JPH06502427A - 合成肺表面活性剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 合成肺表面活性剤 発明の分野 この発明は、肺表面活性物質に関し、更に詳しくは、天然肺表面活性物質と同様 にして、肺胞を被覆するのに用いることができるリポソーム肺表面活性物質に関 するものである。

発明の背景 “人工肺表面活性物質”、　５ｈｏｕ−Ｈｖ＋ａ　Ｙｕ等、バイオヒミカ・エト ・バイオフイジカ・アクタ（Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ　ｅＬＢｉｏｐｈｙｓｉｃａ 　Ａｃｔａ）、　７７６、３７−４７　（１９８４）には、哺乳動物の肺胞を被 覆する天然肺表面活性物質が記載されている。このような表面活性物質は、脂質 と表面活性物質結合タンパク質とを含んでいる。肺表面活性物質は、肺胞の空気 −液体界面における表面張力を低下させる。表面活性物質の存在下では、正常に 膨張した肺内の表面張力が３０ダイン／　ｃ　ｍに近付き、一方、呼気中は、こ の値がＯダイン／　ｃ　ｍに近付くことが、研究かられかっている。新生児が、 その肺から原液を取り除き、規則的な呼吸を定着させなければならない出生時に 、肺表面活性物質の存在が特に決定的である。新生児期中、低表面張力を維持す るのに十分な表面活性物質の蓄積がないことが、ビアリン膜症としても知られ、 先進国における出生周辺期死亡率及び出生周辺期罹患率の主原因である新生児呼 吸困難症候群の発生に関与する主要因であると思われる。進行（ａｄｖａｎｃｅ ｄ）新生児呼吸困難症候群にかかっている乳児を、牛の表面活性物質脂質抽出物 由来の表面活性物質製剤で治療することにより、肺膨張及び気体交換が著しく改 善される。同様に、成人における肺表面活性物質の欠乏は、成人呼吸困難症候群 （ＡＤＲ３）の原因となり得る。

空気／液体界面の表面張力をＯダイン／　ｃ　ｍ近くまで低下させる肺表面活性 物質の能力は、圧縮中に、比較的純粋なジパルミトイルホスファチジルコリン（ ＤＰＰＣ）の単分子膜が形成されることに依っていることが一般に知られている 。しかし、３７℃の通常の体温では、ＤＰＰＣの水和二分子層がゲル状態で存在 し、このことから、吸着が非常にゆっくり起こるだけになる。その結果、正常な 肺機能を維持するのに十分な速度で、ＤＰＰＣを空気／液体界面へ運ぶように機 能することができる人工混合物を開発しようとする試みは、未だ成功していない 。人工表面活性物質の形成に対する一つのアプローチは、長鎖アルコール又は不 活性炭化水素オイルを使用して、若しくはＤＰＰＣが十分に水和されていない“ 乾燥”脂質混合物を投与することにより、ＤＰＰＣを分散させる方法を工夫する ことであった。

前記Ｙｕ等により検討されたもう一つの可能性は、六角形のＨ１□相の形成を促 進する他の脂質と共に、ＤＰＰＣを分散させることである。この後者の状態は、 逆ミセル形の脂質の細長い円筒体からなり、脂肪酸が外側へ伸び、極性の頭の基 （ｈｅａｄ−ｇｒｏｕｐ　）が脂質の細長い円筒に沿って伸びる水の内部コア又 は細孔と結合しているものである。空気は水よりも疎水性であるため、Ｙｕ等は 、空気／液体界面と相互作用しているＨＩＩ相の円筒が展開（ｕｎｆｏｌｄ）　 Ｌやすく、それにより、多くの脂質分子が表直に移送されると仮定している。し かし、六角Ｈ，ＩＤＰＰＣのゲル状濃度が濃いため、この形のＤＰＰＣを生体内 に投与して、肺胞表面上に表面活性物質単分子層を有効に堆積させることができ るとは考えられない。

肺表面活性物質として、ＤＰＰＣを肺胞に投与する場合、肺に対して最大の治療 を行なうために、ＤＰＰＣが、できるだけ広い肺胞表面領域に広げられた単分子 層を形成することが重要である。

更に、単分子層の堆積速度が、呼吸困難症候群によってもたらされる呼吸困難の 被験者の治療において、重要であるかも知れない。

肺胞へＤＰＰＣを搬送する従来法では、肺胞表面に、ＤＰＰＣの有効な表面活性 物質単分子層を堆積させることができなかった。

二分子層形のＤＰＰＣが肺胞に投与された場合、拡展速度が遅すぎて、有効な単 分子層を形成できないか、あるいは呼吸困難を十分に軽減できないことがわかっ ている。同様に、上で論じたよう面に単分子層を形成するには不適当であると考 えられている。

発明の要旨 本発明によれば、哺乳動物の肺胞に、ホスファチジルコリン肺表面活性物質の単 分子層を堆積させる合成肺表面活性物質組成物が提供される。この組成物は、ホ スファチジルコリン肺表面活性物質、ホスファチジルエタノールアミン及びコレ ステロールを、第一の温度以下では組成物がラメラ形状であ番ハ第一の温度より も高い第二の温度では非ラメラ形状であるような割合で含んでいる。本発明で使 用するための好ましいホスファチジルコリン肺表面活性物質は、ジパルミトイル ホスファチジルコリン（Ｄ　Ｐ　Ｐ　Ｃ）であり、これは、天然の哺乳動物肺表 面活性物質の主脂賀成分であることがわかっている。好ましいホスファチジルエ タノールアミンは、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（Ｄｏ　ＰＥ ）である。特定の実施態様において、第一の温度は、室温（２５℃）程度であり 、一方、第二の温度は、治療される哺乳動物の体温又はその近辺であり、ヒトの 場合は、３０〜３７℃の範囲内となるであろう。本発明の特定の実施態様におい て、組成物は、約３部のＤＰＰＣ，約７部のＤｏ　Ｐ　Ｅ、約５〜ｌＯ部のコレ ステロルからなり、全ての部はモル比によるものである（本出願を通じて、特に 断わらない限り、全ての部及びパーセントは、モル比によるものである）。

他の実施態様において、本発明の組成物は、表面活性物質結合タンパク質のよう な治療用ペプチドを一つ又はそれ以上含んでいてもよい。このようなタンパク質 は、天然由来、合成のどちらでもよい、この組成物は、一つ又はそれ以上の他の 薬剤を含んでいてもよい。

本発明の別の実施態様は、肺胞の領域内で、肺の中に本発明の組成物を直接分散 させることにより、肺胞の表面にＤＰＰＣの単分子層を堆積させる方法である。

本発明の更に他の実施ａ様は、哺乳動物における天然肺表面活性物質の不全によ る呼吸困難症候群を治療する方法であり、この方法は、本発明の組成物を治療す る哺乳動物の肺胞に投与することを含む、このような投与は、挿管法又は吸入法 などの周知の胛投与方法により達成されることができる。

本発明の更に別の実施態様によれば、医薬担体又は希釈剤と共に１本発明の合成 肺表面活性物質組成物を含有する、挿管法、吸入法又は他の肺投与法に適した医 薬製剤が提供される。また、このような医薬製剤の製造法も提供され、この方法 は、ホスファチジルコリン肺表面活性物質、ホスファチジルエタノールアミン及 びコレステロールを組み合わせて１本発明の人工肺表面活性物質組成物を形成し 、この組成物を医薬担体又は希釈剤と混合して、肺投与に適した製剤を製造する ことからなる。

図面の簡単な説明 図１は、本発明に従って作られ、ＤＯＰＥ−ＤＰＰＣ−コレステロールを７：３ ：１０のモル比で含む肺表面活性物質サンプルについて、６〜４６℃の範囲の温 度で測定した、３６０ＭＨｚの”Ｐ−ＮＭＲスペクトルの結果を示すグラフであ る。

図２Ａ及び２Ｂは、本発明に従って作られ、ＤＯＰＥ−ＤＰＰＣ−コレステロー ルを７：３：５のモル比で含む肺表面活性物質サンプルについて、２３℃及び３ ８℃で測定した、逆相互間隔（ｉｎｖｅｒｓｅ　ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ　ｄｉｓ ｔａｎｃｅ）に対する小角Ｘ線回折強度（任意の単位）の結果を示すグラフであ る。

図３Ａ及び３Ｂは、本発明に従って作られたものではなく、ＤＯＰＥ−ＤＰＰＣ −コレステロールを７：３：３のモル比で含む比較サンプルについての、２３℃ 及び３８℃での小角Ｘ線回折測定の結果を示すグラフである。

発明の詳細な説明 本発明は、ホスファチジルコリン（ＰＣ）８表面活性物質が二分子層の形状から 六角Ｈ１□又は他の非二分子層の形状に移るとき、ＰＣが乱れた中間相を通ると いう発見に由来するものである。

この中間相は、水和表面上に急速に広がって表面張力を急速に低下させるモノマ ーを生成させる。例えば、二分子層形及び六角ＨＩＩ形のジパルミトイルホスフ ァチジルコリン（ＤＰＰＣ）は、共に非常に安定であり、一方、乱れた中間相は 、ＤＰＰＣがその安定な形状のうちの一つに改変し得るまでの短時間の間、存在 するだけである０本発明に対する鍵は、肺胞の表面において元の位置にある間に 、ＰＣが単分子層転移相を通るようにさせる手段を工夫することである。これを 達成することができれば、ＰＣはその乱れたモノマーの形をしている間に、肺胞 表面上に急速に広がるであろう。

ある種のホスファチジルエタノールアミン（Ｐ　Ｅ）は、ラメラ形状と六角Ｈ１ ｌ形状を両方有しており、多形であることが知られている。更に、このようなＰ Ｅは、温度が高くなるにつれて、そのラメラ形状から六角Ｈ■■形状へ変化する ことがわかっている（Ｔｉｌｃｏｃｋ、′リビッドボリモルフイズム（Ｌｉｐｊ ｄ　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）”、ケミストリー・アンド・フィジックス・オ ブ・リビッズ（Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｃｓ　ｏｆ　Ｌｉｐｉ ｄｓ）　、　４０：１０９．　１１０−ＩＩＩ　（＋９８６）　参照）。コレス テロールは、一般に、二分子層形の脂質に不安定化効果を及ぼすことがわかって いる。

、　本発明では、第一の温度において、安定な二分子層の形状であり、第二のよ り高い温度において、乱れた転移相を通って六角Ｈ１□又は他の非ラメラの形状 に移る合成肺表面活性物質組成物を形成するのに適当な割合で、ホスファチジル コリン肺表面活性物質を、ＰＥ及び少量のコレステロールと混合する。合成肺表 面活性物質としての使用のためには、第一の温度は、室温（２５℃）程度である ことが好ましく、一方、第二の温度は、治療される哺乳動物の体温又はその近辺 であり、ヒトの場合は、３０〜３７℃の範囲内が好ましいであろう。

本発明で使用する好ましいホスファチジルコリン肺表面活性物質は、ジパルミト イルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）であり、これは、一つのＰＣ“頭”基の 上に、二つの完全に飽和したＣ１６“尾“基を含んでいる。ＰＣ＃表面活性物質 として用いることのできる他のＰＣとしては、シミリストイルホスファチジルコ リン（ＤＭＰＣ）（ＣＩ　４尾基）及びジステアロイルホスファチジルコリン（ ＤＳＰＣ）（０１８尾基）が挙げられる。

本発明で使用する好ましいホスファチジルエタノールアミンは、ジオレオイルホ スファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）であり、これは、ＤＰＰＣと化学的 に両立することができ、肺内に使用しても生物学的に安全であり、目的とする温 度依存性相転移特性を有する組成物を作る。しかし、選ばれたホスファチジルコ リン肺表面活性物質と混合して、目的とする温度依存性相転移を得ることのでき 、化学的に両立することができ、生物学的に安全な任意のホスファチジルエタノ ールアミンを用いることができる。

ＤＰＰＣとＤＯＰＥを含む組成物について、目的とする相転移温度を得るために 、これらの成分を、ＤＰＰＣ約２〜４部、Ｄ。

ＰＥ約８〜６部、好ましくは、ＤＰＰＣ約３部、ＤＯＰＥ約７部のモル比で使用 すると、好ましい結果が得られる。

組成物の第三の成分は、コレステロール（ＣＨＯＬ）であり、これは、脂質二分 子層を破砕するのに有効であることが知られている。この組成物において、コレ ステロールは、比較的安定なラメラ相を不安定にするので、肺表面活性物質が、 目的とする温度で不安定な乱れた中間相に入るものと信じられる。混合ホスファ チジルコリン及びホスファチジルエタノールアミン１０部に対してコレステロー ル約５〜１０部のモル比を用いると、良好な結果が得られる。

本発明の組成物は、表面活性物質結合表面活性タンパク質のような治療用ペプチ ドを一つ又はそれ以上含んでいてもよい。このようなタンパク質は、天然由来、 合成のどちらでもよい。天然の肺表面活性物質に見出されるこれらのタンパク質 、又はこのようなタンパク質によく似た合成ペプチドは、特に興味深い。これら の表面活性物質結合タンパク質のいくつかは、正に帯電しているアミノ酸基が多 く、疎水性と親水性の両方のペプチド基を含んでいることがわかっている。

本発明の肺表面活性物質組成物において有用であることがわかっている合成ペプ チドのなかには、疎水性であるアルギニン（“Ｒ”と略す）及び親水性であるロ イシンＣ″Ｌ”と略す）ペプチドを含むものがある。本発明の表面活性物質に使 用するのに特に有用な合成ペプチドは、ＲＬ、と呼ばれ、次の構造のアルギニン 及びロイシン基から成っている。

Ｒ−（Ｌ）、−Ｒ−（Ｌ）、−Ｒ−（Ｌ）、−Ｒ−（Ｌ）、−Ｒ以下で検討する テストのために、ＲＬ４ペプチドを、ｔｈｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｉｎ５ｔｉｔ ｕｔｅ　ｏｆ　５ｃｒｉｐｐｓ　Ｃ１１ｎｉｃ、　Ｌａ　Ｊｏｌｌａ、　ＣＡか ら入手した。

本発明の組成物は、一つ又はそれ以上の追加の他の薬剤を含んでもよい。

実施例１ 本発明の組成物の温度依存性多形特性を発揮するために、５５゜４ｇのＤＯＰＥ 、２３．４ｇのＤＰＰＣ１４１，２ｇのコレステロールを用い、ＤＯＰＥ−ＤＰ ＰＣ−ＣＨＯＬを７：３：１００モル比で含むサンプルを作った。ＤＯＰＥとＤ ＰＰＣは、ＡｖａｎｔｉＰｏｌａｒ　Ｌｉｐｉｄｓ、　Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ、 　Ａｌａｂａｍａから入手し、コレステロールは、Ｂａｋｅｒ　Ｃｈｅｍｉｃａ ｌｓから入手した。この物質を、回転蒸発（ｒｏｔｏ−ｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎ ）を用い、クロロホルム混合物から乾燥して薄いフィルムとし、１５０ｍＭ塩化 ナトリウムを含むｐＨ７，４の１０ｍＭＨＥＰＥＳ緩衝液６ｍｌに懸濁させた。

図１は、６〜４６℃の範囲の温度で測定した、３６０ＭＨｚの”Ｐ−ＮＭＲスペ クトルを示す。温度が高くなるにつれて、グラフ線の形が変化するのは、組成物 のラメラ相から六角ＨＩＩ相への転移を示す。この種のスペクトルデータ及び脂 質相に対するその意味は、上記のＴｉ１ｃｏｃｋに詳細に論じられている。室温 ２５℃では、組成物はまだラメラ形状であるが、一方、４０℃では、ＨＩＩ相に 特有の波形に明らかに変わってしまっている。正常体温よりもちょっと低い３５ ℃では、図形は、ラメラ相とＨ１ｌ相の両方が存在する転移段階を示すものと考 えられる。

実施例２ 実施例１の原料及び方法を用いて、肺表面活性物質組成物の他のサンプルを作っ た。サンプル２は、６６．９ｇのＤＯＰＥ、２８．３ｇのＤＰＰＣ及び２４．８ ｇのコレステロールを含み、６ｍｌの緩衝液に懸濁された、モル比が７：３：５ のＤＯＰＥ−ＤＰＰＣ−ＣＨＯＬ組成物であった。サンプル３は、３０．４ｇの ＤＯＰＥ、１２．９ｇのＤＰＰＣ及び６．８ｇのコレステロールを含み、６　ｍ 　ｌの緩衝液に懸濁された、モル比が７：３：３のＤＯＰＥ−ＤＰＰＣ−ＣＨＯ Ｌ組成物であった。

両サンプルを、小角Ｘ線回折によりテストした。結果を、図２Ａ及び２Ｂ、並び に図３Ａ及び３Ｂに示す。各図において、左のグラフＡは、２３℃におけるサン プルについての結果を示し、右のグラフＢは、３８℃におけるサンプルについて の結果を示す。

所定のサンプルの相は、所定のグラフの右側を調べることにより決定することが できる。１３１２Ａ及び３Ａは、共に、各グラフの中央近くの高いピークの右に 単一のピークを示す。この二重ピークは、脂質がラメラ相であることを示すサイ ンである。図３Ｂもこの同じサインを示し、３８℃において、サンプル３がまだ ラメラ相にあること示している。図２Ｂは、グラフの右側の同じ位置に、明瞭な 二重ピークを示す。これは、ラメラ相からの変化を少なくとも示すサインであり 、おそらく、六角Ｈ１□相への転移を示すものであろう、これらの結果から、３ 部のコレステロールを含む組成物は、３８℃の温度において、まだラメラ相であ るが、一方、５部のコレステロールを含む組成物は、３８℃以下で、ラメラ相か らの転移を明瞭に示していることがわかるであろう。

実施例３ 早産に関係する呼吸問題の治療における本発明の肺表面活性物質の有効性をめる ために、テストを行なった。上で論じたように、新生児が、その肺から原液を取 り除き、規則的な呼吸を定着させなければならない出生時に、肺表面活性物質の 存在が特に重要である。この重要な段階において、肺表面活性物質が欠乏すると 、重症の呼吸困難に陥り、死亡することさえある。

本テストでは、肺表面活性物質不全のモデルとして、天然肺表面活性物質が低レ ベルであるために、呼吸開始が困難であることがわかっている未熟胎児兎を使用 した。各場合において、胎児兎に、０．２ｍｌ又は０．３ｍｌのテスト表面活性 物質を投与し、換気して、呼吸を監視した。３０分後、呼吸の質及び色について 兎を調べた。健康なピンク色は、良好な呼吸を示すものである。

更に、肺容積及び気道圧を測定し、これらの結果を、体重の単位当りの圧力に対 する流量の比として、任意の単位で表わされる動的コンプライアンスを計算する ために使用した。測定コンプライアンスの値が高ければ高いほど、試験動物の呼 吸は良好であった。

これらのテスト方法は、Ｒｅｖａｋ等、′生体外及び生体内で測定された精製ヒ トアポタンパク質及びリン脂質を用いる表面活性物質活性の再構成“、Ａｍ、　 Ｒｅｖ、　Ｒｅ５ｐｉｒ、Ｄｉｒ、、　１３４　：　１２５８−１２６５　（１ ９８６）で更に論じられている。

上記実施例１に従って作られた７：３：１０のＤＯＰＥ−ＤＰＰＣ−コレステロ ール表面活性物質（サンプルＡ）と実施例２に従って作られた７：３：５のＤＯ ＰＥ−ＤＰＰＣ−コレステロール表面活性物質（サンプルＢ）を用いて、テスト を行なった。

上で論じたように、本発明の組成物は、一つ又はそれ以上の治療用タンパク質を 含むこともできる６本発明による肺表面活性剤は、大豆ホスファチジルコリン（ 大豆ＰＥ）、ＤＰＰＣ及びコレステロールとから上記ペプチドＲＬ４と組み合わ せて作った。７：３：３の比の大豆ＰＥ−ＤＰＰＣ−コレステロールからなり、 ３重量％のＲＬ、ペプチドを含むペプチド含有表面活性物質サンプル（サンプル Ｃ）と、７：３：５の比の大豆ＰＥ−ＤＰＰＣ−コレステロールからなり、３重 量％のＲＬ、ペプチドを含むペプチド含有表面活性物質サンプル（サンプルＤ） とを作った。サンプルＣ及びＤも、本胎児兎モデルテストに含まれた。

１５０ｍＭ食塩水を負の対照として使用し、満期（ｔｅｒ＋ｎ）羊水から単離さ れた天然ヒト表面活性物質を正の対照として使用して、更にテストを行なった。

実施例の表面活性物質と負及び正の対照を用いて、３セツトのテストを行なった 。最初の２セツトのテストにおいては、０．２ｍｌの用量を投与したが、一方、 ３番目のセットのテストでは、０．３ｍｌの用量を用いた。動物に、実施例表面 活性物質Ａ、Ｂ、Ｃ若しくはＤ、又はヒト表面活性物賀正対照を投与したテスト では、全てが、換気２〜３分以内に優れた呼吸を示し、全てが、健康なピンク色 を得た。３０分のテスト期間の終わりには、これらの動物の全てが、良好な呼吸 と健康なピンク色とを示し統けた。食塩水魚対照を投与した兎は、呼吸困難を示 し、３０分後に健康なピンク色をしていなかった。これらのテストから、本発明 により作られた実施例表面活性物質Ａ、Ｂ、Ｃ又はＤは、天然肺表面活性物質不 全に関係する呼吸問題を治療する際に、全て、天然ヒト表面活性物質に匹敵する 結果を示すことがわかった。

各動物についてのコンプライアンス値は、３０分のテストの過程にわたって、周 期的な間隔で測定を行なった。コンプライアンスの結果を表１に提示し、コンプ ライアンスは、上記のように、任意の単位で表わされる。実施例の表面活性物質 Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤ、並びにヒト表面活性物賀正対照を投与した動物のコンプライ アンス値は、全て、食塩水食対照動物よりも少なくとも２５〜３００％高かった 。

本発明の他の態様によれば、挿管法、吸入法又は他の肺投与法ホスファチジルコ リン肺表面活性物質、ホスファチジルエタノールアミン及びコレステロールを組 み合わせて、本発明の人工肺表面活性物質組成物を形成し、このように形成され た組成物を、医薬担体又は希釈剤と混合することからなる。

用いられる用語及び語句は、説明の用語として使用されるもので、限定するもの ではなく、このような用語及び語句の使用において、示され、記載された特徴の 均等物又はその一部を排除する意図は無く、本発明の請求の範囲内で、種々の変 更が可能であることが認識される。

表１ 未熟胎児兎の肺コンプライアンス 定容積換気 表１　（続き） 未熟胎児兎の肺コンプライアンス 定容積換気 表１　（続き） 未熟胎児兎の肺コンプライアンス 定容積換気 セットｌ及び２については、０．２ｍｌのサンプルを投与した。　セット３につ いては、０．３ｍｌのサンプルを投与した。

Ａ＝ＤＯＰＥ／ＤＰＰＣ／Ｃｈｏｌ　７：３＋１０Ｂ＝ＤＯＰＥ／ＤＰＰＣ／Ｃ ｈｏｌ　７：３：５Ｃ＝大豆ＰＥ／ＤＰＰＣ／Ｃｈｏ　１　７　：　３　：　３ 　＋　３重量％ＲＬ４Ｄ＝大豆ＰＥ／ＤＰＰＣ／Ｃｈｏ　Ｉ　７　：　３　：　 ５　＋３重量％ＲＬ４ＤＯＰＥ−ＤＰＰＣ−ＣＨＯＬ　７：３：１０　ＭＯＬ： ＭＯＬ第１　図 ＤＯＰＥ−ＯＰＰＣ，ＣＨＯＬ　７：３：５　ＭＯＬ：ＭＯＬ第２図 第３図 国際調査報告

Claims (19)

【特許請求の範囲】
1. １．ホスファチジルコリン肺表面活性物質、ホスファチジルエタノールアミン及 びコレステロールを、第一の温度以下では組成物がラメラ形状であり、第一の温 度よりも高い第二の温度では非ラメラ形状であるような割合で含有する合成肺表 面活性物質組成物。
2. ２．該第一の温度が約２５℃であり、該第二の温度が約３０〜３７℃の範囲内で ある請求の範囲１記載の組成物。
3. ３．ホスファチジルコリン肺表面活性物質がジパルミトイルホスファチジルコリ ン（ＤＰＰＣ）であり、ホスファチジルエタノールアミンがジオレオイルホスフ ァチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）である請求の範囲２記載の組成物。
4. ４．モル比で、約２〜４部のＤＰＰＣと約８〜６部のＤＯＰＥであって合計１０ 部のＤＰＰＣ及びＤＯＰＥの組合せと、約５〜１０部のコレステロールを含有す る請求の範囲３記載の組成物。
5. ５．モル比で、約３部のＤＰＰＣ、約７部のＤＯＰＥ及び約５〜１０部のコレス テロールを含有する請求の範囲４記載の組成物。
6. ６．モル比で、約３部のＤＰＰＣ、約７部のＤＯＰＥ及び約５部のコレステロー ルを含有する請求の範囲５記載の組成物。
7. ７．更に、一つ又はそれ以上の治療用ペプチドを含有する請求の範囲１記載の組 成物。
8. ８．更に、一つ又はそれ以上の他の薬剤を含有する請求の範囲１記載の組成物。
9. ９．肺胞の領域内で、肺の中に合成肺表面活性物質組成物を直接分散させること を含み、 該組成物がホスファチジルコリン肺表面活性物質、ホスファチジルエタノールア ミン及びコレステロールを、第一の温度以下では組成物がラメラ形状であり、第 一の温度よりも高い第二の温度では非ラメラ形状であるような割合で含有してい るものである、肺胞の表面にホスファチジルコリン肺表面活性物質の単分子層を 堆積させる方法。
10. １０．該第一の温度が約２５℃であり、該第二の温度が約３０〜３７℃の範囲内 である請求の範囲９記載の方法。
11. １１．ホスファチジルコリン肺表面活性物質がジパルミトイルホスファチジルコ リン（ＤＰＰＣ）であり、ホスファチジルエタノールアミンがジオレオイルホス ファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）である請求の範囲１０記載の方法。
12. １２．組成物が、モル比で、約２〜４部のＤＰＰＣと約８〜６部のＤＯＰＥであ って合計１０部のＤＰＰＣ及びＤＯＰＥの組合せと、約５〜１０部のコレステロ ールとを含有する請求の範囲１１記載の方法。
13. １３．組成物が、モル比で、約３部のＤＰＰＣ、約７部のＤＯＰＥ及び約５〜１ ０部のコレステロールを含有する請求の範囲１２記載の方法。
14. １４．組成物が、モル比で、約３部のＤＰＰＣ、約７部のＤＯＰＥ及び約５部の コレステロールを含有する請求の範囲１３記載の方法。
15. １５．合成肺表面活性物質組成物が、更に、一つ又はそれ以上の治療用ペプチド を含有する請求の範囲９記載の方法。
16. １６．合成肺表面活性物質組成物が、更に、一つ又はそれ以上の他の薬剤を含有 する請求の範囲１記載の方法。
17. １７．請求の範囲１記載の合成肺表面活性物質組成物を哺乳動物の肺胞に投与す ることを含む、天然肺表面活性物質の不全による哺乳動物の呼吸困難症候群を治 療する方法。
18. １８．該投与が、挿管法又は吸入法である請求の範囲１７記載の方法。
19. １９．請求の範囲１記載の合成肺表面活性物質組成物を含有する、挿管法、吸入 法又は他の肺投与法に適した医薬製剤。