NL8204904A - DIHYDRO- AND TETRAHYDROMONACOLIN L, METAL SALTS AND ALKYL ESTERS, AND METHOD FOR PREPARING THE SAME. - Google Patents
DIHYDRO- AND TETRAHYDROMONACOLIN L, METAL SALTS AND ALKYL ESTERS, AND METHOD FOR PREPARING THE SAME. Download PDFInfo
- Publication number
- NL8204904A NL8204904A NL8204904A NL8204904A NL8204904A NL 8204904 A NL8204904 A NL 8204904A NL 8204904 A NL8204904 A NL 8204904A NL 8204904 A NL8204904 A NL 8204904A NL 8204904 A NL8204904 A NL 8204904A
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- dihydromonacolin
- tetrahydromonacolin
- formula
- carboxylic acid
- dihydro
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
- C07C59/01—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups
- C07C59/11—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups containing rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
- C07C59/40—Unsaturated compounds
- C07C59/42—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups
- C07C59/46—Unsaturated compounds containing hydroxy or O-metal groups containing rings other than six-membered aromatic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
- C07D309/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D309/28—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D309/30—Oxygen atoms, e.g. delta-lactones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Botany (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyrane Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
- 1 -- 1 -
Dihydro- en tetrahydromonacolin L, metaalzouten en alkylesters daarvan, alsmede werkwijze voor het bereiden ervan.Dihydro- and tetrahydromonacolin L, metal salts and alkyl esters thereof, as well as a process for their preparation.
De uitvinding heeft betrekking op nieuwe fysiologisch actieve stoffen met een cholesterol- reducerende activiteit. Meer in het bijzonder heeft de uitvinding betrekking op nieuwe fysiologisch actieve 5 stoffen, dihydro- en tetrahydromonacolin L, weergegeven door formule 1 van het formuleblad, waarin X -CH=CH- of -CH2”CH2- voorstelt, en met een cholesterol-reducerende activiteit, alsook metaalcarbonzuurzouten en alkylcarbon- zuuresters daarvan, weergegeven door formule 2 van het 10 formuleblad, waarin X de bovenaangegeven betekenis heeft, en Y voorstelt (waarin M een metaalelement en n een n atoomvalentie van dit metaalelement is), of een lagere alkylgroep met 1 tot 6 koolstofatomen. De uitvinding heeft verder betrekking op een werkwijze voor het bereiden 15 ervan, alsmede een middel voor het behandelen tegen hyperlipemie, dat deze stoffen als actief bestanddeel bevat.The invention relates to new physiologically active substances with a cholesterol-reducing activity. More particularly, the invention relates to novel physiologically active substances, dihydro- and tetrahydromonacolin L, represented by formula 1 of the formula sheet, wherein X represents -CH = CH- or -CH2 ”CH2-, and with a cholesterol-reducing activity, as well as metal carboxylic acid salts and alkyl carboxylic acid esters thereof, represented by formula 2 of the formula sheet, wherein X has the above indicated meaning, and represents Y (wherein M is a metal element and n is an n atomic valence of this metal element), or a lower alkyl group with 1 to 6 carbon atoms. The invention further relates to a method of preparation thereof, as well as an agent for treating against hyperlipaemia, which contains these substances as an active ingredient.
Hyperlipemie, in het bijzonder hypercholes-terolemie is bekend als één van de belangrijkste faktoren 20 van hartziekten zoals myocardiaal infarct, en athero- sclerose. De onderhavige uitvinder heeft nu onderzoekingen uitgevoerd teneinde uitstekende nieuwe fysiologisch werkzame stoffen te vinden, die een cholesterol-reducerende activiteit bezitten, uit de microbische produkten.Hyperlipaemia, in particular hypercholesterolaemia, is known as one of the major factors of heart disease such as myocardial infarction, and atherosclerosis. The present inventor has now conducted investigations to find excellent new physiologically active substances, which have a cholesterol-reducing activity, from the microbial products.
25 Als resultaat is de uitvinder er in geslaagd om een actieve stof,dihydromonacolin L te verkrijgen uit het gekweekte medium van een stam van de fungi.As a result, the inventor has succeeded in obtaining an active substance, dihydromonacolin L, from the cultured medium of a fungi strain.
Bij een proef op dieren, waarbij ratten gebruikt werden, werd gevonden, dat de onderhavige 30 stof werkzaam is als cholesterol-reducerend middel.In an animal experiment using rats, the present substance was found to act as a cholesterol reducing agent.
Verder-bleken de stoffen volgens de uitvinding bij onderzoek vao de fysisch-chemische eigenschappen nieuwe stoffen te zijn.Furthermore, the substances according to the invention were found to be new substances when examined for their physicochemical properties.
Dihydromonacolin L is gespecificeerd door de genoepiie formule l, waarin X -CH=CH- is, en wordt 8204904 * 4 - 2 - gerepresenteerd door formule 3 van het formuleblad.Dihydromonacolin L is specified by the enjoyable formula 1, wherein X is -CH = CH-, and is represented by 8204904 * 4 - 2 - by formula 3 of the formula sheet.
De uitvinder heeft verder onderzoek uitgevoerd en gevonden, dat tetrahydromonacolin L, weergegeven door formule 4 van het formuleblad, welke is gespecificeerd 5 door de bovengenoemde formule 1, waarin X -CE^-CI^- voorstelt, een overeenkomstige uitwerking heeft, en dat metaal-carbonzuurzout en alkylcarbonzuuresters van dihydro- en tetrahydromonacolin L eveneens uitstekende nieuwe fysiologisch werkzame stoffen zijn met eenzelfde choleste-10 rol-reducerende activiteit als dihydromonacolin L, en aldus werd de onderhavige uitvinding voltooid.The inventor has conducted further research and found that tetrahydromonacolin L, represented by formula 4 of the formula sheet, specified by the above formula 1, wherein X represents -CE-C 1 -C 1 - has a similar effect, and that metal -carboxylic acid salt and alkylcarboxylic acid esters of dihydro- and tetrahydromonacolin L are also excellent new physiologically active substances with the same cholesterol-reducing activity as dihydromonacolin L, thus completing the present invention.
Een doel van de uitvinding is het verschaffen van nieuwe fysiologisch werkzame stoffen met een cholesterol-reducerende activiteit, alsmede een werkwijze voor het 15 bereiden ervan.An object of the invention is to provide new physiologically active substances with a cholesterol-reducing activity, as well as a method for preparing them.
Een ander doel van de uitvinding is het verschaffen van een middel voor het behandelen tegen hyperlipemie, dat een nieuwe fysiologisch actieve stof bevat met een cholesterol-reducerende activiteit als 20 werkzame ingrediënt.Another object of the invention is to provide an anti-hyperlipaemia agent comprising a novel physiologically active substance having a cholesterol-reducing activity as an active ingredient.
Verdere doeleinden en voordelen van de uitvinding zullen worden toegelicht aan de hand van de volgende beschrijving en de tekening. In de tekening toont: fig. 1 een infrarood absorptiespectrum 25 (KBr) van dihydromonacolin L, fig. 2 een NMR spectrum (CDCl-j) van dihydromonacolin L, en fig. 3 een massa-analysespectrum van dihydromonacolin L.Further objects and advantages of the invention will be elucidated on the basis of the following description and the drawing. In the drawing: Fig. 1 shows an infrared absorption spectrum 25 (KBr) of dihydromonacolin L, Fig. 2 shows an NMR spectrum (CDCl-j) of dihydromonacolin L, and Fig. 3 shows a mass analysis spectrum of dihydromonacolin L.
30 Dihydromonacolin L, verkregen volgens de uitvinding en gerepresenteerd door formule 3, kan worden verkregen door het kweken van micro-organismen, een soort fungi, in het bijzonder micro-organismen behorende tot het genus Monascus en afscheiden uit het gekweekte medium.Dihydromonacolin L, obtained according to the invention and represented by formula 3, can be obtained by culturing microorganisms, a kind of fungi, in particular microorganisms belonging to the genus Monascus and separating from the cultivated medium.
35 De micro-organismen, gebruikt in de onder havige uitvinding zijn de dihydromonacolin L producerende stammen, behorende tot het genus Monascus, en een stam, welke volgens de uitvinding bijzonder effektief geacht wordt, is bijv. Monascus ruber No. 1005, die door de 40 uitvinder werd geïsoleerd uit voedingsmiddelen, geproduceerd 8204904 » < - 3 - in Thailand, en welke stam werd gedeponeerd onder Nr.The microorganisms used in the present invention are the dihydromonacolin L producing strains belonging to the genus Monascus, and a strain which is considered to be particularly effective according to the invention is eg Monascus ruber No. 1005, which was isolated from foods by the inventor, produced 8204904 <- 3 - in Thailand, and which strain was deposited under no.
FERM-P 4822 bij Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry, Japan, en onder Nr.FERM-P 4822 at Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry, Japan, and under No.
5 ATCC 20657 bij het American Type Culture Collection, U.S.A.5 ATCC 20657 at the American Type Culture Collection, U.S.A.
Onnodig te zeggen, dat niet alleen variante maar ook mutante stammen van de micro-organismen, behorende tot het genus Monascus andere dan de bovengenoemde, kunnen 10 worden gebruikt, indien zij een dihydromonacolin L producerend vermogen hebben.Needless to say, not only variant but also mutant strains of the microorganisms belonging to the genus Monascus other than the above can be used if they have a dihydromonacolin L producing ability.
De bacteriologische eigenschappen van de genoemde dihydromonacolin L producerende micro-organismen zijn als volgt: 15 1. GroeiThe bacteriological properties of said dihydromonacolin L producing microorganisms are as follows: 1. Growth
De groei op een aardappel-glucose-agarmedium bij 25°C is snel, en de diameter van de kolonie bereikt 5- 6 cm 10 dagen na inoculatie. De kolonie is plat en er ontwikkelt zich een relatief dunne basislaag van 20 hyphae. De ontwikkeling van lucht- hyphae is gering; de lucht-hyphae zijn wit en de meeste ervan wolachtig. Er worden veel cleistothecia gevormd op de basislaag van hyphae en deze kleuren roodbruin bij rijping. Zowel het oppervlak als de achterkant van de kolonie zijn bruin tot 25 roodbruin in kleur.Growth on a potato glucose agar medium at 25 ° C is rapid, and the diameter of the colony reaches 5-6 cm 10 days after inoculation. The colony is flat and a relatively thin base layer of 20 hyphae develops. The development of air hyphae is small; the aerial hyphae are white and most of them are wooly. Many cleistothecia are formed on the base layer of hyphae and these turn reddish brown when matured. Both the surface and the back of the colony are brown to 25 reddish brown in color.
De groei op Sabouraud's agarmedium bij 25°C is zeer snel en de diameter van de kolonie bereikt 6- 6,5 cm 10 dagen na inoculatie. Het oppervlak van de kolonie is zeer vlak, en basishyphae en luchthyphae 30 ontwikkelen zich beter dan op aardappel-glucose-agarmedium. Cleistothecia-aantallen zijn zeer gering. Het oppervlak van de kolonie is roodgeel of roodbruin in kleur en de onderkant is roodbruin tot donkerbruin.Growth on Sabouraud's agar medium at 25 ° C is very rapid and the colony diameter reaches 6-6.5 cm 10 days after inoculation. The surface of the colony is very flat, and base hyphae and aerial hyphae develop better than on potato glucose agar medium. Cleistothecia numbers are very low. The surface of the colony is reddish yellow or reddish brown in color, and the underside is reddish brown to dark brown.
De groei op havermeelagar bij 25°C is 35 langzaam en de diameter van de kolonie bereikt 1,5-2 cm 10 dagen na inoculatie. De kolonie is vlak. Ontwikkeling van luchthyphae en de vorming van cleistothecia zijn beide gering. Zowel het oppervlak als de achterkant van de kolonie zijn donkerrood tot roodbruin in kleur.The growth on oatmeal agar at 25 ° C is slow and the diameter of the colony reaches 1.5-2 cm 10 days after inoculation. The colony is flat. Development of air hyphae and cleistothecia formation are both minor. Both the surface and the back of the colony are dark red to reddish brown in color.
40 ^ De groei op Czapek's agarmedium bij 25°C40 ^ Growth on Czapek's agar medium at 25 ° C
8204904 - 4 - is zeer langzaam en de diameter van de kolonie bereikt 1,6-1,8 cm 10 dagen na inoculatie. De groeisnelheden op elk van de bovengenoemde media bij 37°C zijn nagenoeg gelijk aan die bij 25°C.8204904-4 is very slow and the diameter of the colony reaches 1.6-1.8 cm 10 days after inoculation. The growth rates on each of the above media at 37 ° C are substantially the same as those at 25 ° C.
5 2. Morfologische eigenschappen5 2. Morphological properties
De cleistothecia zijn sferisch en hebben een diameter van 30-60 micron; de wanden zijn dun en membraan-achtig; de stelen ervan hebben septum-wanden en elk bestaat uit een hypha met een diameter van 3,5-4,5 10 micron en een lengte van 15-80 micron. De ascus bezit 8 sporen en is nagenoeg sferisch en evanescent. De ascosporen zijn eivormig of ellipsoïde; zij hebben een grootte van 4-5 x 4-7 micron; en hun oppervlakken zijn glad. De conidia zijn kleurloos en sferisch of peervormig; 15 hun grootte is 6-9 x 6-11 micron; hun bases zijn afgeknot en hun wanden zijn relatief dik en glad. De conidia zijn basipetaal verbonden. De conidiofoor is als een vegetatieve hypha en vertakt of onvertakt, waarbij de conidia aan de top gevormd zijn. De mycelia zijn vertakt 20 en hebben septumwanden; de meeste ervan hebben een diameter van 3-5 micron.The cleistothecia are spherical and have a diameter of 30-60 microns; the walls are thin and membrane-like; its stems have septum walls and each consists of a hypha 3.5-4.5 microns in diameter and 15-80 microns in length. The ascus has 8 tracks and is almost spherical and evanescent. The ascospores are ovoid or ellipsoidal; they are 4-5 x 4-7 microns in size; and their surfaces are smooth. The conidia are colorless and spherical or pear-shaped; Their size is 6-9 x 6-11 microns; their bases are truncated and their walls are relatively thick and smooth. The conidia are basically connected. The conidiophor is like a vegetative hypha and branched or unbranched, with the conidia formed at the top. The mycelia are branched and have septal walls; most of them are 3-5 microns in diameter.
Gebaseerd op de waarneming van zijn eigenschappen, zoals boven gegeven, werd dit micro-organisme geïdentificeerd als een stam van Monascus ruber van 25 Tieghem.Based on the observation of its properties, as given above, this microorganism was identified as a strain of Monascus ruber from Tieghem.
Microbiologische eigenschappen van Monascus ruber zijn gerapporteerd in de volgende literatuur; van Tieghem, Bull. Soc. Botan. France, 31_, 227 (1884);Microbiological properties of Monascus ruber have been reported in the following literature; van Tieghem, Bull. Soc. Botan. France, 31, 227 (1884);
Cole e.a., The Canadian Journal of Botany, £6, 987 (1968), 30 en Takada, Transactions of the Micological Society of Japan, 9, 128 (1969).Cole et al., The Canadian Journal of Botany, £ 6,987 (1968), 30 and Takada, Transactions of the Micological Society of Japan, 9,128 (1969).
Dihydromonacolin L wordt geproduceerd door het kweken van de dihydromonacolin L producerende stam aerobisch in een voedingsmedium op de bekende methode 35 als kweekmethode van fungi. Dihydromonacolin L producerend micro-organisme wordt bijv. in serie gekweekt op een medium bestaande uit 2 % oplosbaar zetmeel, 1 % glucose, 2 % pepton en 2 % agar. Teneinde dihydromonacolin L te produceren, worden de cellichamen, die gegroeid zijn 40 op het agarmedium, direkt geïnoculeerd op het produktie- 8204904 - 5 - medium en gekweekt. Verder worden de cellichamen, gegroeid op het produktiemedium, gekweekt op een nieuw produktiemedium, waarin dihydromonacolin L kan worden geproduceerd.Dihydromonacolin L is produced by culturing the dihydromonacolin L producing strain aerobically in a nutrient medium in the known method as culture method of fungi. For example, dihydromonacolin L producing microorganism is grown in series on a medium consisting of 2% soluble starch, 1% glucose, 2% peptone and 2% agar. In order to produce dihydromonacolin L, the cell bodies grown on the agar medium are directly inoculated on the production medium 8204904-5 and grown. Furthermore, the cell bodies grown on the production medium are grown on a new production medium in which dihydromonacolin L can be produced.
Het dihydromonacolin L producerende micro-5 organisme wordt gekweekt bij een temperatuur, lopende van 7 tot 40°C, maar gewoonlijk wordt dihydromonacolin L bij voorkeur voortgebracht bij een temperatuur van 20 tot 35°C. Voor het kweken van het dihydromonacolin L producerende micro-organisme, behorende tot het genus Monascus, kunnen 10 alle bekende voedingsbronnen, bekend voor kweken van fungi en andere micro-organismen worden gebruikt. Zo kunnen bijv. glucose, maltose, dextrine, zetmeel, lactose, saccharose, glycerine en dergelijke worden gebruikt als koolstofbron. Onder deze koolstofbronnen zijn glucose 15 en zetmeel favoriete koolstofbronnen voor de produktie van dihydromonacolin L.The dihydromonacolin L producing micro-5 organism is grown at a temperature ranging from 7 to 40 ° C, but usually dihydromonacolin L is preferably produced at a temperature of 20 to 35 ° C. For the cultivation of the dihydromonacolin L-producing microorganism belonging to the genus Monascus, all known food sources known for cultivation of fungi and other microorganisms can be used. For example, glucose, maltose, dextrin, starch, lactose, sucrose, glycerine and the like can be used as a carbon source. Among these carbon sources, glucose 15 and starch are preferred carbon sources for the production of dihydromonacolin L.
Alle stikstofbronnen, bekend voor het kweken van micro-organismen, behorende tot het genus Monascus of andere, kunnen worden gebruikt voor de produktie van 20 dihydromonacolin L. Zo kunnen bijv. pepton, vleesextract, gist, gistextract, sojabonenmeel, pindameel, graanmout-vloeistof, rijstzemelen en anorganische stikstofbronnen en dergelijke worden gebruikt. Bij de produktie van dihydromonacolin L door het kweken van het dihydromonacolin L 25 producerende micro-organisme, kunnen indien gewenst, een anorganisch zout en een metaalzout worden toegevoegd.All nitrogen sources known for the cultivation of microorganisms belonging to the genus Monascus or others can be used for the production of 20 dihydromonacolin L. For example, peptone, meat extract, yeast, yeast extract, soybean meal, peanut flour, cereal malt liquid , rice bran and inorganic nitrogen sources and the like are used. In the production of dihydromonacolin L by cultivation of the dihydromonacolin L producing microorganism, an inorganic salt and a metal salt can be added if desired.
Een spoorhoeveelheid van een zwaar metaal kan eveneens worden toegevoegd, indien dit nodig is.A trace amount of a heavy metal can also be added if needed.
Dihydromonacolin L wordt verkregen door 30 het aerobisch kweken van het dihydromonacolin L producerende micro-organisme, en daarbij worden algemeen toegepaste aerobische kweekmethoden toegepast, zoals bijv. vastkweken, schudkweken, en kweken onder beluchting en roeren. Indien het tegengaan van schuim vereist is gedurende 35 het kweken of steriliseren van het medium, kunnen anti-schuimmiddelen zoals siliconenolie, oppervlakactieve middelen en dergelijke worden gebruikt. De temperatuur van 20 tot 35°C heeft de voorkeur voor het kweken.Dihydromonacolin L is obtained by aerobically culturing the dihydromonacolin L producing microorganism, employing commonly used aerobic culture methods such as, for example, culturing, shaking, and culturing under aeration and agitation. If anti-foaming is required during culturing or sterilizing the medium, anti-foaming agents such as silicone oil, surfactants and the like can be used. The temperature of 20 to 35 ° C is preferred for cultivation.
Het kweken wordt voortgezet, totdat dihydromonacolin L 40 aanzienlijk accumuleert, en gewoonlijk uitgevoerd 8204904 - 6 - gedurende 4 tot 17 uur.Culturing is continued until dihydromonacolin L 40 accumulates significantly, and usually carried out 8204904-6 for 4 to 17 hours.
Extractie van de onderhavige substantie uit het gekweekte materiaal kan worden uitgevoerd door een geschikte combinatie van een verscheidenheid van methoden 5 op basis van de onderhavige substantie, die werden aangegeven door de onderhavige uitvinder. Dat wil zeggen; deze methoden omvatten extractie met een oplosmiddel zoals ether, ethylacetaat, chloroform, benzeen en dergelijke; oplossen in een oplosmiddel met een grote polariteit 10 zoals aceton, alcohol en dergelijke; verwijdering van onzuiverheden door gebruik van petroleumether, hexaan en dergelijke met een kleine polariteit, gelfiltratie door gebruikmaking van een Cephadex-kolom; een adsorptie-chromatografie door gebruik van geactiveerde koolstof, 15 silicagel en dergelijke. De onderhavige substantie wordt geïsoleerd uit het gekweekte medium als homogene stof door gebruikmaking van een geschikte combinatie van deze middelen.Extraction of the subject substance from the cultured material can be performed by an appropriate combination of a variety of methods based on the subject substance, which have been indicated by the present inventor. Which means; these methods include extraction with a solvent such as ether, ethyl acetate, chloroform, benzene and the like; dissolving in a high polarity solvent such as acetone, alcohol and the like; removal of impurities using petroleum ether, hexane and the like of low polarity, gel filtration using a Cephadex column; an adsorption chromatography using activated carbon, silica gel and the like. The present substance is isolated from the cultured medium as a homogeneous substance using an appropriate combination of these agents.
Meer concreet kan de onderhavige substantie 20 worden geïsoleerd uit het gekweekte medium door de combinatie van de volgende stappen: Extractie met een oplosmiddel zoals ethylacetaat en dergelijke uit het gekweekte medium, droogverdampen van het extract, oplossen van het extract in een organisch oplosmiddel 25 zoals benzeen en dergelijke, extractie met een waterige oplossing van alkalihydroxyde, aanzuren van de waterige oplossing door toevoeging van een zuur, en het onderwerpen van de oplossing aan extractie met een organisch oplosmiddel zoals ethylacetaat, droogdampen van het extract, 30 oplossen van het extract in benzeen, verwijdering van gevormde kristallen door geconcentreerde verdamping totdat de oplossing droog is, oplossen van het gedroogde produkt in een organisch oplosmiddel zoals benzeen, en ten slotte het zuiveren van het ruwe produkt door 35 middel van een gebruikelijke kolomchromatografie teneinde een gezuiverd eindprodukt te geven.More specifically, the present substance 20 can be isolated from the cultivated medium by the combination of the following steps: Extraction with a solvent such as ethyl acetate and the like from the cultivated medium, evaporation of the extract to dryness, dissolving the extract in an organic solvent such as benzene and the like, extraction with an aqueous solution of alkali metal hydroxide, acidification of the aqueous solution by addition of an acid, and subjecting the solution to extraction with an organic solvent such as ethyl acetate, evaporating the extract to dryness, dissolving the extract in benzene, removal of formed crystals by concentrated evaporation until the solution is dry, dissolving the dried product in an organic solvent such as benzene, and finally purifying the crude product by conventional column chromatography to give a purified final product.
De fysisch-chemische eigenschappen van dihydro-monacolin L worden in het onderstaande beschreven.The physicochemical properties of dihydro-monacolin L are described below.
Dihydromonacolin L, gerepresenteerd door de 40 bovengenoemde algemene formule 3, is een wit kristallijn 8204904 - 7 - poeder, dat oplosbaar is in oplosmiddelen zoals lagere alcoholen, bijv. methanol, ethanol, propanol en dergelijke; aceton, chloroform, ethylacetaat, benzeen en dergelijke.Dihydromonacolin L, represented by the above general formula 3, is a white crystalline 8204904-7 powder which is soluble in solvents such as lower alcohols, e.g., methanol, ethanol, propanol and the like; acetone, chloroform, ethyl acetate, benzene and the like.
Het is onoplosbaar in hexaan, petroleumether en dergelijke.It is insoluble in hexane, petroleum ether and the like.
5 Deze stof is neutraal en is niet oplosbaar in zowel neutraal als aangezuurd water. De lactonstructuur verkrijgt een open ring door de gebruikelijke verzeping met alkali en wordt omgezet in een in water oplosbare zure substantie. Deze zure substantie wordt geëxtraheerd met een oplos-10 middel zoals ethylacetaat, chloroform en dergelijke in het zure pH-gebied, en opnieuw omgezet in dihydro-monacolin L door droogverdampen.5 This material is neutral and insoluble in both neutral and acidified water. The lactone structure obtains an open ring by the usual saponification with alkali and is converted into a water-soluble acidic substance. This acidic substance is extracted with a solvent such as ethyl acetate, chloroform and the like in the acidic pH range, and reconverted to dihydro-monacolin L by evaporation to dryness.
De elementair-analyse van dihydromonacolin L geeft de volgende waarden: koolstof 74,50 %; waterstof 9,85 %? 15 en zuurstof 15,65 %. Het heeft een molecuulgewicht van 306 en een molecuulformule C]_gH3o°3* De fig. 1/ 2 en 3 tonen resp. het infrarood-absorptiespectrum, het NMR-spectrum en het massa-analysespectrum van deze stof.The elemental analysis of dihydromonacolin L gives the following values: carbon 74.50%; hydrogen 9.85%? 15 and oxygen 15.65%. It has a molecular weight of 306 and a molecular formula C] _gH30 ° 3 * Figures 1/2 and 3 show resp. the infrared absorption spectrum, the NMR spectrum and the mass analysis spectrum of this substance.
Dunne-laag-chromatografie onder gebruikmaking 20 van silicagel (bereid door Merck & Co., No. 5715, Kiesel gel^S)60-F254) geeft een enkele stip bij een Rf-waarde van 0,48, wanneer hexaan-aceton (1:1) wordt gebruikt als ontwikkelingssolvent. Genoemde stip kan worden gedetecteerd door zwavelzuursproeien (roodbruin gekleurd bij zwak 25 verhitten) en jodium.Thin layer chromatography using silica gel (prepared by Merck & Co., No. 5715, Kiesel gel ^ S) 60-F254) gives a single dot at an Rf value of 0.48, when hexane acetone ( 1: 1) is used as a development solvent. Said dot can be detected by sulfuric acid sprays (colored red-brown on weak heating) and iodine.
Tetrahydromonacolin L, gerepresenteerd door bovengenoemde formule 4, is een wit kristal en oplosbaar in lagere alcoholen zoals methanol, ethanol, propanol en dergelijke, en andere oplosmiddelen zoals aceton, 30 chloroform, ethylacetaat, benzeen en dergelijke, maar onoplosbaar in hexaan, petroleumether, en dergelijke.Tetrahydromonacolin L, represented by formula 4 above, is a white crystal and soluble in lower alcohols such as methanol, ethanol, propanol and the like, and other solvents such as acetone, chloroform, ethyl acetate, benzene and the like, but insoluble in hexane, petroleum ether, and of such.
Deze stof is neutraal en onoplosbaar in water, maar kan gemakkelijk worden omgezet in een in water oplosbare zure substantie door het openen van de ring van de lacton-35 structuur met de gebruikelijke alkalibehandeling.This substance is neutral and insoluble in water, but can be easily converted to a water-soluble acidic substance by opening the ring of the lactone-35 structure with the usual alkali treatment.
Elementair-analyse van tetrahydromonacolin L geeft de volgende waarden: koolstof 74,03 %; waterstof 10,39 %, zuurstof 15,58 %. Het heeft een molecuulgewicht van 308 en de molecuulformule ervan is ci9H32°3· 40 Tetrahydromonacolin L kan worden verkregen 8204904 - 8 - door het oplossen van monacolin L of dihydromonacolin L gerepresenteerd door formule 3, in een organisch oplosmiddel zoals bijv. tetrahydrofuran, ethylacetaat en dergelijke, en de opgeloste verbinding te hydrogeneren in aanwezigheid 5 van een katalysator zoals bijv. platinaoxyde, palladium-koolstof en dergelijke. De hydrogenering wordt uitgevoerd bij een temperatuur van 10 tot 60°C, bij voorkeur 15 tot 40°C, en is gewoonlijk voltooid in 10 tot 24 uur. De hoeveelheid katalysator bedraagt gewoonlijk 1 tot 60 gew. %, 10 bij voorkeur 2 tot 30 gew. %, gebaseerd op het gewicht van monacolin L of dihydromonacolin L.Elemental analysis of tetrahydromonacolin L gives the following values: carbon 74.03%; hydrogen 10.39%, oxygen 15.58%. It has a molecular weight of 308 and its molecular formula is ci9H32 ° 3 · 40 Tetrahydromonacolin L can be obtained 8204904-8 - by dissolving monacolin L or dihydromonacolin L represented by formula 3, in an organic solvent such as e.g. tetrahydrofuran, ethyl acetate and the like, and hydrogenating the dissolved compound in the presence of a catalyst such as eg platinum oxide, palladium carbon and the like. The hydrogenation is carried out at a temperature of 10 to 60 ° C, preferably 15 to 40 ° C, and is usually completed in 10 to 24 hours. The amount of the catalyst is usually 1 to 60 wt. %, Preferably 2 to 30 wt. %, based on the weight of monacolin L or dihydromonacolin L.
Monacolin L, gebruikt als uitgangsmateriaal, is een bekende verbinding, en kan worden verkregen door isolering uit het gekweekte medium van Monascus ruber 15 No. 1005 (FERM P-No. 4822), zoals beschreven in deMonacolin L, used as a starting material, is a known compound, and can be obtained by isolation from the cultured medium of Monascus ruber No. 15. 1005 (FERM P-No. 4822), as described in the
Japanse ter inzage gelegde octrooiaanvrage Nr. 57798/81.Japanese Patent Application Laid-Open No. 57798/81.
Thans zal een verbinding met formule 2 worden toegelicht.A compound of formula 2 will now be explained.
Als metaalcarbonzure zouten van dihydro-20 en tetrahydromonacolin L zijn te noemen alkalimetaalzouten zoals natrium, kalium en dergelijke, aardalkalimetaalzouten zoals calcium, magnesium en dergelijke; aluminiumzout, ijzerzout, zinkzout; koperzout; nikkelzout; en kobaltzout of dergelijke. Onder deze hebben in het bijzonder 25 alkalimetaalzout, aardalkalimetaalzout en aluminiumzout de voorkeur, en daaronder bezitten natriumzout, calcium-zout en aluminiumzout de hoogste voorkeur.As metal carboxylic acid salts of dihydro-20 and tetrahydromonacolin L are to be mentioned alkali metal salts such as sodium, potassium and the like, alkaline earth metal salts such as calcium, magnesium and the like; aluminum salt, iron salt, zinc salt; copper salt; nickel salt; and cobalt salt or the like. Among these, alkali metal salt, alkaline earth metal salt and aluminum salt are particularly preferred, among which sodium salt, calcium salt and aluminum salt are most preferred.
Als voorbeelden van alkylcarbonzuuresters zijn te noemen methylester, ethylester, n-propylester, 30 isopropylester, n-butylester, n-hexylester en dergelijke. Voorbeelden van deze verbindingen zijn in het onderstaande opgegeven.As examples of alkyl carboxylic acid esters to be mentioned are methyl ester, ethyl ester, n-propyl ester, isopropyl ester, n-butyl ester, n-hexyl ester and the like. Examples of these compounds are listed below.
1. Dihydromonacolin L natriumcarboxylaatzout 2. Tetrahydromonacolin L natriumcarboxylaatzout 35 3. Dihydromonacolin L calciumcarboxylaatzout 4. Tetrahydromonacolin L calciumcarboxylaatzout 5. Tetrahydromonacolin L aluminiumcarboxylaatzout 6. Dihydromonacolin L methylcarboxylaatester 7. Tetrahydromonacolin L methylcarboxylaatester 40 8. Tetrahydromonacolin L ethylcarboxylaatester 8204904 - 9 -1. Dihydromonacolin L sodium carboxylate salt 2. Tetrahydromonacolin L sodium carboxylate salt 35 3. Dihydromonacolin L calcium carboxylate salt 4. Tetrahydromonacolin L calcium carboxylate salt 5. Tetrahydromonacolin L aluminum carboxylate ester 8carboxylate ethyl ester 7. Tetra
Deze verbindingen worden op de volgende wijze gesynthetiseerd.These compounds are synthesized in the following manner.
Tetrahydromonacolin L alkylcarbonzuurester wordt gepresenteerd door formule 5 van het formuleblad, 5 waarin R een alkylgroep met l tot 6 koolstofatomen betekent, en wordt verkregen door het katalytisch reduceren van carbonzure ester van het corresponderende monacolin L of dihydromonacolin L, gerepresenteerd door formule 6 van het formuleblad, waarin ----- een dubbele binding 10 betekent in het geval van monacolin L en een enkele binding in het geval van dihydromonacolin L, terwijl R is zoals boven aangegeven, in een organisch oplosmiddel zoals bijv. alcohol, bijv. methanol, ethanol en dergelijke; tetrahydrofuran, ethylacetaat en dergelijke in aanwezigheid 15 van een katalysator zoals platinaoxyde, palladiumkoolstof en dergelijke. Reduktie wordt uitgevoerd bij een temperatuur lopende van 10 tot 60°C, bij voorkeur 15 tot 40°C. De katalysator wordt gewoonlijk gebruikt in een hoeveelheid van 1 tot 60 gew. %, bij voorkeur 2 tot 30 gew. %, 20 gebaseerd op het gewicht van de carbonzuurester van monacolin L of dihydromonacolin L.Tetrahydromonacolin L alkyl carboxylic acid ester is presented by formula 5 of the formula sheet, wherein R represents an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, and is obtained by catalytically reducing the carboxylic acid ester of the corresponding monacolin L or dihydromonacolin L represented by formula 6 of the formula sheet wherein ----- means a double bond 10 in the case of monacolin L and a single bond in the case of dihydromonacolin L, while R is as indicated above in an organic solvent such as e.g. alcohol, e.g. methanol, ethanol and such; tetrahydrofuran, ethyl acetate and the like in the presence of a catalyst such as platinum oxide, palladium carbon and the like. Reduction is carried out at a temperature ranging from 10 to 60 ° C, preferably 15 to 40 ° C. The catalyst is usually used in an amount of 1 to 60 wt. %, preferably 2 to 30 wt. %, 20 based on the weight of the carboxylic acid ester of monacolin L or dihydromonacolin L.
De carbonzuurester kan ook worden verkregen door het laten reageren van tetrahydromonacolin L met een alcohol (ROH, waarin R dezelfde betekenis als boven 25 aangegeven bezit), corresponderende met de gewenste ester.The carboxylic acid ester can also be obtained by reacting tetrahydromonacolin L with an alcohol (ROH, where R has the same meaning as indicated above) corresponding to the desired ester.
Alkylcarbonzuurester van dihydromonacolin L wordt gewoonlijk verkregen door het laten reageren van dihydromonacolin L met een alcohol, corresponderende met de gewenste ester. In de bovengenoemde reactie wordt 30 als katalysator een anorganisch zuur gebruikt zoals zoutzuur, zwavelzuur en dergelijke; boorfluoride; zure ionen-wisselingshars en dergelijke, en als oplosmiddel een alcohol of iets dergelijks of benzeen, chloroform, ether en dergelijke, welke geen deelnemen aan de reactie.Alkylcarboxylic acid ester of dihydromonacolin L is usually obtained by reacting dihydromonacolin L with an alcohol corresponding to the desired ester. In the above reaction, a mineral acid such as hydrochloric acid, sulfuric acid and the like is used as the catalyst; boron fluoride; acidic ion exchange resin and the like, and as a solvent an alcohol or the like or benzene, chloroform, ether and the like which do not participate in the reaction.
35 Monacolin L alkylcarbonzuurester en dihydro monacolin L alkylcarbonzuurester, dat gebruikt wordt als uitgangsmateriaal, kan worden verkregen door het laten reageren van monacolin L of dihydromonacolin L met een alcohol, corresponderende met de gewenste ester.Monacolin L alkyl carboxylic acid ester and dihydro monacolin L alkyl carboxylic acid ester, which is used as a starting material, can be obtained by reacting monacolin L or dihydromonacolin L with an alcohol corresponding to the desired ester.
40 Metaalcarbonzuurzouten van dihydro- en 8204904 -10- tetrahydromonacolin L worden gerepresenteerd door formule 7 van het formuleblad, waarin X, M en n dezelfde betekenis hebben als boven, en zij worden gesynthetiseerd op de volgende wijze.Metal carboxylic acid salts of dihydro- and 8204904-10-tetrahydromonacolin L are represented by formula 7 of the formula sheet, wherein X, M and n have the same meaning as above, and they are synthesized in the following manner.
5 Genoemde verbindingen worden verkregen door het oplossen van dihydro- of tetrahydromonacolin L, gerepresenteerd door formule 1, waarin X -CH=CH- of -CH2“CH2_ betekent, in een oplosmiddel zoals methanol, ethanol, aceton en dergelijke, en het laten reageren 10 van de genoemde verbinding met een metaalhydroxyde, gerepresenteerd door formule 8 van het formuleblad, waarin M een alkalimetaal, zoals natrium, kalium en dergelijke; een aardalkalimetaal zoals calcium, magnesium en dergelijke; of een metaalelement zoals aluminium, ijzer, zink, koper, 15 nikkel, kobalt of dergelijke, voorstelt, en n een atoom-valentie van genoemd metaalelement is. Dit metaalhydroxyde wordt gewoonlijk gebruikt in waterige oplossing.Said compounds are obtained by dissolving dihydro- or tetrahydromonacolin L, represented by formula 1, wherein X represents -CH = CH- or -CH2 “CH2_, in a solvent such as methanol, ethanol, acetone and the like, and reacting 10 of said compound with a metal hydroxide represented by formula 8 of the formula sheet, wherein M is an alkali metal such as sodium, potassium and the like; an alkaline earth metal such as calcium, magnesium and the like; or represents a metal element such as aluminum, iron, zinc, copper, nickel, cobalt or the like, and n is an atomic valence of said metal element. This metal hydroxide is usually used in aqueous solution.
De fysiologische werkzaamheid van dihydro-monacolin L, tetrahydromonacolin L en afgeleiden daarvan 20 volgens de uitvinding, kan worden aangetoond door de volgende methode, waarbij de bloedcholesterol-reducerende activiteit bij ratten wordt gedetecteerd. Triton® WR-1339 £4-(1,1,3,3-tetramethylbutyl)fenolpolymeer met formaldehyde en oxiran, een oppervlakactief middel, 25 vervaardigd door Rohm & Haas Co., U.S.A. |], met een bloed-cholesterol-verhogende activiteit), wordt intraveneus gegeven aan een groep vijf ratten in een dosering van 400 mg/kg, terwijl tegelijk een bepaalde hoeveelheid van elke verbinding oraal wordt toegediend. Men laat de 30 ratten doodbloeden na 14 uur en het bloedcholesterolgehalte wordt bepaald door de gebruikelijke methode (behandelde groep). Aan de andere kant worden ratten, waaraan alleen Triton® WR-1339 intraveneus gegeven is, op dezelfde wijze behandeld teneinde het bloedcholesterol te bepalen 35 (controlegroep). De werking van dihydromonacolin L kan kwantitatief worden bepaald door het vergelijken van de cholesterolniveaus in de beide groepen.The physiological activity of dihydro-monacolin L, tetrahydromonacolin L and derivatives thereof according to the invention can be demonstrated by the following method, which detects blood cholesterol reducing activity in rats. Triton® WR-1339 £ 4- (1,1,3,3-tetramethylbutyl) phenol polymer with formaldehyde and oxiran, a surfactant, manufactured by Rohm & Haas Co., U.S.A. |], with a blood cholesterol-raising activity), is given intravenously to a group of five rats at a dose of 400 mg / kg, while orally administering a certain amount of each compound. The 30 rats are allowed to bleed to death after 14 hours and the blood cholesterol level is determined by the usual method (treated group). On the other hand, rats given only Triton® WR-1339 intravenously are treated in the same manner to determine blood cholesterol (control group). The activity of dihydromonacolin L can be quantitatively determined by comparing the cholesterol levels in the two groups.
De serumcholesterol-reducerende activiteit, de effektieve dosis en de toxiciteit worden in het onder-40 staande aangegeven.The serum cholesterol reducing activity, the effective dose and the toxicity are indicated below.
8204904 - 11 - 1) Serumcholesterol-reducerende activiteit.8204904 - 11 - 1) Serum cholesterol-reducing activity.
(A) Triton® WR-1339 werd intraveneus toegediend aan ratten in een hoeveelheid van 400 mg/kg, terwijl tegelijk dihydroraonacol L, tetrahydromonacolin L 5 of een afgeleide daarvan oraal werd toegediend (in de vorm van een waterige oplossing of waterige suspensie).(A) Triton® WR-1339 was administered intravenously to rats in an amount of 400 mg / kg, while dihydroraonacol L, tetrahydromonacolin L 5 or a derivative thereof was administered orally (in the form of an aqueous solution or aqueous suspension).
Men liet de ratten doodbloeden na 14 uur, en bepaalde het bloedcholesterol op de gebruikelijke methode. De resultaten zijn getoond in tabel A.The rats were allowed to bleed to death after 14 hours, and blood cholesterol was determined by the usual method. The results are shown in Table A.
10 TABEL A10 TABLE A
Serumcholesterol-reducerende activiteit bij ratten.Serum cholesterol-reducing activity in rats.
dosis percentage serum-dose percentage of serum
Verbinding mg/kg cholesterol-reductie ___(%)_Compound mg / kg cholesterol reduction ___ (%) _
Dihydromonacolin L 20 23,4 15 100 30,6Dihydromonacolin L 20 23.4 15 100 30.6
Tetrahydromonacolin L 5 21 20 29Tetrahydromonacolin L 5 21 20 29
Tetrahydromonacolin L 5 19Tetrahydromonacolin L 5 19
raethylester 2Qraethyl ester 2Q
Tetrahydromonacolin L 5 20 20 natriumzout 2g 2g (B) Triton® WR-1339 werd intraveneus aan ratten gegeven in een hoeveelheid van 400 mg/kg terwijl tegelijk elk van monacolin L, dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L, of afgeleiden daarvan oraal werd 25 toegediend in een dosering van 10 mg/kg (in de vorm van een waterige oplossing of waterige suspensie). Verder werd elk van de bovengenoemde verbindingen oraal toegediend in een dosering van 10 mg/kg na 8 uur (totale dosis 20 mg/kg). Men liet de ratten vervolgens doodbloeden na 30 12 uur (20 uur na toediening van Triton WR-1339) en het serumcholesterol werd bepaald door de gebruikelijke methode. De resultaten zijn getoond in tabel B.Tetrahydromonacolin L 5 20 20 Sodium salt 2g 2g (B) Triton® WR-1339 was given intravenously to rats in an amount of 400mg / kg while simultaneously administering each of monacolin L, dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L, or derivatives thereof, in a dose of 10 mg / kg (in the form of an aqueous solution or aqueous suspension). Furthermore, each of the above compounds was administered orally at a dose of 10 mg / kg after 8 hours (total dose 20 mg / kg). The rats were then allowed to bleed to death after 12 hours (20 hours after administration of Triton WR-1339) and the serum cholesterol was determined by the usual method. The results are shown in Table B.
8204904 - 12 -8204904 - 12 -
TABEL BTABLE B
Percentage serum-Percentage of serum
Verbindingen cholesterolreductie (%) 5 Monacolin L 18,9Compounds cholesterol reduction (%) 5 Monacolin L 18.9
Dihydromonacolin L natriumzout 31,3Dihydromonacolin L sodium salt 31.3
Dihydromonacolin L methylester 34,1Dihydromonacolin L methyl ester 34.1
Tetrahydromonacolin L natriumzout 34,2Tetrahydromonacolin L sodium salt 34.2
Tetrahydromonacolin L methylester 38,0 10 Zoals blijkt uit de bovengegeven resultaten, bezitten de verbindingen volgens de uitvinding een uitstekende cholesterol-reducerende activiteit, en in het bijzonder hebben dihydromonacolin L methylester, tetrahydromonacolin L en afgeleiden daarvan een uitstekend 15 effekt.Tetrahydromonacolin L methyl ester 38.0 As can be seen from the above results, the compounds of the invention have excellent cholesterol reducing activity, and in particular dihydromonacolin L methyl ester, tetrahydromonacolin L and derivatives thereof have excellent effect.
2) Acute toxiciteit.2) Acute toxicity.
De acute toxiciteit werd bepaald door het oraal en in intraperitonaal toedienen van een waterige oplossing of waterige suspensie van dihydromonacolin L, 20 tetrahydromonacolin L en afgeleiden daarvan. De resultaten zijn getoond in onderstaande tabel C.The acute toxicity was determined by the oral and intraperitoneal administration of an aqueous solution or aqueous suspension of dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L and derivatives thereof. The results are shown in Table C below.
- tabel C - 8204904 - 13 -- table C - 8204904 - 13 -
X—NX-N
εη λ; ^ ο ο ο οοοοοοοοοοοοο ε δ ο ο οοοοοοοοοοοοο 3 ο ιλ ο tnomomotnoLnoLnoLn • · · · · * *εη λ; ^ ο ο ο οοοοοοοοοοοοο ε δ ο ο οοοοοοοοοοοοοο 3 3 ο ιλ ο tnomomotnoLnoLnoLn • · · · · * *
Ο γΗ ι—( CNtNfStNCNCNΟ γΗ ι— (CNtNfStNCNCN
m 2 Λ Λ Λ ΛΛΛΛΛΛΛΛΛΛΛΛΛ φ 5 *3 η η η -π -p ^ 'p 4J (0 nJ 03 «J f0 to ^ Jö φ φ φ φ φ to to φ φ ρ β β β β C c 5 β “5 555222 5 C ·Η ·Η ·Η Ή Ή ·Η ··“· ·ρ -U-H U U Μ Μ Μ Μ ^ 5^ HC m cd Q) φ Φ Φ Φ φ φ 0| Ρ4 Οι Οι £ Β4 _i , +) ·Η ιΗ (0 ι—I rtJ'—I to.—1 ί01^ ί0^ 2Τϊί 2 -γΊ η-ΐ αΐϊ-ΐίβ i-itOï-itO S-it0>-it0 i-itOJ-t *5Η ϋ Φ φ-ρφ -ρφ-ρφ-ρφ-ρφ-ρφ-ρ^-ρ •Η Ο U β p βΡβΡβΡβΡΦΡ^Ρβ χ Ε-) Ο ·Η Ο -ri Ο ·Η Ο ·Η Ο -Η Ο ·Η Ο ·Η Ο Ή ο---------- ρ φ Ρ Ρ α φ Ο ·Η < Ό 1-¾ w tn w , ® ,, ο -η -Ρ ·η -Ρ ·ρ -Ρ ‘P -¾ η ρ 3 (0 Ο Φ 2 ^ 0 ι uSe ρ ε u ε ρ ε__ρ_ pj------- w 03m 2 Λ Λ Λ ΛΛΛΛΛΛΛΛΛΛΛΛΛ φ 5 * 3 η η η -π -p ^ 'p 4J (0 nJ 03 «J f0 to ^ Jö φ φ φ φ φ to to φ φ ρ β β β β C c 5 β“ 5 555222 5 C · Η · Η · Η Ή Ή · Η ·· “· · ρ -UH UU Μ Μ Μ Μ ^ 5 ^ HC m cd Q) φ Φ Φ Φ φ φ 0 | Ρ4 Οι Οι £ Β4 _i, +) · Η ιΗ (0 ι — I rtJ' — I to. — 1 ί01 ^ ί0 ^ 2Τϊί 2 -γΊ η-ΐ αΐϊ-ΐίβ i-itOï-itO S-it0> -it0 i-itOJ-t * 5Η ϋ Φ φ-ρφ -ρφ-ρφ-ρφ-ρφ-ρφ-ρ ^ -ρ • Η Ο U β p βΡβΡβΡβΡΦΡ ^ Ρβ χ Ε-) Ο · Η Ο -ri Ο · Η Ο · Η Ο -Η Ο · Η Ο · Η Ο Ή ο ---------- ρ φ Ρ Ρ α φ Ο · Η <Ό 1-¾ w tn w, ® ,, ο -η -Ρ Η -Ρ · ρ -Ρ 'P -¾ η ρ 3 (0 Ο Φ 2 ^ 0 ι uSe ρ ε u ε ρ ε__ρ_ pj ------- w 03
< I<I
64 . έ Η ο >1 ’Ι"1 Λ Ρ +> -Ρ φ φ ε c 1-3 1-3^64. έ Η ο> 1 ’Ι" 1 Λ Ρ +> -Ρ φ φ ε c 1-3 1-3 ^
β C Cβ C C
ι-3 ·Η Ή ·Η Η Η Η β ο ο οι-3 · Η Ή · Η Η Η Η β ο ο ο
Η υ Ü UΗ υ Ü You
I—I Φ φ Φ Ο C G £ υ ο ο ο φ ε ε i Ü» c ο ο ο β ο ρ ρ ij S ’Ö % % Ό Ο >ι Ξ1 β Ρ 33 33 33 •ρ ό φ φ ρ ρ 32 >ι Ρ Ρ 11 Ρ -Ρ U 33 -Ρ -Ρ -Ρ -Ρ Φ g 5_g_gj_gg 8204904 - 14 -I — I Φ φ Φ Ο CG £ υ ο ο ο φ ε ε i Ü »c ο ο ο β ο ρ ρ ij S 'Ö%% Ό Ο> ι Ξ1 β Ρ 33 33 33 • ρ ό φ φ ρ ρ 32> ι Ρ Ρ 11 Ρ -Ρ U 33 -Ρ -Ρ -Ρ -Ρ Φ g 5_g_gj_gg 8204904 - 14 -
Uit bovengenoemde tabel C kon worden vastgesteld , dat dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L en afgeleiden daarvan een zeer lage toxiciteit bezitten.From Table C above, it could be determined that dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L and derivatives thereof have very low toxicity.
Zoals boven opgemerkt, bezitten dihydromonacolin 5 L, tetrahydromonacolin, en de afgeleiden daarvan een bloedcholesterol-reducerende activiteit, en kunnen zij worden gebruikt als farmaceutica, bijv. als antihyper-lipemiemiddel en anti-atherosclerosemiddel.As noted above, dihydromonacolin 5 L, tetrahydromonacolin, and its derivatives have a blood cholesterol-reducing activity, and can be used as pharmaceuticals, e.g., as an anti-hyperlipaemic and anti-atherosclerotic agent.
Deze verbindingen zijn toe te dienen door 10 middel van intraveneuze injectie of orale toediening en dergelijke. De dosis varieert in afhankelijkheid van leeftijd, lichaamsgewicht, symptonen, toedieningsroute, en dergelijke, en gewoonlijk wordt aan volwassenen dihydromonacolin L toegediend in een dosering van 10 tot 2000 mg, 15 bij voorkeur 50 tot 300 mg, per dag in 1 tot 3 verdeelde doses, terwijl tetrahydromonacolin L, alsook de afgeleiden daarvan, wordt toegediend in een dosering van 5 tot 3000 mg, bij voorkeur 10 tot 300 mg per dag in 1 tot 3 doses.These compounds can be administered by intravenous injection or oral administration and the like. The dose varies depending on age, body weight, symptoms, route of administration, and the like, and adults are usually administered dihydromonacolin L at a dose of 10 to 2000 mg, preferably 50 to 300 mg, per day in 1 to 3 divided doses. while tetrahydromonacolin L, as well as its derivatives, is administered in a dose of 5 to 3000 mg, preferably 10 to 300 mg per day in 1 to 3 doses.
Er kunnen evenwel ook verdere doses worden toegediend, 20 indien dit nodig is.However, further doses can also be administered if necessary.
Dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L, en afgeleiden daarvan kunnen worden bereid in de dosis-vorm op faccultatieve en gebruikelijke wijze in analogie met andere lipemie-reducerende middelen, zoals bijv.Dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L, and derivatives thereof can be prepared in the dose form in a facultative and conventional manner analogous to other lipaemea reducing agents, such as e.g.
25 Clofibrate of Simfibrate. Bijgevolg omvat de onderhavige uitvinding tevens een preparaat-samenstelling, die ten minste êën bevat van dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L en afgeleiden daarvan, welke geschikt zijn als farmaceutische middelen voor mensen. Dergelijke 30 samenstellingen kunnen worden geleverd voor gebruik op normale wijze door toepassing van een gekozen en noodzakelijk farmaceutische drager of excipiënt.25 Clofibrate or Simfibrate. Accordingly, the present invention also includes a composition composition containing at least one of dihydromonacolin L, tetrahydromonacolin L and derivatives thereof, which are useful as human pharmaceutical agents. Such compositions can be supplied for use in a normal manner using a selected and necessary pharmaceutical carrier or excipient.
Deze samenstelling wordt op gewenste wijze aangeboden in een vorm geschikt voor absorptie door 35 de gastrointestinale organen. Tabletten en capsules voor orale toediening zijn in eenheidsdosisvorm en kunnen gebruikelijke excipiënten, bijv. bindmiddelen zoals siroop, arabische gom, gelatine, sorbitol, tragacanth, of polyvinylpyrrolidon bevatten; excipiënten zoals 40 lactose, suiker, graanzetmeel, calciumfosfaat, sorbitol, 8204904 - 15 - of glycine; glijmiddelen zoals bijv. magnesiumstearaat, talk, polyetheenglycol, of siliciumdioxyde; degraderings-middelen zoals bijv. aardappelzetmeel of toelaatbare bevochtigingsmiddelen zoals bijv. natriumlaurylsulfaat.This composition is desirably presented in a form suitable for absorption by the gastrointestinal organs. Tablets and capsules for oral administration are in unit dose form and may contain conventional excipients, e.g., binders such as syrup, gum arabic, gelatin, sorbitol, tragacanth, or polyvinylpyrrolidone; excipients such as lactose, sugar, cereal starch, calcium phosphate, sorbitol, 8204904-15 or glycine; lubricants such as, for example, magnesium stearate, talc, polyethylene glycol, or silicon dioxide; degradants such as, for example, potato starch or permissible wetting agents, such as, for example, sodium lauryl sulfate.
5 De tabletten kunnen op gebruikelijke wijze, bekend in de techniek, worden bekleed. Het vloeibare preparaat voor oraal gebruik kan zijn in de vorm van een waterige of olieachtige suspensie, oplossing, siroop, elixers, e.d., of kan een droog produkt zijn, dat gemakkelijk kan 10 worden opgelost met water of andere geschikte dragers voorafgaand aan het gebruik. Deze vloeibare samenstellingen kunnen normaal gebruikte additieven bevatten, bijv. suspenderingsmiddelen zoals sorbitolsiroop, methylcellulose, glucose/suikerstroop, gelatine, hydroxyethylcellulose, 15 carboxymethylcellulose, aluminiumstearaatgel, of gehydro-geneerd eetbaar vet; emulsievormers zoals lethicine, sorbitanmonooleaat, of arabische gom; niet waterige dragers, zoals amandelolie, gefractioneerde cocosnootolie, olieachtige ester, propeenglycol of ethylalcohol; pre-20 servatieven zoals methyl-p-hydroxybenzoaat, propyl-p-hydroxybenzoaat, of sorbinezuur.The tablets can be coated in a conventional manner known in the art. The liquid oral preparation may be in the form of an aqueous or oily suspension, solution, syrup, elixirs, etc., or it may be a dry product that can be easily dissolved with water or other suitable carriers before use. These liquid compositions may contain commonly used additives, eg, suspending agents such as sorbitol syrup, methyl cellulose, glucose / sugar syrup, gelatin, hydroxyethyl cellulose, carboxymethyl cellulose, aluminum stearate gel, or hydrogenated edible fat; emulsifiers such as lethicine, sorbitan monooleate, or gum arabic; non-aqueous carriers such as almond oil, fractionated coconut oil, oily ester, propylene glycol or ethyl alcohol; pre-20 servatives such as methyl p-hydroxybenzoate, propyl p-hydroxybenzoate, or sorbic acid.
Een injecteerbare samenstelling wordt verschaft in de vorm van een eenheidsdosisampul of een houder voor multiple doses tezamen met een toegevoegd 25 preservatief. De samenstelling kan zijn in de vorm van een suspensie, oplossing, emulsie in een olieachtige of waterige drager, en kan een voorgeschreven middel bevatten zoals een suspensiemiddel, en stabilisator en/of een dispersiemiddel. Aan de andere kant kan de 30 actieve ingrediënt een poeder zijn, dat voor gebruik gemakkelijk kan worden opgelost in een geschikte drager, bijv. pyrogeen-vrij en gesteriliseerd water.An injectable composition is provided in the form of a unit dose ampoule or a multiple dose container together with an added preservative. The composition may be in the form of a suspension, solution, emulsion in an oily or aqueous carrier, and may contain a prescription agent such as a suspending agent, a stabilizer and / or a dispersing agent. On the other hand, the active ingredient can be a powder, which can be easily dissolved in a suitable carrier before use, eg pyrogen-free and sterilized water.
De uitvinding zal nu in meer details worden toegelicht aan de hand van voorbeelden en preparaat-35 voorbeelden, waartoe de uitvinding echter geenszins beperkt is.The invention will now be explained in more detail with reference to examples and preparation examples, to which, however, the invention is by no means limited.
VOORBEELD IEXAMPLE I
Monascus ruber No. 1005 (FERM-P 4822, ATCC 20657) werd geïnoculeerd in een vloeistofmedium, 40 dat 3 % glucose, 1 % pepton, 3 % ontvet sojabonenpoeder, 8204904 - 16 - 7 % glycerol, 0,2 % natriumnitraat, en 0,1 % magnesium-sulfaat*heptahydraat (MgS0^*7H20) bevatte, werd bij 28°C aerobisch gekweekt gedurende 10 dagen. Men voegde 6N zoutzuur toe aan het resulterende gekweekte filtraat 5 (50 liter), waardoor de pH gebracht werd op 3, en vervolgens werd het filtraat geëxtraheerd met een gelijke hoeveelheid ethylacetaat. Dit extract werd geconcentreerd tot droog en het residue werd opgelost in 1 liter benzeen, terwijl het onoplosbare materiaal werd verwijderd door filtreren.Monascus ruber No. 1005 (FERM-P 4822, ATCC 20657) was inoculated into a liquid medium, 40 containing 3% glucose, 1% peptone, 3% defatted soybean powder, 8204904 - 16-7% glycerol, 0.2% sodium nitrate, and 0.1% magnesium sulfate * heptahydrate (MgSO4 * 7H2 O) was grown aerobically at 28 ° C for 10 days. 6N hydrochloric acid was added to the resulting cultured filtrate 5 (50 liters), bringing the pH to 3, then the filtrate was extracted with an equal amount of ethyl acetate. This extract was concentrated to dryness and the residue was dissolved in 1 liter of benzene, while the insoluble matter was removed by filtration.
10 Het filtraat werd 2 x gewassen met 500 ml.van een 5 % waterige oplossing van natriumbicarbonaat. Vervolgens voegde men 1 liter 2N natriumhydroxyde-oplossing toe aan de benzeenoplossing, en het resulterende mengsel werd bij kamertemperatuur geroerd. Een waterige laag 15 werd afgescheiden, nadat verdwijnen van dihydromonacolin L uit de benzeenlaag was bevestigd door dunne laag chromatografie. Deze waterige laag werd op een pH van 3,0 gebracht met 6N zoutzuur en tweemaal geëxtraheerd met 1 liter ethylacetaat. Het extract werd geconcentreerd 20 tot droog, waardoor 3,1 g olieachtig materiaal werd verkregen. Dit olieachtige materiaal werd opgelost in benzeen en onderworpen aan een kristallisatie, teneinde monacolin L neer te slaan, dat tegelijk werd geproduceerd. Het moederloog, waaruit de kristallen 25 waren verwijderd, werd gedroogd en vervolgens opgelost in benzeen en geadsorbeerd aan een kolom, gepakt met 80 g silicagel (Wako gel C-200). De kolom werd achtereenvolgens ontwikkeld met 400 ml dichloormethaan, 5 liter van een mengsel van dichloormethaan en ethylacetaat 30 (9:1), en 7 liter van een mengsel van dichloormethaan en ethylacetaat (8:2). Een dihydromonacolin L bevattende fraktie |_ een fraktie, die een bruine stip gaf door zwavelzuur te sproeien en door te verhitten bij 120°C bij de Rf-waarde van 0,45, ontwikkeld door dunne laag 35 chromatografie onder gebruikmaking van silicagel No. 5715, Kiegel gel® 60 F2,^ (bereid door Merck & Co.), oplosmiddel: CH2Cl2/aceton = 9:1 ] werd opgelost in benzeen en geadsorbeerd aan een kolom, gepakt met 40 g silicagel (Wako gel C-200) en ontwikkeld door achtereen-40 volgens 250 ml hexaan en 4 liter van een mengsel van 8204904 - 17 - hexaan en aceton (9:1). Een dihydromonacolin L bevattende fraktie werd gedroogd en opgelost in 60 ml benzeen en tweemaal gewassen met 30 ml van een 5 %'s natriumbicarbo-naatoplossing. De benzeenoplossing werd vervolgens 5 gedehydrateerd en geconcentreerd tot droog, waardoor 30 mg van een wit poeder verkregen werd. Dit witte poeder werd onderworpen aan hoge-snelheidsvloeistofchromatografie (silicagel-ODS type kolom, ontwikkeld met een oplosmiddel, bestaande uit acetonitril - 0,1 % fosforzuuroplossing, 10 1:1) waardoor een dihydromonacolin L fraktie verkregen werd. Na het afdestilleren van het oplosmiddel werd 18 mg dihydromonacolin L in de vorm van een kristallijn wit poeder verkregen.The filtrate was washed twice with 500 ml. Of a 5% aqueous solution of sodium bicarbonate. Then 1 liter of 2N sodium hydroxide solution was added to the benzene solution, and the resulting mixture was stirred at room temperature. An aqueous layer 15 was separated after disappearance of dihydromonacolin L from the benzene layer was confirmed by thin layer chromatography. This aqueous layer was adjusted to a pH of 3.0 with 6N hydrochloric acid and extracted twice with 1 liter of ethyl acetate. The extract was concentrated to dryness to give 3.1 g of an oily material. This oily material was dissolved in benzene and subjected to crystallization to precipitate monacolin L, which was produced simultaneously. The mother liquor, from which the crystals had been removed, was dried and then dissolved in benzene and adsorbed on a column packed with 80 g of silica gel (Wako gel C-200). The column was developed successively with 400 ml of dichloromethane, 5 liters of a mixture of dichloromethane and ethyl acetate (9: 1), and 7 liters of a mixture of dichloromethane and ethyl acetate (8: 2). A dihydromonacolin L-containing fraction - a fraction which gave a brown dot by spraying sulfuric acid and heating at 120 ° C at the Rf value of 0.45, developed by thin layer chromatography using silica gel No. 5715, Kiegel gel® 60 F2, ^ (prepared by Merck & Co.), solvent: CH2Cl2 / acetone = 9: 1] was dissolved in benzene and adsorbed on a column packed with 40 g silica gel (Wako gel C-200) and developed by successive 40 according to 250 ml of hexane and 4 liters of a mixture of 8204904-17-hexane and acetone (9: 1). A dihydromonacolin L-containing fraction was dried and dissolved in 60 ml of benzene and washed twice with 30 ml of a 5% sodium bicarbonate solution. The benzene solution was then dehydrated and concentrated to dryness to give 30 mg of a white powder. This white powder was subjected to high speed liquid chromatography (silica gel-ODS type column, developed with a solvent consisting of acetonitrile - 0.1% phosphoric acid solution, 10 1: 1) to obtain a dihydromonacolin L fraction. After distilling off the solvent, 18 mg of dihydromonacolin L in the form of a crystalline white powder were obtained.
Elementair-analyse 15 Berekend: C, 74,50 %; H, 9,85 %Elemental Analysis 15 Calculated: C, 74.50%; H, 9.85%
Gevonden: C, 74,63 %; H, 9,79 %Found: C, 74.63%; H, 9.79%
Molecuulgewicht : 306 VOORBEELD IIMolecular weight: 306 EXAMPLE II
Men loste 100 mg monacolin L op in 5 ml 20 gedroogde tetrahydrofuran en voegde aan deze oplossing 5 mg platina-oxyde toe, waarna de resulterende oplossing werd onderworpen aan hydrogenering met waterstof onder roeren bij kamertemperatuur gedurende 15 uur. De katalysator werd verwijderd door filtratie en het resulterende 25 produkt werd gekristalliseerd uit een mengsel van ethyl-acetaat en hexaan, waardoor men 63 mg verkreeg van een wit kristal van tetrahydromonacolin L.100 mg of monacolin L were dissolved in 5 ml of dried tetrahydrofuran and 5 mg of platinum oxide was added to this solution, and the resulting solution was subjected to hydrogenation with hydrogen under stirring at room temperature for 15 hours. The catalyst was removed by filtration and the resulting product was crystallized from a mixture of ethyl acetate and hexane to give 63 mg of a white crystal of tetrahydromonacolin L.
Elementair-analyseElemental analysis
Berekend: C, 74,03 %; H, 10,39 % 30 Gevonden: C, 74,13 %; H, 10,42 %Calculated: C, 74.03%; H, 10.39%. Found: C, 74.13%; H, 10.42%
Molecuulgewicht : 308 Ultravioletabsorptiespectrum (MeOH):Molecular weight: 308 Ultraviolet absorption spectrum (MeOH):
EindabsorptieFinal absorption
Infraroodabsorptiespectrum (KBr):^3500, 1730 cm-1 35 Smeltpunt: 101° - 105°CInfrared absorption spectrum (KBr): ^ 3500, 1730 cm-1 35 Melting point: 101 ° - 105 ° C
VOORBEELD IIIEXAMPLE III
Men loste 60 mg dihydromonacolin L, verkregen volgens de methode van voorbeeld I, op in 5 ml droge tetrahydrofuran en voegde 5 ml platinaoxyde toe aan de 40 resulterende oplossing. Vervolgens herhaalde men de 8204904 - 18- procedure van voorbeeld IX, waardoor 33 mg verkregen werd van een wit kristal van tetrahydromonacolin L.60 mg of dihydromonacolin L, obtained by the method of Example I, were dissolved in 5 ml of dry tetrahydrofuran and 5 ml of platinum oxide was added to the resulting solution. The 8204904-18 procedure of Example IX was then repeated to yield 33 mg of a white crystal of tetrahydromonacolin L.
Elementair-analyse:Elemental analysis:
Gevonden: C, 74,11 %; H, 10,44 % 5 Molecuulgewicht : 308.Found: C, 74.11%; H, 10.44%. Molecular weight: 308.
Ultravioletabsorptiespectrum: eindabsorptieUltraviolet absorption spectrum: final absorption
Infraroodabsorptiespectrum (KBr):^3.500, 1730 cm”1 VOORBEELD IVInfrared absorption spectrum (KBr): ^ 3,500, 1730 cm ”1 EXAMPLE IV
Men loste 200 mg monacolin L methylcarboxylaat-10 ester op in 30 ml methanol, en voegde 10 mg platinaoxyde toe als katalysator, waarna de resulterende oplossing katalytisch werd gereduceerd op de gebruikelijke wijze.200 mg of monacolin L methyl carboxylate-10 ester were dissolved in 30 ml of methanol, 10 mg of platinum oxide was added as a catalyst, and the resulting solution was catalytically reduced in the usual manner.
Na verwijdering van de katalysator werd het geconcentreerde residu gezuiverd door silicagelchromatografie 15 (benzeen-ethylacetaat, 9:1 en 8:2 mengsel), waardoor men 195 mg tetrahydromonacolin L methylester verkreeg als een olieachtige substantie.After removing the catalyst, the concentrated residue was purified by silica gel chromatography (benzene-ethyl acetate, 9: 1 and 8: 2 mixture) to give 195 mg of tetrahydromonacolin L methyl ester as an oily substance.
Elementair-analyse:Elemental analysis:
Berekend: C, 70,59 %; H, 10,59 % 20 Gevonden: C, 70,60 %; H, 10,61 %Calculated: C, 70.59%; H, 10.59%. Found: C, 70.60%; H, 10.61%
Molecuulgewicht : 340Molecular weight: 340
Ultravioletabsorptiespectrum (methanol): eindabsorptieUltraviolet absorption spectrum (methanol): final absorption
Infraroodabsorptiespectrum: -3200, 1740, 1730 cm 1 25 VOORBEELD VInfrared absorption spectrum: -3200, 1740, 1730 cm 1 EXAMPLE V
Men loste 120 mg tetrahydromonacolin L op in 5 ml benzeen, en voegde 0,4 ml toe van een 0,1N natriumhydroxyde-oplossing, en roerde het resulterende mengsel bij 40°C gedurende 2 uur. Een waterige laag scheidde zich af van 30 het mengsel en werd drie keer gewassen met 2 mm benzeen en vervolgens gevriesdroogd, waardoor men 104 mg tetrahydromonacolin L natriumzout verkreeg als een wit poeder.120 mg of tetrahydromonacolin L were dissolved in 5 ml of benzene, 0.4 ml of a 0.1N sodium hydroxide solution was added, and the resulting mixture was stirred at 40 ° C for 2 hours. An aqueous layer separated from the mixture and was washed three times with 2 mm benzene and then lyophilized to give 104 mg of tetrahydromonacolin L sodium salt as a white powder.
Elementair-analyse:Elemental analysis:
Berekend: C, 65,52 %; H, 9,48 % 35 Gevonden: C, 65,98 %; H, 9,61 %Calculated: C, 65.52%; H, 9.48%. Found: C, 65.98%; H, 9.61%
Ultravioletabsorptiespectrum (Ë^O): eindabsorptieUltraviolet absorption spectrum (Ë ^ O): final absorption
Infraroodabsorptiespectrum (KBr): 3420, 2930, 1720, 1650 cm”1Infrared absorption spectrum (KBr): 3420, 2930, 1720, 1650 cm ”1
Door het herhalen van de procedure volgens dit 40 voorbeeld, maar daarbij dihydromonacolin L gebruikend 8204904 - 19 - in plaats van tetrahydromonacolin L, verkreeg men dihydro-monacolin L natriumzout.By repeating the procedure of this example, but using dihydromonacolin L using 8204904-19 instead of tetrahydromonacolin L, dihydro-monacolin L sodium salt was obtained.
Elementair-analyse:Elemental analysis:
Berekend; C, 65,87 %; H, 9,02 % 5 Gevonden: C, 66,16 %; H, 9,14 %Calculated; C, 65.87%; H, 9.02%. Found: C, 66.16%; H, 9.14%
Ultravioletabsorptiespectrum (1^0); eindabsorptie Infraroodabsorptiespectrum (KBr): 3420, 2930, 1720 en 1650 cm”1 Door in plaats van natriumhydroxyde in het boven-10 gegeven voorbeeld calciumhydroxyde of magnesiumhydroxyde te gebruiken, verkreeg men resp. het calciumzout en het magnesiumzout.Ultraviolet absorption spectrum (1 ^ 0); final absorption Infrared absorption spectrum (KBr): 3420, 2930, 1720 and 1650 cm ”1 By using calcium hydroxide or magnesium hydroxide instead of sodium hydroxide in the above example, respectively. the calcium salt and the magnesium salt.
VOORBEELD VIEXAMPLE VI
Synthese van dihydromonacolin L methylcarboxylaatester: 15 Men loste 90 mg dihydromonacolin L op in 10 ml methanol, en voegde aan de resulterende oplossing 200 mg toe van een zure ionenwisselingshars (Dowex®50, H type), en roerde het mengsel bij 60 tot 70°C gedurende 3 uur.Synthesis of dihydromonacolin L methyl carboxylate ester: 90 mg of dihydromonacolin L were dissolved in 10 ml of methanol, and 200 mg of an acidic ion exchange resin (Dowex® 50, H type) were added to the resulting solution, and the mixture was stirred at 60 to 70 ° C for 3 hours.
Na voltooiing van de reactie werd de hars verwijderd van 20 het mengsel door filtratie, en werd het filtraat onderworpen aan verdamping onder gereduceerde druk ter verwijdering van het oplosmiddel, waarna het verkregen residu werd gezuiverd door middel van een kolomchromatografie onder gebruikmaking van 10 g silicagel (ontwikkelings-25 oplosmiddel: benzeen-ethylacetaat 9:1 en 8:2 mengsels), waardoor men 63 mg dihydromonacolin L methylaarboxylaat-ester als een olieachtige substantie verkreeg. Elementair-analyse:After the completion of the reaction, the resin was removed from the mixture by filtration, and the filtrate was subjected to evaporation under reduced pressure to remove the solvent, and the resulting residue was purified by column chromatography using 10 g of silica gel ( developing solvent: benzene-ethyl acetate 9: 1 and 8: 2 mixtures), whereby 63 mg of dihydromonacolin L methyl arboxylate ester were obtained as an oily substance. Elemental analysis:
Berekend: C, 70,97 %; H, 10,12 % 30 Gevonden: C, 71,37 %; H, 10,83 %Calculated: C, 70.97%; H, 10.12%. Found: C, 71.37%; H, 10.83%
Ultravioletabsorptiespectrum (1^0): eindabsorptie Infraroodabsorptiespectrum (KBr): -n.3100, 1740, en 1725 cm *Ultraviolet absorption spectrum (1 ^ 0): final absorption Infrared absorption spectrum (KBr): -n. 3100, 1740, and 1725 cm *
Preparaatvoorbeeld 1 35 Capsules voor orale toediening:Preparation example 1 35 Capsules for oral administration:
Tetrahydromonacolin L 250 mgTetrahydromonacolin L 250 mg
Lactose 75 mgLactose 75 mg
Magnesiumstearaat 15 mgMagnesium stearate 15 mg
Totaal 340 mg 8204904 - 20 -Total 340 mg 8204904 - 20 -
Het poeder van het hierboven gegeven recept werd gemengd en gezeefd door een zeef met maaswijdte 60, waarna 340 mg van het poeder werd aangebracht in een No. 1 gelatine capsule ter bereiding van een capsule-5 preparaat.The powder of the above recipe was mixed and sieved through a 60 mesh sieve, after which 340 mg of the powder was placed in a No. 1 gelatin capsule to prepare a capsule-5 preparation.
ReferentievoorbeeldReference example
Synthese van monacolin L methylcarboxylaatester:Synthesis of monacolin L methyl carboxylate ester:
Men loste 1 g monacolin L op in 15 ml methanol, en voegde aan deze oplossing 2 g toe van een zure 10 ionenwisselingshars (Dowex©50 W, H+ type, droge vorm) en verhitte het resulterende mengsel en roerde bij 60 tot 70°C gedurende 3 uur. Na voltooiing van de reactie werd de hars verwijderd van het mengsel door filtratie, werd het filtraat onderworpen aan verdamping onder 15 gereduceerde druk voor het verwijderen van het oplosmiddel, en werd het verkregen residu gezuiverd door middel van een kolomchromatografie onder gebruikmaking van 10 g silicagel (ontwikkelingsoplosmiddel: benzeen-ethylacetaat 9:1 en 8:2 mengsels), waardoor men 650 mg monacolin L 20 methylcarboxylaatester verkreeg als een olieachtige substantie.1 g of monacolin L was dissolved in 15 ml of methanol, and 2 g of an acidic ion exchange resin (Dowex® 50 W, H + type, dry form) were added to this solution and the resulting mixture was heated and stirred at 60 to 70 ° C for 3 hours. After completion of the reaction, the resin was removed from the mixture by filtration, the filtrate was subjected to evaporation under reduced pressure to remove the solvent, and the resulting residue was purified by column chromatography using 10 g of silica gel ( developing solvent: benzene-ethyl acetate 9: 1 and 8: 2 mixtures), yielding 650 mg of monacolin L 20 methyl carboxylate ester as an oily substance.
Elementair-analyse:Elemental analysis:
Berekend: C, 71,39 %; H, 9,59 %Calculated: C, 71.39%; H, 9.59%
Gevonden: C, 71,44 %; H, 9,68 % 25 Ultravioletabsorptiespectrum (H90): eindabsorptie ^ —1Found: C, 71.44%; H, 9.68%. Ultraviolet absorption spectrum (H90): final absorption 1
Infraroodabsorptiespectrum: 3400,^3100, 1710 cm - conclusies - 8204904Infrared absorption spectrum: 3400, ^ 3100, 1710 cm - claims - 8204904
Claims (11)
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56214788A JPS58109480A (en) | 1981-12-23 | 1981-12-23 | Novel physiologically active substance, dihydromonacolin l and its preparation |
| JP21478881 | 1981-12-23 | ||
| JP2374582A JPS58144318A (en) | 1982-02-17 | 1982-02-17 | Tetrahydromonacolin l, its derivative and remedy for hyperlipemia comprising it as active ingredient |
| JP2374582 | 1982-02-17 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL8204904A true NL8204904A (en) | 1983-07-18 |
Family
ID=26361156
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL8204904A NL8204904A (en) | 1981-12-23 | 1982-12-20 | DIHYDRO- AND TETRAHYDROMONACOLIN L, METAL SALTS AND ALKYL ESTERS, AND METHOD FOR PREPARING THE SAME. |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| AU (1) | AU9133682A (en) |
| BE (1) | BE895445A (en) |
| DE (1) | DE3247175A1 (en) |
| DK (1) | DK568882A (en) |
| FR (1) | FR2518546A1 (en) |
| GB (1) | GB2111989B (en) |
| IT (1) | IT8249711A0 (en) |
| NL (1) | NL8204904A (en) |
| SE (1) | SE8207306L (en) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5354772A (en) * | 1982-11-22 | 1994-10-11 | Sandoz Pharm. Corp. | Indole analogs of mevalonolactone and derivatives thereof |
| US4472426A (en) * | 1982-12-22 | 1984-09-18 | Merck & Co., Inc. | Antihypercholesterolemic compounds |
| US4613610A (en) * | 1984-06-22 | 1986-09-23 | Sandoz Pharmaceuticals Corp. | Cholesterol biosynthesis inhibiting pyrazole analogs of mevalonolactone and its derivatives |
| US4804679A (en) * | 1984-07-24 | 1989-02-14 | Sandoz Pharm. Corp. | Erythro-(E)-7-(3'-C1-3alkyl-1'-(3",5"-dimethylphenyl)naphth-2'-yl)-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acids and derivatives thereof |
| US4686237A (en) * | 1984-07-24 | 1987-08-11 | Sandoz Pharmaceuticals Corp. | Erythro-(E)-7-[3'-C1-3 alkyl-1'-(3",5"-dimethylphenyl)naphth-2'-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acids and derivatives thereof |
| US4647576A (en) * | 1984-09-24 | 1987-03-03 | Warner-Lambert Company | Trans-6-[2-(substitutedpyrrol-1-yl)alkyl]-pyran-2-one inhibitors of cholesterol synthesis |
| US4668794A (en) * | 1985-05-22 | 1987-05-26 | Sandoz Pharm. Corp. | Intermediate imidazole acrolein analogs |
-
1982
- 1982-12-08 AU AU91336/82A patent/AU9133682A/en not_active Abandoned
- 1982-12-09 GB GB08235197A patent/GB2111989B/en not_active Expired
- 1982-12-20 NL NL8204904A patent/NL8204904A/en not_active Application Discontinuation
- 1982-12-21 FR FR8221416A patent/FR2518546A1/en not_active Withdrawn
- 1982-12-21 DE DE19823247175 patent/DE3247175A1/en not_active Withdrawn
- 1982-12-21 SE SE8207306A patent/SE8207306L/en not_active Application Discontinuation
- 1982-12-21 IT IT8249711A patent/IT8249711A0/en unknown
- 1982-12-22 BE BE0/209788A patent/BE895445A/en unknown
- 1982-12-22 DK DK568882A patent/DK568882A/en not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2518546A1 (en) | 1983-06-24 |
| DE3247175A1 (en) | 1983-07-07 |
| GB2111989A (en) | 1983-07-13 |
| AU9133682A (en) | 1983-06-30 |
| GB2111989B (en) | 1985-05-09 |
| BE895445A (en) | 1983-04-15 |
| IT8249711A0 (en) | 1982-12-21 |
| SE8207306L (en) | 1983-06-24 |
| DK568882A (en) | 1983-06-24 |
| SE8207306D0 (en) | 1982-12-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI66427B (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN NY SOM CEILING MODEL | |
| DE68914495T2 (en) | Antihypercholesterolemic agent. | |
| DK149003B (en) | PROCEDURE FOR PREPARING POLYHYDRO-3,7-DIMETHYL-8- (2-TETRAHYDRO-4-HYDROXY-6-OXO-2H-PYRAN-2-YL) ETHYL) -1-NAPHTHYL-1-METHYL BUTYL BIRTHYL BIRTHYL ETHYL BUTYL BIRTHYL ETHYL BIRTHYL ETHYL BUTYL EYE HYDROXY ACIDS OR SALTS OR ESTERS THEREOF | |
| JPS5835144A (en) | Mb-530b derivative and its preparation | |
| US5858738A (en) | Ermophilane sesquiterpenoids as HIV intergrase inhibitors | |
| US6403347B1 (en) | HIV integrase inhibitors | |
| NZ194445A (en) | Monacolin k salts and esters | |
| WO1997039999A1 (en) | Novel terphenyl compounds and medicines containing the same | |
| NL8204904A (en) | DIHYDRO- AND TETRAHYDROMONACOLIN L, METAL SALTS AND ALKYL ESTERS, AND METHOD FOR PREPARING THE SAME. | |
| JPH0115491B2 (en) | ||
| US6110716A (en) | HIV integrase inhibitors | |
| JP3026864B2 (en) | New sesquiterpene derivatives | |
| WO1998034932A1 (en) | Hiv integrase inhibitors | |
| US5081264A (en) | Bioxanthracene derivatives | |
| RU2261901C2 (en) | Fungus strain aspergillus terreus 44-62 as producer of lovastatin, industrial method for isolation of lovastatin and method for lactoninization of statins | |
| JP2546239B2 (en) | Novel substance ovalicin | |
| JPS6113798B2 (en) | ||
| JPS5840475B2 (en) | New physiologically active substance ML-236A and its manufacturing method | |
| JP2928626B2 (en) | Platelet activating factor antagonist formactin B | |
| JPH05255184A (en) | New compound ilicicolinic acid a or b | |
| JPH0532656A (en) | Decalin-based compound | |
| JPS6210998B2 (en) | ||
| JPS6320215B2 (en) | ||
| JPH04224559A (en) | Arterialization-inhibiting substance fr-901448 and fr-901449 | |
| JPS58109480A (en) | Novel physiologically active substance, dihydromonacolin l and its preparation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A85 | Still pending on 85-01-01 | ||
| BV | The patent application has lapsed |