
０であった。 ・消化性 唾液による本オリゴ糖の分解率はマルトースの分解率の
２０％であった。 ・水溶性 本オリゴ糖の水溶性はセロビオースの３倍を示した。 ・抗う歯性 ミュータンス菌を本オリゴ糖で３７℃において培養した
際の酸生成率は、グルコースで同様に３７℃において培
養した場合の３０％であった。 ・ビフィズス菌増殖能 本オリゴ糖を健常人６人に一日当たり５ｇ投与して腸内
細菌の変化を調べた結果、投与前にはビフィズス菌の腸
内細菌全体に占める割合が９％であったのに対して、投
与開始から２週間後には１５％、３週間後には２０％ま
で増大した。
オリゴ糖の性質を、特に実施例３において得られたオリ
ゴ糖を例にして、甘味度，消化性，水溶性および抗う歯
性等について試験を行なった。 ・甘味度 ショ糖の甘味度を１００とした場合に、セロビオースの
甘味度が１５であるのに対して本オリゴ糖の甘味度は４
０であった。 ・消化性 唾液による本オリゴ糖の分解率はマルトースの分解率の
２０％であった。 ・水溶性 本オリゴ糖の水溶性はセロビオースの３倍を示した。 ・抗う歯性 ミュータンス菌を本オリゴ糖で３７℃において培養した
際の酸生成率は、グルコースで同様に３７℃において培
養した場合の３０％であった。 ・ビフィズス菌増殖能 本オリゴ糖を健常人６人に一日当たり５ｇ投与して腸内
細菌の変化を調べた結果、投与前にはビフィズス菌の腸
内細菌全体に占める割合が９％であったのに対して、投
与開始から２週間後には１５％、３週間後には２０％ま
で増大した。
【０００９】以上のように、本オリゴ糖は高い甘味度，
難消化性，高い水溶性および高い抗う歯性を有するとと
もに、ビフィズス菌増殖因子としての機能を有すること
が明瞭であり、本発明によるオリゴ糖は優れた性質を有
することが明らかとなった。
難消化性，高い水溶性および高い抗う歯性を有するとと
もに、ビフィズス菌増殖因子としての機能を有すること
が明瞭であり、本発明によるオリゴ糖は優れた性質を有
することが明らかとなった。
【００１０】このように、本発明によるオリゴ糖は、食
品添加物として有用である他、シクロデキストリングル
カノトランスフェラーゼ，α−グルコシダーゼ，α−ア
ミラーゼ，β−アミラーゼ、グルコアミラーゼおよびセ
ルラーゼ等の酵素基質としても使用し得る。さらに、こ
れら酵素、更にはβ−グルコシダーゼ、エキソ−１，４
−β−グルカナーゼの酵素阻害剤ともなり、加水分解酵
素および糖転移酵素の反応機構の研究に有用である。
品添加物として有用である他、シクロデキストリングル
カノトランスフェラーゼ，α−グルコシダーゼ，α−ア
ミラーゼ，β−アミラーゼ、グルコアミラーゼおよびセ
ルラーゼ等の酵素基質としても使用し得る。さらに、こ
れら酵素、更にはβ−グルコシダーゼ、エキソ−１，４
−β−グルカナーゼの酵素阻害剤ともなり、加水分解酵
素および糖転移酵素の反応機構の研究に有用である。
【００１１】また、本発明によるオリゴ糖は、次の製造
方法によって容易に製造できるものである。 １．シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ，
α−グルコシダーゼ，α−アミラーゼ，β−アミラーゼ
およびグルコアミラーゼのうちから選択される１種また
は２種以上の作用により、セロオリゴ糖に対してα−グ
ルコシド結合を有する化合物の糖残基を糖転移または縮
合させる。
方法によって容易に製造できるものである。 １．シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ，
α−グルコシダーゼ，α−アミラーゼ，β−アミラーゼ
およびグルコアミラーゼのうちから選択される１種また
は２種以上の作用により、セロオリゴ糖に対してα−グ
ルコシド結合を有する化合物の糖残基を糖転移または縮
合させる。
【００１２】なお、前記α−グルコシド結合を有する化
合物は、澱粉，シクロデキストリン，マルトオリゴ糖ま
たは配糖体である。
合物は、澱粉，シクロデキストリン，マルトオリゴ糖ま
たは配糖体である。
【００１３】２．シクロデキストリングルカノトランス
フェラーゼ，α−グルコシダーゼ，α−アミラーゼ，β
−アミラーゼおよびグルコアミラーゼのうちから選択さ
れる１種または２種以上の作用により、セロオリゴ糖に
対してグルコースのグルコシル残基を糖転移または縮合
させる。
フェラーゼ，α−グルコシダーゼ，α−アミラーゼ，β
−アミラーゼおよびグルコアミラーゼのうちから選択さ
れる１種または２種以上の作用により、セロオリゴ糖に
対してグルコースのグルコシル残基を糖転移または縮合
させる。
【００１４】本発明によるオリゴ糖の出発原料であるセ
ロオリゴ糖は、セルロースの酸加水分解，市販のパルプ
のセルラーゼバイオリアクターによる部分加水分解等に
より得られるものである。なお、市販のパルプを部分加
水分解する場合に使用するセルラーゼとしてはβ−グル
コシダーゼ活性が低く、エキソ−セロビオヒドロラーゼ
活性の高いものが望ましい。
ロオリゴ糖は、セルロースの酸加水分解，市販のパルプ
のセルラーゼバイオリアクターによる部分加水分解等に
より得られるものである。なお、市販のパルプを部分加
水分解する場合に使用するセルラーゼとしてはβ−グル
コシダーゼ活性が低く、エキソ−セロビオヒドロラーゼ
活性の高いものが望ましい。
【００１５】前記セロオリゴ糖としてセロビオースを使
用した場合には、マルトオリゴ糖に比較的性質の近い生
成物（オリゴ糖）が得られる。一方、重合度の高いセロ
オリゴ糖を出発原料として使用した場合には、この出発
原料の重合度の増加にともなって生成物の水に対する溶
解度が下がり食物繊維としての性質が高まる。このよう
に、前記出発原料の重合度を操作することにより生成物
の性質を変えることもできる。
用した場合には、マルトオリゴ糖に比較的性質の近い生
成物（オリゴ糖）が得られる。一方、重合度の高いセロ
オリゴ糖を出発原料として使用した場合には、この出発
原料の重合度の増加にともなって生成物の水に対する溶
解度が下がり食物繊維としての性質が高まる。このよう
に、前記出発原料の重合度を操作することにより生成物
の性質を変えることもできる。
【００１６】また、前記出発原料として精製したセロオ
リゴ糖を使用することもできるが、生成物の純度が要求
されない場合には、種々の重合度を有するセロオリゴ糖
混合物にα−グルコシル基やα−マルトオリゴシル基を
結合させるようにすれば経済的に有用である。
リゴ糖を使用することもできるが、生成物の純度が要求
されない場合には、種々の重合度を有するセロオリゴ糖
混合物にα−グルコシル基やα−マルトオリゴシル基を
結合させるようにすれば経済的に有用である。
【００１７】本発明において用いられるシクロデキスト
リングルカノトランスフェラーゼとしては、Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇ
ａｔｅｒｉｕｍ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎ
ｓ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈ
ｉｌｕｓなどが分泌する酵素を使用することができる。
この他、糖転移反応や縮合反応を生起する微生物，動
物，植物起源のα−グルコシダーゼ，α−アミラーゼ，
β−アミラーゼ，グルコアミラーゼ等を使用することも
できる。また、本発明における反応は１０℃から１００
℃の温度範囲で行うことができるが、前述の酵素は至適
温度が３０℃から７０℃にあるものが多い。また、前記
反応は通常ｐＨ２からｐＨ１３の緩衝液中で行うが、必
要に応じて有機溶媒を加えてもよい。
リングルカノトランスフェラーゼとしては、Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇ
ａｔｅｒｉｕｍ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎ
ｓ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈ
ｉｌｕｓなどが分泌する酵素を使用することができる。
この他、糖転移反応や縮合反応を生起する微生物，動
物，植物起源のα−グルコシダーゼ，α−アミラーゼ，
β−アミラーゼ，グルコアミラーゼ等を使用することも
できる。また、本発明における反応は１０℃から１００
℃の温度範囲で行うことができるが、前述の酵素は至適
温度が３０℃から７０℃にあるものが多い。また、前記
反応は通常ｐＨ２からｐＨ１３の緩衝液中で行うが、必
要に応じて有機溶媒を加えてもよい。
【００１８】本発明のオリゴ糖は、セロオリゴ糖等の天
然の成分を原料として用い、また、シクロデキストリン
グルカノトランスフェラーゼ等の天然の酵素製剤を触媒
として用いて簡便に製造される。
然の成分を原料として用い、また、シクロデキストリン
グルカノトランスフェラーゼ等の天然の酵素製剤を触媒
として用いて簡便に製造される。
【００１９】一方、前記オリゴ糖を公知の有機合成法に
より調製する場合には次のような煩雑な合成ステップが
必要となる。 （１）セロオリゴ糖の合成 まず、
より調製する場合には次のような煩雑な合成ステップが
必要となる。 （１）セロオリゴ糖の合成 まず、
【化４】 と１，２，３，６−テトラアセチルグルコース（II）と
を反応させることによりセロビオースオクタアセテート
を合成し、このセロビオースオクタアセテートを脱アセ
チル化することによってセロビオースを調製する。ここ
で、前記の１，２，３，６−テトラアセチルグルコース
（II）はグルコースのＣ−６位をトリチル化した後、Ｃ
−１位，Ｃ−２位，Ｃ−３位およびＣ−４位の水酸基を
アセチル化し、次に、トリチル基を脱保護した後、Ｃ−
４位のアセチル基をＣ−６位にアセチル転移させること
により得られるものである。
を反応させることによりセロビオースオクタアセテート
を合成し、このセロビオースオクタアセテートを脱アセ
チル化することによってセロビオースを調製する。ここ
で、前記の１，２，３，６−テトラアセチルグルコース
（II）はグルコースのＣ−６位をトリチル化した後、Ｃ
−１位，Ｃ−２位，Ｃ−３位およびＣ−４位の水酸基を
アセチル化し、次に、トリチル基を脱保護した後、Ｃ−
４位のアセチル基をＣ−６位にアセチル転移させること
により得られるものである。
【００２０】なお、セロトリオース以上の高級セロオリ
ゴ糖については、Ｃ−２位にピバロイル基を導入した３
−Ｏ−ベンジル誘導体を出発原料として合成可能である
が、合成ステップが１０段階以上におよぶ上に収率が低
いことが知られている（木材学会誌、39(1993) 西村
他、p.40-47)。 （２）セロオリゴ糖へのα−グルコシル基の結合 まず、セロオリゴ糖非還元末端Ｃ−４位とＣ−６位とを
アセタール基で保護した後、残る水酸基をアセチル基な
どで保護する。次に、前記アセタール基を脱保護した
後、生成した水酸基のうちＣ−６位の水酸基のみをトリ
チル基で保護することにより、非還元末端Ｃ−４位のみ
に水酸基を有する化合物(III) が得られる。そして、こ
の化合物(III) と
ゴ糖については、Ｃ−２位にピバロイル基を導入した３
−Ｏ−ベンジル誘導体を出発原料として合成可能である
が、合成ステップが１０段階以上におよぶ上に収率が低
いことが知られている（木材学会誌、39(1993) 西村
他、p.40-47)。 （２）セロオリゴ糖へのα−グルコシル基の結合 まず、セロオリゴ糖非還元末端Ｃ−４位とＣ−６位とを
アセタール基で保護した後、残る水酸基をアセチル基な
どで保護する。次に、前記アセタール基を脱保護した
後、生成した水酸基のうちＣ−６位の水酸基のみをトリ
チル基で保護することにより、非還元末端Ｃ−４位のみ
に水酸基を有する化合物(III) が得られる。そして、こ
の化合物(III) と
【化５】 等のハロゲン化グリコシルとを反応させた後、トリチル
基等の保護基をはずすことにより所期の化合物が得られ
る。なお、セロオリゴ糖にマルトオリゴ糖を結合させる
ためには、前記化合物(III) にマルトオリゴシルブロマ
イド等を反応させる操作が必要となるが、このような試
みは行われていないのが実状である。
基等の保護基をはずすことにより所期の化合物が得られ
る。なお、セロオリゴ糖にマルトオリゴ糖を結合させる
ためには、前記化合物(III) にマルトオリゴシルブロマ
イド等を反応させる操作が必要となるが、このような試
みは行われていないのが実状である。
【００２１】このように、公知の有機合成法を用いて所
期の化合物を製造する場合、反応や精製操作の回数が多
いためその化合物の収率が低くなるとともに製造コスト
が高くなる。また、前記有機合成法を用いた場合、製造
過程において有害なハロゲン化物を使用するため、得ら
れたオリゴ糖は食品添加物として使用できない。
期の化合物を製造する場合、反応や精製操作の回数が多
いためその化合物の収率が低くなるとともに製造コスト
が高くなる。また、前記有機合成法を用いた場合、製造
過程において有害なハロゲン化物を使用するため、得ら
れたオリゴ糖は食品添加物として使用できない。
【００２２】
【実施例】次に、本発明によるオリゴ糖およびその製造
方法の具体的実施例について説明する。 （実施例１）セロビオース４ｇ，可溶性澱粉４ｇ，シク
ロデキストリングルカノトランスフェラーゼ（シクロデ
キストリングルコシルトランスフェラーゼ）２mlをリン
酸緩衝液（ｐＨ６）４０ml中に溶解させて６０℃で２時
間反応を行った後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸す
ることにより酵素を失活させた。このようにして得られ
た生成物をイオン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾
燥することによりオリゴ糖６．５ｇを得た。さらに、前
記生成物を高速液体クロマトグラフィーで分離（分離例
を図１に示す。）するとともに、前記生成物について 1
Ｈ−ＮＭＲと箱守法メチル化分析により構造解析を行っ
た。結果を表１に示す。
方法の具体的実施例について説明する。 （実施例１）セロビオース４ｇ，可溶性澱粉４ｇ，シク
ロデキストリングルカノトランスフェラーゼ（シクロデ
キストリングルコシルトランスフェラーゼ）２mlをリン
酸緩衝液（ｐＨ６）４０ml中に溶解させて６０℃で２時
間反応を行った後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸す
ることにより酵素を失活させた。このようにして得られ
た生成物をイオン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾
燥することによりオリゴ糖６．５ｇを得た。さらに、前
記生成物を高速液体クロマトグラフィーで分離（分離例
を図１に示す。）するとともに、前記生成物について 1
Ｈ−ＮＭＲと箱守法メチル化分析により構造解析を行っ
た。結果を表１に示す。
【００２３】
【表１】
【００２４】（実施例２）セロトリオース４ｇ，可溶性
澱粉４ｇ，シクロデキストリングルカノトランスフェラ
ーゼ（シクロデキストリングルコシルトランスフェラー
ゼ）２mlをリン酸緩衝液（ｐＨ６）４０ml中に溶解させ
て６０℃で２時間反応を行った後、反応液を沸騰水浴中
で５分間煮沸することにより酵素を失活させた。このよ
うにして得られた生成物をイオン交換樹脂を用いて脱色
した後、凍結乾燥することによりオリゴ糖６．１ｇを得
た。さらに、前記生成物を高速液体クロマトグラフィー
で分離するとともに、前記生成物について 1Ｈ−ＮＭＲ
と箱守法メチル化分析により構造解析を行った。結果を
表２に示す。
澱粉４ｇ，シクロデキストリングルカノトランスフェラ
ーゼ（シクロデキストリングルコシルトランスフェラー
ゼ）２mlをリン酸緩衝液（ｐＨ６）４０ml中に溶解させ
て６０℃で２時間反応を行った後、反応液を沸騰水浴中
で５分間煮沸することにより酵素を失活させた。このよ
うにして得られた生成物をイオン交換樹脂を用いて脱色
した後、凍結乾燥することによりオリゴ糖６．１ｇを得
た。さらに、前記生成物を高速液体クロマトグラフィー
で分離するとともに、前記生成物について 1Ｈ−ＮＭＲ
と箱守法メチル化分析により構造解析を行った。結果を
表２に示す。
【００２５】
【表２】
【００２６】（実施例３）セロオリゴ糖混合物４ｇ，可
溶性澱粉４ｇ，シクロデキストリングルカノトランスフ
ェラーゼ（シクロデキストリングルコシルトランスフェ
ラーゼ）２mlをリン酸緩衝液（ｐＨ６）４０ml中に溶解
させて６０℃で２時間反応を行った後、反応液を沸騰水
浴中で５分間煮沸することにより酵素を失活させた。こ
のようにして得られた生成物をイオン交換樹脂を用いて
脱色した後、凍結乾燥することによりオリゴ糖６．８ｇ
を得た。
溶性澱粉４ｇ，シクロデキストリングルカノトランスフ
ェラーゼ（シクロデキストリングルコシルトランスフェ
ラーゼ）２mlをリン酸緩衝液（ｐＨ６）４０ml中に溶解
させて６０℃で２時間反応を行った後、反応液を沸騰水
浴中で５分間煮沸することにより酵素を失活させた。こ
のようにして得られた生成物をイオン交換樹脂を用いて
脱色した後、凍結乾燥することによりオリゴ糖６．８ｇ
を得た。
【００２７】（実施例４）セロオリゴ糖混合物４ｇ，デ
キストリン４ｇ，α−グルコシダーゼ２００mgをリン酸
緩衝液（ｐＨ６）４０ml中に溶解させて５０℃で２時間
反応を行った後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸する
ことにより酵素を失活させた。このようにして得られた
生成物をイオン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾燥
することによりオリゴ糖５．２ｇを得た。
キストリン４ｇ，α−グルコシダーゼ２００mgをリン酸
緩衝液（ｐＨ６）４０ml中に溶解させて５０℃で２時間
反応を行った後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸する
ことにより酵素を失活させた。このようにして得られた
生成物をイオン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾燥
することによりオリゴ糖５．２ｇを得た。
【００２８】（実施例５）セロオリゴ糖混合物４ｇ，可
溶性澱粉４ｇ，アミラーゼ２００mgをリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ５．５）４０ml中に溶解させて５０℃で２時間反応を
行った後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸することに
より酵素を失活させた。このようにして得られた生成物
をイオン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾燥するこ
とによりオリゴ糖５．８ｇを得た。
溶性澱粉４ｇ，アミラーゼ２００mgをリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ５．５）４０ml中に溶解させて５０℃で２時間反応を
行った後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸することに
より酵素を失活させた。このようにして得られた生成物
をイオン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾燥するこ
とによりオリゴ糖５．８ｇを得た。
【００２９】（実施例６）セロビオース４ｇ，可溶性澱
粉４ｇ，シクロデキストリングルカノトランスフェラー
ゼ（シクロデキストリングルコシルトランスフェラー
ゼ）２mlを、アセトニトリル１０mlとリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ６．０）３０mlとからなる混合溶媒中に溶解させて６
０℃で２時間反応を行った後、反応液を沸騰水浴中で５
分間煮沸することにより酵素を失活させた。このように
して得られた生成物をイオン交換樹脂を用いて脱色した
後、凍結乾燥することによりオリゴ糖６．５ｇを得た。
粉４ｇ，シクロデキストリングルカノトランスフェラー
ゼ（シクロデキストリングルコシルトランスフェラー
ゼ）２mlを、アセトニトリル１０mlとリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ６．０）３０mlとからなる混合溶媒中に溶解させて６
０℃で２時間反応を行った後、反応液を沸騰水浴中で５
分間煮沸することにより酵素を失活させた。このように
して得られた生成物をイオン交換樹脂を用いて脱色した
後、凍結乾燥することによりオリゴ糖６．５ｇを得た。
【００３０】（実施例７）セロビオース４ｇ，グルコー
ス４ｇ，α−グルコシダーゼ２０mgをリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ５）４０ml中に溶解させて６０℃で２時間反応を行っ
た後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸することにより
酵素を失活させた。このようにして得られた生成物をイ
オン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾燥することに
よりオリゴ糖４．９ｇを得た。
ス４ｇ，α−グルコシダーゼ２０mgをリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ５）４０ml中に溶解させて６０℃で２時間反応を行っ
た後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸することにより
酵素を失活させた。このようにして得られた生成物をイ
オン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾燥することに
よりオリゴ糖４．９ｇを得た。
【００３１】（実施例８）グルコース４ｇ，α−グルコ
シダーゼ２０mgをリン酸緩衝液（ｐＨ６）１０ml中に溶
解させて５０℃で２時間反応を行った後、反応液を沸騰
水浴中で５分間煮沸することにより酵素を失活させてオ
リゴ糖シロップを調製した。次に、このオリゴ糖シロッ
プにセロビオース４ｇ，α−アミラーゼ２ml，リン酸緩
衝液（ｐＨ６）３０mlを加えて５０℃で２時間反応を行
った後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸することによ
り酵素を失活させた。このようにして得られた生成物を
イオン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾燥すること
によりオリゴ糖６．１ｇを得た。
シダーゼ２０mgをリン酸緩衝液（ｐＨ６）１０ml中に溶
解させて５０℃で２時間反応を行った後、反応液を沸騰
水浴中で５分間煮沸することにより酵素を失活させてオ
リゴ糖シロップを調製した。次に、このオリゴ糖シロッ
プにセロビオース４ｇ，α−アミラーゼ２ml，リン酸緩
衝液（ｐＨ６）３０mlを加えて５０℃で２時間反応を行
った後、反応液を沸騰水浴中で５分間煮沸することによ
り酵素を失活させた。このようにして得られた生成物を
イオン交換樹脂を用いて脱色した後、凍結乾燥すること
によりオリゴ糖６．１ｇを得た。
【００３２】
【発明の効果】以上のように構成された本発明のオリゴ
糖は分子内にα−１，４結合とβ−１，４結合とを有す
るため、高い甘味度，難消化性，高い水溶性および高い
抗う歯性を有し食品添加物として有用である。また、前
記オリゴ糖はシクロデキストリングルカノトランスフェ
ラーゼ等の酵素の酵素基質として使用し得るほか、前記
酵素の酵素阻害剤としても使用でき、加水分解酵素およ
び糖転移酵素の反応機構の研究に有用である。
糖は分子内にα−１，４結合とβ−１，４結合とを有す
るため、高い甘味度，難消化性，高い水溶性および高い
抗う歯性を有し食品添加物として有用である。また、前
記オリゴ糖はシクロデキストリングルカノトランスフェ
ラーゼ等の酵素の酵素基質として使用し得るほか、前記
酵素の酵素阻害剤としても使用でき、加水分解酵素およ
び糖転移酵素の反応機構の研究に有用である。
【００３３】前記オリゴ糖は原料として安全な天然の成
分を用い、触媒として天然の酵素製剤を用いて２段階の
穏和な反応条件で製造されるため安全性が高いという利
点がある。
分を用い、触媒として天然の酵素製剤を用いて２段階の
穏和な反応条件で製造されるため安全性が高いという利
点がある。
【図１】本発明の一実施例のオリゴ糖の製造方法により
得られる生成物を高速液体クロマトグラフィーにより分
離した際のチャート図である。
得られる生成物を高速液体クロマトグラフィーにより分
離した際のチャート図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｐ 19/22 7432−4Ｂ (72)発明者 上田 昌見 大阪府高槻市宮田町１丁目36番１号 (72)発明者 中嶋 幹恵 大阪府高槻市南大樋町24−20
Claims (4)
- 【請求項１】 一般式 【化１】 で示されることを特徴とするオリゴ糖。
- 【請求項２】 シクロデキストリングルカノトランスフ
ェラーゼ，α−グルコシダーゼ，α−アミラーゼ，β−
アミラーゼおよびグルコアミラーゼのうちから選択され
る１種または２種以上の作用により、セロオリゴ糖に対
してα−グルコシド結合を有する化合物の糖残基を糖転
移または縮合させることを特徴とするオリゴ糖の製造方
法。 - 【請求項３】 前記α−グルコシド結合を有する化合物
は、澱粉，シクロデキストリン，マルトオリゴ糖または
配糖体であることを特徴とする請求項２に記載のオリゴ
糖の製造方法。 - 【請求項４】 シクロデキストリングルカノトランスフ
ェラーゼ，α−グルコシダーゼ，α−アミラーゼ，β−
アミラーゼおよびグルコアミラーゼのうちから選択され
る１種または２種以上の作用により、セロオリゴ糖に対
してグルコースのグルコシル残基を糖転移または縮合さ
せることを特徴とするオリゴ糖の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5740693A JPH0791310B2 (ja) | 1993-03-17 | 1993-03-17 | オリゴ糖およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5740693A JPH0791310B2 (ja) | 1993-03-17 | 1993-03-17 | オリゴ糖およびその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06271596A JPH06271596A (ja) | 1994-09-27 |
| JPH0791310B2 true JPH0791310B2 (ja) | 1995-10-04 |
Family
ID=13054767
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5740693A Expired - Lifetime JPH0791310B2 (ja) | 1993-03-17 | 1993-03-17 | オリゴ糖およびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0791310B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI415857B (zh) * | 2011-11-11 | 2013-11-21 | Taiwan Tobacco & Liquor Corp | 產生含有α－ＥＧ異麥芽寡醣組成物之製造方法 |
| JP6655246B2 (ja) * | 2015-12-21 | 2020-02-26 | 国立大学法人北海道大学 | ダブル及びシングルアンカー型イソマルトメガロ糖、その製造方法及びその利用 |
-
1993
- 1993-03-17 JP JP5740693A patent/JPH0791310B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH06271596A (ja) | 1994-09-27 |
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