JPH05227982A - 二糖及び三糖、これらの化合物の製造方法、並びにこれらの化合物を含む毛髪成長用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 Ｎ−アセチルヘキソサミニダーゼ活性を有す
る不純酵素調製物を酵素触媒として使用して、少なくと
も１個のグリコシド残基がアセチルアミノ置換基を有す
る二糖又は三糖を製造する。 【効果】 その幾つかが新規な生成化合物は毛髪成長促
進に有用であり得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はアミノ糖及び二次的な糖
（ｓｅｃｏｎｄ ｓｕｇａｒ）から生成される二糖及び
三糖、このような化合物の酵素による製造方法、並びに
これらの化合物の使用に関する。

【０００２】

【従来の技術】ある二糖及びオリゴ糖がかなりの生物学
的活性を示すことは知られている。特にヨーロッパ特許
出願公開第２１１６１０号（Ｕｎｉｌｅｖｅｒ）は、ヘ
キソサミン残基に結合したウロン酸残基を含んでいる二
糖及びオリゴ糖が毛髪成長促進に活性を示すことを開示
している。

【０００３】二糖及びオリゴ糖の化学合成はしばしば、
反応により所望の生成物を得るために保護基を付加し、
後で除去する多段階反応を必要とする。

【０００４】個々の糖が結合するグリコシル化反応が酵
素により生じ得ることは長年知られている。

【０００５】Ｎｉｌｓｓｏｎは“Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａ
ｔｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ”（２０４１９９０ ７９−８
３頁）及びＷＯ−Ａ−９１／０２８０６において、軟体
動物Ｃｈａｍｅｌｉａ ｇａｌｌｉｎａから得られる比
較的未精製の調製物の形態のグリコシダーゼを使用し
て、部位選択的（ｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ）二糖
化合物の酵素触媒による製造を開示している。Ｎｉｌｓ
ｓｏｎは ＨｅｘＮＡｃ−Ｈｅｘ （Ｈｅｘはヘキソース残基を示し、ＮＡｃはヘキソース
残基上のＮ−アセチルアミノ置換基を示す）型の二糖に
言及している。

【０００６】Ｍｅｇａ等による“Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ”（７２ １１９７（１９７２））は、トランスグリ
コシル化させるために単離β−Ｄ−グルコサミニダーゼ
を使用することを開示している。この化合物の収率は非
常に低い。

【０００７】彼らは更に１２０３ページで手短かに、
式： Ｈｅｘ−ＨｅｘＮＡｃ で表される二糖を生じるさまざまな種のβ−Ｄ−ガラク
トシダーゼに言及している。

【０００８】従ってＭｅｇａ等は、グルコサミニダーゼ
よりもむしろガラクトシダーゼを使用したときに、Ｎｉ
ｌｓｓｏｎが言及した型とは構造の異なる生成物を得
た。

【０００９】

【課題を解決するための手段】我々は、Ｎｉｌｓｓｏｎ
の開示した触媒とは異なるある酵素触媒が二糖化合物及
びオリゴ糖化合物の生成に同様に効果的であるか又はよ
り効果的であることを発見した。

【００１０】第一に、本発明は式： ＨｅｘＮＡｃ−Ｓａｃｃ （式中、Ｈｅｘはヘキソース残基を示し、ＮＡｃはヘキ
ソース残基上のＮ−アセチルアミノ置換基を示し、Ｓａ
ｃｃは糖残基を示す。）で表されるオリゴ糖の製造方法
を提供する。本方法は、β−ガラクトシダーゼ活性も示
すＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐから得られた不純Ｎ
−アセチルヘキソサミニダーゼ調製物を酵素触媒として
使用して、受容体としての糖とヘキソサミニル供与体と
の間で酵素触媒による反応をおこすことからなる。

【００１１】受容体である糖は特に単糖又は二糖であり
得、従って生成物は二糖又は三糖である。受容体は特
に、供与体のヘキソサミニル基が付着するヘキソース残
基又はヘキソサミン残基を有するグリコシド又はジグリ
コシドであり得る。

【００１２】反応で生じるグリコシル結合、即ち式： ＨｅｘＮＡｃ−Ｓａｃｃ で表される結合は、ＨｅｘＮＡｃ供与体の１位と受容体
との１，２結合であり得るが、ＨｅｘＮＡｃの１位と受
容体の糖の３位、４位又は６位との１，３、１，４又は
１，６結合である可能性の方が高い。

【００１３】前記方法を使用して、多数の二糖及び三糖
を製造した。これらの中には新規な化合物が幾つか含ま
れている。

【００１４】第二に、本発明は前記式で表される新規化
合物を提供する。

【００１５】第三に、本発明はこのような新規化合物又
は（新規であろうとなかろうと）本発明方法により製造
した化合物を毛髪の成長促進又は脱毛防止のために使用
することである。

【００１６】本発明は更に、化粧品又は医薬品として許
容し得るビヒクルと本発明の化合物とからなる局所的施
用に適した組成物を提供する。

【００１７】添付図面はメチルグルコピラノシド受容体
分子と、ｐ−ニトロフェニルヘキソサミン供与体分子
と、本発明方法により製造可能な後程列挙する種々の化
合物との構造式を示している。

【００１８】酵素触媒反応では、グリコシル基が供与体
から受容体に移動せねばならない。従って、この反応を
便宜的に“移動反応”と称し、生成物は便宜的に“移動
生成物”と称する。

【００１９】本発明で使用する酵素調製物はＮ−アセチ
ルヘキソサミニダーゼ活性を有するが、この活性物の精
製酵素ではない。この酵素調製物の他の活性物にはβ−
ガラクトシダーゼが含まれねばならない。Ｎ−アセチル
ヘキソサミニダーゼ活性物はＮ−アセチルガラクトサミ
ニダーゼ活性物であってもよい。Ｎ−アセチルヘキソサ
ミニダーゼ活性についての検定技術はＬｉ ａｎｄ Ｌ
ｉにより“Ｊ． Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ”（２４５，５１
５３（１９７０））に記載されている。

【００２０】他のグリコシダーゼ活性物（例えばＮ−ア
セチルヘキソサミニダーゼ）を含むに十分なほどに未精
製のβ−ガラクトシダーゼ調製物を使用することが好ま
しい。従って、酵素調製物により示される主活性物はβ
−ガラクトシダーゼであり得る。

【００２１】コウジカビからの未精製βーガラクトシダ
ーゼが特に好ましい。この材料はβ−ガラクトシダーゼ
以外の多数のグリコシダーゼ活性物を含んでいる。これ
らのグリコシダーゼ活性物はそれぞれβ−ガラクトシダ
ーゼ活性物の１％未満であり得るが、その酵素は非常に
安価なので、これらの副活性物の有益なソースとなって
いる。調製物を分別して、特異Ｎ−アセチルヘキソサミ
ニダーゼ活性を高めてもよい。この作業を硫酸アンモニ
ウムの分別により実施してもよい。これはよく知られた
技術であり、とりわけＲｏｂｅｒｔ Ｋ Ｓｃｏｐｅｓ
による“Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ”
に開示されている。

【００２２】８０〜１００％硫酸アンモニウム画分が高
活性のβ−Ｎ−アセチルガラクトサミニダーゼと、低活
性のβ−ガラクトシダーゼとを含んでいることが判明し
た。

【００２３】供与体物質と受容体物質と酵素調製物とを
含んでいる水溶液をインキュベートすることにより酵素
触媒反応が生じ得る。インキュベート終了後に、分解を
促進しないように酵素を加熱して破壊してもよい。

【００２４】公知の技術（非糖質生成物除去のための溶
媒抽出及び個々の生成物を分離するための高速液体クロ
マトグラフィー（ｈ．ｐ．ｌ．ｃ．））を使用して、生
成物を単離してもよい。

【００２５】受容体上の置換部位が、使用する酵素、受
容体の種類、特に受容体のアノマー中心の配置及び反応
条件に依存していることが判明した。

【００２６】供与体分子は一般にアグリコン脱離基を有
するグリコシドである。

【００２７】供与体分子及び受容体分子は任意に他の置
換基を有し得る。

【００２８】受容体分子は、アグリコン基、特に１〜４
個の炭素原子を有するアルキル基がアノマー中心に付着
したグリコシド又はジグリコシドであり得る。このよう
なグリコシドでは、供与体分子が付着する糖残基は好ま
しくは任意にアセチルアミノ置換基を有するヘキソース
である。二糖中のいずれの糖残基も任意に置換されるヘ
キソースであり得、その結果生成物は、式： ＨｅｘＮＡｃ−Ｈｅｘ（ＮＡｃ）−Ｈｅｘ（ＮＡｃ） （式中、ＮＡｃは置換を受けた場合のＮ−アセチル置換
基を示す。）で表され得る。

【００２９】反応は、グリコシド以外の糖（例えばグル
コース又はスクロース）を使用しても生じ得る。

【００３０】受容体分子中のヘキソース残基は種々のヘ
キソースであり得るが、特にグルコース及びガラクトー
スであるとする。これらを特にアセチルアミノ基で置換
してもよい。

【００３１】本方法により製造し得る化合物には特に、
供与体からのＨｅｘＮＡｃが２−アセトアミド−２−デ
オキシーβ−Ｄ−ガラクトピラノシル又は２−アセトア
ミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシルの化合
物が含まれる。

【００３２】本発明方法により製造し得る特に重要な化
合物は以下の通りである。

【００３３】１．メチル３−Ｏ−（２−アセトアミド−
２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ
−グルコピラノシド ２．メチル４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド ３．メチル４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド ４．メチル６−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド ５．メチル３−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド ６．メチル４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノ
シド ７．メチル４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノ
シド ８．メチル６−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノ
シド ９．メチル４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アセトアミド−
２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド １０．メチル４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキ
シ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アセトアミド
−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド １１．メチル６−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキ
シ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アセトアミド
−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド １２．β−Ｄ−ＧａｌｐＮＡｃ−（１→４）−β−Ｄ−
ＧａｌｐＮＡｃ−（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｕｐＮＡｃ
ＯＭｅ １３．β−Ｄ−ＧａｌｐＮＡｃ−（１→３）−β−Ｄ−
ＧａｌｐＮＡｃ−（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｕｐＮＡｃ
ＯＭｅ １４．３−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β
−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノー
ス １５．３−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β
−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノー
ス １６．４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β
−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノー
ス １７．４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β
−Ｄ−ガラクトピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノー
ス。

【００３４】化合物１〜８の構造式を添付図面に示す。

【００３５】前記化合物のうち少なくとも数種（７〜１
３）はそれ自身新規化合物である。

【００３６】２種類の用語系が一般に使用されているこ
とに留意すべきである。アセトアミドデオキシピロノー
スはしばしばＮ−アセチルヘキソサミンとして使用され
ている。

【００３７】本発明方法により製造した化合物を、ヒト
の皮膚で局部的に施用する組成物に混入してもよい。こ
のような組成物は医薬品として許容し得るビヒクルを含
み、組成物の多くは、他の種々の添加剤（例えば香料及
び防腐剤）を含み得る。

【００３８】このような組成物では、本発明方法により
製造する化合物の濃度は好ましくは０．０１〜１０重量
％、更に好ましくは０．１〜５重量％である。組成物は
例えば軟膏、ローション又はクリームのような施用に対
しては本質的に慣用的であり得る。

【００３９】このような組成物で使用する化粧品として
許容し得るビヒクルは、組成物の必要な製品形態に依存
して広範囲の中から選択する。適切なビヒクルを後述す
る如く分類することができる。

【００４０】ビヒクルは、二糖又は三糖用希釈剤、分散
剤又は溶媒として作用し得る物質であり、従って糖を適
切な濃度で髪及び／又は頭皮に付けて、一様に伸ばすこ
とができる。ビヒクルは好ましくは、二糖又は三糖が髪
の小胞（ｆｏｌｌｉｃｕｌｅ）をじかに取り囲む部位に
達するためにそれらの皮膚への浸透を助け得る物質であ
る。本発明の組成物はビヒクルとしての水、及び／又は
水以外の化粧品として許容し得るビヒクルを少なくとも
１種含み得る。

【００４１】本発明の組成物で使用し得る水以外のビヒ
クルには、固体又は液体（例えば皮膚軟化剤、溶媒、保
湿剤、増粘剤及び粉末）が含まれ得る。単独で又は１種
以上のビヒクルの混合物として使用し得るこれらの型の
ビヒクルの各々の例を以下に示す。

【００４２】皮膚軟化剤：ステアリルアルコール、グリ
セリルモノリシノレエート、グリセリルモノステアレー
ト、プロパン−１，２−ジオール、ブタン−１，３−ジ
オール、ミンク油、セチルアルコール、イソプロピルイ
ソステアレート、ステアリン酸、イソブチルパルミテー
ト、イソセチルステアレート、オレイルアルコール、イ
ソプロピルラウレート、ヘキシルラウレート、デシルオ
レエート、オクタデカン−２−オル、イソセチルアルコ
ール、セチルパルミテート、ジメチルポリシロキサン、
ジ−ｎ−ブチルセバケート、イソプロピルミリステー
ト、イソプロピルパルミテート、イソプロピルステアレ
ート、ブチルステアレート、ポリエチレングリコール、
トリエチレングリコール、ラノリン、ヒマシ油、アセチ
ル化ラノリンアルコール、石油、鉱油、ブチルミリステ
ート、イソステアリン酸、パルミチン酸、イソプロピル
リノレエート、ラウリルラクテート、ミリスチルラクテ
ート、デシルオレエート、ミリスチルミリステート、プ
ロパン、ブタン、イソブタン、ジメチルエーテル、二酸
化炭素、一酸化二窒素。

【００４３】溶媒：エチルアルコール、メチレンクロラ
イド、イソプロパノール、ヒマシ油、エチレングリコー
ルモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチ
ルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテ
ル、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン。

【００４４】保湿剤：グリセリン、ソルビトール、２−
ピロリドン−５−カルボン酸ナトリウム、可溶性コラー
ゲン、ジブチルフタレート、ゼラチン。

【００４５】粉末：白亜、タルク、フラー土、カオリ
ン、デンプン、ガム、コロイド二酸化ケイ素、ポリアク
リル酸ナトリウム、テトラアルキル及び／又はトリアル
キルアリールアンモニウムスメクタイト、化学的に改質
されたアルミニウムケイ酸マグネシウム、有機的に改質
されたモンモリロナイトクレー、ケイ酸アルミニウム水
和物、ヒュームドシリカ、カルボキシビニルポリマー、
カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチレングリ
コールモノステアレート。

【００４６】組成物中にビヒクル（例えば水）が存在す
るならば、その量は好ましくは二糖又は三糖の少なくと
も一部分を皮膚に浸透させるのに十分な量でなければな
らない。特に他の成分がほとんど又は全く組成物中に存
在しないときには、ビヒクルの量は組成物のバランスを
損ない得る。ビヒクルの量は好ましくは組成物の５０〜
９９．９９重量％であり、更に好ましくは９０〜９９重
量％である。

【００４７】

【実施例】以下の実施例では、全ての部及び％は特に明
記しない限り重量比である。多くの実施例で使用する酵
素は市販のコウジカビのβ−ガラクトシダーゼ（Ｓｉｇ
ｍａ ｇｒａｄｅ ＸＩ）から得られたものである。こ
の酵素調製物が、主活性（β−ガラクトシダーゼ）物以
外の種々の少量のグリコシダーゼ活性物を含んでいるこ
とは知られている。

【００４８】前述した如く硫酸アンモニウムを使用して
市販の酵素調製物を分別した。８０〜１００％硫酸アン
モニウム画分を使用した。

【００４９】実施例１ ｐ−ニトロフェニル−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−ガラクト
サミニドとも称するｐ−ニトロフェニル−２−アセトア
ミド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（３
５ｍｇ，０．１０２ｍｍｏｌ）と、メチルβ−Ｄ−グリ
コピラノシド（１９９ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）とを含
むリン酸塩緩衝液（１．７ｍｌ，０．０４ｍｏｌ ｄｌ
−３，ｐＨ６．５）を４５〜５０℃で２分間加熱して、
それらの基質を溶解し、冷却し、２８℃でインキュベー
トし、コウジカビから得られたＮ−アセチル−β−Ｄ−
ヘキソサミニダーゼ（Ｓｉｇｍａ ｇｒａｄｅ ＸＩ）
（前記リン酸塩緩衝液で透析した未精製β−ガラクトシ
ダーゼからの８０〜１００％硫酸アンモニウム画分）で
処理した。２４時間インキュベートを継続し、それによ
り供与体の全てを消費した。反応混合物を８５〜９０℃
で１０分間加熱して酵素活性を破壊した。ｐ−ニトロフ
ェノールをジエチルエーテル中に抽出した。水性残留物
を凍結乾燥し、Ｍａｇｎａｓｉｌ ５Ｈアミノプロピル
カラム及び溶離剤としてはＭｅＣＮ：Ｈ₂Ｏ（８１：１
９）を使用する半調製高速液体クロマトグラフィーで二
糖生成物を分離し、２１０ｎｍで紫外分光分析を行っ
た。

【００５０】２種の二糖生成物のみが高速液体クロマト
グラフィーで観察され、（供与体であるグリコシドｐ−
ニトロフェニル−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトサミ
ニドに基づく）全体収率は４９％で、重量比は４：１で
あった。高速液体クロマトグラフィーで分離精製したこ
れらの生成物は１３Ｃ ＮＭＲスペクトルの特性シフト
に基づくと、１，３移動生成物（化合物１）（主異性
体）及び１，４移動生成物（化合物２）（副異性体）で
あることが判明した。陽子−陽子及び炭素−陽子移動相
関分光法（ＣＯＳＹ）を使用してＮＭＲ信号分析を行っ
た。陰イオンＦＡＢ ＭＳ−ＭＳ（タンデム）質量分析
法により構造を確かめた。

【００５１】実施例２ 実施例１と同一の方法を使用（但し受容体としてはメチ
ルα−Ｄ−グルコピラノシドを使用）すると、顕著に異
なる結果が得られた。この場合、同様に２種の生成物の
みが観察され、全体収率は３６％であった。主生成物
（８４％）は１，４移動生成物（化合物３）であり副異
性体（１６％）は１，６移動生成物（化合物４）であっ
た。前述した如く構造分析を行った。

【００５２】実施例３ ｐ−ニトロフェニル−２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシドをグリコシル供与体として
使用すると、非常に似通った結果が得られた。メチルβ
−Ｄ−グルコピラノシドを受容体として使用すると、
１，３及び１，４移動生成物（化合物５及び６）が得ら
れ、全体収率は２３％、重量比は５５：４５であった。
メチルα−Ｄ−グルコピラノシドを受容体として使用す
ると、１，４および１，６移動生成物（化合物７及び
８）が得られ、全体収率は１７％、重量比は７：３であ
った。

【００５３】実施例４ コウジカビからのβ−ガラクトシダーゼ（未精製β−ガ
ラクトシダーゼからの８０〜１００％硫酸アンモニウム
画分）をｐＨ４．５で使用して、ｐ−ニトロフェニル−
２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピ
ラノシドをメチル−２−アセトアミド−２−デオキシ−
β−Ｄ−グルコピラノシド及びメチル−２−アセトアミ
ド−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドと移動反
応させた。

【００５４】メチル−２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシドとの反応で得られた生成物
を高速液体クロマトグラフィーにかけると、４３％の収
率で２種の移動生成物が認められた（重量比は４７：５
３）。一方の移動生成物は化合物９であると同定し、他
方の生成物は２種の三糖の混合物（化合物１２及び１
３）であった。

【００５５】実施例５ 実施例４の方法を使用する（但しメチル−２−アセトア
ミド−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドを使
用）と、同様に２種の生成物が得られ、これらを高速液
体クロマトグラフィーにより検出すると、収率は９１％
と高く、また重量比は９０：１０であった。移動生成物
を化合物１０及び１１であると同定し、重量比は９０：
１０であった。

【００５６】実施例６ 実施例１の方法を使用する（但し受容体としてはβ−Ｄ
−グルコースを使用）と、３種の移動生成物が得られ、
全体収率は５３％であった。２種の主生成物は１，３お
よび１，４移動生成物であった。

【００５７】８０〜１００％硫酸アンモニウム画分の代
わりに市販のβ−ガラクトシダーゼ調製物を使用すると
同一の移動生成物が得られた。

【００５８】クロカビからのβ−Ｎ−アセチルグルコサ
ミニダーゼを使用してもこれらの移動生成物が得られ
た。

【図面の簡単な説明】

【図１】化合物１〜８の構造式を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 デイビツド・ハーバート・ジヨージ・クル ート イギリス国、カバントリー・シー・ブイ・ ４・７・イー・デイー、キヤノン・パー ク、チヤンセラーズ・クローズ・２ (72)発明者 サダム・シング イスラエル国、ガン・52900、ラマト、バ ー−イラン・ユニバーシテイ、デパートメ ント・オブ・ケミストリー（番地なし)

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 式： ＨｅｘＮＡｃ−Ｓａｃｃ （式中、Ｈｅｘはヘキソース残基を示し、ＮＡｃはヘキ
   ソース残基上のＮ−アセチルアミノ置換基を示し、Ｓａ
   ｃｃは糖残基を示す。）で表されるオリゴ糖の製造方法
   であって、β−ガラクトシダーゼ活性も示すＡｓｐｅｒ
   ｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐから得られた不純Ｎ−アセチルヘ
   キソサミニダーゼ調製物を触媒として使用して、ヘキソ
   サミニル供与体を受容体としての糖と酵素反応させるこ
   とからなることを特徴とする方法。
2. 【請求項２】 受容体が単糖又は二糖であることを特徴
   とする請求項１に記載の方法。
3. 【請求項３】 受容体が、供与体のヘキソサミニル基が
   付着するヘキソース残基又はヘキソサミン残基を有する
   グリコシド又はジグリコシドであることを特徴とする請
   求項１に記載の方法。
4. 【請求項４】 供与体が２−アセトアミド−２−デオキ
   シ−β−Ｄ−ガラクトピラノシドであることを特徴とす
   る請求項１に記載の方法。
5. 【請求項５】 酵素調製物がＮ−アセチルガラクトサミ
   ニダーゼ活性を示すことを特徴とする請求項１に記載の
   方法。
6. 【請求項６】 酵素調製物の主活性がβ−ガラクトシダ
   ーゼであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
7. 【請求項７】 請求項１に記載の方法により製造された
   化合物と化粧品として許容し得るビヒクルとからなる局
   所的施用に適した組成物。
8. 【請求項８】 メチル４−Ｏ−（２−アセトアミド−２
   −デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ−グ
   ルコピラノシドと、メチル６−Ｏ−（２−アセトアミド
   −２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−α−Ｄ
   −グルコピラノシドと、メチル４−Ｏ−（２−アセトア
   ミド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−
   ２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラ
   ノシドと、メチル４−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デ
   オキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アセトア
   ミド−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドと、メ
   チル６−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β−
   Ｄ−ガラクトピラノシル）−２−アセトアミド−２−デ
   オキシ−α−Ｄ−グルコピラノシドと、β−Ｄ−Ｇａｌ
   ｐＮＡｃ−（１→４）−β−Ｄ−ＧａｌｐＮＡｃ−（１
   →４）−β−Ｄ−ＧｌｕｐＮＡｃ ＯＭｅと、β−Ｄ−
   ＧａｌｐＮＡｃ−（１→３）−β−Ｄ−ＧａｌｐＮＡｃ
   −（１→４）−β−Ｄ−ＧｌｕｐＮＡｃ ＯＭｅと、３
   −Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガ
   ラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノースと、３
   −Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガ
   ラクトピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノースと、４
   −Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガ
   ラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノースと、４
   −Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガ
   ラクトピラノシル）−α−Ｄ−グルコピラノースとから
   なる群の中から選択される化合物。
9. 【請求項９】 請求項８に記載の化合物と化粧品として
   許容し得るビヒクルとからなる局所的な施用に適した組
   成物。
10. 【請求項１０】 請求項７に記載の組成物を施用するこ
    とからなるヒトの毛髪刺激のための美容手入れ方法。
11. 【請求項１１】 請求項９に記載の組成物を施用するこ
    とからなるヒトの毛髪刺激のための美容手入れ方法。