JPS5843914A - 静注可能な免疫グロブリン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規な、静脈注射可能′な免疫血清グロブリン
から成る製薬組成物、その製造方法及び人の治療に対し
て免疫血清グロブリンを静脈注射によって投与するため
のその使用に関するものであるＯ 筋肉注射の可能なガンマグロブリン製剤は公知である。

このような製品の一つは１ノ１イノ（−テッド（カッタ
ーラボラトリーズ・インコーホレーテッド、バークレー
、カリホルニア）である。

通常の筋庄用ガンマグロプリ／製剤は、特に無ガンマグ
ロブリン血症患者においては、受は入れ難いほど商い反
応の発生のために、安全に静脈注射によって投与するこ
とはできないＯこれらの反応は明らかに、投与したガン
マグロプリ／による補体結合によって生じる血清桶体磯
度の低下を伴なう（Ｓ、　Ｂａｒａｎｄｕｍ　ら、Ｖｏ
ｘ　　Ｓａｎｇ、　　７゜１５７〜１７４（１９６２）
ｌｏ抗抗体体性呼ばれるガンマグロブリンの補体結合能
力は、特に高分子奮鴨への凝集によって、竹に分別操作
の間に生じる変性９結果として、着るしく増大する。こ
れらの凝集物の袖体結合機構は、抗原−抗体複合体にお
けるものと同一でるると考えられる（Ｄ、Ｍ。

Ｍａｒｃｕａ、　Ｊ＊　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　８４、２７
３〜２８４（１９６０））。１０（ＬＯＯＯＸ重力にお
りる超遠心によってａｌｌ集金除去するとき抹、静脈注
射に充分に耐える抗補体活性の堺い製品が得られる（　
Ｂａｒａｎｄｕｎ　　ら−前記文献）Ｏガンマグロブリ
ンを静脈注射による投与に対し工安全准もやとするため
に、多くの試みがなされている。これはすべてガンマグ
ロブリンの抗補体活性を除くことに依存している０超遠
心（＃記）は技術的に不適当であって、それによりｙ得
られる製品は貯販中に再びその抗補体活性を回復する０
ｐＨ４，０における酵素ペプシンによるガンマグロブリ
ンの処理は、分子の蛋白質加水分解的な開裂を生じさせ
て、約５８の超遠心における沈降系数を有する約１０，
０００の分子量の分解を与える（　％、Ｎｔ＠ｏｎｏｆ
ｆ　　ら、５ｃｉｅｎｃｅｓ　　１．５２．１７７０〜
１７７１（１９６０））。この残存分解は、２価の抗体
活性を保存し、且つ抗補体活性を欠いているので、静脈
注射による投与に十分に耐え且つ有効である［Ｗ、　Ｂ
ａｕｍｇａｒｔ＠Ｉｌ＋　　ＶＯＲｇａｍｇｓ　　１５
．８４（１９６７）］。けれども、未変惟のガンマグ、
ロブリンに対する１９８日と比較して、無ガンマグロブ
リン血症患者においてはいくらか長いものの、僅か１８
時間という循環半減期によって迅速に装置してしまうた
めに、得られる治療効果は受は入れ離いはと短かい持続
時間、’ｊ、！、　しているにす、＆慮い（Ｅ、Ｍ＠ｒ
ｌｅｒ　ら、Ｖｏｚ　　８ａｎ、ｇ、　１５．１０２（
１９６７）　；　Ｂ、　Ｊａｇ＊ｒ、　Ａｒｃｈ、　Ｉ
＋ａｔ＠ｒｎ、　Ｍ＠ｄ。

リ」、６０（１９６７）〕。　ベプシ／処理し九ガンマ
グロブリンの着るしい半減期の低下は、恐らくは部分的
に分子の大きさの激減によるものと思われるけれども、
ガンマグロブリンの分解代謝の速度社、ペグシンによっ
て消化たれた分子の部分の特異性に関係するという指摘
がある（　Ｊ、　Ｌ。

Ｆａｈ＠ｙ　ら、Ｊ、　Ｅｘｐ＠ｒ、　Ｍｅｄ、、　　
１１　Ｂ、１８４５〜１８６８（１？４４Ｓ））。分子
の仁の部分は、本発明においては元のままに残っている
。ペグシン処理方法のもう−りの欠点は、残存している
ペプシンが動物性のものであって、特に繰返しの投与に
おいて、抗体の生産を刺激する可能性があるという仁と
である［　Ｃ，Ｂｌａｔｒｉｘら、Ｐｒｅｓｓｓ　　Ｍ
ｅｄ。

７７．６ｓ５〜ｂｓｙ（１ｑｂｖ）〕。入間からのプラ
スミンの使用は、この間ｍを排除するととができるので
、静注用ガンーグロブリンの！１１！造の丸めの異なる
方法の基礎となる。

人のプラスミンによるガンマグロブリンの処理は、分子
量約５０，０００の３成分への開裂をもたらす（Ｊ、　
Ｔ、　Ｓｇｏｕｒｉｓ、　Ｖｏｘ　　ｇａｕｇ、　　１
３．７１（１９６７）３０十分に低濃度のプラスミンを
使用するならば、約１５％の分子が開裂するのみで、８
５チが元のままのガンマグロブリンとして残留する（　
Ｓｇｏｕｒｉｓ、上記文献）０消化されずに残る元のま
まのガンマグロブリンは、はとんど抗補体活性を示さず
、不利な反応なしに静脈内に投与することができる（　
Ｊ、　Ｈｌｍｍａｍ−ら、Ｖｅｘ　　Ｓａｍｇ。

１」−１８５（１９６７））ｏ　このようにして調製し
友材料は、試験管内及び生体内保躾活性を維持するもの
と思われるＣ　Ｆ、　Ｋ、　Ｚｉｔｚｐａｔｒｉｅｋ、
　ＶｅｘＳａｕｇ、　１３．５ｓ（１ｔ６ｙ）〕ｏ　　
この解決方法の一欠点は、ブラスミ／ｆ：完全に除去す
ることができないということである。その麩めに、材料
ｔ４℃にお゛いて貯賦するときにすら、劣化が継続する
。

ｐＨ４，０において３７℃で種々の時間にわたってガン
マグロブリンを装置すると、抗補体活性が低い水準に低
下することが認められている。この結果は、ガンマグロ
ブリン中に不純物として存在する少量の血清酵素によっ
て生じるのではない力；ということが示唆されている（
　Ｂｌａｔｒｉｘら、前記文献）。プラスミン処理した
ガンマグロブリンにおけると同様に、この＠ｐＨ４，０
ガンマグロブリン″″は貯、臀中に、子側し得ない速度
で、抗補体活性を回復することが見出されているので、
患者に投与する前に抗補体活性ｔ−醐定することが必要
でるる（Ｊ＠Ｍａ１ｇｒａｓら１Ｒａｙ、　Ｆｒａ、、
ｎｃ、　Ｔｒａｎｓ。

す、１７ｉ（ｔｐ７ｏ））。

プラスミン処理ガンマグロブリン（Ｈｉｎｍａｎら、前
記）及びｐＨ屯０ガンマグロブリン（Ｈ，Ｋｏｂｌ＠ｔ
ら、　　Ｖｅｘ　　Ｓａｎｇ、　　１３、　？！（１９
４７）　　；　　Ｊ、Ｖ。

％Ｖｃｌｌｓ　ら、＾ｕｓｔｒ、Ａ＋ａｍ、Ｍ＠ｄ、　
　　１８．２７１（１９６９）：　　Ｂａｒｍｎｄｕｎ
　ら、Ｍｏｎｏｇｒ−Ａｌｌｅｒｇｙ。

上、５９〜６０　（１９７５）　　；　　Ｂａｒａｎｄ
ｔＩｍ　ら、Ｖ（ＩＸＳａｕｇ、、７，１５７〜１７４
（１９１２））Ｉｌｉ生体内で未変性ガンマグロブリン
よりも蝮ぷい半減期を有している。たとえば、ｐＨ４０
ガンマグロプリ゛ンの通常の患者中における半減期は約
１４日（Ｋｏｂｌ＠ｔら、前記）であり、一方グラスミ
ン処環物Ｆｉ１６日（ＭＩｒｌｅｒら、前記）の半減期
を示す０ パリ゛のＣｅｎ１ｅｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　ｄ＠Ｔｒａ
ｎｓｆｕｓｉｏｎＳａｎｇｕ１ｎｅ　（Ｃ，Ｎ、　Ｔ、
　８）Ｆｉ辿択した新鮮な血漿からのガンマグロブリン
の注意深い分画と′濾過によって、低抗捕体活性を有す
る静脈内注射の可能なガンマグロブリンを生産している
（　１ｉｌａｔｒｉｘら、前記；同、Ｐｒｅｓｓｅ　　
Ｍｅｄ、　　７７、１５９〜１６１（１９６９）；　Ｍ
、５ｔｅｉｎｂｕｅｈ　ら、ＶｏｗＳａｍｇ、１土、１
ｏ５（ｔ？６７））ｏ　　これは注意して投与しなけれ
ばならず、また実際に一部の患者には反応が生じている
ことからみて、抗補体活性を完全に欠いているものとは
思われない。このような反応を排除するためには注射前
にコーチシンを与えればよいが、抗補体活性の明らかに
不完全な除去は、その広範囲にわたる使用に対しては好
ましくないものと思われる。

ガンマグロブリンのジスルフィド結合を還元したのち末
端封鎖剤と反応させることの抗補体活性に対する効果は
、既に研究されている。バランダンら（Ｓ、　Ｂａｒａ
ｎｄｕｎ、前記）はガンマグロブリンの浴液ｔ−（１２
Ｍシステアミンによって、次いでα２Ｍヨードアセトア
ミドによって処理すると、はとんど完全な抗補体活性の
喪失が生じるのに対して、システアミンまたはヨードア
セトアミド単独による処理は抗補体活性ｔ−朧著に低下
させないことを見出した。ヨードアセトアミドの毒性の
ために、これらの研究者は静脈注射可能なガンマグロブ
リンへのこＱＭ決方法を追究しなかった。

変性した免役血清グロブリンは米国特許第５．９０５，
２６２号に＾ピされている。先ず分子中の一ジスルフィ
ド結合の一部を−ＢＨ基に還元したのち、−８Ｈ基をア
ルキル化することｋよって、免疫血清グロブリンを静脈
注射可能ならしめた。反応混合物から生成物を分離した
のち、それを滅―した。このようにして得た生成物は静
脈注射が可能でｌ５Ｏ１実聚的及び潜在的な抗補体活性
の何れをも実質的に有していす、相当する未変性免疫血
清グロブリンの抗補体活性の生理学的半減期及びスペク
トルｔ＋ｍ的に有していた。

現在、いくつかの静脈注射のＢＪ能なガンマグロブリン
を米国以外で入手することができる０このような製品の
一つはフランクフルトのビオテスト社のイントラグロビ
ンである０この製品はガンマグロプリ／のベータープロ
ピオラクトン処理によって製造する（　５ｔｅｐｈａｎ
、　ＶＯ）ＣＳａｍｇ、、　　２８．４２２〜４３７（
１９７５））。この材料は、約１１８のナトリウムイオ
ンと約１２７の塩素イオンのモル濃度ｔ−Ｗしている。

その製造において使用するベータープロピオラクトンは
発ガン物質として疑われている。

別の静脈注射可能な製品線１　日本のミドリ十字社によ
って製造されている（米国特許第４．１６　ａ５０５号
）。これは、２０　Ｃ’Ｈ５０以工の抗補体　。

活性と重量でα０６〜α２６部のたとえば塩化ナトリウ
ムのような中性無機塩を有している、凍結乾燥した、天
然ガンマグロブリン製剤である〇スイスの赤十字は静脈
内投与の九めの免疫グロブリン８ＲＣｔＮしている。８
ＲＣｉ８０１１超える単量体としてのＩｇＧと比較的僅
かな副台の２量体、重合体及び開裂したＩｇ・Ｇ並びに
痕跡のＩｇムとＩｇＭｌ含有している。夏ｇＧ亜鋼の分
布社正常な血清のそれと等しい。この製品は凍結乾燥し
た形態で製造され、１単位蟲り３ｆの蛋白質、５１の庶
勧及び少量の塩化ナトリウムを含有している。＃ｉ釈吻
（１００−）はα９−の塩化ナトリウムを含有する。

グエノグロプリン（日本のミドリ十字製）Ｆｉ双ガング
ロブリンをプラスミンで処理することによって製造され
る。これもまた重量で１部のプラスミン処理ガンマグロ
ブリン当りに（１５部の蛋白質安定剤（たとえばアミノ
アセテート）管含弔゛シている■この製品は白色粉末と
して市販され、希釈剤に溶解して使用する。生成する溶
液は透明であるか、または僅かに濁っており、表４〜７
．４のｐＨを有している。

西ドイツのシュワツブによっても静脈江刺の６■能なガ
ンマグロブリンが開発されており、これに５ＱａＦ／−
の免疫グロブリン、７１１９　／　ｙｕｌのグリクン及
び１ｗｑ／−の塩化ナトリウムを含有している。

クエイノグロプリンはフランスのメリュー研究所から人
手することができる。これｌ１ｓｙの蛋白質及ヒＰＨ、
！：安定性の確保に十分なグリシン及ヒ塩化ナトリウム
を含有している凍結乾燥粉末として市販されてｈる、グ
ラスミノ処理ガ／マグロプリンである・１００−当りＣ
Ｌ９ｔの塩化、ナトリウムまた社等張性グルコースを含
有する水浴液が注射用として用いられる。

西ドイツのベーリングウェルヶＡＧＪＩＣｈｇされた米
国特許第４１６へ７６３号は、免疫グロブリン分層ｔｔ
績度の亜硫酸加水分解剤及び／または水に雌用性のリン
酸塩で処理することによって製造した、低下した補体固
定を有する静脈内投与のための免疫グロブリンに対する
もの′である◇この材料のｐＨｌｌ１□１０であり、製
品は凍結乾燥前にα８５％の塩化ナトリウムと２．５１
（重量／容１）のグリクンを含有している。

東京の量大研究所は、新規免疫グロブリン誘導体に対す
る米国特許第４．０５９．５７１号の記録の譲受は人で
ある。新規線導体を含有する静脈内投与用の水浴性組成
物ｔ−配している。この誘導体は、ガフマグロプリンの
開裂した連鎖間ジスルフィド結合のＳ−スルホン化物で
あル。

ペプシン処理した人の免疫グロブリンであるグログエニ
ンは日本の日本製薬の製品である。典型的には、上記の
製品の溶液は５０ａｙ／−のペグシン処理免疫グロブリ
ン、２．２５％Ｃ重１／ｇ量）のアミノ酢酸及びα８５
ｓ（重Ｊｌｌ／容量）の塩化ナトリウムを含有している
。

山之内製薬はグロブリンＶの販売業者であるが、これは
２２５ａｐのアミノ酢酸と８５ａｙｏ塩化ナトリウムを
含有する乾燥したペプシン処理ヒト免疫グロブリン（ｓ
　ｏ　ｏｑ）である。静脈内投与のためには、乾燥製品
を１（ｌｄの水に溶解して注射に供する。

本発明者は、免疫血清グロブリンの単量体濃度が約９０
％よりも大であり且つ広い範曲の患者に対しｉ免疫血清
グロブリンを静脈内投与できる程度に実際的及び潜在的
抗補体活性を持続するようなイオン強度及びｐＨを有す
る、変性した静脈内注射の可能な免疫血清グロブリンを
見出した。

本発明の製品は、免疫血清グロブリン（ＩＳＯ）を可溶
化して所定の蛋白質ａ度の溶液とする。

ＩＳＧの単量体含量が約９０％よりも高く且つ実際的及
び潜在的抗補体活性がＩＳＧ製品を静脈内注射可能なら
仁める程度となるような水準に、この溶液のｐＨ１１１
節し且つ溶液のイオン強度を低下さぜる◇ｐＨとイオン
強度扛、蛋白′ｊ［一度の調節、滅１、最終的な容器へ
の充填などの間、上記の水準に保つ。

本発明のＩＳＧの一利点は、静脈注射が可能であること
によって、筋肉注射に伴なう問題を排除することができ
るということである。その上、本発明の製品ｔま、還元
−アルキルずヒ、ベータープロピオラクトン処理などに
おいて生じるような化学的な変性を実質的に伴なわない
。

本発明の製品の事安な一特色は、実際的及び潜在的な抗
補体活性を実質的に有しておらず且つまた重合体状の動
画、すなわち、＠凝集物＃を実質的に含有していないと
いうことである０特に、本発明の製品は、従来の製剤よ
りも向上した安定性を示す。この材料は、その単量体含
量と実際的及び潜在的抗補１本活性の欠如を維持しつつ
、添加剤の存在なしで＆肋間にわたって室温で保存する
ことができる〇 本発明のもう一つの利点は、静脈注射の可能なＩＳＧの
物理的測定値と生理学的機能がほとんど変化しないとい
うことである。すなわち、本発明の材料の抗体力価は出
発材料と看るしくに異ならない。

好適実施形態の説明 本発明の方法のための出発材料は、未変性の人の免疫血
清グロブリンである◇不明細書中の説明及び脣許自求の
範囲中で１免疫血清グロブリン”という用語は、文献中
でガンマグロブリフ、ＩｇＧ及び免疫グロブリンＧとし
てもまた種々言及されている物質を定義する丸めに用い
る。これは、主として且つ好ましくは、少なくとも約８
５憾の、約１６１１ＬＯ００の分子量を有する；ガンマ
グロブリンの７８種から成っている０残りの部分は、約
３０へ０００の分子量を有する、９８種であることが好
ましい。標準的な免疫及び高度免疫（ｈｙｐ＠ｒｉｍａ
ｌｕｎｓ　）血清グロブリン、たとえば、破傷風、狂犬
病及び肝炎免疫血清グロブリン、の両者ｔ−使用するこ
とができるが、変性生成物は、それぞれ、免疫及び高度
免疫ＩＳＧである。すなわち、本発明の方法に対する適
当な出発材料は、コーンの分層用または分層Ｆ！１１通
物である（Ｃｏｈｎら、　Ｊａ　Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｅ
ａ、、６　Ｂ、４５９（１９４６）；０ｎｅｌｅｙ　ら
、　１ｂｉｄ、、　　７１．５４１（１９４９）参照〕
。

分ＰＰｔｌＦｉ、超遠心による研究によると、主として
１６１１０００の平均分子量ｔ−有する（約８５％）。

７ｇ（沈降系数７）種のガンマグロブリンである。

残りの蛋白質は本質的に約３０へ０００の分子量を有す
る９Ｓ材料である０湿った分層璽ペースト（固形公約３
０％）を通常のようにして凍結乾燥して乾燥１８Ｇ粉末
とし、次いでそれを溶解して１＆５−の無菌浴液として
筋肉注射用に調製する。

本発明の方法にｊｊシては、湿つ九分隋■ペース）また
は乾燥１８Ｇ粉末の何れも、適当な出発材料である＠ 本発明の方法の出発物質としては、コーン分層１まえは
分層ＩＦ液中に認められるものと本質的に同一の蛋白質
成分の組成を有する、どのような方法によって取得した
ガンマグロブリンをも使用することができる。

出発材料として鉱標準免疫血清グロブリン及び高度免疫
血清グロブリンの何れをも使用することができる。公知
のように、後者線平均母集団中に普通に見出されるより
も嬉かに高い特異性抗体に対する力価を有している選ば
れた供血者から得た血漿または血清から製造される０こ
のような供血者は、特定のワクチンによって最近免疫を
与えられ良か、さもなければ感染または疾病から最近回
復し＆４のの何れかである０これらの高力価の血清ま友
は血漿を集めて、分層厘が単離する点まで通常のコーン
分別手順を施す０現在、高度免疫血清グロブリンに対す
るビューローオグ・ビオロジックス（ＢｏＢ）抗体標準
は、筋肉内に投４すべき製品に基づいている。これらの
標準は還元したグロブリン（１〜１０−）の標準的な筋
肉内用量を投与するという仮定に基づいている。所望の
免疫学的応答を達成するために必要な抗体ゐ量は、静脈
内に投与した場合には実質的に低下するから、同一の血
清抗体力価を与える静脈内用量は筋肉内用量よりも実質
的に少ないことは明らかである。すなわち、筋肉内ＩＳ
Ｇと高度免疫血清グロブリンの用量は、同じ抗体活性の
グロブリ／を静脈内に投与するときに同一の血清抗体力
価を達成するために必要な用量よりも高くなければなら
ない。

出発する湿ったペーストまた社凍結乾燥し九粉末を一定
綾の水またはその他の生理学的に受容しうる基剤中に浴
解して、約ａ５〜２０ｓ１好ましくは約５９６の濃度の
蛋白質溶液とする０分層履のｒ液を用いる場合には、常
法によって望ましい蛋白質濃度に濃縮しなければならな
いｇこの方法においてはどのような蛋白質濃度を用いゼ
もよい０しかしながら、上記の範囲が実際的な見地から
好適である。

蛋白質を溶解また社濃縮したのち、たとえば塩酸のよう
な生理学的に受容しうる酸の添加によって、約５５〜！
ＬＯ１好ましくは約１８〜４．２のＰＨＫ調節する〇一
般に、蛋白質溶液中の単量体物質を最大に保つ点にｐＨ
’ｔｖＩ４節する。しかしながら、ｐＨはゲル化をもた
らすほど低くてはならない０温度はＩＳＧ材料に対して
有害であってはならない。良好な結果線約０〜２０℃の
温度範囲内で得られる。このように調節した材料を次の
段階前に何らかの時間にわ九って保持する必要はない０
しかしながら、所望するならは、材料を何らの悪影響な
く保存することもできる０ ｐＨの一節後に蛋白質溶液を処理して、そのイオン強度
ｔ１８Ｇ製剤の単量体含量が約９０ｇ５よりも高く、好
ましくは約９５１よりも高く、且つさらに好ましくは約
９８優よりも高くなり、且つ実際的及び着任的抗補体活
性がＩ８Ｇ製剤を静脈注射可能ならしめるようなものと
なる水準まで低下させる。そのためには、実際の抗補体
活性が約２１１ＩＩ蛋白質／Ｃ’Ｈ５０単位よりも高く
なければならない。生成物の非特異的補体結合活性は、
任意的に力価測定した補体とヘモリシン管用いて測定す
る０抗袖体活性として知られる補体結合活性はＩ　Ｃ’
Ｈ５０単位を不活性化（結合）することができる蛋白＊
ｍｍクキして記す。Ｉ　Ｃ’Ｈ５０単位は任意的に力価
測定した補体及びヘモリシン系中の補体の５ｏｑｂｔ活
性化することができる蛋白質の量として定＊−する◇ 溶液のイオン強度Ｃｒ／２）は、５−蛋白質浴液として
の製品が約１ｓＮＴＵ　（ｆｉｎ定濁定率度単位満、好
ましくは約２Ｎ？υ未満の比濁分析の読みｔ有している
ようなものでなけれｉｆ−＆らないＯイオン強度（ｒ／
２）は下式のように定義される−ここでＣゝ＝たとえば
Ｎａ％に％（：、、Ｍｇなどのような金属イオ／を包含
する 陽イオ／であり、 ｃ”＝たとえばＣｌ−１Ｂｒ−のよう１な）・ロゲンイ
オ／、酢Ｉｇ！また°社りエン酸イオンなどのようなカ
ルボ／＠イオン を包含する隘イオンであり、 ２“＝Ｃ＋の電荷であり、且つ ｚ−＝ｃ−の電荷であるＯ 前記のようなイオン強度は約ａ００１未満であることが
好ましい。上記の処理は、たとえば限外濾過、透析ｅ遇
（ｄｉａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ　）、透析などのような
標準的な方法またはそれらの組合わせによって行なうこ
とができる。たとえば適当なｐＨにおける蛋白質溶液を
少なくとも５容量の水の交換で、通常は約４〜８容量の
交換によって透析濾過して、イオン強度を少なくとも約
ａ００１に低下させる。この処理の間にペプチド及び良
とえばアルコールのようなその他の不純物の濃度もまた
、一般に痕跡１まで低下する。

上記の処理後または処理中に、ｐＨ’ｊ−測定し且つ約
１５〜５に、０の範囲内に保つ。

このように処理した材料の蛋白質濃度を、次いで、たと
えば５憾、１０−１１５−１等々というように、蝦終襞
品中で望ましい水準に調節するＯこの調節はＩＳＧに対
して有害でない通常の方法、たとえば限外１過、逆浸透
、弁傘、蒸発などによって達成される０やはり、製剤の
ｐＨに約五５〜ＳＯ１好ましくは約５８〜４．２の範囲
内に保つ。

次いでＩＳＧ製剤を緊張性（ｔｏｎｉｃ）ならしめる、
すなわぢ、それを生理学的な状態と自立するようにさせ
るため、またはそれを注射において生理学的に受容しう
るものとするために、処理する。

これに関しては、製剤のイオン強度（前記参照）を高め
ることなしに緊張性（ｇｋ度、ｔｏｎｉｅｉｔｙ　）が
得られるようにしなければならないということに注意す
ることが重要である。この目的は、ＩＳＧ製剤に一定量
の、たとえばグリシ／などのようなアミノ酸、またはマ
ルトース、デキストロース、フルクトース、などのよう
な戻水化物、あるいはたとえばマンニトール、ソルビト
ールなどのような糖アルコールまたは緊張性を与えるた
めに十分なそれらの混合物を加えることによって達成さ
れる。たとえば、Ｉ８Ｇ製剤ｆ：緊張性とするためには
、それを約１０−のマルトース（ｍａｔ／谷量に基づい
て）と混合すればよい。

上記の調節優に、通常は適当な媒体を通じる滅ＩＮＰ遺
によって＆Ｒａし、次いで最終的な容器中に充填する。

最終容器中に詰めたのちに滅ｌｌ５Ｇ製品を凍結乾燥す
ることも可能である。静脈注射用には凍結乾燥した材料
を注射前に医学的に許容しりる水に溶解する。製品を凍
結乾燥前に緊張性としない場合には、凍結乾燥し次材料
を、医学的に許容しうる水と製剤を緊張性ならしるべき
量の前記の物置の中の一つを含有する溶液中に、ｆ＃解
しなければならない。

本発明のＩＳＯは主として静脈内投与に向は友ものであ
るけれども、ＩＳＧ製剤は、適当な賦形剤を含有してい
るならば、筋肉内に投与することもできる。それ故、本
発明の組成物局面は、静脈内投与に適合する製条学的に
許容しりろ水性の基剤中の本発明の静脈注射可能なｘｓ
ａｏＨ液から成る組成物である。ｌ８ＧＦｉ実質的に純
粋である。

ＩＳＯは、そのままで静脈内投与に適しているかまたは
たとえば水または前記のような希釈剤による受容しうる
濃度への希釈後に静脈内投与するために適している濃度
、たとえは約１・〜１８−＃液、好ましくは約１〜１５
−以上、史に好ましくは即座の投与に対する約１０％、
及び投与前の希剤に対しては約１６゛−の濃度で、これ
らの溶液中に存在することができる０ＩＳＧは、単独で
、または他の血液製剤、たとえば全血、血漿、血漿蛋白
質分層、フイプリノーゲ／、たとえば因子１、因子■濃
縮物などのような凝血因子及びアルブミンと組合わせて
、または−緒に、静脈内に投与させることができる０ その使用局面において、本発明は、通常は人への、前記
の如き製条組成物の静脈内投与に関するものである。組
成物′は、通常のようにして、たとえば、適切な治療量
の抗体を提供する量で、投与する。１６５饅蛋白質溶液
に対しては、約１〜２５−が通常の１回の用量である。

その後の投薬は、病気の重さ及び病気への暴露の時間に
依存して、通常は１〜３週以内である〇 前記のように、本発明の製品は、治療のために使用する
ことができる調合薬中に混入させることができる。しか
しながら、゛調合薬“という術胎は本明細書においては
広い意味で、治療目的のためばかりでなく、この分野で
公知の診断及び試薬として、たとえばワクチン、インタ
ーフエ０７などの生産のためのビールスのような有機体
を血漿または血漿分層、たとえばコー／ｆｌｉ、出液厘
＋ｍ１コー／分屑■、コーン分層ｖ１十の他、の上で生
長させる組緘培餐物として、その他のためにも用いるこ
とができる本発明による組成物を含有する製剤を包含す
ることを意図する０治僚用としての調合薬は、治療量、
すなわち、予防または治癒健康方策の九めに必要な量、
の本発明の組成物を含有していなければならない。調合
薬を診断または試薬として用いようとする場合は、これ
は診断またＦｉ試薬量のかかる組成物を含有していなけ
ればならない。同様に、組織培養物または培養基中で用
いる場合には、培養基は望ましい生長を達成するために
十分な組成物を含有していなければならない。

本発明のガンマ−グロブリンは、直接的及び潜在的の両
方で、実質的に抗補体活性を有していないＯ 抗体力価は、出発する未変性のカンマグロブリンと著る
しくは異ならない。すなわち、出発ＩＳＯの抗体力価に
依存して、通常または高度免疫、たとえは破傷風１良は
狂犬病１％度免疫グロブリ／である０抗体分子は、抗原
と共に沈殿する能力が示すように、２１曲である。

本発明のｌ５−Ｇの他の特色は、蛋白質加水分解活性を
有していないことである。１８Ｇのいくつかの試料は貯
績したときに断片を生じることが知られている。このよ
うな断片は、しばしばプラスミ／と推定さノする汚染す
る酵素による蛋白質加水分解的な消化による。断片化は
溶液中の活性な抗体の獣の低下を生じさせるので望まし
くない。本発明の方法は、■ＳＧ中の蛋白質加水分解活
性を、検出不可能な水準葦で、または多くとも痕跡の水
準まで、著るしく低下させる。

本発明の製品の第一の且つ重要な１４Ｉｆ象は、その安
定性である。本発明の製品は、その抗体活性、単看体装
置、／ｌｌｉ澄性、抗補体活性の欠如などの拳、、′、
。

普な変化（たとえ変化があったとしても）なしに、長時
間にわたって貯賦することができる。たとえば、本発明
に従って製造した無−の、最終容器中の材料は、前記の
品質の纏着な変化なしに、６ケ月を越える期間にわたっ
て室温で保存することができる。

この安定性は前記の工うなｐＨとイオン強度の調節によ
って取得することができる。従来は、一方のｐＨとイオ
ン強度及び他方の静脈注射の間の関係は認められていな
かつ九０前記のようにｐＨ４におけるガンマグロブリン
の処理は公知である。

しかしながら、このようにして処理した材料を次いで患
者への投与のために、約７のｐＨにもどしていた０その
上、たとえば塩化す）　ＩＪウムのような塩の添加ｔ−
緊張性の取得のために使用した。

本発明の製品の関連する利益は、その緩動能力の欠如で
ある。本発明の製品は驚くべきことにｐｉｉｘｓ〜５０
て投与することができる。しかしながら、イオン強度を
きわめて低い水準に低下させであるから、塩の存在によ
り本質的にＰＨＡ５〜５０に緩衝した材料の投与におい
て生じるような生理学的なｐＨの乱れは、たとえあった
としても、きわめて僅かにすき゛ない〇 実施例 以下の例証的な実施例によって本発明をさらに実証する
。

実施例　１ コーン分別スキーム（コーンラ、前記文献）からの分＃
ＩＲｒｇ（２１００ｔ　）ノｐｎ　ｔ、　ｌＮｌｌＣｌ
の添加に工゛つて、４．０に−節し友０約４０１のＲｅ
１　を十分に攪拌しながら１分間に１Ｌ未満の速度で加
えた。次いで分層層Ｐ液ｔ＠外Ｐａｍ置中に計り入れｆ
ｃＱｍ外１遍と透析ｆ’Ａｋ用いて、生成物の温度ｆ：
１０℃よりも低く保ちながら、アルコールのａ度をでき
る＠り迅速に低下させた０冷蒸貿水會用いて約５ｓｏｔ
の一定富量に保った。

１分間尚９２０を程度の高い流出速度が認められた。す
べての分層１１液を約５９！蛋白質まで濃―し且つ生成
物のアルコール濃度全８慢よりも低く低下させたのちに
、冷蒸留水を用いて７容會の交換を行なつ九。生成物の
温度は２０℃程度まで変化するままにまかせた。次いで
免疫血清グロブリン浴液をａＳｉｊｉ白質まで濃縮して
限外Ｃ過装置から流し出した。透明な１水様”の状態で
１２０ｔの８−免疫血清グロブリンを回収した。この材
料はα０◎１（計算により求めた）のイオン強度と４．
２のｐＨを有していた。この材料の部分試料を５−蛋白
質において１０−マルトースによって緊張性とした０こ
れを安定性及びその他の試験のだめに２５０−のびん（
６０本）中に入れた。初期の高圧液体クロマト、グラフ
ィー（ＨＰＬＣ）結果は、９９１！’を超える単量体一
度を示し九〇このロットはＩＧＩＶに対するすべての典
型的な試験に合格した。いくつかの容器を室温で貯蔵し
、６ケシ７ 力抜にＨＰＬＣは単祉体護度がなお９９％よりも高いこ
とを示した。

第　１　表 ＨＰＬＣ単量体（９９，１％）　２蓋体（α９チ）５量
体（り空隙（０）抗補体活性　　　蛋白質３　ｉｗ／　
Ｃ’Ｈｓ　ｏ単位ｐＫＡ　　　　　　対照の１１チ 緩衝能力　　　　１４２４ミリ当量／を比濁ｉｔ　　　
　１．５　ＮＴ　Ｕ 同様な部分試＃＋ｉ　ｎ　２　Ｍの濃度までのグリシ／
の添加によって緊張性とした。

実施例　２ 実施例１に従って調製した１２０ｔのａＳ免疫血清グロ
ブリンの部分試料（６ｔ）をｌＮＨＣｌで処理してｐ）
１４．０としたのち、凍結乾燥した〇この材料に注射の
ための水ｔ−７Ｊｌｌ蛋て５Ｓ！白實濃度とした。還元
した材料は下記の特性を示しえ。

第２表

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ｔ　製薬学的に許容しつる基剤中の免疫血清グロブリゾ
   の溶液から成り、＃溶液は約００（８未満のイオン強度
   と約５５〜五〇のｐＨｔ−有すること１特倣とする、静
   脈投与可能な組成物。 ｌ　単量体含量が７ｔｏ−よりも大である、特許請求の
   範曲第１項記載の組成物。 工　実際的及び潜在的な抗補体活性がＩ　Ｃ’Ｈ５０単
   位当り約２ｑの蛋白質よりも大である、％計請求の範囲
   ＠１項記載の組成物。 く　免疫血清グロブリンは高度免疫血清グロプリ／であ
   る、特許請求の範囲第１積記載の組成物Ｏ五　治療量の
   免疫血清グロブリンの水浴液がら戟り、該浴液＃ｉ５優
   蛋白質濃度における浴液が１５ＮＴＵよりも小さい比濁
   分析の読み、約４５〜！ＬＯのｐＨ及び生理学的に許容
   しうる張度１有するようなイオン強度ｔ！することｔ−
   ％黴とする、安定な、無菌の、静脈注射可能な製薬組成
   物。 ＆　生理学的に許容しうる強度を溶液に与えるに充分な
   蒙で、炭水化物、拗アルコール及びアミノ酸より成る群
   から遺らはれる物質を特徴する特許請求の軛西第５項記
   載の組成物。 ７、　（ａ）　　免疫血清グロブリンの溶液を生成せし
   め、（ｂ）　　該浴液のｐａｌに約４５〜５−０に調節
   し、且つ （ｃ）　　該溶液のｐＨをめ五５〜＆０に保ちながら、
   溶液のイオン強度Ｃｒ／２）を５９６蛋白質ａＩ度にお
   ける溶液が約１５ＮＴＵよりも小さい比濁分析の読み４
   ４するような水準まで低下させるぺ〈処理する、 ことヲ待錐とする、免疫血清グ關プリンを靜脈江射可能
   ならしめる丸めの処理方法。 ａ　段階（ａ）における溶液が約α５〜２０重′ｌｔｓ
   の蛋白質濃度を有する、特許請求の範曲第７項記載の方
   法。 ９（ｄ）溶液に炭水化物、槍アルコール及びアミノａＩ
   ！より成る群から選らばれる物質をカロえることによっ
   て、それを緊張性ならしめるべくに処理し、且つ （・）溶液を滅−する、 段階をさらに包含する、特許請求の組曲第７墳記載の方
   法。 １α水溶液にしたとき、約５５〜５．０のｐＨ，５−蛋
   白質濃度における溶液が約１５ＮＴＵよりも小さい比濁
   分析の読みを有するようなイオン強度（ｒ／２　）およ
   び約５５〜５００ｐＨｔ有する免疫血清グロブ゛リンか
   ら成ることｔ−％畝とする、乾燥組成物。