JPH0761956B2

JPH0761956B2 - 静注可能な免疫グロブリン

Info

Publication number: JPH0761956B2
Application number: JP4203184A
Authority: JP
Inventors: ロバート・エイ・テノルド
Original assignee: カツター・ラボラトリース・インコーポレーテツド
Priority date: 1981-08-24
Filing date: 1992-07-08
Publication date: 1995-07-05
Anticipated expiration: 2010-07-05
Also published as: DE3267593D1; EP0073371A3; JPS5843914A; AU549204B2; EP0073371A2; JPH0694421B2; CA1183084A; AU8726582A; JPH05208918A; EP0073371B1; US4396608A; ES8306440A1; ES515177A0; MX7235E; ATE16567T1

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は新規な、静脈注射可能な免疫血清
グロブリンから成る製薬組成物、その製造方法及び人の
治療に対して免疫血清グロブリンを静脈注射によつて投
与するためのその使用に関するものである。

【０００２】筋肉注射の可能なガンマグロブリン製剤は
公知である。このような製品の一つは“ハイパーテツ
ド”（カツターラボラトリーズ・インコーポレーテツ
ド、バークレー、カリホルニア）である。

【０００３】通常の筋注用ガンマグロブリン製剤は、特
に無ガンマグロブリン血症患者においては、受け入れ難
いほど高い反応の発生のために、安全に静脈注射によつ
て投与することはできない。これらの反応は明らかに、
投与したガンマグロブリンによる補体結合によつて生じ
る血清補体濃度の低下を伴なう［S.Barandum ら、VoxSa
ng．７、１５７〜１７４（１９６２）］。抗補体性と呼
ばれるガンマグロブリンの補体結合能力は、特に高分子
量種への凝集によつて、特に分別操作の間に生じる変性
の結果として、著るしく増大する。これらの凝集物の補
体結合機構は、抗原−抗体複合体におけるものと同一で
あると考えられる［D.M.Marcus，J.Immunol．８４、２
７３〜２８４（１９６０）］。１００,０００×重力に
おける超遠心によつて凝集物を除去するときは、静脈注
射に充分に耐える抗補体活性の低い製品が得られる（Ba
randun ら、前記文献）。

【０００４】ガンマグロブリンを静脈注射による投与に
対して安全なものとするために、多くの試みがなされて
いる。これはすべてガンマグロブリンの抗補体活性を除
くことに依存している。超遠心（前記）は技術的に不適
当であつて、それによつて得られる製品は貯蔵中に再び
その抗補体活性を回復する。

【０００５】ｐＨ４.０における酵素ペプシンによるガ
ンマグロブリンの処理は、分子の蛋白質加水分解的な開
裂を生じさせて、約５Ｓの超遠心における沈降系数を有
する約１０,０００の分子量の分屑を与える［A.Nisonof
f ら、Science，１３２、１７７０〜１７７１（１９６
０）］。この残存分屑は、２価の抗体活性を保存し、且
つ抗補体活性を欠いているので、静脈注射による投与に
十分に耐え且つ有効である［W.Baumgarten，Vox Sang．
１３、８４（１９６７）］。けれども、未変性のガンマ
グロブリンに対する１９.８日と比較して、無ガンマグ
ロブリン血症患者においてはいくらか長いものの、僅か
１８時間という循環半減期によつて迅速に排泄してしま
うために、得られる治療効果は受け入れ難いほど短かい
持続時間を有しているにすぎない［E.Merler ら、Vox S
ang．１３、１０２（１９６７）；B.Jager，Arch.Inter
n.Med．１１９、６０（１９６７）］。ペプシン処理し
たガンマグロブリンの著るしい半減期の低下は、恐らく
は部分的に分子の大きさの激減によるものと思われるけ
れども、ガンマグロブリンの分解代謝の速度は、ペプシ
ンによつて消化された分子の部分の特異性に関係すると
いう指摘がある［J．L.Fahey ら、J.Exper.Med.，１１
８、１８４５〜１８６８（１９６３）］。分子のこの部
分は、本発明においては元のままに残つている。ペプシ
ン処理方法のもう一つの欠点は、残存しているペプシン
が動物性のものであつて、特に繰返しの投与において、
抗体の生産を刺激する可能性があるということである
［C.Blatrix ら、Presse Med．７７、６３５〜６３７
（１９６９）］。人間からのプラスミンの使用は、この
問題を排除することができるので、静注用ガンマグロブ
リンの製造のための異なる方法の基礎となる。

【０００６】人のプラスミンによるガンマグロブリンの
処理は、分子量約５０,０００の３成分への開裂をもた
らす［J.T.Sgouris，Vox Sang．１３、７１（１９６
７）］。十分に低濃度のプラスミンを使用するならば、
約１５％の分子が開裂するのみで、８５％が元のままの
ガンマグロブリンとして残留する（Sgouris，上記文
献）。消化されずに残る元のままのガンマグロブリン
は、ほとんど抗補体活性を示さず、不利な反応なしに静
脈内に投与することができる［J.Hinman ら、Vox San
g．１３、８５（１９６７）］。このようにして調製し
た材料は、試験管内及び生体内保護活性を維持するもの
と思われる［F.K.Zitzpatrick.Vox Sang．１３、８５
（１９６７）］。この解決方法の一欠点は、プラスミン
を完全に除去することができないということである。そ
のために、材料を４℃において貯蔵するときにすら、劣
化が継続する。

【０００７】ｐＨ４.０において３７℃で種々の時間に
わたつてガンマグロブリンを温置すると、抗補体活性が
低い水準に低下することが認められている。この結果
は、ガンマグロブリン中に不純物として存在する少量の
血清酵素によつて生じるのではないかということが示唆
されている（Blatrix ら、前記文献）。プラスミン処理
したガンマグロブリンにおけると同様に、この“ｐＨ
４.０ガンマグロブリン”は貯蔵中に、予測し得ない速
度で、抗補体活性を回復することが見出されているの
で、患者に投与する前に抗補体活性を測定することが必
要である［J.Malgrasら、Rev.Franc.Trans．１３、１７
３（１９７０）］。

【０００８】プラスミン処理ガンマグロブリン（Hinman
ら、前記）及びｐＨ４.０ガンマグロブリン［H.Koblet
ら、Vox Sang．１３、９３（１９６７）；J.V.Wclls
ら、Austr.Ann.Med．１８、２７１（１９６９）；Baran
dun ら、Monogr.Allergy，９、３９〜６０（１９７
５）；Barandun ら、Vox Sang.，７、１５７〜１７４
（１９６２）］は生体内で未変性ガンマグロブリンより
も短かい半減期を有している。たとえば、ｐＨ４.０ガ
ンマグロブリンの通常の患者中における半減期は約１４
日（Koblet ら、前記）であり、一方プラスミン処理物
は１６日（Merler ら、前記）の半減期を示す。

【０００９】パリの Center National de Transfusion
Sanguine（Ｃ.Ｎ.Ｔ.Ｓ）は選択した新鮮な血漿からの
ガンマグロブリンの注意深い分画と濾過によつて、低抗
補体活性を有する静脈内注射の可能なガンマグロブリン
を生産している［Blatrix ら、前記；同、Presse Med，
７７、１５９〜１６１（１９６９）；M.Steinbuch ら、
Vox Sang．１３、１０３（１９６７）］。これは注意し
て投与しなければならず、また実際に一部の患者には反
応が生じていることからみて、抗補体活性を完全に欠い
ているものとは思われない。このような反応を排除する
ためには注射前にコーチゾンを与えればよいが、抗補体
活性の明らかに不完全な除去は、その広範囲にわたる使
用に対しては好ましくないものと思われる。

【００１０】ガンマグロブリンのジスルフイド結合を還
元したのち末端封鎖剤と反応させることの抗補体活性に
対する効果は、既に研究されている。バランダンら（S.
Barandun，前記）はガンマグロブリンの溶液を０.２Ｍ
システアミンによつて、次いで０.２Ｍヨードアセトア
ミドによつて処理すると、ほとんど完全な抗補体活性の
喪失が生じるのに対して、システアミンまたはヨードア
セトアミド単独による処理は抗補体活性を顕著に低下さ
せないことを見出した。ヨードアセトアミドの毒性のた
めに、これらの研究者は静脈注射可能なガンマグロブリ
ンへのこの解決方法を追究しなかつた。

【００１１】変性した免疫血清グロブリンは米国特許第
３,９０３,２６２号に記されている。先ず分子中のジス
ルフイド結合の一部を−ＳＨ基に還元したのち、−ＳＨ
基をアルキル化することによつて、免疫血清グロブリン
を静脈注射可能ならしめた。反応混合物から生成物を分
離したのち、それを滅菌した。このようにして得た生成
物は静脈注射が可能であり、実際的及び潜在的な抗補体
活性の何れをも実質的に有していず、相当する未変性免
疫血清グロブリンの抗補体活性の生理学的半減期及びス
ペクトルを実質的に有していた。

【００１２】現在、いくつかの静脈注射の可能なガンマ
グロブリンを米国以外で入手することができる。このよ
うな製品の一つはフランクフルトのビオテスト社のイン
トラグロビンである。この製品はガンマグロブリンのベ
ータープロピオラクトン処理によつて製造する［Stepha
n,Vox Sang.，２８、４２２〜４３７（１９７５）］。
この材料は、約０.１８のナトリウムイオンと約０.２７
の塩素イオンのモル濃度を有している。その製造におい
て使用するベータープロピオラクトンは発ガン物質とし
て疑われている。

【００１３】別の静脈注射可能な製品は、日本のミドリ
十字社によつて製造されている（米国特許第４,１６８,
３０３号）。これは、２０Ｃ′Ｈ５０以下の抗補体活性
と重量で０.０６〜０.２６部のたとえば塩化ナトリウム
のような中性無機塩を有している、凍結乾燥した、天然
ガンマグロブリン製剤である。

【００１４】スイスの赤十字は静脈内投与のための免疫
グロブリンＳＲＣを有している。ＳＲＣは８０％を超え
る単量体としてのＩｇＧと比較的僅かな割合の２量体、
重合体及び開裂したＩｇＧ並びに痕跡のＩｇＡとＩｇＭ
を含有している。ＩｇＧ亜鋼の分布は正常な血清のそれ
と等しい。この製品は凍結乾燥した形態で製造され、１
単位当り３ｇの蛋白質、５ｇの庶糖及び少量の塩化ナト
リウムを含有している。希釈物（１００ｍｌ）は０.９
％の塩化ナトリウムを含有する。

【００１５】ヴエノグロブリン（日本のミドリ十字製）
はガンマグロブリンをプラスミンで処理することによつ
て製造される。これもまた重量で１部のプラスミン処理
ガンマグロブリン当りに０.５部の蛋白質安定剤（たと
えばアミノアセテート）を含有している。この製品は白
色粉末として市販され、希釈剤に溶解して使用する。生
成する溶液は透明であるか、または僅かに濁つており、
６.４〜７.４のｐＨを有している。

【００１６】西ドイツのシユワツブによつても静脈注射
の可能なガンマグロブリンが開発されており、これは５
０ｍｇ／ｍｌの免疫グロブリン、７ｍｇ／ｍｌのグリシ
ン及び７ｍｇ／ｍｌの塩化ナトリウムを含有している。

【００１７】ヴエイノグロブリンはフランスのメリユー
研究所から入手することができる。これは５ｇの蛋白質
及びｐＨと安定性の確保に十分なグリシン及び塩化ナト
リウムを含有している凍結乾燥粉末として市販されてい
る、プラスミン処理ガンマグロブリンである。１００ｍ
ｌ当り０.９ｇの塩化ナトリウムまたは等張性グルコー
スを含有する水溶液が注射用として用いられる。

【００１８】西ドイツのベーリングウエルケＡＧに譲渡
された米国特許第４,１６０,７６３号は、免疫グロブリ
ン分屑を低濃度の亜硫酸加水分解剤及び／または水に難
溶性のリン酸塩で処理することによつて製造した、低下
した補体固定を有する静脈内投与のための免疫グロブリ
ンに対するものである。この材料のｐＨは７.０であ
り、製品は凍結乾燥前に０.８５％の塩化ナトリウムと
２.５％（重量／容量）のグリシンを含有している。

【００１９】東京の帝人研究所は、新規免疫グロブリン
誘導体に対する米国特許第４,０５９,５７１号の記録の
譲受け人である。新規誘導体を含有する静脈内投与用の
水溶性組成物を記している。この誘導体は、ガンマグロ
ブリンの開裂した連鎖間ジスルフイド結合のＳ−スルホ
ン化物である。

【００２０】ペプシン処理した人の免疫グロブリンであ
るグロヴエニンは日本の日本製薬の製品である。典型的
には、上記の製品の溶液は５０ｍｇ／ｍｌのペプシン処
理免疫グロブリン、２.２５％（重量／容量）のアミノ
酢酸及び０.８５％（重量／容量）の塩化ナトリウムを
含有している。

【００２１】山之内製薬はグロブリンＶの販売業者であ
るが、これは２２５ｍｇのアミノ酢酸と８５ｍｇの塩化
ナトリウムを含有する乾燥したペプシン処理ヒト免疫グ
ロブリン（５００ｍｇ）である。静脈内投与のために
は、乾燥製品を１０ｍｌの水に溶解して注射に供する。

【００２２】本発明者は、免疫血清グロブリンの単量体
濃度が約９０％よりも大であり且つ広い範囲の患者に対
して免疫血清グロブリンを静脈内投与できる程度に実際
的及び潜在的抗補体活性を持続するようなイオン強度及
びｐＨを有する、変性した静脈内注射の可能な免疫血清
グロブリンを見出した。

【００２３】本発明の製品は、免疫血清グロブリン（Ｉ
ＳＧ）を可溶化して所定の蛋白質濃度の溶液とする。Ｉ
ＳＧの単量体含量が約９０％よりも高く且つ実際的及び
潜在的抗補体活性がＩＳＧ製品を静脈内注射可能ならし
める程度となるような水準に、この溶液のｐＨを調節し
且つ溶液のイオン強度を低下させる。ｐＨとイオン強度
は、蛋白質濃度の調節、滅菌、最終的な容器への充填な
どの間、上記の水準に保つ。

【００２４】本発明のＩＳＧの一利点は、静脈注射が可
能であることによつて、筋肉注射に伴なう問題を排除す
ることができるということである。その上、本発明の製
品は、還元−アルキル化、ベータープロピオラクトン処
理などにおいて生じるような化学的な変性を実質的に伴
なわない。

【００２５】本発明の製品の重要な一特色は、実際的及
び潜在的な抗補体活性を実質的に有しておらず且つまた
重合体状の物質、すなわち、“凝集物”を実質的に含有
していないということである。特に、本発明の製品は、
従来の製剤よりも向上した安定性を示す。この材料は、
その単量体含量と実際的及び潜在的抗補体活性の欠如を
維持しつつ、添加剤の存在なしで長期間にわたつて室温
で保存することができる。

【００２６】本発明のもう一つの利点は、静脈注射の可
能なＩＳＧの物理的測定値と生理学的機能がほとんど変
化しないということである。すなわち、本発明の材料の
抗体力価は出発材料と著るしくは異ならない。

【００２７】好適実施形態の説明本発明の方法のための出発材料は、未変性の人の免疫血
清グロブリンである。本明細書中の説明及び特許請求の
範囲中で“免疫血清グロブリン”という用語は、文献中
でガンマグロブリン、ＩｇＧ及び免疫グロブリンＧとし
てもまた種々言及されている物質を定義するために用い
る。これは、主として且つ好ましくは、少なくとも約８
５％の、約１６０,０００の分子量を有する、ガンマグ
ロブリンの７Ｓ種から成つている。残りの部分は、約３
００,０００の分子量を有する、９Ｓ種であることが好
ましい。標準的な免疫及び高度免疫（hyperimmune）血
清グロブリン、たとえば、破傷風、狂犬病及び肝炎免疫
血清グロブリン、の両者を使用することができるが、変
性生成物は、それぞれ、免疫及び高度免疫ＩＳＧであ
る。すなわち、本発明の方法に対する適当な出発材料
は、コーンの分屑ＩＩまたは分屑ＩＩＩ濾過物である
［Cohn ら、J.Am.Chem.Soc.，６８、４５９（１９４
６）；Oncley ら、ibid.，７１、５４１（１９４９）参
照］。

【００２８】分屑ＩＩは、超遠心による研究によると、
主として１６０,０００の平均分子量を有する（約８５
％）７Ｓ（沈降系数７）種のガンマグロブリンである。
残りの蛋白質は本質的に約３００,０００の分子量を有
する９Ｓ材料である。湿つた分屑ＩＩペースト（固形分
約３０％）を通常のようにして凍結乾燥して乾燥ＩＳＧ
粉末とし、次いでそれを溶解して１６.５％の無菌溶液
として筋肉注射用に調製する。本発明の方法に対して
は、湿つた分屑ＩＩペーストまたは乾燥ＩＳＧ粉末の何
れも、適当な出発材料である。

【００２９】本発明の方法の出発物質としては、コーン
分屑ＩＩまたは分屑ＩＩＩ濾液中に認められるものと本
質的に同一の蛋白質成分の組成を有する、どのような方
法によつて取得したガンマグロブリンをも使用すること
ができる。

【００３０】出発材料としては標準免疫血清グロブリン
及び高度免疫血清グロブリンの何れをも使用することが
できる。公知のように、後者は平均母集団中に普通に見
出されるよりも遥かに高い特異性抗体に対する力価を有
している選ばれた供血者から得た血漿または血清から製
造される。このような供血者は、特定のワクチンによつ
て最近免疫を与えられたか、さもなければ感染または疾
病から最近回復したものの何れかである。これらの高力
価の血清または血漿を集めて、分屑ＩＩが単離する点ま
で通常のコーン分別手順を施す。現在、高度免疫血清グ
ロブリンに対するビユーロー・オブ・ビオロジツクス
（ＢｏＢ）抗体標準は、筋肉内に投与すべき製品に基づ
いている。これらの標準は還元したグロブリン（１〜１
０ｍｌ）の標準的な筋肉内用量を投与するという仮定に
基づいている。所望の免疫学的応答を達成するために必
要な抗体の量は、静脈内に投与した場合には実質的に低
下するから、同一の血清抗体力価を与える静脈内用量は
筋肉内用量よりも実質的に少ないことは明らかである。
すなわち、筋肉内ＩＳＧと高度免疫血清グロブリンの用
量は、同じ抗体活性のグロブリンを静脈内に投与すると
きに同一の血清抗体力価を達成するために必要な用量よ
りも高くなければならない。

【００３１】出発する湿つたペーストまたは凍結乾燥し
た粉末を一定量の水またはその他の生理学的に受容しう
る基剤中に溶解して、約０.５〜２０％、好ましくは約
５％の濃度の蛋白質溶液とする。分屑ＩＩＩの濾液を用
いる場合には、常法によつて望ましい蛋白質濃度に濃縮
しなければならない。この方法においてはどのような蛋
白質濃度を用いてもよい。しかしながら、上記の範囲が
実際的な見地から好適である。

【００３２】蛋白質を溶解または濃縮したのち、たとえ
ば塩酸のような生理学的に受容しうる酸の添加によつ
て、約３.５〜５.０、好ましくは約３.８〜４.２のｐＨ
に調節する。一般に、蛋白質溶液中の単量体物質を最大
に保つ点にｐＨを調節する。しかしながら、ｐＨはゲル
化をもたらすほど低くてはならない。温度はＩＳＧ材料
に対して有害であつてはならない。良好な結果は約０〜
２０℃の温度範囲内で得られる。このように調節した材
料を次の段階前に何らかの時間にわたつて保持する必要
はない。しかしながら、所望するならば、材料を何らの
悪影響なく保存することもできる。

【００３３】ｐＨの調節後に蛋白質溶液を処理して、そ
のイオン強度をＩＳＧ製剤の単量体含量が約９０％より
も高く、好ましくは約９５％よりも高く、且つさらに好
ましくは約９８％よりも高くなり、且つ実際的及び潜在
的抗補体活性がＩＳＧ製剤を静脈注射可能ならしめるよ
うなものとなる水準まで低下させる。そのためには、実
際の抗補体活性が約２ｍｇ蛋白質／Ｃ′Ｈ５０単位より
も高くなければならない。生成物の非特異的補体結合活
性は、任意的に力価測定した補体とヘモリシンを用いて
測定する。抗補体活性として知られる補体結合活性は１
Ｃ′Ｈ５０単位を不活性化（結合）することができる蛋
白質製品ｍｇとして記す。１Ｃ′Ｈ５０単位は任意的に
力価測定した補体及びヘモリシン系中の補体の５０％を
活性化することができる蛋白質の量として定義する。

【００３４】溶液のイオン強度（Г／２）は、５％蛋白
質溶液としての製品が約１５ＮＴＵ（国定濁度単位）未
満、好ましくは約２ＮＴＵ未満の比濁分析の読みを有し
ているようなものでなければならない。

【００３５】本発明では、米国、コロラド州ラブランド
（loveland）のハツチ（Hach）社によつて製造されたハ
ツチレシオ−濁度計（Hach Ratio Turbimeter）を使用
して、比濁分析を行つた。イオン強度（Г／２）は下式
のように定義される：

【００３６】

【数１】ここでＣ⁺＝たとえばＮａ⁺、Ｋ⁺、Ｃａ²⁺、Ｍｇ²⁺ な
どのような金属イオンを包含する陽イオンであり、Ｃ^-＝たとえばＣｌ^-、Ｂｒ^-のようなハロゲンイオン、
酢酸またはクエン酸イオンなどのようなカルボン酸イオ
ンを包含する陰イオンであり、Ｚ⁺＝Ｃ⁺の電荷であり、且つＺ^-＝Ｃ^-の電荷である。

【００３７】前記のようなイオン強度は約０.００１ま
たはそれ以下であることが好ましい。上記の処理は、た
とえば限外濾過、透析濾過（diafiltration）、透析な
どのような標準的な方法またはそれらの組合わせによつ
て行なうことができる。たとえば適当なｐＨにおける蛋
白質溶液を少なくとも５容量の水の交換で、通常は約４
〜８容量の交換によつて透析濾過して、イオン強度を少
なくとも約０.００１に低下させる。この処理の間にペ
プチド及びたとえばアルコールのようなその他の不純物
の濃度もまた、一般に痕跡量まで低下する。

【００３８】上記の処理後または処理中に、ｐＨを測定
し且つ約３.５〜５.０の範囲内に保つ。

【００３９】このように処理した材料の蛋白質濃度を、
次いで、たとえば５％、１０％、１５％、等々というよ
うに、最終製品中で望ましい水準に調節する。この調節
はＩＳＧに対して有害でない通常の方法、たとえば限外
濾過、逆浸透、昇華、蒸発などによつて達成される。や
はり、製剤のｐＨは約３.５〜５.０、好ましくは約３.
８〜４.２の範囲内に保つ。

【００４０】次いでＩＳＧ製剤を緊張性（tonic）なら
しめる、すなわち、それを生理学的な状態と両立するよ
うにさせるため、またはそれを注射において生理学的に
受容しうるものとするために、処理する。これに関して
は、製剤のイオン強度（前記参照）を高めることなしに
緊張性（張度、tonicity）が得られるようにしなければ
ならないということに注意することが重要である。この
目的は、ＩＳＧ製剤に一定量の、たとえばグリシンなど
のようなアミノ酸、またはマルトース、デキストロー
ス、フルクトース、などのような炭水化物、あるいはた
とえばマンニトール、ソルビトールなどのような糖アル
コールまたは緊張性を与えるために十分なそれらの混合
物を加えることによつて達成される。たとえば、ＩＳＧ
製剤を緊張性とするためには、それを約１０％のマルト
ース（重量／容量に基づいて）と混合すればよい。

【００４１】与えられた溶液の張度は、溶媒のｍオスモ
ル（osmols）／ｋｇ（本発明の場合、溶媒は水）の単位
として表わされる。

【００４２】市販の静脈用免疫グロブリン溶液は、２５
０〜６５０ｍオスモル／ｋｇの浸透圧値（osmolality v
alue）を示しているが、一般的に許容されている浸透圧
値の範囲は２９５〜３１５または２８９〜３０８であ
る。

【００４３】上記の調節後に、通常は適当な媒体を通じ
る滅菌濾過によつて滅菌し、次いで最終的な容器中に充
填する。最終容器中に詰めたのちに滅菌ＩＳＧ製品を凍
結乾燥することも可能である。静脈注射用には凍結乾燥
した材料を注射前に医学的に許容しうる水に溶解する。
製品を凍結乾燥前に緊張性としない場合には、凍結乾燥
した材料を、医学的に許容しうる水と製剤を緊張性なら
しめるべき量の前記の物質の中の一つを含有する溶液中
に、溶解しなければならない。

【００４４】本発明のＩＳＧは主として静脈内投与に向
けたものであるけれども、ＩＳＧ製剤は、適当な賦形剤
を含有しているならば、筋肉内に投与することもでき
る。それ故、本発明の組成物局面は、静脈内投与に適合
する製薬学的に許容しうる水性の基剤中の本発明の静脈
注射可能なＩＳＧの溶液から成る組成物である。ＩＳＧ
は実質的に純粋である。ＩＳＧは、そのままで静脈内投
与に適しているかまたはたとえば水または前記のような
希釈剤による受容しうる濃度への希釈後に静脈内投与す
るために適している濃度、たとえば約１〜１８％溶液、
好ましくは約１〜１５％以上、更に好ましくは即座の投
与に対する約１０％、及び投与前の希剤に対しては約１
６％の濃度で、これらの溶液中に存在することができ
る。ＩＳＧは、単独で、または他の血液製剤、たとえば
全血、血漿、血漿蛋白質分屑、フイブリノーゲン、たと
えば因子ＶＩＩＩ、因子ＩＸ濃縮物などのような凝血因
子及びアルブミンと組合わせて、または一緒に、静脈内
に投与させることができる。

【００４５】その使用局面において、本発明は、通常は
人への、前記の如き製薬組成物の静脈内投与に関するも
のである。組成物は、通常のようにして、たとえば、適
切な治療量の抗体を提供する量で、投与する。１６.５
％蛋白質溶液に対しては、約１〜２５ｍｌが通常の１回
の用量である。その後の投薬は、病気の重さ及び病気へ
の暴露の時間に依存して、通常は１〜３週以内である。

【００４６】前記のように、本発明の製品は、治療のた
めに使用することができる調合薬中に混入させることが
できる。しかしながら、“調合薬”という術語は本明細
書においては広い意味で、治療目的のためばかりでな
く、この分野で公知の診断及び試薬として、たとえばワ
クチン、インターフエロンなどの生産のためのビールス
のような有機体を血漿または血漿分屑、たとえばコーン
流出液ＩＩ＋ＩＩＩ、コーン分屑ＩＶ、コーン分屑Ｖ、
その他、の上で生長させる組織培養物として、その他の
ためにも用いることができる本発明による組成物を含有
する製剤を包含することを意図する。治療用としての調
合薬は、治療量、すなわち、予防または治癒健康方策の
ために必要な量、の本発明の組成物を含有していなけれ
ばならない。調合薬を診断または試薬として用いようと
する場合は、これは診断または試薬量のかかる組成物を
含有していなければならない。同様に、組織培養物また
は培養基中で用いる場合には、培養基は望ましい生長を
達成するために十分な組成物を含有していなければなら
ない。

【００４７】本発明のガンマグロブリンは、直接的及び
潜在的の両方で、実質的に抗補体活性を有していない。

【００４８】抗体力価は、出発する未変性のガンマグロ
ブリンと著るしくは異ならない。すなわち、出発ＩＳＧ
の抗体力価に依存して、通常または高度免疫、たとえば
破傷風または狂犬病高度免疫グロブリンである。抗体分
子は、抗原と共に沈殿する能力が示すように、２価であ
る。

【００４９】本発明のＩＳＧの他の特色は、蛋白質加水
分解活性を有していないことである。ＩＳＧのいくつか
の試料は貯蔵したときに断片を生じることが知られてい
る。このような断片は、しばしばプラスミンと推定され
る汚染する酵素による蛋白質加水分解的な消化による。
断片化は溶液中の活性な抗体の量の低下を生じさせるの
で望ましくない。本発明の方法は、ＩＳＧ中の蛋白質加
水分解活性を、検出不可能な水準まで、または多くとも
痕跡の水準まで、著るしく低下させる。

【００５０】本発明の製品の第一の且つ重要な特徴は、
その安定性である。本発明の製品は、その抗体活性、単
量体含量、清澄性、抗補体活性の欠如などの顕著な変化
（たとえ変化があつたとしても）なしに、長時間にわた
つて貯蔵することができる。たとえば、本発明に従つて
製造した無菌の、最終容器中の材料は、前記の品質の顕
著な変化なしに、６ケ月を越える期間にわたつて室温で
保存することができる。

【００５１】この安定性は前記のようなｐＨとイオン強
度の調節によつて取得することができる。従来は、一方
のｐＨとイオン強度及び他方の静脈注射の間の関係は認
められていなかつた。前記のようにｐＨ４におけるガン
マグロブリンの処理は公知である。しかしながら、この
ようにして処理した材料を次いで患者への投与のため
に、約７のｐＨにもどしていた。その上、たとえば塩化
ナトリウムのような塩の添加を緊張性の取得のために使
用した。

【００５２】本発明の製品の関連する利益は、その緩衝
能力の欠如である。本発明の製品は驚くべきことにｐＨ
３.５〜５.０で投与することができる。しかしながら、
イオン強度をきわめて低い水準に低下させてあるから、
塩の存在により本質的にｐＨ３.５〜５.０に緩衝した材
料の投与において生じるような生理学的なｐＨの乱れ
は、たとえあつたとしても、きわめて僅かにすぎない。

【００５３】

【実施例】以上の例証的な実施例によつて本発明をさら
に実証する。

【００５４】実施例１コーン分別スキーム（コーンら、前記文献）からの分屑
ＩＩＩ濾液（２１００ｌ）のｐＨを、１ＮＨＣｌの添加
によつて、４.０に調節した。約４０ｌのＨＣｌを十分
に撹拌しながら１分間に１ｌ未満の速度で加えた。次い
で分屑ＩＩＩ濾液を限外濾過装置中に計り入れた。限外
濾過と透析濾過を用いて、生成物の温度を１０℃よりも
低く保ちながら、アルコールの濃度をできる限り迅速に
低下させた。冷蒸留水を用いて約３５０ｌの一定容量に
保つた。１分間当り２０ｌ程度の高い流出速度が認めら
れた。すべての分屑ＩＩＩ濾液を約５％蛋白質まで濃縮
し且つ生成物のアルコール濃度を８％よりも低く低下さ
せたのちに、冷蒸留水を用いて７容量の交換を行なつ
た。生成物の温度は２０℃程度まで変化するままにまか
せた。次いで免疫血清グロブリン溶液を８％蛋白質まで
濃縮して限外濾過装置から流し出した。透明な“水様”
の状態で１２０ｌの８％免疫血清グロブリンを回収し
た。この材料は０.００１（計算により求めた）のイオ
ン強度と４.２のｐＨを有していた。この材料の部分試
料を５％蛋白質において１０％マルトースによつて緊張
性とした。これを安定性及びその他の試験のために２５
０ｍｌのびん（６０本）中に入れた。初期の高圧液体ク
ロマトグラフイー（ＨＰＬＣ）結果は、９９％を超える
単量体濃度を示した。このロツトはＩＧＩＶに対するす
べての典型的な試験に合格した。いくつかの容器を室温
で貯蔵し、６ケ月後にＨＰＬＣは単量体濃度がなお９９
％よりも高いことを示した。

【００５５】

【表１】第１表ＨＰＬＣ単量体(９９.１％) ２量体(０.９％) ３量体(０) 空隙(０) 抗補体活性蛋白質３ｍｇ／Ｃ′Ｈ５０単位ｐＫＡ対照の１１％緩衝能力１６.２４ミリ当量／ｌ超遠心６.６Ｓ９０.８％９.８Ｓ９.２％比濁計１.５ＮＴＵ同様な部分試料を０.２Ｍの濃度までのグリシンの添加
によつて緊張性とした。

【００５６】実施例２実施例１に従つて調製した１２０ｌの８％免疫血清グロ
ブリンの部分試料（６ｌ）を１ＮＨＣｌで処理してｐＨ
４.０としたのち、凍結乾燥した。この材料に注射のた
めの水を加えて５％蛋白質濃度とした。還元した材料は
下記の特性を示した。

【００５７】

【表２】第２表ＨＰＬＣ単量体(９８.５％) ２量体(１.５％) ３量体(０) 空隙(０) 抗補体活性蛋白質３ｍｇ／Ｃ′Ｈ５０単位

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】治療有効量の免疫血清グロブリンの水溶
液から成り、該溶液は５％蛋白質濃度における溶液が１
５ＮＴＵよりも小さい比濁分析の読み、３．５〜５．０
のｐＨ及び生理学的に許容しうる張度を有するようなイ
オン強度を有することを特徴とする、安定な、無菌の、
静脈注射可能な免疫血清グロブリン製薬組成物。
【請求項２】生理学的に許容しうる張度を溶液に与え
るに充分な量で、炭水化物、糖アルコール及びアミノ酸
より成る群から選らばれる物質を包含する、特許請求の
範囲第１項記載の組成物。
【請求項３】（ａ）免疫血清グロブリンの治療有効量
を含む水溶液を生成せしめる工程、（ｂ）該溶液のｐＨを３．５〜５．０に調節する工
程、且つ（ｃ）該溶液のｐＨを３．５〜５．０に保ちながら、
溶液のイオン強度（Γ／２）を５％蛋白質濃度における
溶液が約１５ＮＴＵよりも小さい比濁分析の読みを有す
るような水準まで低下させる工程、を含んでなる静脈注射可能な免疫血清グロブリン製薬組
成物の製造方法。
【請求項４】段階（ａ）における溶液が０．５〜２０
重量％の蛋白質濃度を有する、特許請求の範囲第３項記
載の方法。
【請求項５】（ｄ）溶液に炭水化物、糖アルコール及
びアミノ酸より成る群から選らばれる物質を加えること
によって、イオン強度を上昇させることなく前記溶液を
緊張性ならしめる工程、且つ（ｅ）溶液を滅菌する工程、をさらに含んでなる特許請求の範囲第３項記載の方法。