JPH07206887A - 新規ホスホリパーゼｃ阻害物質ａｍ６２１１及びその製造法 - Google Patents
新規ホスホリパーゼｃ阻害物質ａｍ６２１１及びその製造法Info
- Publication number
- JPH07206887A JPH07206887A JP6005854A JP585494A JPH07206887A JP H07206887 A JPH07206887 A JP H07206887A JP 6005854 A JP6005854 A JP 6005854A JP 585494 A JP585494 A JP 585494A JP H07206887 A JPH07206887 A JP H07206887A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reaction
- substance
- phospholipase
- chloroform
- calcium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts
Landscapes
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 ホスファチジルイノシトール特異的ホスホリ
パーゼＣ阻害活性作用を有する、タラロマイセス（Ｔａ
ｌａｒｏｍｙｃｅｓ）属の微生物を培養して得られるＡ
Ｍ６２１１物質、およびその製造法。 【効果】 新規かつ有用なホスファチジルイノシトール
特異的ホスホリパーゼＣ阻害活性作用を示し、医薬、例
えば血栓症、心臓または脳における虚血性疾患、アレル
ギー、気管支喘息、高血圧、脳血管攣縮、種々の腎疾患
または膵炎等の予防または治療剤として有用である。
パーゼＣ阻害活性作用を有する、タラロマイセス（Ｔａ
ｌａｒｏｍｙｃｅｓ）属の微生物を培養して得られるＡ
Ｍ６２１１物質、およびその製造法。 【効果】 新規かつ有用なホスファチジルイノシトール
特異的ホスホリパーゼＣ阻害活性作用を示し、医薬、例
えば血栓症、心臓または脳における虚血性疾患、アレル
ギー、気管支喘息、高血圧、脳血管攣縮、種々の腎疾患
または膵炎等の予防または治療剤として有用である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、タラロマイセス（Ｔａ
ｌａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する微生物が産生する、新
規なホスファチジルイノシトール特異的ホスホリパーゼ
Ｃ阻害活性を有するＡＭ６２１１物質に関する。
ｌａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する微生物が産生する、新
規なホスファチジルイノシトール特異的ホスホリパーゼ
Ｃ阻害活性を有するＡＭ６２１１物質に関する。
【０００２】
【従来の技術】ホスファチジルイノシトール特異的ホス
ホリパーゼＣ（以下、ＰＬ−Ｃと略することがある）
は、ホスファチジルイノシトール−４，５−二リン酸を
加水分解し、それによってイノシトール−１，４，５−
三リン酸（以下、ＩＰ3 と略することがある）及びジア
シルグリセロール（以下、ＤＧと略することがある）を
生成する酵素である。そしてこの酵素は、細胞内で特異
的膜受容体に作用する種々の神経伝達物質、ホルモン及
び成長因子による調節の結果として活性化される。
ホリパーゼＣ（以下、ＰＬ−Ｃと略することがある）
は、ホスファチジルイノシトール−４，５−二リン酸を
加水分解し、それによってイノシトール−１，４，５−
三リン酸（以下、ＩＰ3 と略することがある）及びジア
シルグリセロール（以下、ＤＧと略することがある）を
生成する酵素である。そしてこの酵素は、細胞内で特異
的膜受容体に作用する種々の神経伝達物質、ホルモン及
び成長因子による調節の結果として活性化される。
【０００３】さらに、ＩＰ3 とＤＧは細胞内でセカンド
メッセンジャーの役割を演じている。前者は細胞内カル
シウムストアよりカルシウムを遊離することによって、
後者はプロテインキナーゼＣを活性化することによって
その役割を果たしている。このように、ＰＬ−Ｃは神経
伝達物質、ホルモン及び成長因子によって誘起される多
くの細胞活性化プロセスに重要な役割を演じている。
メッセンジャーの役割を演じている。前者は細胞内カル
シウムストアよりカルシウムを遊離することによって、
後者はプロテインキナーゼＣを活性化することによって
その役割を果たしている。このように、ＰＬ−Ｃは神経
伝達物質、ホルモン及び成長因子によって誘起される多
くの細胞活性化プロセスに重要な役割を演じている。
【０００４】ＩＰ3 によって細胞内カルシウムストアよ
りカルシウムが放出されるＩＰ3 誘発カルシウム放出
〔ＩＰ3 −ｉｎｄｕｃｅｄ Ｃａ ｒｅｌｅａｓｅ（Ｉ
ＩＣＲ）〕機構について説明する。ホルモンや神経伝達
物質、オータコイド等のアゴニストが細胞膜上の各受容
体に結合すると、刺激はＧＴＰ結合蛋白質を介し、ＰＬ
−Ｃを活性化する。一方、細胞膜中に存在するイノシト
ールリン脂質であるホスファチジルイノシトールは、ホ
スファチジルイノシトール−４−一リン酸、ホスファチ
ジルイノシトール−４，５−二リン酸（以下、ＰＩＰ2
と略することがある）へと段階的に変換される。このＰ
ＩＰ2 が、活性化したＰＬ−ＣによってＩＰ3 とＤＧの
二つのセカンドメッセンジャーに分解される。そしてＩ
Ｐ3 が細胞内カルシウムストアに存在する受容体に結合
してカルシウムが放出される。一方ＤＧは、このカルシ
ウムとともにプロテインキナーゼＣを活性化する。更
に、ＩＰ3 感受性カルシウムストアからＩＩＣＲ機構に
より放出されたカルシウムは、ＩＰ3 非感受性カルシウ
ムストアから、細胞内のカルシウム濃度の上昇によって
カルシウムが放出されるカルシウム誘発カルシウム放出
〔Ｃａ−ｉｎｄｕｃｅｄＣａ ｒｅｌｅａｓｅ（ＣＩＣ
Ｒ）〕機構によりカルシウムが放出されるのを誘発す
る。即ち、細胞内カルシウム濃度上昇の律速段階はＩＰ
3 産生である。ＩＰ3 産生によりＩＰ3 感受性カルシウ
ムストアよりカルシウムが放出され、受容体作動性カル
シウムチャンネルを介してカルシウムが流入する。次い
で、このカルシウムによってＩＰ3 非感受性カルシウム
ストアからカルシウムが放出され、伝播性のカルシウム
波を発生することが報告されている〔Ｂｅｒｒｉｄｇ
ｅ，Ｍ．Ｊ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６５，９
５８３（１９９０）〕。
りカルシウムが放出されるＩＰ3 誘発カルシウム放出
〔ＩＰ3 −ｉｎｄｕｃｅｄ Ｃａ ｒｅｌｅａｓｅ（Ｉ
ＩＣＲ）〕機構について説明する。ホルモンや神経伝達
物質、オータコイド等のアゴニストが細胞膜上の各受容
体に結合すると、刺激はＧＴＰ結合蛋白質を介し、ＰＬ
−Ｃを活性化する。一方、細胞膜中に存在するイノシト
ールリン脂質であるホスファチジルイノシトールは、ホ
スファチジルイノシトール−４−一リン酸、ホスファチ
ジルイノシトール−４，５−二リン酸（以下、ＰＩＰ2
と略することがある）へと段階的に変換される。このＰ
ＩＰ2 が、活性化したＰＬ−ＣによってＩＰ3 とＤＧの
二つのセカンドメッセンジャーに分解される。そしてＩ
Ｐ3 が細胞内カルシウムストアに存在する受容体に結合
してカルシウムが放出される。一方ＤＧは、このカルシ
ウムとともにプロテインキナーゼＣを活性化する。更
に、ＩＰ3 感受性カルシウムストアからＩＩＣＲ機構に
より放出されたカルシウムは、ＩＰ3 非感受性カルシウ
ムストアから、細胞内のカルシウム濃度の上昇によって
カルシウムが放出されるカルシウム誘発カルシウム放出
〔Ｃａ−ｉｎｄｕｃｅｄＣａ ｒｅｌｅａｓｅ（ＣＩＣ
Ｒ）〕機構によりカルシウムが放出されるのを誘発す
る。即ち、細胞内カルシウム濃度上昇の律速段階はＩＰ
3 産生である。ＩＰ3 産生によりＩＰ3 感受性カルシウ
ムストアよりカルシウムが放出され、受容体作動性カル
シウムチャンネルを介してカルシウムが流入する。次い
で、このカルシウムによってＩＰ3 非感受性カルシウム
ストアからカルシウムが放出され、伝播性のカルシウム
波を発生することが報告されている〔Ｂｅｒｒｉｄｇ
ｅ，Ｍ．Ｊ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６５，９
５８３（１９９０）〕。
【０００５】このようにＩＰ3 が直接的若しくは間接的
に関与して起こる細胞内カルシウムストアからのカルシ
ウム放出は、細胞の機能発現において重要な役割を果た
していることが、以下に挙げる実験等において確認され
ている。（１）血小板をトロンボキサンＡ2 やトロンビ
ン等で刺激すると、ＩＰ3 を介して凝集が起こり、血栓
が形成され、心臓や脳における虚血性疾患に連なる〔Ｂ
ｉｏｃｈｉｍｉｃａｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃ
ｔａ，１０８２，２１９−２３８（１９９１）〕。
（２）好中球より産生されるロイコトリエンＢ4 （ＬＴ
Ｂ4 ）は、ＩＰ3を介して細胞内カルシウム濃度を上昇
させ、炎症部位への好中球遊走を起こし、炎症を進展さ
せる〔ＡＮＮ．ＮＹ．ＡＣＡＤ．Ｓｃｉ．，５２４，１
８７−１９５（１９８８）〕。心筋梗塞においてもＬＴ
Ｂ4 産生が壊死層拡大に関与している〔Ｊ．Ｐｈａｒ
ｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２２８，５１０−５２２（１
９８３）〕。（３）気管支平滑筋や血管平滑筋におい
て、ロイコトリエンＤ4 （ＬＴＤ 4 ）やアンジオテンシ
ンII等の刺激によってＩＰ3 が産生され、カルシウムが
放出されることにより収縮が起こり、喘息、高血圧また
は脳血管攣縮等を引き起こすことが示唆されている
〔Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２４４，５０
８−５１５（１９８７）；蛋白質核酸酵素，３６，８８
５−８９５（１９９１）〕。（４）腎において、アンジ
オテンシンIIやブラジキニン等の刺激でＩＰ3 産生とと
もにメサンギウム細胞が増殖し、糸球体腎炎が引き起こ
される。また、その他多くの腎疾患に、ＩＰ3 は影響し
ている〔代謝，２７，４１３−４２５（１９９０）〕。
（５）膵外分泌細胞において、コレシストキニンやアセ
チルコリン等の刺激で、ＩＰ3 を介して細胞内カルシウ
ム濃度が上昇し、プロテアーゼの異常分泌が起こり、膵
炎が引き起こされると考えられている〔Ｐｈａｒｍａｃ
ｏｌｏｇｙ ＆ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，６８，８３−
８７（１９９１）〕。
に関与して起こる細胞内カルシウムストアからのカルシ
ウム放出は、細胞の機能発現において重要な役割を果た
していることが、以下に挙げる実験等において確認され
ている。（１）血小板をトロンボキサンＡ2 やトロンビ
ン等で刺激すると、ＩＰ3 を介して凝集が起こり、血栓
が形成され、心臓や脳における虚血性疾患に連なる〔Ｂ
ｉｏｃｈｉｍｉｃａｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃ
ｔａ，１０８２，２１９−２３８（１９９１）〕。
（２）好中球より産生されるロイコトリエンＢ4 （ＬＴ
Ｂ4 ）は、ＩＰ3を介して細胞内カルシウム濃度を上昇
させ、炎症部位への好中球遊走を起こし、炎症を進展さ
せる〔ＡＮＮ．ＮＹ．ＡＣＡＤ．Ｓｃｉ．，５２４，１
８７−１９５（１９８８）〕。心筋梗塞においてもＬＴ
Ｂ4 産生が壊死層拡大に関与している〔Ｊ．Ｐｈａｒ
ｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２２８，５１０−５２２（１
９８３）〕。（３）気管支平滑筋や血管平滑筋におい
て、ロイコトリエンＤ4 （ＬＴＤ 4 ）やアンジオテンシ
ンII等の刺激によってＩＰ3 が産生され、カルシウムが
放出されることにより収縮が起こり、喘息、高血圧また
は脳血管攣縮等を引き起こすことが示唆されている
〔Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２４４，５０
８−５１５（１９８７）；蛋白質核酸酵素，３６，８８
５−８９５（１９９１）〕。（４）腎において、アンジ
オテンシンIIやブラジキニン等の刺激でＩＰ3 産生とと
もにメサンギウム細胞が増殖し、糸球体腎炎が引き起こ
される。また、その他多くの腎疾患に、ＩＰ3 は影響し
ている〔代謝，２７，４１３−４２５（１９９０）〕。
（５）膵外分泌細胞において、コレシストキニンやアセ
チルコリン等の刺激で、ＩＰ3 を介して細胞内カルシウ
ム濃度が上昇し、プロテアーゼの異常分泌が起こり、膵
炎が引き起こされると考えられている〔Ｐｈａｒｍａｃ
ｏｌｏｇｙ ＆ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，６８，８３−
８７（１９９１）〕。
【０００６】以上のように、内因性カルシウムは種々の
疾患と非常に深い関連を有する。したがって、ＰＬ−Ｃ
に対する阻害物質は、ＩＰ3 産生を抑制することによ
り、細胞内カルシウムストアよりカルシウムの放出を抑
制することが可能である。即ち内因性カルシウム放出抑
制剤として有用である。現在までにＰＬ−Ｃ阻害物質と
して、ｖｉｎａｘａｎｔｈｏｎｅ〔Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ
ｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１３２，４７３７−４７４０
（１９９１）〕、ｈｉｓｐｉｄｏｓｐｅｒｍｉｄｉｎ
〔３５ｎｄ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｔｈｅ Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃ
ｔｓ，Ｋｙｏｔｏ，Ｊａｐａｎ，Ｏｃｔ．１１−１３，
３０６−３１３（１９９３）〕等が報告されているが、
医薬品としては用いられていない。また、ｎｅｏｍｙｃ
ｉｎ，ｓｔｅｒｏｉｄａｍｉｎｅ，ｎｉｔｒｏｃｏｕｍ
ａｒｉｎ等がＰＬ−Ｃ阻害物質として知られているが、
これらの化合物は特異性の点において乏しい。〔Ｄｒｕ
ｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｕｔｕｒｅ，１８，３４３−３
５０（１９９３）〕。
疾患と非常に深い関連を有する。したがって、ＰＬ−Ｃ
に対する阻害物質は、ＩＰ3 産生を抑制することによ
り、細胞内カルシウムストアよりカルシウムの放出を抑
制することが可能である。即ち内因性カルシウム放出抑
制剤として有用である。現在までにＰＬ−Ｃ阻害物質と
して、ｖｉｎａｘａｎｔｈｏｎｅ〔Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ
ｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１３２，４７３７−４７４０
（１９９１）〕、ｈｉｓｐｉｄｏｓｐｅｒｍｉｄｉｎ
〔３５ｎｄ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｔｈｅ Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃ
ｔｓ，Ｋｙｏｔｏ，Ｊａｐａｎ，Ｏｃｔ．１１−１３，
３０６−３１３（１９９３）〕等が報告されているが、
医薬品としては用いられていない。また、ｎｅｏｍｙｃ
ｉｎ，ｓｔｅｒｏｉｄａｍｉｎｅ，ｎｉｔｒｏｃｏｕｍ
ａｒｉｎ等がＰＬ−Ｃ阻害物質として知られているが、
これらの化合物は特異性の点において乏しい。〔Ｄｒｕ
ｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｕｔｕｒｅ，１８，３４３−３
５０（１９９３）〕。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、細胞
内カルシウム濃度の上昇により引き起こされる疾患、例
えばヒトを含めた哺乳動物、特にヒトの血栓症、心臓ま
たは脳における虚血性疾患、アレルギー、気管支喘息、
高血圧、脳血管攣縮、種々の腎疾患、または膵炎等の予
防または治療に有用な、新規なホスファチジルイノシト
ール特異的ＰＬ−Ｃ阻害活性を有するＡＭ６２１１物質
を提供することにある。
内カルシウム濃度の上昇により引き起こされる疾患、例
えばヒトを含めた哺乳動物、特にヒトの血栓症、心臓ま
たは脳における虚血性疾患、アレルギー、気管支喘息、
高血圧、脳血管攣縮、種々の腎疾患、または膵炎等の予
防または治療に有用な、新規なホスファチジルイノシト
ール特異的ＰＬ−Ｃ阻害活性を有するＡＭ６２１１物質
を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】上記目的を達するため各
方面から検討した結果、本発明者らは天然物に着目し、
微生物の醗酵生産物に注目するに至り、各種微生物を検
索した結果、神奈川県横須賀市で採取した海泥サンプル
から新たに分離した糸状菌Ｍ６２１１株が培養液中に目
的物質を蓄積することを確認した。さらに、これらの物
質についてその理化学的性質を詳細に研究した結果、従
来未知の新規物質であって、好ましいＰＬ−Ｃ阻害作用
を有することを確認し、また、その工業的製法を確立
し、本発明を完成するに至った。
方面から検討した結果、本発明者らは天然物に着目し、
微生物の醗酵生産物に注目するに至り、各種微生物を検
索した結果、神奈川県横須賀市で採取した海泥サンプル
から新たに分離した糸状菌Ｍ６２１１株が培養液中に目
的物質を蓄積することを確認した。さらに、これらの物
質についてその理化学的性質を詳細に研究した結果、従
来未知の新規物質であって、好ましいＰＬ−Ｃ阻害作用
を有することを確認し、また、その工業的製法を確立
し、本発明を完成するに至った。
【０００９】本発明に係わるＡＭ６２１１物質は、次に
示される理化学的性質を有する新規物質である。ＡＭ６２１１物質の理化学的性質 （ａ）比旋光度 〔α〕D 23 −３°±５°（ｃ＝１．０，クロロホル
ム） （ｂ）分子式 Ｃ9 Ｈ9 ＮＯ5 （ｃ）ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ２１２．０５６９（Ｍ＋Ｈ）+ （ｄ）元素分析 計算値（％）（Ｃ9 Ｈ9 ＮＯ5 に対して） Ｃ，５１．１９；Ｈ，４．３０；Ｎ，６．６３ 実測値（％） Ｃ，５１．２８；Ｈ，４．３１；Ｎ，６．６０ （ｅ）溶解性 メタノール、アセトニトリル、酢酸エチル、クロロホル
ム、ジメチルスルホキシドに可溶；水、ヘキサンにほと
んど溶けない。 （ｆ）呈色反応 ヨウ素蒸気反応、過マンガン酸カリウム脱色反応に陽性
を示し、塩化第二鉄反応、ドラーゲンドルフ反応、フェ
ーリング反応に陰性を示す。 （ｇ）紫外部吸収スペクトル λCH3CN max ｎｍ（Ｅ1% 1cm ）；２２２（７２０） （ｈ）赤外部吸収スペクトル（ＮａＣｌ板に塗布して測
定） 有意なシグナルは次の通りである。
示される理化学的性質を有する新規物質である。ＡＭ６２１１物質の理化学的性質 （ａ）比旋光度 〔α〕D 23 −３°±５°（ｃ＝１．０，クロロホル
ム） （ｂ）分子式 Ｃ9 Ｈ9 ＮＯ5 （ｃ）ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ２１２．０５６９（Ｍ＋Ｈ）+ （ｄ）元素分析 計算値（％）（Ｃ9 Ｈ9 ＮＯ5 に対して） Ｃ，５１．１９；Ｈ，４．３０；Ｎ，６．６３ 実測値（％） Ｃ，５１．２８；Ｈ，４．３１；Ｎ，６．６０ （ｅ）溶解性 メタノール、アセトニトリル、酢酸エチル、クロロホル
ム、ジメチルスルホキシドに可溶；水、ヘキサンにほと
んど溶けない。 （ｆ）呈色反応 ヨウ素蒸気反応、過マンガン酸カリウム脱色反応に陽性
を示し、塩化第二鉄反応、ドラーゲンドルフ反応、フェ
ーリング反応に陰性を示す。 （ｇ）紫外部吸収スペクトル λCH3CN max ｎｍ（Ｅ1% 1cm ）；２２２（７２０） （ｈ）赤外部吸収スペクトル（ＮａＣｌ板に塗布して測
定） 有意なシグナルは次の通りである。
【００１０】３４９２，１７１７，１６４０，１４０
８，１３１２，１２０４，１１７７，１１１１，１０５
３，９８０，９１１，８６０ｃｍ-1 （ｉ） 1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ3 ） ケミカルシフトは次の通りである。 ２．２１（１Ｈ，ｓ），３．８１（３Ｈ，ｓ），４．６
５（２Ｈ，ｄ），５．９０（１Ｈ，ｓ），６．６０（１
Ｈ，ｓ），６．６７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．３１，１．９
８Ｈｚ） （ｊ）13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１００ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ3 ） ケミカルシフトは次の通りである。
８，１３１２，１２０４，１１７７，１１１１，１０５
３，９８０，９１１，８６０ｃｍ-1 （ｉ） 1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ3 ） ケミカルシフトは次の通りである。 ２．２１（１Ｈ，ｓ），３．８１（３Ｈ，ｓ），４．６
５（２Ｈ，ｄ），５．９０（１Ｈ，ｓ），６．６０（１
Ｈ，ｓ），６．６７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．３１，１．９
８Ｈｚ） （ｊ）13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１００ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ3 ） ケミカルシフトは次の通りである。
【００１１】１６８．５（ｓ），１６８．１（ｓ），１
６２．６（ｓ），１４８．９（ｓ），１２８．４
（ｓ），１２８．１（ｔ），１２７．２（ｄ），５７．
２（ｔ），５２．９（ｑ） （ｋ）塩基性、中性、酸性の区別 中性物質 また、測定条件等によって変化することもあり得るが、
次の理化学的性質も有している。 （ｌ）物質の色及び状態 無色油状物質 （ｍ）ＴＬＣ Ｒｆ＝０．３２ 東京化成社製、シリカゲルスポットフ
ィルムｆ使用展開溶媒：ベンゼン／酢酸エチル（１０：
５） 本発明に係わるＡＭ６２１１物質は、上記した理化学的
性質からみてマレイミドの性状を示し、その構造は下記
の式と推定される。
６２．６（ｓ），１４８．９（ｓ），１２８．４
（ｓ），１２８．１（ｔ），１２７．２（ｄ），５７．
２（ｔ），５２．９（ｑ） （ｋ）塩基性、中性、酸性の区別 中性物質 また、測定条件等によって変化することもあり得るが、
次の理化学的性質も有している。 （ｌ）物質の色及び状態 無色油状物質 （ｍ）ＴＬＣ Ｒｆ＝０．３２ 東京化成社製、シリカゲルスポットフ
ィルムｆ使用展開溶媒：ベンゼン／酢酸エチル（１０：
５） 本発明に係わるＡＭ６２１１物質は、上記した理化学的
性質からみてマレイミドの性状を示し、その構造は下記
の式と推定される。
【００１２】
【化１】 マレイミド骨格を有し、ＡＭ６２１１物質と類似のＵＶ
スペクトル、ＩＲスペクトルを有する化合物としてペン
コライド〔Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，８６，２３７−２４
３（１９６３）〕等が微生物によって生産されることが
知られているが、ＡＭ６２１１物質とは分子式、元素分
析値等により区別される。従ってＡＭ６２１１物質は上
述の性状から公知物質とは明らかに区別され、新規物質
であることが確認された。
スペクトル、ＩＲスペクトルを有する化合物としてペン
コライド〔Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，８６，２３７−２４
３（１９６３）〕等が微生物によって生産されることが
知られているが、ＡＭ６２１１物質とは分子式、元素分
析値等により区別される。従ってＡＭ６２１１物質は上
述の性状から公知物質とは明らかに区別され、新規物質
であることが確認された。
【００１３】本発明に係わるＡＭ６２１１物質は、後述
の通り、タラロマイセス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ）属
に属し、該化合物を生産する能力を有する微生物を培養
することにより製造することができるが、その微生物と
しては、例えば、本発明者らが神奈川県横須賀市で採取
した海泥サンプルから新たに分離した微生物Ｍ６２１１
株が挙げられる。
の通り、タラロマイセス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ）属
に属し、該化合物を生産する能力を有する微生物を培養
することにより製造することができるが、その微生物と
しては、例えば、本発明者らが神奈川県横須賀市で採取
した海泥サンプルから新たに分離した微生物Ｍ６２１１
株が挙げられる。
【００１４】Ｍ６２１１株の菌学的性状を詳細に示すと
次の通りである。 （１）各培地における生育状態 （ａ）ツアペック・酵母エキス寒天培地。 ２５℃で１４日間培養した場合、集落の大きさは直径４
２−４７ｍｍとなる。菌叢はやや厚く平坦でビロード
状、中央部はやや盛り上がり、綿毛状となる。中央部の
色は黄白色ｙｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（３Ａ２）
をしており、周辺部に向かうに従い白色となる。浸出
液、拡散性色素は出さない。周辺部は全縁である。裏面
の中央部は蝋黄色ｗａｘ ｙｅｌｌｏｗ（３Ｂ５）をし
ており、周辺部に向かうに従い淡黄色ｌｉｇｈｔ ｙｅ
ｌｌｏｗ（３Ａ５）、パステル黄色ｐａｓｔｅｌ ｙｅ
ｌｌｏｗ（２Ａ４）となる。３７℃での生育は良好であ
る。
次の通りである。 （１）各培地における生育状態 （ａ）ツアペック・酵母エキス寒天培地。 ２５℃で１４日間培養した場合、集落の大きさは直径４
２−４７ｍｍとなる。菌叢はやや厚く平坦でビロード
状、中央部はやや盛り上がり、綿毛状となる。中央部の
色は黄白色ｙｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（３Ａ２）
をしており、周辺部に向かうに従い白色となる。浸出
液、拡散性色素は出さない。周辺部は全縁である。裏面
の中央部は蝋黄色ｗａｘ ｙｅｌｌｏｗ（３Ｂ５）をし
ており、周辺部に向かうに従い淡黄色ｌｉｇｈｔ ｙｅ
ｌｌｏｗ（３Ａ５）、パステル黄色ｐａｓｔｅｌ ｙｅ
ｌｌｏｗ（２Ａ４）となる。３７℃での生育は良好であ
る。
【００１５】（ｂ）麦芽エキス寒天培地。 ２５℃で１４日間培養した場合、集落の大きさは直径３
１−３７ｍｍとなる。菌叢は薄く平坦、綿毛状である。
菌糸に被われた毛玉状の子のう果が散在する。表面は黄
白色ｙｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（１Ａ２）や白色
となる。周辺部はやや不規則な細かな円きょ歯状とな
る。浸出液、拡散性色素は出さない。裏面はパステル黄
色ｐａｓｔｅｌ ｙｅｌｌｏｗ（３Ａ４）、薄黄色ｐａ
ｌｅ ｙｅｌｌｏｗ（３Ａ３）となる。３７℃での生育
は良好である。
１−３７ｍｍとなる。菌叢は薄く平坦、綿毛状である。
菌糸に被われた毛玉状の子のう果が散在する。表面は黄
白色ｙｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（１Ａ２）や白色
となる。周辺部はやや不規則な細かな円きょ歯状とな
る。浸出液、拡散性色素は出さない。裏面はパステル黄
色ｐａｓｔｅｌ ｙｅｌｌｏｗ（３Ａ４）、薄黄色ｐａ
ｌｅ ｙｅｌｌｏｗ（３Ａ３）となる。３７℃での生育
は良好である。
【００１６】（ｃ）オートミール寒天培地。 ２５℃で１４日間培養した場合、集落の大きさは直径３
６−４０ｍｍとなる。菌叢は薄く平坦で、菌糸に被われ
た毛玉状の子のう果が散在する。中央部は子のう果の形
成が少なくへこむ。白色をしており、周辺部は黄白色ｙ
ｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（３Ａ２）となる。周辺
部は緩やかな円きょ歯状となる。浸出液、拡散性色素は
出さない。裏面中央部は薄黄色ｐａｌｅ ｙｅｌｌｏｗ
（２Ａ４）をしており、周辺部に向かうに従い黄白色ｙ
ｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（３Ａ２）の淡い色とな
る。３７℃での生育は良好である。
６−４０ｍｍとなる。菌叢は薄く平坦で、菌糸に被われ
た毛玉状の子のう果が散在する。中央部は子のう果の形
成が少なくへこむ。白色をしており、周辺部は黄白色ｙ
ｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（３Ａ２）となる。周辺
部は緩やかな円きょ歯状となる。浸出液、拡散性色素は
出さない。裏面中央部は薄黄色ｐａｌｅ ｙｅｌｌｏｗ
（２Ａ４）をしており、周辺部に向かうに従い黄白色ｙ
ｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（３Ａ２）の淡い色とな
る。３７℃での生育は良好である。
【００１７】（ｄ）ツアペック寒天培地。 ２５℃で１４日間培養した場合、集落の大きさは直径２
１−２９ｍｍとなる。菌叢はやや薄く、やや綿毛状、中
央部は盃状となる。中央部の色は白色をしており、周辺
部は薄黄色ｐａｌｅ ｙｅｌｌｏｗ（１Ａ３）や黄白色
ｙｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（１Ａ２）となる。浸
出液、拡散性色素は出さない。周辺部は全縁である。裏
面の中央部は緑黄色ｇｒｅｅｎｉｓｈ ｙｅｌｌｏｗ
（１Ａ６）をしており、周辺部に向かうに従いパステル
黄色ｐａｓｔｅｌ ｙｅｌｌｏｗ（１Ａ４）と淡い色と
なる。３７℃での生育は良好である。
１−２９ｍｍとなる。菌叢はやや薄く、やや綿毛状、中
央部は盃状となる。中央部の色は白色をしており、周辺
部は薄黄色ｐａｌｅ ｙｅｌｌｏｗ（１Ａ３）や黄白色
ｙｅｌｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ（１Ａ２）となる。浸
出液、拡散性色素は出さない。周辺部は全縁である。裏
面の中央部は緑黄色ｇｒｅｅｎｉｓｈ ｙｅｌｌｏｗ
（１Ａ６）をしており、周辺部に向かうに従いパステル
黄色ｐａｓｔｅｌ ｙｅｌｌｏｗ（１Ａ４）と淡い色と
なる。３７℃での生育は良好である。
【００１８】（各培地における生育状態の色の表示はＫ
ｏｒｎｅｒｕｐ，Ａ．ａｎｄ Ｗａｎｓｃｈｅｒ，Ｊ．
Ｈ．１９７８．“Ｍｅｔｈｕｅｎ ｈａｎｄｂｏｏｋ
ｏｆｃｏｌｏｕｒ．３ｒｄ ｅｄ．”Ｅｙｒｅ Ｍｅｔ
ｈｕｅｎ，Ｌｏｎｄｏｎの表示に従った。） （２）生理的諸性状 Ｍ６２１１株は１９−４０℃で生育可能で、最適生育温
度は２８−３６℃である（ポテト・グルコース寒天培地
上で測定した）。また本菌株は、ｐＨ１．０−９．７で
生育可能で、最適生育ｐＨは２．０−８．４である（ポ
テト・グルコース液体培地中で測定した）。
ｏｒｎｅｒｕｐ，Ａ．ａｎｄ Ｗａｎｓｃｈｅｒ，Ｊ．
Ｈ．１９７８．“Ｍｅｔｈｕｅｎ ｈａｎｄｂｏｏｋ
ｏｆｃｏｌｏｕｒ．３ｒｄ ｅｄ．”Ｅｙｒｅ Ｍｅｔ
ｈｕｅｎ，Ｌｏｎｄｏｎの表示に従った。） （２）生理的諸性状 Ｍ６２１１株は１９−４０℃で生育可能で、最適生育温
度は２８−３６℃である（ポテト・グルコース寒天培地
上で測定した）。また本菌株は、ｐＨ１．０−９．７で
生育可能で、最適生育ｐＨは２．０−８．４である（ポ
テト・グルコース液体培地中で測定した）。
【００１９】（３）顕微鏡下における形態的特色 子のう果は表存し、明確な壁ができず緩く編まれた菌糸
に被われ、直径２５０−５００μｍの球形を示し、約２
週間で成熟する。子のう果原基は膨らんだ分枝した菌糸
のかたまりから発達する。子のうは短い連鎖を形成し、
８胞子性であり、楕円形から亜球形（長さ７．５−９．
０μｍ、幅５．０−６．５μｍ）である。子のう胞子は
楕円形（長さ３．０−３．５μｍ、幅２．０−２．３μ
ｍ）で表面はトゲ状であり、帯状隆起はない。Ｐｅｎｉ
ｃｉｌｌｉｕｍ属に属する分生子世代を形成する。スタ
イプは気生菌糸から分枝し、長さは１５−５０μｍ、幅
は２．２−２．５μｍの滑壁である。分生子形成様式は
フィアロフォア形である。ペニシリは複輪生から単輪
生、メトレは２−３本群生し、滑壁、長さは１０−１４
μｍ、幅は２．０−２．５μｍである。フィアライドは
細く長いペン先型、滑壁、長さは１２．０−１７．５μ
ｍ、幅は２．２−２．５μｍである。分生子は楕円形、
滑壁、長さは２．２−２．８μｍ、幅は１．７−２．０
μｍである。
に被われ、直径２５０−５００μｍの球形を示し、約２
週間で成熟する。子のう果原基は膨らんだ分枝した菌糸
のかたまりから発達する。子のうは短い連鎖を形成し、
８胞子性であり、楕円形から亜球形（長さ７．５−９．
０μｍ、幅５．０−６．５μｍ）である。子のう胞子は
楕円形（長さ３．０−３．５μｍ、幅２．０−２．３μ
ｍ）で表面はトゲ状であり、帯状隆起はない。Ｐｅｎｉ
ｃｉｌｌｉｕｍ属に属する分生子世代を形成する。スタ
イプは気生菌糸から分枝し、長さは１５−５０μｍ、幅
は２．２−２．５μｍの滑壁である。分生子形成様式は
フィアロフォア形である。ペニシリは複輪生から単輪
生、メトレは２−３本群生し、滑壁、長さは１０−１４
μｍ、幅は２．０−２．５μｍである。フィアライドは
細く長いペン先型、滑壁、長さは１２．０−１７．５μ
ｍ、幅は２．２−２．５μｍである。分生子は楕円形、
滑壁、長さは２．２−２．８μｍ、幅は１．７−２．０
μｍである。
【００２０】（４）微生物の同定及び寄託 Ｍ６２１１株は子のう果を形成することから子のう菌類
（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔｉｎａ）に属する。子のうが緩く
編まれた菌糸に被われていること、子のうが連鎖してい
ること、分生子世代としてＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属を
有していることからＴａｌａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する
1) 。現在Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ属には約３５種認め
られており、分生子世代はＰａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ，
Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ，Ｇｅｏｓｍｉｔｈｉａ属のい
ずれかである 2) 。分生子世代にＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕ
ｍ属を有し、Ｍ６２１１株の子のう胞子とほぼ同じ大き
さ、トゲ状の表面構造を有する種には、Ｔａｌａｒｏｍ
ｙｃｅｓ ｃｏｎｖｏｌｕｔｕｓ，Ｔ．ｄｅｒｘｉｉ，
Ｔ．ｆｌａｖｕｓ，Ｔ．ｈｅｌｉｃｕｓ ｖａｒ．ｂｏ
ｎｉｎｅｎｓｉｓ，Ｔ．ｉｎｄｉｇｏｔｉｃｕｓ，Ｔ．
ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｓの６種が知られている 1-
5) 。本菌株Ｍ６２１１はこれらのうち、子のう果原基
が膨らんだ分枝した菌糸のかたまりから発達することか
らＴ．ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｓが考えられ 2) 、他
の５種とは区別できた。更に本菌は、子のう胞子の形、
大きさ、表面構造などからＴ．ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍ
ｕｓと良く一致した性状を示した 1)2) 。よって本菌株
Ｍ６２１１はＴ．ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｓと同定
し、タラロマイセス・トラキスペルムス（Ｔ．ｔｒａｃ
ｈｙｓｐｅｒｍｕｓ）Ｍ６２１１株と命名した。
（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔｉｎａ）に属する。子のうが緩く
編まれた菌糸に被われていること、子のうが連鎖してい
ること、分生子世代としてＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ属を
有していることからＴａｌａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する
1) 。現在Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ属には約３５種認め
られており、分生子世代はＰａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ，
Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ，Ｇｅｏｓｍｉｔｈｉａ属のい
ずれかである 2) 。分生子世代にＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕ
ｍ属を有し、Ｍ６２１１株の子のう胞子とほぼ同じ大き
さ、トゲ状の表面構造を有する種には、Ｔａｌａｒｏｍ
ｙｃｅｓ ｃｏｎｖｏｌｕｔｕｓ，Ｔ．ｄｅｒｘｉｉ，
Ｔ．ｆｌａｖｕｓ，Ｔ．ｈｅｌｉｃｕｓ ｖａｒ．ｂｏ
ｎｉｎｅｎｓｉｓ，Ｔ．ｉｎｄｉｇｏｔｉｃｕｓ，Ｔ．
ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｓの６種が知られている 1-
5) 。本菌株Ｍ６２１１はこれらのうち、子のう果原基
が膨らんだ分枝した菌糸のかたまりから発達することか
らＴ．ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｓが考えられ 2) 、他
の５種とは区別できた。更に本菌は、子のう胞子の形、
大きさ、表面構造などからＴ．ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍ
ｕｓと良く一致した性状を示した 1)2) 。よって本菌株
Ｍ６２１１はＴ．ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍｕｓと同定
し、タラロマイセス・トラキスペルムス（Ｔ．ｔｒａｃ
ｈｙｓｐｅｒｍｕｓ）Ｍ６２１１株と命名した。
【００２１】本菌株の凍結乾燥サンプルは、工業技術院
生命工学工業技術研究所に寄託した（ＦＥＲＭ Ｐ−１
４０５８）。参考文献 １）Ｓｔｏｌｋ，Ａ．Ｃ．ａｎｄ Ｓａｍｓｏｎ，Ｒ．
Ａ．，“Ｔｈｅ ｇｅｎｕｓ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅ
ｓ．ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ
ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅｒａ II”，Ｓｔｕ
ｄ．Ｍｙｃｏｌ．，２，６５（１９８２） ２）高田正樹，真菌の分離と分類・同定 Ｔａｌａｒｏ
ｍｙｃｅｓ属．防菌防黴，２０，６５１−６６１（１９
９２） ３）Ｔａｋａｄａ，Ｍ．ａｎｄ Ｕｄａｇａｗａ，
Ｓ．，Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｉｎｄｉｇｏｔｉｃｕ
ｓ，ａ ｎｅｗ ｓｐｅｃｉｅｓ ｆｒｏｍ ｓｏｉ
ｌ．Ｍｙｃｏｔａｘｏｎ，４６，１２９−１３４（１９
９３） ４）Ｕｄａｇａｗａ，Ｓ．，Ｔｈｒｅｅ ｎｅｗ ｓｐ
ｅｃｉｅｓ ｏｆ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｆｒｏｍ
Ｎｅｐａｌ．Ｍｙｃｏｔａｘｏｎ，４８，１４１−１
５６（１９９３） ５）Ｙａｇｕｃｈｉ，Ｔ．，Ｉｍａｉ，Ｓ．ａｎｄ Ｕ
ｄａｇａｗａ，Ｓ．，Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｈｅｌ
ｉｃｕｓ ｖａｒ．ｂｏｎｉｎｅｎｓｉｓ，ａｎｅｗ
ｖａｒｉｅｔｙ ｆｒｏｍ Ｊａｐａｎｅａｓｅ ｓｏ
ｉｌ．Ｔｒａｎｓ．Ｍｙｃｏｌ．Ｓｏｃ．Ｊａｐａｎ，
３３，５１１−５１５（１９９３） ＡＭ６２１１物質の生産は単に説明を目的として挙げた
だけの本明細書記載の特定の微生物の使用に限定される
ものではないことを理解すべきである。この発明は記載
の微生物からＸ線照射、紫外線照射、Ｎ−メチル−Ｎ’
−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、２−アミノプリン
等の変異処理により取得できる人工変異株ならびに自然
変異株を含めてＡＭ６２１１物質を生産しうる全ての変
異株の使用をも包含するものである。本発明に係わるＡ
Ｍ６２１１物質は、Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する
該物質生産菌（例えばＴａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｔｒａ
ｃｈｙｓｐｅｒｍｕｓ Ｍ６２１１株）を資化しうる炭
素及び窒素源を含む栄養培地中に接種し、好気的条件下
で培養することにより（例えば、振盪培養、通気攪拌培
養等）、生産せしめることができる。
生命工学工業技術研究所に寄託した（ＦＥＲＭ Ｐ−１
４０５８）。参考文献 １）Ｓｔｏｌｋ，Ａ．Ｃ．ａｎｄ Ｓａｍｓｏｎ，Ｒ．
Ａ．，“Ｔｈｅ ｇｅｎｕｓ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅ
ｓ．ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ
ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅｒａ II”，Ｓｔｕ
ｄ．Ｍｙｃｏｌ．，２，６５（１９８２） ２）高田正樹，真菌の分離と分類・同定 Ｔａｌａｒｏ
ｍｙｃｅｓ属．防菌防黴，２０，６５１−６６１（１９
９２） ３）Ｔａｋａｄａ，Ｍ．ａｎｄ Ｕｄａｇａｗａ，
Ｓ．，Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｉｎｄｉｇｏｔｉｃｕ
ｓ，ａ ｎｅｗ ｓｐｅｃｉｅｓ ｆｒｏｍ ｓｏｉ
ｌ．Ｍｙｃｏｔａｘｏｎ，４６，１２９−１３４（１９
９３） ４）Ｕｄａｇａｗａ，Ｓ．，Ｔｈｒｅｅ ｎｅｗ ｓｐ
ｅｃｉｅｓ ｏｆ Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｆｒｏｍ
Ｎｅｐａｌ．Ｍｙｃｏｔａｘｏｎ，４８，１４１−１
５６（１９９３） ５）Ｙａｇｕｃｈｉ，Ｔ．，Ｉｍａｉ，Ｓ．ａｎｄ Ｕ
ｄａｇａｗａ，Ｓ．，Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｈｅｌ
ｉｃｕｓ ｖａｒ．ｂｏｎｉｎｅｎｓｉｓ，ａｎｅｗ
ｖａｒｉｅｔｙ ｆｒｏｍ Ｊａｐａｎｅａｓｅ ｓｏ
ｉｌ．Ｔｒａｎｓ．Ｍｙｃｏｌ．Ｓｏｃ．Ｊａｐａｎ，
３３，５１１−５１５（１９９３） ＡＭ６２１１物質の生産は単に説明を目的として挙げた
だけの本明細書記載の特定の微生物の使用に限定される
ものではないことを理解すべきである。この発明は記載
の微生物からＸ線照射、紫外線照射、Ｎ−メチル−Ｎ’
−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン、２−アミノプリン
等の変異処理により取得できる人工変異株ならびに自然
変異株を含めてＡＭ６２１１物質を生産しうる全ての変
異株の使用をも包含するものである。本発明に係わるＡ
Ｍ６２１１物質は、Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ属に属する
該物質生産菌（例えばＴａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｔｒａ
ｃｈｙｓｐｅｒｍｕｓ Ｍ６２１１株）を資化しうる炭
素及び窒素源を含む栄養培地中に接種し、好気的条件下
で培養することにより（例えば、振盪培養、通気攪拌培
養等）、生産せしめることができる。
【００２２】炭素源としては、グルコース、デキストリ
ン、シュークロース、フラクトース、グリセリン、澱
粉、麦芽糖、糖蜜等が単独または混合物として用いられ
る。窒素源としては、大豆粉、綿実粉、コーンスティー
プリカー、肉エキス、ペプトン、小麦胚芽、酵母エキ
ス、オートミール、グルテンミール、魚粉、アンモニウ
ム塩（例えば、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、
リン酸アンモニウム等）、尿素、アミノ酸等が単独また
は混合物として用いられる。必要ある場合には、例えば
次のような無機塩類を添加してもよい：塩化ナトリウ
ム、塩化カリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、
炭酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、マ
グネシウム塩、銅塩、コバルト塩、鉄塩、亜鉛塩、マン
ガン塩等。また培地の発泡の著しい時には、必要に応じ
て液体パラフィン、動物油、鉱物油、シリコン等を添加
してもよい。
ン、シュークロース、フラクトース、グリセリン、澱
粉、麦芽糖、糖蜜等が単独または混合物として用いられ
る。窒素源としては、大豆粉、綿実粉、コーンスティー
プリカー、肉エキス、ペプトン、小麦胚芽、酵母エキ
ス、オートミール、グルテンミール、魚粉、アンモニウ
ム塩（例えば、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、
リン酸アンモニウム等）、尿素、アミノ酸等が単独また
は混合物として用いられる。必要ある場合には、例えば
次のような無機塩類を添加してもよい：塩化ナトリウ
ム、塩化カリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、
炭酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、マ
グネシウム塩、銅塩、コバルト塩、鉄塩、亜鉛塩、マン
ガン塩等。また培地の発泡の著しい時には、必要に応じ
て液体パラフィン、動物油、鉱物油、シリコン等を添加
してもよい。
【００２３】培養方法としては、一般の微生物代謝産物
の生産方法と同様に行えばよく、固体培養でも液体培養
でもよい。液体培養の場合は、静置培養、攪拌培養、振
盪培養または通気培養等のいずれを実施してもよいが、
特に振盪培養又は深部通気攪拌培養が好ましい。培養温
度は本ＡＭ６２１１物質生産菌が本物質を生産する範囲
内で適宜変更しうるが、通常は２８−３６℃、好ましく
は３０℃前後で培養するのがよい。好ましい培地のｐＨ
は２−８．４の範囲で、培養時間は培養条件や培養量に
よって異なるが、通常は１日−８日間である。培養物か
ら目的とするＡＭ６２１１物質を採取するには、微生物
の生産する代謝物の培養物から採取するのに通常使用さ
れる分離手段が適宜利用される。ＡＭ６２１１物質は主
として培養濾液中に存在するので、培養濾液より通常の
分離手段、例えば溶媒抽出法、イオン交換樹脂法又は吸
着若しくは分配クロマトグラフィー法及びゲル濾過法等
を単独または組み合わせて行うことにより精製できる。
また高速液体クロマトグラフィーや薄層クロマトグラフ
ィーなども抽出精製に利用することができる。
の生産方法と同様に行えばよく、固体培養でも液体培養
でもよい。液体培養の場合は、静置培養、攪拌培養、振
盪培養または通気培養等のいずれを実施してもよいが、
特に振盪培養又は深部通気攪拌培養が好ましい。培養温
度は本ＡＭ６２１１物質生産菌が本物質を生産する範囲
内で適宜変更しうるが、通常は２８−３６℃、好ましく
は３０℃前後で培養するのがよい。好ましい培地のｐＨ
は２−８．４の範囲で、培養時間は培養条件や培養量に
よって異なるが、通常は１日−８日間である。培養物か
ら目的とするＡＭ６２１１物質を採取するには、微生物
の生産する代謝物の培養物から採取するのに通常使用さ
れる分離手段が適宜利用される。ＡＭ６２１１物質は主
として培養濾液中に存在するので、培養濾液より通常の
分離手段、例えば溶媒抽出法、イオン交換樹脂法又は吸
着若しくは分配クロマトグラフィー法及びゲル濾過法等
を単独または組み合わせて行うことにより精製できる。
また高速液体クロマトグラフィーや薄層クロマトグラフ
ィーなども抽出精製に利用することができる。
【００２４】ＡＭ６２１１物質の分離精製は上記のよう
に既知の方法を適宜利用して行うが、例えば次のように
してもよい。まず培養液を遠心分離し、遠心上清液を得
る。得られた上清液を酢酸エチル等の有機溶媒で抽出
し、抽出液を濃縮する。濃縮残査をシリカゲルカラムク
ロマトに付し、ベンゼン、酢酸エチル、酢酸等の混合溶
媒で溶出し、目的画分を集め濃縮後、更にシリカゲルカ
ラムクロマトに付し、ヘキサン、酢酸エチル、酢酸等の
混合溶媒で溶出し、目的画分を集め濃縮後、減圧乾燥す
ることによりＡＭ６２１１物質が得られる。
に既知の方法を適宜利用して行うが、例えば次のように
してもよい。まず培養液を遠心分離し、遠心上清液を得
る。得られた上清液を酢酸エチル等の有機溶媒で抽出
し、抽出液を濃縮する。濃縮残査をシリカゲルカラムク
ロマトに付し、ベンゼン、酢酸エチル、酢酸等の混合溶
媒で溶出し、目的画分を集め濃縮後、更にシリカゲルカ
ラムクロマトに付し、ヘキサン、酢酸エチル、酢酸等の
混合溶媒で溶出し、目的画分を集め濃縮後、減圧乾燥す
ることによりＡＭ６２１１物質が得られる。
【００２５】ＡＭ６２１１物質は、薬理物質としての使
用の他、単に、ＰＬ−Ｃ阻害物質としての使用も考えら
れる。薬理物質として投与する場合には、ＡＭ６２１１
物質の有効量を含有する製剤を調製して使用することが
好ましい。有効成分の治療有効量は治療される各患者の
年齢および条件によって変動するが、一般に有効成分
を、静脈内投与の場合には人の体重１Ｋｇ当たり１日量
０．０１−１０ｍｇ、筋肉内投与の場合には人の体重１
Ｋｇ当たり１日量０．１−１０ｍｇ、経口投与の場合に
は人の体重１Ｋｇ当たり１日量０．５−２０ｍｇで、細
胞内カルシウム濃度の上昇により引き起こされる疾患の
予防または治療のために投与することができる。
用の他、単に、ＰＬ−Ｃ阻害物質としての使用も考えら
れる。薬理物質として投与する場合には、ＡＭ６２１１
物質の有効量を含有する製剤を調製して使用することが
好ましい。有効成分の治療有効量は治療される各患者の
年齢および条件によって変動するが、一般に有効成分
を、静脈内投与の場合には人の体重１Ｋｇ当たり１日量
０．０１−１０ｍｇ、筋肉内投与の場合には人の体重１
Ｋｇ当たり１日量０．１−１０ｍｇ、経口投与の場合に
は人の体重１Ｋｇ当たり１日量０．５−２０ｍｇで、細
胞内カルシウム濃度の上昇により引き起こされる疾患の
予防または治療のために投与することができる。
【００２６】本発明に係わるＡＭ６２１１物質が対象と
する、細胞内カルシウム濃度の上昇により引き起こされ
る疾患とは、具体的には、血栓症、心臓または脳におけ
る虚血性疾患、アレルギー、気管支喘息、高血圧、脳血
管攣縮、種々の腎疾患または膵炎等が例示される。次に
実施例によって本発明をさらに説明するが、本発明の範
囲はこれらに限定されるものではない。
する、細胞内カルシウム濃度の上昇により引き起こされ
る疾患とは、具体的には、血栓症、心臓または脳におけ
る虚血性疾患、アレルギー、気管支喘息、高血圧、脳血
管攣縮、種々の腎疾患または膵炎等が例示される。次に
実施例によって本発明をさらに説明するが、本発明の範
囲はこれらに限定されるものではない。
【００２７】
【実施例１】ＡＭ６２１１物質の醗酵生産 グルコース１％、デキストリン１％、イーストエキス
０．５％、カゼイン水解物０．５％、ＣａＣＯ3 ０．１
％、セライト１％の組成の培地（滅菌前ｐＨ６．５）を
５００ｍｌ容三角フラスコに各々１００ｍｌずつ分注
し、１１５℃で１５分間滅菌した。これらにタラロマイ
セス・トラキスペルムス（Ｔ．ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍ
ｕｓ）Ｍ６２１１株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４０５８）の斜
面培養物を各々一白金耳ずつ接種し、ロ−タリーシェー
カー（毎分２００回転）で２６℃、７２時間培養した。
０．５％、カゼイン水解物０．５％、ＣａＣＯ3 ０．１
％、セライト１％の組成の培地（滅菌前ｐＨ６．５）を
５００ｍｌ容三角フラスコに各々１００ｍｌずつ分注
し、１１５℃で１５分間滅菌した。これらにタラロマイ
セス・トラキスペルムス（Ｔ．ｔｒａｃｈｙｓｐｅｒｍ
ｕｓ）Ｍ６２１１株（ＦＥＲＭ Ｐ−１４０５８）の斜
面培養物を各々一白金耳ずつ接種し、ロ−タリーシェー
カー（毎分２００回転）で２６℃、７２時間培養した。
【００２８】次にグルコース２％、ペプトン１％、コー
ンスティープリカー１％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．２％、Ｍｇ
ＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．１％、セライト１％、ＦＳ−ア
ンチフォーム（Ｄｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｋ．Ｋ社製）
０．０２％からなる本培養培地（滅菌前ｐＨ６．５）を
調整しておき、この本培地２００ｌを３００ｌ容ファー
メンターに注入した。これを１２０℃で２０分間滅菌し
た後、先に得た前培養物を０．５％接種し、２８℃で４
日間培養した。攪拌は１５０ｒｐｍ、通気量は２６０ｌ
／分で行った。
ンスティープリカー１％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．２％、Ｍｇ
ＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．１％、セライト１％、ＦＳ−ア
ンチフォーム（Ｄｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｋ．Ｋ社製）
０．０２％からなる本培養培地（滅菌前ｐＨ６．５）を
調整しておき、この本培地２００ｌを３００ｌ容ファー
メンターに注入した。これを１２０℃で２０分間滅菌し
た後、先に得た前培養物を０．５％接種し、２８℃で４
日間培養した。攪拌は１５０ｒｐｍ、通気量は２６０ｌ
／分で行った。
【００２９】ＡＭ６２１１物質の抽出、精製 上記の培養方法で得られた培養物２００ｌをバスケット
遠心により菌体を除去し、培養上清液１８０ｌを得た。
この培養上清液に酢酸エチル９０ｌを加え、アンモニア
水でｐＨ７．０に調整し酢酸エチル抽出を行い、抽出液
を減圧下濃縮し、約２０ｇの油状物質を得た。この油状
物質を予めベンゼンで作製したシリカゲルカラム（４
ｌ）にチャージし、ベンゼン−酢酸エチル−酢酸（１
０：２：０．０５）の混合溶媒にて溶出を行い、５００
ｍｌずつ分画した。フラクションＮｏ．３６−４５にＡ
Ｍ６２１１物質が溶出された。これらのフラクションを
集め減圧濃縮し、予めヘキサン−酢酸エチル−酢酸（１
０：５：０．０５）で作製したシリカゲルカラム（４０
０ｍｌ）にチャージし、同混合溶媒で展開し、１７ｇず
つ分画した。各フラクションをベンゼン−酢酸エチル
（１０：５）の系でシリカゲル薄層クロマトグラフィー
に付すと、フラクションＮｏ．１０７−１３０にＲｆ値
０．３２を示すＡＭ６２１１物質のみを示すスポットが
観察された。これらの分画を集め減圧下濃縮すると、単
一なＡＭ６２１１物質が無色油状物として１．５２ｇ得
られた。
遠心により菌体を除去し、培養上清液１８０ｌを得た。
この培養上清液に酢酸エチル９０ｌを加え、アンモニア
水でｐＨ７．０に調整し酢酸エチル抽出を行い、抽出液
を減圧下濃縮し、約２０ｇの油状物質を得た。この油状
物質を予めベンゼンで作製したシリカゲルカラム（４
ｌ）にチャージし、ベンゼン−酢酸エチル−酢酸（１
０：２：０．０５）の混合溶媒にて溶出を行い、５００
ｍｌずつ分画した。フラクションＮｏ．３６−４５にＡ
Ｍ６２１１物質が溶出された。これらのフラクションを
集め減圧濃縮し、予めヘキサン−酢酸エチル−酢酸（１
０：５：０．０５）で作製したシリカゲルカラム（４０
０ｍｌ）にチャージし、同混合溶媒で展開し、１７ｇず
つ分画した。各フラクションをベンゼン−酢酸エチル
（１０：５）の系でシリカゲル薄層クロマトグラフィー
に付すと、フラクションＮｏ．１０７−１３０にＲｆ値
０．３２を示すＡＭ６２１１物質のみを示すスポットが
観察された。これらの分画を集め減圧下濃縮すると、単
一なＡＭ６２１１物質が無色油状物として１．５２ｇ得
られた。
【００３０】
【実施例２】ＡＭ６２１１物質のホスホリパーゼＣ阻害作用 （ａ）ホスホリパーゼＣ酵素液の調製。 ホスホリパーゼＣβの調製は、竹縄らの方法〔実験医
学，１１，２５７−２６１（１９９３）〕に従って調整
した。即ちウイスター系ラット（５週齢、雄、７０−９
０ｇ）の脳１００ｇを、ホモゲナイズ用２０ｍＭトリス
緩衝液〔２０ｍＭトリス・塩酸，１ｍＭ ＥＤＴＡ（Ｅ
ｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ
Ａｃｉｄ；東京化成社製），１００μＭ ＰＭＳＦ
（Ｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ Ｆｌｕ
ｏｒｉｄｅ；Ｓｉｇｍａ社製），１００μＭ ＤＩＦＰ
（Ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａ
ｔｅ；Ｓｉｇｍａ社製），２μＭ ロイペプチン（Ｓｉ
ｇｍａ社製）；ｐＨ７．４〕２５０ｍｌ中でホモゲナイ
ザー（バイオトロン ＢＴ型、池田理化社製）を用いて
ホモゲナイズした。ホモジネートを１００，０００×
ｇ，４℃で６０分間遠心した。得られたペレットを１Ｍ
ＮａＣｌ含有ホモゲナイズ用２０ｍＭトリス緩衝液２
５０ｍｌ中でホモゲナイズし、ホモジネートを１００，
０００×ｇ，４℃で６０分間遠心した。得られたペレッ
トを再び１Ｍ ＮａＣｌ含有ホモゲナイズ用２０ｍＭト
リス緩衝液２５０ｍｌ中でホモゲナイズし、ホモジネー
トを１００，０００×ｇ，４℃で６０分間遠心した。得
られたペレットを１％コール酸ナトリウム含有ホモゲナ
イズ用２０ｍＭトリス緩衝液２５０ｍｌ中で懸濁させ、
１００，０００×ｇ，４℃で６０分間遠心した。その上
清液をカラム用２０ｍＭトリス緩衝液（２０ｍＭトリス
・塩酸，１ｍＭ ＥＤＴＡ，１００μＭ ＰＭＳＦ，１
００μＭ ＤＩＦＰ；ｐＨ７．６）で平衡化したＱ Ｓ
ｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆ．Ｆ．（Ｐｈａｒｍａｃｉａ社
製、カラム容量５０ｍｌ）にチャージし、０，０．２，
０．６，１．０Ｍ ＮａＣｌ含有カラム用２０ｍＭトリ
ス緩衝液のステップワイズグラジェントで各々２００ｍ
ｌずつ溶出した。０．６Ｍ ＮａＣｌ含有カラム用トリ
ス緩衝液画分にホスホリパーゼＣβ活性が溶出し、これ
をホスホリパーゼＣβ酵素液として分注し、−８０℃で
保存し、必要に応じて融解して用いた。
学，１１，２５７−２６１（１９９３）〕に従って調整
した。即ちウイスター系ラット（５週齢、雄、７０−９
０ｇ）の脳１００ｇを、ホモゲナイズ用２０ｍＭトリス
緩衝液〔２０ｍＭトリス・塩酸，１ｍＭ ＥＤＴＡ（Ｅ
ｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ
Ａｃｉｄ；東京化成社製），１００μＭ ＰＭＳＦ
（Ｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ Ｆｌｕ
ｏｒｉｄｅ；Ｓｉｇｍａ社製），１００μＭ ＤＩＦＰ
（Ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｆｌｕｏｒｏｐｈｏｓｐｈａ
ｔｅ；Ｓｉｇｍａ社製），２μＭ ロイペプチン（Ｓｉ
ｇｍａ社製）；ｐＨ７．４〕２５０ｍｌ中でホモゲナイ
ザー（バイオトロン ＢＴ型、池田理化社製）を用いて
ホモゲナイズした。ホモジネートを１００，０００×
ｇ，４℃で６０分間遠心した。得られたペレットを１Ｍ
ＮａＣｌ含有ホモゲナイズ用２０ｍＭトリス緩衝液２
５０ｍｌ中でホモゲナイズし、ホモジネートを１００，
０００×ｇ，４℃で６０分間遠心した。得られたペレッ
トを再び１Ｍ ＮａＣｌ含有ホモゲナイズ用２０ｍＭト
リス緩衝液２５０ｍｌ中でホモゲナイズし、ホモジネー
トを１００，０００×ｇ，４℃で６０分間遠心した。得
られたペレットを１％コール酸ナトリウム含有ホモゲナ
イズ用２０ｍＭトリス緩衝液２５０ｍｌ中で懸濁させ、
１００，０００×ｇ，４℃で６０分間遠心した。その上
清液をカラム用２０ｍＭトリス緩衝液（２０ｍＭトリス
・塩酸，１ｍＭ ＥＤＴＡ，１００μＭ ＰＭＳＦ，１
００μＭ ＤＩＦＰ；ｐＨ７．６）で平衡化したＱ Ｓ
ｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆ．Ｆ．（Ｐｈａｒｍａｃｉａ社
製、カラム容量５０ｍｌ）にチャージし、０，０．２，
０．６，１．０Ｍ ＮａＣｌ含有カラム用２０ｍＭトリ
ス緩衝液のステップワイズグラジェントで各々２００ｍ
ｌずつ溶出した。０．６Ｍ ＮａＣｌ含有カラム用トリ
ス緩衝液画分にホスホリパーゼＣβ活性が溶出し、これ
をホスホリパーゼＣβ酵素液として分注し、−８０℃で
保存し、必要に応じて融解して用いた。
【００３１】同様にホスホリパーゼＣδについてもＨｏ
ｍｍａ，Ｙ．らの方法〔Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２
６３，６５９２−６５９８（１９８８）〕に従ってホス
ホリパーゼＣδ酵素液を調製した。 （ｂ）ホスホリパーゼＣ阻害活性の測定。 ホスホリパーゼＣ阻害活性の測定は、Ｈｏｍｍａ，Ｙ．
らの方法〔Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６３，６５９
２−６５９８（１９８８）〕に従ってアッセイした。即
ち、アッセイ用緩衝液｛５０ｍＭ ＭＥＳ〔２−（Ｎ−
Ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏ）ｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ
Ａｃｉｄ；和光純薬〕，１ｍＭ ＣａＣｌ2 ，５０ｍ
Ｍ ＫＣｌ，０．１ｍＭ ＥＤＴＡ，；ｐＨ６．８（濃
度はいずれも最終濃度）｝５５μｌに、被検化合物４５
μｌ及び上で調整したホスホリパーゼＣ酵素液（ホスホ
リパーゼＣβ酵素液、またはホスホリパーゼＣδ酵素
液）６０μｌを加えて、３７℃で６０分間プレインキュ
ベーションを行った。次にこの反応液にアッセイ用基質
溶液〔１０μＭ ＰＩＰ2 （Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ
ｉｎｏｓｉｔｏｌ−４，５−ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ；
Ｓｉｇｍａ社製），５０００ｄｐｍ 3Ｈ−ＰＩＰ2 （Ｎ
ｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ社製），５μＭ
ＰＥ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍ
ｉｎｅ；Ｓｉｇｍａ社製），１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ（Ｂ
ｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ Ａｌｂｕｍｉｎ；Ｓｉｇｍａ
社製）（濃度はいずれも最終濃度、放射能は最終の放射
能）〕を２０μｌ加えて反応を開始し、３７℃で６０分
間反応を行った。その後、１Ｎ塩酸２５μｌおよびクロ
ロホルム−メタノール（２：１，ｖ／ｖ）溶液５００μ
ｌを加えて反応を停止し、１８，５００×ｇで１分間遠
心分離を行い上清液２００μｌを採取し、上清液中の放
射活性を液体シンチレーションカウンター（Ａｌｏｋａ
社製、ＬＳＣ−７００型）にて測定した。被検化合物の
阻害活性は以下の方法で計算した。
ｍｍａ，Ｙ．らの方法〔Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２
６３，６５９２−６５９８（１９８８）〕に従ってホス
ホリパーゼＣδ酵素液を調製した。 （ｂ）ホスホリパーゼＣ阻害活性の測定。 ホスホリパーゼＣ阻害活性の測定は、Ｈｏｍｍａ，Ｙ．
らの方法〔Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６３，６５９
２−６５９８（１９８８）〕に従ってアッセイした。即
ち、アッセイ用緩衝液｛５０ｍＭ ＭＥＳ〔２−（Ｎ−
Ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｏ）ｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ
Ａｃｉｄ；和光純薬〕，１ｍＭ ＣａＣｌ2 ，５０ｍ
Ｍ ＫＣｌ，０．１ｍＭ ＥＤＴＡ，；ｐＨ６．８（濃
度はいずれも最終濃度）｝５５μｌに、被検化合物４５
μｌ及び上で調整したホスホリパーゼＣ酵素液（ホスホ
リパーゼＣβ酵素液、またはホスホリパーゼＣδ酵素
液）６０μｌを加えて、３７℃で６０分間プレインキュ
ベーションを行った。次にこの反応液にアッセイ用基質
溶液〔１０μＭ ＰＩＰ2 （Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ
ｉｎｏｓｉｔｏｌ−４，５−ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ；
Ｓｉｇｍａ社製），５０００ｄｐｍ 3Ｈ−ＰＩＰ2 （Ｎ
ｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ社製），５μＭ
ＰＥ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍ
ｉｎｅ；Ｓｉｇｍａ社製），１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ（Ｂ
ｏｖｉｎｅ Ｓｅｒｕｍ Ａｌｂｕｍｉｎ；Ｓｉｇｍａ
社製）（濃度はいずれも最終濃度、放射能は最終の放射
能）〕を２０μｌ加えて反応を開始し、３７℃で６０分
間反応を行った。その後、１Ｎ塩酸２５μｌおよびクロ
ロホルム−メタノール（２：１，ｖ／ｖ）溶液５００μ
ｌを加えて反応を停止し、１８，５００×ｇで１分間遠
心分離を行い上清液２００μｌを採取し、上清液中の放
射活性を液体シンチレーションカウンター（Ａｌｏｋａ
社製、ＬＳＣ−７００型）にて測定した。被検化合物の
阻害活性は以下の方法で計算した。
【００３２】阻害活性（％）＝｛１−（Ａ−Ｃ）／（Ｂ
−Ｃ）｝×１００ Ａ：被検化合物が反応液中に存在するときの放射活性 Ｂ：被検化合物が反応液中に存在しないときの放射活性 Ｃ：反応液中に被検化合物及び酵素液が存在しないとき
の放射活性 ＡＭ６２１１物質についてラット脳由来のホスホリパー
ゼＣβおよびホスホリパーゼＣδの活性を５０％阻害す
る濃度（ＩＣ50値）を求めた。その結果、ＡＭ６２１１
物質のホスホリパーゼＣβ及びホスホリパーゼＣδに対
するＩＣ50値はそれぞれ９．４μｇ／ｍｌ，９．６μｇ
／ｍｌであった。
−Ｃ）｝×１００ Ａ：被検化合物が反応液中に存在するときの放射活性 Ｂ：被検化合物が反応液中に存在しないときの放射活性 Ｃ：反応液中に被検化合物及び酵素液が存在しないとき
の放射活性 ＡＭ６２１１物質についてラット脳由来のホスホリパー
ゼＣβおよびホスホリパーゼＣδの活性を５０％阻害す
る濃度（ＩＣ50値）を求めた。その結果、ＡＭ６２１１
物質のホスホリパーゼＣβ及びホスホリパーゼＣδに対
するＩＣ50値はそれぞれ９．４μｇ／ｍｌ，９．６μｇ
／ｍｌであった。
【００３３】なお、ＡＭ６２１１物質はヒト細胞質由来
のホスホリパーゼＡ2 、豚膵由来のホスホリパーゼＡ2
及び微生物由来ホスホリパーゼＤ等のホスホリパーゼに
対しては、２００μｇ／ｍｌの濃度で全く阻害活性を示
さなかった。また本物質は、パパイン、カテプシンＢ等
のチオールプロテアーゼ、トリプシン、α−キモトリプ
シン等のセリンプロテアーゼに対しても、２００μｇ／
ｍｌの濃度で全く阻害活性を示さなかった。
のホスホリパーゼＡ2 、豚膵由来のホスホリパーゼＡ2
及び微生物由来ホスホリパーゼＤ等のホスホリパーゼに
対しては、２００μｇ／ｍｌの濃度で全く阻害活性を示
さなかった。また本物質は、パパイン、カテプシンＢ等
のチオールプロテアーゼ、トリプシン、α−キモトリプ
シン等のセリンプロテアーゼに対しても、２００μｇ／
ｍｌの濃度で全く阻害活性を示さなかった。
【００３４】
【発明の効果】本発明はＡＭ６２１１物質を提供するも
のであるが、この物質は従来未知の新規生理活性物質で
あって、ホスファチジルイノシトール特異的ホスホリパ
ーゼＣ阻害活性作用を示し、医薬、例えば血栓症、心臓
または脳における虚血性疾患、アレルギー、気管支喘
息、高血圧、脳血管攣縮、種々の腎疾患または膵炎等の
予防または治療剤として有用である。
のであるが、この物質は従来未知の新規生理活性物質で
あって、ホスファチジルイノシトール特異的ホスホリパ
ーゼＣ阻害活性作用を示し、医薬、例えば血栓症、心臓
または脳における虚血性疾患、アレルギー、気管支喘
息、高血圧、脳血管攣縮、種々の腎疾患または膵炎等の
予防または治療剤として有用である。
【００３５】また本発明によって、微生物を利用する上
記物質の製法も確立された。
記物質の製法も確立された。
【図１】図１はＡＭ６２１１物質のアセトニトリル中で
の紫外部吸収スペクトルを示す。
の紫外部吸収スペクトルを示す。
【図２】図２はＡＭ６２１１物質のＮａＣｌ板に塗布し
た赤外部吸収スペクトルを示す。
た赤外部吸収スペクトルを示す。
【図３】図３はＡＭ６２１１物質のＣＤＣｌ3 中で測定
した 1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）スペクトルを示す。
した 1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）スペクトルを示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 35/70 ＡＢＮ 7431−4Ｃ ＡＢＳ 7431−4Ｃ ＡＢＵ 7431−4Ｃ ＡＣＢ 7431−4Ｃ ＡＣＤ 7431−4Ｃ ＡＣＪ 7431−4Ｃ ＡＣＶ 7431−4Ｃ Ｃ１２Ｎ 9/16 Ｄ (Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:645）
Claims (2)
- 【請求項１】 下記の理化学的性質を有するＡＭ６２１
１物質。 （ａ）比旋光度 〔α〕D 23 −３°±５°（ｃ＝１．０，クロロホル
ム） （ｂ）分子式 Ｃ9 Ｈ9 ＮＯ5 （ｃ）ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ ２１２．０５６９（Ｍ＋Ｈ）+ （ｄ）元素分析 計算値（％）（Ｃ9 Ｈ9 ＮＯ5 に対して） Ｃ，５１．１９；Ｈ，４．３０；Ｎ，６．６３ 実測値（％） Ｃ，５１．２８；Ｈ，４．３１；Ｎ，６．６０ （ｅ）溶解性 メタノール、アセトニトリル、酢酸エチル、クロロホル
ム、ジメチルスルホキシドに可溶；水、ヘキサンにはほ
とんど溶けない。 （ｆ）呈色反応 ヨウ素蒸気反応、過マンガン酸カリウム脱色反応に陽性
を示し、塩化第二鉄反応、ドラーゲンドルフ反応、フェ
ーリング反応に陰性を示す。 （ｇ）紫外部吸収スペクトル λCH3CN max ｎｍ（Ｅ1% 1cm ）；２２２（７２０） （ｈ）赤外部吸収スペクトル（ＮａＣｌ板に塗布して測
定） 有意なシグナルは次の通りである。 ３４９２，１７１７，１６４０，１４０８，１３１２，
１２０４，１１７７，１１１１，１０５３，９８０，９
１１，８６０ｃｍ-1 （ｉ） 1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ3 ） ケミカルシフトは次の通りである。 ２．２１（１Ｈ，ｓ），３．８１（３Ｈ，ｓ），４．６
５（２Ｈ，ｄ），５．９０（１Ｈ，ｓ），６．６０（１
Ｈ，ｓ），６．６７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．３１，１．９
８Ｈｚ） （ｊ）13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１００ＭＨｚ，ＣＤＣ
ｌ3 ） ケミカルシフトは次の通りである。 １６８．５（ｓ），１６８．１（ｓ），１６２．６
（ｓ），１４８．９（ｓ），１２８．４（ｓ），１２
８．１（ｔ），１２７．２（ｄ），５７．２（ｔ），５
２．９（ｑ） （ｋ）塩基性、中性、酸性の区別 中性物質 - 【請求項２】 タラロマイセス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅ
ｓ）属に属し、請求項１記載のＡＭ６２１１物質を生産
する能力を有する微生物を培養することを特徴とするＡ
Ｍ６２１１物質の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6005854A JPH07206887A (ja) | 1994-01-24 | 1994-01-24 | 新規ホスホリパーゼｃ阻害物質ａｍ６２１１及びその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6005854A JPH07206887A (ja) | 1994-01-24 | 1994-01-24 | 新規ホスホリパーゼｃ阻害物質ａｍ６２１１及びその製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07206887A true JPH07206887A (ja) | 1995-08-08 |
Family
ID=11622577
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6005854A Withdrawn JPH07206887A (ja) | 1994-01-24 | 1994-01-24 | 新規ホスホリパーゼｃ阻害物質ａｍ６２１１及びその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07206887A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011140492A (ja) * | 2004-02-20 | 2011-07-21 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | グリメピリド誘導及びインスリン誘導グリコシルホスファチジルイノシトール特異的ホスホリパーゼｃ制御 |
-
1994
- 1994-01-24 JP JP6005854A patent/JPH07206887A/ja not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011140492A (ja) * | 2004-02-20 | 2011-07-21 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | グリメピリド誘導及びインスリン誘導グリコシルホスファチジルイノシトール特異的ホスホリパーゼｃ制御 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HU182069B (en) | Process for preparing monacoline k, a compound with antihypercholesteremic activity | |
| ROGGO et al. | Novel spirodihydrobenzofuranlactams as antagonists of endothelin and as inhibitors of HIV-1 protease produced by Stachybotrys sp. I. Fermentation, isolation and biological activity | |
| JPH06339390A (ja) | Ｂｕ−４１６４ｅ−ａ及びｂ、プロリルエンドペプチダーゼインヒビター | |
| KR100366258B1 (ko) | 신규 kf-1040 물질 및 그 제조법 | |
| JPH06506202A (ja) | 医薬用キサントン誘導体 | |
| JPH07206887A (ja) | 新規ホスホリパーゼｃ阻害物質ａｍ６２１１及びその製造法 | |
| JP3026864B2 (ja) | 新規セスキテルペン誘導体 | |
| JP2842613B2 (ja) | フォスフォリパーゼａ▲下２▼阻害物質 | |
| JPS6243671B2 (ja) | ||
| JP3434860B2 (ja) | Ｆｏ−２５４６物質およびその製造法 | |
| JPH07285912A (ja) | 新規化合物ａｍ５２２１ | |
| JPS60228471A (ja) | フラノン誘導体 | |
| JPH04243894A (ja) | 新規ｑ−６４０２化合物およびその製造法 | |
| JP2979271B2 (ja) | 生理活性物質ｔａｎ−１５１５，その製造法及び用途 | |
| JPH06225793A (ja) | ６β，１４α−ジヒドロキシ−４−アンドロステン−３，１７−ジオンの新規製造法 | |
| JP3010215B1 (ja) | リパ―ゼ阻害剤 | |
| JPS5889187A (ja) | Ｎｏ１４−ａ物質およびその製造法 | |
| JPS6034550B2 (ja) | 酵素阻害物質ｋｍ−２７５３およびその製造法 | |
| JPH04117346A (ja) | ホスホリパーゼａ↓２阻害物質 | |
| JPH0383947A (ja) | 新規なｑ―５４８６―ａ物質及びその製造法 | |
| JPH04159252A (ja) | ホスホリパーゼａ↓２阻害物質 | |
| JPS6021997B2 (ja) | アシル基を有するペプチド、微生物によるその製法及びそれからなる環状アデノシン３′，５′−モノリン酸ホスホジエステラ−ゼ阻害剤 | |
| JP2002332297A (ja) | 生理活性化合物チロペプチンａおよびｂとその製造方法 | |
| JPH0856688A (ja) | Ｆｏ−２５４６物質およびその製造法 | |
| KR19990033253A (ko) | 인지질 분해효소 a2에 대한 저해물질 함유 분획 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Application deemed to be withdrawn because no request for examination was validly filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20010403 |