CN110538193A - 卡拉胶寡糖的用途及含有卡拉胶寡糖的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及卡拉胶寡糖作为生发剂或护发剂的用途及包含卡拉胶寡糖的组合物，具体涉及卡拉胶寡糖在制备用于改善和/或促进毛发生长，或者消除和/或缓解与毛发生长状态不良有关的病症或状态的产品中的用途。本发明提供的包含卡拉胶寡糖的组合物具有显著的防脱生发功效，无刺激性、无副作用、安全性高。

Description

卡拉胶寡糖的用途及含有卡拉胶寡糖的组合物

技术领域

本发明涉及卡拉胶寡糖的用途，特别是卡拉胶寡糖作为改善毛发生长的活性成分的作用，更特别是用于防止脱发和促进毛发生长方面的用途。

背景技术

脱发及其所引起的秃顶是一种常见的现象，其引起的精神压力给人际关系和社会生活带来很多困扰和障碍。随着生活节奏的加快，生活压力、环境压力的增大，目前受到脱发困扰的人群越来越年轻化，且不止是男性，女性脱发也正逐渐增加，因此有很多用于防脱发的治疗药物、护发外用品、生发外用品。

引起脱发的原因较为复杂，是多种因素的共同作用。最常见的脱发类型是“雄性激素源性脱发”，或者被称为“脂溢型脱发”，其主要的原因是皮脂的分泌受雄性激素调节，在皮脂异常分泌或者产生异常皮脂时，将影响毛发健康，进而导致脱发。目前的药物和护发用品，一般是通过雄性激素的控制、或清洗等方法来解决头皮油脂问题。例如服用保法止(非那雄胺片，即N-(1,1-二甲基乙基)-3-氧-4-氮杂-5α-甾-1-烯-17β-酰胺)抑制雄性激素水平，促进头发生长，治疗雄性激素源脱发与秃顶。外用米诺地尔(6-(1-哌啶基)-2,4-嘧啶二胺,3-氧化物)治疗雄性激素源性脱发。这两种药物虽然有明显的治疗效果，但同时由于降低了雄性激素的水平，由此也产生了相应的副作用，例如勃起障碍、性欲减退，外用处出现皮疹、炎症、瘙痒等。

一些化妆品通过添加植物提取物来达到防脱或生发效果。例如中国专利文献CN105640803A公开了一种去屑、防脱发、护发产品及其制备方法，利用植物精油来消毒抗菌，平衡肌肤表层油脂分泌；中国专利文献CN101810553A公开了一种防脱育发组合物，包括当归、何首乌、防风、苦参、干姜、羌活等各种植物提取物。根据中医理论，它们一般都具有祛风、除湿、活血、降火等功效，但这些提取物的功效成分不清，因此其作用原理也不清楚，而且这些提取物由于成分复杂，极易造成过敏、刺激、皮炎等不良反应。因此开发新的具有保护头发、预防脱发、促进生发作用的产品仍是本领域技术人员期待的。

卡拉胶(Carrageenan)是从海洋红藻(石花菜、角叉菜、鹿角菜、麒麟菜等)中提取的一种硫酸半乳聚糖，具有由1,3-β-D半乳糖和1,4-α-D半乳糖交替连接形成的骨架结构。通过化学法或生物法降解卡拉胶可制备得到卡拉胶寡糖，其为低聚糖，分子量小、可溶性好，具有多种生理活性。卡拉胶寡糖的凝胶化作用具有免疫调节和抗肿瘤活性；对辐射损伤有明显的防护作用；具有抗菌和抗病毒活性；具有明显的抗氧化活性；具有抗凝血活性。多种红藻提取物已列入化妆品目录，如胶石花菜提取物、沟鹿角菜提取物、角叉菜胶钠等，但卡拉胶寡糖用于化妆品方面的应用，尚未见报道。

根据单糖的连接方式和基团的位置，常见的卡拉胶寡糖主要有Kappa(κ-)型、Iota(ι-)型和Lambda(λ-)型三种，但无论是单一组分或混合组分的卡拉胶寡糖，其用于保护头发、防脱育发的功能都尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供卡拉胶寡糖作为改善毛发生长的活性成分的作用，特别是用于防止脱发和促进毛发生长方面的用途。本发明令人意外地发现，使用卡拉胶寡糖及其组合物可以有效地改善毛发生长状态，特别是可以有效地防止脱发及促进毛发生长。

为此，第一方面，本发明提供了卡拉胶寡糖在制备用于改善和/或促进毛发生长，或者消除和/或缓解与毛发生长状态不良有关的病症或状态的产品中的用途，其中所述卡拉胶寡糖作为活性成分。

进一步，所述卡拉胶寡糖选自下组：κ-卡拉胶寡糖、ι-卡拉胶寡糖、λ-卡拉胶寡糖中的至少一种。

具体地，所述κ-卡拉胶寡糖选自下组：κ-卡拉胶三糖、κ-卡拉胶五糖、κ-卡拉胶七糖、κ-卡拉胶九糖、κ-卡拉胶十一糖、κ-卡拉胶十三糖、κ-卡拉胶十五糖、κ-卡拉胶十七糖、κ-卡拉胶十九糖中的至少一种；优选为κ-卡拉胶五糖。

进一步，所述与毛发生长状态不良有关的病症或状态是指脱发或毛发生长速度缓慢。

进一步，所述脱发是指雄性激素源性脱发。

进一步，所述产品是局部施用产品。

进一步，所述产品是用作皮肤外用的局部施用产品。

进一步，所述产品是药品或化妆品。

进一步，所述产品是呈溶液、乳状、膏状、乳膏、或凝胶的形式。

进一步，所述卡拉胶寡糖占所述产品总重量的百分数为0.01-1wt％，优选0.01-0.5wt％，更优选0.1-0.5wt％。

进一步，所述产品包括：(1)所述卡拉胶寡糖，和(2)生理学可接受的辅料。

进一步，所述生理学可接受的辅料选自下组：乳化剂、着色剂、保湿剂、增溶剂、防腐剂中的至少一种。

进一步，所述生理学可接受的辅料包括小分子多元醇和非离子表面活性剂。

进一步，所述小分子多元醇选自下组：甘油、丙二醇、丁二醇和戊二醇中的至少一种，优选为甘油。

进一步，所述非离子表面活性剂选自下组：聚乙二醇(PEG)、吐温和SPAN中的至少一种，优选为PEG，进一步优选为PEG-400。

第二方面，本发明提供一种组合物，其特征在于，所述组合物包括：(1)卡拉胶寡糖，和(2)药品或化妆品中可接受的辅料，其中所述卡拉胶寡糖以促进毛发生长、改善毛发状态的浓度存在于所述组合物中，所述组合物为药物或化妆品。

进一步，所述卡拉胶寡糖选自下组：κ-卡拉胶寡糖、ι-卡拉胶寡糖、λ-卡拉胶寡糖中的至少一种。

具体地，所述κ-卡拉胶寡糖选自下组：κ-卡拉胶三糖、κ-卡拉胶五糖、κ-卡拉胶七糖、κ-卡拉胶九糖、κ-卡拉胶十一糖、κ-卡拉胶十三糖、κ-卡拉胶十五糖、κ-卡拉胶十七糖、κ-卡拉胶十九糖中的至少一种；优选为κ-卡拉胶五糖。

进一步，所述卡拉胶寡糖占所述组合物总重量的百分数为0.01-1wt％，优选0.01-0.5wt％，更优选0.1-0.5wt％。

进一步，所述药品或化妆品中可接受的辅料选自下组：乳化剂、着色剂、保湿剂、增溶剂、防腐剂中的至少一种。

进一步，所述药品或化妆品中可接受的辅料包括小分子多元醇和非离子表面活性剂。

进一步，所述小分子多元醇选自下组：甘油、丙二醇、丁二醇和戊二醇中的至少一种，优选为甘油。

进一步，所述非离子表面活性剂选自下组：PEG、吐温和SPAN中的至少一种，优选为PEG，进一步优选为PEG-400。

进一步，所述小分子多元醇和所述非离子表面活性剂的质量比为2-12：1-10。

在优选的实施方式中，所述甘油占所述组合物总重量的1-6wt％，优选1-4wt％；所述PEG-400占所述组合物总重量的0.5-5wt％，优选0.5-2wt％。

在一个具体的实施方式中，所述组合物由卡拉胶寡糖、甘油、PEG-400和水组成。

进一步，所述组合物是呈溶液、乳状、膏状、乳膏、或凝胶的形式。

第三方面，本发明提供一种生发剂或护发剂，所述生发剂或护发剂以卡拉胶寡糖为药效活性成分，用于提高毛乳头细胞活力。

进一步的，卡拉胶寡糖作为保护头发、预防脱发、和/或促进生发的活性成分。

进一步的，卡拉胶寡糖作为提高毛乳头细胞活力的活性成分；特别是，卡拉胶寡糖用于提高由雄激素(如二氢睾酮)导致的损伤毛乳头细胞的活力。

进一步的，卡拉胶寡糖用于促进毛乳头细胞分泌细胞因子的能力。

进一步的，卡拉胶寡糖用于促进毛长增长、毛重增加。

进一步，所述卡拉胶寡糖选自下组：κ-卡拉胶寡糖、ι-卡拉胶寡糖、λ-卡拉胶寡糖中的至少一种。

具体地，所述κ-卡拉胶寡糖选自下组：κ-卡拉胶三糖、κ-卡拉胶五糖、κ-卡拉胶七糖、κ-卡拉胶九糖、κ-卡拉胶十一糖、κ-卡拉胶十三糖、κ-卡拉胶十五糖、κ-卡拉胶十七糖、κ-卡拉胶十九糖中的至少一种；优选为κ-卡拉胶五糖。

卡拉胶寡糖，是卡拉胶酶酶解卡拉胶或者红藻后所得的低聚合度的寡糖，可通过商购获得。卡拉胶寡糖具有多种生物活性，但在化妆品领域特别是用于保护头发、防脱育发的功能在本发明的申请日前未见有报道。本发明对卡拉胶寡糖进行实验，以细胞模型验证了其具有防脱育发的功能。

将卡拉胶寡糖进一步应用于动物模型时，本发明针对皮肤环境(皮肤含有油脂)，选用了小分子多元醇、表面活性剂两种成分与卡拉胶寡糖进行复配，利用醇对水和油的兼容特性，以及表面活性剂的分散特性，促进了其在天然皮肤上的渗透、分散，使卡拉胶寡糖用于天然皮肤时可以有效发挥作用。

本发明所用的小分子多元醇为碳链长度为10以下的多元醇。用于复配的小分子多元醇可选用具有水和油的兼容特性，同时具有保湿性能的，常用于药品或化妆品中的小分子多元醇，包括甘油、丙二醇、丁二醇、戊二醇等；表面活性剂可包括聚乙二醇、吐温、SPAN等。根据安全性、无刺激性、许可使用等因素综合考虑，本发明优选了甘油和聚乙二醇。甘油具有水和油的兼容特性，有助于卡拉胶寡糖的渗透，同时，甘油具有保湿作用，有助于增加毛发正常代谢所需的水分；第三，甘油是公认安全性很高的药品和化妆品原料。聚乙二醇是一种安全的非离子表面活性剂，有助于降低表面张力，加强卡拉胶寡糖和甘油在皮肤的接触，促进渗透充分发挥在促毛发生长的作用。

可用于卡拉胶寡糖复配的辅料种类众多，为了提供一种组合物便于与其它辅料进一步复配，形成各种产品，本发明优选一种由κ-卡拉胶五糖、甘油、PEG-400和水组成的具有防脱育发效果的组合物，可以应用于护发产品的原料，也可直接作为护发产品使用。

综上，与现有技术相比，本发明具有以下优点：

(1)本发明提供了卡拉胶寡糖的新用途。卡拉胶寡糖用于防脱育发作用的安全性高、无副作用、无刺激性。而现有的用于防脱育发的产品主要有非那雄胺、米诺地尔和植物提取物，非那雄胺和米诺地尔副作用强；植物提取物由于成分复杂，易产生刺激性。

(2)卡拉胶寡糖用于防脱育发作用的机理清楚、功效明确，首次证实了卡拉胶寡糖能够缓解二氢睾酮对毛乳头细胞的抑制作用，提高毛乳头细胞的活力。现有技术中广泛使用的植物提取物成分复杂，一些组份甚至对生发护发具有不良或负面影响，降低了防脱育发的效果，不仅导致不同批次间提取物效果不稳定，而且也推高了成本、造成了浪费。

(3)本发明提供了一种包含卡拉胶寡糖的组合物，具有保护头发、预防脱发、促进生发的作用，该组合物用于防脱生发时功效显著、无刺激性、无副作用、安全性好。

附图说明

通过阅读下文优选实施方式的详细描述，各种其他的优点和益处对于本领域普通技术人员将变得清楚明了。附图仅用于示出优选实施方式的目的，而并不认为是对本发明的限制。在附图中：

图1为不同浓度DHT对毛乳头细胞活力的影响；

图2为不同浓度的卡拉胶寡糖对毛乳头细胞活力的影响；

图3为卡拉胶寡糖作用于雄激素脱发体外细胞模型时，对VEGF的表达量影响；

图4为DHT作用于毛乳头细胞时，对DKK-1、TGF-β2、β-catenin和AR的表达量的影响；

图5为卡拉胶寡糖(DP3-19)作用于雄激素脱发体外细胞模型时，对DKK-1、TGF-β2、β-catenin和AR的表达量影响；

图6为κ-卡拉胶五糖(DP5)作用于雄激素脱发体外细胞模型时，对DKK-1、TGF-β2、β-catenin和AR的表达量影响；

图7为κ-卡拉胶五糖及其组合物的经皮渗透结果。

具体实施方式

下面将参照附图更详细地描述本公开的示例性实施方式。虽然附图中显示了本公开的示例性实施方式，然而应当理解，可以以各种形式实现本公开而不应被这里阐述的实施方式所限制。相反，提供这些实施方式是为了能够更透彻地理解本公开，并且能够将本公开的范围完整的传达给本领域的技术人员。

本发明对试验中所用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述，在下面的实施例中，如果无其他特别的说明，％表示wt％，即重量百分数。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。

实施例1卡拉胶寡糖对雄激素脱发体外细胞模型的作用

以毛乳头细胞为试验对象，用一定浓度的二氢睾酮(DHT)刺激建立雄激素脱发体外细胞模型，然后用卡拉胶寡糖处理雄激素脱发体外模型，以米诺地尔为阳性对照物，通过检测毛乳头细胞分泌的血管内皮生长因子(VEGF)、DKK-1、转化生长因子(TGF-β2)以及β-连环蛋白(β-catenin)、雄激素受体(AR)含量的变化来评价κ-卡拉胶寡糖促进毛发再生的功效。

本实施例用到的卡拉胶寡糖有以下两种：(1)κ-卡拉胶五糖(以下简称DP5)；(2)9种κ-卡拉胶寡糖的混合物(以下简称DP3-19)，由κ-卡拉胶三糖、五糖、七糖、九糖、十一、十三、十五、十七、十九组成，且这9种κ-卡拉胶寡糖在混合物中占相同比例。

具体试验步骤如下：

(一)构建雄激素脱发体外模型

以毛乳头细胞为研究对象，用不同浓度的二氢睾酮(DHT)处理毛乳头细胞，通过细胞活力、细胞因子VEGF、TGF-β2、β-catenin、DKK1以及雄激素受体AR的变化情况来确定DHT的最佳刺激浓度，其中DHT最佳刺激浓度为在不损伤细胞(细胞活力≥90％)的前提下，能使几种分泌因子的表达量发生显著性变化(P＜0.01)的浓度。具体步骤如下：

(1)将毛乳头细胞以1.5×10⁵/孔细胞的接种密度接种至96孔板中，放置于37℃，含5％CO₂培养箱孵育24h；

(2)弃去已培养24h的细胞培养液，更换新培养液，同时分别加入不同浓度的DHT(0nM、25nM、50nM、100nM、200nM、400nM、600nM、800nM、1000nM)，培养24h；

(3)细胞活力检测：经步骤(2)培养后，弃去上清，加入200μL浓度为0.5mg/mL的MTT工作液，37℃避光孵育。4h后弃去上清，每孔加150μL二甲基亚砜，利用酶标仪读取OD₄₉₀值。以空白对照(加入0nM DHT)的细胞OD值为100％细胞活力，计算细胞活力值，经不同浓度DHT处理后细胞活力值见图1。

由图1可知，当二氢睾酮(DHT)的浓度不高于800nM时，毛乳头细胞的活力维持在90％以上，当DHT浓度达到1000nM时，细胞活力降至82.26％。且DHT浓度为800nM时，可使前五种述分泌因子的表达量发生显著性变化(P＜0.01)，根据以上实验结果选择DHT的最佳刺激浓度为800nM。

(二)检测卡拉胶寡糖对毛乳头细胞的细胞毒性

通过MTT法检测不同浓度的卡拉胶寡糖对毛乳头细胞的毒性作用，筛选出样品的安全工作浓度范围进行后续功效评估实验。检测方法如下：

表1卡拉胶寡糖浓度设置表

(1)向96孔板中加入细胞培养液，以1.5×10⁵/孔细胞的接种密度接种至96孔板中，放置于37℃，含5％CO₂培养箱孵育24h；

(2)配液：用细胞培养液进行配制：实验组：按照表1记载的浓度梯度，用培养液分别将DP5和DP3-19配制成所需的浓度；阳性对照组(PC组)：配制含4％DMSO的培养液；空白组：对培养液不做任何处理，待用；

(3)给药：弃去已培养24h的细胞培养液，分别加入步骤(2)配制得到的实验组培养液、PC组培养液、空白组培养液，继续培养24h；

(4)检测：细胞孵育24h后，弃去上清，加入200μL浓度为0.5mg/mL的MTT工作液，37℃避光孵育，孵育4h后弃去上清，每孔加150μL二甲基亚砜，用酶标仪读取OD₄₉₀值。以空白对照的细胞OD值为100％细胞活力，计算实验组和PC组细胞活力值，细胞毒性检测结果如表2；不同浓度的卡拉胶寡糖对毛乳头细胞活力的影响见图2。

表2细胞毒性检测结果

从细胞毒性结果(表2，图2)可知，不同聚合度的卡拉胶寡糖对毛乳头细胞的活力影响相当，当其浓度在2500ppm范围内时，毛乳头细胞的活力维持在90％以上，当其浓度达到5000ppm时，细胞活力降至90％以下。根据该结果，卡拉胶寡糖在毛乳头细胞上的最大安全给药浓度为2500ppm，最终确定在卡拉胶寡糖的安全给药浓度范围内选择200ppm、1000ppm和2500ppm这三个浓度对毛乳头细胞进行给药。

(三)测试卡拉胶寡糖对雄激素脱发体外细胞模型的作用

将毛乳头细胞以1.5×10⁵/孔细胞的接种密度接种至6孔板中，放置于37℃，含5％CO₂培养箱孵育24h。空白对照组不做任何处理；阴性对照组(NC)加入800nM DHT进行刺激；阳性对照组(PC)同时加入500μM米诺地尔和800nM DHT；石花菜提取物对照组为同时加入1000ppm胶石花菜(GELIDIUM CARTILAGINEUM)提取物和800nM DHT；实验组加入800nM DHT和分别加入不同浓度的DP5、DP3-19，继续孵育24h，分别收集上清液和细胞，采用ELISA法检测上清中的VEGF；收集细胞，采用RT-PCR检测DKK-1、TGF-β2、β-catenin和AR。应用GraphPad Prism作图，结果表示为Mean±SD。

VEGF的检测结果见图3，用T-Test方法进行统计分析时，NC组与空白相比，显著性以#表示，P-value＜0.05表示为#，P-value＜0.01表示为##；石花菜提取物组、DP3-19组、DP5组、PC组与NC组相比，显著性以*表示，P-value＜0.05表示为*，P-value＜0.01表示为**。

相应地，DKK-1、TGF-β2、β-catenin和AR的检测结果见图4-6。采用2^-△△CT方法进行结果计算，用T-Test方法进行统计分析时，在图4中，将空白组mRNA扩增倍数归一处理，NC组与空白组相比，显著性以#表示，P-value＜0.05表示为#，P-value＜0.01表示为##。在图5、6中，将NC组mRNA扩增倍数归一处理，PC组及各实验组与NC组相比，显著性以*表示，P-value＜0.05表示为*，P-value＜0.01表示为**。

由图3可知，与空白组相比，NC组的VEGF分泌量显著降低，说明本实验DHT刺激条件有效。与NC组相比，实验组中DP3-19、DP5的三个浓度对VEGF的分泌量均有显著提升作用，且随着卡拉胶寡糖浓度的提高，提升效果越显著，当其浓度达到2500ppm时，VEGF含量甚至超过了米诺地尔。这说明卡拉胶寡糖能促进毛乳头细胞中VEGF的分泌，有效解除DHT对细胞的抑制作用。石花菜提取物对VEGF的分泌量也有一定改善作用，但在相同浓度下(1000ppm)差于DP3-19和DP5的效果，可推知原因为石花菜提取物中也含有一定量的卡拉胶寡糖，故具有一定的解除DHT抑制的作用，但由于其卡拉胶寡糖的含量不高，所以效果较差。另外还可发现，与混合的卡拉胶寡糖(DP3-19)相比，单一的κ-卡拉胶五糖(DP5)具有更明显的作用。

由图4可知，与空白组相比，800nM的DHT对毛乳头细胞β-catenin基因的表达有显著抑制作用；对毛乳头细胞TGFβ2、DKK1和AR基因的表达有显著提升作用，说明本次实验DHT刺激条件有效。

由图5、6可知，(1)与NC组相比，PC组(米诺地尔)可以显著刺激雄性脱发模型中β-catenin基因的表达，并且抑制TGF-β2、DKK1和AR受体的表达，从而促进毛发生长。(2)混合的卡拉胶寡糖(DP3-19，图5)和单一的卡拉胶五糖(DP-5，图6)的作用规律与PC组一致，表明二者均可刺激毛发生长。(3)DP-5具有比DP3-19更明显的作用。(4)二者的最佳浓度均为1000ppm，在该浓度下，无论是DP3-19还是DP-5，其对雄性脱发模型中β-catenin基因表达的刺激作用，对TGF-β2、DKK1和AR受体表达的抑制作用，均比石花菜提取物好，表明分子量较小的寡糖，对毛发生长的促进作用更强。(5)在1000ppm浓度下，DP-5对TGF-β2、DKK1和AR受体表达的抑制作用，与PC组的米诺地尔相当，表明二者促进毛发生长的效果相当。

综合以上分析，卡拉胶寡糖对DHT造成的雄激素脱发模型均有修复效果，能改善模型中与脱发有关的分泌因子的表达量，表现出防脱育发的功效，对VEGF、β-catenin、TGF-β2、DKK1和AR均有显著性影响，故表明卡拉胶寡糖作为防脱育发组合物的主要活性成分，尤其以κ-卡拉胶五糖具有明显优势。

实施例2经皮渗透试验

经皮渗透试验旨在考察卡拉胶寡糖在皮肤上的渗透性，以κ-卡拉胶五糖为例进行以下试验。由于皮肤细胞具有屏障作用，通过采用高浓度的κ-卡拉胶五糖，以提高渗透后样品中κ-卡拉胶五糖的含量，保证检测的准确性，同时以相同浓度的石花菜提取物在皮肤上的渗透性作为对照。另外，设计向κ-卡拉胶五糖中添加促渗剂，如甘油以及非离子型表面活性剂(例如聚乙二醇)来增强其经皮吸收性能，促渗剂的选择与浓度设计如表3所示。

表3促渗剂的选择与浓度设计

将处理好的SD大鼠皮肤固定在透皮扩散仪(RYJ-12B型)的扩散池中。取含有1％κ-卡拉胶五糖的生理盐水500μL滴加于大鼠皮上，避免产生气泡。供应室上加保鲜膜防止水分蒸发。接收池内加入6mL生理盐水，循环水保持37(±0.5)℃，搅拌速度300rpm。分别于渗透0.5、1、2、3、4、5h时从接收池中抽取全部液体置于4℃待测，同时再向接收池中补充等量等温的新鲜生理盐水，实验设置三个重复。按上述操作流程对含有不同促渗剂的κ-卡拉胶五糖的经皮吸收能力进行测定。将所有待测样品用旋转蒸发仪浓缩至1mL，采用DNS法测定其中κ-卡拉胶五糖的含量并计算单位面积的渗透量。κ-卡拉胶五糖、石花菜提取物及其组合物的经皮渗透结果见图7。

由图7可知，未添加任何促渗剂时，κ-卡拉胶五糖的渗透速率较慢。当向其中分别加入甘油及非离子表面活性剂后，促渗效果明显，当甘油和PEG400同时存在时，其促渗效果比单独使用甘油或PEG400要好，其中组合8(2％甘油+1％PEG400)表现出最佳的促渗效果，使κ-卡拉胶五糖快速高效透过动物皮肤。

实施例3小鼠生发试验

取豚鼠36只，随机分为6组(空白组，实验组1、2、3、4、5)，每组6只，用生理盐水配制各组所用药物如下：空白组为生理盐水，实验组1为κ-卡拉胶寡糖(2500ppm)，实验组2为ι-卡拉胶寡糖(2500ppm)，实验组3为λ-卡拉胶寡糖(2500ppm)，实验组4为κ-卡拉胶五糖(2500ppm)，实验组5为2500ppmκ-卡拉胶五糖+2％甘油+1％PEG400。

向豚鼠注射适量麻醉剂，待其麻醉后，将每只背部相同部位3×3cm²的体毛除净，注意不要损伤皮肤，用生理盐水擦拭干净，将豚鼠放回笼内。24h后，在除毛区给药，每只500μL，涂抹均匀，每天1次，连续30天，并于给药的30天后随机从豚鼠给药部位剪取10根体毛，测量其长度和重量，以其平均值为指标比较各组豚鼠体毛生长情况，测得小鼠的生发效果见表4所示。

表4小鼠生发效果

由上表可知，与生理盐水相比，卡拉胶寡糖能一定程度的促进脱毛小鼠的毛发生长；几种卡拉胶寡糖对比发现，与ι型和λ型相比，κ型卡拉胶寡糖表现对脱毛小鼠毛发生长更好的效果，其中κ-卡拉胶五糖及其组合物对脱毛小鼠的毛发生长的促进效果最佳。特别是实验组5(卡拉胶五糖+甘油+PEG400)的生发效果更加明显，30天毛长增长率达到22.1％，毛重增长20.6％。这说明，甘油及聚乙二醇等物质能有效促进κ-卡拉胶五糖在皮肤组织中的扩散，该组合物具有显著的促进毛发生长作用。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (10)

1.卡拉胶寡糖在制备用于改善和/或促进毛发生长，或者消除和/或缓解与毛发生长状态不良有关的病症或状态的产品中的用途，其中所述卡拉胶寡糖作为活性成分。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述与毛发生长状态不良有关的病症或状态是指脱发或毛发生长速度缓慢。

3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述的卡拉胶寡糖选自下组：κ-卡拉胶寡糖、ι-卡拉胶寡糖、λ-卡拉胶寡糖中的至少一种；

优选的，所述卡拉胶寡糖至少包含κ-卡拉胶寡糖。

4.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述卡拉胶寡糖占所述产品总重量的百分数为0.01-1wt％。

5.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述产品包括生理学可接受的辅料；优选地，所述生理学可接受的辅料包括小分子多元醇和非离子表面活性剂。

6.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括：(1)卡拉胶寡糖，和(2)药品或化妆品中可接受的辅料，其中所述卡拉胶寡糖以促进毛发生长、改善毛发状态的浓度存在于所述组合物中，所述组合物为药物或化妆品。

7.根据权利要求6所述的组合物，其特征在于，所述卡拉胶寡糖占所述组合物总重量的百分数为0.01-1wt％。

8.根据权利要求6或7所述的组合物，其特征在于，所述药品或化妆品中可接受的辅料包括小分子多元醇和非离子表面活性剂；所述小分子多元醇和所述非离子表面活性剂的质量比优选为2-12：1-10。

9.如权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述小分子多元醇选自下组：甘油、丙二醇、丁二醇和戊二醇中的至少一种；所述非离子表面活性剂选自下组：PEG、吐温和SPAN中的至少一种。

10.一种生发剂或护发剂，其特征在于，所述生发剂或护发剂以卡拉胶寡糖为药效活性成分，用于提高毛乳头细胞活力，特别是，卡拉胶寡糖用于提高由雄激素导致的损伤毛乳头细胞的活力。