JPH07501539A - Ｎ，ｎ’−ジアセチルシスチンの有機塩 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 Ｎ、Ｎ’−ジアセチルシスチンの有機塩発明の分野 本発明は免疫調節活性を有するＮ、　Ｎ’−ジアセチルシスチン（以下ＤｉＮＡ ｃと称する）の有機塩並びに該塩をベースとする医薬組成物およびそれらの薬理 学的使用方法に関する。本発明は特に免疫系における欠損が指摘されている疾患 の治療に有用な、無毒性有機陽イオン含有の結晶性、非吸湿性かつ化学安定性の 塩を得る方法に関する。

背景技術 Ｎ−アセチル−し−システィンは、慢性の閉塞性疾患および慢性の気管支炎に対 する治療剤として慣例的に使用されているよく知られた化合物である。最初の特 許は１９６４年に出願されたけれども（ＧＢ９５４２６８）　、該化合物の作用 機序はこれまでに確立されていない。最近、Ｎ−アセチル−■７−システィンす なわちＬ−ＤｉＮＡｃの対応するジスルフィドが強力な免疫刺激剤として作用し くスエーデン特許出願Ｎｏ、　ＳＥ　９００２０６７−８号）、例えば現行の免 疫刺激剤であるナトリウムジエチルジチオカルバメートまたは２．２′−ジチオ ビスエタノールに匹敵しうる活性を示すことが発見された。

ＤｉＮＡｃの製造経路はいくつかの特許（米国特許Ｎｏ、　４．８２７．０＋６ ．４、７２４．２３９および４．７０ｇ、　９６５、ヨーロッパ特許Ｎｏ、　３ ００１００並びにドイツ特許Ｎｏ、　２３２６４４４）に報告されている。しか し、ＤｉＮＡｃは非結晶性かつ吸湿性であり、そのために単離することおよび医 薬組成物に処方することが困難であって、その投与は通常水溶液の形態において のみである。無機または有機陽イオンによるＤｊＮＡｃの大部分の塩は遊離ジ酸 に関するのと同一の好ましくない物理的性質を有する。その他の硫黄含有アミノ 酸の塩の例は特許文献（米国特許Ｎｏ、　３．６４１．８３４、日本特許Ｎｏ、 　５６１５５２９８およびフランス特１ｎＮｏ、　ｌ１ｔ１０６５９２）に記載 されている。

発明の開示 本発明者等は意外なことに有機塩基によるＤｉＮＡｃのいくつかの塩が、その単 離および該塩の固形形態での処方を可能ならしめかつそれらを固形形態での吸入 により投与されつるようにし、あるいはその他の乾燥製剤において臨床的に当然 望ましい非吸湿性および結晶性の好ましい組合せを示すということを見出した。

本発明は式１ａまたは■ｂ： または （式中Ｒ４およびＲ２Ｊはそれぞれモノ−またはジプロトン化有機アミンである ）を有するＤｉＮＡｃの有機塩を提供する。有機アミンはりジニウム、エチレン ジアミニウム、Ｎ、Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミニウム、Ｎ−ベンジル−２ −フェニルエチルアミニウム、ピペラジニウムおよび１−アダマンタンアミニウ ムから選択される。

リジニウムはそのＤ−またはＬ−型で存在しつる。最も好ましいのは■７−型で ある。

本発明は水和塩および例えば低級アルカノールで溶媒和されるような溶媒和塩を 包含する。本発明はＤｉＮＡｃの塩をその個々の異性体すなわちＤ−１■、−お よびメソ−型並びにそのラセミ型で包含する。

本発明者等は、本発明の新規塩がＤｉＮＡｃの免疫調節活性を保持しつつ易結晶 化性、非吸湿性および化学安定性の要件をみたし、それ故に医薬的に有用である ということを見出した。

すなわち、本発明は免疫応答のエネルギーもしくは異所性の免疫応答または無効 な宿主防御が疑われつる疾患の治療に有利な性質をもつ化合物を提供する。この ような疾患の例としては慢性気管支炎があり、それは従来、免疫応答調節剤例え ばビオスチム（Ｉｌｉｏｓｔｉｍ）（Ｒａｄｅｍｅｃｋｅｒ、　Ｍ、　ｅｔ　ａ ｌ、　Ｉｍｔ、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃ、　１０．９１３−９１７ ゜１９８８：　５ｃｈｅｆｆｅｒ、　Ｊ、　ｅｔ　ａｔ、＾ｒｚｎｅｉｔ　Ｆｏ ｒｓｃｈ／Ｄｒｕｇ　Ｒｅｓ、　４１゜１１１１５８２０、１９９１）、リポム ニル（Ｒｉｂｏｍｕｎｙｌ）およびブロンコバクソム（ＢｒｏｎｃｈｏＶａｘｏ ｍ）　（Ｐａｕｐｅ、　Ｊ、　Ｒｅ５ｐｉｒａｔｉｏｎ　５８．１５０−１５４ ．１９９１）並びにＮ−アセチルシスティン（Ｂｅｒｇｓｔｒａｎｄ、　ＩＩ、 　ｅｔ　ａｌ、Ｊ、　ＦｒｅｅＲａｄｉｃ、　Ｂｊｏｌ、　Ｍｃｄ、　２．１１ ９−１２７．１９８６参照）を用いた場合に病状再燃率の減少が報告されている 。

また、このような疾患にはある種の形態の悪性腫瘍疾患がある。

すなわち、世界中の多くのリサーチ研究所が種々の形態の悪性腫瘍を有する患者 の免疫応答を刺激する方法を見出すことを目的としており、そして文献中の多く の論文がこのアプローチを取扱っている（ＳＬｅｖｅｎｓｏｎ、　Ｆ、に、　Ｆ ＡＳＥＢ　Ｊ５：　２２５０−２２５７．１９９１）。−例を挙げれば、頭蓋的 腫瘍（神経原種）の、中古はおそら＜　ＩＬ−２の分泌欠損並びに該患者のＴ細 胞におけるＩＬ−２レセプターの発現によると思われる免疫性の顕著な減少を示 す（Ｒｏｓｚｍａｎ、　Ｔ、　ｅｔ　ａｌ、　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　Ｔｏｄａ ｙ　１２゜３７０３７４、１９９１）。さらに、黒色腫および結腸癌の免疫療法 における有意なアジュバント作用は免疫刺激剤レバミゾール（Ｌｅｖａ■１ｓｏ ｌｅ）について報告されており（Ｖａｎ　ｆａｕｗｅ、　Ｊ、　ａｎｄ　Ｊａｎ ｓｓｅｎ、　Ｐ、＾、Ｊ、　Ｉｎｔ。

ＩＩＩｌｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃ、　１３．３−９．１９９１）そしてルー２　 ｉｎ　ｖｉｖｏによる免疫療法またはＩＬ−２ｅｘ　ｖｉｖｏによる患者のリン ホカイン賦活化キラー細胞の治療は選択された患者において癌の緩解を生起させ た（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ。

Ｓ、＾、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　Ｔｏｄａｙ　９．　５８−、　１９８８）。該 化合物■が有利な効果をもつものと期待されうる悪性腫瘍の例としては間充織器 官の腫瘍例えば繊維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫もしくはを索 肉腫のような肉腫、例えば血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、滑液肉腫もしく は中皮肉腫のような肉腫、例えば顆粒性白血球性白血病、単球性白血病、リンパ 球性白血病、悪性リンパ腫、形質細胞腫、細網細胞肉腫もしくはホジキンス病の ような肉腫、例えば平滑筋肉腫もしくは横絞筋肉腫のような肉腫、上皮器官の腫 瘍（癌）例えば扁平細胞癌、基底細胞癌、汗腺癌、内脂腺癌、腺癌、乳頭癌、乳 頭腺癌、のう胞腺癌、髄癌、未分化癌、気管支原性癌、黒色腫、腎細胞癌、肝癌 −肝細胞癌、胆汁胃癌−胆管癌、移行型白血球細胞癌、絢毛癌、セモノーマ（ｓ ｅｍｏｎｏｎ＋ａ）もしくは胚芽癌、中枢神経系の腫瘍例えば神経原種、髄膜腫 、髄芽腫、シュワン細胞腫もしくは上衣腫を挙げることができる。

さらに、該化合物はまた例えばレバミゾールのような免疫刺激剤での治療によっ て臨床改善が従来より報告されているヘルペス、アフタ口内炎および微小病変症 候群のような慢性感染症並びに免疫刺激剤例えばビオスチム（Ｂｉｏｓｔｉｍ） 、ブロンコーバソクソム（Ｂｒｏｎｃｈｏ−Ｖａｘｏｍ）およびリボムニイ（Ｒ ｉｂｏｍｕｎｙ）での治療で改善される尿路または耳、鼻もしくは喉におけるそ の他の慢性炎症疾患または旧Ｖ感染症もしくはＡＩＤＳの治療のために有利な性 質も有している。

さらに、免疫応答の障害、欠損または不均衡もまた、例えばアトピー性皮膚炎、 鼻炎および喘息のようなアトピー性疾患に存在することが自明のこととして仮定 されている（ＫａＬｚ、Ｄ、　ＩＩ、　Ｔｒａｎｓ−ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　Ｒ ｅｖｉｅｗｓ　４１．７７−１０８．　１９７７）　ａ理論的考察によれば免疫 応答の刺激が、不均衡および自己免疫性を回（ｙさせる最良方法であろうと示唆 されるので（ｖａｒｅｌａ、Ｆ、Ｊ、ａｎｄ　Ｃｏｕｔｉｎｈｏ、＾。

１ｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　Ｔｏｄａｙ　１２．１５９−１６６、１９９１）、該化 合物はまた喘息、鼻炎、アトピー性皮膚炎および自己免疫疾患例えば非肥満性糖 尿病、全身性狼癒紅斑、硬皮症、ショーグレン症候群、皮膚筋炎または多発性硬 化症、リウマチ性関節炎および乾癖症の治療のために有利な性質を有することも 予想されうる。

さらに、該化合物はその免疫刺激性質の故にワクチン製剤の種々の形態でのアジ ュバントとして有利な性質を有することが予想されうる。

最後に、該化合物はアテローム性動脈硬化症において推定される炎症過程に影響 を及ぼすかまたは及ぼさないにしろ、アテローム性動脈硬化症の治療のために有 利な性質を有することが予想されうる（Ｈａｎｓｓｏｎ、　Ｇ、に、　ｅｔ　ａ ｌ、　Ｐｒｏ、　Ｎａｔ、＾ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳ八へ８．１０５３０゜１ ９９１）。

腫瘍増殖における免疫刺激性薬物の重要性は本発明者等による関連腫瘍増殖試験 系で説明される。後記の実験ラットの腫瘍モデルは、十分に立証されている免疫 刺激性薬物レバミゾールとの比較において本発明化合物の腫瘍抑制効力を非常に よく示しかつそれらは急速に増殖する腫瘍、乳癌および徐々に進行増殖する腫瘍 、神経原種を非常によく臨床的に示しており、両系において該薬物は腫瘍増殖に 対する優れた抑制効果を有している。

本発明化合物での治療に特に適しているのは悪性腫瘍例えば黒色腫、乳癌、胃腸 癌、神経原種、膀胱癌並びに首および頭部領域の扁平細胞癌；感染症例えば慢性 気管支炎、肝炎、感染後エネルギー並びにＡＩＤＳのような後天性免疫不全症： 外傷後の免疫学的エネルギー；並びに例えばリウマチ性関節炎、多発性硬化症お よび乾癖症のような自己免疫疾患と思われているような該疾患である。

前記疾患の治療に対する有効投与量は１日当たり０．１〜１００ｗｇ好ましくは １．０〜６０叩である。

製造方法 式！ａおよびＩｂの有機塩は一般的に、ＤｉＮＡｃおよび前述の定義を有する有 機塩基をそれぞれ溶媒または溶媒混合物中に溶解または分散して混合することに よって製造される。例えば水、アルコール、グリコール、ケトン、アミド、スル ホキシドもしくはその他の極性溶媒のような溶媒または溶媒混合物を使用するこ とができる。塩は反応混合物から直接沈殿するかまたは比較的極性の小さな溶媒 の添加もしくは蒸発もしくは凍結乾燥により得られるかのいずれかである。反応 は媒質中の溶解性によるが、高められた温度または室温において遂行される。別 法として、塩は水性またはアルコール性溶液中で適当なＮ−アセチルシスティン を酸化し次いで前記のように沈殿させることによって製造されつる。この酸化は 例えば過酸化水素またはハロゲンを用いて化学的にあるいは電気化学的に遂行さ れつる。

本発明によれば式１ａおよびＩｂの化合物は医薬的に許容しうる担体を用いるか または用いないで、吸入投与用並びにその他の経路例えば経口もしくは局所的投 与用に処方されうる。

この物質は加圧、計量投与用吸入器、乾燥粉末用吸入器例えばＴｕｒｂｕｈａｌ ｅｒ＠またはゼラチン、プラスチックもしくはその他のカプセルを用いる乾燥粉 末用吸入器から吸入されつる。この粉状物質には無毒性および化学的に不活性な 物質例えばラクトース、トレハロース、マンニトールまたはグルコースを加える ことができる。

この物質はまたカプセルまたは錠剤の形態で経口投与することもでき、その際該 カプセル、錠剤または活性物質それ自体はコーティングされてもよいしまたはコ ーティングされなくてもよい。このコーティングは例えば、イソプロパツールま たはその他の適当な溶媒中に溶解したヒドロキシプロピルセルロースおよびエー ロシルからなることができる。所望の物理的または薬学的性質を得るために、こ の粉末状物質に無毒性および化学的に不活性な物質を加えることができる。

また、これら新規化合物の非経口投与も可能である。

薬理学的実験 化合物ジーし一すジニウムーＮ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−ンスチネート（Ｉａ ；Ｒ＝リジン）が免疫応答を調節しつる能力は、マウスでの動物遅延型過敏症（ ＤＴｌｌ）試験におけるその効力によって説明される。

体重が１８〜２０ｇの、Ｂｏｍｈｏｌ　ｔｓｇａａｒｄ社（デンマーク）から得 られる雄と雌の両Ｂａ１ｂ／ｃマウスを用いた。４−エトキシメチレン−２＝フ ェニルオキサゾリン−５−オン（Ｏｘ＾）はＢＤＩ＋　（英国）から購入し、こ の試験で抗原として利用した。

０８目（Ｄａｙ　Ｏ）にマウスの剃った腹部の上皮に３％Ｏｘ＾を含有する無水 エタノール−アセトン（３：１）溶液１５０１１７７を投与してマウスを感作さ せた。感作直後にジスルフィド塩またはビヒクル（０，９％ＮａＣｊりによる処 置を経口投与により開始し次いで６日日（Ｄａｙ　６）まで１日に１回その処置 を続けた。感作後７日経過後（Ｄａｙ　６）に、全てのマウスの両耳の両側に落 花生油中に溶解した１％ＯＸ＾２０ａｌを局所投与することにより該耳を攻撃し た。オデイテストスプリングカリパス（Ｏｄｉｔｅｓｔ　ｓｐｒｉｎｇ　ｃａｌ ｌｉｐｅｒ）を用いて攻撃の前および２４時間後または４８時間後に耳の厚さを 測定した。攻撃および測定は軽いベンドパルビタール麻酔の下で遂行した。

ＤＴＩ＋反応の強度は式Ｔｔ２４／４１−　Ｔｔｏｊｌ１１’位（ここでｔｏ、 　＋２４および１４８は個々の試験（Ｔ）における攻撃の前および２４時間後ま たは４８時間後のそれぞれの耳の厚さを示す）によって表示された。結果は平均 ±Ｓ、Ｅ、Ｍ、とじて表示された。各グループの平均における有意性のレベルは ステニープント両側を一検定により得られた。表１および表２には代表実験から の２４時間および４８時間後に関するそれぞれの測定値から得られた結果が示さ れている。化合物の免疫刺激効力は対照と比較した耳の摩さの増加における有意 差で表されている。

例えば、処置済みの動物において２４時間後にはその応答は対照動物の応答の約 ２倍であった（８ｕに対して１５ｊｓ＋、表１参照）。

表　１ ジー■７−リジニウムーＮ、　Ｎ’−ジアセチル−■、−シスチネートまたはビ ヒクル（ＮａＣ／）の指定没与暇で処置した動物への攻撃の２４時間後における 耳の厚さ ＮａＣ／　１０　８，２５　０．５６ ０．０３　１０　１５．００　０．４２　零＊本３．０　１０　１５．８０　０ ．７７　零重重木零零Ｐく０．００１ 表　２ ジーＬ−リンニウム−Ｎ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチネートまたはビヒク ル（ＮａＣ／）の指定投与量で処置した動物への攻撃の４８時間後における耳の 厚さ ＮａＣ１！１０　８．８３　０．３１ ０．０３　＋０　１２．５５　０．４１　零木木３．０　１０　＋３．２０　０ ．２８　零零零零零零１フ＜０．００１ 同一の供試化合物（Ｉａ、Ｒ＝リジン）が腫瘍情意ラットの生存を延長または増 加させ得る能力は、ラットての腫瘍接種による２つの相異なる実験により説明さ れる。

Ｗｉｓｔａｒ　Ｆｕｒｔｈ種ラット１０匹からそれぞれ成る２つのグループにラ ット１匹当たり１０４個の乳癌細胞を皮下接種し、腫瘍の大きさを１週間に２回 測定した。一方のグループではラットは普通の水を飲んでいたが、他方のグルー プでは１日につき動物重量１ｋｑ当たり０．０３Ｉ１モルの投与量が得られるよ うに、水中に溶解した供試化合物を摂取していた。３８日後に、水を飲んでいた グループのうち１匹の動物はまだ生きていたが、一方該化合物が与えられたグル ープでは７匹の動物が生きていた。

別の実験においてＬｅｗｉｓ種ラット１０匹からそれぞれ成る３つのグループに ラット１匹当たり１０６個の神経膠腫細胞を皮下接種し、腫瘍の大きさを１週間 に２回測定した。一つのグループではラットは普通の水を飲んでおり、第２のグ ループでは１日につき動物重量１ｈｇ当たり０．０３μモルの投与量が得られる ように、水中に溶解した供試化合物を摂取しそして第３グループではう・ソトは また１１］につき動物体重１ｈｑ当たり０．０３／Ｚモルの投与量でのよく知ら れた癌治療薬であるレバミゾール（１，ｅｖａｍｉｓｏｌｅ）を含有する水を飲 んでいた。１１９日後に、水を飲んていたグループでは生存ラットは全くいなか った。

１１９日後に、供試化合物が投与されたグループでは６匹のう１．トが生存して おり、一方しバミソール摂取グループでは３匹のラットが生存していた。

腫瘍に関する両実験において腫瘍ポジティブ（ｐｏｓｉｔｉｖｅ）動物の頻度は より低くなり、また両実験において水中に溶解した該化合物を摂取するグループ では生長する腫瘍の腫瘍増殖阻止がみられた。

別の実験において５ＣＩＤマウス〔免疫欠損の重度合併免疫不全疾患（Ｓｅｖｅ ｒｅ　Ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｊｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　Ｄｉｓｅａｓｅ ）を有する７９２１８匹からそれぞれ成る２つのグループに２本１０３個の乳癌 細胞を接種し、増殖を１週間に２回測定した。一方のグループではマウスは普通 の水を飲んでおり、第２グループでは１日につき動物重量１−ｋｑ当たり０．０ ３μモルの投与量が得られるように水中に溶解した供試化合物を摂取した。これ らのグループ間には増殖率および発病率に関して有意な差は全くなかった。これ より該化合物は、腫瘍細胞に対する直接作用を有するのではなくて免疫器官を介 して作用するということが指摘される。

狼痢すなわち実験用のネズミの全身性狼癒紅斑（ＳＬＥ）罹患の動物モデルにお いて、ＭＲＬ　ｌｐｒ／ｌｐｒマウスは同時にリンパ性増殖、皮膚炎、関節炎お よび糸球体腎炎を発現させる。この狼瘉罹患ネズミモデルにおいて蛋白尿および 血尿症としての糸球体腎炎に及ぼすジーＬ−リジニウムーＮ、　Ｎ’−ジアセチ ル−１７−シスチネートの効果およびまた動物の生存率を調べた。ジーし一すジ ニウムーＮ、　Ｎ’−ジアセチル−■、−シスチネー１・を飲料水中に入れ次い で平均投与量を０．０３μモル／ｋｑ／口になるように計算した。対照マウスは 水道の水を摂取した。両グループは飲料水を自由に摂取した。動物が８週令に達 した時に処置を開始し、次いで死ぬまでまたは４６週令まで継続し、調査を終了 させた。

蛋白尿および血尿の評価は試薬片（Ｅｏｕｒ−ＴｅｓＬ＊、　Ｂｏｅｈｒｉｎｇ ｅｒ社製、Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を用いて遂？テした。

ジーＬ−リンニウム−Ｎ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチネートを投与すると 生存率は対照マウスに比べて有意に改善された。未処置グループ（２１匹の動物 ）の死亡率は約２５退会で５０％に達した。ジーし一すジニウムーＮ、　Ｎ’− ジアセチル−Ｌ−シスチネート処置のＭＲＬ　−Ｉｐｒ／ｌｐｒマウス（１２匹 の動物）の場合には４４週まで一１４記死亡率は達成されなかった。

またこの処置形態は未処理グループと比較した場合、試薬片の任意単位として測 定される蛋白尿および血尿の双方に対する評点を有意に改善した。

これらの結果は、本発明化合物の免疫調節効力、特にＳｌ、Ｅに関する効力を示 している。

実施例 製剤 以下に、局所および全身投与の種々の方法に適用される製剤の代表例を説明する 。

例１　吸入用の加圧エーロゾル エーロゾル系は、計量される各投与量が０．１〜１．０１９であるように調製さ れる。

化合物１ａまたはＩｂ、微粉化状　１．０％ｗ、／ｖソルビクントリオレート　 ０．７％Ｗ／冒トリクロロモノフルオロメタン　２４４％Ｖ／Ｖジクロロテトラ フルオロエタン　２４４％Ｗ／Ｗジクロロジフルオロメタン　４９５％Ｗ／Ｗ例 ２　純粋物質吸入用の粉末エーロゾル純粋物質はＴｕｒｂｕｈａｌｅｒからの吸 入用に調製される。各単−の投与量は０．１〜１．０１１９を含有する。

化合物１ａまたはｒｂ、調製済み　０．１〜１．０１９例３　吸入用の粉末エー ロゾル 各単−の投与量はカプセル中に０．１＝１．０１９を含有する。

化合物Ｉ、微微粉状状　１．０〜１．０慮りラクトース　５０ｍｇ 例４　噴霧圧の溶液 この溶液は１．０〜Ｉ０．０＋＋ｇ／＋＋１を含有し１〜３勇ｌがｌ１ｌ−没与 蹟で投与されつる。

化合物［１，０〜１０．０■９ 注射用蒸留水　を加えて１．Ｏｄにする。

例５　錠剤 各錠剤は 化合物１　０．１−１００ク トウモロコンデンブン　５０票９ ラクトース　１５０ク ポリビドン　了り 微結晶ヤｌセルロース　２０−９ ステアリン酸マグネシウム　’１ｍｇを含有する。

例６　経１」溶液 ｌＱｗ／の甲−没”：、ｍはＩＱ−ｌＯＴｏｖを含有する。

化合物！　１〜１０■ク ソルビトール７ グリセロール　１００翼９ 安、１香酸ナトリウム　Ｉ１１９ フレーバー　−Ｉ分量 精製水　を加えて１．０＋＋ｉ’にする。

例７　徐放性錠剤 錠剤１飼は 化合物１　１〜１００＋＋９ バラフインスベンヤル（ｒａｒａ［ｉｎ　１４５ＮｇＳｐｃｃｉａｌ） ラクトース粉末　５０＠９ コロイド性二酸化珪素　５厘９ エチルセルロース１０　ｃｐｓ　１３吋エタノール９９．　５ｖｏ１％　８５肩 ９ステアリン酸マグネシウム　２．　５ｍｇからなる。

例８　徐放性顆粒 顆粒１ｇは 化合物■　１〜１００璽９ 工チルセルロース分散液　１０Ｍｇ アセチルトリブチルシトレート　０．５ｕＥｕｄｒａｇｉＬ　Ｌｌｏｏ−５５　 ５５ｍｇトリエチルントレート　５厘。

タルク　３０吋 新しく蒸留した水　３５０禦ｑ 中性ベレント　を加えて１０００■９からなる。

例９　注射溶液 単一投与量のＩｊ／は１．０〜ｔｏ．　ｏｗｑを含有する。

化合物１ａまたはＩ　ｂ　１．０　〜１０．（１ｗｖ塩化ナトリウム　８．９〜 ７，７り 注射用蒸留水　を加えて　１．Ｏｍｌにする。

化合物１　０．１〜１吋 ホワイトソフトパラフィン　７５Ｉ９ 液ｆ本パラフィン　１０層９ セトステアリルアルコール　７５請リ セトマクロゴル１０００　２０麿９ メタシン　０．３ｓ＋ｇ プロパジン　０．２ｍＶ 精製水　を加えて１゜Ｏｇからなる。

例１１　局所用軟膏 軟膏１ｇは 化合物１　１．０〜１肩９ 液体パラフィン　１５０＋＋ｇ ホワイトソフトパラフィン　を加えて１．０９からなる。

例１２　眼病用溶液 ２滴の１回投与量は０．０１〜０．１１９の化合物Ｉを含有する。

化合物１　０．１＝１＋＋ｗ ベンズアルコニウムクロリド　０．１１１９塩化ナトリウム　９．０叩 滅閑水　を加えてＩ、　Ｏｗｌにする。

ジーＬ−リジニウムーＮ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチネー）（Ｉａ；Ｒ＝ 　１１２Ｎ（Ｃ００１１）Ｃ１ｌ（ＣＩｌｚ）　５ＮＨｓ　）　：Ｎ−アセチル −し−システィン（２２モル、　３．５９＆ｓ＋）を脱イオン水２．６Ｌ中に溶 解した。水中の水酸化ナトリウム（２２モル、　１．９２Ｌｇ）を撹拌下、温度 を２０℃より低く保ちながら加えた。温度を５℃に調整後、過酸化水素（１１， ０モル、　０．９５Ｌ）を９０分かけて慎重に滴加した。

この添加中、温度は１０℃を越えないようにした。得られた溶液に活性化された 強酸性陽イオン交換体９Ｌを加えた。１０分間撹拌後にｐＨは２．０であった。

次いでイオン交換体を濾去した。純粋物質から製造した標準を用いたＩＩＰＬＣ により測定したところ、その濾液は９．６５モルのＮ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ −シスチンを含有した。この粗溶液にＬ−リジン（１９，３モル、　３．１７６ ｇ）を加えた。得られた濃溶液を、結晶性ジーＬ−リジニウム−Ｎ、　Ｎ’−ジ アセチル−Ｌ−シスチネート０．２３ｋｇを含有する還流エタノール５０■７に ゆっくりと加えた。添加後、スラリーを冷却させ、結晶を濾去した。エタノール （８Ｌ）で洗浄し次いで１２時間乾燥（真空、４０℃）すると標記物質５．３６ ｈｑ　（９０％）が白色の結晶性固形物として得られた。

物理的データ：　Ｎｐ　２１０℃（ｄｅｃ）。（Ｃ１，２ａ＝　７０°（ｃ＝０ ．５４．　ＨｔＯ）。

’ＩＩ−ＮＩＩＲ（Ｄ、Ｏ）δ：　ｔ、３６−１．６０［４１１，ｍ、　Ｌｙｓ ７ＣＩＩｔ］、　１．７３［４１１，ｐ。

ＬｙｓδＣｔ１２］、１．８４−１．９６［４１１，ｑ、Ｌｙｓ７１？ＣＩ！、 ）、２．０５（６１１，ｓ、Ｃｌ１ｓゴ。

２．９５（２１１，ｄｄ、Ｃｌ１２３）、３．０２（４亀　ｔ、ＬｙｓＥＣＩＩ 、）、３．２５［２１１，ｄｄ。

ＣｌＩ２３］、　３．７６（２１１，ｔ、　ＬｙｓαＣｌ１）、　４．５０（２ ＋１．　ｄｄ、　ＣＩＩＮＩ。”Ｃ−ＮＩＩＲ（Ｄ、０δ：　２４．２７；　２ ４．８０：　２９．２４：　３２．７２；　４１．８９；　４２．７８；　５２ ．９６：　５７．３０：１７６．５３：　１７７．４１；１７９．７４゜元素分 析値：　Ｃ２２１１４４０＋。Ｎ、Ｓ、としての計算値Ｃ：　４２．８．１＋・ ７．２．　Ｎ：１３．６　実測値Ｃ：４２．６．　ＴＩニア、４．　Ｎ：１３． ７；　ＭＳ　ｍ／ｚ＝３２５（ＩＩＩ”）、ｍ／ｚ＝４７１（ＭＬｙｓ１１’） 、＋ｓ／ｚ＝６１７（ＭＬｙｓ２１１’）。

例１４ エチレンジアミニウム−Ｎ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチネート（Ｉ　ｂ　 ；　Ｒ＝　ＩｈＮＣ１１□ＣＩｌ、ＮＨ３）　：水２０Ｍ１中に溶解したＮ、　 Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチン（３０，９ミリモル、］Ｏｇ）にエチレンジア ミン（６１，８ミリモル、３．７３ｇ）およびエタノール（３０＋＋１）を加え た。この溶液を濃縮して濃ペーストを得、それをエタノール８０ＨＩ中に再溶解 した。１０℃で２時間撹拌後に結晶得られた。

物理的データ：　ｉｌｐ　１ｇ５．２−１９２．４℃。ＩＨ−ＮＭＲ（Ｃ２０） δ：　２．０６［６１１，ｓ。

ＣＨｓ〕、　２．９６［２１１，ｄｄ、　Ｃ１１２Ｓ）、　３．２６（２１１， ｄｄ、　Ｃｌ１２３）、　３．２８（４１１，ｓ。

Ｈ，Ｎ’Ｃ１１２Ｃ１１２Ｎ’Ｈ３）、４．５０（２＋１．　ｄｄ、ＣＩＩＮ） 　。　盲３Ｃ−ＮＭＩ？　（Ｄ　２０）　δ・　２４．７８G ３９．９９；　４２．７４：　５６．９８；　１７６．５５；　１７９．８２゜ 元素分析値：計算値Ｃ：３７．５．　ｌｌ：６．３．　Ｎ：Ｉ４．６．　Ｓ：　 １６．７　実測値Ｃ：３７．３．１１：６．８．　Ｎ＋１５．３；　Ｓ：　１５ ．２゜ＭＳ　ｍ／ｚ＝３８５　（Ｍ（Ｈ２ＮＣＩＩ、Ｃ１１２ＮＲ，）Ｉ＋’〕 。

例１５ Ｎ、　Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミニウム−Ｎ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ− シスチネート（Ｉ　ｂ　：　Ｒ＝ｒ’ｈＣＩＩ□Ｎｉｌ　２Ｃ１１２ＣＩＩ□Ｎ ｌｌ、ＣＩｌ、Ｉ’ｈ）水中に溶解したＮ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチン （ロアミリモル。

２１．８９）の６３％溶液にＮ、　Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン（ロアミ リモル、　１６．０９）を加えた。発熱反応により若干油性の生成物が得られ、 それを水から再結晶して標記物質１２．０ｇ（３２％）を白色の針状結晶として 得た。

物理的データ：　Ｎｐ　１６３．８−１６５．３℃。’ＩＩ−ＮＭＲ（０２０） δ：　２．０４［６Ｈ，ｓ。

ＣＨ２Ｆ、２．９３（２１１，ｄｄ、　Ｃｌ１２３）、　３．２２（２１１，ｄ ｄ、　Ｃ１１２３）、３．４４［４１１，ｓ。

ＣＨ２ＮＢｎ１．４．２７（４１１，ｓ、　ＰｈＣＩＩ、Ｎ］、　４．４７［２ １１，ｄｄ、　ＣＩＩＮＩ、　７．４４−７．５４（Ｌｏｌｌ、　ｍ、Ｐｈ’Ｊ 。’　３Ｃ−ＮＭＲ（Ｃ２０）δ：　２４．８２：　４２．８２．４５．７１； 　５４．４７＋５６．９９；　１３２．２２：１３２．５８：　１３２．６７＋ 　１３３．５２；　１７６．５６＋　１７９．８０゜元素分析値（ｌ水和物）： 計算値Ｃ・５３．６．　ｌｌ：６．６．　Ｎ：９．６．３：　１１．０実測値Ｃ ：５４．５．　ｔｌ：６．６．　Ｎ：９．６；　Ｓ：　１１．２゜例１６ ジー（１−アダマンタンアミニウム）−Ｎ、Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチネー ト（Ｉ　ａ　；　Ｒ＝　［Ｃ（１）ＣＨ（３，５，７）Ｃ１ｌｚ（２，４，６， ８，９，１０）Ｎｌｌｓ）水５ｇｌ中に溶解したＮ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ− シスチン（５，３５ミリモル、１．７３ｇ）に１−アダマンタンアミン（１０， ７ミリモル、　１．６１　ｑ　）を加えた。この溶液にアセトン６０ｍ１を滴加 した。得られた結晶性塩を濾過し次いで真空乾燥して標記化合物２．３９　（６ ７％）を得た。

物理的データ：　Ｎｐ　１６２℃。’ｌｌ−Ｎｉ１Ｒ（Ｃ２０）δ：　１．７１ （１２１（、幅広ｄｄ。

ＣＨ２（４，６，１０））、１．８７［１２１１，ｄ、　ＣＨｚ（２，８，９） ）、　２．０５（６１１，ｓ、　ＣＨｓ〕。

２、１７［６ｎ、幅広ｓ、　Ｃｌ１（３，５，７））、　２．９６（２１１，ｄ ｄ、　Ｃｌ１ｚＳ）、　３．２６（２１１，ｄｄ。

Ｃ１１ｚＳ）、　４．５０［２１１，ｄｄ、　ＣＩＩＮＩ。

例１７ ジー（Ｎ−ベンジル−２−フェニルエチルアミニウム）−Ｎ、Ｎ’−Ｌ−ンスチ ネート（Ｉ　ａ　；　Ｒ”ＰｈＣＨｚＣ１１２Ｎ１１ｚＣｆｌｚＰｈ）水２ＯＮ ｌ中に溶解したＮ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチン（２８，７ミリモル、９ ．３９）をＮ−ベンジル−２−フェニルエチルアミン（５７，４ミリモル、　１ ２．１９）を加えた。この溶液を濃縮して濃ペーストを得、それより塩が徐々に 結晶化した。結晶性の標記化合物を単離し次いで乾燥した。

物理的データ：Ｍｐ８７℃。１■−ＮＭＲ（Ｃ２０）δ：　２．０５［６１１， ｓ、　ＣＨ２Ｆ。

２．９５（２１１，ｄｄ、　ＣＪＳ）、　３．０４（４８，ｔ、　ＰｈＣｎ２Ｃ ）、　３．２４（２■、　ｄｄ、　ＣＩＴ２Ｓ）。

３、３３［４１１，ｔ、　Ｃｔ１２ＮＢｎ］、　４．２５（４０，ｓ、　ＰｈＣ ｎ２Ｃ，４，４９（２１１，ｄｄ、　ＣＨＮＩ。

７．３０−７．５２［２０１１，ｍ、　Ｐｈ］。

例１８ ピペラジニウム−Ｎ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチネート（Ｉｂ；Ｒ＝　Ｎ ｕｔ（１，４）ＣＪ（２，３，５，６））水５冒！中に溶解したＮ、　Ｎ’−ジ アセチル−Ｌ−シスチン（４，６０ミリモル、　１．４９９）にピペラジン（４ ，６０ミリモル、０．９０９）を加えた。

この溶液に十分なイソプロパツールを加えて油状物を生成させしめ、それは徐々 に固化した。塩を単離し次いで乾燥した。

物理的データ＋Ｉｉｐ＞１７０℃（ｄｅｃ、　）。’　ＩＩ−ＮＩＲ（０，０） δ：　２．０５（６Ｈ，ｓ。

ＣＨｓ）、２．９６［２Ｆｌ、　ｄｄ、　ＣＨｚＳ］、　３．２６（２１１，ｄ ｄ、　Ｃｌ１ｔＳ）、３．４２（８Ｈ，ｓ。

ＣＩ’１２（２，３，５，６））、　４．４９（２１１，ｄｄ、　ＣＩＩＮＩ。

例１９ ジーし一すジニウムーＮ、　Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチネート（Ｉａ；Ｒ＝ 　ＨＪ（Ｃ００１１）ＣＩ（Ｃ１１２）　４Ｎ１１りＮ−アセチル−し−システ ィン（３７ミリモル、６．０９）およびＬ−リジン（３７ミリモル、５．４ｇ） を脱イオン水しＯｍｌ中に溶解した。過酸化水素（１８ミリモル、■、５ｍ１） を撹拌しながら摘加し、温度を２５℃より低く保った。この溶液をさらに４時間 撹拌した。この粘稠性溶液を、結晶性ジーＬ−リジニウムーＮ、　Ｎ’−ジアセ チル−Ｌ−シスチネート０．５０　ｑ含有の還流エタノール１５０■ｌに徐々に 加えた。添加後溶液を冷却させ、結晶を濾去した。エタノール（２０ｍＩ２）で 洗浄し次いで２４時間乾燥（真空、４５℃）して標記物質１０．’（＋９　（８ ４％）を白色結晶性固形物として得た。

物理的データ：　Ｍｐ　２０８℃；〔α〕、”＝−７３°（ｃ＝０．５４．　Ｉ ＩｔＯ）フロントページの続き （８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、ＰＴ、ＳＥ） 、０Ａ（ＢＦ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、　ＣＩ、　ＣＭ、　ＧＡ、　ＧＮ、　ＭＬ、 　ＭＲ，ＳＮ、　ＴＤ。

ＴＧ）、　ＡＴ、　ＡＵ、　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＣＨ。

Ｃ３，ＤＥ、ＤＫ、ＥＳ、ＦＩ、、ＧＢ、ＨＵ、ＪＰ、ＫＰ、ＫＲ，ＬＫ、ＬＵ 、ＭＧ、ＭＮ、ＭＷ、ＮＬ、Ｎ。

、　ＰＬ、　ＰＴ、　ＲＯ，ＲＵ、　ＳＤ、　５Ｅ（７２）発明者　ヨーセフソ ン、ブーーイヨーランスウェーデン国ニス−２２４６７ルノド。

エクサメンスヴエイエン１８ （７２）発明者　リンドヴアツル、マーグヌススウェーデン国ニス−２２３６５ ルノド。

ベルヘンリフリン　クスヴ工−グ７ （７２）発明者　セルンストラノド、ベンクトスウェーデン国ニス−２３７００ ビニレッド・レイフスヴエーグ２８ （７２）発明者　テーネベルイ、エーリクスウェーデン国ニス−１５１４３ゼデ ルテイエ、オニーステル　ガタン５

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. １．一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ または ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＋およびＲ２＋は有機塩基のリジン、エチレンジアミン、Ｎ，Ｈ′−ジ ベンジルエチレンジアミン、アダマンタンアミン、Ｎ−ベンジル−２−フェニル エチルアミンまたはピペラジンの陽イオンである）を有することを特徴とする個 々の異性体すなわちＤ−、Ｌ−およびメソ型並びにラセミ型におけるＮ，Ｎ′− ジアセチルシスチン〔ＤｉＮＡｃ〕と有機塩基との塩。
2. ２．Ｎ，Ｎ′−ジアセチル−Ｌ−シスチンの請求項１記載の塩。
3. ３．ＤｉＮＡｃを有機塩基または該有機塩基のこれら陽イオンを含有する塩で処 理し、反応成分を溶媒または溶媒混合物中に溶解または分散し次いで場合により 水和または溶媒和された形態であることもある塩を単離することからなる請求項 １または２記載の化合物の塩を製造する方法。
4. ４．Ｎ−アセチルシステインと有機塩基との塩を酸化し次いで場合により水和ま たは溶媒和された形態であることもあるＤｉＮＡｃ塩を単離することからなる請 求項１または２記載の塩を製造する方法。
5. ５．活性成分として請求項１または２記載のＤｉＮＡｃの塩を含有する医薬組成 物。
6. ６．加圧、計量投与用吸入器または乾燥粉末用吸入器またはゼラチン、プラスチ ックもしくはその他のカプセルを用いた乾燥粉末で投与するための請求項５記載 の医薬組成物。
7. ７．組成物に加えられる医薬的に許容しうる担体を包含する請求項５または６記 載の医薬組成物。
8. ８．カプセル剤または錠剤の形態での請求項５記載の医薬組成物。
9. ９．医薬的に許容しうる担体を包含する請求項８記載の医薬組成物。
10. １０．噴霧により溶液で投与するための請求項５記載の医薬組成物。
11. １１．治療上の活性物質として使用するための請求項１または２記載の塩。
12. １２．悪性腫瘍治療用の請求項１または２記載の塩。
13. １３．免疫調節活性を有する医薬の製造における請求項１または２記載の塩の使 用。
14. １４．悪性腫瘍の治療用医薬の製造における請求項１または２記載の塩の使用。
15. １５．ヒトを含む哺乳動物の免疫系における欠損による疾患の治療において、そ のような治療を必要とする宿主に請求項１または２記載のＤｉＮＡｃの塩の有効 量を投与することを特徴とする前記の治療方法。
16. １６．ヒトを含む哺乳動物の悪性腫瘍の治療において、そのような治療を必要と する宿主に請求項１または２記載のＤｉＨＮＡｃの塩の有効量を投与することを 特徴とする前記の治療方法。