JPH07278585A - エイコサペンタエン酸又はそのエステルの精製方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】本発明の目的は、尿素及び溶媒の回収が簡便
な、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の尿素付加物法に
よる精製方法の改良法を提供することである。 【構成】本発明は、１）ＥＰＡを含有する脂肪酸混合物
を、尿素及び７０〜９５重量％の低級アルコール及び３
０〜５重量％の水からなる溶媒と混合する工程、２）工
程１）の混合液を加熱し尿素を溶解後、冷却し尿素結晶
を析出させ、次いで無極性溶媒を添加し、尿素結晶を濾
過する工程、３）工程２）の濾液をアルコール水溶液層
と無極性溶媒層に分離する工程、４）工程３）のアルコ
ール水溶液層と工程２）の尿素結晶を混合後、加熱溶解
し、脂肪酸混合物層と、尿素含有アルコール水溶液層と
に分離し、尿素含有アルコール水溶液を回収する工程、
５）工程３）の無極性溶媒層から無極性溶媒を回収し、
ＥＰＡを分離する工程、よりなる、ＥＰＡの精製方法で
ある。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はエイコサペンタエン酸又
はそのエステルの尿素付化物法による精製方法の改良に
関するものであり、更に詳しくは、該方法で用いる尿素
及び溶媒を簡便に回収でき、工業的規模において低コス
トで、そして有機溶媒による環境汚染を低減することが
できる、エイコサペンタエン酸又はそのエステルの精製
方法に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】エイコサペンタエン酸及びそのエステ
ル、アミド等には血液中のコレステロ−ル値の低減、血
栓の形成抑制効果等が見い出だされており、心筋梗塞、
脳梗塞等の治療及び予防に有効であることがすでに知ら
れている。それ故、医薬品や健康食品への利用が現在盛
んに行われている。またエイコサペンタエン酸は、各種
魚の養殖において魚の成長に重要な役割を果たしてお
り、養殖に用いる飼料（ワムシ等）の培養液に添加され
ている。

【０００３】エイコサペンタエン酸は、天然油脂、特に
イワシ、サバ、タラ等の水産生物油脂中に、それ自体あ
るいはその誘導体として含有されている。しかしなが
ら、水産生物の原油中には他の夾雑脂肪酸が圧倒的に多
く、医薬品や健康食品、或いは養殖用飼料の培養添加物
として利用するためには抽出・精製しなければならな
い。

【０００４】従来、海産生物の油脂から高度不飽和脂肪
酸を分離・精製する一般的方法としては、尿素付加物
法、真空蒸留法、銀イオン・クロマトグラフィ−
法、薄層クロマトグラフィ−法、ガスクロマトグラ
フィ−法、及びこれらの方法を組み合わせた方法（特
開昭５７−１８７３９７号公報、特開昭５８−８０３７
号公報等）が知られていた。

【０００５】これらの中では、尿素付加物法が最も簡便
であり、また安価であった。尿素付化物法は、不飽和結
合が少ない脂肪酸エステルほど尿素との付加物結晶（あ
るいは包摂結晶）を作りやすく、不飽和結合の多い高度
不飽和脂肪酸エステル類は尿素との付加物体を作りにく
い性質を利用するものである。典型的には、試料を、尿
素を溶解したメタノ−ル溶液と混合・撹拌し、生成した
付加物結晶を濾過・洗浄するという簡便なものである。
しかし、海産生物の油脂中には大量の飽和又は低不飽和
脂肪酸エステルが含まれているので、それらに比べ非常
に含量の少ないエイコサペンタエン酸又はそのエステル
を分離精製するためには、大量の尿素及びメタノ−ルが
必要となる。例えば、イワシ原油１００Ｋｇに対し尿素
は２００〜３００Ｋｇ、メタノ−ルは６００〜７００リ
ットル程度が必要となる。更に、今まで用いられている
尿素付加物法による精製方法は、最終精製品中のエイコ
サペンタエン酸の純度がそれ程良くなくその改良が望ま
れていた。

【０００６】これらの欠点を改良する方法が、先に引用
した特開昭５８−８０３７号公報に記載されている。こ
の方法は、尿素付加物法による尿素及びアルコ−ルの大
量消費を解消し、併せて最終製品中のエイコサペンタエ
ン酸の純度を上げるべく、１）脂肪酸混合物を連続式蒸
留し主留を採取することにより、エイコサペンタエン酸
又はそのエステルを部分精製し、次いで２）尿素付加物
法により精製を行うものである。しかしながらこの方法
では、第一段階として連続蒸留を行うため操作が繁雑で
あり、また設備も大きく複雑となる。更に蒸留操作によ
るエイコサペンタエン酸の回収率も良くない（２５〜５
０％）。次いで行う尿素付加物法は従来の方法と同様で
ある。即ち、尿素をアルコ−ル溶液に溶解し、これに脂
肪酸混合物を加え撹拌する。次いで、尿素処理液を冷却
し、尿素結晶を析出させ、低不飽和脂肪酸が付加した尿
素結晶を濾別する。この操作によりほとんどの尿素は除
かれる。濾液は濃縮して大部分の溶媒を留去する。この
操作により、大部分のアルコ−ルは除かれる。ついで、
水及びヘキサンを加え、残存する尿素を水層に、不飽和
度の高い脂肪酸を溶媒層に移行させそれぞれの層を分離
する。最後に、溶媒層より溶媒を留去し、エイコサペン
タエン酸を回収する。

【０００７】また、尿素付加物法による瀘別によって生
じる低不飽和脂肪酸付加結晶から尿素を、容易に、効率
よく回収する方法は今までに報告されていない。

【０００８】このように、現在までのところ、尿素不加
物法において尿素及び溶媒を簡便な方法において効率よ
く回収する方法は開発されておらず、又、回収した尿素
及び溶媒を簡便に再利用する方法も開発されていなかっ
た。それ故、それらの方法の開発が望まれていた。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、上記
問題点を解決し、簡便な方法により、尿素及び溶媒の回
収が可能なエイコサペンタエン酸又はそのエステルの尿
素付加物法による精製方法を提供することである。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記問題
点を解決し、簡便で安価な尿素不加物法を工業的に利用
すべく鋭意努力した結果、尿素及び溶媒の回収が簡便で
あり、またそれらの再利用が可能なエイコサペンタエン
酸又はそのエステルの精製方法を発明するに至った。

【００１１】即ち、本発明は、 １）エイコサペンタエン酸又はそのエステルを含有する
脂肪酸混合物を、尿素、及び７０〜９５重量％の炭素数
４以下のアルコ−ル及び３０〜５重量％の水と混合し、
混合液を調製する工程、 ２）下記の工程（ａ）及び（ｂ）、（ａ）工程１）より
得られた混合液を、加熱して尿素を溶解した後、冷却し
尿素結晶を析出させる工程、（ｂ）工程（ａ）より得ら
れた混合液から尿素結晶を瀘別する工程、ここで、工程
（ａ）の前又は後の混合液にもしくは工程（ｂ）の後の
瀘液に無極性溶媒を添加すること、 ３）工程２）より得られた瀘液又は混合液をアルコ−ル
水溶液層と無極性溶媒層に分離する工程、 ４）工程３）より得られたアルコ−ル水溶液層の少なく
とも一部と工程２）（ｂ）より得られた尿素結晶を混合
した後、加熱して尿素結晶を溶解し、脂肪酸混合物層
と、尿素を含有したアルコ−ル水溶液層とに分離し、次
いで尿素含有アルコ−ル水溶液を回収する工程、そし
て、 ５）工程４）より得られた無極性溶媒層から無極性溶媒
を回収し、エイコサペンタエン酸又はそのエステルを分
離する工程、 よりなるエイコサペンタエン酸又はそのエステルの精製
方法に関するものである。

【００１２】また、本発明は、海産生物の油脂からのエ
イコサペンタエン酸又はそのエステルの精製方法に関す
るものである。

【００１３】更に本発明は、上記の工程４）により回収
された尿素含有アルコ−ル水溶液、工程３）で得られか
つ工程４）で使用されなかった残部のアルコ−ル水溶液
及び工程６）により回収された無極性溶媒を再利用する
ことからなる上記のエイコサペンタエン酸又はそのエス
テルの精製方法に関するものである。

【００１４】以下本発明を、詳細に説明する。エイコサ
ペンタエン酸を多く含む天然油脂としては、例えば、イ
ワシ、サバの油脂、タラの肝油、オキアミ等の水産物油
を挙げることができる。本発明においては、これらの天
然油脂を定法に従って処理して、トリグリセリドを遊離
脂肪酸又は脂肪酸エステル、好ましくはエチルエステル
（以下、両者を脂肪酸混合物とする）とする。本発明に
おいては、天然油脂の定法による処理に先立ち、天然油
脂を吸着処理しても良い。本吸着処理は、天然油脂の脱
色・脱臭のために行うものであり、吸着剤としては、活
性白土、ケイ酸、活性アルミナ、活性炭等を用いること
ができ、吸着方法は、バッチ方式でもカラム方式でも良
い。

【００１５】本発明においては、まず脂肪酸混合物を尿
素により処理する。具体的には脂肪酸混合物に尿素及び
炭素数４以下のアルコ−ル及び水を加える。本発明でい
う炭素数４以下のアルコ−ルとは、例えばメタノ−ル、
エタノ−ル、プロパノ−ル、ｓｅｃ−ブタノ−ル、ｔｅ
ｒｔ−ブタノ−ル等を挙げることができるが、特にメタ
ノ−ルが好ましい。尿素を、予めアルコ−ル及び水の混
合溶液に溶解して加えても良いし、結晶状態で加えても
良い。尿素は、脂肪酸混合物１重量部に対して、０．５
部以上、特に１部〜５部加えるのが好ましい。加える尿
素がこれ未満だと尿素に吸着されない脂肪酸エステル類
が多くなり、得られたエイコサペンタエン酸の純度が悪
くなる。尿素の量を上げると最終精製物中のエイコサペ
ンタエン酸の純度は上がるので、尿素の量はできる限り
高くするのが好ましい。しかし、上記上限より多くの尿
素を用いても格別の効果の向上はなく、不経済となる。

【００１６】又、アルコ−ル及び水は、尿素濃度が１０
〜４０％、特に２０〜３０％となるような範囲の量を加
えるのが好ましい。アルコ−ル及び水の量が、この範囲
未満だと尿素の溶解が十分でなくなり、またこの範囲を
越えると尿素結晶の析出が十分でなくなるからである。
いずれにしろ、尿素、アルコ−ル及び水の割合は尿素の
溶解度が温度によって大きく変化し、更に尿素の脂肪酸
の包摂能力に影響するので適宜選択するのが望ましい
し、本発明の技術分野の当業者においてはその選択は容
易に行い得ることである。アルコ−ル及び水の割合は、
アルコ−ル７０〜９５重量％、水３０〜５重量％、特に
アルコ−ル８０〜９５重量％、水２０〜５重量％、更に
はアルコ−ル９０〜９５重量％、水１０〜５重量％が好
ましい。水の割合が多すぎると冷却による尿素結晶の析
出が不十分となり、また尿素における飽和・低不飽和脂
肪酸の包摂能力が低下するからである。一方、水の割合
が少なすぎると、以下に述べる無極性溶媒による抽出の
際に、アルコ−ルが無極性溶媒側に移行してしまい好ま
しくないからである。

【００１７】次いで、この尿素処理液を、加温しながら
撹拌し、尿素溶液を均一に混合する。その後、尿素溶液
を冷却し、尿素結晶を析出させる。このとき、脂肪酸混
合物中の飽和脂肪酸及び低不飽和脂肪酸は尿素に包摂さ
れる。冷却は、長時間かけてもまた短時間でも良いが、
好ましくは０．５〜４時間かけて冷却する。また、尿素
溶液の最終温度は、４０℃以下、好ましくは１０℃〜３
０℃が良い。

【００１８】次いで、得られた尿素結晶含有混合液に、
無極性溶媒を加える。無極性溶媒としては、ヘキサン、
四塩化炭素、ヘプタン、石油エ−テル、ベンゼン、トル
エン等を挙げることができるが、特にｎ−ヘキサンが好
ましい。加える無極性溶媒の量は任意であるが、アルコ
−ル水溶液１重量部に対して、０．１部〜１．０部の範
囲が好ましい。無極性溶媒の添加により、エイコサペン
タエン酸を含む高度不飽和脂肪酸は無極性溶媒層へ移行
する。

【００１９】次いで、尿素結晶を濾過し、飽和脂肪酸及
び低不飽和脂肪酸を包摂した尿素結晶（これをアダクト
と呼ぶ）と濾液に分離する。濾過は定法に従って行えば
よく、その方法は、普通濾過、減圧濾過、加圧濾過、遠
心濾過、フィルタ−プレス等いかなる方法でもよい。

【００２０】前記無極性溶媒の添加は、尿素結晶の析出
後に混合液に添加しても良く、また濾過後に瀘液に添加
しても良く、更には脂肪酸混合物に直接添加しても或い
は脂肪酸混合物に尿素・メタノ−ル・水を加えた後に添
加しても良い。

【００２１】但し、前記無極性溶媒を尿素結晶析出後か
つ瀘過前に添加すれば、尿素結晶に包摂されないが、結
晶に付着している高度不飽和脂肪酸を尿素結晶から分離
でき、エイコサペンタエン酸の損失を抑え、回収率を上
げることができる。よって、冷却し尿素の析出した溶液
に無極性溶媒を加え、混合した後、濾過するのが好まし
い。

【００２２】得られた混合液又は瀘液を静置分別し、無
極性溶媒層とアルコ−ル水溶液層に分離する。無極性溶
媒層にエイコサペンタエン酸又はそのエステルが含有さ
れている。それぞれの層を以下の操作に付す。

【００２３】好ましくは、無極性溶媒層に水を加え、撹
拌し、水層を除去する操作を２〜５回程度繰り返す。こ
の操作は、無極性溶媒層中に残存している微量の尿素を
除去するために行うものであり、微量の尿素の混在が問
題にならない場合は、省くこともできる。次いで、無極
性溶媒層を真空下で加熱し、無極性溶媒を蒸発回収す
る。残部に、エイコサペンタエン酸を含む高度不飽和脂
肪酸エステルを高純度で含有する最終精製物が得られ
る。温度は、５０℃以上であれば良いが、好ましくは１
００℃〜２００℃である。余り温度を上げすぎること
は、高度不飽和脂肪酸は熱に不安定な物質故、好ましく
ない。また、高度不飽和脂肪酸は、高温下で、酸素によ
り容易に酸化されるので、本操作は真空下で行うのが好
ましい。本操作により蒸発回収した無極性溶媒は本発明
の精製方法において再利用できるので、コスト面から、
そして環境汚染という面からも工業的に有用である。

【００２４】高度不飽和脂肪酸は、酸素、光等に不安定
であるので、前記の各操作は、遮光、窒素雰囲気下で行
うのが好ましい。

【００２５】一方、アルコ−ル水溶液層の少なくとも一
部、好ましくは全てを以下の操作に供する。アルコ−ル
水溶液を先に回収したアダクトに添加し、加熱して尿素
結晶を溶解することにより、包摂尿素結晶を分解し、飽
和脂肪酸及び低不飽和脂肪酸と尿素とを分離する。次い
で溶液を静置し、２層に分離した後、例えば、デカンテ
−ションにより、尿素含有アルコ−ル水溶液と飽和脂肪
酸エステル・低不飽和脂肪酸エステルを分離する。回収
した尿素含有アルコ−ル水溶液は、ここで用いなかった
残部のアルコ−ル水溶液（もし、あれば）と一緒にし、
尿素濃度を調整した後、本発明の精製方法に再利用す
る。

【００２６】上述のように、本発明においては、脂肪酸
混合物からエイコサペンタエン酸又はそのエステルを簡
便な尿素付加物法により精製でき、かつ該方法に用いる
尿素及び溶媒は簡便に回収できる。そしてまた、本発明
の方法において用いる尿素及び溶媒は本発明の方法に再
利用できる。それ故本発明の精製方法を用いれば、コス
トが低減でき、そして環境汚染等を防げるので、工業的
に大量に精製する方法として有用である。

【００２７】以下、実施例において本発明を更に詳細に
説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるもので
はない。

【００２８】

【実施例】

【００２９】

【実施例１】断りがない限り、以下の操作（ｉ）〜
（ｖ）の撹拌、静置、抽出等の操作はすべて、遮光・窒
素雰囲気下で行った。

【００３０】（ｉ）イワシを煮て、浮上してきた油を回
収し、これをイワシ原油とした。イワシ原油１００ｋｇ
（エイコサペンタエン酸 １６．０％）に、１０％水酸
化ナトリウム溶液２．３リットルを加え、９０℃の温度
にて数秒間撹拌し、次いで遠心分離し、油部分を回収し
た。この操作により遊離脂肪酸が中和され除去（脱酸）
される。次いで、油液を、９０℃の湯を用いて水洗し
た。水洗後、活性白土を１〜２％となるように油液へ添
加し、１１０℃の温度にて撹拌する。この吸着操作によ
り、脱臭・脱色が行われる。最後に、油液を濾過し、白
土を除いた。その結果、精製イワシ油９５ｋｇが得られ
た。

【００３１】（ｉｉ）精製イワシ油９５ｋｇを、エタノ
−ル２８リットル及び濃度９９％の水酸化ナトリウムフ
レ−ク０．５ｋｇの混合液中へ入れ、温度２５℃〜３０
℃で５時間撹拌し、エステル化反応を行った。反応終了
後、脱塩し、さらにその他の不溶性不純物を除去するた
め、５０℃の温水２０リットルを加え、反応液を５分間
撹拌し、水洗し、エタノ−ル層を回収した。この操作を
５回繰返した。その結果、イワシエチルエステル９０ｋ
ｇが得られた。

【００３２】（ｉｉｉ）イワシエステル９０ｋｇを、尿
素２４５ｋｇを９２％メタノ−ル水溶液６６０リットル
に溶解した溶液中に入れ、７０℃の温度にて、３０分間
撹拌し、完全に溶解させた。溶解後、撹拌を続けなが
ら、２時間かけて、液温が２０℃になるまで冷却した。
この操作により、溶液中の飽和脂肪酸及び低不飽和脂肪
酸は尿素結晶中に包摂される。次いで、ｎ−ヘキサン２
００リットルを添加し、２０℃の温度にて１５分間撹拌
・抽出した。この操作により、目的物であるエイコサペ
ンタエン酸エチルエステルを含有する高度不飽和脂肪酸
はヘキサン層へ移行する。その後、包摂尿素結晶を減圧
瀘過し、アダクトと濾液に分離した。

【００３３】濾液を静置分別した。この際、界面を明瞭
にし、分離効果を高めるため、２相溶液を、２０℃の温
度にて、１時間静置した。静置終了後、上層のヘキサン
層と下層のメタノ−ル水溶液層を液液分離した。その
後、ヘキサン層とメタノ−ル水溶液層を以下の通り、別
々に処理した。

【００３４】（ｉｖ）ヘキサン層は、水洗を行うため、
４０℃の温水２００リットルを加え、５分間、撹拌・抽
出をした。その後、４０℃の温度にて１時間静置した。
静置後、水層を抜き出し、ヘキサン層と液液分離した。
この水洗操作は、残量する微量の尿素を完全に除去する
ために３回行った。水洗終了後、ヘキサン溶媒を除去、
回収するために、６０℃の温度にて、真空下でヘキサン
を蒸発回収した。回収したヘキサンは実施例２において
前記操作（ｉｉｉ）に再利用した。ヘキサンの蒸発回収
後、エイコサペンタエン酸エステル含有高度不飽和脂肪
酸エチルエステルが２５ｋｇ得られた。得られた脂肪酸
エステルを分析したところ、エイコサペンタエン酸エチ
ルエステルの純度は４５．０％、収率は７０％で、良好
であった。

【００３５】（ｖ）一方、メタノ−ル水溶液層に前記ア
ダクトを添加し、７０℃の温度にて３０分間撹拌し、加
熱溶解した。この操作により、アダクトは分解し、飽和
脂肪酸及び低不飽和脂肪酸は尿素と分離される。加熱溶
解後、溶液を６０℃の温度にて１時間静置し、上層へ浮
かび上がった飽和脂肪酸エチルエステル及び低不飽和脂
肪酸エチルエステル６５ｋｇをデカンテ−ションした。
残った尿素含有アルコ−ル水溶液溶媒を回収し、尿素濃
度を測定し、若干の尿素濃度の調整を行った後、実施例
２において前記操作（ｉｉｉ）に再利用した。

【００３６】

【実施例２】実施例１と同様にして、イワシ原油よりエ
イコサペンタエン酸エチルエステルの精製を行った。た
だし、操作（ｉｉｉ）において、尿素及び９２％メタノ
−ル水溶液は別々に加えるのではなく、実施例１で回収
した尿素含有９２％メタノ−ル水溶液を利用した。ま
た、ヘキサンも実施例１で回収したヘキサンを利用し
た。結果は、実施例１と同様の純度及び回収率にてエイ
コサペンタエン酸エチルエステルが精製できた。

【００３７】

【発明の効果】以上から明らかなように、本発明の方法
により、エイコサペンタエン酸又はそのエステルが簡便
な尿素付加物法により精製でき、かつ該方法において用
いる尿素、アルコ−ル水溶液及び無極性溶媒は簡便に回
収できる。また、本発明の方法で用いる尿素、アルコ−
ル水溶液及び無極性溶媒は再利用できる。それ故、本発
明の精製方法は、コストが低く、また環境汚染の心配が
ないので工業的規模における精製方法として有用であ
る。

【手続補正書】

【提出日】平成６年６月１０日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】請求項１

【補正方法】変更

【補正内容】

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１１

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１１】即ち、本発明は、 １）エイコサペンタエン酸又はそのエステルを含有する
脂肪酸混合物を、尿素、及び７０〜９５重量％の炭素数
４以下のアルコール及び３０〜５重量％の水からなる溶
媒と混合し、混合液を調製する工程、 ２）下記の工程（ａ）及び（ｂ）、（ａ）工程１）より
得られた混合液を、加熱して尿素を溶解した後、冷却し
尿素結晶を析出させる工程、（ｂ）工程（ａ）より得ら
れた混合液から尿素結晶を瀘別する工程、ここで、工程
（ａ）の前又は後の混合液にもしくは工程（ｂ）の後の
瀘液に無極性溶媒を添加すること、 ３）工程２）より得られた瀘液又は混合液をアルコール
水溶液層と無極性溶媒層に分離する工程、 ４）工程３）より得られたアルコール水溶液層の少なく
とも一部と工程２）（ｂ）より得られた尿素結晶とを混
合した後、加熱して尿素結晶を溶解し、脂肪酸混合物層
と、尿素を含有したアルコール水溶液層とに分離し、次
いで尿素含有アルコール水溶液を回収する工程、そし
て、 ５）工程３）より得られた無極性溶媒層から無極性溶媒
を回収し、エイコサペンタエン酸又はそのエステルを分
離する工程、 よりなるエイコサペンタエン酸又はそのエステルの精製
方法に関するものである。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】以下の工程よりなることを特徴とするエイ
   コサペンタエン酸又はそのエステルの精製方法 １）エイコサペンタエン酸又はそのエステルを含有する
   脂肪酸混合物を、尿素、及び７０〜９５重量％の炭素数
   ４以下のアルコ−ル及び３０〜５重量％の水と混合し、
   混合液を調製する工程、 ２）下記の工程（ａ）及び（ｂ）、 （ａ）工程１）より得られた混合液を、加熱して尿素を
   溶解した後、冷却し尿素結晶を析出させる工程、（ｂ）
   工程（ａ）より得られた混合液から尿素結晶を瀘別する
   工程、ここで、工程（ａ）の前又は後の混合液にもしく
   は工程（ｂ）の後の瀘液に無極性溶媒を添加すること、 ３）工程２）より得られた瀘液又は混合液をアルコ−ル
   水溶液層と無極性溶媒層に分離する工程、 ４）工程３）より得られたアルコ−ル水溶液層の少なく
   とも一部と工程２）（ｂ）より得られた尿素結晶を混合
   した後、加熱して尿素結晶を溶解し、脂肪酸混合物層
   と、尿素を含有したアルコ−ル水溶液層とに分離し、次
   いで尿素含有アルコ−ル水溶液を回収する工程、そし
   て、 ５）工程４）より得られた無極性溶媒層から無極性溶媒
   を回収し、エイコサペンタエン酸又はそのエステルを分
   離する工程。
2. 【請求項２】前記工程１）のアルコ−ル及び水の割合
   が、アルコ−ル８０〜９５重量％、水２０〜５重量％で
   ある、請求項１記載のエイコサペンタエン酸又はそのエ
   ステルの精製方法。
3. 【請求項３】エイコサペンタエン酸又はそのエステルが
   海産生物の油脂から得られたものあることを特徴とする
   請求項１又は２記載のエイコサペンタエン酸又はそのエ
   ステルの精製方法。
4. 【請求項４】請求項１記載の工程４）により回収された
   尿素含有アルコ−ル水溶液、工程３）で得られかつ工程
   ４）で使用されなかった残部のアルコ−ル水溶液及び工
   程５）により回収された無極性溶媒を再利用することを
   特徴とする請求項１乃至３のいずれか一つに記載のエイ
   コサペンタエン酸又はそのエステルの精製方法。
5. 【請求項５】炭素数４以下のアルコ−ルがメタノ−ル又
   はエタノ−ルであることを特徴とする請求項１乃至４の
   いずれか一つに記載のエイコサペンタエン酸又はそのエ
   ステルの精製方法。
6. 【請求項６】無極性溶媒がｎ−ヘキサンであることを特
   徴とする請求項１乃至５のいずれか一つに記載のエイコ
   サペンタエン酸又はそのエステルの精製方法。