JPH0126709B2 - - Google Patents
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Description
産業上の利用分野
本発明はデオキシリボ核酸（以下DNAと略記
する）高分子担体に安定した状態で固定して成る
抗DNA抗体用吸着材に関するものである。さら
に詳しくいえば、本発明は、滅菌が容易で、かつ
選択性が優れる上に吸着能力が大きく、しかも取
扱いが容易であつて、全身性エリテマトーデスな
どの自己免疫疾患の要因物質である抗DNA抗体
やDNA―抗DNA抗体免疫複合体を、該疾患患者
の血漿中から除去するのに好適に用いられる安定
性に優れた吸着材に関するものである。 従来の技術 近年、医工学技術の著しい発展に伴い、全身性
エリテマトーデス、慢性関節リウマチ、強皮症な
どの自己免疫疾患の治療には、患者の血液中から
これらの疾患の要因物質を除去する血液浄化療法
が確立されつつある。この血液浄化療法として
は、これまで血漿交換法、ろ過法、吸着法などが
試みられているが、いずれの方法もなんらかの欠
点があり必ずしも満足しうるものとはいえない。 例えば、血漿交換法は、患者の血漿を新鮮な凍
結血漿又は血漿製剤で置き換える方法であるが、
置換液の大量確保が困難であり、かつ血性肝炎な
どの感染の危険性があるなど、重要な問題を有し
ている。またろ過法としては、二種のフイルター
により特定の分子量を有するもののみを分画除去
する二錯重ろ過法などが試みられているが、十分
な分画能を有するフイルターは見出されておら
ず、しかもこの方法は分子サイズによる分画であ
るため、有用物質も同時に除去されるので、血漿
補充液を必要とするなどの問題があつて、まだ実
用化に至つていない。一方吸着法については、吸
着材ととして活性炭、スチレン―ジビニルベンゼ
ン共重合体、陰イオン交換樹脂などを用いた人工
肝臓や吸着型人工腎臓がすでに実用化されてい
る。しかしながら、これらの吸着材は、抗DNA
抗体などの比較的高分子量成分を選択的に吸着除
去する能力を有していない。 これらの方法の中で、血液中の疾患要因物質を
除去するには、吸着法が種々の点で有利であり、
そのため、特定の疾患要因物質のみを吸着除去し
うる吸着材の開発が望まれている。 ところで、生化学分野においては、抗原―抗
体、酵素―基質、酵素―阻害剤、ホルモン―レセ
プターなど、それぞれの物質間だけに存在する特
異的な相互作用を利用して、特定タンパク質成分
を分離精製する手法、すなわちアフイニテイクロ
マトグラフイーが広く用いられている。このアフ
イニテイクロマトグラフイーに用いる吸着材は、
目的物質と親和性を有する物質を担体に固定、不
溶化したものである。 このようなアフイニテイクロマトグラフイーの
原理を応用し、血液中の抗DNA抗体などの免疫
物質を除去するのに、該免疫物質と特異的に免疫
反応する物質を利用する研究が積極的に行われて
いる。例えば、全身性エリテマトーデスに関して
は、吸着対象物質として、抗DNA抗体やDNA―
抗DNA抗体免疫複合体が考えられ、これらに対
する吸着材として、(1)メチル化アルブミンを多糖
類ゲル粒子に固定したもの（特開昭55−120875号
公報）、(2)セルロースに吸着させたDNAを寒天ゲ
ルで包括したもの〔「クリニカル・アンド・イク
スペリメンタル・イミユノロジー（Clin.Exp.
Immunol.）」第24巻、第231〜237ページ（1976
年）〕、(3)活性炭に吸着させたDNAをコロジオン
で包括したもの〔「クリニカル・イミユノロジ
ー・アンド・イミユノパソロジー（Clin.
Immunol. Immunopathol.）」第８巻、第90〜96
ページ（1977年）〕、(4)DNAと二価金属イオンと
の複合体〔「シヤーナル・オブ・イミユノロジカ
ル・メソツズ（J.Immunol.Methods）」第40巻、
第89〜94ページ（1981年）〕、(5)DNAを高分子コ
ラーゲン膜にアシルアジドで共有結合したもの
〔「バイオテクノロジー・アンド・バイオエンジニ
アリング（Biotechnol.Bioeng.）」第26巻、第665
〜669ページ（1984年）〕などが提案されている。 このような生体高分子を固定した吸着材におい
ては、滅菌時、あるいは保存中や使用中における
安定性に優れていることが必要であり、特に使用
時において固定化したDNAやたんぱく質が血液
中に溶出すると重大な副作用が生じるおそれがあ
る。したがつて、生体高分子を吸着材に利用する
場合は、できるだけ強固に固定化する必要があ
る。 しかしながら、前記の吸着材においては、固定
化物の安定性について必ずしも満足しうるもので
はなく、またいずれも滅菌の手段が不明であつ
て、実用上の問題がある。 発明が解決しようとする問題点 本発明の目的は、このような事情のもとで、滅
菌が容易で、かつ選択性が優れる上に吸着能力が
大きく、しかも取扱いが容易であつて、全身エリ
テマトーデスなどの自己免疫疾患の要因物質であ
る抗DNA抗体やDNA―抗DNA抗体免疫複合体
を、該疾患患者の血漿中から除去するのに好適に
用いられる安定性に優れた吸着材を提供すること
にある。 問題点を解決するための手段 本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、エポキシ
基と結合しうる官能基を有する高分子化合物を担
体として用い、これにエポキシ基を導入し、該エ
ポキシ基を介してDNAを化学結合させたものが
前記目的に適合しうることを見出し、この知見に
基づいて本発明を完成するに至つた。 すなわち、本発明は、エポキシ基を導入した高
分子化合物に、該エポキシ基を介してDNAを化
学結合させて成る抗DNA抗体用吸着材を提供す
るものである。 これまで、エポキシ基を介してDNAを担体に
固定化する方法は、たんぱく質などの精製のため
に、アフイニテイクロマトグラフイー用吸着材に
用いられた例はあるが、血液浄化用吸着剤に適用
された例はない。 本発明においては、担体としてエポキシ基を導
入しうるような官能基、例えば水酸基やチオール
基をする高分子化合物が用いられるが、非特異的
な吸着能をもたない非イオン性物質が望ましい。
このようなものとしては、例えばアガロース系、
デキストラン系、セルロース系、ポリビニルアル
コール系などの水酸基含有高分子化合物が好適で
ある。また、担体の形状については、表面積が大
きいものであれば特に制限はなく、例えばビーズ
状、繊維状、中空糸状などの形状を有するものが
用いられる。 前記高分子化合物にエポキシ基を導入する方法
としては、アルカリ性条件下でエピクロロヒドリ
ンや、１，４―ビス（２，３―エポキシプロポキ
シ）ブタンのようなビスオキシラン化合物などを
作用させる公知の方法の中から任意の方法を用い
ることができる。 次に、エポキシ基が導入された高分子化合物
に、該エポキシ基を介してDNAを化合結合させ
るためには、例えばPH９〜13、好ましくは10.5〜
12のアルカリ性水溶液中において、該エポキシ基
導入高分子化合物と所望のDNAとを、30〜80℃、
好ましくは40〜60℃の温度に保ちながら所要時間
反応させればよい。温度が低すぎると反応速度が
遅く、かつ加熱した際の固定化DNAの十分な安
定性が得られず、一方高すぎるとDNAの固定化
量が減少する。また反応時間は温度によつて左右
されるが、通常５〜40時間程度でよい。さらに、
高分子化合物に対するDNAの量は、該高分子化
合物に導入されたエポキシ基の量によつて適宜選
ばれ、またその濃度は高い方が固定化量が多くな
る。 このようにしてDNAが固定化された高分子化
合物をろ別し、十分に洗浄することにより、本発
明の吸着材が得られる。 発明の効果 本発明の吸着材は、従来のものと異なりDNA
がエポキシ基を介して担体の高分子化合物に極め
て安定に結合しており、例えばDNAの脱落は４
℃の温度で70日間保存した場合は４％以下、80℃
で１時間熱処理した場合は２％以下であるように
僅かであり、また抗DNA抗体に対する吸着活性
も保存や熱処理によつて損われないなど、優れた
特徴を有している。 さらに、エポキシ基は安定なエーテル結合やチ
オエーテル結合を介して担体に導入されているの
で、該エポキシ基の脱落のおそれはなく、その上
エポキシ基の導入の際に担体の架橋が同時に起こ
るので、該担体は強固となり、加熱などに対して
安定性に優れたものとなる。したがつて、滅菌方
法としては、簡便な加熱方法を適用することがで
きる。 このように本発明の吸着材は安定性に優れ、か
つその製造や滅菌が容易である上に、選択性能や
吸着性能については従来のものと比較して遜色が
なく、例えば全身エリテマトーデスなどの自己免
疫疾患の血液浄化療法として、その要因物質であ
る抗DNA抗体やDNA―抗DNA抗体免疫複合体
を該疾患患者の血漿中から除去するのに好適に用
いられる。 実施例 次に実施例により本発明をさらに詳細に説明す
る。 実施例 １ セフアローズ4B（フアルマシア社製）をエピク
ロロヒドリン処理して得られた、水分95.6重量
％、エポキシ基導入量89mmol／ｇ乾燥ビーズの
ビーズ５ｇと、サケ精液由来のDNA〔和光純薬工
業(株)製〕を0.5M炭酸ナトリウム―水酸化ナトリ
ウム（モル比７：３）水溶液に溶かした、DNA
濃度4.7重量％、PH10.7の溶液10mlとを混合し、
40℃で24時間振とうした。次いで、ビーズを
0.1M酢酸緩衝液（PH4.0）及び0.2M炭酸緩衝液
（PH9.0）で繰り返し洗浄後、0.1Mホウ酸緩衝液
（PH7.3）、1M塩化ナトリウム溶液及び蒸留水で洗
浄して、DNAを固定化したビーズ状吸着材を得
た。 このもののDNAの含有量を、モリブデンブル
ー法によるリンの測定より求めたところ乾燥吸着
材１ｇ当り231mgであつた。 次に、このようにして得られた吸着材1.5ｇ
（乾燥重量87mg）に0.01Mホウ酸緩衝液―生理食
塩水（PH7.5）15mlを加え、80℃で１時間振とう
した。処理後、溶液の260nmにおける吸光度測定
及び吸着材中のリンの測定により、DNAの脱落
率を求めたところ、1.8％であつた。なお、吸着
材の形状は熱処理後も変化が認められなかつた。 実施例 ２ 実施例１と同様にして作成した。DNA結合量
153mg／ｇ乾燥吸着材の吸着材を４℃で70日間保
存後、1M塩化ナトリウム溶液及び蒸留水で洗浄
した。このもののDNA含有量は乾燥吸着材１ｇ
当り150mgであつた。 実施例 ３ トヨパールHW―65〔東洋曹達工業(株)製〕を１，
４―ビス（２，３―エポキシプロポキシ）ブタン
で処理して得られた、水分89.6重量％、エポキシ
基導入量0.19mmol／ｇ乾燥ビーズのビーズ５ｇ
と、DNA濃度5.1重量％、PH1.3のサケ精液由来の
DNA溶液10mlとを混合し、実施例１と同様に処
理して、DNAを固定化したビーズ状吸着材を得
た。このもののDNA含有量は乾燥吸着材１ｇ当
り５mgであつた。 実施例 ４ エピクロロヒドリンで処理した、エポキシ基導
入量0.06mmol／ｇ乾燥ガーゼのガーゼ1.2ｇに、
DNA濃度5.2重量％、PH1.2のサケ精液由来の
DNA溶液20mlを加え、実施例１と同様に処理し
て、DNAを固定化した吸着材を得た。このもの
のDNA含有量は、乾燥吸着材１ｇ当り３mgであ
つた。 実施例 ５ エピクロロヒドリンで処理した、エポキシ基導
入量0.07mmol／ｇ乾燥繊維の細繊維化ポリビニ
ルアルコール繊維1.0ｇに、DNA濃度5.1重量％、
PH11.3のサケ精液製DNA溶液20mlを加え、実施
例１と同様に処理して、DNAを固定化した吸着
材を得た。このもののDNA含有量は、乾燥吸着
材１ｇ当り５mgであつた。 実施例 ６ 担体としてセフアローズ4Bを用い、実施例１
と同様に処理して得られた水分含量92.7重量％の
ビーズ状吸着材50mg（DNA含有量0.73mg）を、
0.01Mリン酸緩衝液―生理食塩水（PH7.3、以下
PBSと略記する）で洗浄後、このものと、全身
エリテマトーデス患者の血清250μとを混合し、
１時間振とうした。 処理前後の血清をPBSで倍々に希釈した系列
を作り、抗ネイテイブDNA（nDNA）抗体を、抗
nDNA抗体テストキツト（カレスタツド社製）
を用いてけい光抗体法で測定し、陰性になる希釈
倍率を求めた。その結果を次表に示す。
する）高分子担体に安定した状態で固定して成る
抗DNA抗体用吸着材に関するものである。さら
に詳しくいえば、本発明は、滅菌が容易で、かつ
選択性が優れる上に吸着能力が大きく、しかも取
扱いが容易であつて、全身性エリテマトーデスな
どの自己免疫疾患の要因物質である抗DNA抗体
やDNA―抗DNA抗体免疫複合体を、該疾患患者
の血漿中から除去するのに好適に用いられる安定
性に優れた吸着材に関するものである。 従来の技術 近年、医工学技術の著しい発展に伴い、全身性
エリテマトーデス、慢性関節リウマチ、強皮症な
どの自己免疫疾患の治療には、患者の血液中から
これらの疾患の要因物質を除去する血液浄化療法
が確立されつつある。この血液浄化療法として
は、これまで血漿交換法、ろ過法、吸着法などが
試みられているが、いずれの方法もなんらかの欠
点があり必ずしも満足しうるものとはいえない。 例えば、血漿交換法は、患者の血漿を新鮮な凍
結血漿又は血漿製剤で置き換える方法であるが、
置換液の大量確保が困難であり、かつ血性肝炎な
どの感染の危険性があるなど、重要な問題を有し
ている。またろ過法としては、二種のフイルター
により特定の分子量を有するもののみを分画除去
する二錯重ろ過法などが試みられているが、十分
な分画能を有するフイルターは見出されておら
ず、しかもこの方法は分子サイズによる分画であ
るため、有用物質も同時に除去されるので、血漿
補充液を必要とするなどの問題があつて、まだ実
用化に至つていない。一方吸着法については、吸
着材ととして活性炭、スチレン―ジビニルベンゼ
ン共重合体、陰イオン交換樹脂などを用いた人工
肝臓や吸着型人工腎臓がすでに実用化されてい
る。しかしながら、これらの吸着材は、抗DNA
抗体などの比較的高分子量成分を選択的に吸着除
去する能力を有していない。 これらの方法の中で、血液中の疾患要因物質を
除去するには、吸着法が種々の点で有利であり、
そのため、特定の疾患要因物質のみを吸着除去し
うる吸着材の開発が望まれている。 ところで、生化学分野においては、抗原―抗
体、酵素―基質、酵素―阻害剤、ホルモン―レセ
プターなど、それぞれの物質間だけに存在する特
異的な相互作用を利用して、特定タンパク質成分
を分離精製する手法、すなわちアフイニテイクロ
マトグラフイーが広く用いられている。このアフ
イニテイクロマトグラフイーに用いる吸着材は、
目的物質と親和性を有する物質を担体に固定、不
溶化したものである。 このようなアフイニテイクロマトグラフイーの
原理を応用し、血液中の抗DNA抗体などの免疫
物質を除去するのに、該免疫物質と特異的に免疫
反応する物質を利用する研究が積極的に行われて
いる。例えば、全身性エリテマトーデスに関して
は、吸着対象物質として、抗DNA抗体やDNA―
抗DNA抗体免疫複合体が考えられ、これらに対
する吸着材として、(1)メチル化アルブミンを多糖
類ゲル粒子に固定したもの（特開昭55−120875号
公報）、(2)セルロースに吸着させたDNAを寒天ゲ
ルで包括したもの〔「クリニカル・アンド・イク
スペリメンタル・イミユノロジー（Clin.Exp.
Immunol.）」第24巻、第231〜237ページ（1976
年）〕、(3)活性炭に吸着させたDNAをコロジオン
で包括したもの〔「クリニカル・イミユノロジ
ー・アンド・イミユノパソロジー（Clin.
Immunol. Immunopathol.）」第８巻、第90〜96
ページ（1977年）〕、(4)DNAと二価金属イオンと
の複合体〔「シヤーナル・オブ・イミユノロジカ
ル・メソツズ（J.Immunol.Methods）」第40巻、
第89〜94ページ（1981年）〕、(5)DNAを高分子コ
ラーゲン膜にアシルアジドで共有結合したもの
〔「バイオテクノロジー・アンド・バイオエンジニ
アリング（Biotechnol.Bioeng.）」第26巻、第665
〜669ページ（1984年）〕などが提案されている。 このような生体高分子を固定した吸着材におい
ては、滅菌時、あるいは保存中や使用中における
安定性に優れていることが必要であり、特に使用
時において固定化したDNAやたんぱく質が血液
中に溶出すると重大な副作用が生じるおそれがあ
る。したがつて、生体高分子を吸着材に利用する
場合は、できるだけ強固に固定化する必要があ
る。 しかしながら、前記の吸着材においては、固定
化物の安定性について必ずしも満足しうるもので
はなく、またいずれも滅菌の手段が不明であつ
て、実用上の問題がある。 発明が解決しようとする問題点 本発明の目的は、このような事情のもとで、滅
菌が容易で、かつ選択性が優れる上に吸着能力が
大きく、しかも取扱いが容易であつて、全身エリ
テマトーデスなどの自己免疫疾患の要因物質であ
る抗DNA抗体やDNA―抗DNA抗体免疫複合体
を、該疾患患者の血漿中から除去するのに好適に
用いられる安定性に優れた吸着材を提供すること
にある。 問題点を解決するための手段 本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、エポキシ
基と結合しうる官能基を有する高分子化合物を担
体として用い、これにエポキシ基を導入し、該エ
ポキシ基を介してDNAを化学結合させたものが
前記目的に適合しうることを見出し、この知見に
基づいて本発明を完成するに至つた。 すなわち、本発明は、エポキシ基を導入した高
分子化合物に、該エポキシ基を介してDNAを化
学結合させて成る抗DNA抗体用吸着材を提供す
るものである。 これまで、エポキシ基を介してDNAを担体に
固定化する方法は、たんぱく質などの精製のため
に、アフイニテイクロマトグラフイー用吸着材に
用いられた例はあるが、血液浄化用吸着剤に適用
された例はない。 本発明においては、担体としてエポキシ基を導
入しうるような官能基、例えば水酸基やチオール
基をする高分子化合物が用いられるが、非特異的
な吸着能をもたない非イオン性物質が望ましい。
このようなものとしては、例えばアガロース系、
デキストラン系、セルロース系、ポリビニルアル
コール系などの水酸基含有高分子化合物が好適で
ある。また、担体の形状については、表面積が大
きいものであれば特に制限はなく、例えばビーズ
状、繊維状、中空糸状などの形状を有するものが
用いられる。 前記高分子化合物にエポキシ基を導入する方法
としては、アルカリ性条件下でエピクロロヒドリ
ンや、１，４―ビス（２，３―エポキシプロポキ
シ）ブタンのようなビスオキシラン化合物などを
作用させる公知の方法の中から任意の方法を用い
ることができる。 次に、エポキシ基が導入された高分子化合物
に、該エポキシ基を介してDNAを化合結合させ
るためには、例えばPH９〜13、好ましくは10.5〜
12のアルカリ性水溶液中において、該エポキシ基
導入高分子化合物と所望のDNAとを、30〜80℃、
好ましくは40〜60℃の温度に保ちながら所要時間
反応させればよい。温度が低すぎると反応速度が
遅く、かつ加熱した際の固定化DNAの十分な安
定性が得られず、一方高すぎるとDNAの固定化
量が減少する。また反応時間は温度によつて左右
されるが、通常５〜40時間程度でよい。さらに、
高分子化合物に対するDNAの量は、該高分子化
合物に導入されたエポキシ基の量によつて適宜選
ばれ、またその濃度は高い方が固定化量が多くな
る。 このようにしてDNAが固定化された高分子化
合物をろ別し、十分に洗浄することにより、本発
明の吸着材が得られる。 発明の効果 本発明の吸着材は、従来のものと異なりDNA
がエポキシ基を介して担体の高分子化合物に極め
て安定に結合しており、例えばDNAの脱落は４
℃の温度で70日間保存した場合は４％以下、80℃
で１時間熱処理した場合は２％以下であるように
僅かであり、また抗DNA抗体に対する吸着活性
も保存や熱処理によつて損われないなど、優れた
特徴を有している。 さらに、エポキシ基は安定なエーテル結合やチ
オエーテル結合を介して担体に導入されているの
で、該エポキシ基の脱落のおそれはなく、その上
エポキシ基の導入の際に担体の架橋が同時に起こ
るので、該担体は強固となり、加熱などに対して
安定性に優れたものとなる。したがつて、滅菌方
法としては、簡便な加熱方法を適用することがで
きる。 このように本発明の吸着材は安定性に優れ、か
つその製造や滅菌が容易である上に、選択性能や
吸着性能については従来のものと比較して遜色が
なく、例えば全身エリテマトーデスなどの自己免
疫疾患の血液浄化療法として、その要因物質であ
る抗DNA抗体やDNA―抗DNA抗体免疫複合体
を該疾患患者の血漿中から除去するのに好適に用
いられる。 実施例 次に実施例により本発明をさらに詳細に説明す
る。 実施例 １ セフアローズ4B（フアルマシア社製）をエピク
ロロヒドリン処理して得られた、水分95.6重量
％、エポキシ基導入量89mmol／ｇ乾燥ビーズの
ビーズ５ｇと、サケ精液由来のDNA〔和光純薬工
業(株)製〕を0.5M炭酸ナトリウム―水酸化ナトリ
ウム（モル比７：３）水溶液に溶かした、DNA
濃度4.7重量％、PH10.7の溶液10mlとを混合し、
40℃で24時間振とうした。次いで、ビーズを
0.1M酢酸緩衝液（PH4.0）及び0.2M炭酸緩衝液
（PH9.0）で繰り返し洗浄後、0.1Mホウ酸緩衝液
（PH7.3）、1M塩化ナトリウム溶液及び蒸留水で洗
浄して、DNAを固定化したビーズ状吸着材を得
た。 このもののDNAの含有量を、モリブデンブル
ー法によるリンの測定より求めたところ乾燥吸着
材１ｇ当り231mgであつた。 次に、このようにして得られた吸着材1.5ｇ
（乾燥重量87mg）に0.01Mホウ酸緩衝液―生理食
塩水（PH7.5）15mlを加え、80℃で１時間振とう
した。処理後、溶液の260nmにおける吸光度測定
及び吸着材中のリンの測定により、DNAの脱落
率を求めたところ、1.8％であつた。なお、吸着
材の形状は熱処理後も変化が認められなかつた。 実施例 ２ 実施例１と同様にして作成した。DNA結合量
153mg／ｇ乾燥吸着材の吸着材を４℃で70日間保
存後、1M塩化ナトリウム溶液及び蒸留水で洗浄
した。このもののDNA含有量は乾燥吸着材１ｇ
当り150mgであつた。 実施例 ３ トヨパールHW―65〔東洋曹達工業(株)製〕を１，
４―ビス（２，３―エポキシプロポキシ）ブタン
で処理して得られた、水分89.6重量％、エポキシ
基導入量0.19mmol／ｇ乾燥ビーズのビーズ５ｇ
と、DNA濃度5.1重量％、PH1.3のサケ精液由来の
DNA溶液10mlとを混合し、実施例１と同様に処
理して、DNAを固定化したビーズ状吸着材を得
た。このもののDNA含有量は乾燥吸着材１ｇ当
り５mgであつた。 実施例 ４ エピクロロヒドリンで処理した、エポキシ基導
入量0.06mmol／ｇ乾燥ガーゼのガーゼ1.2ｇに、
DNA濃度5.2重量％、PH1.2のサケ精液由来の
DNA溶液20mlを加え、実施例１と同様に処理し
て、DNAを固定化した吸着材を得た。このもの
のDNA含有量は、乾燥吸着材１ｇ当り３mgであ
つた。 実施例 ５ エピクロロヒドリンで処理した、エポキシ基導
入量0.07mmol／ｇ乾燥繊維の細繊維化ポリビニ
ルアルコール繊維1.0ｇに、DNA濃度5.1重量％、
PH11.3のサケ精液製DNA溶液20mlを加え、実施
例１と同様に処理して、DNAを固定化した吸着
材を得た。このもののDNA含有量は、乾燥吸着
材１ｇ当り５mgであつた。 実施例 ６ 担体としてセフアローズ4Bを用い、実施例１
と同様に処理して得られた水分含量92.7重量％の
ビーズ状吸着材50mg（DNA含有量0.73mg）を、
0.01Mリン酸緩衝液―生理食塩水（PH7.3、以下
PBSと略記する）で洗浄後、このものと、全身
エリテマトーデス患者の血清250μとを混合し、
１時間振とうした。 処理前後の血清をPBSで倍々に希釈した系列
を作り、抗ネイテイブDNA（nDNA）抗体を、抗
nDNA抗体テストキツト（カレスタツド社製）
を用いてけい光抗体法で測定し、陰性になる希釈
倍率を求めた。その結果を次表に示す。
【表】
参考例
担体としてセフアローズ4Bを用い、実施例１
と同様に処理して得られた水分含量94.1重量％の
ビーズ状吸着材500mg（DNA含有量4.56mg）を
PBSで洗浄後、このものと、牛血清アルブミン
及びγ―グロブリンそれぞれ10mgをPBS10mlに
溶かした液とを混合し、25℃で１時間振とうした
のち、UV吸収により牛血清アルブミン及びγ―
グロブリンの吸着をそれぞれ調べたが、いずれの
場合も吸着は認められなかつた。
と同様に処理して得られた水分含量94.1重量％の
ビーズ状吸着材500mg（DNA含有量4.56mg）を
PBSで洗浄後、このものと、牛血清アルブミン
及びγ―グロブリンそれぞれ10mgをPBS10mlに
溶かした液とを混合し、25℃で１時間振とうした
のち、UV吸収により牛血清アルブミン及びγ―
グロブリンの吸着をそれぞれ調べたが、いずれの
場合も吸着は認められなかつた。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ エポキシ基を導入した高分子化合物に、該エ
ポキシ基を介してデオキシリ核酸を化学結合させ
て成る抗デオキシリボ核酸抗体用吸着材。 ２ 高分子化合物が水酸基を含有するものである
特許請求の範囲第１項記載の吸着材。 ３ 水酸基を含有する高分子化合物がアガロース
系、デキストラン系、セルロース系又はポリビニ
ルアルコール系化合物である特許請求の範囲第２
項記載の吸着材。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60068096A JPS61226059A (ja) | 1985-03-30 | 1985-03-30 | 抗デオキシリボ核酸抗体用吸着材 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60068096A JPS61226059A (ja) | 1985-03-30 | 1985-03-30 | 抗デオキシリボ核酸抗体用吸着材 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61226059A JPS61226059A (ja) | 1986-10-07 |
| JPH0126709B2 true JPH0126709B2 (ja) | 1989-05-25 |
Family
ID=13363861
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60068096A Granted JPS61226059A (ja) | 1985-03-30 | 1985-03-30 | 抗デオキシリボ核酸抗体用吸着材 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61226059A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9821783D0 (en) | 1998-10-06 | 1998-12-02 | Bioprocessing Ltd | Adsorbent medium |
| EP1421216A4 (en) | 2001-09-01 | 2006-05-17 | Samsung Electronics Co Ltd | METHOD FOR PRODUCING A HYDROGEL BIOCHIP USING A STARRY-LIKE POLYETHYLENE GLYCOL DERIVATIVE WITH EPOXY GROUP |
-
1985
- 1985-03-30 JP JP60068096A patent/JPS61226059A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS61226059A (ja) | 1986-10-07 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |