JP2739579B2 - イムノグロブリンの分離精製方法 - Google Patents
イムノグロブリンの分離精製方法Info
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- JP2739579B2 JP2739579B2 JP62330178A JP33017887A JP2739579B2 JP 2739579 B2 JP2739579 B2 JP 2739579B2 JP 62330178 A JP62330178 A JP 62330178A JP 33017887 A JP33017887 A JP 33017887A JP 2739579 B2 JP2739579 B2 JP 2739579B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- immunoglobulin
- purification method
- molar ratio
- immunoglobulin separation
- hydroxyapatite
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
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- External Artificial Organs (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、イムノグロブリンの分離精製方法に関す
る。 従来の技術 CaとＰのモル比が1.5ないし2.0であるリン酸カルシウ
ム、特にCa/Pモル比が1.67であるハイドロキシアパタイ
トやCa/P比が1.50であるリン酸三カルシウムは、生体親
和性にすぐれたインプラント材料として人工歯根や骨充
填材料として実用化している。ハイドロキシアパタイト
はまた、蛋白の吸着能にもすぐれ、液体クロマトグラフ
ィー用吸着カラムとして広く用いられている。ところ
で、免疫グロブリン（IgG）は、ヒト血清中に最も高濃
度（８〜15mg/ml）に含まれる免疫グロブリンクラス
で、多くの抗体活性を持つ。血管外体液中濃度も高く、
また、胎盤を通じて母体から退治に移行し、新生児の感
染防御にもかかわっている。分子量は15万、沈降定数は
6.5〜7.0Sである。 ヒトでは、IgG1〜IgG4の四つのサブクラスがあり、Ig
G4以外は補体結合性を有するものである。 この様な免疫グロブリンは、様々な感染症の予防及び
治療を目的として使用されるものである。 課題を解決する為の手段 本発明は、CaとＰのモル比が1.5ないし2.0で、粒径が
20〜100μの球状粒子を700℃〜900℃で焼成して得られ
るリン酸カルシウム化合物をイムノグロブリン溶液に浸
すことにより、変性したイムノグロブリン（IgG）を吸
着除去する免疫グロブリンの分離精製方法を提案するも
のである。 本発明で示すリン酸カルシウム化合物は、CaとＰのモ
ル比が1.5ないし2.0で、粒径が20〜100μの球状粒子を7
00℃〜900℃で焼成して得られるものであって、特にCa/
Pモル比が1.6ないし1.7のハイドロキシアパタイト相の
ものが望ましい。 その製法は、例えば、湿式法等で合成したスラリーを
噴霧乾燥し、0.1〜150μの粒径をもつ球状微粒子とした
ものを300〜1300℃で焼成した方法が提示される。 噴霧乾燥粉以外にボールミルやサンプルミル、ジェッ
トミル、アトマイザーなどの種々の粉砕法による粉砕
粉、あるいは熱分解法、アルコキシド法、乾式法などの
別な合成法による造粒粉を用いても良い。 また、牛骨や魚骨など天然の骨や歯を高温で焼結した
焼成粉を用いることもできる。 また、Mg、Zr、Fe、Ti、Si、Srなどの陽イオンやC
l-、F-、I-、CO3 2-などの陰イオンを０〜10％程度含む
ものをもちいてもよい。 以下、本発明を実施例により詳細に説明する。 実施例 ハイドロキシアパタイトは湿式法で合成し、脱水乾燥
をおこなった後、サンプルミルで粉砕し、さらに800℃
で焼成した粉末を用いた。 上記ハイドロキシアパタイトをグロブリン溶液に浸
し、室温で、約２分間反応させた後、上清液のイムノグ
ロブリン量を測定した。 イムノグロブリン等の蛋白液の濃度は、光電比色計
（日立Ｍ−100−20）を用い、主として280nmで吸光度を
測定した。結果を第１表に示す。 さらにこれを電気泳動した所、吸着前のグロブリンの
方が変性したイムノグロブリンのパターンが見られた。 このことから、ハイドロキシアパタイトにより、変性
したグロブリンが吸着除去されていることが知見され
た。
る。 従来の技術 CaとＰのモル比が1.5ないし2.0であるリン酸カルシウ
ム、特にCa/Pモル比が1.67であるハイドロキシアパタイ
トやCa/P比が1.50であるリン酸三カルシウムは、生体親
和性にすぐれたインプラント材料として人工歯根や骨充
填材料として実用化している。ハイドロキシアパタイト
はまた、蛋白の吸着能にもすぐれ、液体クロマトグラフ
ィー用吸着カラムとして広く用いられている。ところ
で、免疫グロブリン（IgG）は、ヒト血清中に最も高濃
度（８〜15mg/ml）に含まれる免疫グロブリンクラス
で、多くの抗体活性を持つ。血管外体液中濃度も高く、
また、胎盤を通じて母体から退治に移行し、新生児の感
染防御にもかかわっている。分子量は15万、沈降定数は
6.5〜7.0Sである。 ヒトでは、IgG1〜IgG4の四つのサブクラスがあり、Ig
G4以外は補体結合性を有するものである。 この様な免疫グロブリンは、様々な感染症の予防及び
治療を目的として使用されるものである。 課題を解決する為の手段 本発明は、CaとＰのモル比が1.5ないし2.0で、粒径が
20〜100μの球状粒子を700℃〜900℃で焼成して得られ
るリン酸カルシウム化合物をイムノグロブリン溶液に浸
すことにより、変性したイムノグロブリン（IgG）を吸
着除去する免疫グロブリンの分離精製方法を提案するも
のである。 本発明で示すリン酸カルシウム化合物は、CaとＰのモ
ル比が1.5ないし2.0で、粒径が20〜100μの球状粒子を7
00℃〜900℃で焼成して得られるものであって、特にCa/
Pモル比が1.6ないし1.7のハイドロキシアパタイト相の
ものが望ましい。 その製法は、例えば、湿式法等で合成したスラリーを
噴霧乾燥し、0.1〜150μの粒径をもつ球状微粒子とした
ものを300〜1300℃で焼成した方法が提示される。 噴霧乾燥粉以外にボールミルやサンプルミル、ジェッ
トミル、アトマイザーなどの種々の粉砕法による粉砕
粉、あるいは熱分解法、アルコキシド法、乾式法などの
別な合成法による造粒粉を用いても良い。 また、牛骨や魚骨など天然の骨や歯を高温で焼結した
焼成粉を用いることもできる。 また、Mg、Zr、Fe、Ti、Si、Srなどの陽イオンやC
l-、F-、I-、CO3 2-などの陰イオンを０〜10％程度含む
ものをもちいてもよい。 以下、本発明を実施例により詳細に説明する。 実施例 ハイドロキシアパタイトは湿式法で合成し、脱水乾燥
をおこなった後、サンプルミルで粉砕し、さらに800℃
で焼成した粉末を用いた。 上記ハイドロキシアパタイトをグロブリン溶液に浸
し、室温で、約２分間反応させた後、上清液のイムノグ
ロブリン量を測定した。 イムノグロブリン等の蛋白液の濃度は、光電比色計
（日立Ｍ−100−20）を用い、主として280nmで吸光度を
測定した。結果を第１表に示す。 さらにこれを電気泳動した所、吸着前のグロブリンの
方が変性したイムノグロブリンのパターンが見られた。 このことから、ハイドロキシアパタイトにより、変性
したグロブリンが吸着除去されていることが知見され
た。
Claims (1)
- (57)【特許請求の範囲】 １．CaとＰのモル比が1.5ないし2.0で、粒径が20〜100
μの球状粒子を700℃〜900℃で焼成して得られるリン酸
カルシウム化合物をイムノグロブリン溶液に浸すことに
より、変性したイムノグロブリン（IgG）を吸着除去す
ることを特徴とするイムノグロブリンの分離精製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62330178A JP2739579B2 (ja) | 1987-12-28 | 1987-12-28 | イムノグロブリンの分離精製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62330178A JP2739579B2 (ja) | 1987-12-28 | 1987-12-28 | イムノグロブリンの分離精製方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01171567A JPH01171567A (ja) | 1989-07-06 |
| JP2739579B2 true JP2739579B2 (ja) | 1998-04-15 |
Family
ID=18229697
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62330178A Expired - Lifetime JP2739579B2 (ja) | 1987-12-28 | 1987-12-28 | イムノグロブリンの分離精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2739579B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4779190B2 (ja) * | 2000-07-26 | 2011-09-28 | 東レ株式会社 | 炎症性疾患治療用カラム |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0653169B2 (ja) * | 1986-04-24 | 1994-07-20 | 株式会社クラレ | 血液浄化用吸着剤 |
| JPH0653170B2 (ja) * | 1986-07-07 | 1994-07-20 | 旭光学工業株式会社 | β２ミクログロブリン吸着剤 |
-
1987
- 1987-12-28 JP JP62330178A patent/JP2739579B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH01171567A (ja) | 1989-07-06 |
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