HU182069B - Process for preparing monacoline k, a compound with antihypercholesteremic activity - Google Patents
Process for preparing monacoline k, a compound with antihypercholesteremic activity Download PDFInfo
- Publication number
- HU182069B HU182069B HU80397A HU39780A HU182069B HU 182069 B HU182069 B HU 182069B HU 80397 A HU80397 A HU 80397A HU 39780 A HU39780 A HU 39780A HU 182069 B HU182069 B HU 182069B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- monacolin
- compound
- strain
- medium
- blood
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
- C07D309/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D309/28—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D309/30—Oxygen atoms, e.g. delta-lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Virology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Abstract
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Monacolin K fuer die Anwendung als Arzneimittel gegen Hypercholesterinaemie. Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung einer Verbindung mit verbesserter Wirkung zur Senkung des Cholesteringehaltes im Blut. Erfindungsgemaess wird eine Verbindung Monacolin K der folgenden Formel in der Weise hergestellt, dass Mikroorganismen vom Kulturstamm Monascus ruber, Stamm 1005, in einem entsprechenden kulturmedium bei einer Temperatur von 7 bis 40 Grad C, insbesondere von 20 bis 35 Grad C, gezuechtet werden.The invention relates to a process for the preparation of monacolin K for use as a medicament for hypercholesterolemia. The aim of the invention is to provide a compound having an improved action for lowering the cholesterol content in the blood. According to the invention, a Monacolin K compound of the following formula is prepared by culturing microorganisms of the culture strain Monascus ruber, strain 1005, in a suitable culture medium at a temperature of from 7 to 40 ° C, especially from 20 to 35 ° C.
Description
A találmány tárgya eljárás az /1/ képletü - általunk Monacolin K-nak nevezett - uj, antihiperkoleszterémiás hatású vegyület előállítására. A Monacolin K-t a Monascus nemzetségbe tartozó Monascus ruber 1005 mikroorganizmus törzs megfelelő táptalajon való tenyésztésével állíthatjuk elő.The present invention relates to a novel antihypercholesterolemic compound of the formula (I), termed Monacolin K. Monacolin K can be prepared by culturing the Monascus ruber 1005 strain of the genus Monascus in an appropriate medium.
Már korábban felismerték, hogy a szívbetegségnek, például a szívinfarktusnak vagy az ártérlosclerosisnak egyik fő okozója a vér magas köleszterinszlntje. Ennek a felismerésnek a hatására széleskörű kutatásokat végeztek olyan fiziológiailag elfogadható vegyületek előállítására, amelyek gátolják a koleszterin bioszintézist és ezáltal csökkentik a vér koleszterinszint· jót. Az egyik ilyen, a kutatók által ML-256-nak nevezett vegyületet az 1 455 425 sz. nagy-britanniai szabadalmi leírás ismerteti. Az ML-256-ot a Penicilliuai nemzetségbe tartozó mikroorganizmusok tenyésztésével állítják elő.It has been previously recognized that one of the main causes of heart disease, such as myocardial infarction or multiple sclerosis, is high blood cholesterol levels. As a result of this discovery, extensive research has been carried out to produce physiologically acceptable compounds that inhibit cholesterol biosynthesis and thereby lower blood cholesterol levels. One such compound known as ML-256 by researchers is disclosed in U.S. Patent No. 1,455,425. British Patent Specification No. 4,684,198. ML-256 is produced by culturing microorganisms of the genus Penicilliuai.
Monascus nemzetségbe tartozó gombákat vizsgálva azt tapasztaltuk, hogy a Monascus ruber 1005 törzs olyan antihiperkoleszterémias anyagot termel, amelynek aktivitása jóval nagyobb, mint az ML-2J6-é. Ezt az uj, /1/ képletü anyagot Monacolin K-nak neveztük el.Examining fungi of the genus Monascus, it was found that the strain Monascus ruber 1005 produces an antihypercholesterolemic agent with a much higher activity than ML-2J6. This new compound of formula (1) was named Monacolin K.
A Monascus ruber 1005 egy újonnan elkülönített mikroorganizmus, amelynek a következő mikrobiológiai tulajdonságai vannak. A törzset Thaiföldön előállított élelmiszerből izoláltuk, és 1979· február 16~án helyeztük letétbe a FERM 4822 letétbehelyezési számon Japánban /Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry/, és 1979· december Jl-ép az NRRL 12075 letétbehelyez és i számon az Amerikai Egyesült államokban /Agricultural Research Service, Northern Régiónál Research Labor^tory/.Monascus ruber 1005 is a newly isolated microorganism with the following microbiological properties. The strain was isolated from food produced in Thailand and deposited on 16 February 1979 under the accession number FERM 4822 in Japan (Fermentation Research Institute, Ministry of International Trade and Industry), and December 1979, Jl-int. No. NRRL 12075 to U.S. Agricultural Research Service, Northern Region Research Laboratory.
A mikroorganizmus jól tenyészthető burgonya-glükóz-agar közegen 25 °C-on. A gyorsan növekedő telep átmérője az inokulálás utáni 10. napon eléri a 6-6,5 cm-t. A telep felszíne sima és egy viszonylag vékony hifa alapréteg fejlődik ki. A levegőbe nyúló hifafonalak gyengén fejlettek; ezek a hifafonalak feherek és többségükben gyapjasak. A hifa alaprétegen sok clelstothecium képződik, amelyek megérésükkor vörösesbarnák lesznek. A telep felszíne és alsó felülete is barna-vörösesbarna szinü.The microorganism can be well grown on potato glucose agar medium at 25 ° C. The diameter of the rapidly growing colonies reaches 6-6.5 cm on the 10th day after inoculation. The surface of the battery develops smooth and has a relatively thin hyphae base. Airborne hyphae are poorly developed; these hyphae are white and mostly woolly. Many clelstothecia are formed on the hyphae basal layer which, upon maturation, turn reddish brown. The surface and bottom of the colony are brown to reddish brown.
A törzs igen gyorsan nő Sabouraud-féle agaros táptalajon 25 °C hőmérsékleten, és a telep átmérője az inokulálás utániThe strain grows very rapidly on Sabouraud's agar medium at 25 ° C and the colony diameter after inoculation
10. napon eléri a 6-6,5 cm-t. A telep felszíne igen sima és a felületi hifák és a leghlfák jobban kifejlődnek, mint burgonya-gükóz-agarközegen. Igen kevés cleistothecium fejlődik ki'. A telep-felszíne vöröses-sárgás, alsó felülete vörös-barna-sötétbarna.On day 10, it reaches 6-6.5 cm. The colony surface is very smooth and the surface hyphae and legumes develop better than in potato-glucose agar medium. Very few cleistothecia develop '. The surface of the colony is reddish-yellow and the lower surface is red-brown-dark brown.
A törzs lassan nő zablisztes agaron 25 C°-on és a telep átmérője az inokulácló utáni 10. napon 1,5-2 cm. A telep sima; a léghifák és a cleistotheciumok, egyaránt igen gyengén fejlettek. A telep felszíne és alsó felülete egyaránt sötétvörös-vörösesbarna.The strain grows slowly on oatmeal agar at 25 ° C and colonies are 1.5 to 2 cm in diameter on day 10 after inoculation. The battery is smooth; air hyphae and cleistothecia are both very poorly developed. The surface and bottom of the battery are both dark red and reddish brown.
Igen lassan fejlődik a mikroorganizmus Czapek-féle agaron 25 C°-on; a telep átmérője az inokulálás utáni 10. napon csak 1,6-1,8 cm.The microorganism develops very slowly on Czapek agar at 25 ° C; the diameter of the colony on the 10th day after inoculation was only 1.6-1.8 cm.
Mindegyik említett táptalajon a növekedés aránya 57 °C-on gyakorlatilag megegyezik a 25 °C-nál tapasztalt növekedési aránnyal.In each of these media, the growth rate at 57 ° C is practically the same as the growth rate at 25 ° C.
Ami a törzs morfológiai tulajdonságait illeti, a cleisAs for the morphological characteristics of the strain, the cleis
-2182.069 totheciumok gömbalaknak és 30-60 mm átmérőjüek* faluk vékony és membránszerü, nyelükben válaszfalak vannak és mindegyik egy-2182.069 tothecium spherical in shape and 30-60 mm in diameter * have thin and membranous walls, partitions at the handle and each one
3,5-4,5 /u. átmérőjű és 15-80 /u hossza hifából áll. Az ascus 8 spórából áll, majdnem gömbalaku és könnyen szétesik. Az ascospórák színtelenek, ovális vagy ellipszoid alakúak, 4-5 x 4-7 /u méretűek, felületük sima. A konidiumok színtelenek, gömbvagy körtealakuak, méretük 6-9 x 6-11 /1· alapjuk csonka, faluk viszonylag vékony és sima. A konidiumok sziromszerüen kapcsolódnak az alaphoz, mint a merisztéma arthorspora egy fajtája. A konidiospórák vegetatív hifához hasonlóak, elágazóak vagy nem elágazók; a konidiumok a felső részen képződnek. A micéliumok színtelenek, elágazók és válaszfalaik vannak, legtöbbjük átmérője 3-5 /u .3.5-4.5 / u. diameter and 15-80 / u length consists of hyphae. The ascus consists of 8 spores, almost spherical and easily disintegrates. Ascospores are colorless, oval or ellipsoidal, 4-5 x 4-7 / u in size, with smooth surfaces. Conidia are colorless, spherical or pear-shaped, with a 6-9 x 6-11 / 1 · base, truncated, relatively thin and smooth. The conidia are petal-like to the base, a kind of arthorspora of the meristem. Conidiospores are similar to vegetative hyphae, branched or unbranched; conidia are formed on the upper part. Mycelia are colorless, branched and have partitions, most of them 3-5 µm in diameter.
A fenti jellemzők alapján a mikroorganizmust a Monascus ruber van Tieghem egyik törzsébe tartozónak találtuk.Based on the above characteristics, the microorganism was found to belong to a strain of Monascus ruber van Tieghem.
A Monascus ruber mikrobiológiai tulajdonságait például a következő publikációk ismertetik: Takada, Transactions of the Micological Society of Japan, j), 125-130 /1969/ ,'Materials fór the fungus flóra of Japan /7/j ; van Tieghem, Bull. Soc. Botan. Francé* 31» 227 /1884/. A törzs ascospórás nemzedékét Colé és munkatársai írták le a Canadian Journal of Botany-ban, 46, 987 /1968/, a következő címen: Conidium Ontogeny in hypomycetes. The iniperfect state os Monascus ruber and its mer isteni arthrospores.”For example, the microbiological properties of Monascus ruber are described in Takada, Transactions of the Micrological Society of Japan, 125-130 (1969), 'Materials for the fungus flora of Japan (7); van Tiegham, Bull. Soc. Botan. Francé * 31 »227/1884 /. The ascospore generation of the strain has been described by Colé et al., Canadian Journal of Botany, 46, 987 (1968), at Conidium Ontogeny in Hypomycetes. The iniperfect state os Monascus ruber and its mer arthrospores. ”
Bár a Monascus ruber 1005 törzs felhasználását szemléltetjük leírásunkban példákkal a nevezett törzs mutánsai is felhasználhatók a találmányunk szerinti eljárás végrehajtásához.Although the use of Monascus ruber strain 1005 is illustrated herein, examples of mutants of said strain can be used to carry out the process of the present invention.
A Monacolin K-t előállíthatjuk a kiválasztott mikroorganizmus megfelelő táptalajon való aerob tenyésztésével; a tenyésztést a gombák és mikroorganizmusok tenyésztésére a szakirodalomból jól ismert módszerekkel hajtjuk végre. így például a Monacolin K-t termelő mikroorganizmust tenyészthetjük először egy megfelelő közegen, majd az ezen kifejlődött mikroorganizmusokat összegyüjthet jük és átolthatjuk egy másik tápközegre, amelyen az a kivánt Monacolin K-t termeli. A mikroorganizmus szaporítására és a Monacolin K termelésre alkalmazott tápközeg lehet azonos vagy különböző.Monacolin K can be prepared by aerobically culturing the selected microorganism in a suitable medium; the cultivation is carried out by methods well known in the art for culturing fungi and microorganisms. For example, a microorganism producing Monacolin K may first be cultured in a suitable medium, and then the microorganisms developed therein may be harvested and transferred to another medium on which it produces the desired Monacolin K. The medium used for the growth of the microorganism and for the production of Monacolin K may be the same or different.
A tenyésztéshez bármely, a szakirodalomból ismeretes, gombák tenyésztésére alkalmas tápközeg megfelel, feltéve, hogy tartalmazza a megfelelő tápanyagokat, elsősorban a jól asszimilálható szén- és nitrogénforrást. A megfelelő, jól asszimilálható szénforrások közé tartozik például a glükóz, maltóz, dextrin, keményítő, laktóz* szacharóz és a glicerin. A felsoroltak közül a Monacolin K előállításához elsősorban a glükóz, a glicerin és a keményítő alkalmazása előnyös. A megfelelő, jól aszszimilálható nitrogénforrások közé tartozik például a pepton, a husextrakt, az élesztő, az élesztőextrakt, a szójaliszt, a földimogyoróliszt, a kukoricalekvár, a rizskorpa és a szervetlen szénforrások. A felsoroltak közül különösen előnyös a pepton alkalmazása. A Monacolin K előállításakor valamely szervetlen sót és/vagy fémsót adhatunk a tápközeghez* ha az szükséges. Emellett szükség esetén kis mennyiségű nehézfémet is adagolhatunk.For culture, any medium known in the art for growing mushrooms is suitable provided that it contains the appropriate nutrients, in particular well-assimilable sources of carbon and nitrogen. Suitable, well assimilable carbon sources include, for example, glucose, maltose, dextrin, starch, lactose * sucrose, and glycerol. Of these, the use of glucose, glycerol and starch is preferred for the preparation of Monacolin K. Suitable, well assimilable nitrogen sources include, for example, peptone, huse extract, yeast, yeast extract, soybean meal, peanut flour, corn jam, rice bran and inorganic carbon sources. Of these, the use of peptone is particularly preferred. In preparing Monacolin K, an inorganic salt and / or metal salt may be added to the medium * if necessary. In addition, small amounts of heavy metals may be added if necessary.
A mikroorganizmust előnyösen aerob feltételek mellett tenyésztjük az irodalomból jól ismert technikák alkalmazásával,Preferably, the microorganism is cultured under aerobic conditions using techniques well known in the art,
-3182.069 póldául szilárd vagy rázott vagy levegőztetett éa kevert kultúrában. A mikroorganizmus széles hőmérséklettartományban tenyészthető, például 7 es 40 °C között, de Monacolin K termelésére legelőnyösebb 20 és 35 °C közötti hőmérsékletet alkalmazni.-3182.069 for example solid or shaken or aerated and mixed culture. The microorganism can be cultivated over a wide range of temperatures, for example between 7 and 40 ° C, but it is most preferred to produce between 20 and 35 ° C for the production of Monacolin K.
A mikroorganizmus tenyésztése során a Monacolin K képződósét figyelhetjük a tápközegből· való mintavétel és a mintában a Monacolin K fiziológiai aktivitásának az alább leirt módon való mérése utján. A tenyésztést addig folytathatjuk, amig jelentős mennyiségü Monacolin K halmozódik fel a tápközegben, ekkor a Monacolin K-t izolálhatjuk a tápközegből fizikai es kémiai tulajdonságainak megfelelően választott elválasztási technikákkal. így például a következő elválásztási technikák bármelyikét alkalmazhatjuk: a fermentléből hidrofil oldószerrel /például dietil-éterrel, etil-acetáttal, kloroformmal vagy benzollal·/ való extrahálása, a mikroorganizmusok hidrofil oldószerrel / például acetonnal vagy alkohollal/ való extrahálása, besűrítés, polárosabb oldószerbe /például acetonba vagy alkoholba/ való atoldás, a szennyezések eltávolítása egy kevésbé poláros oldószer /például petroléter vagy hexán/ alkalmazásával·/, gélszürés megfelelő anyaggal, például Sephadexszel töltött oszlopon, abszorpciós kromatográfia-akt ívsz énnel vagy szilikagélen. Ezeknek a technikáknak a megfelelő kombinálásával a Monacolin K tiszta formában nyerhető ki a tenyészetből.During cultivation of the microorganism, the formation of Monacolin K can be observed by sampling the medium and measuring the physiological activity of Monacolin K in the sample as described below. The culture can be continued until a significant amount of Monacolin K accumulates in the medium, and then Monacolin K can be isolated from the medium by separation techniques selected according to its physical and chemical properties. For example, any of the following separation techniques may be employed: extraction of the fermentation broth with a hydrophilic solvent such as diethyl ether, ethyl acetate, chloroform or benzene, extraction of the microorganisms with a hydrophilic solvent such as acetone or alcohol, concentration, a more polar solvent, e.g. norgestrel acetone or alcohol / to the removal of impurities with a less polar solvent / e.g. petroleum ether or hexane / using · /, gel filtration with a suitable material such as a packed column Sephadexszel, absorption chromatography - nude IVSZ ene or silica. By properly combining these techniques, Monacolin K can be recovered from the culture in pure form.
A Monacolin K tulajdonságai a következők:Monacolin K has the following properties:
Színtelen kristályok, amelyek 157-159 °C-on olvadnak bomlás közben. Összegképlete Ón^H^gOt-, elemanalizisének eredményei: C = 71.56 %, II = 8,85 % θθ 0 =19,59 %. Tömegspektronietriásan meghatározott molekulasúlya 404. Metanolban felvett ultraibolya abszorpciós spektrumát az 1. ábra mutatja; maximumok észlelhetők 232, 238 és 246 m/u-nál. Kálium-bromid pasztillában felvett infravörös abszorpciós spektrumát a 2. ábra mutatja; deutero-kloroformban, tetrametil-szilán belső standard,alkalmazásával felvett spektruma /proton 60 MHz/ a 3· ábrán látható. A 4. ábra a deutero-metanolban felvett MR spektrumot /13c/ mutatja, A Monacolin K oldható rövidszénláncú alkoholokban /például metanolban, etanolban és propanolban/, v alamint acetonban, kloroformban, etil-acetátban és benzolban. Oldhatatlan petroléterben és hexánban. Optikai forgató képessége:^ ^5 = + 307,6 /c = 1, metanolban/. Vékonyrétegkromatográfiás f ut tatás sál-R^= 0,47-nél· jelentkezik folt; a futtatást a Merek et. Co. Inc. Ltd. által gyártott No. 5715 Kiesel-gel 6OF254 szilikagélen végeztük, futtatószerként metilén-klorid: aceton = 4:1 arányú elegyét alkalmazva. A detektálást a folt ultraibolya sugárelnyelő tulajdonsága alapján vagy a,lemezt 50,térfogat%-os kén-, savval vagy jóddal bepermetezve végezzük. Kénsavas bepermetezéS esetén melegítés hatására a folt világos vörös-vörösesbarna színűvé válik. A Monacolin K semleges anyag és semleges vagy vizes savas közegben oldhatatlan. 'Lúggal kezelve savas jellegű anyaggá alakul, amely vizoldható· Ez a savas jellegű vegyület savas pH-η etil-acetáttal vagy kloroformmal extrahálható és az oldószer bepárlásával visszaalakul Monacolin K-vá. A Monacolin K fiziológiái aktivitása kvantitative is meghatározható a következő in vivő teszt segítségével.Colorless crystals melting at 157-159 ° C with decomposition. Elemental analysis of the formula: Tin ^ H ^ gOt-: C = 71.56%, II = 8.85% θθ 0 = 19.59%. It has a mass spectrometry molecular weight of 404. The ultraviolet absorption spectrum of methanol is shown in Figure 1; maxima can be observed at 232, 238 and 246 m / u. The infrared absorption spectrum of potassium bromide in a paste is shown in Figure 2; spectrum of a deuterochloroform using tetramethylsilane internal standard / proton 60 MHz / a is shown in Figure 3. Figure 4 shows the MR spectrum of deuteromethanol (13c). Monacolin K is soluble in lower alcohols (e.g. methanol, ethanol and propanol), and in acetone, chloroform, ethyl acetate and benzene. Insoluble in light petroleum and hexane. Optical rotation: λmax = + 307.6 (c = 1, in methanol). TLC Rf = 0.47 · spot occurs; run by Merek et. Co. Inc. Ltd., No. 5715 Kiesel gel 6OF254 on silica gel, eluting with methylene chloride: acetone = 4: 1. Detection is based on the ultraviolet absorbing property of the spot or by spraying the plate with 50% (v / v) sulfur, acid or iodine. When sprayed with sulfuric acid, the spot becomes light red to reddish-brown when heated. Monacolin K is an insoluble substance and is insoluble in a neutral or aqueous acidic medium. When treated with an alkali, it is converted to an acidic substance which is soluble in water · This acidic compound can be extracted with acidic pH η ethyl acetate or chloroform and converted to Monacolin K by evaporation of the solvent. The physiological activity of Monacolin K can also be quantified using the following in vivo assay.
In vivő teszt nyulakonCarrier test in rabbits
-4182.039-4182.039
A teszt során azt mérjük, hogy mennyire csökkenti a Monacolin K nyíllak vérének koleszterlnszintjét. A kísérleti állatok 2,5-3,0 kg-osak. Közvetlenül a kísérlet megkezedése előtt minden nyúl fülének vénájából vért veszünk és ismert módon megmérjük a vérszérum koleszterlnszint jét. Ezután a Monacolln K előre meghatározott mennyiségét adjuk a nyulaknak folyamatosan, orálisan 1-5 napig, és beadás után mérjük a vérszérum koleszterinszintjét. A Monacolln K, illetve a Monacolln K-t tartalmazó tápközeg hatékonysága kvantitative meghatározható a kezelés előtt és után mért koleszterinszint értékekből.This test measures how well the Monacolin K arrows lower the blood cholesterol level. The experimental animals weighed 2.5-3.0 kg. Immediately before the experiment, blood was drawn from the vein of each rabbit ear and blood serum cholesterol levels were measured in a known manner. Thereafter, a predetermined amount of Monacolln K is administered to the rabbits orally continuously for 1 to 5 days, and the serum cholesterol is measured after administration. The efficacy of Monacolln K and Monacolln K containing media can be quantified by measuring cholesterol levels before and after treatment.
A Monacolih K vér és máj koleszterinszintjét csökkentő hatását különböző in vivő tesztekben határoztuk meg.The blood and liver cholesterol lowering effect of Monacolih K was determined in various in vivo tests.
Patkányok vér koleszterinszintjének csökkentéseReduction of blood cholesterol levels in rats
Körülbelül 300 g testsulyu Wistar Imamlchi patkányokat 5-5 tagú csoportokba osztunk. Minden állatnak 400 mg/kg Triton TO-1139-et adunk intravénásán /ez az anyag a vér koleszterinszintjét növeli/, és ezzel egyidejűleg intraperitoneálisan 10 mg/kg Monacolln K-t is adagolunk. 14 órával a Monaoolin K intraperltoneális beadása után az állatokat elvéreztetjük* a vért összegyűjtjük és koleszterinszintjét ismert módon megmerjük. Azt az eredményt kaptuk, hogy a kontroli-csoporthoz képest, amelynek tagjai csak Triton WR-1339-et kaptak, a Monacolln K-val kezelt állatok vérének koleszterlnszintje 23,9 %-kal csökkent.About 300 g of testulyu Wistar Imamlchi rats are divided into groups of 5 to 5 members. Each animal is given 400 mg / kg Triton TO-1139 intravenously (this increases blood cholesterol levels), and at the same time 10 mg / kg Monacolln K is administered intraperitoneally. 14 hours after intraperitoneal administration of Monaoolin K, the animals are bled * blood is collected and cholesterol is measured in a known manner. It was found that the blood cholesterol level in Monacolln K treated animals was reduced by 23.9% compared to the control group, which received only Triton WR-1339.
Nyulak vér koleszterlnszintjének csökkentéseRabbit blood cholesterol lowering
A kísérleti állatok 2,7 - 2,9 kg testsulyu nyulak, amelyeknek orálisan 1 mg/kg Monacolln K-t adunk naponta kétszer /reggel és este/ öt napon keresztül. A Monacolin K beadása előtt es a 3. és az 5· napon beadás után vért veszünk a nyulak fülének vénájából és megmérjük a vérszérum koleszterlnszintjét. Azt találtuk, hogy a Monacolin K beadása után a 3· és 5· napon a koleszterlnszint 15 %, illetve 29 %; ezek az értékek alacsonyabb bak, mint a Monacolin K beadása előtti értékek.The experimental animals are 2.7 to 2.9 kg body-weight rabbits administered 1 mg / kg Monacolln K orally twice daily in the morning and evening for five days. Blood is drawn from the rabbit ear vein and blood serum cholesterol is measured before and 3 days after and 5 days after administration of Monacolin K. We found that after 3 and 5 days after administration of Monacolin K, cholesterol levels were 15% and 29%, respectively; these values are lower than those before administration of Monacolin K.
A koleszterin bioszintézisét jelentős mértékben gátló hatása mellett a Monacolin K toxicitása igen kicsi. Egereken mért akut orális toxicitása /LD^q/ 1 g/testsulykilogramm.In addition to its significant inhibitory effect on cholesterol biosynthesis, the toxicity of Monacolin K is very low. Acute oral toxicity in mice / LD ^ q / 1 g / kg body weight.
A Monacolin K-t alkalmazhatjuk orálisan vagy parenterálisan kapszulák, tabletták, injekciók vagy bármely más gyógyszerkészítmény formájában; általában orális alkalmazása előnyös.Monacolin K may be administered orally or parenterally in the form of capsules, tablets, injections or any other pharmaceutical preparation; oral administration is generally preferred.
Az alkalmazott dózis a beteg korától és testsúlyától, valamint a betegség sulyosáágától függően változhat, de általában egy felnőtt embernek napi 0,5-50 mg adható be akár egyszerre, akár két vagy három részletben. Tekintettel arra, hogy a Monacolin K toxicitása igen alacsony, szükség esetén nagyobb adagokat is lehet alkalmazni.The dosage used will vary with the age and weight of the patient and the severity of the disease, but usually an adult can be given 0.5 to 50 mg daily in two, three or three divided doses. Due to the very low toxicity of Monacolin K, higher doses may be used if necessary.
A találmány szerinti eljárást a következő példával szemléltetjük a korlátozás szándéka nélkül.The process of the present invention is illustrated by the following example, but is not intended to be limiting.
Példa vegyes% glükózt, 2,5 vegyes% peptont, 0,5 vegyest kukoricalekvárt és 0,5 vegyes% ammóniám-klór időt tartalmazó tápközegre Monascus ruber 1005 törzset oltunk. A tenyésztést aerob. körülmények között 28 °C-ón 10 napig folytatjuk. A kultúra szürletének /5 1/ pH-ját 6n sósav-oldattal pH = 3~*a állítjuk be,J majd a szürletet ekvivalens térfogatú etil-acetáttal extraháljuk.Example of a medium containing mixed% glucose, 2.5% peptone, 0.5% corn jam and 0.5% ammonium chlorine time was inoculated with Monascus ruber 1005. The breeding is aerobic. under tin conditions at 28 ° C for 10 days. The filtrate (5 L) of the culture filtrate was adjusted to pH 3 ~ 6 with 6N hydrochloric acid and the filtrate was extracted with an equivalent volume of ethyl acetate.
-5182.069-5182.069
Az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk és a maradékot feloldjuk 100 ml benzolban; az oldhatatlan részeket kiszűrjük.The solvent was evaporated under reduced pressure and the residue was dissolved in 100 ml of benzene; insoluble matter is filtered off.
A szürletet kétszer 100 ml 5 vegyes%-os vizes nátrium-hicLrogén-karbonát oldattal mossuk, majd 100 ml 0,2 n vizes nátrium-hidr oxid oldgtot adunk hozza és az elegyet szobahőmérsékleten keverjük. Vékonyrétegkromatográflásan ellenőrizzük, hogy a Monacolln K-t teljesen eltávolitottuk-e a benzolos fázisból, majd a vizes fázist elválasztjuk, és pH-értékét 6n sósavoldattal 3ra állítjuk. Az oldatot kétszer 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot csökkentett nyomáson szárazra pároljuk, igy 260 mg olajat kapunk. A kapott olajat benzolban oldjuk és hagyjuk kristályosodni, majd acetonos-vizes oldatból átkrisályosltjuk, Így 87 mg Monacolin K-t kapunk színtelen tűk formájában; az azonosítási adatok megegyeznek a leirórészben ismertetettekkel.The filtrate was washed twice with 100 ml of 5% aqueous sodium bicarbonate solution, 100 ml of 0.2 N aqueous sodium hydroxide solution was added and the mixture was stirred at room temperature. Thin layer chromatography is used to verify that Monacolln K is completely removed from the benzene phase, and the aqueous phase is separated and adjusted to pH 3 with 6N hydrochloric acid. The solution was extracted with ethyl acetate (2 x 100 mL) and the extract was concentrated to dryness under reduced pressure to give 260 mg of an oil. The resulting oil was dissolved in benzene and allowed to crystallize and recrystallized from aqueous acetone to give 87 mg of Monacolin K as colorless needles; the identification data are the same as those described in this section.
Claims (3)
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP54017856A JPS5925599B2 (en) | 1979-02-20 | 1979-02-20 | New physiologically active substance monacolin K and its production method |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HU182069B true HU182069B (en) | 1983-12-28 |
Family
ID=11955290
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU80397A HU182069B (en) | 1979-02-20 | 1980-02-20 | Process for preparing monacoline k, a compound with antihypercholesteremic activity |
Country Status (27)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5925599B2 (en) |
KR (1) | KR830002801B1 (en) |
AT (1) | AT373915B (en) |
AU (1) | AU532626B2 (en) |
BE (1) | BE881825A (en) |
CA (1) | CA1129794A (en) |
CH (1) | CH645890A5 (en) |
DD (1) | DD154494A5 (en) |
DE (2) | DE3006216C2 (en) |
DK (2) | DK149095C (en) |
ES (1) | ES8103171A1 (en) |
FI (1) | FI66427C (en) |
FR (1) | FR2449685B1 (en) |
GB (1) | GB2046737B (en) |
HU (1) | HU182069B (en) |
IE (1) | IE49743B1 (en) |
IT (1) | IT1175260B (en) |
MX (1) | MX6314E (en) |
NL (1) | NL191540C (en) |
NO (1) | NO153974C (en) |
NZ (1) | NZ192919A (en) |
PH (1) | PH15145A (en) |
PL (1) | PL124304B1 (en) |
SE (1) | SE453301B (en) |
SG (1) | SG6784G (en) |
SU (2) | SU1158048A3 (en) |
ZA (1) | ZA80962B (en) |
Families Citing this family (34)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS55150898A (en) * | 1979-05-11 | 1980-11-25 | Sankyo Co Ltd | Preparation of a new physiologically active substance mb-530b |
US4231938A (en) * | 1979-06-15 | 1980-11-04 | Merck & Co., Inc. | Hypocholesteremic fermentation products and process of preparation |
JPS5621594A (en) * | 1979-07-27 | 1981-02-28 | Sankyo Co Ltd | Mb-530b carboxylic acid metal salt and its preparation |
AU548996B2 (en) * | 1980-02-04 | 1986-01-09 | Merck & Co., Inc. | Tetrahydro-2h-pyran-2-one derivatives |
PT72394B (en) * | 1980-02-04 | 1982-09-06 | Merck & Co Inc | Process for preparing dihydro and tetrahydromevinoline hypocholesterolimics |
JPH0692381B2 (en) * | 1980-03-31 | 1994-11-16 | 三共株式会社 | MB-530A derivative |
JPS56142236A (en) | 1980-04-08 | 1981-11-06 | Sankyo Co Ltd | Ml-236a and mb-530a derivative |
MX7065E (en) * | 1980-06-06 | 1987-04-10 | Sankyo Co | A MICROBIOLOGICAL PROCEDURE FOR PREPARING DERIVATIVES OF ML-236B |
JPS5835144A (en) * | 1981-08-27 | 1983-03-01 | Sankyo Co Ltd | Mb-530b derivative and its preparation |
US4782084A (en) * | 1987-06-29 | 1988-11-01 | Merck & Co., Inc. | HMG-COA reductase inhibitors |
US4997848A (en) | 1987-10-27 | 1991-03-05 | Sankyo Company, Limited | Octahydronaphthalene oxime derivatives for cholesterol synthesis inhibition |
CA2062023A1 (en) | 1992-02-10 | 1993-08-11 | Jagroop S. Dahiya | Novel fungal strains and use thereof in antibiotic production |
EP0629184A1 (en) * | 1992-03-04 | 1994-12-21 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | TETRALIN DERIVATIVES AS HMG-CoA REDUCTASE INHIBITORS |
NZ247617A (en) | 1992-05-15 | 1995-07-26 | Sankyo Co | Octahydronaphthalene oxime derivatives and pharmaceutical compositions |
HU210867B (en) * | 1992-11-04 | 1995-10-30 | Biogal Gyogyszergyar | Method for extraction and purification of mevinolin from culture medium |
US6812007B1 (en) * | 1992-11-04 | 2004-11-02 | Keri Vilmos | Process for the isolation and purification of mevinolin |
SI9300303A (en) * | 1993-06-08 | 1994-12-31 | Krka Tovarna Zdravil | Process for isolation of hypolipemic effective substance |
US5409820A (en) * | 1993-08-06 | 1995-04-25 | Apotex, Inc. | Process for the production of lovastatin using Coniothyrium fuckelii |
US7238348B2 (en) | 1996-09-30 | 2007-07-03 | Beijing Peking University Wbl Corporation Ltd. | Method of treatment of osteoporosis with compositions of red rice fermentation products |
US6046022A (en) | 1996-09-30 | 2000-04-04 | Peking University | Methods and compositions employing red rice fermentation products |
IL132822A0 (en) | 1998-03-20 | 2001-03-19 | Biogal Gyogyszergyar | Metabolic controlled fermentation procedure for the manufacture of lovastatin hydroxy acid |
YU63602A (en) | 2000-02-24 | 2006-01-16 | Biogal Gyogyszergyar Rt. | Method of purifying a fermentation broth |
US6521762B2 (en) | 2000-03-03 | 2003-02-18 | BIOGAL Gyógyszergyar RT. | Process for purifying lovastatin and simvastatin with reduced levels of dimeric impurities |
KR20010095780A (en) * | 2000-04-12 | 2001-11-07 | 나가오카 마사시 | Embryo monascus |
IN192861B (en) | 2000-06-30 | 2004-05-22 | Ranbaxy Lab Ltd | |
EP1357807B1 (en) | 2001-02-09 | 2007-03-14 | Unilever N.V. | Food product comprising soy protein and statins |
KR100379075B1 (en) | 2002-03-07 | 2003-04-08 | Jinis Biopharmaceuticals Co | Method for producing low cholesterol animal food product and food product therefrom |
KR20020093147A (en) * | 2002-05-30 | 2002-12-13 | 지니스생명공학 주식회사 | Preventive and Dietary Supplement for adult chronic disease |
KR100710500B1 (en) | 2005-05-18 | 2007-04-24 | 고려대학교 산학협력단 | Method for producing Monacolin K using Monascus sp |
SI2373609T1 (en) | 2008-12-19 | 2013-12-31 | Krka, D.D., Novo Mesto | Use of amphiphilic compounds for controlled crystallization of statins and statin intermediates |
EP2327682A1 (en) | 2009-10-29 | 2011-06-01 | KRKA, D.D., Novo Mesto | Use of amphiphilic compounds for controlled crystallization of statins and statin intermediates |
RO128803A0 (en) | 2012-10-12 | 2013-09-30 | Ion Gigel Fulga | Composition for the treatment or prevention of dyslipidemias |
CN110331151A (en) * | 2019-04-11 | 2019-10-15 | 北京工商大学 | The construction method of purple Monascus mokH gene overexpression bacterial strain |
CN111297938A (en) * | 2020-03-11 | 2020-06-19 | 北京康立生医药技术开发有限公司 | Method for detecting lovastatin in composition for assisting in reducing blood fat |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5612114B2 (en) * | 1974-06-07 | 1981-03-18 | ||
JPS55150898A (en) * | 1979-05-11 | 1980-11-25 | Sankyo Co Ltd | Preparation of a new physiologically active substance mb-530b |
AU535944B2 (en) * | 1979-06-15 | 1984-04-12 | Merck & Co., Inc. | Hypocholestermic fermentation products from aspergillus |
-
1979
- 1979-02-20 JP JP54017856A patent/JPS5925599B2/en not_active Expired
-
1980
- 1980-02-19 IE IE321/80A patent/IE49743B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-19 CA CA345,983A patent/CA1129794A/en not_active Expired
- 1980-02-19 KR KR1019800000654A patent/KR830002801B1/en active
- 1980-02-19 AU AU55673/80A patent/AU532626B2/en not_active Expired
- 1980-02-20 DE DE3006216A patent/DE3006216C2/en not_active Expired
- 1980-02-20 PL PL1980222120A patent/PL124304B1/en unknown
- 1980-02-20 BE BE0/199476A patent/BE881825A/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 HU HU80397A patent/HU182069B/en unknown
- 1980-02-20 DD DD80219159A patent/DD154494A5/en unknown
- 1980-02-20 ES ES488796A patent/ES8103171A1/en not_active Expired
- 1980-02-20 GB GB8005748A patent/GB2046737B/en not_active Expired
- 1980-02-20 SU SU802887300A patent/SU1158048A3/en active
- 1980-02-20 FI FI800506A patent/FI66427C/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 NZ NZ192919A patent/NZ192919A/en unknown
- 1980-02-20 CH CH136680A patent/CH645890A5/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 MX MX808652U patent/MX6314E/en unknown
- 1980-02-20 IT IT67262/80A patent/IT1175260B/en active
- 1980-02-20 DE DE3051175A patent/DE3051175C2/de not_active Expired
- 1980-02-20 AT AT0092980A patent/AT373915B/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 DK DK73080A patent/DK149095C/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 SE SE8001339A patent/SE453301B/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 FR FR8003662A patent/FR2449685B1/en not_active Expired
- 1980-02-20 ZA ZA00800962A patent/ZA80962B/en unknown
- 1980-02-20 NO NO800451A patent/NO153974C/en unknown
- 1980-02-20 PH PH23668A patent/PH15145A/en unknown
- 1980-02-20 NL NL8001041A patent/NL191540C/en not_active IP Right Cessation
- 1980-09-12 SU SU802977031A patent/SU969702A1/en active
-
1984
- 1984-01-24 SG SG67/84A patent/SG6784G/en unknown
-
1989
- 1989-01-18 DK DK021889A patent/DK21889D0/en not_active Application Discontinuation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
HU182069B (en) | Process for preparing monacoline k, a compound with antihypercholesteremic activity | |
US4323648A (en) | Preparation of Monacolin K | |
AU656028B2 (en) | Antifungal agent | |
US5756472A (en) | Antifungal agent obtained from hormonema | |
JPH06339390A (en) | Bu-4164e-a and b and prolyl endopeptidase inhibitor | |
NZ194445A (en) | Monacolin k salts and esters | |
EP0396378B1 (en) | Antifungal agent | |
NL8204904A (en) | DIHYDRO- AND TETRAHYDROMONACOLIN L, METAL SALTS AND ALKYL ESTERS, AND METHOD FOR PREPARING THE SAME. | |
AU673560B2 (en) | Antibiotic agents | |
CA2244142C (en) | Antifungal compound from hormonema sp. | |
JP3026864B2 (en) | New sesquiterpene derivatives | |
US5304485A (en) | Antibiotic producing microorganism | |
US5597806A (en) | Antifungal agents | |
US5441987A (en) | Antifungal agent | |
JPH0532656A (en) | Decalin-based compound | |
US5712151A (en) | Antifungal agent | |
JPS5889187A (en) | No14-a substance and its preparation | |
JP2002069075A (en) | New physiologically active substance nk34896b and method for producing the same | |
DK165990B (en) | Hypocholesterolaemic agent monacolin K - produced by culturing Monascus strain | |
HU182776B (en) | Process for preparing new metabolytes | |
JPS6210998B2 (en) | ||
JPH04368378A (en) | New metabolite azistatines from phthalium species, method for manufacturing same and use of same |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HU90 | Patent valid on 900628 |