CN115054566B - 一种抗头皮衰老组合物及其制备方法 - Google Patents

一种抗头皮衰老组合物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于日化产品技术领域，具体涉及一种抗头皮衰老组合物及应用。所述组合物的原料包括如下重量份数的组分：决明胶，扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物，厚朴树皮提取物，甘油，野大豆籽提取物，二裂酵母发酵产物溶胞产物，乳酸菌发酵溶胞产物，芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝果提取物。制备方法包括先将决明胶、水和金属络合剂混合制成溶液A相；然后将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物，厚朴树皮提取物，甘油，野大豆籽提取物，香精，增溶剂和保湿剂混合搅拌制成B相；再将B相加入A相中搅拌，混合；最后依次加入剩余原料混合均匀即得。本发明组合物对斑马鱼模型具有明显的修复舒缓作用，提高头皮的屏障性能。

Description

一种抗头皮衰老组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于日化产品技术领域，具体涉及一种抗头皮衰老组合物及应用。
背景技术
头皮上覆盖着一层保护膜，其主要组成为皮脂，皮脂与皮肤水分、酸碱度等多种指标密切相关。头皮健康包括头发有光泽，没有头皮屑，头皮无瘙痒、炎症等问题，是头发健康生长的根本。日晒、风吹、灰尘等外界物理化学因素可能导致头皮损伤或其表面生态失衡，将会产生头皮屑、脱发、脂溢性皮炎、银屑病、头皮藓等头皮问题，另一个原因是真菌、细菌等其他因素引起的头皮炎症反应，从而出现大量头皮屑、红疙瘩、瘙痒等症状，其不健康状态易反复难以治愈。
虽然这些疾病在医学上并不严重，一般不会对人的身体健康造成较大的影响，但是容易给患者带来心理压力，引发社会问题和心理问题。因此如何更好地保持头皮和头发健康，修复保养头皮、抵抗头皮衰老以引起人们的广泛关注，成为亟待解决的社会问题。
目前用于改善头皮失衡的措施主要是调节头皮生态平衡、抑菌和头发护理。
中国发明专利申请CN111973545A公开了一种头皮护理组合物及其应用，该头皮护理组合物包含组分头皮屏障功能修复组分0.1-2%，包括水溶性神经酰胺0.10.5%、乳酸杆菌/豆浆发酵产物滤液0.1-0.5%、悬疣马尾藻提取物0.2-0.8%，控油组分0.11%，所述控油组分包括钩沙菜提取物0.10.5%、厚朴树皮提取物0.1-0.5%，抗敏组分0.1-0.5%，所述抗敏组分包括麦芽四糖0.10.5%。该头皮护理组合物具有平衡水油、舒缓止痒、修复头皮受损屏障的功效。
中国另一发明专利申请CN113786379A公开了乳酸菌美白修护精华及其制备方法，其原料包括乳酸杆菌/豆浆发酵产物滤液、乳酸菌发酵溶胞产物、二裂酵母发酵产物溶胞产物、酵母菌/川谷籽发酵产物滤液、海藻糖、果聚糖、生育酚、透明质酸钠、软毛松藻提取物、葡萄籽提取物、白蔡芦醇、肌酸、聚谷氨酸、黄原胶、苯氧乙醇、乙基己基甘油。该发明的乳酸菌美白修护精华能建立肌肤健康微生态,强化肌肤微生物屏障，同时可嫩白肌肤，软化角质，促进肌肤更新，抑制黑色素活性，其针对头皮的抗衰老的作用未有报道。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明提供一种抗头皮衰老组合物。与其他头皮护理精华相比，本发明从多种维度强化头皮的功能，维持头皮健康。
为了实现本发明目的，采用的技术方案如下：
一种抗头皮衰老精华液组合物，所述组合物的原料包括如下重量份数的组分：决明胶，扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物，厚朴树皮提取物，甘油，野大豆籽提取物，二裂酵母发酵产物溶胞产物，乳酸菌发酵溶胞产物，芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝果提取物。
优选地，所述组合物的原料包括如下重量份数的组分：决明胶0.1-1份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1 0.1-2份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2 0.1-1.5份、二裂酵母发酵产物溶胞产物0.5-4份、乳酸菌发酵溶胞产物0.2-3份、芽孢杆菌发酵产物0.1-4份和毛叶蕃荔枝果提取物0.2-3份。
优选地，所述扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的质量比为2.5:1:1；
混合物1是多种亲脂性提取物的协同增效复合物，为皮肤与皮肤微生物群之间的天然平衡提供重要支持，应对痤疮和头屑。其可以降低座疮杆菌毒性菌株的成膜活性并显著抑制其生长，能有效减轻痒疮和头屑所涉及的炎症。
优选地，所述甘油和和野大豆籽提取物的质量比为4:1。野大豆籽提取物是从野大豆的籽粒中提取的纯天然产物，含有丰富的黄酮等成分，能够促进纤维芽细胞的生长，具有活肤，抗衰老的作用；同时能与甘油保持头皮水分，协同保湿效果强。
优选地，所述混合物1选自CUTIBIOME CLRTM；
优选地，混合物2选自LysofitTM；
优选地，二裂酵母发酵产物溶胞产物选自Repair Complex CLRTMPF；紫外线带来的最严重的皮肤损伤便是对细胞 DNA 的破坏。细胞都有酶促修复系统来预防刺激损伤后果，但是，随着年龄的增长，修复的效率会降低。二裂酵母发酵产物溶胞产物有效预防 DNA 损伤，能够增加紫外线引发的角质形成细胞和活体皮肤的修复率，而且还能够减少不可修复的 DNA 损伤。
优选地，乳酸菌发酵溶胞产物选自ProRenew Complex CLRTM ；其可以增强头皮抗衰老能力，帮助其在受到破坏后重建微生物群，通过影响表皮微生态来增进皮肤健康；
优选地，芽孢杆菌发酵产物选自MARSTurizeTM；其可以促进表皮再生，减少细胞剥脱，从而重建皮肤屏障；并对抗氯化钠渗透压，防止皮肤脱水，提升角质细胞存活率；快速提升皮肤屏障功能/锁水力。
优选地，毛叶蕃荔枝果提取物选自AnnonaSenseCLRTM。AnnonaSense CLRTM 基于毛叶蕃荔枝的果实，作用于两种生物系统。它能建立稳定的内稳态平衡，激活内源性大麻素受体 CB2，与此同时，另一种受体 TRPV1 失去活性。在有害的皮肤内源性香草醛系统（EVS）中，TRPV1 是最重要的一员，失去活性，对缓解头皮炎症至关重要。其可以改善皮肤健康，增强舒适感。
优选地，所述组合物的原料还包括金属络合剂、增溶剂、保湿剂、防腐剂、防腐增效剂、助渗剂、香精和水中的一种或几种。
优选地，所述组合物的原料还包括金属络合剂、增溶剂、保湿剂、防腐剂、防腐增效剂、助渗剂、香精和水。
优选地，以重量份数计，所述组合物的原料还包括金属络合剂0.02-0.1份、增溶剂0.4-0.6份、保湿剂1-4份、防腐剂0.2-0.6份、防腐增效剂0.05-0.2份、助渗剂0.01-0.3份、香精0.01-0.03份和水。
优选地，所述金属络合剂为EDTA钠盐或EDTA钾盐；
优选地，所述增溶剂为PEG-40氢化蓖麻油；
优选地，所述保湿剂为甲基丙二醇；
优选地，所述防腐剂为苯甲醇，所述防腐增效剂为辛甘醇；
优选地，所述助渗剂为精氨酸。
本发明还提供上述组合物的制备方法，包括如下步骤：
（1）将决明胶、水和金属络合剂混合制成溶液A相；
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物，厚朴树皮提取物，甘油，野大豆籽提取物，香精，增溶剂和保湿剂混合搅拌制成B相；
（3）将B相加入A相中搅拌，混合均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝果提取物进行混合搅拌，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
优选地，步骤（1）中操作为先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在80±5℃下搅拌4-10min，保温10-20min，其中决明胶和部分水的质量比为1:1-3。
优选地，步骤（2）中所述搅拌的时间为5-10分钟；所述搅拌的温度为23-26℃；
优选地，步骤（3）中所述搅拌的温度为45-55℃，搅拌的时间为5-15min；
优选地，步骤（4）中所述混合搅拌的温度为40-50℃，搅拌的时间为10-15min。
本发明还提供上述组合物或制备方法制备的组合物在制备防治头皮衰老产品中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
（1）本发明抗头皮衰老精华液，与其他头皮护理精华相比，其从抗炎、保湿、修护、调节头皮内稳态等多种维度强化头皮抗衰的功效，维持头皮健康。
（2）本发明组合物，特殊的极端环境菌芽孢杆菌发酵产物、乳酸菌发酵溶胞产物协同强化屏障修复，从细胞层面增强防御能力，达到紧致皮肤、消除红血丝、改善皮肤色泽等，强化头皮的生理功能。
（3）本发明组合物通过二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物和毛叶蕃荔枝果提取物进一步调整头皮的微生物菌群，提升有益菌，提升头皮在更新过程以及在更新过程所参与的皮肤适应负面影响的能力；帮助皮肤建立可持续的内稳态平衡，改善皮肤健康，降低皮肤的敏感性，特别是头皮随年龄增长而增加的敏感，比如长期使用含有十二烷基硫酸钠 (SLS)的洗发水。这种化学物质会导致皮肤的天然保护屏障受损，增加经表皮的水分流失，并导致潜在的刺激物进一步渗透到皮肤。
附图说明
图1为模型组斑马鱼舒缓试验图；
图2为实施例1组斑马鱼舒缓试验图；
图3为模型组斑马鱼修护试验图；
图4为实施例1组斑马鱼修护试验图；
图5为实施例2组斑马鱼修护试验图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明。
以下实施方式中，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物混合物1采用产品CUTIBIOME CLRTM，供应商为Chemisches Laboratorium Dr. Kurt RichterGmbH；
甘油和野大豆籽提取物混合物2采用产品LysofitTM，供应商为新加坡LysoCoreBiotech ；
二裂酵母发酵产物溶胞产物采用产品Repair Complex CLRTM PF ，供应商为CLR- Chemisches Laboratorium Dr. Kurt Richter GmbH；乳酸菌发酵溶胞产物采用产品ProRenew Complex CLRTM，供应商为Chemisches Laboratorium Dr. Kurt Richter Gmb；芽孢杆菌发酵产物采用产品MARSTurizeTM，供应商为Lipotore science&biotechnologies；
毛叶蕃荔枝（Annona Cherimola）果提取物采用产品AnnonaSenseCLRTM，供应商为CLR -Chemisches Laboratorium Dr. Kurt Richter Gmb。
金属络合剂为EDTA钠盐，增溶剂为PEG-40氢化蓖麻油，保湿剂为甲基丙二醇，防腐剂为苯甲醇，防腐增效剂为辛甘醇，助渗剂为精氨酸。
实施例1
本实施例抗头皮衰老精华液组合物，组合物的原料为：决明胶0.5份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1为1份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2为1份、二裂酵母发酵产物溶胞产物2份、乳酸菌发酵溶胞产物2份、芽孢杆菌发酵产物1份和毛叶蕃荔枝果提取物1份，金属络合剂0.05份、增溶剂0.5份、保湿剂2份、防腐剂0.3份、防腐增效剂0.1份、助渗剂0.2份、香精0.02份，余量为水共100份。
制备方法如下：
（1）先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在85℃下搅拌6min，保温15min，制成A相；其中决明胶和部分水的质量比为1:1。
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，香精，增溶剂和保湿剂混合，在25℃下以500rpm速度搅拌5min制成B相；
（3）将B相加入A相中于55℃下以300rpm速度搅拌15min，混合分散均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝果提取物在45℃，分别搅拌5min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
将本方法制备的精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液未出现分层，稳定性良好。
实施例2
本实施例抗头皮衰老精华液组合物，所述组合物的原料为：决明胶0.1份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1为0.1份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2为0.1份、二裂酵母发酵产物溶胞产物0.5份、乳酸菌发酵溶胞产物0.2份、芽孢杆菌发酵产物0.1份和毛叶蕃荔枝果提取物0.2份。金属络合剂0.02份、增溶剂0.4份、保湿剂1份、防腐剂0.2份、防腐增效剂0.05份、助渗剂0.01份、香精0.01份，余量为水共50份。
制备方法如下：
（1）先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在80℃下搅拌10min，然后保温15min，制成A相；其中决明胶和部分水的质量比为1:2。
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，香精，增溶剂和保湿剂混合，在26℃下以500rpm速度搅拌10min制成B相；
（3）将B相加入A相中于45℃下以350rpm速度搅拌7min，混合分散均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝（Annona Cherimola）果提取物在50℃下分别搅拌8min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
本方法制备的精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液未出现分层，稳定性良好。
实施例3
本实施例抗头皮衰老精华液组合物，所述组合物的原料为：决明胶1份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1为2份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2为1.5份、二裂酵母发酵产物溶胞产物4份、乳酸菌发酵溶胞产物3份、芽孢杆菌发酵产物4份和毛叶蕃荔枝果提取物3份；金属络合剂0.1份、增溶剂0.6份、保湿剂4份、防腐剂0.6份、防腐增效剂0.2份、助渗剂0.3份、香精0.03份，余量为水共100份。
制备方法如下：
（1）先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在85℃下搅拌8min，然后保温20min，制成A相；其中决明胶和部分水的质量比为1:3。
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，香精，增溶剂和保湿剂混合，在25℃下以550rpm速度搅拌8min制成B相；
（3）将B相加入A相中于45℃下以300rpm速度搅拌10min，混合分散均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝（Annona Cherimola）果提取物在50℃下分别搅拌5min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
将本方法制备的精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液未出现分层，稳定性良好。
实施例4
本实施例抗头皮衰老精华液组合物，所述组合物的原料为：决明胶0.8份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1为1.5份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2为 0.8份、二裂酵母发酵产物溶胞产物3份、乳酸菌发酵溶胞产物2份、芽孢杆菌发酵产物2.5份和毛叶蕃荔枝果提取物2份。金属络合剂0.06份、增溶剂0.4份、保湿剂3份、防腐剂0.4份、防腐增效剂0.15份、助渗剂0.05份、香精0.02份，余量为水共100份。
制备方法如下：
（1）先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在85℃下搅拌6min，保温15min，制成A相；其中决明胶和部分水的质量比为1:2。
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，香精，增溶剂和保湿剂混合，在25℃下以550rpm速度搅拌5min制成B相；
（3）将B相加入A相中于55℃下以300rpm速度搅拌15min，混合分散均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝（Annona Cherimola）果提取物在45℃，分别搅拌5min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
将本方法制备的精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液未出现分层，稳定性良好。
实施例5
本实施例抗头皮衰老精华液组合物，所述组合物的原料为：决明胶0.3份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1为0.6份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2为0.4份、二裂酵母发酵产物溶胞产物1份、乳酸菌发酵溶胞产物0.8份、芽孢杆菌发酵产物1份和毛叶蕃荔枝果提取物0.4份。金属络合剂0.08份、增溶剂0.6份、保湿剂2份、防腐剂0.3份、防腐增效剂0.08份、助渗剂0.02份、香精0.03份，余量为水共50份。
制备方法如下：
（1）先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在85℃下搅拌6min，保温15min，制成A相；其中决明胶和部分水的质量比为1:2；
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，香精，增溶剂和保湿剂混合，在25℃下以500rpm速度搅拌5min制成B相；
（3）将B相加入A相中于55℃下以300rpm速度搅拌15min，混合分散均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝（Annona Cherimola）果提取物在45℃，分别搅拌5min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
将本方法制备的精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液未出现分层，稳定性良好。
对比例1
本对比例组合物的原料为：决明胶0.5份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1为1份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2为1份、二裂酵母发酵产物溶胞产物3份、乳酸菌发酵溶胞产物2份、芽孢杆菌发酵产物1份，金属络合剂0.05份、增溶剂0.5份、保湿剂2份、防腐剂0.3份、防腐增效剂0.1份、助渗剂0.2份、香精0.02份，余量为水共100份。
制备方法如下：
（1）先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在85℃下搅拌6min，保温15min，制成A相；其中决明胶和部分水的质量比为1:1。
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，香精，增溶剂和保湿剂混合，在25℃下以500rpm速度搅拌5min制成B相；
（3）将B相加入A相中于55℃下以300rpm速度搅拌15min，混合分散均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物在45℃，分别搅拌5min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
将本方法制备的精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液未出现分层，稳定性良好。
对比例2
本对比例组合物的原料为：决明胶0.5份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1为1份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2为 1份、乳酸菌发酵溶胞产物2份、芽孢杆菌发酵产物1份、毛叶蕃荔枝果提取物3份，金属络合剂0.05份、增溶剂0.5份、保湿剂2份、防腐剂0.3份、防腐增效剂0.1份、助渗剂0.2份、香精0.02份，余量为水共100份。
制备方法如下：
（1）先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在85℃下搅拌6min，保温15min；其中决明胶和部分水的质量比为1:1。
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，香精，增溶剂和保湿剂混合，在25℃下以500rpm速度搅拌5min制成B相；
（3）将B相加入A相中于55℃下以300rpm速度搅拌15min，混合分散均匀；
（4）依次加入乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝果提取物在45℃，分别搅拌5min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
将本精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液未出现分层，稳定性良好。
对比例3
本对比例抗头皮衰老精华液组合物的原料为：扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1为1份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2为1份、二裂酵母发酵产物溶胞产物2份、乳酸菌发酵溶胞产物2份、芽孢杆菌发酵产物1份和毛叶蕃荔枝果提取物1份，金属络合剂0.05份、增溶剂0.5份、保湿剂2份、防腐剂0.3份、防腐增效剂0.1份、助渗剂0.2份、香精0.02份，余量为水共100份。
制备方法如下：
（1）先将水和金属络合剂混合，在85℃下搅拌6min，保温15min；
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，香精，增溶剂和保湿剂混合，在25℃下以500rpm速度搅拌5min制成B相；
（3）将B相加入A相中于55℃下以300rpm速度搅拌15min，混合分散均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝（Annona Cherimola）果提取物在45℃，分别搅拌5min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
将本精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液未出现分层，稳定性良好。
对比例4
本对比例的乳化制备方法与实施例1方法不同，具体步骤如下：
（1）先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水和金属络合剂混合，在85℃下搅拌6min，保温15min；其中决明胶和部分水的质量比为1:1。
（2）将二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝（Annona Cherimola）果提取物香精，增溶剂和保湿剂混合，在25℃下以500rpm速度搅拌5min制成B相；
（3）将B相加入A相中于55℃下以300rpm速度搅拌15min，混合分散均匀；
（4）依次加入扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1，甘油和野大豆籽提取物混合物2，在45℃，分别搅拌5min，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
将本方法制备的精华液组合物用4000r/min离心15min，精华液出现分层，稳定性差。
试验一 本发明组合物对斑马鱼模型舒缓实验
1.实验原理:斑马鱼胚胎的中性粒细胞和人体中性粒细胞在形态、生化和生理功能上高度相似。中性粒细胞是在损伤或病菌入侵部位第一批出现的白细胞，作用于清除感染或有害物质。应用硫酸铜诱导斑马鱼胚胎侧线区域神经丘细胞损伤而引起中性粒细胞聚集的模型进行测试，比较受试物处理组和模型对照组的鱼胚胎侧线区域的中性粒细胞的数量变化，计算中性粒细胞抑制率以评价原料、配方或产品的舒缓功效。
2实验方法：
2.1受试生物：应用来源可靠(中国国家斑马鱼资源中心)的野生型AB品系斑马鱼产卵测试。
2.2分组
将斑马鱼分为模型组、阳性组、实施例1-5组、对比例1-3组，每组10尾受精后3天大的斑马鱼胚胎。
2.3处理方法：
模型组试验处理为将斑马鱼胚胎转移至3cm培养皿中，加入5mL含0.16mg/L五水硫酸铜的鱼胚胎培养液中培养；
阳性组试验处理为将斑马鱼胚胎将斑马鱼胚胎转移至3cm培养皿中，加入5mL含0.16mg/L五水硫酸铜和0.0036mg/L 吲哚美辛的鱼胚胎培养液中培养。
实施例1-5组和对比例1-3组试验处理为将斑马鱼胚胎转移至3cm培养皿中，分别加入5mL含0.16mg/L五水硫酸铜和0.2mL实施例1-5和对比例1-3制备的精华液组合物的鱼胚胎培养液中培养。
其中，上述鱼胚胎培养液制备方法如下：称取2940mg无水氯化钙， 1233mg七水硫酸镁，630mg碳酸氢钠，55mg氯化钾溶于10L水配制而成，pH值6.5-8.5，化学品均为分析纯级别。
2.4鱼胚胎固定染色
将“2.3处理方法”中各组培养皿均放置于28±1℃恒温箱中培养45min，然后将每组鱼胚胎于多聚甲醛中固定1h后，用PBST (配制方法见6.11)处理鱼胚胎3次，每次5min，然后用50%乙醇处理3min。
用苏丹黑B染色溶液(由上海源叶生物科技有限公司供应)对鱼胚胎进行室温染色1h后，用70%乙醇(v/v) 浸洗4次，每次5min ，然后用PBST处理2次，每次5min。
用漂白溶液在开盖的试管里处理鱼胚胎10min，然后用70%乙醇溶液处理5min，PBST处理1min，用70%乙醇溶液处理10min，再用PBST处理3min。
2.5样本的显微分析
将鱼胚胎侧身摆放，然后放到体式显微镜下对鱼胚胎尾部进行拍照，计数每尾鱼胚胎从肛门起四分之三尾部侧线区域的中性粒细胞数目，模型组与实施例1组斑马鱼舒缓实验结果分别如图1-2所示。
2.6数据和结果计算
计算中性粒细胞聚集抑制率：
抑制率 =× 100%− − − − − − − − − − − −(1)
(1)式中：
T— 受试物处理组鱼胚胎中性粒细胞数目的平均值；
C—模型对照组鱼胚胎中性粒细胞数目的平均值；
对受试物处理组鱼胚胎中性粒细胞数目和模型对照组中性粒细胞数目进行统计分析，并计算抑制率，各组对斑马鱼的中性粒细胞聚集抑制率结果见表1。
表1
试验二 本发明组合物对斑马鱼模型的修复实验
1、实验原理：当受到伤害时，皮肤必须快速重生来修复皮肤屏障。在胚胎阶段，伤口愈合十分迅速且不会留下伤疤；但过了胚胎阶段，伤口愈合需经过凝血、炎症、皮肤再生、血管重生和肉芽组织的形成，最终形成伤疤等步骤。斑马鱼在伤口修复过程中，除了不会形成凝血外，其余步骤和人类相同。斑马鱼伤口皮肤愈合非常迅速，紧接着炎症细胞迁移至伤口形成由巨噬细胞、纤维细胞、血管和胶原蛋白组成的肉芽组织。因此，斑马鱼和人类伤口愈合的主要步骤和原理十分一致，可以作为人体皮肤修护功效的检测筛查模型。
2、实验方法：
2.1受试生物：应用来源可靠(中国国家斑马鱼资源中心)的野生型AB品系斑马鱼(Daniorerio)产卵进行测试。
2.2分组
将斑马鱼分为模型组、阳性组、实施例1-5组、对比例1-3组，每组10尾受精后受精后3天大的斑马鱼胚胎。
2.3处理方法：
先使用三卡因溶液麻醉各组斑马鱼胚胎，于显微镜下用实验解剖刀切除各组斑马鱼胚胎尾鳍。
然后将模型组鱼胚胎，转移至96-孔板中，每孔含一粒鱼胚胎和0.2mL鱼胚胎培养液。其中鱼胚胎培养液制备方法如下：称取2940mg无水氯化钙， 1233mg七水硫酸镁，630mg碳酸氢钠，55mg氯化钾溶于10L水配制而成，pH值6.5-8.5，化学品均为分析纯级别。
将阳性组鱼胚胎，转移至96-孔板中，每孔含一粒鱼胚胎和0.2mL熟地黄提取物溶液。其中熟地黄溶液的制备方法为将熟地黄加6倍量的水煎煮三次，过滤，合并滤液，浓缩至60℃下相对密度为1.2的浓缩液即得。
将实施例1-5组、对比例1-3组鱼胚胎，转移至96-孔板中，每孔含一粒鱼胚胎和0.2mL相应组制备的精华液组合物溶液。
各组均放置于28±1℃恒温箱中培养3.5h。
2.4样本的显微分析
用三卡因将斑马鱼麻醉，然后放到体式显微镜下对鱼胚胎尾部进行侧面拍照。模型组如图3所示，实施例1组如图4所示，实施例2组如图5所示。
2.5数据和结果计算
计数每尾鱼胚胎尾鳍长度，并计算尾鳍修护促进率：
促进率 =× 100%− − − − − − − − − − − −(2)
(2)式中：
T— 各组鱼胚胎尾鳍长度的平均值；
C—模型组鱼胚胎尾鳍长度的平均值；
对各组组鱼胚胎尾鳍长度进行双尾 T 检验，最后计算尾鳍修护促进率，其修护促进率结果见下表2。
表2
试验三 本发明组合物对头皮经皮失水率的研究
检测仪器：Tewameter TM300，供应商为德国CK公司。
试验方法：招募35-40岁头皮经头皮失水率相当的志愿者共30名，将其分为6组，每组5人，分组时考虑性别、年龄、头皮肤质等因素，使各样本间头皮状况差异较小，使用前于上午检测头皮经皮失水率，使用方法为每天晚上涂抹一次，按摩10分钟，一次10ml。使用两周后，于次日上午再次检测经皮失水率，测试均在相同的头皮中央位置进行，其结果如表3。
表3各组经头皮失水率情况
注：同一列经皮失水率，与实施例1相比*P＜0.05。
上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。

Claims (7)

1.一种抗头皮衰老精华液组合物，其特征在于，所述组合物的原料由如下重量份数的组分组成：决明胶0.1-1份，扫帚叶澳洲茶枝/叶油、胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的混合物1 0.1-2份，甘油和野大豆籽提取物的混合物2 0.1-1.5份、二裂酵母发酵产物溶胞产物0.5-4份、乳酸菌发酵溶胞产物0.2-3份、芽孢杆菌发酵产物0.1-4份和毛叶蕃荔枝果提取物0.2-3份；
所述扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物和厚朴树皮提取物的质量比为2.5:1:1，所述甘油和和野大豆籽提取物的质量比为4:1。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物的原料还包括金属络合剂、增溶剂、保湿剂、防腐剂、防腐增效剂、助渗剂、香精和水。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，以重量份数计，所述组合物的原料还包括金属络合剂0.02-0.1份、增溶剂0.4-0.6份、保湿剂1-4份、防腐剂0.2-0.6份、防腐增效剂0.05-0.2份、助渗剂0.01-0.3份、香精0.01-0.03份和水。
4.根据权利要求2-3任一项所述的组合物，其特征在于，所述金属络合剂为EDTA钠盐，所述增溶剂为PEG-40氢化蓖麻油，所述保湿剂为甲基丙二醇，所述防腐剂为苯甲醇，所述防腐增效剂为辛甘醇，所述助渗剂为精氨酸。
5.一种权利要求2-4任意一项所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将决明胶、水和金属络合剂混合制成溶液A相；
（2）将扫帚叶澳洲茶枝/叶油，胡椒籽提取物，厚朴树皮提取物，甘油，野大豆籽提取物，香精，增溶剂和保湿剂混合搅拌制成B相；
（3）将B相加入A相中搅拌，混合均匀；
（4）依次加入二裂酵母发酵产物溶胞产物、乳酸菌发酵溶胞产物、芽孢杆菌发酵产物和毛叶蕃荔枝果提取物进行混合搅拌，再加入防腐剂、防腐增效剂和助渗剂混合均匀即得。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中操作为先将决明胶和部分水混合为分散液，然后再与剩余水、金属络合剂混合，在80±5℃下搅拌4-10min，然后保温10-20min，其中决明胶和部分水的质量比为1:1-3。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述搅拌的时间为5-10分钟；所述搅拌的温度为23-26℃，搅拌的转速为500-550rpm；步骤（3）中所述搅拌的温度为45-55℃，搅拌的时间为5-15min,搅拌的转速为300-350rpm；步骤（4）中所述混合搅拌的温度为40-50℃，搅拌的时间为15-30min。
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