JPH0659304B2

JPH0659304B2 - 血液成分分離方法

Info

Publication number: JPH0659304B2
Application number: JP63153464A
Authority: JP
Inventors: 徹黒田; 隆雄西村
Original assignee: Asahi Medical Co Ltd
Current assignee: Asahi Kasei Medical Co Ltd
Priority date: 1988-06-23
Filing date: 1988-06-23
Publication date: 1994-08-10
Anticipated expiration: 2009-08-10
Also published as: JPH01320064A

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、血液をその成分毎に分離する為に用いるバッ
グと白血球除去フィルターとより成る分離方法に関する
ものである。

更に詳細に述べると、採血に用いられる抗凝固剤入りの
採血バッグと、血漿、赤血球、血小板は通過させが白血
球は通過させない白血球除去フィルターおよび少なくと
も３つの血液成分分離用バッグを組み合わせる事によ
り、無菌的に白血球除去濃厚赤血球、白血球除去濃縮血
小板血漿、血漿の３種類の血液成分を同時に分離しよう
とする方法に関するものである。

（従来技術）近年、医学、特に免疫学の進歩により、血液をその成分
毎に分離し、治療の目的に適した血液成分のみを輸血す
る、いわゆる成分輸血が普及して来た。しかしながら成
分輸血の際、輸血用の血液成分中に混入して来る白血球
は患者にとっては他人の白血球であり、赤血球のＡＢＯ
型を合わせたとしても白血球の血液型は種類が多く、白
血球の型を完全に一致させて輸血する事は困難である。
その為輸血された白血球の表面に存在する抗原に対し、
患者の体内には抗体が産生され、繰り返し輸血された患
者の場合、患者体内の抗白血球抗体と輸血血液中の白血
球とが抗原抗体反応を起こし、発熱、蕁麻疹等の輸血副
作用を起きす事が多い。この為、輸血用血液成分中に含
まれる白血球を除去する目的に使用される白血球除去フ
ィルターが近年開発されて来ている。これらの白血球除
去フィルターは全血または成分毎に分離された血液成分
中の白血球を効率良く除去する事ができるので、輸血を
受ける患者にとっては副作用が抑えられ、非常に喜ばれ
ている。

（発明が解決しようとする問題点）しかしながら、これらの白血球除去フィルターは血液バ
ッグに接続する際、完全に無菌状態で接続する事が不可
能である為、白血球を除去した血液製剤は製造後２４時
間以内に使用するが義務付けられている。白血球を除去
していない血液製剤は、これよりずっと長い期間保存す
る事ができるので、無菌的に白血球を除去する方法があ
れば非常に有用である事は言うまでも無い。これを解決
しようとする試みが米国特許第４５９６６５７号である
が、この方法は、採血バッグに少なくとも２つのバッグ
を接続し、採血バッグと一方のバッグとの間に白血球除
去フィルターを組み込んだものであり、使用方法は、先
ず採血バッグ中の全血を遠心分離し、その後、血小板を
含む血漿は白血球除去フィルターが接続されていないバ
ッグに移され、濃厚赤血球が白血球除去フィルターを通
しもう一方のバッグに移される。この発明によれば白血
球除去濃厚赤血球と白血球、血小板を含む血漿が得られ
る事になる。すなわち、濃厚赤血球中に含まれる白血球
は除去できるが、血小板を含む血漿中に混入する白血球
は除去できず、更には、白血球除去フィルターが血液バ
ッグと一緒に遠心分離機により遠心される為白血球除去
フィルターの容器やバッグの破損があり、安心して使え
無い為広く一般に普及するには至っていない。本発明者
らは上記した様な従来技術の欠点を解決し、遠心分離操
作を行なう際には、白血球除去フィルターを取り外す事
ができ、すなわち、フィルター容器やバッグの破損の心
配が無く、白血球を除去した濃厚赤血球、白血球を除去
した濃縮血小板血漿、血漿等の３つの血液成分を無菌的
に一気に分離できる方法を提供する事を目的に鋭意研究
した結果、本発明を成すに至った。

（問題点を解決する為の手段）すなわち本発明は、血漿、赤血球、血小板は通過させる
が白血球は通過させない白血球除去フィルーの上流側に
採血バッグが接続され該白血球除去フィルターの下流側
には少なくとも３つの血液成分分離用バッグが無菌的に
接続されてなる血液成分分離用バッグ装置を用いて、前
記採血バッグに採取された血液を前記白血球除去フィル
ターに通して予め白血球を除去した後に、塩心分離を行
い比重差により分離された血液成分を前記血液成分分離
用バッグに分取する方法である。

本発明で言う採血バッグとは、採血針を備える採血チュ
ーブを連結し、内部にはＡＣＤ（アシッドサイトレート
デキストローズ）、ＣＰＤ（サイトレート・フォスフェ
ート・デキストローズ）等の抗凝固剤を封したバッグで
あり、一般の採血に使用する採血バッグを使用する事が
できる。

白血球除去フィルターとは、血液中の白血球は捕捉する
が他の血液成分すなわち血漿、赤血球、血小板は捕捉し
ないフィルターであり、繊維状物、多孔性物質、粒子状
物質等を充填したフィルターを用いる事ができる。フィ
ルターの素材としては親水性材料、疎水性材料いずれも
使用する事ができるが、血小板の通過性の観点から親水
性表面を持つ材料の方が好ましい。フィルター素材の形
態としては、繊維状のものが白血球の捕捉効率が良く推
奨できる。繊維状物質の形態としては、織布状、不織布
状、綿状いずれも使用できるが、血液の通液性の観点か
ら不織布状のものが特に好ましい結果を与える。

上記白血球除去フィルターは、例えば繊維状物質の集合
体である不織布をフィルターの主要材料として容器に充
填して用いるが、血小板の通過性をより良くする為に不
織布表面を親水性高分子でコーティングしたり、抗血栓
性材料でコートする事もできる。繊維の直径は、０．３
μｍから２０μｍ程度の物が用いられ、繊維の素材とし
ては、合成繊維、再生セルロースの様な半合成繊維、綿
の様な天然繊維、無機繊維等が用いられる。中でも合成
繊維、例えばポリエチレンテレフタレート、ナイロン、
ポリプロピレン、ポリアクリロニトリル等の繊維が好ま
しく用いられる。また、コート材としては、ヒドロキシ
エチルアクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート
の様にヒドロキシル基を有する高分子材料、ジエチルア
ミノエチル（メタ）アクリレートとヒドロキシエチル
（メタ）アクリレートとの共重合体の様に塩基性含窒素
官能基を有する高分子材料、ポリエーテルウレタン、ア
ブコサン等を用いる事ができる。

血液成分分離用バッグとは、全血を濃厚赤血球、濃縮血
小板血漿、血漿等に分離する為に用いられる液密性のバ
ッグであり、一般に用いられている血液成分分離用バッ
グを用いる事ができる。また、少くとも濃縮血小板血漿
を保存する為に用いられる血液成分分離用バッグは、グ
ロー放電処理した軟質ポリ塩ビニールバッグ、通気量を
大きくしたバッグ、ポリオレフィン系エラストマー製の
バッグ、炭素数の多いフタル酸エステルを可塑剤として
使用したバッグ等血小板の機能低下を起こし難い素材よ
り成るバッグを使用する事が好ましい。

以下、図面を用いて本発明血液成分分離方法を更に詳細
に説明する。

第１図は、本発明の基本構成を示す模式図であり、第２
図は第１図の方法に赤血球保護液としての赤血球保存液
入りバッグを配したものであり、第３図は第１図の方法
に白血球除去フィルターに滞留する血液を回収する為の
生理的溶液入りバッグを配したものであり、第４図は、
第２図と第３図を組み合わせたものである。

第１図において、供血者から採血された血液は採血バッ
グ１に導入され、採血バッグ内に存在する抗凝固剤と混
合され、血液が凝固するのを防止される。採血された血
液は白血球除去フィルター２に重力により、または、採
血バッグを押える等の方法により送られ、白血球除去フ
ィルター２を通過した血液は第１の血液成分分離用バッ
グ３に送られる。血液は白血球除去フィルター２を通過
する事により白血球を除去されるので、第１の血液成分
分離用バッグに送られた血液に含まれるのは赤血球、血
小板および血漿である。この後、白血球除去フィルター
２と第１の血液成分分離用バッグ３との間のチューブを
アルミリングで圧着、あるいはヒートシーラーで熱融着
した後切り離し、血液成分分離用バッグ３、４、５だけ
を遠心分離装置にかけ、遠心する。この操作により第１
の血液成分分離用バッグ３中の血液は層分離し、上清に
多血小板血漿、沈渣に白血球除去濃厚赤血球が得られ
る。

この後上清を第２の血液成分分離用バッグ４に移し、更
にもう１度遠心分離操作を行なうと第２の血液成分分離
用バッグ４中の多血小板血漿は上清に血漿、沈渣に白血
球除去濃厚血小板血漿が得られる。

第２回目の遠心分離操作を行なう前に第１の血液成分分
離用バッグ３は、前述した操作と同じ様にして切り離し
てしまい、残りの２つの血液成分分離用バッグ４、５だ
け、第２回目の遠心分離操作にかけても良い。第２回目
の遠心分離操作の後、上の血漿を第３の血液成分分離用
バッグ５に移し、述した操作の様にして血液成分分離用
バッグ３、４、５を切り離せば第１のバッグ３に白血球
除去濃厚赤血球、第２のバッグ４に白血球除去濃厚血小
板血漿、第３のバッグ５に血漿がそれぞれ無菌的に得ら
れる（説明中、血液成分を１つのバッグから別のバッグ
へ移す際等チューブのクランプ操作は省略した。以下同
じ）。遠心分離操作の際には血液成分分離用バッグ３、
４、５のみを遠心すれば良いので白血球除去フィルター
２の容器が破損したり血液成分分離用バッグ３、４、５
が白血球除去フィルター２の容器に押し潰されて破れる
様な事が無く、安全である。

第２図は第１図に赤血球保存液入りのバッグ６を取り付
けたものであるが、赤血球保存液は、第１回目の遠心分
離操作を行ない、上清の多血小板血漿を第２の血液成分
分離用バッグ４に移した後、第１の血液成分分離用バッ
グ３内に残る濃厚赤血球に加えられる。赤血球保存液を
濃厚赤血球に加える事で赤血球の保存日数を更に長くし
ても輸血に用いる事が可能になる。赤血球保存液の例と
しは、アデニン、マンニトール、ソルビトール、グアノ
シン等を１種類以上含む生理的溶液が挙げられる。

第３図は、第１図に生理的溶液入りのバッグ７を取り付
けたものであるが、生理的溶液は、血液を採血バッグ１
から白血球除去フィルター２に流し終えた後、白血球除
去フィルター２に送られ、白血球除去フィルター２の中
に少量残存する血液を第１の血液成分分離用バッグ３に
回収する為に用いられる。この操作により、赤血球、血
小板、血漿の回収率が高くなる。生理的溶液は生理食塩
水、リンゲル液等血液成分に対してダメージを与え難
く、生体にとって安全なものであれば全て使える。

第４図、第２図と第３図を組み合わせたものであり、使
用方法も前述のとうりである。

また、血漿の回収率を高くする為に、第１の血液成分分
離用バッグ３を更に強く遠心し、上清の血漿を第３の血
液成分分離用バッグ５に移す為のバイパス回路を血液成
分分離用バッグ３、５間に設ける事も本発明に含まれ
る。更に、第１図から第４図までの例では血液成分分離
用バッグ３、４、５が直列の位置関係で示されている
が、並列の位置関係にしても血液成分を分離する操作上
特別な問題は無く、この様な接続の仕方も本発明に含ま
れる。

また、先に述べた血液成分分離操作では、濃縮血小板血
漿を得る際に遠心分離を行ない、沈渣として血小板を得
ているが、第２回目の遠心分離をせずに第１回目の遠心
分離操作後第１の血液成分分離用バッグ３から上清のう
ち血小板濃厚の薄い部分を血液成分分離用バッグ５にし
た後、血小板濃度の濃い部分を血液成分分離用バッグ４
に移す方法もとれる。この操作の場合は、血液成分分離
用バッグ３、４、５は並列の位置関係である事が好まし
い。

（発明の効果）以上述べた様に、本発明を用いる事により、全血から１
つの血液成分分離方法を用いるだけで、完全に無菌的
に、白血球を除去した濃厚赤血球、白血球を除去した濃
縮血小板血漿、血漿の３種類の血液成分を同時に得る事
ができる様になった、更に遠心分離操作を行なう際、白
血球除去フィルターを取り外してしまう事が可能な為、
遠心時に白血球除去フィルターが破損したり、血液成分
分離用バッグが破損される事が無い為非常に安全な血液
成分分離方法とする事ができた。また、白血球を除去し
た血液製剤が得られる為、微小凝集物の発生も少なく、
溶血等も少なくなった。以下、実施例より本発明をより
詳細に説明する。

（実施例）実施例１血液成分分離方法として第１図に示すものを用いた。

白血球除去フィルター２としては、平均直径１．８μｍ
のポリエチレンテレフタレート製不織布を６７ｍｍ×６
７ｍｍの正方形に切断したものを重ねて、第５図に示す
ようにカラム内にセッした後、後述するコポリマーをコ
ートしたものを用いた。不織布フィルター層１１は、２
枚の角型の枠体９、９′を組み合わせてできているカラ
ム本体８の中にセットされており、その周辺部は圧着さ
れている。１０、１０′はカラムの側に設けられた突起
であり、不織布フィルターの中央部を部分的に支持して
いる。１２は処理血液入口、１３は分離血液出口であ
る。不織布フィルターの有効断面積は６０ｍｍ×６０ｍ
ｍ＝３６００ｍｍ^２であり、厚みは７ｍｍ、重量は４．
２ｇである。

コポリマーの合成及び不織布へのコーティングは以下の
様に行なった。

２−ヒドロキシエチルメタアクリレート（以下ＨＥＮＡ
と略称する）とジエチルアミノエチルメタアクリレート
（以下ＤＥＡＭＡと略称する）のコポリマーを通常の溶
液ラジカル重合によって合成した。重合条件としては、
エタノール中のモノマー濃度１モル／で開始剤として
アゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）１／２００モル／
存在下、６０℃で８時間重合反応を行った。

上記ポリマーを１ｇ／ｄの濃度になる様にエタノール
に溶解したものを前述の不織布フィルターに充填した
後、余分なポリマーを乾燥窒素を送り込む事より除去
し、更にそのまま窒素を送り続け、乾燥した。このフィ
ルターを更に１６時間真空乾燥した後、白血球除去フィ
ルター２とした。コーティングしたＨＥＭＡとＤＥＡＭ
Ａとのコポリマー中のＤＥＡＭＡ単位の含量は５モル％
とした。

採血バッグ１はＣＰＤ入りの採血バッグ、血液成分分離
用バッグ３、４、５は市販のものを用いた。

供血者からの血液４００ｇを採血バッグ１に導入した
後、重力により白血球除去フィルター２を経由して、第
１の血液成分分離用バッグ３に流した。血液全てを流し
終えるまでの時間は２０分であった。

この後、ヒートシーラーを用いて白血球除去フィルター
２と第１の血液成分分離用バッグ３との間のチューブを
２ケ所溶着し、その間をはさみで切断し、血液成分分離
用バッグ３、４、５を２２℃の遠心分離機にセットし、
３００ｇで１８分遠心した。この後遠心分離機より血液
成分分離用バッグ３、４、５を取り出し、第１の血液成
分分離用バッグ３を押えつけながら上清を第２の血液成
分分離用バッグ４に移した。この後もう１度２２℃の遠
心分離機にセットし、３０００ｇで６分遠心した。その
後遠心分離機から血液成分分離用バッグ３、４、５を取
り出し、第２の血液成分分離用バッグ４の２０ｍの血
漿を残す様にして上清を第３の血液成分分離用バッグ５
に移した。以上の様にして得られた各血液成分分離用バ
ッグ中の成分を実験に供した血液と比較して分析したと
ころ、第１の血液成分分離用バッグ３中に含まれる濃厚
赤血球中には実験に供した赤血球の９１％が回収され、
混入した白血球は実験に供した白血球の０．８％であっ
た。第２の血液成分分離用バッグ４中に含まれる濃縮血
小板血漿中には実験に供した血小板の６２％が回収さ
れ、混入した白血球は実験に供した白血球の０．９％で
あった。第３の血液成分分離用バッグ５中には１６４ｍ
の血漿が回収できた。操作中血液成分分離用バッグ、
回路等の破損は無かった。

実施例２血液成分分離方法として、第３図に示すものを用いた。
生理的溶液を含むバッグ７としては、生理食塩液３０ｍ
を含むポリ塩化ビニル製バッグを用いた。これ以外の
構成部品は全て実施例１と同じにした。

操作方法も、採血バッグ１中の血液を全て流し終わった
後、生理的溶液を含むバッグ７中の生理食塩液を白血球
除去フィルター２に流した事以外は、実施例１と同様に
操作を行なった。

得られた各血液成分分離用バッグ中の成分を実施例１と
同様に分析したところ、第１の血液成分分離用バッグ３
中に含まれる濃厚赤血球中には実験に供した赤血球の９
６％が回収され、混入した白血球は実験に供した白血球
の０．８％であった。第２の血液成分分離用バッグ４中
に含まれる濃縮血小板血漿中には実験に供した血小板の
６６％が回収され、混入した白血球は実験に供した白血
球の０．９％であった。第３の血液成分分離用バッグ５
中には１７８ｍの血漿が回収できた。操作中血液成分
分離用バッグ、回路等の破損は無く、実施例１に比べ、
赤血球、血小板、血漿の回収率が高くなった。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明血液成分分離方法の基本構成を示す模式
図であり、第２図は第１図の方法に赤血球保存液入りバ
ッグを配した方法の模式図であり、第３図は第１図の方
法に生理的溶液入りバッグを配した方法の模式図であ
り、第４図は第２図と第３図を組み合わせた方法の模式
図である。第５図は実施例で用いた白血球除去フィルタ
ーの構成を示す断面模式図である。１……採血バッグ２……白血球除去フィルター３．４．５……血液成分分離用バッグ６……赤血球保存液入りバッグ７……生理的溶液入りバッグ８……カラム本体９．９′……枠体１０．１０′……突起１１……不織布フィルター層１２……血液入口１３……血液出口

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】血漿、赤血球、血小板は通過させるが白血
球は通過させない白血球除去フィルターの上流側に採血
バッグが接続され該白血球除去フィルターの下流側には
少なくとも３つの血液成分分離用バッグが無菌的に接続
されてなる血液成分分離用バッグ装置を用いて、前記採
血バッグに採取された血液を前記白血球除去フィルター
に通して予め白血球を除去した後に、遠心分離を行い比
重差により分離された血液成分を前記血液成分分離用バ
ッグに分取する方法。