JPH0653169B2 - 血液浄化用吸着剤 - Google Patents
血液浄化用吸着剤Info
- Publication number
- JPH0653169B2 JPH0653169B2 JP61096021A JP9602186A JPH0653169B2 JP H0653169 B2 JPH0653169 B2 JP H0653169B2 JP 61096021 A JP61096021 A JP 61096021A JP 9602186 A JP9602186 A JP 9602186A JP H0653169 B2 JPH0653169 B2 JP H0653169B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- blood
- porous body
- adsorbent
- plasma
- calcium phosphate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- External Artificial Organs (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、血液浄化用吸着剤、とくに血液中の免疫抑制
因子、Ｂ型肝炎抗原等を吸着除去する血液浄化用吸着剤
に関する。
因子、Ｂ型肝炎抗原等を吸着除去する血液浄化用吸着剤
に関する。
（従来の技術） 従来から、患者の血液を遠心分離または膜過により血
球と血漿に分離し、得られた血漿をさらに分離膜または
吸着剤で処理して血漿中の有害物質を除去する方法（そ
れぞれ二重膜過法、血漿吸着法と呼ばれている）はよ
く知られている（特開昭56-110625号、特公昭55-22107
号）。血液中に存在する病因物質は数多くあり、従来か
ら種々の分離膜、吸着剤を用いてこれらの除去が、試み
られている。例えば、ガン患者においては、α−フエト
プロテイン（ＡＦＰ）、ガン胎児性抗原（ＣＥＡ）、α
1−アンチトリプシン（α1−AT）、α1−酸性糖蛋白質
（α1−ＡＧＰ）、免疫抑制性酸性蛋白質（ＩＡＰ）、
免疫複合体などの免疫抑制因子がガンに対する免疫機能
を阻害しているといわれており、これらの免疫抑制因子
を除去することが、免疫機能の正常化のために求められ
ているが、このために上記の二重膜過法により免疫抑
制因子を除去し、アルブミンなどの比較的低分子量の有
用な蛋白質を患者に返そうとする試みがある。また、同
じ目的で抗ＩＡＰ抗体をセルロース、デキストラン、ヒ
ドロキシアパタイトなどの各種の担体に担持させた吸着
剤を用いて、血液中の免疫抑制因子だけを除去すること
も知られている（特公昭57-35978号）。
球と血漿に分離し、得られた血漿をさらに分離膜または
吸着剤で処理して血漿中の有害物質を除去する方法（そ
れぞれ二重膜過法、血漿吸着法と呼ばれている）はよ
く知られている（特開昭56-110625号、特公昭55-22107
号）。血液中に存在する病因物質は数多くあり、従来か
ら種々の分離膜、吸着剤を用いてこれらの除去が、試み
られている。例えば、ガン患者においては、α−フエト
プロテイン（ＡＦＰ）、ガン胎児性抗原（ＣＥＡ）、α
1−アンチトリプシン（α1−AT）、α1−酸性糖蛋白質
（α1−ＡＧＰ）、免疫抑制性酸性蛋白質（ＩＡＰ）、
免疫複合体などの免疫抑制因子がガンに対する免疫機能
を阻害しているといわれており、これらの免疫抑制因子
を除去することが、免疫機能の正常化のために求められ
ているが、このために上記の二重膜過法により免疫抑
制因子を除去し、アルブミンなどの比較的低分子量の有
用な蛋白質を患者に返そうとする試みがある。また、同
じ目的で抗ＩＡＰ抗体をセルロース、デキストラン、ヒ
ドロキシアパタイトなどの各種の担体に担持させた吸着
剤を用いて、血液中の免疫抑制因子だけを除去すること
も知られている（特公昭57-35978号）。
また、Ｂ型肝炎患者を治療するための方法として、血液
（血漿）中に放出されているＢ型肝炎抗原（ＨＢ抗原）
を除去することが有効であると言われており、除去方法
として膜による方法（人工臓器、１４巻、1762−1765
頁、1985年）、表面に抗体を固定した吸着剤を用い、抗
原抗体反応を利用する方法（人工臓器、１４巻、６０８
−６１１頁、1985年）などが知られている。
（血漿）中に放出されているＢ型肝炎抗原（ＨＢ抗原）
を除去することが有効であると言われており、除去方法
として膜による方法（人工臓器、１４巻、1762−1765
頁、1985年）、表面に抗体を固定した吸着剤を用い、抗
原抗体反応を利用する方法（人工臓器、１４巻、６０８
−６１１頁、1985年）などが知られている。
（発明が解決しようとする問題点） しかしながら、膜分離により免疫抑制因子を除去しよう
とすると、ＡＦＰ（分子量７万）、α1−AT（分子量
５．４万）、α1−ＡＧＰ（分子量４．４万）、ＩＡＰ
（分子量５万）などの低分子量の免疫抑制因子を除去す
ることができないという問題があり、また、膜分離によ
りＢ型肝炎抗原を除去しようとすると、血漿中のフイブ
リノーゲン、 IgMなどの大分子量物質の損失を伴うとい
う問題があつた。
とすると、ＡＦＰ（分子量７万）、α1−AT（分子量
５．４万）、α1−ＡＧＰ（分子量４．４万）、ＩＡＰ
（分子量５万）などの低分子量の免疫抑制因子を除去す
ることができないという問題があり、また、膜分離によ
りＢ型肝炎抗原を除去しようとすると、血漿中のフイブ
リノーゲン、 IgMなどの大分子量物質の損失を伴うとい
う問題があつた。
さらにまた、免疫抑制因子やＢ型肝炎抗原を、抗体を固
定化した吸着剤で除去しようとすると、特殊な抗体が多
量に必要となり、かかる抗体の入手が困難であるので、
かかる抗体を用いる方法は実用的なものとはなりにく
い。このような抗体を固定化した吸着剤ではなく、多孔
性の吸着剤で上記の免疫抑制因子、Ｂ型肝炎抗原を除去
することが考えられるが、このような吸着剤はいまだ知
られていない。
定化した吸着剤で除去しようとすると、特殊な抗体が多
量に必要となり、かかる抗体の入手が困難であるので、
かかる抗体を用いる方法は実用的なものとはなりにく
い。このような抗体を固定化した吸着剤ではなく、多孔
性の吸着剤で上記の免疫抑制因子、Ｂ型肝炎抗原を除去
することが考えられるが、このような吸着剤はいまだ知
られていない。
したがつて、本発明が解決しようとする問題点は、免疫
抑制因子、Ｂ型肝炎抗原などの有害物質を選択的に除去
すると共に、アルブミン、免疫グロブリンなどの有用物
質を除去しない、実用的な血液浄化用吸着剤を得ること
である。
抑制因子、Ｂ型肝炎抗原などの有害物質を選択的に除去
すると共に、アルブミン、免疫グロブリンなどの有用物
質を除去しない、実用的な血液浄化用吸着剤を得ること
である。
（問題点を解決するための手段） 上記の問題点は、Ca／Ｐ比が１．５０〜１．７５の範囲
にあるリン酸カルシウムを主成分とする多孔体であつ
て、１０〜７０ｎｍの孔径範囲にある細孔の容積が０．
２cc／ｇ以上であり、かつ全細孔容積の８０％以上をし
める多孔体からなる血液浄化用吸着剤を用いて血液浄化
を行うことにより解決される。
にあるリン酸カルシウムを主成分とする多孔体であつ
て、１０〜７０ｎｍの孔径範囲にある細孔の容積が０．
２cc／ｇ以上であり、かつ全細孔容積の８０％以上をし
める多孔体からなる血液浄化用吸着剤を用いて血液浄化
を行うことにより解決される。
本発明においては、前記のようにCa／Ｐ比が１．５０〜
１．７５の範囲にあるリン酸カルシウムが用いられる
が、かかるリン酸カルシウムとしてはヒドロキシアパタ
イト〔Ca(OH)2・3Ca3(PO4)2〕（Ca／Ｐ原子比１．６
７）、第三リン酸カルシウム〔Ca3(PO4)2〕（Ca／Ｐ原
子比１．５）またはこれらの混合物があげられる。Ca／
Ｐ比が上記の範囲外であると、本発明の目的とする血液
中の免疫抑制因子、Ｂ型肝炎抗原などの吸着能が著しく
低下する。本発明において、Ca／Ｐ比は好ましくは、
１．６０〜１．７５である。
１．７５の範囲にあるリン酸カルシウムが用いられる
が、かかるリン酸カルシウムとしてはヒドロキシアパタ
イト〔Ca(OH)2・3Ca3(PO4)2〕（Ca／Ｐ原子比１．６
７）、第三リン酸カルシウム〔Ca3(PO4)2〕（Ca／Ｐ原
子比１．５）またはこれらの混合物があげられる。Ca／
Ｐ比が上記の範囲外であると、本発明の目的とする血液
中の免疫抑制因子、Ｂ型肝炎抗原などの吸着能が著しく
低下する。本発明において、Ca／Ｐ比は好ましくは、
１．６０〜１．７５である。
本発明の血液浄化剤は、上記の如きリン酸カルシウムを
主成分とする多孔体であつて、かかる多孔体は１０−７
０ｎｍの孔径範囲にある細孔の容積が０．２cc／ｇ以上
（好ましくは、０．３cc／ｇ以上）であり、かつ全細孔
容積の８０％以上をしめる構造を有している。孔径は水
銀ポロシメーターを用いて得られる値であり、全細孔容
積は直径２μｍ以下の細孔について求められるものであ
る。上記孔径範囲にある細孔の容積が０．２cc／ｇ以下
では、免疫抑制因子、Ｂ型肝炎抗原等の除去すべき物質
の効果的な除去が行われず、また、上記孔径範囲にある
細孔の容積が全細孔容積の８０％以下では、孔径分布が
広すぎて、除去すべき物質の選択的吸着が行われにくく
なる。
主成分とする多孔体であつて、かかる多孔体は１０−７
０ｎｍの孔径範囲にある細孔の容積が０．２cc／ｇ以上
（好ましくは、０．３cc／ｇ以上）であり、かつ全細孔
容積の８０％以上をしめる構造を有している。孔径は水
銀ポロシメーターを用いて得られる値であり、全細孔容
積は直径２μｍ以下の細孔について求められるものであ
る。上記孔径範囲にある細孔の容積が０．２cc／ｇ以下
では、免疫抑制因子、Ｂ型肝炎抗原等の除去すべき物質
の効果的な除去が行われず、また、上記孔径範囲にある
細孔の容積が全細孔容積の８０％以下では、孔径分布が
広すぎて、除去すべき物質の選択的吸着が行われにくく
なる。
本発明において用いられるリ酸カルシウム多孔体は、い
ずれの製法で得られたものでもよいがなかでもカルシウ
ムイオンとホスフエートイオン（例えば、水酸化カルシ
ウムとリン酸、硝酸カルシウムとリン酸水素アンモニウ
ム）とを水性媒質中約１０〜１２のｐＨで反応させて、
Ca／Ｐ比が１．５０〜１．７５の範囲にあるリン酸カル
シウムのゼラチン状沈殿物を生成させ、この沈殿物を溶
液から分離し、乾燥後４００〜９００℃で数時間焼成す
ることにより得られたものが好ましい。
ずれの製法で得られたものでもよいがなかでもカルシウ
ムイオンとホスフエートイオン（例えば、水酸化カルシ
ウムとリン酸、硝酸カルシウムとリン酸水素アンモニウ
ム）とを水性媒質中約１０〜１２のｐＨで反応させて、
Ca／Ｐ比が１．５０〜１．７５の範囲にあるリン酸カル
シウムのゼラチン状沈殿物を生成させ、この沈殿物を溶
液から分離し、乾燥後４００〜９００℃で数時間焼成す
ることにより得られたものが好ましい。
かかるリン酸カルシウム多孔体の製法は Hayek等により
インオルガニツク シンセシス（Inorganic Syntheses
７，６３（1963）に開示されている。この方法におい
て、１．５０〜１．７５のCa／Ｐ比が高いほどまた、焼
成温度が低温である程、孔径の小さいものが得られ、Ca
／Ｐ比が小さくなる程、また、焼成温度が９００℃の如
き高温である程孔径の大きいものが得られる。この方法
により得られた多孔体は、直径１０〜１００ｎｍの一次
粒子が結合したもので、細孔は結合した一次粒子の間隙
に形成されている。かかる多孔体の構造の一例（Ca／Ｐ
比１．６６）を第１図に示す。また、第１図に示された
構造の多孔体について、水銀ポロシメーターで測定した
孔径分布図を第２図に示した〔中心孔径（最大ピークを
示す孔径）２４ｎｍ１０〜７０ｎｍの孔径範囲にある細
孔の容積0.45cc／ｇ〕。第２図に示されている如く、上
記の方法により得られた多孔体の孔径分布は非常にシヤ
ープであり、１０〜７０ｎｍの孔径範囲にある細孔の容
積が全細孔容積の８０％以上をしめることは勿論、多孔
体の細孔の中心孔径をＤとするとき０．５Ｄ〜１．５Ｄ
の範囲にある細孔の容積の割合が通常全細孔容積の８０
％以上を占めている。それゆえ、上記の方法により得ら
れた多孔体は本発明の血液浄化用吸着剤のための多孔体
として特に好ましい。
インオルガニツク シンセシス（Inorganic Syntheses
７，６３（1963）に開示されている。この方法におい
て、１．５０〜１．７５のCa／Ｐ比が高いほどまた、焼
成温度が低温である程、孔径の小さいものが得られ、Ca
／Ｐ比が小さくなる程、また、焼成温度が９００℃の如
き高温である程孔径の大きいものが得られる。この方法
により得られた多孔体は、直径１０〜１００ｎｍの一次
粒子が結合したもので、細孔は結合した一次粒子の間隙
に形成されている。かかる多孔体の構造の一例（Ca／Ｐ
比１．６６）を第１図に示す。また、第１図に示された
構造の多孔体について、水銀ポロシメーターで測定した
孔径分布図を第２図に示した〔中心孔径（最大ピークを
示す孔径）２４ｎｍ１０〜７０ｎｍの孔径範囲にある細
孔の容積0.45cc／ｇ〕。第２図に示されている如く、上
記の方法により得られた多孔体の孔径分布は非常にシヤ
ープであり、１０〜７０ｎｍの孔径範囲にある細孔の容
積が全細孔容積の８０％以上をしめることは勿論、多孔
体の細孔の中心孔径をＤとするとき０．５Ｄ〜１．５Ｄ
の範囲にある細孔の容積の割合が通常全細孔容積の８０
％以上を占めている。それゆえ、上記の方法により得ら
れた多孔体は本発明の血液浄化用吸着剤のための多孔体
として特に好ましい。
本発明において用いられる多孔体は通常大きさ０．１〜
１．０mmの粒子状として用いられる。前述のホスフエー
トイオンとカルシウムイオンとを反応させて得られるゼ
ラチン状沈殿物を一旦乾燥させ、これをラバープレス法
等により成形した上粉砕し、これを焼成することによ
り、また、ゼラチン状沈殿物を一体塊のまま乾燥後焼成
し、焼成後粉砕することにより得られる。
１．０mmの粒子状として用いられる。前述のホスフエー
トイオンとカルシウムイオンとを反応させて得られるゼ
ラチン状沈殿物を一旦乾燥させ、これをラバープレス法
等により成形した上粉砕し、これを焼成することによ
り、また、ゼラチン状沈殿物を一体塊のまま乾燥後焼成
し、焼成後粉砕することにより得られる。
血液（または血漿）が多孔体に直結接触することから、
血球を損傷したり、血液中に多孔体微粉が混入したりし
ないように、粒状物にはとがつた角がないようにしてお
くことが望ましく、そのために、粉砕後粒状物を回転体
中に入れ共摺りによる研摩等の処理を行なつて使用する
のが好ましい。
血球を損傷したり、血液中に多孔体微粉が混入したりし
ないように、粒状物にはとがつた角がないようにしてお
くことが望ましく、そのために、粉砕後粒状物を回転体
中に入れ共摺りによる研摩等の処理を行なつて使用する
のが好ましい。
以上のようにして得られたリン酸カルシウム多孔体に血
液を直接接触させるか、遠心分離または膜過により分
離された血漿を接触させることにより、血液中のＡＦ
Ｐ、ＣＥＡ、α1−ＡＴ、α1−ＡＧＰおよびＩＡＰなど
の免疫抑制因子、HBs抗原〔約２．０ｎｍの大きさを有
する球状粒子、球状粒子と球状粒子が融合した管状粒子
および直径２７ｎｍの芯を有する直径４２ｎｍの大形球
状粒子（Dane粒子）の３種類があるといわれている〕、
HBe抗原〔分子量数十万を有する）等のＢ型肝炎抗原等
の有害物質は吸着されるが、アルブミン、グロブリン等
の有用物質はほとんど吸着されない。本発明において血
液浄化なる用語は、血液から直接これら有害物質を除去
するだけでなく、血漿・血清などから血液中の有害物質
を除去することも包含する用語として用いられている。
液を直接接触させるか、遠心分離または膜過により分
離された血漿を接触させることにより、血液中のＡＦ
Ｐ、ＣＥＡ、α1−ＡＴ、α1−ＡＧＰおよびＩＡＰなど
の免疫抑制因子、HBs抗原〔約２．０ｎｍの大きさを有
する球状粒子、球状粒子と球状粒子が融合した管状粒子
および直径２７ｎｍの芯を有する直径４２ｎｍの大形球
状粒子（Dane粒子）の３種類があるといわれている〕、
HBe抗原〔分子量数十万を有する）等のＢ型肝炎抗原等
の有害物質は吸着されるが、アルブミン、グロブリン等
の有用物質はほとんど吸着されない。本発明において血
液浄化なる用語は、血液から直接これら有害物質を除去
するだけでなく、血漿・血清などから血液中の有害物質
を除去することも包含する用語として用いられている。
本発明のリン酸カルシウム多孔体からなる血液浄化用吸
着剤で血液を処理する具体的方法としては、従来から活
性炭、多孔質ガラス等の吸着剤による血液浄化法（体外
血液循環法）がそのまま用いられる。かかる方法は、前
述の特公昭５５−22107号の他特公昭57-27090号、特開
昭60-241450号等に開示されている。通常、粒状のリン
酸カルシウム多孔体はカラムに充填されて使用される。
カラムは、多孔体層の両側に血液回路と容易に接続し得
る形状の入口部と出口部を有する本体と、多孔体層と出
入口部との間に血液または血漿は通過するが多孔体は通
過しない８０〜１８０メツシユの網目を持つフイルター
を備えているものが好ましいが、他の形状であつても実
質的に同様の機能を持つカラムであれば本目的に使用し
得る。カラムの材質はガラス、ポリエチレン、ポリプロ
ピレン、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリメチル
メタクリレート等が使用できるがオートクレーブ滅菌が
可能なポリプロピレンやポリカーボネート等が特に好ま
しい。フイルターは生理学的に不活性で強度の高いもの
であれば良いが、特にポリエステル製のものが好ましく
は使用される。第３図は多孔体を充填したカラム１の一
例についての断面図であり、血液または血漿は入口２よ
り導入され、多孔体５で処理された後出口３より導出さ
れる。多孔体はフイルター４によりカラム内に保持され
ている。
着剤で血液を処理する具体的方法としては、従来から活
性炭、多孔質ガラス等の吸着剤による血液浄化法（体外
血液循環法）がそのまま用いられる。かかる方法は、前
述の特公昭５５−22107号の他特公昭57-27090号、特開
昭60-241450号等に開示されている。通常、粒状のリン
酸カルシウム多孔体はカラムに充填されて使用される。
カラムは、多孔体層の両側に血液回路と容易に接続し得
る形状の入口部と出口部を有する本体と、多孔体層と出
入口部との間に血液または血漿は通過するが多孔体は通
過しない８０〜１８０メツシユの網目を持つフイルター
を備えているものが好ましいが、他の形状であつても実
質的に同様の機能を持つカラムであれば本目的に使用し
得る。カラムの材質はガラス、ポリエチレン、ポリプロ
ピレン、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリメチル
メタクリレート等が使用できるがオートクレーブ滅菌が
可能なポリプロピレンやポリカーボネート等が特に好ま
しい。フイルターは生理学的に不活性で強度の高いもの
であれば良いが、特にポリエステル製のものが好ましく
は使用される。第３図は多孔体を充填したカラム１の一
例についての断面図であり、血液または血漿は入口２よ
り導入され、多孔体５で処理された後出口３より導出さ
れる。多孔体はフイルター４によりカラム内に保持され
ている。
ガン患者、Ｂ型肝炎患者から取り出された血液は通常血
球成分と血漿成分に分離され、分離された血漿成分が上
記カラムに導入され、処理が行われる。そして、処理さ
れた血漿成分は、カラム出口から取り出され、血球成分
と混合されて、患者に戻される。その一例を第４図に示
した。血液はカテーテル７により患者から採取され、ポ
ンプ８を通つて、血漿分離装置６へ供給され、血球と血
漿に分離される。分離された血漿はポンプ９を通つて本
発明の吸着剤を充填したカラム１に供給され、吸着処理
された後血漿・血球混合装置１０で血球と混合されて血
液導出口１１より患者にもどされる。
球成分と血漿成分に分離され、分離された血漿成分が上
記カラムに導入され、処理が行われる。そして、処理さ
れた血漿成分は、カラム出口から取り出され、血球成分
と混合されて、患者に戻される。その一例を第４図に示
した。血液はカテーテル７により患者から採取され、ポ
ンプ８を通つて、血漿分離装置６へ供給され、血球と血
漿に分離される。分離された血漿はポンプ９を通つて本
発明の吸着剤を充填したカラム１に供給され、吸着処理
された後血漿・血球混合装置１０で血球と混合されて血
液導出口１１より患者にもどされる。
（実施例） 実施例１および比較例１ ｉ） リン酸カルシウム多孔体の作成 硝酸カルシウム（Ca(NO3)2・4H2O）２５０ｇを水１に
溶解し、２８％アンモニア水７９０mlを加えて混合し
た。これにリン酸−水素アンモニウム（(NH4)2HPO4）８
３．２ｇと水２と２８％アンモニア水４８０mlの混合
溶液を５００ rpmで撹拌しながら２０分かけて室温（１
２〜２０℃）で滴下した。滴下完了後５００ rpmで２０
分撹拌、さらにマントルヒーターで加温して２０分還流
した。加熱を止め、２０分撹拌後室温で一夜放置、遠心
脱水し、水で洗浄、乾燥した。同様の反応において硝酸
カルシウムの量を一定にし、リン酸−水素アンモニウム
の量を変化させることによりCa／Ｐ比の異なる反応生成
物を得た。
溶解し、２８％アンモニア水７９０mlを加えて混合し
た。これにリン酸−水素アンモニウム（(NH4)2HPO4）８
３．２ｇと水２と２８％アンモニア水４８０mlの混合
溶液を５００ rpmで撹拌しながら２０分かけて室温（１
２〜２０℃）で滴下した。滴下完了後５００ rpmで２０
分撹拌、さらにマントルヒーターで加温して２０分還流
した。加熱を止め、２０分撹拌後室温で一夜放置、遠心
脱水し、水で洗浄、乾燥した。同様の反応において硝酸
カルシウムの量を一定にし、リン酸−水素アンモニウム
の量を変化させることによりCa／Ｐ比の異なる反応生成
物を得た。
これらの反応生成物を電気炉にて400℃〜900℃で３時間
熱処理した後、粉砕することにより粒径１５０〜５００
μｍの無定形のリン酸カルシウム多孔体を得た。得られ
た多孔体はいずれも第１図に示すような一次粒子の結合
したものであり、細孔は粒子間の間隙に形成されてい
た。
熱処理した後、粉砕することにより粒径１５０〜５００
μｍの無定形のリン酸カルシウム多孔体を得た。得られ
た多孔体はいずれも第１図に示すような一次粒子の結合
したものであり、細孔は粒子間の間隙に形成されてい
た。
ii) ガン患者血漿中のα1−AGPおよびIAPの吸着▲すい
▼ガン患者患者血漿（二重過プラズマフエレーシス二
次フイルターの液０．５mlとリン酸カルシウム多孔体
０．１ｇを混合、３７℃、120cpmで３時間振とうした。
上清中のα1−ＡＧＰ残存濃度をネフエロメトリーで、
ＩＡＰを免疫拡散法で、それぞれ測定し、多孔体を加え
ない対照との濃度差からα1−ＡＧＰ及びＩＡＰの吸着
率を求めた。
▼ガン患者患者血漿（二重過プラズマフエレーシス二
次フイルターの液０．５mlとリン酸カルシウム多孔体
０．１ｇを混合、３７℃、120cpmで３時間振とうした。
上清中のα1−ＡＧＰ残存濃度をネフエロメトリーで、
ＩＡＰを免疫拡散法で、それぞれ測定し、多孔体を加え
ない対照との濃度差からα1−ＡＧＰ及びＩＡＰの吸着
率を求めた。
(注１) リン酸カルシウム多孔体の中心孔径は、水銀ポ
ロシメーター法によつて求めた孔径分布図において最大
ピークを示す孔径を意味し、全細孔容積は孔径２μｍ以
下の細孔の容積を意味する。
ロシメーター法によつて求めた孔径分布図において最大
ピークを示す孔径を意味し、全細孔容積は孔径２μｍ以
下の細孔の容積を意味する。
以下の測定においても同じ。
(注２) (B)は中心孔径をＤとするとき、0.5D〜1.5Dの範
囲にある細孔容積を意味する。以下の表においても同
じ。
囲にある細孔容積を意味する。以下の表においても同
じ。
iii) ガン患者血漿中のα1−AGPの吸着 種々のガン患者血漿０．５mlと、リン酸カルシウム多孔
体〔Ca／Ｐ1.68、中心孔径(D)23nm、直１０〜７０ｎｍ
の細孔容積(A)０．４８cc／ｇ、(A)の全細孔容積との比
８９％、０．５Ｄ〜１．５Ｄの細孔容積／全細孔容積８
５％〕０．１ｇをそれぞれ混合し、37℃、１２０ cpmで
３時間振とうした。上清中のα1−AGP濃度を測定し、吸
着率を求めた（実施例1-4）。
体〔Ca／Ｐ1.68、中心孔径(D)23nm、直１０〜７０ｎｍ
の細孔容積(A)０．４８cc／ｇ、(A)の全細孔容積との比
８９％、０．５Ｄ〜１．５Ｄの細孔容積／全細孔容積８
５％〕０．１ｇをそれぞれ混合し、37℃、１２０ cpmで
３時間振とうした。上清中のα1−AGP濃度を測定し、吸
着率を求めた（実施例1-4）。
結果を第２表に示した。
比較の為にCa／Ｐ1.78、中心孔径(D)１３ｎｍ、直径１
０〜７０ｎｍの細孔容積(A)０．３５cc／ｇ、(A)の全細
孔容積との比８２％、０．５Ｄ〜１．５Ｄの細孔容積／
全細孔容積８７％の多孔体を用いて同様の実験を行なつ
た（比較例１〜２）が、α1−AGPはいずれの血漿でも全
く吸着されなかつた。
０〜７０ｎｍの細孔容積(A)０．３５cc／ｇ、(A)の全細
孔容積との比８２％、０．５Ｄ〜１．５Ｄの細孔容積／
全細孔容積８７％の多孔体を用いて同様の実験を行なつ
た（比較例１〜２）が、α1−AGPはいずれの血漿でも全
く吸着されなかつた。
iV) ガン患者血清中のα1−AGPおよびIgGの吸着乳ガン
及び直腸ガン患者数名の血清を混合し、血清０．５mlの
リン酸カルシウム多孔体０．１ｇを加え、３７℃で３時
間振とうし、α1−AGP及びIgGの吸着率を測定した。第
３表に結果を示す。
及び直腸ガン患者数名の血清を混合し、血清０．５mlの
リン酸カルシウム多孔体０．１ｇを加え、３７℃で３時
間振とうし、α1−AGP及びIgGの吸着率を測定した。第
３表に結果を示す。
V) ガン血漿２次液中のＩＡＰの吸着とリンパ球幼若
化反応 ガン患者血漿（二重過プラズマフエレーシスの二次フ
イルター液）１mlにリン酸カルシウム多孔体０．２ｇ
を加え、３７℃で１時間振とうし、その上清をリンパ球
幼若化反応（ＰＨＡ反応）液に添加して、リンパ球で増
殖抑制率を測定した。即ち、健康ヒト末梢血リンパ球を
牛胎児血清加ＲＰＭＩ1640培地に浮遊し、上記処理血漿
を培地の１５％になるように加え、マイクロタイタープ
レートに分注し、各ウエルに１％のフイトヘマグルチニ
ン（ＰＨＡ）を添加、３７℃、５％CO2で２日間培養
し、１μCi／ウエルの3Ｈ−サイミジンを加え、さらに
１日培養、3Ｈ−サイミジンの取込み量を測定した。リ
ンパ球増殖抑制率は次式で定義した。
化反応 ガン患者血漿（二重過プラズマフエレーシスの二次フ
イルター液）１mlにリン酸カルシウム多孔体０．２ｇ
を加え、３７℃で１時間振とうし、その上清をリンパ球
幼若化反応（ＰＨＡ反応）液に添加して、リンパ球で増
殖抑制率を測定した。即ち、健康ヒト末梢血リンパ球を
牛胎児血清加ＲＰＭＩ1640培地に浮遊し、上記処理血漿
を培地の１５％になるように加え、マイクロタイタープ
レートに分注し、各ウエルに１％のフイトヘマグルチニ
ン（ＰＨＡ）を添加、３７℃、５％CO2で２日間培養
し、１μCi／ウエルの3Ｈ−サイミジンを加え、さらに
１日培養、3Ｈ−サイミジンの取込み量を測定した。リ
ンパ球増殖抑制率は次式で定義した。
また上記リン酸カルシウム多孔体処理血漿中のＩＡＰ濃
度をSRID法で測定した。第４表に結果を示す。
度をSRID法で測定した。第４表に結果を示す。
Vi) α1-AGP、α1-AT、アルブミンおよび総蛋白質の吸
着性の比較 ガン患者血清数例を混合し、０．５ml／０．１ｇの割合
でリン酸カルシウム多孔体を加え、３７℃で３時間振と
うして、上清中のα1-AGP及びα1−ＡＴをネフエロメト
リーで、アルブミン及び総蛋白質を比色法でそれぞれ測
定し、吸着率を求めた。結果を第５表に示す。
着性の比較 ガン患者血清数例を混合し、０．５ml／０．１ｇの割合
でリン酸カルシウム多孔体を加え、３７℃で３時間振と
うして、上清中のα1-AGP及びα1−ＡＴをネフエロメト
リーで、アルブミン及び総蛋白質を比色法でそれぞれ測
定し、吸着率を求めた。結果を第５表に示す。
Vii) 孔径分布の広い多孔体のα1−ＡＧＰ、アルブミ
ンおよび総蛋白質の吸着 ガン患者血清数例を混合し、０．５ml／０．１ｇの割合
でリン酸カルシウム多孔体（いずれもCa／Ｐ１．６６
７）を加え、３７℃、１２０ cpmで３時間振とうして、
上清中のα1−ＡＧＰをネフエロメトリーで、アルブミ
ン及び総蛋白質を比色法でそれぞれ測定し、吸着率を求
めた。結果を第６表に示す。
ンおよび総蛋白質の吸着 ガン患者血清数例を混合し、０．５ml／０．１ｇの割合
でリン酸カルシウム多孔体（いずれもCa／Ｐ１．６６
７）を加え、３７℃、１２０ cpmで３時間振とうして、
上清中のα1−ＡＧＰをネフエロメトリーで、アルブミ
ン及び総蛋白質を比色法でそれぞれ測定し、吸着率を求
めた。結果を第６表に示す。
直径１０〜７０ｎｍの細孔容積(Ａ)が小さいものではα
1−ＡＧＰの吸着率が低く、(Ａ)が大きくても分布が広
いものではα1−ＡＧＰの吸着は起るがアルブミンの吸
着も起り、選択性が低いことがわかる。
1−ＡＧＰの吸着率が低く、(Ａ)が大きくても分布が広
いものではα1−ＡＧＰの吸着は起るがアルブミンの吸
着も起り、選択性が低いことがわかる。
実施例２ HBs抗原値４８．７、HBe抗原値４．７、Ａ／Ｇ値１．４
０、アルブミン濃度４．２５ｇ／dlおよびグロブリン濃
度３．１０ｇ／dlの血清３mlに、実施例１と同様の方法
により作成した種々のリン酸カルシウム多孔体１ｇをそ
れぞれ添加して２４時間室温で放置した。その後、遠心
分離して上清を採取し、上清のHBs抗原値、HBe抗原値、
Ａ／Ｇ値、アルブミン濃度およびグロブリン濃度を測定
した。結果を第７表に示した。なお、HBs抗原値およびH
Be抗原値はいずれも放射同位体イミユノアツセイ（ＲＩ
Ａ）法によつて測定した値（titer）であり、Ａ／Ｇ値
は和光純薬(株)製アルブビン・グロブリン比測定用「Ａ
／ＧＢ−Test ＷＡＫＯ」を用いて、アルブミン量はブ
ロムクレゾールグリーン法、総蛋白量はビユーレツト法
により測定し、下記により算出した。
０、アルブミン濃度４．２５ｇ／dlおよびグロブリン濃
度３．１０ｇ／dlの血清３mlに、実施例１と同様の方法
により作成した種々のリン酸カルシウム多孔体１ｇをそ
れぞれ添加して２４時間室温で放置した。その後、遠心
分離して上清を採取し、上清のHBs抗原値、HBe抗原値、
Ａ／Ｇ値、アルブミン濃度およびグロブリン濃度を測定
した。結果を第７表に示した。なお、HBs抗原値およびH
Be抗原値はいずれも放射同位体イミユノアツセイ（ＲＩ
Ａ）法によつて測定した値（titer）であり、Ａ／Ｇ値
は和光純薬(株)製アルブビン・グロブリン比測定用「Ａ
／ＧＢ−Test ＷＡＫＯ」を用いて、アルブミン量はブ
ロムクレゾールグリーン法、総蛋白量はビユーレツト法
により測定し、下記により算出した。
（発明の効果） 本発明のリン酸カルシウム多孔体からなる血液浄化用吸
着剤により、血液中のアルブミン、グロブリン等の有用
成分を除去することなく免疫抑制因子、Ｂ型肝炎抗原等
を吸着除去することができる。
着剤により、血液中のアルブミン、グロブリン等の有用
成分を除去することなく免疫抑制因子、Ｂ型肝炎抗原等
を吸着除去することができる。
第１図は本発明の血液浄化用吸着剤の粒子構造の一例を
示す電子顕微鏡写真（倍率；36000倍）である。第２図
は本発明の血液浄化用吸着剤の孔径分布の一例を示す図
である。第３図は本発明の血液浄化用吸着剤が充填され
たカラムの一例を示す断面図である。第４図は本発明の
血液浄化用吸着剤を用いて血液浄化を行うフローシート
を示す図である。
示す電子顕微鏡写真（倍率；36000倍）である。第２図
は本発明の血液浄化用吸着剤の孔径分布の一例を示す図
である。第３図は本発明の血液浄化用吸着剤が充填され
たカラムの一例を示す断面図である。第４図は本発明の
血液浄化用吸着剤を用いて血液浄化を行うフローシート
を示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 谷原 正夫 岡山県倉敷市酒津1625 (72)発明者 黒川 圭一 岡山県倉敷市酒津1652
Claims (1)
- 【請求項１】Ca／Ｐ比が１．５０〜１．７５の範囲にあ
るリン酸カルシウムを主成分とする多孔体であつて、10
〜７０ｎｍの孔径範囲にある細孔の容積が０．２cc／ｇ
以上であり、かつ全細孔容積の８０％以上をしめる多孔
体からなる血液浄化用吸着剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61096021A JPH0653169B2 (ja) | 1986-04-24 | 1986-04-24 | 血液浄化用吸着剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61096021A JPH0653169B2 (ja) | 1986-04-24 | 1986-04-24 | 血液浄化用吸着剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62253074A JPS62253074A (ja) | 1987-11-04 |
| JPH0653169B2 true JPH0653169B2 (ja) | 1994-07-20 |
Family
ID=14153632
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61096021A Expired - Fee Related JPH0653169B2 (ja) | 1986-04-24 | 1986-04-24 | 血液浄化用吸着剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0653169B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2739579B2 (ja) * | 1987-12-28 | 1998-04-15 | 株式会社アドバンス | イムノグロブリンの分離精製方法 |
| US8211310B2 (en) * | 2006-11-20 | 2012-07-03 | Cytosorbents, Inc. | Size-selective polymer system |
-
1986
- 1986-04-24 JP JP61096021A patent/JPH0653169B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS62253074A (ja) | 1987-11-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2198901B1 (en) | Adsorption column for purifying body fluid | |
| Denizli et al. | DNA-immobilized polyhydroxyethylmethacrylate microbeads for affinity sorption of human immunoglobulin G and anti-DNA antibodies | |
| JPS5928972A (ja) | 血液浄化用吸着体及びその製造方法 | |
| US4952323A (en) | B2 microglobulin adsorbent | |
| JPH0653169B2 (ja) | 血液浄化用吸着剤 | |
| Guo et al. | Removal of endotoxin from aqueous solutions by affinity membrane | |
| Paul et al. | Modified hydroxyapatite microspheres as immunoadsorbent for plasma perfusion: preliminary study | |
| JP2004016994A (ja) | 重金属イオン吸着材、その製造方法及びそれを用いた重金属イオン除去方法 | |
| JP2816739B2 (ja) | ウイルス及び細胞の分離器 | |
| JP2543766B2 (ja) | ウイルス及び細胞の吸着分離剤並びにこれを用いたウイルス及び細胞の分離方法 | |
| JPS59186558A (ja) | リウマチ因子および／またはその免疫複合体の吸着材 | |
| JP5308171B2 (ja) | 体液浄化処理用吸着カラム | |
| JP2534867B2 (ja) | ミオグロビン吸着材 | |
| JPS6226073A (ja) | 直接血液潅流吸着方法およびその装置 | |
| JPH0236878A (ja) | ヒト免疫不全症候群ウイルスおよび／またはその関連物質除去剤 | |
| JPS61253071A (ja) | 血液浄化用装置 | |
| JPS6125566A (ja) | 多孔質膜 | |
| JPH0611336B2 (ja) | 体液浄化材および体液浄化装置 | |
| JPS59189859A (ja) | 自己抗体、免疫複合体を吸着する材料 | |
| EP0503682A1 (en) | Device for plasma modification composition and remodeling | |
| JPS5944266A (ja) | 免疫吸着材 | |
| JPH08173528A (ja) | 血液処理システム | |
| JPS5979854A (ja) | 血漿浄化方法及び装置 | |
| JPS62267236A (ja) | 血液製剤から血液型抗体を除去する方法 | |
| JPH0126709B2 (ja) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |